Leçon n°2 : Dosage spectrophotométrique
Notions et contenus Capacités exigibles
Absorbance, spectre d’absorption, couleur Expliquer ou prévoir la couleur d’une espèce en solution à partir de son
d’une espèce en solution. spectre U.V visible.
Rappel seconde spectre de la lumière blanche, radiations visibles (de 400 nm à 800 nm)
I. Principe de la spectrophotométrie
1. Les solutions colorées
Une solution est incolore si, lorsqu’elle est traversée par la lumière, elle laisse passer toutes les radiations du spectre visible
sans les absorber. Ainsi, la lumière visible, sortant de la solution est la même lumière blanche qui y est entrée et la solution
parait incolore.
La couleur d’une solution correspond à la superposition des radiations non absorbées par la solution.
Lorsqu’une solution n’absorbe que dans un seul domaine de longueur d’ondes du visible, sa couleur est la couleur
complémentaire de celles des radiations absorbées..
2. L’absorbance
Une solution colorée absorbe certaines radiations du spectre de la lumière blanche et transmet les autres radiations du
spectre.
La couleur de la solution résulte de la superposition des radiations non absorbées.
Ex : La solution jaune a absorbé les radiations bleues.
L’absorbance A est une grandeur mesurable sans unité qui caractérise la capacité d’une espèce chimique colorée
à absorber une radiation de longueur d’onde λ.
Plus la lumière est absorbée, plus l’absorbance est grande.
Elle se mesure avec un spectrophotomètre.
Remarque : Pour une solution transparente et incolore comme l’eau pure A = 0 pour toutes les longueurs d’onde.
3. Principe du spectrophotomètre
Document : Schéma d’un spectrophotomètre
Le spectrophotomètre permet d’éclairer une solution colorée avec une lumière monochromatique.
Il compare l’intensité lumineuse transmise par la solution à celle transmise par une solution de référence
généralement constitué par le solvant utilisé.
Pourquoi compare-t-on l’intensité transmise par la solution avec une solution de référence constituée du
même solvant ?
c’est pour faire le blanc c’est dire à l’appareil que cette solution que l’Absorbance= 0
Regarder la vidéo https://youtu.be/f8AtLTMcuFU
De quels paramètres l’absorbance d’une solution dépend-elle ?
- De la concentration de la solution colorée monochromatique
- De la couleur de la longueur d’onde , de la lumière
- De la nature de la solution colorée
- Longueur d’onde au maximum d’absorbance
- Quelle est la longueur d’onde la plus absorbée par une solution de diiode ? A quelle couleur correspond-
elle ?
lambda= 470nm. La solution de diiode absorbe le bleu. Elle parait jaune orangé
- Même question pour la solution de permanganate de potassium.
Lambda= 540nm la solution absorbe vert et elle parait magenta.
Pourquoi choisir le maximum d’absorption ?
Compléter la phrase suivante en choisissant parmi les mots suivants : grande, petite, nette, plus, moins,
d’augmenter, de réduire, d’annuler.
Le choix de la longueur d’onde la plus absorbée par la solution permet
l’affichage de l’absorbance la plus grande possible.
Comme la précision de la mesure est au centième, ce choix permet de
réduire l’erreur relative.
4. Spectre d’absorption
Selon la couleur de la solution, les radiations observées ne sont pas les
mêmes.
Un spectrophotomètre permet de réaliser des mesures de l’absorbance
d’une solution pour une plage de valeur de longueurs d’onde de la lumière qui traverse cette solution.
Le spectre d’absorption est le graphe représentant l’absorbance en fonction de la longueur d’onde.
Exemple : Spectre d’absorption du bleu patenté (colorant alimentaire) Spectre d’absorption du bleu patenté
Quelle est valeur de la longueur d’onde pour laquelle la solution absorbe le plus ? A quelle couleur correspond
cette longueur d’onde ? Quel est le lien entre cette couleur et la couleur de la solution ?
Lambda max= 630nm la solution absorbe le jaune elle parait bleue : ce sont des couleurs complémentaire.
Sur le spectrophotomètre, on peut utiliser plusieurs longueurs d’onde : 470 nm, 567 nm, 585 nm, 635 nm, 655 nm,
700nm. Quelle longueur d’onde va-t-on utiliser pour mesurer l’absorbance des solutions de bleu patenté. Justifier.
Lambda max=635 nm
Exercice n°1 :
Exercice n°2 :
Exercice n1 :
1 : la longueur d’onde du maximum d’absorption est de lambda max = 460nm La solution absorbe (bleu) elle
parait donc jaune
2 : le pH est supérieur à 6,2
3: Tracer l’allure du spectre d’absorption si la solution avait été préparée à pH = 2.
À pH 2, l'hélianthine se présente sous sa forme rouge, ce qui signifie qu'elle absorbe la lumière bleu . La
lumière bleu se situe autour de 520nm .
Exercice 2 :
1 :le spectre montré correspond à la forme colorée du bleu de méthylène, car il absorbe dans le rouge, et la
solution apparaît donc bleue.
2 :La longueur d'onde à régler pour une mesure d'absorbance est 670 nm.
3 : A=0 pour la forme incolore
