La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
Lyophilisation ou cryodessiccation
Plan du cours
Introduction
1.
2. Réalisation technique
2.1. Congélation
2.2. Stockage
2.3. Chauffage du produit à dessécher en cours de sublimation
2.4. Conduits de la vapeur
2.5. Piégeage de la vapeur
2.6. Réglage de la pression
2.7. Appareils de contrôle
3. Différents types d'appareils
4. Applications de la lyophilisation
5. Contrôle de la lyophilisation ou de la dessiccation
Université Moustefa Benboulaid Batna -2-
Faculté de médecine
Département de pharmacie
Année universitaire 2020/2021
1
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
Introduction
La lyophilisation est une technique de dessiccation par sublimation de la glace de
solutions, de suspensions, de tissus animaux ou végétaux, etc. préalablement solidifiés par
congélation.
Les conditions du procédé : basse température, pression réduite, absence de phase
intervenant.
Le produit sec obtenu, de texture poreuse, friable, possède un caractère « lyophile », une
solution ou de la pseudosolution initiale.
1. Principe
La lyophilisation est une « dessiccation par s -à-dire que par ce procédé
Fig. 01
2
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
Le phénomène peut être schématisé de la façon suivante :
Fig. 2 représentation schématique du procédé de lyophilisation
Soit deux enceintes « A » et « B » « A » est
refroidie à une température Ta de telle sorte que le produit à dessécher soit congelé, « B »
est amenée à une température Tb encore plus basse.
Du fait que Tb < Ta la tension de vapeur en « B » est inferieure à la tension de vapeur
en « A » : Pb < Pa. Cette différence de tension de vapeur entre les deux enceintes est le
moteur de la lyophilisation. Elle provoque le déplacement de la vapeur de « A » vers « B » où
elle se transforme en glace.
En « A » il y a sublimation de la glace, en « B » on aura condensation de la vapeur en
glace (piège à vapeur).
N.B : le réglage du chauffage doit être tre les calories fournies
par la source de chaleur et les calories absorbées par la sublimation : le produit en « A » doit
congelé.
sateur
3
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
2. Réalisation technique :
2.1 Congélation :
Elle doit être à la fois précoce et rapide. Il faut « figer » le produit. Une congélation
lente dans le cas des produits biologiques peut présenter le double inconvénient d'altérer les
tissus et de dénaturer les protéines. En effet, si la congélation est lente, il se forme peu de
centres de cristallisation et, par conséquent, des gros cristaux qui risquent de déchirer les
parois cellulaires. En revanche si la congélation est brusque il se forme une infinité de petits
cristaux.
Pour avoir une congélation rapide il faut que le contact entre le produit et la source de
froid soit aussi étroit que possible :
* Les produits solides sont divisés et répartis en couches pas trop épaisses sur des
plateaux. La congélation peut être assurée par la neige carbonique qui produit un froid de -
80 °C ou par l'azote liquide qui donne - 196 °C.
* Les liquides, on peut envisager deux cas :
Flacons de grande capacité : 250 mL, 500 mL ou 1 L. Le liquide est étalé sur les parois
par rotation du flacon pendant la congélation. C'est la congélation « en coquille » utilisée
essentiellement pour le plasma :
- par rotation horizontale lente (fig. 04). Les flacons sont couchés sur des cylindres
entraîneurs de façon à ce que la partie inférieure soit plongée dans un bain
réfrigérant. Le bain peut être un mélange d'alcool et de glace carbonique (- 60 °C à -
70 °C). Dans le cas d'une production importante un bain d'alcool ou de saumure est
refroidi par une machine frigorifique qui permet d'avoir - 45 °C.
Fig. 04 congélation par rotation horizontale lente
- par rotation verticale rapide (fig. 05). La vitesse doit être suffisante pour que le
liquide remonte sur les parois verticales (de l'ordre de 1000 tr/min). Le refroidissement est
assuré soit par un soufflage d'air froid, soit par aspersion d'alcool froid. Dans ce cas la
réfrigération est plus rapide.
4
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
Fig. 05 congélation par rotation verticale rapide
Flacons de petite capacité (types bouteilles d'antibiotiques ou ampoules bouteilles).
Les récipients sont placés verticalement dans des boîtes métalliques plates. Pour la
congélation, le fond des boîtes est plongé dans un bain d'alcool réfrigéré ou sur un lit de
neige carbonique.
2.2 Stockage :
La discontinuité des opérations de lyophilisation impose dans certains cas le stockage
des flacons congelés (plasma ou lait de femme récoltés irrégulièrement). Il se fait dans des
chambres froides à une température suffisamment basse pour qu'il n'y ait pas de
décongélation et, dans le cas des tissus animaux ou végétaux, pas de croissance des cristaux.
