Article original

Propagation de Ricinodendron heudelotii par bouturage in vitro

FOTSOa*, Tchinda Néhémie DONFAGSITELIb, Duclaire MBOUNAa, Ndoumou Denis OMOKOLOa

a
Laboratoire de Physiologie In vitro propagation of Ricinodendron heudelotii by cuttings.
végétale, École normale
Abstract –– Introduction. R. heudelotii (Euphorbiaceae) is a fruit tree of the tropical wet, dense
supérieure, BP 47, Yaoundé, forests, exploited by the local populations. The species is dioecious. The currently used regeneration
Cameroun by seeds is not easy and it involves a genetic heterogeneity of the descendants. Until now, the species’
fotsober@[Link] horticultural vegetative multiplication was especially based on the use of seedlings resulting from seeds.
Our work aimed at developing an in vitro vegetative propagation method of selected adult trees of
b
Institut de recherches R. heudoletii. Materials and methods. Cuttings of 2 cm (one node with a single axillary bud) were
taken on an adult plant of R. heudelotii, and then cultured, after sterilization, on a half-diluted Murashige
médicales et d’études des and Skoog’s medium. Various concentrations of kinetin were added to this basic medium (BM) to study
plantes médicinales (IMPM), the cytokinin effect on the bud bursting and the axillary bud development. In the same way, effects
BP 6113, Yaoundé, of benzylaminopurine (BAP) added to BM were studied in parallel on the proliferation of buds present
Cameroun at the level of the cutting node. Lastly, the cutting's rooting after culturing either on medium with kinetin
or on medium with BAP was tested by transplanting cuttings onto BM enriched with naphthaleneacetic
acid (NAA). Results. The 4.5 mg BAP·L–1 medium allowed the proliferation of 91% of the buds present
at the node level on cuttings, with a maximum of 4.8 newly formed buds per cutting. However, the
insulation of these buds on medium enriched with NAA did not allow the observation of root diffe-
rentiation. Medium with 2.5 mg kinetin·L–1 supported bud bursting and the best development of axillary
buds (71%). Transplanting onto medium with 2 mg ANA·L–1 supported the rooting of 72% of the cut-
tings cultured at the beginning on medium with kinetin, with a maximum of 6.3 roots formed by cutting.
The acclimatization success rate of the regenerated vitroplants was 52.7%. Discussion and conclusion.
By using media with kinetin and NAA, a maximum of 36 rooted R. heudelotii vitroplants were rege-
nerated in 22 weeks from the 50 cuttings cultured. This propagation rate remains weak and, for an effec-
tive clonal propagation of the species, it will have to be improved with a vitroplant complementary
production starting with proliferation of buds obtained on medium with BAP.
Cameroon / Ricinodendron heudelotii / plant propagation / vitroplants /
propagation by cuttings / buds / rooting

Propagation de Ricinodendron heudelotii par bouturage in vitro.

Résumé –– Introduction. R. heudelotii (Euphorbiaceae) est un arbre fruitier des forêts denses humi-
des, exploité par les populations locales. L’espèce est dioïque. La régénération par graines actuellement
utilisée n’est pas aisée et elle entraîne une hétérogénéité génétique des descendants. Jusqu’à présent,
la multiplication végétative horticole a surtout été basée sur l’utilisation de plantules issues des graines.
Le but principal de notre travail a été de développer une méthode de multiplication conforme in vitro
d’arbres adultes de R. heudoletii sélectionnés. Matériel et méthodes. Les boutures de 2 cm (un œil
+ un bourgeon axillaire) ont été prélevées sur une plante adulte de R. heudelotii, puis mises en culture,
après stérilisation, sur un milieu de Murashige et Skoog dilué de moitié. Différentes concentrations de
kinétine ont été ajoutées à ce milieu de base (MB) pour étudier l’effet de cette cytokinine sur le débour-
rement et le développement des bourgeons axillaires. De même, les effets de la benzylaminopurine
(BAP) ajoutée à MB ont été parallèlement étudiés sur la prolifération des bourgeons présents au niveau
des nœuds des boutures. Enfin, l’enracinement des boutures après culture soit sur milieu avec kinétine,
soit sur milieu avec BAP a été testé par repiquage des boutures sur MB enrichi en acide naphtalènea-
–1
* Correspondance et tirés à part cétique (ANA). Résultats. La BAP à 4,5 mg·L a permis la prolifération de 91 % des bourgeons présents
au niveau des nœuds sur boutures avec un maximum de 4,8 bourgeons néoformés par bouture. Cepen-
dant, l’isolement de ces bourgeons sur milieu enrichi en ANA n’a pas permis d’observer la différentiation
de racines. La kinétine à 2,5 mg·L–1 a favorisé le débourrement et le meilleur développement des bour-
Reçu le 22 août 2003 geons axillaires (71 %). Le repiquage sur MB + 2 mg ANA·L–1 a favorisé l’enracinement de 72 % des
Accepté le 7 juin 2004 boutures mises en cultures au départ sur MB + kinétine, avec un maximum de 6,3 racines formées par
bouture. Le taux de réussite de l’acclimatation des vitroplants régénérés a été de 52,7 %. Discussion
et conclusion. En utilisant la kinétine et l’ANA, un maximum de 36 vitroplants enracinés de R. heu-
delotii ont été régénérés en 22 semaines à partir de 50 boutures mises en culture. Ce taux de multi-
Fruits, 2004, vol. 59, p. 351–358 plication reste faible et, pour une multiplication conforme efficace de l’espèce, il devra être amélioré
© 2004 Cirad/EDP Sciences par la production complémentaire de vitroplants à partir de la prolifération des bourgeons obtenus sur
All rights reserved milieu avec BAP.
DOI: 10.1051/fruits:2004033 Cameroun / Ricinodendron heudelotii / multiplication des plantes / vitroplant /
RESUMEN ESPAÑOL, p. 358 bouturage / bourgeons / enracinement

