‫اﻟﺠﻤﻬﻮرﻳ ـ ـﺔ اﻟﺠﺰاﺋﺮﻳـ ـﺔ اﻟﺪﻳﻤﻘﺮاﻃﻴـ ـﺔ اﻟﺸﻌﺒﻴ ـ ـﺔ‬

REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

‫وزارة اﻟﺼﺤـ ـﺔ‬
MINISTERE DE LA SANTE

‫اﻟﻮﻛﺎﻟ ـﺔ اﻟﻮﻃـﻨﻴـ ـﺔ ﻟﻠﺪم‬

Agence Nationale du Sang

EDITION
2022
 LISTE DE LA COMMISSION D’ACTUALISATION DU PROCESSUS DON
DU SANG

- Pr TAOULI Katia / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.

- Pr MENDI Khalida / Centre de Transfusion Sanguine CHU Bab El Oued Alger.
- Dr CHAIB Mohamed / Centre de Transfusion Sanguine CHU Blida.
- Dr ZEGHLACHE Lynda / Agence Nationale du Sang Alger.
- Dr BOUTAZIR Feriel / Agence Nationale du Sang Alger.
- Dr HAMMADI Meriem / Agence Nationale du Sang Alger.

LISTE DE LA COMMISSION DE REDACTION DES PROCEDURES RELATIVES

AU PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
A PARTIR DU SANG PERIPHERIQUE

- Dr BENKHENICHE Nassima / Agence Nationale du Sang Alger.

- Dr KHOBZI Farid / Agence Nationale du Sang Alger.
- Dr CHERADI Asma / Agence Nationale du Sang Alger.
- Dr HAMMADI Meriem / Agence Nationale du Sang Alger.
- Dr MESKINE Samira / Agence Nationale du Sang Alger.
- Melle YAHOU Rifel / Agence Nationale du Sang Alger.
- Melle BATEL Zineb / Agence Nationale du Sang Alger.
 LISTE DE LA COMMISSION DE VALIDATION DES PROCEDURES
OPERATOIRES NORMALISEES

- Pr ALLAL TAOULI Katia / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.

- Pr BOUZEGHOUB Salima / Laboratoire National de Référence VIH Institut
Pasteur d’Algérie.
- Pr BROUK Hacen / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr CHEKKAL Mohamed / Centre de Transfusion Sanguine EHU Oran.
- Pr MENDI Khalida / Centre de Transfusion Sanguine CHU Bab El Oued.
- Pr MOHAMMEDI Dhakya / Institut Pasteur d’Algérie.
- Pr MOUEDEN Mohamed Amine / Centre de Transfusion Sanguine/ CHU Oran.
- Pr RETIMA Abdelhak / Centre de Transfusion Sanguine/ CHU Annaba.
- Pr ZOUAI Karima / Centre de Transfusion Sanguine EPH Rouiba.
- Dr ADDA Fatima / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.
- Dr ALIOUA Meriem / Agence Nationale du Sang.
- Dr ZEGHLACHE Lynda / Agence Nationale du Sang.

LISTE DE LA COMMISSION DE VALIDATION DES PROCEDURES RELATIVES

AU PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES A PARTIR DU SANG
PERIPHERIQUE

- Pr ALLAL TAOULI Katia / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.

- Pr BROUK Hacen / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr BRAHIMI Mohamed/ Service d’hématologie EHU Oran.
- Pr MOUEDEN Mohamed Amine / Centre de Transfusion Sanguine CHU Oran.
- Dr FELLA Lilia / Centre de Transfusion Sanguine EPH Kouba.
- Dr ZEGHLACHE Lynda / Agence Nationale du Sang.
 SOMMAIRE
PROCESSUS DON DU SANG

PRO n°01 Prise en charge d’un candidat au don du sang 07

PRO n°02 Prélèvement de sang total 13
PRO n°03 Organisation de la collecte mobile 19
PRO n°04 Prélèvement par aphérèse 25
PRO n°05 Don de sang autologue programmé 29
PRO n°06 Prélèvement des cellules souches autologues du sang périphérique 35
PRO n°07 Prélèvement des cellules souches allogeniques du sang périphérique 43
PRO n°08 Préparation, cryoconservation et décongélation des cellules souches_
du sang périphérique 51
MOP n°01 Accueil du candidat au don de sang 61
MOP n°02 Sélection médicale du candidat au don de sang 63
MOP n°03 La phlébotomie 67
MOP n°04 Lien don donneur / règles d’étiquetage 73
MOP n°05 Prise en charge des incidents liés au don de sang 77
MOP n°06 Vérification de la trousse à pharmacie 83
MOP n°07 Prélèvement par aphérèse 87

ANNEXE
SUPPORTS D’INFORMATION
FICHES
Questionnaire médical type 95
Questionnaire médical type en arabe 99
Fiche donneur de sang 101
Fiche de prélèvement de sang total 103
Fiche de prélèvement par aphérèse. 104
Fiche technique hygiène du prélèvement 105
Demande de transfusion autologue programmée 106
Calendrier de prélèvement de la transfusion autologue programmée 107
Fiche de validation du lieu de collecte. 108
Fiche de rapport de la collecte mobile 109
Fiche de vérification de la trousse à pharmacie 110
Fiche de liaison 111
Fiche d’anomalie 112
Fiche de poste 113
Fiche de vie des équipements 114
Fiche de transport de PSL 115

REGISTRES
Registre des candidats au don du sang 116
Registre des donneurs de sang total 117
Registre des donneurs de sang par aphérèse 118
Registre des candidats au don ajournés 119
Registre de prélèvement de sang 120
Registre des donneurs de cellules souches 121

CARTE DE DONNEUR REGULIER 123

MODELE D’ETIQUETTES D’IDENTIFICATION DU DON DE SANG 125

FLYER D’AUTOEXCLUSION 126

DOCUMENT D’INFORMATION
Document pré don 127
Document post don 129
ANNEXE DES MODIFICATIONS 131
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/PRO01
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date: 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission de rédaction Commission de La Directrice Générale de

et d’actualisation validation l’Agence Nationale du Sang
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Décrire la chronologie de toutes les actions permettant la prise en charge d’un candidat au
don de sang en site fixe et mobile.
2. Domaine d’application
- Collecte fixe et mobile.
3. Documents de référence
- Textes Réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles ANS.
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020.
- Décision n°250 du 31/08/2021 relative à la collation offerte aux donneurs de sang.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- Automate d’aphérèse : Séparateur de cellules de sang total.
- DASRI : Déchets des Activités des Services à Risque Infectieux.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- Poches ACD-A : Poches d’Anticoagulant à l’Acide Citrate Dextrose additionnée
d’Adénine.
5. Personnel concerné
- Personnel d’accueil formé et qualifié.
- Secrétaire médical (e).
- Médecin du don.
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
- Personnel chargé de la collation formé en transfusion sanguine.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Questionnaire médical type (ANS/COL/FIC01/V02/22).
- Questionnaire médical type en arabe (ANS/COL/FIC08/V01/22).
- Flyer d’autoexclusion (ANS/COL/DAE01/V01/22).
- Fiche de donneur (ANS/COL/FIC02/V02/22).
- Fiche de prélèvement de sang total (ANS/COL/FIC03/V02/22).
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Fiche de vérification de la trousse à pharmacie (ANS/COL/FIC07/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).

