Activité 4 : Extraire l’ ADN des cellules de chou-fleur ou de banane
Réaliser un protocole expérimental et son compte rendu.
On dispose du matériel suivant :
Au bureau : sel, liquide vaisselle, (mixeur), chou-fleur ou banane, vert de méthyle (colorant de l’ADN)
Par paillasse :
1 mortier avec son pilon
-deux béchers ou pots de yaourts
-2 tubes à essais :1 vide ; 1 contenant 5 cm d'alcool
-du papier absorbant.
- un filtre à café
-eau du robinet
Protocole Critères de réussite degré
Première étape (extraire l’ADN des noyaux des cellules)
Protocole exécuté
1- Prélever un morceau de banane ou de chou-fleur de la taille d’une grosse soigneusement
noix.
Travail dans le calme. Pas de
2- Le broyer dans le mortier à l’aide du pilon. Lorsqu’il est broyé, rajouter une déplacements inutiles :
bonne pincée de sel (2g environ) et finir de broyer. Ajouter un peu d’eau à
l’aide du tube à essai vide, environ 10 cm d’eau. Mélanger pour homogénéiser
3- Ajouter quelques gouttes de produit à vaisselle. Ne communique qu’avec son
Remarque : le liquide vaisselle contient une substance qui détruit toutes les membranes binôme :
des structures intra-cellulaires et notamment l’enveloppe du noyau.
éthanol versé contre la paroi du
4- Mettre le filtre dans l’entonnoir. Puis l’entonnoir sur un bécher. Enfin, filtrer le tube
broyat obtenu.
Obtention d’une pelote
Deuxième étape : de filaments blancs
5- Un liquide visqueux s'écoule. Verser environ 3 cm de ce liquide dans le tube à
essai vide, doucement et le long de la paroi du tube. Méduse bien visible dans le
tube, et colorée
6- Ajouter doucement une hauteur égale d'alcool présente dans le tube à essai
plein. Appeler le professeur avant de réaliser cette étape.
Paillasse propre :
Matériel rincé et rangé :
Résultat : Une substance blanche se forme dans l'alcool au contact des 2 liquides :
c’est l'ADN qui précipite pour former ce que les biochimistes appellent la « méduse ».
7- Ajouter une goutte de vert de méthyle et agitez de manière circulaire,
DELICATEMENT.
Résultat : les filaments sont colorés en vert et bien visibles.
Rédaction d’un compte rendu avec problématique apparente, les différentes étapes du protocole commentées et
illustrées avec des photos. Résultat visible avant et après coloration. Conclusion de la manipulation