Fruits, vol. 59 (5) 351

 Fotso et al.

1. Introduction induction de bourgeons à partir de ces cals.

S’appuyant sur des résultats encourageants
Ricinodendron heudelotii (Euphorbiaceae) d’Enjalric [14] sur le bouturage in vitro de
est un arbre fruitier répandu dans les zones Hevea brasiliensis (également de la famille
forestières tropicales humides d’Afrique de des Euphorbiaceae), nos travaux ont tenté
l’Ouest et centrale. d’établir les conditions favorables pour un
bouturage in vitro de R. heudelotii afin d’obte-
Au Cameroun, l’espèce est communément nir une propagation clonale rapide de la
appelée « Djansang ». Ses amandes oléagineu- plante pour la mise en place de plantations
ses sont récoltées par les populations locales homogènes de l’espèce.
pour la consommation et la commercialisa-
tion [1, 2]. Elles servent de matière première
potentielle pour les industries agroalimen-
taires tropicales [3]. Son bois est utilisé en 2. Matériel et méthodes
menuiserie et sert également à la construc-
tion des maisons [4]. Cependant, la multipli- 2.1. Préparation du matériel végétal
cation de l’espèce R. heudelotii n’est pas
encore contrôlée en Afrique. Des segments de tige de 2 cm environ por-
tant un seul nœud doté d’un bourgeon axil-
Des essais de production de semences laire ont été prélevés entre septembre et
pour l’extension des plantations en milieu octobre sur les jeunes repousses d’un arbre
paysan réalisés au Cameroun par Mapong- de 8 ans, après fructification dans la région
metsem et al. [5] se sont heurtés à un faible de Nkolbisson (banlieue de Yaoundé, Came-
taux de production des graines (3,3 % de roun). Ces explants ont été lavés à l’eau cou-
succès) qui produisent, par ailleurs, une des- rante et désinfectés par trempage dans une
cendance hétérogène. De plus, bien que la solution de Tween 80 à 1 % pendant 5 min,
plante se multiplie principalement par voie puis dans une solution de Mercryl laurylé à
sexuée, cette multiplication est très limitée 20 % pendant 20 min, enfin dans une solu-
à cause de l’allogamie de l’espèce, de la résis- tion d’hypochlorite de sodium à 3 % pendant
tance de la coque entourant les amandes qui 25 min. Ce dernier trempage a été suivi de
limite la germination de la graine [6] et de trois rinçages à l’eau distillée stérile, de 10 min
l’action de psylles de l’espèce Diclidophle- chacun, sous une hotte à flux laminaire hori-
bia xuani qui détruisent les jeunes plantules zontal, au voisinage d’un bec Bunsen.
après germination [7].
Les tentatives de multiplication et de pro- 2.2. Milieux de culture in vitro
pagation végétatives de l’espèce par les
méthodes horticoles traditionnelles telles que Les tests préliminaires réalisés sur milieu de
greffage [8], bouturage et marcottage [9, 10] Murashige et Skoog complet (MS) [15] ou
se sont heurtées à des difficultés d’enraci- dilué deux, quatre ou huit fois ont montré
nement et de reprise des greffons après que le milieu MS dilué deux fois était le plus
transplantation. En utilisant un système de favorable au développement des boutures
propagation sur différents substrats (sciure, de R. heudelotii. Le choix des phytohormo-
sable et graviers) enrichis en acide indole- nes utilisées et la méthodologie adoptée dans
butyrique, Shiembo et al. [11] ont pu obtenir, ce travail ont été basés sur les travaux de
dans certaines conditions, jusqu’à 80 % de Omokolo et al. [16] sur Invirgia gabonensis.
plantules de R. heudelotii enracinées à par- Ainsi, le milieu de base pour toutes les cul-
tir de boutures feuillées ; l’espèce pourrait tures a été constitué d’un milieu gélosé à
donc être propagée végétativement. Cepen- 0,6 % d’agar contenant la solution minérale
dant, jusqu’à présent, très peu de travaux de Murashige et Skoog diluée deux fois,
ont été consacrés à sa multiplication in vitro. additionnée de 4 % de saccharose, et du com-
Parmi eux, les travaux de Donfagsiteli [12] plexe vitaminique de Morel et Wetmore [17].
et Omokolo [13] ont abouti à la régénération Le pH de tous les milieux a été ajusté à 5,6.
de plantules après induction de cals à partir Tous les milieux ont été stérilisés à l’auto-
de fragments de feuilles et de tige, puis clave à 115 °C pendant 30 min sous une

