S1/R1.
08/P Jusseaume/Biologie générale/Tp BV/Anatomie histologie-tiges feuilles/IUT LAVAL/GB1/2021-2022
R 1.08 - TP BV : CARACTERISTIQUES PRINCIPALES DES TIGES et FEUILLES durée : 2h
La tige feuillée présente chez les CORMOPHYTES est le résultat du fonctionnement d’un méristème apical qualifié de méristème
caulinaire. La mise en place des tissus primaires se fait selon 3 voies ( protoderme, méristème fondamental, procambium )
qui évolueront en tissus spécialisés, pour assurer les fonctions vitales de la plante. Les feuilles sont des organes mis en place
latéralement par les méristèmes caulinaires, leur insertion sur la tige se fait au niveau des nœuds, leur croissance est définie,
leurs fonctions sont variées (photosynthèse, stockage). Le vieillissement des tiges feuillées se traduit par la mise en place de
tissus secondaires et la chute des feuilles dans la plupart des cas.(phénomène d'abscission)
OBJECTIFS:
• Etude morpho-anatomique de tiges et feuilles caractéristiques.
• Etude histologique des tissus constitutifs I et II à partir de coupes colorées au carmino-vert. Dans ce Tp vous aurez une
coupe à réaliser avec traitement, coloration et montage microscopique puis dessin .
• Mise en évidence de quelques adaptations biologiques, intérêt pour la plante.
MATERIEL: Echantillons divers de tiges et feuilles, Préparations microscopiques du commerce, Matériel à dissection, Produits
colorants : carmino-vert, Microscope (MO), Loupes, Dictionnaire de botanique..
➔ Le protocole pour la coupe et la coloration au carmino-vert et les symboles botaniques sont donnés en annexe pages 3
et 4.
DÉROULEMENT : Tp noté à rendre par binôme en fin de séance, dessins dans une grande copie double, classés dans l’ordre ;
chaque étudiant.e doit réaliser au minimum un montage (évalué) et le montrer à l’enseignant, microscope réglé.La note obtenue
par les deux membres d’un binôme peut varier en fonction de la qualité de la préparation réalisée par chacun.e
➔ La charge de travail du Tp est à planifier et répartir entre les deux membres du binôme en début de séance.
[Link] CAS DES TIGES
I.1 Etude de tiges à stuctures primaires.
a)Tige de Dicotylédone primaire ex : Renoncule : Ranunculus repens Renonculacées
Protocole : réalisation d’une coupe transversale de tige de Renoncule, colorée au carmino-vert, montage dans une goutte d'eau
coupe réalisée par l’ étudiant A impérativement !
Observation : Observation microscopique (MO), repérez les différentes zones histologiques de la tige
A rendre : sur la même page !
1 dessin global légendé ( 1/4 de tige ) avec les symboles botaniques montrant les principales zones histologiques de la tige
1 dessin de détail ( 1/4 de tige ) des principaux tissus observés en partant de la périphérie jusqu’au centre de l’organe avec les
éventuelles différenciations histologiques
c)Tige de Monocotylédone ex : Asperge
Protocole : Etude d'une coupe transversale de tige d'Asperge : Asparagus officinalis Liliacées (lame du commerce) colorée au
carmino-vert
Observation : Observation microscopique (MO) des zones histologiques de la tige d'Asperge
A rendre :
1 dessin global légendé ( 1/4 de tige ) avec les symboles botaniques montrant les principales zones histologiques de la tige
1 dessin de détail des principaux tissus observés partant de la périphérie jusqu’au centre de l’organe avec les éventuelles
différenciations histologiques
I.2 Etude de tiges âgées à structures secondaires.
a)observation de lames du commerce préparées
un exemple de tige à structures secondaires continues : lame DICO II CONT
Protocole : Etude d'une coupe transversale de tige ( lame du commerce) colorée au carmino-vert
Observation :Observation microscopique (MO), zones histologiques de la tige
A rendre :
1 dessin global légendé ( 1/4 de tige ) pour chaque cas avec les symboles botaniques montrant les principales zones
histologiques de la tige
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[Link] CAS DES FEUILLES
II.1 Etude morphologique d'échantillons.
a) étude d'une feuille simple type
-Cas de la feuille de Dicotylédone : ex : Pommier : Malus communis Rosacées
Protocole / observation : Etude macroscopique d'une tige feuillée
A rendre :
1 dessin légendé de la partie terminale de la tige feuillée en détaillant la structure d'une feuille (nervation, forme du limbe, fixation
sur le pétiole, orientation/sol, couleur...)
