Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr.

HACHOUD Said

LA NÉOGLUCOGENÈSE
Biosynthèse du glucose à partir du pyruvate

Plan

1 - Introduction
2 - Étapes enzymatiques
2.1 - Transformation du pyruvate en phosphoenolpyruvate
2.1.1 - Phase mitochondriale
2.1.2 - Phase cytosolique
2.2 - Transformation du phosphoenolpyruvate en fructose 1-6 bisè
2.3 - Transformation du fructose 1-6 bisphosphate en glucose
2.3.1 - Dephosphorylation du fructose-1,6-bisp en fructose 6-p
2.3.2 - Isomerisation du fructose 6-p en glucose 6-p
2.3.3 - Dephosphorylation du glucose 6-p en glucose
2.4 - Bilan
3 - Regula tion reciproque de la gluconeogenese et de la glycolyse
3.1 - Regulation allosterique
3.1.1 - Phosphofructokinase 1 /fructose 1,6 bisphosphatase 1 (pfk1/fbp1)
3.1.2 - Pyruvate deshydrogenase/pyruvate carboxylase (pdh/pc).
3.2 - Regulation hormonale
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

1 - Introduction
Certains tissus comme le cerveau, les globules rouges, la région médullaire du rein, le
cristallin, la cornée de l'œil, et le muscle en contraction rapide ont besoin d'un approvisionnement
continu en glucose. Seul le foie est capable d'assurer cette fonction par mobilisation du glycogène
et par néoglucogenèse. Les réserves du foie sous forme de glycogène sont évaluées à 190 g. Les
besoins journaliers en glucose sont estimés à 120 g pour le cerveau et 40 g pour le reste de
l'organisme. On en déduit que les réserves en glucose hépatique ne couvrent que les besoins d'un
jour en l'absence d'alimentation glucidique.

Le glucose peut être synthétisé par la voie de la néoglucogenèse ou gluconéogénèse à partir

de précurseurs comme le pyruvate, le lactate, le glycérol issu de l'hydrolyse des triglycérides et
des céto-acides provenant de la désamination des acides aminés glucoformateurs. La majeure
partie du glucose néoformé (90 %) est synthétisée dans le foie et les 10 % restants dans les reins.
Les reins jouent ainsi un rôle mineur sauf dans le cas de jeûne prolongé où leur contribution
devient très importante. La néoglucogenèse est activée dans le cas du jeûne et dans le diabète. En
cas d'exercice physique pendant lequel le glucose musculaire est dégradé en lactate, la
néoglucogenèse hépatique est stimulée ; pour retransformer le lactate en glucose, issu de la
glycolyse musculaire.
Bien que la néoglucogenèse soit habituellement définie comme la transformation du
pyruvate en glucose et que la glycolyse soit la dégradation du glucose en pyruvate, la
néoglucogenèse n'est pas l'inverse de la glycolyse. En effet, trois réactions de la glycolyse sont
irréversibles et se situent au niveau des sites de contrôle :
Enzyme La réaction
1 Hexokinase glucose + ATP → glucose 6P+ ADP
2 Phosphofructokinase Fructose 6-P + ATP→ Fructose-1,6-bisP + ADP
3 Pyruvate kinase PEP + ADP → Pyruvate + ATP

Pour contourner ces 3 difficultés, la cellule fait appel à d'autres réactions

thermodynamiquement plus favorables avec la coopération des mitochondries.
2 - Étapes enzymatiques
La plupart des étapes qui conduisent du pyruvate au glucose sont catalysées par les
enzymes de la glycolyse qui interviennent en sens inverse (réactions réversibles). Les trois
réactions irréversibles sont remplacées par d'autres réactions à équilibre thermodynamique plus
favorable, pour contournes les trois étapes irréversibles de la glycolyse par des enzymes
alternatives spécifiques à la gluconéogenèse. Le démarrage de la néoglucogenèse exige la
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

conversion du pyruvate en phosphoénolpyruvate. Il est a noté que deux pyruvates sont nécessaires
pour resynthèse une molécule de glucose.