352 Fruits, vol. 59 (5)

 Propagation de R. heudelotii in vitro

pression de 1,6 kg·cm–2. Toutes les cultures 120 °C pendant 1 h 30 min. Chaque sachet
ont été placées dans une salle à une tempé- a été recouvert d’une cloche de plastique
rature de (26 ± 1) °C, une photopériode de permettant de confiner l’atmosphère et de
16 h d’éclairement, et une intensité lumi- réduire la déshydratation, puis placé en
neuse de 40 µmol·m–2·s–1. chambre de culture maintenue à (26 ± 1) °C,
(72 à 76) % d’humidité relative et une pho-
2.3. Phytohormones testées topériode de 16 h/8 h (40 µmol·m–2·s–1).
L’acclimatation a été réalisée en réduisant
L’influence de la kinétine sur le débourre- progressivement l’humidité ambiante de la
ment et la croissance des bourgeons axillai- plantule par diminution régulière du confi-
res a été étudiée par addition de différentes nement. Les plantules ont été arrosées à l’eau
concentrations de (0 à 3,5) mg kinétine·L–1 stérile pendant 2 semaines, puis à l’eau cou-
au milieu de culture de base. Après10 semai- rante pendant les 10 dernières semaines
nes, le pourcentage des bourgeons débour- d’acclimatation.
rés et développés a été noté pour chacune
des concentrations de kinétine testées. La
croissance des bourgeons a été exprimée par 3. Résultats
l’allongement moyen de la tigelle et le nom-
bre moyen de feuilles nouvellement formées. La méthode de stérilisation des explants uti-
Parallèlement, un milieu de base enrichi de lisée a permis d’obtenir 75 % d’explants
(0 à 6,5) mg benzylaminopurine·L–1 a per- sains, soit environ 350 boutures saines sur
mis d’étudier l’influence de cette cytokinine les 500 mises en culture.
sur la prolifération des bourgeons au niveau
des nœuds de boutures. Après 10 semaines 3.1. Débourrement et croissance
d’expérimentation, le nombre moyen de bour- des bourgeons axillaires : effet
geons proliférés a été noté pour chacune des
de la kinétine
concentrations de BAP testées.
Après croissance sur ces milieux avec Sans ajout de kinétine dans le milieu de base,
kinétine ou avec BAP, les boutures montrant il n’y a eu aucun débourrement (tableau I).
des bourgeons axillaires développés ont été Dans nos conditions expérimentales, la kiné-
isolées et repiquées sur le même milieu de tine a donc été indispensable pour provo-
base alors enrichi en acide naphtalèneacé- quer un débourrement des bourgeons mis
tique (ANA) à différentes concentrations [(0 en culture.
à 3) mg·L–1] pour étudier l’influence de cette Lorsque différentes concentrations de kiné-
auxine sur la rhizogenèse. Après 12 semai- tine ont été ajoutées au milieu de base, les
nes d’expérience, le pourcentage d’explants bourgeons axillaires des boutures ont com-
formant des racines, le nombre moyen de mencé à débourrer après une semaine de
racines par bouture et l’allongement moyen culture (figure 1), puis ils se sont dévelop-
des racines ont été mesurés pour chaque pés pour former une tige feuillée en 9 semai-
concentration d’ANA. nes (figure 2). Les meilleurs taux de débour-
Chacun des milieux ainsi définis a été rement des bourgeons ont été obtenus sur
testé par la mise en culture de 50 boutures milieux avec (2 et 2,5) mg kinétine·L–1
saines. Les résultats ont été traités par ana- (tableau I). Sur ces milieux, les tigelles ont
lyse de variances et les moyennes significa- pu s’allonger jusqu’à 4,8 cm. Le nombre maxi-
tivement différentes séparées par le test de mal de feuilles nouvellement formées a été
Duncan (P ≤ 0,05). obtenu sur milieux avec de (1,5 à 2,5) mg
kinétine·L–1 (tableau I).
2.4. Acclimatation
3.2. Prolifération des bourgeons
Les vitroplants enracinés ont été transférés sur bouture
en sachets de polyéthylène contenant un
mélange de [terre noire + vermiculite] à volume Les bourgeons présents sur les boutures sai-
égal, préalablement stérilisé à l’étuve à nes cultivées directement sur le milieu de