- Registre des candidats au don du sang (ANS/COL/REG01/V02/22).
- Registre des donneurs de sang total (ANS/COL/REG02/V02/22).
- Registre des donneurs de sang par aphérèse (ANS/COL/REG03/V02/22).
- Registre des candidats au don ajournés (ANS/COL/REG04/V02/22).
- Registre de prélèvement (ANS/COL/REG05/V02/22).
- Documents pré-don (ANS/COL/DRD01/V02/22).
- Document post don (ANS/COL/DPD01/V02/22).
- Etiquettes d’identification du don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
- Carte de donneur régulier (ANS/COL/CDR01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussé.
 Flux du candidat au Don

Entrée Sortie Collation - Repos

Accueil Inapte Prélèvement

Apte
Attente
Entretien médical

Secrétariat

6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
 Zone de consultation
- Mobilier pour le médecin et le donneur.
- Table de consultation.
- Tensiomètre.
- Stéthoscope.
- Lecteur d’hémoglobine.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Pèse-personne.
- Toise.
 Zone d’analyses biologiques ou laboratoire de proximité
- Automate de FNS
- Automate ou semi automate d’hémostase
- Automate ou semi automate de biochimie
 Zone de prélèvement
- Fauteuils de prélèvement.
- Source d’oxygène.
- Chariots.
- Agitateurs limitateurs de poches.
- Automate d’aphérèse.
- Clampeuses soudeuses électriques.
- Portoirs pour tubes échantillons.
- Pince à clamper.
- Ciseaux.
- Conteneurs pour poches de sang.
- Potences.
- Plateaux à servir.
- Paravents.
 Zone de collation
- Mobilier de collation (tables, chaises).
- Cuisinière, réfrigérateur.
- Ustensile nécessaire.
- Les boissons et les denrées alimentaires nécessaires à la collation doivent être
stockées et conservées dans un dispositif de stockage spécifique et adéquat.
 Zone de gestion des incidents liés au don
- Lits de repos.
- Potence.
- Source d’oxygène
 Equipements spécifique pour la collecte mobile
En site fixe
- Lits de prélèvements.
En véhicule de collecte
- Véhicule de collecte de sang, mobile.
- Fauteuils pliables de prélèvement

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3.2 Consommables
- Abaisse-langue.
- Sparadrap.
- Conteneurs pour déchets.
- Sachets spécifiques aux DASRI et produits ménagers.
- Trousse à pharmacie voir (ANS/COL/MOP06/V02/22 : Vérification de la trousse à
pharmacie).
- Poches à sang.
- Kits d’aphérèse
- Poches d’anticoagulant ACD-A
- Sérum physiologique
- Tubes échantillons
- Compresses
- Désinfectant (Bétadine alcoolisée ou alcool à 70°C)
- Eau de javel
- Savon liquide
- Solution hydro-alcoolique
- Gants
- Garrots
- Bandes à gaze
- Masques à oxygène/lunette
6.4 Description
6.4.1 Accueil du candidat au don Voir
(ANS/COL/MOP01/V02/22 : Accueil du candidat au don de sang).
6.4.2 La sélection médicale Voir
(ANS/COL/MOP02/V02/22 : Sélection médicale du candidat au don de sang)
6.4.3 Prélèvement Voir
(ANS/COL/FICT01/V01/22 : Fiche technique : Hygiène de prélèvement).
(ANS/COL/MOP03/V02/22 : Phlébotomie).
(ANS/COL/MOP04/V02/22 : Lien Don /Donneur /Règles d’étiquetage).
(ANS/COL/MOP05/V02/22 : Prise en charge des incidents liés au don).
6.4.4 Repos et collation
- Présenter une collation au donneur.
- Bien surveiller le donneur.
Si incidents Voir (ANS/COL/MOP05/V02/22 : Prise en charge des incidents liés
au don).
- Remercier le donneur et l’inviter pour un prochain don.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.5 Carte de donneur régulier

- Une carte de donneur régulier est délivrée au donneur par la structure de transfusion
sanguine lors d’un deuxième don après validation des qualifications immuno-
hématologiques.
- La carte est complétée à chaque don.
6.5 LOGIGRAMME
Qui Quoi Comment

Personnel d’accueil Accueil du

ANS/COL/MOP01/V02/22 :
formé et qualifié candidat au don Accueil du candidat au don de
sang
Secrétaire médical(e)

ANS/COL/MOP02/V02/22 :
Entretien Sélection médicale du
Médecin du Don médical
candidat au don de sang

Apte Inapte

ANS/COL/FICT01/V01/22 :
Fiche technique : Hygiène de
IDE et/ou LSP formés et prélèvement.
qualifiés en transfusion Prélèvement ANS/COL/MOP03/V02/22 :
sanguine Phlébotomie

ANS/COL/MOP04/V02/22 :
Lien Don/Donneur/ règles
d’étiquetage

ANS/COL/MOP05/V02/22 :
Prise en charge des incidents
Personnel chargé de la Repos et liés au don
collation formé. collation

Sortie

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO2/
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
PRELEVEMENT DE SANG TOTAL
DE SANG
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/PRO02
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date:04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO2/
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
PRELEVEMENT DE SANG TOTAL
V02/22
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Définir les règles à appliquer pour tout prélèvement de sang total.
- Le respect de cette procédure a pour but d'éviter toute faute technique et d`appliquer les
bonnes pratiques de prélèvement.
2. Domaine d’application
- Collecte fixe et mobile.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes Pratiques transfusionnelles ANS.
- Manuel du médecin du Don de sang ANS/2020.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets des Activités des Services à Risque Infectieux.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
5. Personnel concerné
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de prélèvement de sang total (ANS/COL/FIC03/V02/22)
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de prélèvement (ANS/COL/REG05/V02/22).
- Etiquettes d’identification du don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée, aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau et
d’oxygène.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussée.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO2/
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
PRELEVEMENT DE SANG TOTAL
DE SANG
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Fauteuils de prélèvement.
- Limitateur agitateur de poches (automate de prélèvement).
- Clampeuse soudeuse électrique.
- Chariot ou support de manipulation.
- Portoir à tubes.
- Ciseaux, stripper, anneaux, pinces.
- Bacs pour transport des poches de sang et tubes de prélèvement de sang
- Conteneurs validés pour stockage et transport des poches de sang et tubes de
prélèvement.
6.3.2 Consommables
- Poches à sang
- Tubes échantillons
- Compresses
- Sparadrap ordinaire et micropore.
- Pansement compressif.
- Gants à usage unique.
- Savon liquide
- Solution hydro alcoolique
- Garrots.
- Conteneurs à déchets.
- Sachets spécifiques aux DASRI et DAOM.
- Désinfectants (Bétadine alcoolisée ou alcool à 70°C).
- Trousse à pharmacie voir (ANS/COL/MOP06/V02/22 : Vérification de la trousse à
pharmacie).
[Link] Poches à sang
- Les poches à sang sont à la disposition des équipes de prélèvement.
- Les délais d'utilisation des poches à sang après ouverture des cartons sont
disponibles sur l'étiquette de fond de poches ou sur l'emballage unitaire.
- La poche à sang ne doit être sortie de son emballage qu’au moment du
prélèvement.
- Respecter les conditions de stockage et de conservation des poches à sang
préconisées par le fournisseur.
[Link] Antiseptiques
- Indispensables pour assurer l'asepsie du prélèvement.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO2/
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
PRELEVEMENT DE SANG TOTAL
V02/22
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- A la première ouverture, noter les dates d’ouverture, le numéro du lot et la date

limite d’utilisation des flacons d’antiseptiques.
- Ne jamais oublier de refermer le flacon en fin d’utilisation.
6.4 Description
6.4.1 Installation et vérification du matériel
- Le matériel indispensable doit être disponible (poches, tubes...).
- Tout le matériel nécessaire est propre et en état de fonctionnement (fauteuils,
agitateurs, soudeuses...).
6.4.2 Lavage des mains et asepsie
Voir (ANS/COL/FICT01/V01/22 : Fiche technique : Hygiène de prélèvement)
6.4.3 Prélèvement du donneur
- Installer le donneur.
- Vérifier sur la fiche de prélèvement de sang total :
 L’identité du donneur (en lui demandant de décliner son nom et prénom et sa date
de naissance).
 La concordance du numéro de don sur les étiquettes et celui de la fiche de
prélèvement.
 Les consignes médicales (volume à prélever, tubes d'examen...).
- Vérifier le capital veineux du donneur.
- Préparer la poche, vérifier la date de péremption, son intégrité et l’aspect
macroscopique de l’anticoagulant, programmer l’agitateur limitateur.
- Apposer les étiquettes sur les poches et les 02 tubes
Voir (ANS/COL/MOP04/V02/22 : Lien Don /Donneur / Règles d’étiquetage).
6.4.4 Phlébotomie
Voir (ANS/COL/FICT01/V01/22 : Fiche technique : Hygiène de prélèvement)
(ANS/COL/MOP03/V02/22 : Phlébotomie)
6.4.5 Surveillance du donneur
- Le donneur doit être surveillé pendant toute la durée du prélèvement ; en cas
d’incidents voir (ANS/COL/MOP05/V02/22 : Prise en charge des incidents liés au
don).
- Au cours du prélèvement, l’agitation de la poche, le débit et la durée maximale
doivent être surveillés.
6.4.6 Fin du prélèvement
Quand le volume programmé est atteint :
- Enlever le garrot.
- Désolidariser la poche à l’aide d’une soudeuse.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO2
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
PRELEVEMENT DE SANG TOTAL
/V02/22
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Dépiquer le donneur, laisser une compresse sèche sur le point de ponction et

