Année universitaire 2024-2025
CEC de Biologie Clinique de Monastir
Module d’Immuno-Hématologie : Fiche Technique
Résolution de difficulté de groupage sanguin ABO et Rhésus
Rédigé par :
Dr Ghachem Ikbel
AHU en Hématologie Biologique
Laboratoire de biologie médicale, Hôpital MTM Nabeul
Public cible : Résidents de Biologie Clinique
Domaines d’application :
Tous laboratoires d’analyse médicale
OBJECTIF
Ce modèle a pour objectifs d’interpréter et résoudre les difficultés de groupage ABO et rhésus
Définitions
Une difficulté de groupage ABO est une réaction non attendue touchant les deux épreuves globulaire ou
sérique par défaut ou par excès placé dans l’un des deux situations suivantes :
- Discordance entre l’épreuve globulaire et sérique avec des témoins négatifs
- Discordance entre les deux épreuves avec un ou plusieurs témoins l’un des témoins positifs
Une difficulté RH peut être liée à :
- Un témoin albumineux positif
- Discordance entre deux réactifs
Précautions
Devant toute anomalie il faut :
Eliminer les erreurs pré-analytiques (qualité du prélèvement, des réactifs et du matériel : pipetage,
contamination…)
Faire les 3 témoins
Prendre connaissance du contexte clinique : âge, ATCD transfusionnels ou d’allogreffe et du contexte
pathologique
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Difficulté de
groupage ABO
Discordance entre
les 2 épreuves Un ou plusieurs
Double population
témoins positifs
Témoins négatifs
1. Discordance entre l’épreuve globulaire et sérique avec des témoins négatifs
1.1. Variants
Epreuve globulaire Epreuve sérique Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA GRB
- - - - +++ -
Cause de la concordance Epreuves complémentaires : Conclusions
A faible Epreuve de fixation-élution A faible
Recherche de substance ABH
dans la salive
Etude génétique
Exp : Am, Ay, Ael, Bel, By
Affaiblissement antigénique Recherche de l’antigène A A
au cours d’une leucémie
Greffe de cellules souches Renseignement clinique A
incompatibles Donneur O et (A greffé par du O)
Receveur : A
1.2. Hémolysine anti-A, anti-B à titre élevé
Epreuve globulaire Epreuve sérique Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA GRB
-
- - - (+) +++
Cause de la concordance Epreuves complémentaires : Conclusions
-Chez un sujet de groupe O : Décomplémenter le sérum à 56° O
titre anti-A=anti-B et refaire l’épreuve sérique
-(+) : hémolysine anti-A
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1.3. Titre faible d’anticorps
Epreuve globulaire Epreuve sérique Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA GRB
+++ +++ - - -
Cause de la concordance Epreuves complémentaires : Conclusions
Nouveau-né < 6 mois A
Refaire le groupage à 6 mois (Seul cas ou une
défaillance de l’épreuve sérique peut être acceptée
Déficit en immunoglobine -Hématies traitées par les enzymes protéolytiques
-technique en tube (1 Volume GR/2 V sérum) ou
carte filtration
- Electrophorèse et dosages des immunoglobulines
Allogreffe -Renseignements cliniques
1.4. Présence d’un anti-A1
Epreuve globulaire Epreuve sérique Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA GRB
+ +++ +++ ++ - -
CAT :
-Recontrôler avec un anti-A correct (un bon réactif A reconnait les GR A1 et A2 avec une intensité +++)
-Vérifier la spécificité de l’anti-A1 (faire le témoin allo)
-Si même résultat : penser à un A2B avec un anti-A1
Cause de la concordance Epreuves complémentaires : Conclusions
Présence d’un anti-A1 -Utiliser des GR A1 et A2 ?
-Tester les hématies avec un anti-H
et anti-A1 pour faire la différence
Anti-A1 Anti-H
GRA1 +++ -
GRA2 - +++
Epreuve globulaire Epreuve sérique Anti-A1 Anti-H Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA1 GRA2 GRB
+ +++ +++ ++ - - - ++ -
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Cause de la concordance Epreuves complémentaires : Conclusions
Présence d’un anti-A1 -Utiliser des GR A1 et A2 A2B avec anti-A1
-Tester les hématies avec un anti-H
et anti-A1 pour faire la différence
-La détermination des groupes A1 et A2 n’a aucun interert en transfusion.