-Cas d’une feuille de Monocotylédone : ex : Poireau Allium porum Alliacées ou autre Maïs : Zea mays Poacées
Protocole / observation : Étude macroscopique d'une feuille complète
A rendre :
1 dessin légendé détaillant la structure d'une feuille (nervation, forme du limbe, orientation/sol, couleur.)
➔ légendes au tableau
II.2 Etude anatomique et histologique.
a)Cas des Dicotylédones : étude de la feuille de Houx : Ilex aquifolium Aquifoliacées
• Protocole : Etude histologique microscopique
Réalisation d'une coupe transversale du limbe au niveau de la zone centrale, coloration carmino-vert , montage dans une goutte
d'eau,
coupe réalisée par l’ étudiant B impérativement !
Observation : Observation microscopique (MO) des zones histologiques de la tige
A rendre : sur la même page !
1 dessin global légendé avec les symboles botaniques montrant les principales zones histologiques de la feuille
1 dessin de détail des principaux tissus observés partant de la face ventrale passant par la nervure centrale jusqu’à la face
dorsale avec les éventuelles différenciations histologiques
BILAN : Dégagez de façon synthétique les principales caractéristiques histologiques des tiges et feuilles observées dans votre
étude. Faire le relation avec les fonctions assurées par ces tissus.
TECHNIQUES HISTOLOGIQUES
Anatomie = étude de la forme, de la disposition et de la structure des organes.
Histologie = étude des tissus et cellules constituant les organes.
Originalité du matériel végétal : la présence d’une paroi cellulaire induit une rigidité des tissus donc une conservation de la
forme de la cellule même après la perte de son protoplasme.
Les caractéristiques de la paroi sont donc essentielles pour identifier un tissu .Constituant de base : cellulose, présence fréquente
de lignine et subérine ou cutine (cuticule) qui imprègne la paroi chez les cellules âgées.
Réalisation des coupes :
Technique de coupe à main levée : à partir d’organes frais ou conservés dans l’alcool à 70°, on réalise des coupes totales ou
partielles de l’organe permettant son étude anatomique et histologique
Orientation de la coupe : transversale en général, on réalise une coupe perpendiculaire à l’axe de symétrie (tige, racine) ou au
plan de symétrie (feuille) de l’organe étudié ; des coupes radiales et tangentielles peuvent parfois être réalisées
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Réalisation des coupes minces : avec une lame de rasoir neuve en plaçant l’échantillon dans un morceau de sureau ou
polystyrène, récupérer les coupes (plusieurs >10) dans un verre de montre contenant de l’eau osmosée
Coloration des coupes : cas de la coloration au carmino-vert
Le carmino-vert est le colorant le plus fréquent, c’est un mélange de :
• Rouge carmin : colore les parois cellulosiques en rose
• Vert d’iode : colore en vert la lignine, en vert jaune à brun la subérine, en verdâtre à jaunâtre la cutine .
Protocole :
1 : passage dans l’eau de javel 20 à 30 minutes pour détruire le contenu cellulaire, agitation douce, certaines pièces (rhizomes,
tubercule, liber ) nécessitent deux bains de 10 à 15 minutes. (faire glisser les coupes avec le pinceau sur le bord des coupelles
lors des changements de bains)
2 : lavage des coupes à l’eau osmosée : 3 bains successifs (3x1 minute) pour éliminer les traces d’eau de javel.
3 : passage 5 minutes dans l’eau acétique 1% assurant un mordançage des parois, pour une meilleure fixation du colorant
4 : coloration au carmino-vert : 5 minutes.
5 : rinçage à l’eau osmosée : 1 minute.
6 : montage dans l’eau osmosée (rajouter de l’eau régulièrement pour compenser l’évaporation), attention aux bulles d’air, ne pas
placer trop de coupes sur la même préparation ! (1 suffit souvent)
7 : observation : objectif faible(x4) pour repérer la zone permettant la meilleure observation puis objectifs forts (x10, x40).
Critères pris en compte : couleur, taille et forme des cellules, épaisseur des parois, constitution biochimique.
Dct 1 : Protocole de coupes et coloration des échantillons végétaux.
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Dct 2 : Symboles conventionnels des divers tissus végétaux
Dct 3 : Clé de détermination des divers organes végétaux
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