demander au donneur de comprimer 2 à 3 minutes, bras allongé au niveau du point
de ponction.
- Vérifier l’arrêt de saignement, maintenir avec une compresse et un sparadrap.
- Laisser le donneur au repos sur le fauteuil de prélèvement (au maximum 5 min),
s’assurer de la bonne tolérance du don, le remercier et l’accompagner vers la salle
de collation.
6.4.7 Prise en charge des documents, tubes et poches
 Traitement des documents :
Renseigner correctement la fiche de prélèvement de sang total ainsi que le registre
de prélèvement de sang.
 Traitement de la poche :
- Stripper et agiter la poche de sang.
- Souder la tubulure de prélèvement de sang total en faisant deux soudures avec un
écart d’environ 04 à 06 centimètres.
- Vérifier l’intégrité des soudures.
- Placer les poches dans des conteneurs réservés au stockage et transport des
poches et les acheminer vers l’unité concernée accompagnées des fiches de
liaisons.
 Traitement des tubes :
- Ranger les tubes dans les portoirs selon leur destination et l’ordre qui a été
prédéfini.
- Renseigner la fiche de liaison et la fiche de prélèvement (en cas d’incidents)
- Vérifier la concordance entre les tubes, les poches et la fiche de liaison au cours
du prélèvement.
- Les acheminer vers l’unité concernée accompagnés des fiches de liaisons.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO2/
ANS/COL/PRO01/ PRISE EN CHARGE D’UN CANDIDAT AU DON
PRELEVEMENT DE SANG TOTAL
V02/22
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 LOGIGRAMME
Quoi Comment
Qui
IDE et/ou LSP formés et Préparer le matériel avant ANS/ COL/MOP06/V02/22 :
l’arrivée des donneurs. Vérification de la trousse à
qualifiés en transfusion
sanguine pharmacie
Se laver les mains en respectant
les conditions d’hygiène.
ANS/COL/FICT01/V01/22 :
Fiche technique : Hygiène
Installer le donneur de prélèvement

Contrôler la cohérence entre l’identité du

donneur et la fiche de prélèvement

Mettre en marche l’agitateur, limitateur

préprogrammé

ANS/COL/MOP03/V02/22 :
Désinfecter le site Phlébotomie.
de phlébotomie

Ponctionner la veine

ANS/COL/MOP04/V02/22 :
Préparer et étiqueter les tubes et les poches
Lien don/donneurs/ règles
d’étiquetage.

Surveiller le déroulement du prélèvement

ANS/COL/MOP05/V02/22 :
Suivre le mode opératoire
prise en charge des
Désolidariser la Le donneur présente des incidents Prise en charge des
poche liés au don incidents liés au don.
incidents liés au don
Oui
Non

Laisser remplir la poche jusqu’à

la quantité programmée
Médecin du don Oui
Remplir les tubes, désolidariser
la poche et dépiquer le donneur.

Le donneur Laisser le donneur

présente un se reposer et Traiter la fiche et le
IDE et/ou l’accompagner vers registre de prélèvement
incident.
LSP formés la salle de collation
et qualifiés Non

Vérifier la concordance entre les

Libérer le donneur, le remercier tubes, la poche et la fiche de liaison
et l’inviter à un autre don

Conditionnement et transport

18
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO03/ ORGANISATION DE LA COLLECTE MOBILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/PRO03
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission de rédaction Commission de La Directrice Générale de

et d’actualisation validation l’Agence Nationale du Sang
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO03/ ORGANISATION DE LA COLLECTE MOBILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Décrire les étapes permettant la planification et l’organisation d’une collecte mobile.
2. Domaine d’application
- Collecte de sang organisée en dehors de la structure de transfusion sanguine.
3. Documents de référence
- Textes Réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles ANS.
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020.
- Décision n°250 du 31/08/2021 relative à la collation offerte aux donneurs de sang.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- Clino-Mobile : Véhicule de collecte équipé pour le don de sang.
5. Personnel concerné
- Personnel d’accueil formé et qualifié.
- Médecin du don.
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
- Chauffeur.
- Personnel de la collation formé et qualifié.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Questionnaire médical type (ANS/COL/FIC01/V02/22).
- Questionnaire médical type en arabe (ANS/COL/FIC08/V01/22).
- Flyer autoexclusion (ANS/COL/DAE01/V01/22)
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de prélèvement du sang total (ANS/COL/FIC03/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Fiche de validation du lieu de collecte (ANS/COL/FIC05/V02/22).
- Fiche de transport (ANS/STS/FIC06/V02/22).
- Fiche de rapport de collecte (ANS/COL/FIC06/V02/22).
- Fiche de vérification de la trousse à pharmacie (ANS/COL/FIC07/V02/22).
- Registre des candidats au don du sang (ANS/COL/REG01/V02/22)

20
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO03/ ORGANISATION DE LA COLLECTE MOBILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Registre des donneurs de sang total (ANS/COL/REG02/V02/22).

- Registre des candidats au don ajournés (ANS/COL/REG04/V02/22).
- Registre de prélèvement de sang (ANS/COL/REG05/V02/22).
- Documents pré-don (ANS/COL/DRD01/V02/22).
- Document post don (ANS/COL/DPD01/V02/22).
- Etiquettes d’identification du don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée, aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
 Zone de consultation
- Mobilier pour médecin et donneur.
- Tensiomètre.
- Stéthoscope.
- Lecteur d’hémoglobine.
- Pèse-personne.
- Toise.
- Ordinateur portable.
 Zone de prélèvement
- Fauteuils et /ou lits pour prélèvement.
- Source d’oxygène.
- Chariots.
- Agitateurs limitateurs de poches.
- Clampeuses soudeuses électriques.
- Tubes échantillons.
- Portoirs pour tubes échantillons.
- Pince à clamper.
- Ciseaux.
- Conteneurs validés pour transport des poches de sang.
- Potences.
- Plateaux à servir.
- Paravents.

21
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO03/ ORGANISATION DE LA COLLECTE MOBILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 Zone de collation
- Mobilier de collation (tables, chaises).
- Ustensile nécessaire
- Les boissons et les denrées alimentaires nécessaires à la collation doivent être
stockées et conservées dans un dispositif de stockage spécifique et adéquat.
 Zone de gestion des incidents liés au don
- Lits de repos
- Potence
 Equipements spécifique collecte mobile
- Une ambulance.
En site fixe
- Lits de prélèvements
En véhicule de collecte
- Véhicule de collecte de sang mobile.
6.3.2 Consommables
- Trousse à pharmacie.
- Anneaux.
- Abaisse-langue.
- Poches à sang.
- Tubes échantillons.
- Compresses.
- Désinfectant (Bétadine alcoolisée ou alcool à 70°C).
- Gants.
- Garrot.
- Draps et coussins jetables.
- Conteneurs pour déchets avec dispositifs de tri.
6.4 Description
6.4.1 Planification de la collecte mobile
Le responsable de la collecte mobile doit planifier soigneusement à l’avance la collecte :
- Identifier le lieu de la collecte.
- Prendre contact avec les organismes ou les établissements concernés (demande
rédigée dans laquelle sera précisée la date et l’heure de la collecte).
- Visiter et valider les lieux de la collecte.
- Estimer les besoins humains et matériel.