Conversion of pyruvate to phosphoenolpyruvate Pyruvate carboxylase

Conversion of fructose 1,6-bisphosphate to fructose 6-

Fructose 1,6-bisphosphatase
phosphate

Conversion of glucose 6-phosphate to glucose Glucose 6-phosphatase

2.1 - Transformation du pyruvate en phosphoenolpyruvate (PEP)

La première étape. Elle ne peut être réalisée par l'action de la pyruvate carboxylase selon la
réaction suivante qui est endergonique. Pour obtenir cette phosphorylation du pyruvate il y a
coopération entre la mitochondrie et le cytosol.
2 Pyruvate + 2 ATP → 2 Phosphoénolpyruvate + 2 ADP ∆G°' = + 7.5 kcal/mol

Elle se déroule en deux étapes. La pyruvate carboxylase est une enzyme mitochondriale
dépendante de la biotine et elle convertit le pyruvate en oxaloacétate en présence d'ATP et de
CO2. Cette enzyme régule la gluconéogenèse et nécessite l'acétyl CoA pour son activité. La
pyruvate carboxylase se trouver dans la matrice des mitochondries du foie et des reins mais pas
dans celles des muscles.
2 Pyruvate + 2 CO2+ 2 A TP → 2 oxaloacétate + 2 ADP + 2 Pi
Puis l'oxaloacétate formé est réduit en malate par la malate déshydrogenase
mitochondriale. Le malate est ensuite transporté de la mitochondrie dans le cytosol.
2 Oxaloacétate + 2 NADH,H+ → 2 malate + 2 NAD+
Fig.1 : Transformation de l’oxaloacétate
en phosphoenolpyruvate
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

2.1.2 - Phase cytosolique

Le malate est réoxydé en oxaloacétate par la malate déshydrogénase cytosolique.

2 Malate + 2 NAD+ ↔ 2 Oxaloacétate + 2 NADH, H+ (Malate DH)
Enfin l'oxaloacétate est transformé en phosphoénolpyruvate (PEP), suivant une réaction
réversible) en présence du GTP par la phosphoénolpyruvate carboxykinase (PEPCK), enzyme
spécifique de la néoglucogenèse.
2 Oxaloacétate + 2 GTP ↔ 2 Phosphoénolpyruvate + 2 GDP + 2 CO2
En résumé la réaction globale de la transformation du pyruvate en phosphoénolpyruvate est :
2Pyruvate + 2ATP + GTP → 2Phosphoénolpyruvate + 2ADP + 2GDP + 2Pi

Fig.2 : Schéma des réactions enzymatiques de la néoglucogenèse conduisant du pyruvate à la

formation du glucose

Remarque : Chez certains micro-organismes et végétaux, la phosphorylation du pyruvate

en PEP est réalisée par une réaction complètement différente, catalysée, en une seule étape, par
une pyruvate orthophosphate dikinase :
2 Pyruvate + 2 ATP + 2 Pi → 2 PEP + 2 AMP + 2 PPi
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

2.2 - Transformation du phosphoenolpyruvate en fructose 1-6 bisP

La séquence des réactions qui vont conduire du PEP au glucose est cytosolique. Nous
nous contenterons de les écrire en rappelant les noms des enzymes. Voir figure 2
Enzyme La réaction
1 Enolase 2 PEP + 2 HO ↔ 2 glycérate 2P
2 Phosphoglycérate mutase 2 glycérate 2P ↔ 2 glycérate 3P
3 Glycérate 3-P kinase 2Glycérate 3P + 2ATP↔ 2 (1-3)BPGlycéroyl + 2
ADP
4 Glycéraldéhyde 3-PDH 2(1-3) BPG + 2NADH, H+ ↔ 2 glycéraldéhyde 3P +
2Pi + 2NAD+
5 Phosphotriose 1 glycéraldéhyde 3-P ↔1 dihydroxyacétone 3-P
isomérase
6 Aldolase 1 3P glycéraldéhyde + 3P dihydroxyacétone ↔
Fructose 1,6 bisP