2.3 Chauffage du produit à dessécher en cours de sublimation :
II est rappelé qu'il s'agit simplement d'apporter au produit à dessécher suffisamment
de calories pour compenser exactement les calories absorbées par la sublimation, en
prenant garde surtout de ne pas le décongeler.
On peut chauffer les plateaux soit avec une résistance électrique ou à l'aide d'une
circulation de fluide chaud grâce à des canalisations se trouvant toujours dans l'épaisseur
des plateaux.
Pour les produits injectables la lyophilisation est réalisée dans des flacons ou ampoules
de verre dont le fond doit être très plat et l'épaisseur aussi régulière et aussi réduite que
possible pour faciliter les échanges thermiques.
Le réglage du chauffage est peut-être le point le plus délicat d'une opération de
lyophilisation. C'est une deuxième raison pour réduire le plus possible l'épaisseur du produit
à lyophiliser.
5
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
2.4 Conduits de la vapeur :
Il s'agit surtout du conduit qui sépare l'enceinte de sublimation de celle du condenseur.
Ce conduit doit être aussi large que possible pour assurer une évacuation rapide de la
vapeur d'eau.
Il faut donc éviter dans la mesure du possible tous les obstacles sur le trajet de la
vapeur : les conduits mais aussi les goulots trop étroits des flacons et ampoules et l'épaisseur
des produits.
2.5 Piégeage de la vapeur :
La condensation par le froid est le moyen habituel d'élimination de la vapeur d'eau du
circuit de lyophilisation. Les sources de froid pour amener le condenseur à une température
suffisamment basse sont :
- La neige carbonique et les gaz liquéfiés qui ne sont utilisés que pour les petites
installations.
- Les machines frigorifiques à compresseurs mécaniques alternatifs ou rotatifs servent
dans toutes les installations à haut rendement.
Un point important est que la température du condenseur reste au-dessous d'une
certaine valeur qui est fonction du vide (Pour jouer son rôle de piège à vapeur).
Un autre point important est la surface de condensation : elle doit être suffisante pour
qu'en fin d'opération la couche de glace déposée ne soit pas trop épaisse pour que les
échanges thermiques continuent à se faire entre la vapeur et le condenseur.
Jusqu'ici il n'a été question que de la condensation par le froid pour éliminer la vapeur
d'eau, mais pour les petites quantités d'eau, on peut avoir recours :
- Soit à des déshydratants étalés sur des plateaux à la place du condenseur (ex. : P205).
- Soit à la pompe à vide elle-même.
2.6 Réglage de la pression :
Le vide est nécessaire pour avoir une vitesse de sublimation suffisante, Il est à
déterminer en fonction de la température. L'ordre de grandeur est 10-1 mmHg. La
lyophilisation peut utiliser les techniques les plus classiques de production de basses
pressions mais surtout les pompes à palettes à un ou mieux deux étages.
Certaines installations sont donc munies d'un système de régulation de la pression par
injection d'un gaz incondensable, par exemple de l'air ou mieux de l'azote ou encore de
l'hydrogène ou de l'hélium qui par leur coefficient de conductibilité permettent d'améliorer
encore les transferts thermiques.
6
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
2.7 Appareils de contrôle :
Ils permettent de contrôler le vide et la température aux différents niveaux de
l'appareil.
On enregistre la pression dans l'enceinte (tubes à décharge, jauge à ionisation,
manomètre à thermocouple).
On enregistre les températures du condenseur, des plateaux et des produits à l'aide de
couples thermoélectriques convenablement placés.
3. Différents types d'appareils :
Les lyophilisateurs (ou lyophiliseurs) sont très nombreux. Voici deux schémas
d'appareils classiques (fig. 06).
- Le premier appareil convient pour la lyophilisation en série dans des flacons type
antibiotiques ou des ampoules bouteilles. Il comprend :
armoire à étagères sur lesquelles sont placées des plaques métalliques percées
d'alvéoles à la dimension des flacons,
condenseur,
groupe de pompage,
groupe frigorifique
Et de plus comme éléments qui ne figurent pas sur le schéma :
équipement électrique de chauffage,
programmateur à commandes électroniques.
.
Fig. 06 Lyophilisateur pour flacons type antibiotique
et ampoules bouteilles
7
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
- Le deuxième appareil convient pour les flacons et ampoules. On y trouve les
principaux éléments du 1er appareil mais ici la canalisation du condensateur tapisse la paroi
même de l'enceinte de sublimation et la congélation des produits se fait à l'extérieur avant
l'introduction des plateaux dans l'appareil (fig. 07).