22
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO03/ ORGANISATION DE LA COLLECTE MOBILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.2 Information et sensibilisation

- Précéder la collecte par une phase de sensibilisation et d’information sur le don de
sang.
- Utiliser comme support des affiches, des dépliants, des articles, et organiser des
débats, informer les habitants du lieu de collecte suffisamment à l’avance.
- Mettre au point des méthodes efficaces pour sensibiliser les donneurs aux séances
de collectes mobiles.
- Encourager et rassurer les donneurs potentiels qui ont des doutes ou des
inquiétudes au sujet du don de sang.
6.4.3 Déroulement de la collecte de sang
a- Accueil Voir (ANS/COL/MOP01/V02/22 : Accueil d’un candidat au don de sang)
- L’équipe chargée de l’accueil doit également orienter le flux des donneurs.
- Prévoir des bancs en nombre suffisant.
- Veiller au confort des donneurs.
b- Secrétariat
- Renseigner le registre des candidats au don de sang
c- Sélection médicale Voir (ANS/COL/MOP02/V02/22 : Sélection médicale du
candidat au don du sang).
d- Prélèvement Voir
(ANS/COL/FICT01/V01/22 : Fiche technique : Hygiène de prélèvement).
(ANS/COL/MOP03/V02/22 : La Phlébotomie).
(ANS/COL/MOP04/V02/22 : Lien don /Donneur / Règles d’étiquetage).
(ANS/COL/MOP05/V02/22 : Prise en charge des incidents liés au don).
e- Repos et Collation
- Donner une collation au donneur
- Surveiller le donneur de sang (10 min).
Si incidents : Voir (ANS/COL/MOP05/V02/22 : Prise en charge des incidents liés
au don).
- Remercier le donneur et l’inviter pour un prochain don.
6.4.4 Après la collecte
- Remercier les organisateurs de la collecte.
- Evaluer les collectes systématiquement en vue de déterminer leur efficacité et leur
rentabilité.
- Etablir le rapport de collecte.

23
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/COL/PRO03/ ORGANISATION DE LA COLLECTE MOBILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 Logigramme
Qui Quoi Comment
Médecin du Don
Identifier le lieu de
Et /Ou
collecte
Personnel chargé de la
promotion du don de sang
Prendre contact avec les
organismes ou les
établissements concernés

Formuler une demande

officielle

Convenir de la date et de
l’heure de la collecte

Visiter et valider les ANS/COL/FIC05/V02/22 : Fiche de

lieux de la collecte validation du lieu de collecte

Sensibiliser et informer
la population de la
collecte

Médecin du don Estimer les besoins

IDE et/ou LSP formés et humains et matériel
qualifiés

Vérifier la trousse à ANS/COL/MOP06/V02/22 :

pharmacie Vérification de la trousse
à pharmacie

Procéder à la collecte

Remercier le partenaire

Evaluer la
collecte et établir ANS/COL/FIC06/V02/22 :
Médecin du Don Rapport de la collecte mobile
le rapport de la
collecte

24
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/COL/PRO04/ PRELEVEMENT PAR APHERESE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/PRO04
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission de rédaction Commission de La Directrice Générale de

et d’actualisation validation l’Agence Nationale du Sang
Dr K.L OULD KABLIA

25
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/COL/PRO04/ PRELEVEMENT PAR APHERESE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Définir les règles à appliquer pour tout prélèvement par aphérèse.
2. Domaine d’application
- Collecte en site fixe.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles ANS.
- Manuel d’utilisation de l’automate d’aphérèse
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- Poches ACD-A : Poches d’Anticoagulant à l’Acide Citrate Dextrose additionnée
d’Adénine.
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- Amorçage par l’anticoagulant : Phase de rinçage automatique du kit par l’ACD-A.
- Automate d’aphérèse : Séparateur de Cellules de sang total.
- Phlébotomie : Ponction Veineuse.
5. Personnel concerné
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
- Médecin du don.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de prélèvement de sang (ANS/COL/REG05/V02/22).
- Etiquettes d’identification du don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée et aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique, d’une source d’eau et
d’oxygène.

26
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/COL/PRO04/ PRELEVEMENT PAR APHERESE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez-de

chaussée.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Automate d’aphérèse.
- Soudeuse.
- Armoire à pharmacie
6.3.2 Consommables
- Kits d’aphérèse.
- Poches d’anticoagulant (ACD-A).
- Tubes échantillons.
- Compresses.
- Sparadrap ordinaire et micropore.
- Pansement compressif.
- Gants.
- Garrots.
- Savon liquide.
- Solution hydro alcoolique.
- Conteneurs à déchets.
- Désinfectants (Bétadine alcoolisée ou Alcool à 70°C).
- Sérum salé isotonique.
- Dispositifs de prélèvement de sang.
- Trousse à pharmacie.
6.4 Description
6.4.1 Préparation du matériel
Avant l’arrivée des donneurs, il faut s'assurer que :
- Le matériel indispensable est disponible (kits et poches d’anticoagulant, tubes...),
- Tout le matériel nécessaire est propre et en état de fonctionnement (fauteuils,
séparateur de cellules, soudeuses...).
6.4.2 Prélèvement du donneur
Voir ANS/COL/MOP07/V02/22 : Prélèvement par aphérèse.
6.4.3 Surveillance du donneur
Le donneur doit être surveillé pendant toute la durée du prélèvement.
Voir ANS/COL/MOP05/V02/22 : Prise en charge des incidents liés au don.
6.4.4 Fin du don
Voir ANS/COL/MOP07/V02/22 : Prélèvement par aphérèse.
6.4.5 Traitement des fiches, des poches et des tubes
Voir ANS/COL/MOP07/V02/22 : Prélèvement par aphérèse

27
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/COL/PRO04/ PRELEVEMENT PAR APHERESE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 LOGIGRAMME
Qui Quoi Comment
Préparer le matériel avant
l’arrivée des donneurs
IDE et/ou LSP formés et ANS/COL/MOP07/V02/22 :
qualifiés en transfusion Prélèvement par aphérèse
sanguine. Mise en marche de l’automate d’aphérèse.
Montage du kit avec Amorçage ACD-A

Installer le donneur

Contrôler la cohérence entre l’identité du

donneur et la fiche de prélèvement

Introduire dans l’automate les paramètres du

donneur et choisir une procédure de collecte
ANS/COL/FICT01/V01/22
Se laver les mains en respectant
Fiche technique :
IDE et/ou LSP formés et les conditions d’hygiène Hygiène de prélèvement
qualifiés en transfusion
sanguine. Choisir une veine, désinfecter le ANS/COL/MOP03/V02/22 :
site de phlébotomie Phlébotomie

Ponctionner la veine

Etiqueter les poches et les tubes et prélever les échantillons

ANS/COL/MOP07/V02/22 :
Démarrer la séance de don
Prélèvement par aphérèse

Surveiller le déroulement du prélèvement.

Suivre le mode opératoire ANS/COL/MOP05/V02/22 :

Médecin du don Oui Le donneur présente
prise en charge des un incident Prise en charge des
incidents liés au don incidents liés au don du
sang
Non
Fin du don
ANS/COL/MOP07/V02/22 :
Oui Prélèvement par aphérèse

Dépiquer le donneur.

Laisser le donneur se
Traiter la fiche et le
Le donneur présente reposer puis
registre de prélèvement
un incident. l’accompagner vers la
salle de collation

Non
Traiter et conditionner les poches
des produits collectés
Libérer le donneur, le remercier
et l’inviter à un autre don.

28
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/PRO05/ DON DE SANG AUTOLOGUE PROGRAMME
V01/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE²

Code-Document : ANS/COL/PRO05
Version-Document : V01/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Première version

Modification : Aucune

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Rédigée Validée Approuvée

Date : 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission de rédaction La Directrice Générale de

et d’actualisation Commission de l’Agence Nationale du Sang
validation
Dr K.L OULD KABLIA

29
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/PRO05/ DON DE SANG AUTOLOGUE PROGRAMME
V01/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE²

1. Objectif
- Définir les différentes étapes d’un prélèvement de sang pour une transfusion autologue
programmée.
2. Domaine d’application
- Collecte de sang organisée au niveau de la structure de transfusion sanguine.
3. Documents de référence
- Textes Réglementaires Transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles ANS.
- Manuel de ressources techniques en transfusion de l’Ontario
4. Définitions et abréviations
- Ac : Anticorps.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- ES : Etablissement de Santé.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- STS : Structure De Transfusion Sanguine.
- TAP : Transfusion Autologue Programmée.
5. Personnel concerné
- Personnel d’accueil formé et qualifié.
- Médecin du Don et le médecin prescripteur (chirurgien, anesthésiste).
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
- Personnel de la collation formé.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Questionnaire médical type (ANS/COL/FIC01/V02/22).
- Questionnaire médical type en arabe (ANS/COL/FIC08/V01/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de prélèvement de sang total (ANS/COL/FIC03/V02/22).
- Registre des candidats au don du sang (ANS/COL/REG01/V02/22)
- Registre des donneurs de sang total (ANS/COL/REG02/V02/22).
- Registre des candidats au don ajournés (ANS/COL/REG04/V02/22).