Le bilan global de la séquence est comme suit :

2PEP + 2H2O + 2ATP + 2NADH, H+ Fructose-1,6 -bisP + 2ADP + 2Pi + 2NAD+

2.3 - Transformation du fructose 1-6 bisphosphate en glucose

Une séquence de 3 réactions, dont une réversible, conduit au glucose
2.3.1 - Dephosphorylation du fructose 1,6-bisP en fructose 6P
La réaction qui transforme le fructose 6-phosphate en fructose 1-6-bisP est catalysée par
la phosphofructokinase 1 (PFK 1) et il est irréversible. La réaction inverse qui enlève le
groupement phosphate est catalysée par la fructose 1,6-bisphosphatase (FBP1), enzyme clé et
site de régulation principal de la voie de la néoglucogenèse.
Fructose 1,6-bisP + H2O ↔ fructose 6P + Pi
2.3.2 - Isomérisation du fructose 6P en glucose 6P
La réaction est réversible et catalysée par la phosphogluco-isomérase (PGI)
Fructose 6P ↔ Glucose 6P
2.3.3 - Dephosphorylation du glucose 6-ł en glucose
Le déphosphorylation du glucose 6P est effectué par une hydrolase enzymatique sous
contrôle de la glucose 6-phosphatase, dont l'importance est fondamentale dans le maintien de
la glycémie. La glucose-6-phosphatase est unique au foie et aux reins, leur permettant de
fournir du glucose à d'autres tissus.
Glucose 6-P + H2O ↔ glucose + Pi
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

2.4 - Bilan
Le bilan de la formation du glucose à partir de 2 pyruvate est le suivant :
2Pyruvate + 4ATP+ 2GTP + 2NADH, H+ → Glucose + 4ADP + 2GDP + 6Pi + 2NAD+
Sur le plan énergétique la synthèse du glucose consonne 4 ATP et 2 GTP soit
l'équivalent de 6 liaisons phosphates riches en énergie.

3 - Régulation réciproque de la gluconéogenèse et de la glycolyse

L'hormone glucagon et la disponibilité des substrats régulent principalement la gluconéogenèse,
Influence du glucagon
Il s'agit d'une hormone sécrétée par les cellules α des îlots pancréatiques. Le glucagon stimule
la gluconéogenèse par deux mécanismes
a. La forme active de la pyruvate kinase est convertie en forme inactive par l'intermédiaire
de l'AMP cyclique, provoquée par le glucagon. La diminution de la pyruvate kinase
entraîne une conversion réduite du phosphoénol pyruvate en pyruvate et le premier est
détourné pour la synthèse du glucose.
b. Le glucagon réduit la concentration de fructose 2,6 bisP. Ce composé inhibe de manière
allostérique la phosphofructokinase et active la fructose 1,6-bisphosphatase, tous deux
favorisant une gluconéogenèse accrue.

À l'état nourri, lorsque la glycémie est élevée, le foie est orienté vers la conservation du
carburant : le glycogène est synthétisé et la voie glycolytique et la pyruvate déshydrogénase
sont activées, décomposant le glucose en acétyl-CoA pour la biosynthèse des acides gras et le
stockage des graisses. À jeun, cependant, le foie maintient le taux de glucose sanguin à la fois
par dégradation du glycogène et par la gluconéogenèse. Les principaux substrats/précurseurs
de la gluconéogenèse sont : le lactate, le pyruvate, les acides aminés glucogéniques, le
propionate et le glycérol (voir la diapo de cours).
3.1 - Régulation allostérique
L'hormone glucagon et la disponibilité des substrats régulent principalement la
gluconéogenèse. La vitesse et la direction de la glycolyse et de la gluconéogenèse sont
contrôlées aux points de ces voies où les directions directe et inverse peuvent être régulées
indépendamment : les réactions catalysées par :
a. L'hexokinase/Glucose-6phosphatase,
b. La PFK/FBPase et
c. Pyruvate kinase/Pyruvate carboxylase–PEPCK (Fig.3).
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

Fig.3 : Régulation
allostérique assures pas
(1) hexokinase/Glucose-
6phosphatase et (2)
PFK/FBPase.