Fruits, vol. 59 (5) 353

 Fotso et al.

Tableau I.
Effet de la kinétine sur le débourrement et la croissance des bourgeons axillaires de
boutures de Ricinodendron heudelotii. Les boutures (un segment de tige avec un
nœud portant un bourgeon axillaire) ont été cultivées pendant 10 semaines sur milieu
de Murashige et Skoog dilué de moitié et additionné de (0 à 3,5) mg kinétine·L–1
(50 explants sains testés par dose de kinétine).

Dose de Bourgeons débourrés Allongement moyenne Nombre moyen de feuilles

kinétine et développés de la tigelle nouvellement
(mg·L–1) (%) (cm) formées par plantule

0 0 0 0
0,5 3 2,2 c 2,1 c
1,0 7 3,3 b 3,0 b
1,5 29 3,0 b 6,8 a
2,0 69 4,8 a 6,2 a
2,5 71 4,6 a 6,8 a
Figure 1. 3,0 22 3,0 b 2,2 c
Bouture de Ricinodendron 3,5 21 1,8 c 2,4 c
heudelotii à bourgeon axillaire
débourré après une semaine Les valeurs de chaque colonne ayant la même lettre ne sont pas statistiquement différentes d’après
de culture sur milieu de le test de Duncan (P ≤ 0,05).
Murashige et Skoog dilué de
moitié et additionné de 2,5 mg
kinétine·L–1.
base sans BAP ou avec seulement 0,5 mg l’isolement des bourgeons proliférés sur bou-
BAP·mL–1 n’ont présenté aucun développe- ture et issu du milieu enrichi en BAP puis
ment (tableau II). En revanche, les bour- repiqués sur milieu enrichi en ANA n’a pas
geons cultivés sur milieu de base enrichi permis d’observer la différentiation de raci-
avec de plus fortes concentrations de BAP nes (figure 5). Le meilleur taux de boutures
ont débourré. Ce débourrement a été suivi ayant différencié les racines et le nombre
du gonflement de la tige au niveau du nœud maximal de racines comptées par boutures
avec apparition de nouvelles ébauches de (6,3) a été obtenu avec un milieu à 2 mg
bourgeons. Ces nouveaux bourgeons se sont ANA·L–1 (tableau III). A cette même concen-
ensuite développés pour évoluer en 10 semai- tration, l’allongement des racines a été maxi-
nes en nouvelles tiges secondaires feuillées, mal et égal à 3,8 cm.
disposées en couronne autour de la tige prin-
cipale (figure 3). Les meilleurs taux de bou-
tures ayant formé de nouvelles tiges secon- 3.4. Acclimatation
daires ont été obtenus sur un milieu contenant
(3,5 et 4,5) mg BAP·L–1 (tableau II). À cette En utilisant de la kinétine à 2,5 mg·L–1 puis
concentration, un nombre maximal de 4,7 de l’ANA à 2 mg·L–1, un nombre maximal
et 4,8 bourgeons par bouture a pu être obtenu. de 36 vitroplants de R. heudelotii sur les
50 boutures mises en culture en début d’expé-
rimentation a pu être régénéré en 22 semai-
Figure 2. 3.3. Induction de la rhizogenèse : nes (10 semaines en présence de kinétine
Tige feuillée issue du effet de l’ANA + 12 semaines en présence d’ANA). Ces
développement d’un bourgeon vitroplants placés en condition d’acclimata-
axillaire débourré de Douze semaines après repiquage sur milieu tion ont repris leur croissance pour 52,7 %
Ricinodendron heudelotii après
avec ANA, des racines se sont différenciées d’entre eux ; 19 plantules sur 36 ont donc
9 semaines de culture sur milieu
de Murashige et Skoog dilué de
à la base de la tige des boutures présentant réussi à être acclimatées après 3 semaines.
moitié et additionné de 2,5 mg un axe feuillé et issues du milieu de base Elles ont été aptes à un transfert en champ
kinétine·L–1. enrichi en kinétine (figure 4). En revanche, après 15 semaines (figure 6).