30
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/PRO05/ DON DE SANG AUTOLOGUE PROGRAMME
V01/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE²

- Registre de prélèvement (ANS/COL/REG05/V02/22).

- Demande de transfusion autologue programmée (ANS/COL/FIC09/V01/22).
- Calendrier de prélèvement de la transfusion autologue programmée
(ANS/COL/FIC10/V01/22)
- Etiquettes d’identification du don de sang pour TAP (ANS/COL/ETI02/V01/22).
6.2. Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée, aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau et
d’oxygène.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussée.
6.3. Matériel
6.3.1 Equipements
- Fauteuils de prélèvement.
- Limitateur agitateur de poches (automate de prélèvement).
- Clampeuse soudeuse électrique.
- Chariot ou support de manipulation.
- Portoir à tubes.
- Ciseaux, stripper, anneaux, pinces.
6.3.2 Consommables
- Poches à sang
- Tubes échantillons
- Compresses
- Sparadrap ordinaire et micropore.
- Pansement compressif.
- Gants à usage unique.
- Savon liquide
- Solution hydro alcoolique
- Garrots.
- Conteneurs à déchets
- Sachets spécifiques aux DASRI et produits ménagers.
- Désinfectants (Bétadine alcoolisée ou alcool à 70°C).
- Trousse à pharmacie (ANS/COL/MOP06/V02/22 : Vérification de la trousse à
pharmacie).

31
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/PRO05/ DON DE SANG AUTOLOGUE PROGRAMME
V01/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE²

6.4. Description
Le don autologue n’est programmé qu’après concertation entre le médecin du don et
le médecin prescripteur
1. Critères d’admissibilité des candidats au prélèvement pour TAP :
- Poids : à partir de 15 kg
- Taux d’Hb ≥ 11 g/dl ou Hte = 34%
2. Au cours de la consultation, le médecin du don :
 Vérifie les indications de la TAP :
- Phénotype érythrocytaire rare (carte de groupage de phénotype étendu).
- Présence d’Ac irréguliers anti érythrocytaire multiples (RAI).
- Ac dirigé contre une protéine de plasma.
- Absence d’une solution thérapeutique alternative disponible dans les délais
compatibles avec l’état du malade.
 Informe son patient et obtient son accord après s’être assuré de l’absence de contre-
indications cliniques et biologiques :
- Toute pathologie infectieuse latente ou patente (dentaire, urinaire, digestive…)
- Pathologie cardiaque (angor instable, crise angineuse dans les 8 jours précédent,
rétrécissement aortique serré, cardiopathie cyanogène…)
- Artériopathie cérébrale occlusive sévère
 Remet une fiche d’information standardisée assurant le « consentement libre et éclairé
du patient » en chirurgie pédiatrique, les deux titulaires de l’autorité parentale signent
un formulaire de consentement libre et éclairé.
 Vérifie les données renseignées sur la fiche de demande de transfusion autologue
programmée et les résultats de la sérologie infectieuse et les examens biologiques
pré don (groupage ABO-RH1, phénotype RH-KEL1 si nécessaire RAI, numération de
formule sanguine)
 Exclut les patients dont le résultat de dépistage d’un ou plusieurs des marqueurs
suivants est positif :
- Antigène HBs ;
- Anticorps anti-VHC ;
- Anticorps anti-VIH-1 et 2 ;
- Anticorps anti-HTLV I et II;
- Anticorps anti-HBc isolé (absence d’anticorps anti-HBs).
Toutefois et par dérogation, les patients pour lesquels les marqueurs mentionnés
ci-dessus sont positifs peuvent être prélevés et transfusés dans le cadre d’un protocole de
transfusion autologue programmée à condition qu’ils se trouvent en situation d’impasse

32
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/PRO05/ DON DE SANG AUTOLOGUE PROGRAMME
V01/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE²

thérapeutique (groupe sanguin rare <4/1000 et/ou mélange d’anticorps irréguliers avec
fréquence de phénotype < 4/100 000).
Le constat d’impasse thérapeutique et la décision de prélèvement en vue d’une
transfusion autologue programmée sont établis conjointement par le médecin responsable
des prélèvements de la STS et le médecin prescripteur.
Possibilités d’inclusion, patient présentant :
- Des anticorps anti-HBc avec anticorps anti-HBs positifs,
- Un dépistage positif de la syphilis.
 Procède à l'examen médical du candidat à la TAP.
 Complète la demande de TAP (Copie ES et STS).
La décision de prélever ces patients est prise conjointement par le médecin prescripteur et
le médecin responsable des prélèvements de la STS après évaluation des antécédents du
patient.
3. Planification du prélèvement :
Le médecin du don :
 Donne l'information pré don et prescrit la prémédication (sulfate ferreux 300 à partir de
la veille du premier don et jusqu’à 2 semaines après l’intervention chirurgicale.
Posologie adaptée en fonction de l’âge).
 Etablit le calendrier des prélèvements en respectant un intervalle minimal d’une
semaine entre 2 prélèvements sans dépasser 5 prélèvements (5 unités de CGR).
Le volume total prélevé ne doit pas excéder 12% de la masse sanguine. Le dernier
prélèvement ne peut être effectuer les dernières 72 heures précédant l’intervention.
 Remplit le formulaire du calendrier du prélèvement de la TAP
 Prélève le patient selon le calendrier préétabli.
 Observe la même procédure de prélèvement et de prise en charge que celle décrite
pour le sang homologue avec des soins particuliers adaptés au patient (prélèvement
en position déclive sans garrot avec compensation volumique selon l’état clinique du
patient).
 Appose sur les produits des étiquettes spécifiques au don autologue programmé.
L’étiquette comprend : le numéro du don, la date de prélèvement et de péremption du
produit sanguin, le nom, prénom, date de naissance et le sexe de la personne
prélevée et la mention « Transfusion Autologue programmée »
 Achemine rapidement les poches prélevées à l’unité de préparation. (Les poches pour
transfusion autologue sont traitées dans un circuit spécifique pour la préparation, la
qualification, la conservation et la distribution des produits sanguins labiles).

33
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO06/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 AUTOLOGUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/PRO06
Version-Document : V01/22

Date effective : 10/11/2022

Valide :
Date d’expiration : 10/11/2027

Version remplacée : Première version

Modification : Aucune

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Rédigée Validée Approuvée

Date : du 07 au 28/08/2022 Date :20/09/2022 au 06/11/2022 Date : 10/11/2022

Commission de rédaction Commission de La Directrice Générale de

et d’actualisation validation l’Agence Nationale du Sang
Dr K.L OULD KABLIA

35
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO06/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 AUTOLOGUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Déterminer l’aptitude au don de cellules souches à partir de sang périphérique.
- Préparer le donneur au don de cellules souches de sang périphérique.
- Définir les différentes étapes d’un prélèvement pour le don de cellules souches de sang
périphérique par cytaphérèse tout en respectant les règles de bonnes pratiques de
prélèvement.
2. Domaine d’application
- Collecte de cellules souches de sang périphérique au niveau de la structure de transfusion
sanguine et des services habilités par voie réglementaire.
3. Documents de référence
- Les différentes modalités de prélèvement des cellules souches hématopoïétiques, Elsevier
Masson SAS/2011.
- Modalités de mobilisation des cellules souches hématopoïétiques autologues et objectifs
cellulaires en cellules CD34 + : recommandations de la Société francophone de greffe de
mœlle et de thérapie cellulaire (SFGM-TC), Bulletin du Cancer /2019.
- Les allogreffes, InfoCancer, mise à jour le 29 novembre 2020
- Résumé des caractéristiques du produit ANSM ; mise à jour 25/01/2013
- Registre de donneurs de cellules souches, HEMA-QUEBEC/2004.
- Comprendre l’intensification thérapeutique avec support de cellules souches, International
myeloma foundation, USA / 2013.
- Manifestation, gestion et traitement de l’hypocalcémie induite par le citrate pendant une
aphérèse, Journal of Clinical Apheresis/2012.
- Protocol général pour la cytométrie en flux, Clinisciences, France/2022.
- The ISHAGE guidelines for CD34+ cell determination by flow cytometry. International
Society of Hematotherapy and Graft Engineering.
4. Définitions et abréviations
- 7AAD : 7AminoActinomycine D.
- Autogreffe : Injection de cellules souches provenant du sujet greffé lui-même.
- CD : Cluster de Différenciation.
- CSH : Cellules Souches Hématopoïétiques.
- CSSP : Cellules Souches du Sang Périphérique.
- Cytaphérèse : Procédure médicale consistant à séparer les divers composants du sang
périphérique afin d’en extraire une population d’intérêt.
- ECG : ElectroCardioGramme.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.

