Centre Universitaire Abdelhafid Boussouf – Mila
Institut des Sciences de la Nature et de la Vie
Département de Biotechnologie
INTRODUCTION AUX BIOTECHNOLOGIES
TD 6 : le clonage moléculaire
1- Définition
Une technique de biologie moléculaire qui consiste à isoler un fragment d'ADN et
à le multiplier à l'identique en l'insérant dans une molécule d'ADN porteuse
appelée vecteur permettant son amplification.
2- Principe de la technique
L'opération consiste à introduire un fragment d'ADN d'intérêt dans un organisme
vivant unicellulaire pour reproduire à l'identique un très grand nombre de copies de
ce fragment d'ADN.
3- Les éléments biologiques utilisés dans la technique de clonage moléculaire
Figure: Schéma récapitulatif des procédures et des éléments biologiques utilisés dans
la technique de clonage moléculaire.
4- Procédure de la technique
Le procédé de clonage de gènes s’appuie sur quatre étapes biochimiques et
biologiques distinctes. Ces étapes s'appuient sur l'utilisation d'outils moléculaires,
des protéines enzymes qui permettent de couper, copier et coller un fragment
d'ADN dans un autre.
Figure : Etapes de la technique de clonage moléculaire.
- L'extraction de l'ADN est une technique permettant d'isoler l'acide
désoxyribonucléique (ADN) des organismes.
- Purification = Technique utilisée pour séparer et purifier une molécule X des
autres molécules.
On distingue deux types de clonage moléculaire :
1. le clonage partiel ne portant que sur un fragment de matériel génétique (ADN)
2. le clonage d'un gène entier.