S1/UE2/R1-08/TP Matériels d'observation-Consignes dessin/P.
Jusseaume/IUT LAVAL/GB1
TP : Microscope-Matériels et techniques d'observation-Dessin scientifique durée : 2h
Objectifs :
• Connaître et prendre en main des appareils d'observation utilisés régulièrement en TP : microscope, loupe
binoculaire, loupe à main
• Connaître les procédures pour réaliser un montage pour l'observation microscopique en biologie et microbiologie
• Connaître, nommer et prendre en main des ustensiles de dissection en fonction des besoins
• Connaître les consignes pour la réalisation d'un dessin d'observation en biologie et microbiologie
◦ pas de compte-rendu à remettre / Tp non évalué
1)Le microscope : présentation et utilisation du microscope optique à fond clair
Le microscope se compose d’une partie mécanique nommée statif et d’une partie optique portée par la partie mécanique. Il permet
l’étude structurale des tissus et des objets de taille supérieure à 0.2 µm.
1.1)Présentation
● Activité : légendez l’image fournie en observant votre microscope et en exploitant les informations données
par l'enseignant en séance et lors du cours de physique vu en parallèle (cf tableau page 4).
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● Activité : Mise en route/réglages/maintenance/arrêt et rangement
Le microscope est votre outil d’observation au cours des TP, vous êtes donc responsables de cet appareil lors des
séances . Il faut donc le manipuler avec le plus grand soin. En cas de problème prévenir l’enseignant présent ; ne jamais
quitter la salle en laissant un microscope en panne !
1.2)Procédures : à connaître et savoir appliquer
Le microscope à contraste de phase transforme de légères différences d’indice de réfraction et de densité cellulaire
en différences d’intensités lumineuses observables. C’est donc un excellent moyen pour examiner les cellules vivantes. Le
contraste de phase n'est pas utilisé systématiquement.
* Réglage du microscope : avec le contraste de phase
Placer la préparation sur la platine.
Mettre l’objectif x40 en (seul objectif utilisable en contraste de phase)
Enfoncer le coulisseau ou autre élément comparable en contraste de phase (si nécessaire)
Régler la luminosité, l’écartement pupillaire et l’ouverture du diaphragme
En regardant la platine, remonter la préparation avec la vis macrométrique jusqu'à venir effleurer la lamelle avec
l'objectif. Attention à ne pas écraser la lamelle.
En regardant dans les oculaires, faire la mise au point en descendant la platine avec la vis micrométrique ==>
Les bactéries apparaissent réfringentes
Affiner le réglage de la luminosité et l’ouverture du diaphragme
* Réglage du microscope : sans le contraste de phase
Placer la préparation sur la platine
Mettre l’objectif x4 (Gx40) puis x10 (Gx100). Changer l’objectif si besoin ( x4, x10, x40) et réajuster les
réglages (lumière, diaphragme, condenseur, mise au point). Passer impérativement à un grossissement
plus fort pour affiner l’observation !
Tirer le coulisseau ou autre élément comparable= observation en lumière directe
Régler la luminosité, l’écartement pupillaire et l’ouverture du diaphragme
En regardant la platine, remonter la préparation avec la vis macrométrique
En regardant dans les oculaires, faire la mise au point en descendant la platine avec la vis macrométrique
Choisir la zone à observer : il faut balayer du regard l'ensemble de la lame pour repérer les zones favorables à
l'observation ainsi que les différentes structures histologiques présentes.
Déplacer l’objectif x10
Si besoin et après avis du professeur, placer une goutte d’huile à immersion sur la lame
Attention : certains microscopes s'utilisent sans huile, bien vérifier avant !
Mettre l’objectif à immersion x100
En regardant dans les oculaires, faire la mise au point avec la vis micrométrique.
Affiner le réglage de la luminosité et l’ouverture du diaphragme.
➔ Retirer la préparation et la nettoyer au papier optique pour enlever l’huile, nettoyer l’ objectif au papier optique
imprégné d’une solution dégraissante (alcool), nettoyer les oculaires, mettre le potentiomètre à 0 et appuyer sur
l’interrupteur, débrancher le fil et l’enrouler autour du statif, remettre la housse et ranger délicatement le
microscope.
1.3) Autres matériels :
Présentation/activité :
• loupe binoculaire : description par le professeur, modalités d’utilisation, réglage, observation macroscopique d'un
échantillon (graine ? fruit ? Autre), réalisation d’un dessin simple de l’échantillon
• loupe à main : description, exemple d’utilisation
• trousse à dissection :
◦ présentation et dénomination des ustensiles, description de la fonction des ustensiles, exemples d’utilisation,
démonstration d'installation de la lame de scalpel. Nettoyage : eau savonnée, désinfection /alcool, démontage +
rangement dans étui,
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1.4)Observation de cellules au microscope optique : rappels
La réalisation de la préparation :
Le dépôt de la lamelle couvre-objet sur la lame : en tenant la lamelle par le tranchant, la poser par une de ses arêtes sur la
lame et l'incliner progressivement (avec une aiguille montée) pour chasser les bulles d'air.
A : bonne préparation, objet mince, correctement étalé, lamelle horizontale, liquide bien réparti.