Le tableau suivant résume les enzymes régulatrices et leurs régulateurs. Les mécanismes
dominants sont les interactions allostériques et les modifications covalentes dépendantes de
l'AMPc (phosphorylation/déphosphorylation).
Tableau 1 : Régulateurs de l'activité enzymatique gluconéogène
Enzyme Allosteric Allosteric Enzym Protein Synthesis
Inhibitors Activators e Ption
PFK ATP, citrate AMP, F2,6P
FBPase AMP, F2,6P
Pyruvate Alanine F1,6P Inactivé
kinase
Pyruvate Acetyl-CoA
carboxylas
e
PEPCK Stimulé par le glucagon, l'hormone
thyroïdienne et les glucocorticoïdes, et
inhibé par l'insuline
PFK-2 Citrate AMP, F6P, Pi Inactivé
FBPase-2 F6P Glycerol-3-P Activé
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

3.1.1 - Phosphofructokinase / FRUCTOSE 1,6 BISPHOSPHATASE 1 (PFK1/FBP1)

Dans le foie, les taux de glycolyse et de gluconéogenèse sont ajustés pour maintenir les
niveaux de glucose sanguin. Le fructose 2,6-bisphosphate stimule fortement la
phosphofructokinase et inhibe la fructose 1,6-bisphosphatase (Fig. 3 & 4). Lorsque la glycémie
est basse, le fructose 2,6-bisphosphate perd un groupe phosphoryle pour former du fructose 6-
phosphate. D fait, il ne peut plus liée à la PFK. Comment la concentration de fructose 2,6-
bisphosphate est-elle contrôlée pour augmenter et diminuer avec la glycémie ? Deux enzymes
régulent la concentration de cette enzyme : l’un phosphoryle le fructose 6-phosphate et l'autre
déphosphoryle le fructose 2,6-bisphosphate. Le fructose 2,6-bisphosphate est formé dans une
réaction catalysée par la phosphofructokinase 2 (PFK2), une enzyme différente de la
phosphofructokinase. Le fructose 6-phosphate est formé par hydrolyse du fructose 2,6-
bisphosphate par une phosphatase spécifique, la fructose bisphosphatase 2 (FBPase2).

La découverte frappante est que PFK2 et FBPase2 sont toutes deux présentes dans une
seule chaîne polypeptidique de 55 kd. Cette enzyme bifonctionnelle contient un domaine
régulateur N-terminal, suivi d'un domaine kinase et d'un domaine phosphatase. La PFK2
possède un domaine NTPase à boucle P, tandis que la FBPase2 ressemble à la phosphoglycérate
mutase. Rappelons que la mutase est essentiellement une phosphatase. Dans l'enzyme
bifonctionnelle, l'activité phosphatase a évolué pour devenir spécifique du F-2,6-BP. L'enzyme
bifonctionnelle elle-même est probablement née de la fusion de gènes codant pour les domaines
kinase et phosphatase.
Les activités de PFK2 et FBPase2 sont réciproquement contrôlées par la
phosphorylation d'un seul résidu sérine. Lorsque le glucose se fait rare, comme lors d'un jeûne
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