Fig. 07 Lyophilisateur pour flacons ou ampoule
4. Applications de la lyophilisation
Elles sont très nombreuses et peuvent être classées de la façon suivante :
Conservation des substances médicamenteuses fragiles
Ce procédé convient particulièrement aux produits d'origine biologique dont on réduit
ainsi au maximum la dénaturation des protéines
- Produits d'origine humaine. Le plasma humain
- Produits d'origine animale : les sérums, la tuberculine, de nombreux antigènes, des
produits opothérapiques, des enzymes, etc.
- Produits d'origine végétale : extraits de plantes médicinales, vitamines, sucs de fruits,
antibiotiques, etc.
Conservation des greffons d'origine humaine ou animale
II existe des banques de tissus d'origine humaine dans lesquelles on conserve des tissus
sous forme lyophilisée : os, fragments de peau, cornée, cartilages, artères, etc.
Conservation de la matière vivante
Pour le moment la conservation d'organismes vivants à l'état lyophilisé est limitée au
microorganisme, bactéries et virus.
Certains vaccins sont lyophilisés (ex. : BCG)
8
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
Applications à la technologie pharmaceutique
La lyophilisation permet de résoudre des problèmes techniques. On y a recours :
- pour assurer la conservation d'un produit qui serait instable en solution ;
- pour dessécher sans les faire fondre les produits dont le point de fusion est très bas ;
- pour avoir un produit poreux facile à remettre en solution ou en suspension ;
- pour la répartition d'un produit solide en petites doses ;
- pour faciliter l'obtention de produits pulvérulents stériles :
La lyophilisation menée aseptiquement permet d'avoir une poudre stérile en partant d'une
solution stérilisée au préalable soit à l'autoclave, soit par filtration.
Applications diverses
- Conservation des structures des produits végétaux et animaux.
- Dans l'alimentation : cette méthode de conservation convient dans certains cas
malgré son prix de revient (ex. : extrait de café lyophilisé).
5. Contrôle de la lyophilisation ou de la dessiccation :
Comme toute opération pharmaceutique, la dessiccation ou séchage doit être
contrôlée. On doit vérifier d'une part que les principes actifs n'ont pas été altérés et d'autre
part le taux d'humidité résiduelle dont dépend la bonne conservation du produit desséché.
Correspond à la teneur en eau (sous forme liquide ou vapeur) de l'air ou d'une substance.
Si l'humidité, au sens strict du terme, ne concerne que la teneur en eau d'une substance, la
plupart des procédés dits de détermination du taux d'humidité mesurent en fait la teneur en
substances se volatilisant par chauffage : huiles, solvants organiques, graisses, alcools,...etc.
La mesure de l'humidité est ainsi essentielle pour respecter les normes en vigueur. La teneur
en eau a également une influence sur la qualité du produit (au toucher, au goût, à l'évolution
du produit et sa conservation)
La détermination de ce taux doit cependant être effectuée de manière rapide et sans
incidence sur la production.
5.2 Méthodes
Le taux d'humidité peut être déterminé de différentes façons, qui peuvent être classées
selon les catégories suivantes :
- Les méthodes spectrométriques
- Les méthodes chimiques
- Les méthodes thermogravimétriques
- Autres méthodes : la conductimètre, la réfractométrie,
9
La lyophilisation 2021 pharmacie galénique
Parmi celles-ci, les méthodes thermogravimétriques sont les plus répandues, car elles
conviennent à la plupart des applications, pour peu que la substance testée puisse résister à
une température de séchage comprise typiquement entre 100 et 140ºC. Ces méthodes
consistent essentiellement en un triple processus de « pesage-séchage-pesage » : les
échantillons sont pesés avant et après séchage par échauffement pour une température et
un temps donnés en fonction du matériau, la perte de masse permettant de calculer
l'humidité de l'échantillon.
Les méthodes thermogravimétriques peuvent à leur tour être classées en plusieurs
catégories :
- La méthode traditionnelle de l'armoire à dessiccation : l'étuve
- La distillation
- Le séchage par infrarouge
- Le séchage par micro-ondes
- La méthode de l'anhydride phosphorique
- Le séchage par source halogène.
Bibliographie :
Le Hir Alain Abrégé de pharmacie galénique (bonne pratique de fabrication des
médicaments) 8ème édition édition Masson 2001 pages 173-194
Denine Rachid cours de pharmacie galénique édition OPU 10/2018 pages 35-43
10