B : mauvaise préparation, échantillon trop épais d'un côté, lamelle inclinée avec liquide qui déborde.
C : mauvaise préparation, excès de liquide, l'objet va «flotter», élimination de liquide indispensable
Le remplacement d'un liquide de montage et le centrage de la préparation
A : mal centré B : bien centré C : déplacement nécessaire
● Activité :
Faire un montage , à l'aide d'un coton tige, de cellules d'épithélium buccal dans une goutte de solution de Bleu de méthylène,
régler et observer une cellule aux objectifs x4, x10, x40
Remplacer le liquide de montage par une solution d'eau osmosée en appliquant la méthode exposée ci-dessus
Si besoin, après repérage du noyau, passer ensuite à l'immersion (huile, x100), faire la mise au point, observer.
Réaliser un dessin d'observation légendé en suivant les consignes données sur la fiche « consignes dessin »
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Légende du microscope
1 Tête binoculaire
2 oculaires
3 Tourelle porte-objectif
4 Objectifs x4/ x10/ x40/ x100
5 chariot
6 Platine porte-objet
7 Vis de déplacement du chariot
8
9 Platine porte-objet
10 condenseur
11 condenseur
12 Diaphragme d'ouverture
13 Coulisseau/contraste de phase
14 Source lumineuse/diaphragme de champ
15 Vis micro et macrométrique de mise au point
Description du contenu de la trousse à dissection
►Le nom des objets de la trousse est à connaître.
►Les conditions d'utilisation et fonctions des objets sont à connaître.
1 paire de ciseaux forts
1 paire de petits ciseaux pointus
1 paire de grandes pinces à bout rond
1 paire de petites pinces à bout pointu
1 paire de pinces à bout courbe
1 paire de pinces « brucelles »
1 scalpel avec lame démontable :faire le montage /démontage de la lame
1 sonde canelée
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2) La réalisation des dessins
• Les consignes générales sont identiques pour la biologie (histologie, physiologie, botanique) et la
microbiologie.
2.1) 2 types de dessins rendent compte de la structure anatomique d’un organe: le dessin d’ensemble général et le
dessin de détail. Ces dessins sont la représentation de la réalité observée, ils doivent pouvoir être revus et
réutilisés lors des révisions et traduire fidèlement les structures étudiées.
dessin général : il donne une vue synthétique de la coupe/préparation (forme de l’organe, emplacement et
proportion des différents tissus respectifs) ; les différents tissus sont délimités par des traits simples et différenciés
les uns des autres grâce à des signes conventionnels si besoin (cf tableau fourni en tp Bv), aucune cellule ne figure
sur ce dessin en Bv. Dans certains cas (symétrie/axe ou plan), une partie seulement de l’organe peut être
représentée (1/2 ou 1/4 )
Dessin de détail : il rend compte de la forme et de la disposition des cellules de chaque tissu ou des bactéries
observées. Aucun signe conventionnel ne sera utilisé, les cellules seront observées et dessinées une à une (inutile
de les dessiner toutes !). Il nécessite une approche au faible objectif pour déterminer la zone à représenter et
esquisser les limites des principaux tissus en respectant leur proportions relatives. Il correspond le plus souvent, en
biologie, à une bande étroite allant de la périphérie vers le centre de l’organe et comprenant tous les types de tissus
présents dans la coupe. Figurer par un cadre l’emplacement du dessin de détail sur sur le schéma d’ensemble si
besoin.
2.2)Technique :
Dessin au crayon de papier ou critérium (mines 2H ou HB) sur feuille de papier blanc recto uniquement, 2 dessins
au maximum par page. ENCRE ET COULEUR INTERDITS
• Le dessin doit respecter les formes et les proportions. Réfléchir au placement du dessin sur la feuille avant de
débuter.
• Le trait doit être fin et continu, pas de hachures ni d’autres figurés.
• Présence d’un titre complet et précis accompagné du grossissement: (objectif x oculaire) . Exemple : x400, (échelle
si observation à l’œil nu) et titre placé sous le dessin et centré, accompagné des conditions de montage (état frais,
coloration de Gram, coloration au rouge neutre..)
• La légende doit être placée latéralement de façon judicieuse en alignant les inscriptions de part et d’autre du dessin.
Les plans de coupe, coloration, milieu de montage doivent être indiqués.
• Les traits de légende doivent être parallèles, tracés à la règle sans se croiser en désignant de façon nette les
structures sans être dotés de flèche au bout.
• Le commentaire est placé sous le titre (centré et souligné), il récapitule les éléments essentiels observés et les relie
au contexte biologique.
• Soigner la mise en page et l’écriture pour optimiser la présentation (intervenant sur la note) et la facilité de révision.
•
● Activité :
Vous réaliserez les dessins indiqués ci-dessous à partir d'un montage réalisé en respectant les consignes données ci-
dessus.
• Dessin légendé de l’observation microscopique de la cellule d’épithélium buccal ou autre
• Dessin légendé de l’échantillon proposé par le professeur après observation à la loupe binoculaire
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Exemples de dessins réalisés par une étudiante (général et détail)/coupes transversales de feuille de houx
coloration carmino-vert
face ventrale en haut/face dorsale en bas