nocturne, une élévation du taux sanguin de l'hormone glucagon déclenche une cascade de
signaux d'AMP cyclique, conduisant à la phosphorylation de cette enzyme bifonctionnelle par
la protéine kinase A (voir la diapo de glycogène). Cette modification covalente active la
FBPase2 et inhibe la PFK2, abaissant le niveau de F-2,6-BP. La gluconéogenèse prédomine.
Le glucose formé par le foie dans ces conditions est essentiel à la viabilité du cerveau. La
stimulation par le glucagon de la protéine kinase A inactive également la pyruvate kinase dans
le foie.
A l'inverse, lorsque la glycémie est élevée, comme après un repas, la gluconéogenèse
n'est pas nécessaire et le groupement phosphoryle est éliminé de l'enzyme bifonctionnelle. Cette
modification covalente active PFK2 et inhibe FBPase2. L'augmentation résultante du niveau de
F-2,6-BP accélère la glycolyse. Le contrôle coordonné de la glycolyse et de la gluconéogenèse
est facilité par la localisation des domaines kinase et phosphatase sur la même chaîne
polypeptidique que le domaine régulateur.

Les hormones insuline et glucagon régulent également les quantités d'enzymes

essentielles (fig.4). Ces hormones modifient l'expression des gènes principalement en modifiant
le taux de transcription. Les niveaux d'insuline augmentent après un repas, ce qui fournit
beaucoup de glucose pour la glycolyse. Pour favoriser la glycolyse, l'insuline stimule
l'expression de la phosphofructokinase, de la pyruvate kinase et de l'enzyme bifonctionnelle qui
fabrique et dégrade le F-2,6-BP. Le glucagon augmente pendant le jeûne, lorsque la
gluconéogenèse est nécessaire pour remplacer le glucose qui est ce fait rare. Pour favoriser la
gluconéogenèse, le glucagon inhibe
l'expression des trois enzymes glycolytiques
régulées et stimule à la place la production de
deux enzymes gluconéogéniques clés, la
phosphoénolpyruvate carboxykinase et la
fructose 1,6 bisphosphatase.
Fig. 4 : Régulation hormonale de [F2,6P]. Ce
processus active la gluconéogenèse dans le
foie en réponse à un faible taux sanguin de la
concentration de glucose.
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

3.1.2 – La pyruvate kinase régule également la glycolyse

La pyruvate kinase est inhibée par l'ATP et activée par le F1,6-BP. La pyruvate kinase
est active à l'état déphosphorylé (a) et inactivé à l'état phosphorylé (b) (Fig.6).
L'inactivation de la pyruvate kinase par phosphorylation est provoquée par la protéine kinase
dépendante de l'AMPc. L'hormone glucagon inhibe la glycolyse hépatique par ce mécanisme.
Pendant le jeûne, la glycolyse est inhibée dans le foie (signal glucagon) mais non affectée dans
le muscle

Fig.6 : régulation de pyruvate kinase (PKA- protéine kinase A PP- phosphoprotéine

phosphatase)

La pyruvate déshydrogénase et la pyruvate carboxylasece sont des enzymes

mitochondriales impliquent dans la régulation réciproquement de glycolyse et de la
néoglucogenèse. En cas de besoin en ATP, le fructose-1,6- bisphosphate stimule la pyruvate
kinase pour produire du pyruvate indispensable à la formation de l'acétyl-CoA. Une activité
de la pyruvate DH favorise la glycolyse. En cas d'excès d'ATP, signal de ralentissement en
aval du cycle de Krebs et de la phosphorylation oxydative, le citrate et l'acétyl-CoA
s'accumulent. L'acétyl-CoA, en excès, devient un effecteur négatif de la pyruvate DH mais un
activateur de la pyruvate carboxylase qui, en temps normal, est peu active. Le pyruvate est
alors transformé en oxaloacétate, œ qui engage ses carbones dans la néoglucogenèse
plutôt que dans ~ processus de production de l'A TP.
La pyruvate carboxylase est essentielle dans la régulation de la production de
l'énergie. En effet, l'oxaloacétate, produit de la carboxylation du pyruvate, est un
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

