Enterobacteries
Enterobacteries
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escherichia salmonella shigella citrobacter Klebsiella Enterobacter serratia Proteus Providencia morganella yersinia
coli Thypi dysenterie Freundii Oxytoca Cloacae marcesens Vulgaris Rettgeri morganii Enterolitica
pestis
Parathypi Sonnei koseri pneumoniae Aerogenes Mirabilis Stuartii
A et C
Flexneri penneri Alcalificiens
mineurs
boydii
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Caratères de différenciation:
- Le matériel enzymatique( TDA, UREASE, TRYPTOPHANASE,
ADH,LDC, ODC)
- La fermentation des sucres ( lactose, saccharose , autres )
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Antigènes H Ag
flagellaires • Thermolabiles
si mobilité • Agglutination floconneuse facilement dissociable
par agitation ( agglutination par les flagelles)
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Exotoxines
Toxines ayant un mode d’action spécifique( enterotoxines, cytotx, neurotx)
Presence de capsule:
protection contre la phagocytose par les macrophages, EX: klebsielle
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1. Prélèvements :
- Selon le site infecté
- Différents types de prélèvements: Urines, sang, LCR,
épanchements, Pus…
- Le prélèvement doit être de bonne qualité , ce qui conditionne
l’exactitude du diagnostic:
- Les conditions de transport et de conservation sont variables
selon le prélèvement
ex: yersinia ( triple emballage pour la protection du
manipulateur, prélèvement)
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D’enrichissement: CC
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Imp. Souissi, Rabat 10100 http://fmp.um5.ac.ma/ +212 666566654 2024-2025
VII. Diagnostic bactériologique
► Tests biochimiques :
- Permettent de différencier entre différentes espèces d’entérobactéries selon le
principe d’élimination
- Détection de la fermentation de différents sucres : glucose, lactose,
saccharose, mannitol
- Détection de certaines enzymes : oxydase, catalase, urease, beta
galactosidase, décarboxylases (LDC, ODC, ADH)
- Nous allons étudier les principaux caractères biochimiques
- Tests d’orientation
- Etude des métabolismes glucidique et protidique
- Puis comment identifier une entérobactérie (galeries)
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1. Tests d’orientation :
Test de l’oxydase
• But : mettre en évidence la cytochrome oxydase: enzyme qui permet le
transfert d’électrons vers une molécule d’oxygène
• Principe: N diméthyl paraphénylène diamine ( incolore)
produit (violet.)
• Technique:
✔ en milieu liquide
✔ sur papier buvard
✔ sur disque
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Test de la catalase
• But : mettre en évidence la catalase :enzyme qui détruit le peroxyde
d’hydrogène( H2 O2) et libère l’oxygène gazeux qui se traduit par
l’apparition de bulle.
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Mode respiratoire
Cet ensemencement est effectué à l’aide d’une pipette pasteur de bas en haut,
en spirale, le tube étant maintenu verticalement, il est ensuite refroidis.
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Citrate - Citrate +
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Préparation de l’inoculum
1 seule colonie
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Tests
négatifs
Tests
positifs
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Tests
positifs
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NR 2024-2025
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lactose + + + + V V - - - +
VP - + + +- - - - - - -
TDA - - - - - - + + + -
H2S - - - - +/- - +/- - - +/-
GAZ + + - + V +
mobilité + - + + + - + + + +
Urée - + - - - + + - -
indole + -/+ - - - +/- +/- + + +/-
citrate - + + + +/- - V + - +
colistine s s s R s s R R R s
LDC + +/- + +/- - - - -
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► Sérotypage :
L’identification biochimique doit être complétée pour certains genres:
Salmonella , Shigella , E.coli par le Sérotypage
Agglutination:
But :
Différencier les souches de microorganismes en fonction de leur
composition antigénique (sérotypes ou sérovars) .
Principe:
Les antigènes solubles sont libérés au préalable par chauffage à 100° C
pendant 15 min ( spécialement chez salmonella et shigella pour démasquer
l’Ag O situé sous la capsule) qu’ on met en contact avec les anticorps
spécifiques.
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► Recherche de toxines :
- Techniques immunoenzymatiques:
- Techniques immunochromatographiques:
- Biologie moléculaire: ( EHEC): PCR
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6. Antibiogramme :
But:
- Détermination de la sensibilité d’une souche à un antibiotique
donné
- Surveillance épidémiologique
- Aide à l’identification ( Serratia)
Principe:
Permet de mesurer la capacité d’un ATB à inhiber la croissance
bactérienne.
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6. Antibiogramme :
2 méthodes :
► Antibiogramme standard: Méthode de diffusion en milieu
solide
- Le plus utilisé dans les laboratoires de diagnostic.
- Lecture des diamètres des zones d’inhibitions ( en fonctions des D critiques
figurant dans des tableaux d’interprétation fournis par les fabricants des
disque/ CA-SFM )
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6. Antibiogramme :
2 méthodes :
► Techniques en milieu liquide:
Permettent d’étudier les antibiotiques à l’aide de deux
concentrations critiques (c, C) et ainsi de catégoriser les
bactéries en S, I ou R vis-à-vis des divers ATB examinées.
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► Le E.test :
- Permet de déterminer la CMI grâce à l'utilisation de bandelettes imprégnées
d'un gradient exponentiel continu de l'antibiotique à tester. Ce gradient
couvre une zone qui, en fonction des molécules, va de 0,016 à 256 mg/L ou
de 0,002 à 32 mg/L.
- Le E test associe les caractéristiques des méthodes de diffusion et de dilution
en milieu solide.
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- Famille d’enterobactériacae
- Genre : Escherichia
- Espèce : Escherichia coli
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Imp. Souissi, Rabat 10100 http://fmp.um5.ac.ma/ +212 666566654
Pathovars d’E.coli
E.coli ETEC EPEC EHEC EIEC
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Imp. Souissi, Rabat 10100 http://fmp.um5.ac.ma/ +212 666566654
Sensibilité aux antibiotiques
- Escherichia coli est généralement sensible aux antibiotiques.
- Parmi les bêtalactamines, sont actives les pénicillines du groupe
A (aminopénicillines), les carboxypénicillines, les
ureidopenicillines, les céphalosporines, les carbapénems et
les monobactams.
- Les aminosides et les polypeptides sont également actifs de
même que les quinolones de première génération, les
fluoroquinolones et le cotrimoxazole.
- Cette sensibilité peut être modifiée par la production d'enzymes
hydrolysant les bêtalactamines (pénicillinase,
céphalosporinase) ou les aminosides ou par une mutation
affectant les porines
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