36
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO06/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 AUTOLOGUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Endoxan : ce médicament est une chimiothérapie anticancéreuse apparentée aux

alkylants, il est utilisé seul ou en association avec d’autres chimiothérapies dans le
traitement de nombreux cancers (lymphome, myélome multiple…)
- FITC : Fluoresceine IsoThyoCyanate.
- FNS : Formule de Numération Sanguine.
- G-CSF: Granulocyte-colony stimulating factor.
- GGT: Gamma Glutamyl Transferase
- HTLV : Human T Lymphotropic Virus.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat
- PE : PhycoErythrin.
- Plerixafor : Utilisé en association avec le G-CSF et permet de rattraper les mobilisations
insuffisantes par FCH seul
- Poches ACD-A : Poches d’Anticoagulant à l’Acide Citrate Dextrose additionnée
d’Adénine.
- TCA : Temps de Céphaline Activé.
- TGO : Transaminase Glutamo Oxaloacétique.
- TGP : Transaminase Glutamo Pyruvique.
- TP : Temps de Prothrombine.
- VHB : Virus de l’Hépatite B.
- VHC : Virus de l’Hépatite C.
- VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine.
5. Personnel concerné
- Médecin qualifié.
- IDE formés et qualifiés.
6. Description de la procédure
6.1Supports d’information renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Etiquettes identification don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de donneurs de cellules souches (ANS/COL/REG06/V01/22).
6.2Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée, aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.

37
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO06/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 AUTOLOGUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Automate d’aphérèse pour collecte de cellules souches.
- Equipement pour cytométrie en flux (pipettes et Pipet-aid, centrifugeuse, réfrigérateur,
cytomètre en flux)
- Automate de FNS.
- Soudeuse.
- Centrifugeuse de paillasse.
- Banque de sang.
- Réfrigérateur.
6.3.2 Consommables
- Kits d’aphérèse pour cellules souches.
- Tubes échantillons : EDTA et sec.
- Poches d’anticoagulant (ACD-A).
- Compresses.
- Sparadrap ordinaire et micropore.
- Pansement compressif.
- Gants.
- Garrots.
- Savon liquide.
- Conteneurs à déchets.
- Dispositifs de prélèvement de sang.
- Désinfectants (Bétadine alcoolisée ou Alcool à 70°C).
6.3.3 Médicaments
- Trousse à pharmacie : Voir : ANS/COL/MOP06/V02/22 : Vérification de la trousse à
pharmacie.
- G-CSF.
- Plerixafor.
- Cyclophosphamide.

6.3.4 Réactifs
- Anticorps anti-CD45 en FITC, anti-CD34 en PE, 7AAD
- La lyse doit être en chlorure d’ammonium
- Les tubes Truecount®
6.4 Description
6.4.1 Préparation du donneur
- Préparer le donneur au don pour une période de 5 à 7 semaines
- Réduire la période de préparation à une semaine en cas d’urgence.
38
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO06/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 AUTOLOGUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

a) Evaluation de l’aptitude du donneur

- Recevoir la prescription médicale de la collecte par aphérèse.
- Informer le donneur sur le déroulement de l’opération.
- Évaluer le capital veineux par l'équipe d'aphérèse, et expliquer la nécessité de mise
en place d'un cathéter central double voie, de bon calibre, si nécessaire
- Faire un bilan pré-don :
▪ FNS.
▪ Hémostase : TP-TCA-Fibrinogène.
▪ Sérologies VIH, VHB, VHC, Syphilis, HTLV I/II.
▪ Bilan rénal : Urée, Créatinine.
▪ Bilan Hépatique : TGO/TGP, Bilirubine (Directe et Totale), GGT.
▪ Calcémie.
▪ Protidémie.
▪ EFR.
▪ Examen Cardio-vasculaire, ECG avec Echographie cardiaque.
- Signer des consentements, qui devraient mentionner la possibilité de détruire la
poche de sang(greffon) ou de l'utiliser pour des projets de recherche s'il n'y a plus
d'indication de don(greffe).
- Prescrire le facteur de croissance hématopoïétique pour la mobilisation de CSSP.
b) Administration du traitement
Le FCH utilisé est du G-CSF.
- Une dose de 15 µg/kg par jour, ou 10 µg/kg en deux fois par jour à heure fixe (toutes
les 12 h), par voie sous-cutanée pendant 05 jours.
6.4.2 Avant l’installation du donneur
- Voir : ANS/COL/MOP07/V02/22 : Prélèvement par aphérèse.
6.4.3 Prélèvement du donneur
Il existe trois méthodes de prélèvement de cellules souches périphériques :
1) sous facteurs de croissance seuls (Protocole 1)
2) sous facteurs de croissance, combinés à une chimiothérapie de mobilisation
(Protocole 2)
3) sous facteurs de croissance avec Plerixafor
[Link] Protocole 01
Le FCH utilisé est du G-CSF :
- Une dose de 15 µg/kg par jour, ou 10 µg/kg en deux fois par jour à heure fixe
(toutes les 12 h), par voie sous-cutanée pendant 05 jours.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO06/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 AUTOLOGUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Doser les cellules CD34+ dans le sang chez le patient afin de vérifier la possibilité
de débuter la cytaphérèse (Voir logigramme).
 CD34 + ≥ 20/µL : la cytaphérèse peut commencer.
 10/µl ≤ CD34+ < 20/µl : il est possible de réaliser une première séance de
cytaphérèse. Si le résultat de la première collecte est insuffisant (< 1,5x10 6
cellules CD34+/kg/greffon), passer au protocole 3.
[Link] Protocole 02
- Utiliser l’endoxan (ou cyclophosphamide) comme chimiothérapie pour augmenter la
libération des cellules souches dans le sang.
- Administrer un facteur de croissance durant cinq jours (15 µg/kg par jour, ou 10
µg/kg en deux fois par jour à heure fixe (toutes les 12 h), par voie sous-cutanée)
après la mobilisation par chimiothérapie.
[Link] Protocole 03
- Administrer un facteur de croissance durant cinq jours (15 µg/kg par jour, ou 10
µg/kg en deux fois par jour à heure fixe (toutes les 12 h), par voie sous-cutanée).
- Doser les cellules CD34+ dans le sang chez le patient (Voir logigramme).
 CD34+<10/µl : la cytaphérèse sera réalisée le lendemain du dosage des cellules
CD34 +, après administration de plerixafor.
 10/µl ≤ CD34+<20/µl : réaliser une première séance de cytaphérèse.
 Si le résultat de la première collecte est insuffisant (< 1,5x106 cellules
CD34+/kg/greffon), prévoir l'usage du plerixafor pour une 2 èmecytaphérèse le
lendemain.
 CD34+ <5/µl : les résultats de la mobilisation sont aléatoires et la décision de
mobiliser par plerixafor est variable d'un centre à l'autre.
Le nombre de cellules souches hématopoïétiques nécessaires pour réaliser une autogreffe
est généralement de 2 à 4 × 106 CD34+/kg.
6.4.4 Incidents survenant lors du prélèvement
- Une hypocalcémie à l’origine de dysesthésies, des nausées et des trémulations au
niveau de la bouche, des mains et des pieds. Ces effets peuvent être corrigés par une
supplémentation en Calcium au cours de la cytaphérèse.
- Des complications de l’abord veineux (occlusions, hémorragies sur cathéter central ou
très rarement infections) peuvent également être observées.
- Voir : ANS/COL/MOP05/V02/22 : Prise en charge des incidents lies au don du
sang.

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Nombre de
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ANS/COL/PRO06/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 AUTOLOGUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.5 Contrôle de qualité après collecte

- Numération des cellules nucléées totales.
- Numération des cellules CD34+ : par cytomètrie en flux.
- Détermination du taux des granulocytes : Max de 40% de granulocytes (matures et
immatures) pour ne pas influencer la viabilité des CSSP après décongélation.
- Détermination de l’hématocrite (exigence de 2%).