354 Fruits, vol. 59 (5)

 Propagation de R. heudelotii in vitro

Tableau II.
Effet de la benzyladénine (BAP) sur la prolifération de bourgeons sur boutures de
Ricinodendron heudelotii. Les boutures (un segment de tige avec un nœud portant un
bourgeon axillaire) ont été cultivées pendant 10 semaines sur milieu de Murashige et
Skoog dilué de moitié et additionné de (0 à 6,5) mg BAP·L–1 (50 explants sains testés
par dose de BAP).

BAP Boutures avec prolifération de bourgeons Nombre moyen de bourgeons formés

(mg·L–1) (%) par bouture

0 0 0
0,5 0 0
2,5 51 3,0 b
3,5 84 4,7 a
4,5 91 4,8 a
5,5 42 3,0 b
6,5 36 1,2 c

Les valeurs de chaque colonne ayant la même lettre ne sont pas statistiquement différentes d’après
Figure 3.
le test de Duncan (P ≤ 0,05).
Bourgeon de Ricinodendron
heudelotii montrant une
prolifération au niveau d’un
nœud de bouture après
4. Discussion même, Gulati et Jaiwal [18] avaient obtenu 10 semaines de culture sur
un nombre similaire de bourgeons au milieu de Murashige et Skoog
dilué de moitié et additionné de
Nos expérimentations ont permis d’induire niveau des nœuds des microboutures de 4,5 mg BAP·L–1
.
in vitro le développement de bourgeons Dalbergia sissoo, mais le milieu de base était
axillaires de l’espèce R. heudelotii à partir alors constitué de MS complet. Par ailleurs,
de boutures prélevées sur une plante adulte Yassen et al. [19] avaient obtenu un nombre
et cultivées sur un milieu de Murashige et de bourgeons deux fois plus élevé (9,6 bour-
Skoog dilué de moitié et enrichi en kinétine, geons par explant) à partir de boutures de
puis repiquées sur un milieu avec ANA. Psidium guajava, alors prélevées sur plan-
tules issues de la germination de graines.
La kinétine a favorisé le développement
Dans nos expérimentations, l’obtention
de bourgeons axillaires en tiges feuillées.
de plantules entières a eu lieu après une
L’effet maximal a été obtenu avec 2,5 mg
phase d’enracinement sur milieu de base
kinétine·L–1 qui ont provoqué le débourre-
enrichi en ANA. Seules les boutures mises
ment de 71 % des bourgeons ; ceux-ci ont
en culture au début de l’expérimentation
présenté un allongement maximal de la tigelle
ont alors formé des racines avec un pour-
en 10 semaines.
centage maximal de 72 % et au plus 6,3 raci-
L’adjonction de la BAP au milieu de base nes par bouture. Ces résultats sont à com-
a entraîné la prolifération des bourgeons au parer à ceux obtenus par bouturage horticole
niveau des nœuds des boutures mises en de R. heudelotii (3,3 % de réussite) par
cultures. Le meilleur taux de boutures ayant Mapongmetsem et al. [5]. De même, les tra-
différencié des bourgeons (91 %) a été obtenu vaux de Shiembo [9] puis de Shiembo et al.
avec 4,5 mg BAP·L-1 et, à cette concentra- [10] sur le bouturage horticole d’Irvingia
tion, chaque bouture a présenté un nombre gabonensis et de Gnetum africanum avaient
maximal de 4,8 bourgeons. Ces résultats sont donné des résultats relativement faibles, alors Figure 4.
similaires à ceux obtenus par Enjalric [14] Bouture de Ricinodendron
que, en utilisant la même technique de bou-
heudelotii enracinée,
chez Hevea brasiliensis (Euphorbiaceae) à turage horticole pour R. heudelotii, Shiembo 12 semaines après repiquage
partir de boutures cultivées dans les mêmes et al. [11] avaient obtenu des taux d’enraci- sur un milieu de Murashige et
conditions avec, cependant, ajout dans le nement relativement élevés (80 %). Nos Skoog dilué de moitié et
milieu de (0,5 à 1) g de charbon actif·L–1. De résultats sont comparables aux résultats des additionné de 2 mg ANA·L–1.