-L’intérêt majeur tient au risque d’erreur de groupage :
Faible réactivité A2 chez certains A2B
A la présence d’une agglutination irrégulière anti-A1 chez 2% des groupe A2 et 25% des sujets A2B
-Certains A faible peut produire un anti-A1 : exp A3
2. Double population
Epreuve globulaire Epreuve sérique Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA GRB
++ - ++ - +++ -
Cause de la Epreuves complémentaires Conclusions
concordance
Double population - Renseignements cliniques - Transfusion non iso groupe
(malade de groupe A transfusé par
Agglutination -Attention au prélèvement à partir
du O)
partielle avec les du sang du cordon : Laver au - Sang du cordon
- Chimère
sérums tests préalable les globules rouges 6 fois
en milieu salin
- Epreuve de fixation –élution - Groupe A faible : A3, A end, Ax
- Recherche de substance ABH
dans la salive
- Etude génétique
3. Discordance entre les deux épreuves avec l’un des témoins positifs
3.1. Témoin auto positif
Le témoin auto consiste à mélanger les GR de patient avec son sérum. Il valide l’es deux épreuves
globulaire et sérique. Sa positivité témoigne de la présence d’un auto-anticorps
Epreuve globulaire Epreuve sérique Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA GRB Témoin auto : +++
Témoin Allo : +++
+++ +++ +++ +++ +++
Témoin AB : +++
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Cause de la Epreuves complémentaires Conclusions
concordance
Témoin auto+ Epreuve globulaire :
-Lavage des GR avec de l’eau physiologique à 37°
Auto anticorps actif - Si les lavages restent insuffisants, on pratiquera une élution
à basse T° à 40 °C pendant 10 mn
-refaire l’épreuve globulaire en présence d’un témoin AB
Epreuve sérique :
-Auto-anticorps du sérum sera adsorbé sur des GR de groupe
O à +4°
-refaire l’épreuve sérique avec le sérum adsorbé en présence
d’un témoin allo
Epreuve globulaire Epreuve sérique Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA GRB Témoin auto : Rouleaux
Témoin Allo : Rouleaux
+++ Rouleaux +++ Rouleaux +++
Témoin AB : Rouleaux
Cause de la Epreuves complémentaires Conclusions
concordance
Rouleaux : fausse Epreuve globulaire :
agglutination -Lavage des GR avec de l’eau physiologique A
Macroglobulinémie Epreuve sérique :
Myélome -Diluer le sérum au ½ ou 1/3
Hyperfibrinémie
3.2. Témoin allo- positif
-Le témoin allo consiste à mélanger des GR O avec le sérum du patient.
- Il valide l’épreuve sérique.
-Sa positivité témoigne de la présence d’un allo-anticoprs actif à basse T° autre que l’anticorps A et B
et qui sont spontanément hémagglutinants :
- Anti P1
- Anti A1 des sujets A2 et A faible ou A2B
- Anti Lewis
- Anti M, Anti N
Epreuve globulaire Epreuve sérique Témoins
Anti A Anti B Anti AB GRA GRB Témoin auto : -
+++ - +++ ++ +++ Témoin Allo : ++
Témoin AB : -
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Cause de la Epreuves complémentaires Conclusions
concordance
Présence d’un autre -Identifier l’anticorps naturel irrégulier par par un panel
anticorps actif à érythrocytaire en salin A
basse T° autre que -Refaire l’épreuve sérique avec des GR ne possédant pas
l'anti’A et l’anti-B l’antigène correspondant à l’anticorps
3.3. Témoin AB positif
-Le témoin AB consiste à mélanger un sérum AB avec les GR de patient.
-Il valide l’épreuve globulaire.
-Sa positivité témoigne de la présence de polyagglutinabilité : phénomène immunologique secondaire à
un antigène démasqué ou anormalement présent à la surface des globules rouges et reconnu par un
anticorps spécifique présent dans la plupart des sérums humains : anti T, anti Tn
-Le témoin AB n’est plus pratiqué car tous les réactifs sont monoclonaux.
Difficulté RH
Discordance
Témoin positif
entre 2 réactifs
1. Témoin positif :
- Phénomène de rouleaux présents dans le sérum du patient : lavage des GR et les mettre dans
du sérum AB normal et refaire le groupage
- Lot d’albumine ayant servi à la préparation du réactif anti-D défectueux
Utiliser un réactif actif en milieu salin
Eluer les anticorps par la chaleur et refaire le groupage
2. Discordance entre 2 réactifs :
Rh serebio RH Biomaghreb Témoins conclusions
+++ - - ?
Cause de la Epreuves complémentaires et CAT transfusionnelle Conclusions
concordance
Rechercher D faible par TCI :
Différence de clones -Discordance persistante considérer comme négatif pour le D faible
et de sensibilité des receveur et positif pour le donneur génotypage
réactifs
Refaire le RH par TCI : positif RH positif
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Hypothèses devant une difficulté de groupage ABO/Rhésus
3 Témoins négatifs Témoin auto- Témoin allo- Témoin Discordance
positif positif albumineux entre deux
positif réactifs RH
Hypothèses -Nouveau-né -Agglutinines Présence d’un Rouleaux Variants D
Agammaglobulinémie froides anticorps
-A faible -Rouleaux naturel
-B faible irrégulier autre
-Allogreffe de MO que l’anti-A et
incompatible l’anti-B
-Hémolysine anti-A ,
anti-B
-Présence d’un anti-
A1
-leucémie
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