Remarque : Rendement ou efficience de collecte (CE2)

CE2 = R/ Vol x C (0.4 – 0.5)
R : Richesse de la poche en CD34+.
Vol : Volume du sang traité.
C : Concentration en CD34+ circulants avant aphérèse.

6.5 Logigramme
Algorithme pour le déclenchement de la 1ère cytaphérèse selon le taux de cellules CD34 +
dans le sang circulant dans le cas d'une mobilisation sous G-CSF seul. Les cas les plus
fréquents sont représentés par des traits pleins, les cas moins fréquents par des traits en
pointillés.

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Nombre de
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ANS/COL/PRO06/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 AUTOLOGUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

J1 : Dosage des CD34+ circulants

CD34+<5/µl 5/µl≤CD34<10/µI 10/µl≤CD34<20/µl

CD34 ≥ 20/µl
Ou
recueil estimé
6
>2 x 10 CD34/Kg

Ou Ou

<1.5x106
Plerixafor Cytaphérèse J1
CD34/Kg/greffon
Echec : nouvelle
tentative à distance
Non
Disponible Mobilisation

Oui 2ème cytaphérèse

J2
Cytaphérèse J2

CD34 < 3. 106/Kg CD34 > 3.106 /Kg

Mobilisation

ème
3 cytaphérèse
J3
6 6
CD34 < 3. 10 /Kg CD34 > 3. 10 /Kg

Nouvelle tentative à
distance avec plerixafor

42
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Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO07/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 ALLOGENIQUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/PRO07
Version-Document : V01/22

Date effective : 10/11/2022

Valide :
Date d’expiration : 10/11/2027

Version remplacée : Première version

Modification : Aucune

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Rédigée Validée Approuvée

Date : du 07 au 28/08/2022 Date : 20/09/2022 au 06/11/2022 Date : 10/11/2022

Commission de rédaction Commission de La Directrice Générale de

et d’actualisation validation l’Agence Nationale du Sang
Dr K.L OULD KABLIA

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DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Déterminer l’aptitude au don de cellules souches de sang périphérique.
- Préparer le donneur au don de cellules souches de sang périphérique.
- Définir les différentes étapes d’un prélèvement pour le don de cellules souches de sang
périphérique par cytaphérèse tout en respectant les règles de bonnes pratiques de
prélèvement.
2. Domaine d’application
- Collecte de cellules souches de sang périphérique au niveau de la structure de
transfusion sanguine et des services habilités par voie réglementaire.
3. Documents de référence
- Les différentes modalités de prélèvement des cellules souches hématopoïétiques,
Elsevier Masson SAS/2011.
- Registre de donneurs de cellules souches, HEMA-QUEBEC/2004.
- La loi N° 18-11 du 18 chawal 1439 correspondant au 2 juillet 2018 relative à la santé.
- Les allogreffes, InfoCancer, mise à jour le 29 novembre 2020.
- Prélèvement des cellules souches hématopoïétiques ‘’ les applications transfusionnelles
et thérapeutiques des techniques d’aphérèse’’ 2013.
- Allogreffe et autogreffe de cellules souches hématopoïétiques 05/12/2011, Elsevier
Masson.
- Résumé des caractéristiques du produit ANSM ; mise à jour 25/01/2013.
- The ISHAGE guidelines for CD34+ cell determination by flow cytometry. International
Society of Hematotherapy and Graft Engineering.
4. Définitions et abréviations
- 7AAD : 7AminoActinomycine D.
- Allogreffe : Injection de cellules prélevées à partir d’un donneur HLA compatible.
- CD : Cluster de Différenciation.
- CMV : CytoMégaloVirus
- CSH : Cellules Souches Hématopoïétiques.
- CSSP : Cellules Souches du Sang Périphérique.
- Cytaphérèse : Procédure médicale consistant à séparer les divers composants du sang
périphérique afin d’en extraire une population d’intérêt.
- ECG : ElectroCardioGramme.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- EFR : Exploration Fonctionnelle Respiratoire.

44
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Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO07/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 ALLOGENIQUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- FCH : Facteur de Croissance Hématopoïétique.

- FITC : Fluoresceine IsoThyoCyanate.
- FNS : Formule Numération Sanguine
- G-CSF: Granulocyte-Colony Stimulating Factor.
- GGT: Gamma Glutamyl Transferase
- GVH: Graft Versus Host
- HLA : Human Leucocyte Antigens.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- HTLV : Human T Lymphotropic Virus.
- PE : PhycoErythrin.
- Poches ACD-A : Poches d’Anticoagulant à l’Acide Citrate Dextrose additionnée
d’Adénine.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- TCA : Temps de Céphaline Activé.
- TDA : Test Direct à Antiglobuline.
- TGO : Transaminase Glutamo Oxaloacétique
- TGP : Transaminase Glutamo Pyruvique
- TP : Temps de Prothrombine.
- TSH : Tyroid-Stimulating Hormone.
- VHB : Virus de l’Hépatite B
- VHC : Virus de l’Hépatite C
- VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine.
5. Personnel concerné
- Médecin qualifié.
- IDE formés et qualifiés.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Etiquettes identification don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO07/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 ALLOGENIQUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).

- Registre de donneurs de cellules souches (ANS/COL/REG06/V01/22).
- Formulaire du consentement éclairé.
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée, aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.

6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Automate d’aphérèse pour collecte de cellules souches.
- Equipement pour cytométrie en flux (pipettes et Pipet-aid, centrifugeuse, réfrigérateur,
cytomètre en flux)
- Automate de FNS.
- Soudeuse.
- Centrifugeuse de paillasse
- Banque de sang
- Réfrigérateur
6.3.2 Consommables :
- Kits d’aphérèse pour cellules souches.
- Tubes échantillons : EDTA et sec.
- Poches d’anticoagulant (ACD-A).
- Compresses.
- Sparadrap ordinaire et micropore.
- Pansement compressif.
- Gants.
- Garrots.
- Savon liquide.
- Conteneurs à déchets.
- Dispositifs de prélèvement de sang.
- Désinfectants (Bétadine alcoolisée ou Alcool à 70°C).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO07/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 ALLOGENIQUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3.3 Médicaments
- Trousse à pharmacie : Voir : ANS/COL/MOP06/V02/22 : VERIFICATION DE LA
TROUSSE A PHARMACIE.
- G-CSF.
6.3.4 Réactifs
- Anticorps anti-CD45 en FITC, anti-CD34 en PE, 7AAD.
- La lyse doit être en chlorure d’ammonium.
- Les tubes Truecount®.
6.4 Description
6.4.1 Principe et exigences
- La réalisation de la greffe allogénique répond à plusieurs impératifs : assurer une prise
de greffe sur le long terme et délivrer une activité antitumorale adéquate, en
contrepartie d’une toxicité modérée.
- La limite d’âge est comprise entre 18-50 ans révolus.
- Le prélèvement de cellules souches hématopoïétiques, est autorisé à partir d’un
donneur mineur, seulement, au bénéfice d’un frère ou d’une sœur. En l’absence
d'autres solutions thérapeutiques, ce prélèvement peut se faire, exceptionnellement,
au bénéfice de sa cousine ou de son cousin germain. Dans tous les cas, ce
prélèvement nécessite le consentement éclairé, de chacun des parents ou de leur
tuteur légal.
- Le protocole de prélèvement peut se faire une fois par an.
• Recevoir la prescription médicale de la collecte par aphérèse.
• Informer le donneur sur le déroulement de l’opération.
• Évaluer le capital veineux par l'équipe d'aphérèse, et expliquer la nécessité de mise
en place d'un cathéter central double voie, de bon calibre, si nécessaire (problème
d'abord veineux périphérique ou donneur pédiatrique).
• Faire un bilan pré-don :
▪ FNS.
▪ Hémostase : TP-TCA-Fibrinogène.
▪ Sérologies VIH, VHB, VHC, Syphilis, HTLV I/II.
▪ Bilan rénal : Urée, Créatinine .
▪ Bilan Hépatique : TGO/TGP, Bilirubine (Directe et Totale) , GGT .
▪ Calcémie.
▪ Protidémie.
▪ Groupage ABO-RH1, Phénotype érythrocytaire complet.
▪ TDA.