Fruits, vol. 59 (5) 355

 Fotso et al.

Tableau III.
Effet de l’acide naphtalèneacétique (ANA) sur l’induction et l’allongement des
racines de boutures de Ricinodendron heudelotii. Après 10 semaines sur milieu de
Murashige et Skoog dilué de moitié et additionné de kinétine, les boutures (un
segment de tige avec un nœud portant un bourgeon axillaire) ont été repiquées sur
milieu additionné de (0 à 3,5) mg ANA·L–1 puis laissées en sous-culture pendant
12 semaines (50 explants sains testés par dose d’ANA).

ANA Vitroplants rhizogènes Nombre de racines Allongement des racines

(mg·L–1) (%) par vitroplant (cm)

0 0 0 0
0,5 18 2,1 d 2,4 b
1,0 26 2,4 d 2,2 b
1,5 58 3,0 c 3,1 a
2,0 72 6,3 a 3,8 a
2,5 40 4,0 b 1,8 c
3,0 17 3,4 b 1,6 c
Figure 5.
Tige feuillée issue du Les valeurs de chaque colonne ayant la même lettre ne sont pas statistiquement différentes d’après
développement d’un bourgeon le test de Duncan (P ≤ 0,05).
de Ricinodendron heudelotii,
observé 12 semaines après
avoir été isolé et repiqué sur un
milieu de Murashige et Skoog études similaires réalisées in vitro chez d’autres
dilué de moitié et additionné de espèces ligneuses telles que Hevea brasi-
2 mg ANA·L–1.
liensis [14], Cola nitida [20–22] et Dacryodes
edulis [23].
L’isolement et le repiquage sur milieu de
base avec ANA des bourgeons proliférés au
niveau des nœuds des boutures n’ont pas
donné lieu à la formation de racines. Des
résultats similaires ont été obtenus par Don-
fagsiteli [12] et Omokolo [13] sur la même
espèce et par Fotso et al. [24] sur Cola acu-
minata, mais, lors de ces travaux, les bour-
geons étaient issus de cals. En revanche,
chez Irvingia gabonensis, Omokolo et al.
[16] ont montré que les bougeons proliférés
au niveau des nœuds des boutures après
isolement et repiquage sur MS dilué quatre
fois et enrichi en 2,5 mg ANA·L–1 différen-
ciaient des racines pour 98 % d’entre eux.
La méthode d’acclimatation utilisée a per-
Figure 6. mis d’obtenir 52,7 % de plantules viables,
Plantule de Ricinodendron soit, en moyenne, 19 plantules sur les 36 régé-
heudelotii issue de vitroculture nérées à partir des 50 boutures saines mises
et acclimatée pendant en cultures. Ces résultats sont similaires à
15 semaines sur un mélange de ceux de Youmbi et Benbadis [25] chez Dacryo-
(terre + vermiculite) à volume des edulis qui ont obtenu avec la même
égal. méthode 50 % de plantules viables.