intermédiaire catalytique du cycle de Krebs. Dans ce cas, la réaction catalysée par la pyruvate
carboxylase est considérée comme une réaction nourricière du cycle tricarboxylique. Elle
assure le maintien du taux nécessaire en oxaloacétate mitochondria.
La PFK2 est désactivée par phosphorylation, en présence de l'ATP, par la protéine
kinase A, ce qui arrête la production du fructose-2,6-bisP. En même temps la même protéine
kinase A stimule par phosphorylation l'activité de la FBP2 permettant la déphosphorylation
du fructose-2,6-bisP en fructose 6-P. La baisse de la concentration cellulaire en fructose-2,6-
bisP active la néoglucogenèse. Inversement l'insuline, par ses réactions en cascade, conduit
à l'activation, par phosphorylation, d'une protéine phosphatase insulino-dépendante. Cette
dernière permet la déphosphorylation à la fois de PFK2 et de FBP2. La synthèse de fructose-
2,6-bisP peut reprendre avec comme conséquence la stimulation de la glycolyse et l'arrêt de
la néoglucogenèse.
Par le jeu d'interconversion d'une forme à une autre pour chacune des enzymes du
complexe, la régulation réciproque de la glycolyse et de la néoglucogenèse est efficacement
assurée dans les cellules hépatiques sous l'action du glucagon et de l'adrénaline d'une part et
de l'insuline d'autre part (voir Fig 3 & 4). Dans les mêmes conditions la protéine kinase A
peut aussi phosphoryler la Pyruvate kinase hépatique qui devient inactive. Le
phosphoénolpyruvate ne peut être converti en pyruvate mais remonte la voie de la
néoglucogenèse.
Néoglucogenèse UMMTO Faculté de medicine Dr. HACHOUD Said

Tableau 5 - GLYCOLYSE ET NEOGLUCOGENESE : Ce qu’il faut retenir

aractéristiqu Glycolyse Néoglucogenèse

es
Définition Voie de dégradation du glucose en Voie de synthèse du glucose à partir du
pyruvate pyruvate
Localisation Cytoplasme Cytoplasme
Réactions 10 : 11
enzymatiques - 3 irréversibles -3 irréversibles
- 7 réversibles- - 8 réversibles
Réactions - Phosphoglucoisomérase : Glucose-6-P ↔ fructose-6-p
réversibles - Fruct.-1,6-bisP aldolase : Fructose-1,6-bisP ↔ Glycér.-3-P + PDHA
communes - Phosphotriose isomerase : Glycéral.-3-P ↔ PDHA
- Glycér.-3-P DH : Glycéra.l-3-P + NAD+ + Pi ↔ PGP + NADH,H+
- Phosphoglycérate kinase : PGP - ADP ↔ Glycérate-3-P + ATP
- Phosphoglycérate mutase : Glycérate-3-P ↔ Glycérate-2-P
- PEP énolase : Glycérate-2-P ↔ PEP + H2O
Réactions - Hexokinase : - G-6-Phatase :
spécifiques Gluc+ ATP → G-6-P + ATP G-6-P + H2O → Glucose + Pi
- Phosphofuctokinase - Fructose-1,6-bisphosphatase
F-6-P + ATP → F-1,6-bisP + ADP F-1,6-bisP + H2O → F-6-P + Pi
- Pyruvate kinase - PEPcarboxykinase
PEP + ADP → Pyruvate + ATP Oxaloac. + GTP ↔ PEP + GDP
- Pyruvate carboxylase :
Pyr. + CO2 + ATP → Oxal. + ADP
+ Pi
Energétique Production de : Consommation de
2 ATP et de 2 NADH,H+ 4 ATP, 2 GTP et 2 NAD(P)H,H+
Bilan Glucose + 2 ADP + 2 Pi + 2 2 pyr. + 2 NAD (P) H,H+ + 2 GTP + 4
NAD+ → 2pyruvate + 2 ATP +
ATP → Gluc. + 2 NAD (P)+ + 2 GDP + 4
2 NADH,H
ADP + 6 Pi .