356 Fruits, vol. 59 (5)

 Propagation de R. heudelotii in vitro

Le schéma global de multiplication in vitro dron heudelotii (Baill). Matière première poten-
de R. heudelotii mis au point au cours de nos tielle pour les industries agroalimentaires
travaux incluant l’utilisation de la kinétine tropicales, J. Food Eng. 32 (1997) 1–10.
pour induire le débourrement et le dévelop- [4] Anigbogu P., Nature’s Grifts: improving trees
pement des bourgeons axillaires en 10 semai- and shrubs around the world. Ricinodendron
nes, puis l’utilisation de l’ANA pour induire heudelotii (Baill) in Nigeria, Agroforestry Today
l’enracinement en 12 semaines et enfin l’accli- (1996) 8–25.
matation des vitroplants dans un mélange [5] Mapongmetsem P.M., Duguma B., Nkongmeneck
[terre noire + vermiculite] respecte globale- B.A., Domestication of Ricinodendron heudelo-
ment le schéma de multiplication in vitro des tii ( Baill) in the humid lowlands of Cameroon,
espèces végétales [23, 25]. Il peut permettre in: Actes 2e Sém. Int. Valorisation du safoutier
dès maintenant un certain taux de multipli- et autres oléagineux non conventionnels,
cation in vitro d’arbres productifs. Cepen- Ngaoundéré, Cameroun, 1998, pp. 71–79.
dant, une expérimentation avec utilisation [6] Fondoun J.M., Tiki T.M., Kengne J., Ricino-
simultanée des deux hormones kinétine et dendron heudelotii (Baill) (Djangsang) Ethno-
ANA pourrait être intéressante à entrepren- botany and importance for forest dwellers in
dre pour gagner 10 semaines dans le proto- Southern Cameroon, in: Actes 2e sém. Int.
cole et vérifier l’existence éventuelle d’inte- Valorisation du safoutier et autres oléagineux
ractions entre les deux hormones sur le non conventionnels, Ngaoundéré Cameroun,
1998, pp. 247–248.
développement de la microbouture.
[7] Messi J., Alene D.C., Tamesse J.L., Une espèce
L’amplification par prolifération sur milieu nouvelle de psylle, Diclidophledia xuani
de base enrichi en BAP pose encore des pro- (Homoptera : Psyllidae), déprédateur du Rici-
blèmes, notamment pour l’enracinement des nodendron heudelotii (Baill), in: Actes 2e sém.
plantules. L’une des approches envisagea- Int. Valorisation du safoutier et autres oléagi-
bles pour remédier à cette difficulté serait neux non conventionnels, Ngaoundéré, Came-
de tester simultanément une combinaison roun, 1998, pp. 80–89.
d’auxine et de cytokinine pour la culture des [8] Nguélé O.S., Essai de greffage de Ricinoden-
souches proliférantes. Cette utilisation pour- dron heudelotii (Baill), mém. DESS, Univ.
rait permettre d’augmenter le taux de régé- Yaoundé I, Cameroun, 2000, 43 p.
nération et, dès lors, la méthode pourrait
[9] Shiembo P.N., Domestication of multipurpose
constituer une nouvelle voie de micropro- tropical plants with particular reference to Irv-
pagation in vitro de R. heudoletii. ingia gabonensis (Baill), Ricinodendron heudelo-
tii (Baill) and Gnetum africanum Welw., thesis,
Univ. Edinburgh, UK, 1994, pp. 103–124.
Remerciements [10] Shiembo P.N., Newton A.C., Leakey R.R.B.,
Les auteurs remercient le Dr. Boudjeko Vegetative propagation of Irvingia gabonen-
Thaddée pour ses suggestions et critiques. sis, a West African fruit tree, For. Ecol. Man-
age. 87 (1996) 185–192.
[11] Shiembo P.N., Newton A.C., Leakey R.R.B.,
Vegetative propagation of Ricinodendron
Références heudelotii, a West African fruit tree, J. Trop.
Forest Sci. 9 (1997) 514–525.
[1] Kapseu C., Tchiengang C., Chemical proper-
[12] Donfagsiteli T.N., Potentialités de régénéra-
ties of Ricinodendron heudelotii (Baill) seed
tion in vitro chez Ricinodendron heudelotii
oil, J. Food Lipids 2 (1995) 87–98.
(Baill) à partir des fragments d’organes, mém.
[2] Mbofung C.M.F., Caractéristiques morpholo- DEA, Univ. Yaoundé I, Cameroun, 2002, 48 p.
giques des amandes et physico-chimiques
de l’huile de Ricinodendron heudelotii (Baill) [13] Omokolo N.D., Preliminary results on the in
du Cameroun, in: 3e Sémin. Int. Valorisation du vitro regeneration of Ricinodendron heudelo-
safoutier et autres oléagineux non conven- tii (Baill), in: Proc. First Prota Int. workshop,
tionnels, Yaoundé, Cameroun, 2002, pp. 288– Nairobi, Kenya, 2002, pp. 325–326.
299. [14] Enjalric F., Étude sur le microbouturage in
[3] Tchiengang C., Kapseu C., Ndouenkeu R., vitro de Hevea brasiliensis Mull Arg., Thèse,
Ngassoum M. B., Amandes des Ricinoden- Univ. Paris-Sud, Orsay, France, 1983, 161 p.

Fruits, vol. 59 (5) 357

 Fotso et al.

[15] Murashige T., Skoog F., A revised medium for [21] Ashiru G.A., Quarcoo T., Vegetative propaga-
rapid growth and bioassay with tobacco tis- tion of kola [Cola nitida (Vent) Schott and End-
sue culture, Physiol. Plantarum 15 (1962) licher], Trop. Agric. 48 (1) (1971) 85–92.
473–497.
[22] Dossa E.L., Bertrand B., Aidam A., Microbou-
[16] Omokolo N.D., Fotso, Oumar, Mbouna D., turage in vitro du Cola nitida (Schott et Endli-
Propagation d’Irvingia gabonensis par micro- cher), Café Cacao Thé 38 (1) (1994) 57–60.
bouturage in vitro, Fruits 59 (1) (2004) 1–8.
[23] Youmbi E., Potentialités de régénération in
[17] Morel G., Wetmore R.H., Fern callus tissue vitro du nœud cotylédonaire chez Dacryodes
culture, Ann. J. Bot. 38 (1951) 141–143. edulis, Fruits 55 (6) (2000) 409–419.
[18] Gulati A., Jaiwal P.K., Micropropagation of [24] Fotso, Omokolo Ndoumou D., Mbouna D.,
Dalbergia sissoo from nodal explants of mature Comparaison de l’aptitude à la régénération
trees, Biol. Plantarum 3 (2) (1996) 169–175. in vitro de deux kolatiers : Cola anomala et
[19] Yassen R.N., Shell R.J., Splittstoesser W.E., Cola acuminata, Cah. Agric. 11 (2002) 355–
In vitro shoot proliferation and propagation of 360.
guava (Psidium guajava L.) from germinated
[25] Youmbi E., Benbadis A., Régénération in vitro
seedlings, Plant Cell Rep. 14 (1995) 525–528. de plants à partir des bourgeons axillaires et
[20] Dublin P., La multiplication végétative et des apex de plantules sexuées de Dacryodes
l’amélioration de Cola nitida, Café Cacao Thé edulis (Don) Lam., Fruits 56 (5) (2001) 333–
(14) (1970) 275–294. 343.

Propagación de Ricinodendron heudelotii por estaquillado in vitro.

Resumen –– Introducción. R. heudelotii (Euphorbiaceae) es un árbol frutal de los bosques
densos húmedos, explotado por las poblaciones locales. Es una especie dioica. La
regeneración por semillas actualmente utilizada no es fácil y provoca heterogeneidad
genética en los descendientes. Hasta ahora, la multiplicación vegetativa hortícola se basaba
fundamentalmente en la utilización de plántulas procedentes de semillas. El objetivo principal
de nuestro trabajo fue desarrollar un método de multiplicación fiel “in vitro” de árboles
adultos de R. heudoletii seleccionados. Material y métodos. Las estacas de 2 cm (un ojo +
una yema axilar) se tomaron de una planta adulta de R. heudelotii y se pusieron en cultivo,
tras esterilización, en un medio Murashige y Skoog diluido a la mitad. Se añadieron diferentes
concentraciones de kinetina a este medio basal (MB) para estudiar el efecto de esta
citoquinina en el desborre y desarrollo de las yemas axilares. Asimismo, se estudiaron
paralelamente los efectos de la bencilaminopurina (BAP) añadida al MB en la proliferación de
las yemas presentes en los nudos de las estacas. Por último, se ensayó, mediante transplante
de las estaquillas en MB enriquecido con ácido naftalenacético (ANA), el enraizamiento de las
estacas tras cultivo bien en un medio con kinetina, bien en un medio con BAP. Resultados.
La BAP a 4,5 mg·L–1 permitió la proliferación del 91% de las yemas presentes en los nudos de
estacas con un máximo de 4,8 yemas neoformadas por estaca. Sin embargo, el aislamiento de
estas yemas en un medio enriquecido con ANA no permitió observar la diferenciación de
raíces. La kinetina a 2,5 mg·L–1 favoreció el desborre y el mejor desarrollo de las yemas
axilares (71%). El repicado en MB + 2 mg ANA·L–1 favoreció el enraizamiento del 72% de las
yemas inicialmente cultivadas en MB + kinetina, con un máximo de 6,3 raíces formadas por
estaca. El porcentaje de éxito en la aclimatación de las vitroplantas regeneradas fue del 52,7%.
Discusión y conclusión. Mediante el uso de kinetina y ANA, se regeneró un máximo de
36 vitroplantas enraizadas de R. heudelotii en 22 semanas a partir de 50 estaquillas puestas en
cultivo. Esta tasa de multiplicación sigue siendo baja y, para lograr una multiplicación fiel y
eficaz de la especie, deberá mejorarse mediante la producción complementaria de
vitroplantas a partir de la proliferación de yemas obtenidas en un medio con BAP.

Camerún / Ricinodendron heudelotii / propagación de plantas / vitroplantas /

esquejado / yema (planta) / enraizamiento

358 Fruits, vol. 59 (5)