47
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO07/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 ALLOGENIQUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

▪ RAI.
▪ Electrophorèse des Protéines.
▪ Electrophorèse de l’Hémoglobine.
▪ TSH.
▪ Ferritine.
▪ Sérologie Toxoplasmose (IgG et IgM).
▪ Sérologie CMV (IgG et IgM).
▪ Examen Cardio-vasculaire, ECG avec Echographie cardiaque
▪ EFR.
- Signer des consentements, qui devraient mentionner la possibilité de détruire la poche
de sang (greffon) ou de l'utiliser pour des projets de recherche s'il n'y a plus
d'indication de don (greffe).
- Prescrire le facteur de croissance hématopoïétique (FCH) pour la mobilisation de
CSSP.
6.4.2 Choix du donneur compatible
Procédure indispensable pour éviter ou limiter la GVH, permettant de vérifier les
critères de compatibilité, à partir d'un typage HLA réalisé à partir d'une prise de sang.
Il est le plus souvent exigé une compatibilité parfaite entre donneur et receveur dans
le système majeur d’histocompatibilité.
 Donneur Intra-familial :
La greffe géno-identique est la greffe « syngénique » réalisée entre jumeaux
monozygotes.
 Donneurs "phéno-identiques" :
Les autres greffes allogéniques sont faites à partir de donneurs volontaires non
apparentés, inscrits sur des fichiers nationaux et internationaux. Ces greffes sont
dites « phéno-identiques »
Les donneurs phéno-identiques sont choisis en fonction de leur typage HLA
(compatibilité à 10/10 ou 9/10 acceptée entre le donneur et le receveur), de leur
statut vis-à-vis du virus CMV et de leur âge.
 Donneurs alternatifs :
Dans certains cas, une moindre compatibilité peut être acceptée. Il s’agit alors de
greffes « mismatch » où existe une différence entre donneur et receveur portant
sur un ou plusieurs antigènes HLA.
6.4.3 Technique de mobilisation
- Les cellules souches hématopoïétiques (CSH) périphériques sont obtenues par la
mobilisation.

48
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO07/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 ALLOGENIQUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Chez le donneur, le FCH utilisé est du G-CSF à la dose 5 µg/kg en deux fois par jour
(toutes les 12 h), ou de 10 µg/kg par jour le matin et à heure fixe, par voie sous-
cutanée pendant 05 jours précédant le prélèvement.
6.4.4 Prélèvement par cytaphérèse
- Prélever systématiquement le donneur sain à partir du 4ème ou 5ème jour du
traitement.
- Au terme de la stimulation par le G-CSF, une évaluation par le taux de cellules CD34+
circulantes permet de déterminer, le moment du recueil qui peut être répété le
lendemain.
- Une à 2 (maximum 3) séances de cytaphérèse pour atteindre deux masses
sanguines.
- Le nombre de cellules souches hématopoïétiques nécessaires pour réaliser une
allogreffe est généralement de 4 à 8 × 106 CD34+/kg du poids du receveur.

6.4.5 Effets indésirables dus au prélèvement par cytaphérèse

- Une hypocalcémie à l’origine de dysesthésies, des nausées et des trémulations au
niveau de la bouche, des mains et des pieds. Ces effets peuvent être corrigés par une
supplémentation en Calcium au cours de la cytaphérèse.
- Des complications de l’abord veineux (occlusions, hémorragies sur cathéter central ou
très rarement infections) peuvent également être observées.
- Voir : ANS/COL/MOP05/V02/22 : PRISE EN CHARGE DES INCIDENTS LIES AU
DON DU SANG.

6.4.6 Contrôle de qualité après collecte

- Numération des cellules nucléées totales.
- Numération des cellules CD34+ : par cytométrie en flux.
- Détermination du taux des granulocytes : Max de 40% de granulocytes (matures et
immatures) pour ne pas influencer la viabilité des CSSP après décongélation.
- Détermination de l’hématocrite (exigence de 2%).

Remarque : Rendement ou efficience de collecte (CE2)

CE2 = R/ Vol x C (0.4 – 0.5)

R : Richesse de la poche en CD34+.

Vol : Volume du sang traité.
C : Concentration en CD34+ circulants avant aphérèse.

49
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/COL/PRO07/ PRELEVEMENT DES CELLULES SOUCHES
V01/22 ALLOGENIQUES DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 Logigramme
Algorithme décisionnel pour le prélèvement allogénique des cellules souches du sang
périphériques

Informations et consentement du
donneur+ bilan clinique et biologique

Choix du donneur compatible

Mobilisation de CSSP avant la collecte :

5 µg/kg de G-CSF en deux fois par jour (toutes
les 12 h), ou 10 µg/kg par jour, par voie
sous-cutanée pendant 05 jours.

Prélèvement par Cytaphérèse

Nombre de Oui
CD34+ atteint :
Arrêter
4 à 8. 106 /kg
du receveur

Non

2ème Prélèvement le lendemain après

mobilisation
(Maximum de 3 prélèvements au total)

50
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/PRO08
Version-Document : V01/22

Date effective : 10/11/2022

Valide :
Date d’expiration : 10/11/2027

Version remplacée : Première version

Modification : Aucune modification

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Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Rédigée Validée Approuvée

Date : du 07 au 28/08/2022 Date :20/09/2022 au 06/11/2022 Date : 10/11/2022

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PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Assurer une bonne conservation des cellules souches de sang périphérique afin de
préserver de façon optimale leurs propriétés à long terme.
2. Domaine d’application
- Préparation, cryoconservation et stockage des cellules souches de sang périphérique au
niveau de la structure de transfusion sanguine et des services habilités par voie
réglementaire.
3. Documents de référence
- A Freezing Protocol for Hematopoietic Stem Cells - Chapter 14 - Stem Cell Mobilization:
Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, vol. 2017
- Modalités de préparation, cryopréservation, décongélation des cellules souches
hématopoïétiques et précautions pour infusion au patient : recommandations de la
Société francophone de greffe de moelle et de thérapie cellulaire (SFGM-TC), Bull
Cancer 2016.
- Le transport des cellules souches hématopoïétiques et des cellules mononuclées : du
site de prélèvement à l’unité de thérapie cellulaire ANSM Octobre 2012
- Décision du 27 octobre 2010 définissant les règles de bonnes pratiques relatives à la
préparation, à la conservation, au transport, à la distribution et à la cession des tissus,
des cellules et des préparations de thérapie cellulaire AFSSAPS
4. Définitions et abréviations
- 7AAD : 7AminoActinomycine D.
- CMF : CytoMétrie en Flux.
- CSH : Cellules Souches Hématopoïétiques.
- CSSP : Cellules Souches du Sang Périphérique.
- DMSO (Me2SO) : DiMéthylSulfOxyde : agent cryoprotecteur pour la cryoconservation des
CSSP.
- HEA : Hydroxy-Ethyl-Amidon.
- HSA : Human Serum Albumin.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
5. Personnel concerné
- Praticien spécialiste en hémobiologie et transfusion sanguine.
- Praticien de l’unité de greffe.
- LSP ou Biologiste formés et qualifiés.

52
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Nombre de
pages : 09
PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
6.2 Locaux
- Les locaux sont situés, conçus, construits, adaptés et entretenus de façon à être en
adéquation avec les opérations à effectuer.
- Les zones et postes de travail sont définis pour chaque type de préparation.
- Le plan des locaux, leur agencement, leur conception et leur utilisation tendent à
minimiser les risques de confusion ou d’erreur en établissant des circuits logiques. Ils
contribuent également à la protection du personnel, des produits et de l’environnement et
sont sécurisés, suffisamment spacieux pour pouvoir y travailler dans de bonnes
conditions, correctement éclairés et ventilés.
- Les mesures prises pour protéger les produits issus de prélèvements de CSH tiennent
compte de l’environnement immédiat en vue d’éviter tout risque d’altération ou de
contamination
- Les locaux sont de taille suffisante. Ils sont conçus et adaptés en vue de garantir la
qualité et la traçabilité des produits conservés ou stockés. Ils sont propres et secs et
maintenus le cas échéant dans des limites de température et d’hygrométrie spécifiées
mesurées et contrôlées pour les différents types de produits conservés ou stockés. Ces
locaux ne sont pas un lieu de passage.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Hotte à flux laminaire.
- Bain-Marie.
- Congélateur - 80°C (6 mois).
- Congélateur programmable avec descente progressive de la température (-196°C).
- Fut d’azote liquide.
- Centrifugeuse de poches réfrigérée.
- Thermomètre.

53
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Nombre de
pages : 09
PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Agitateur horizontal de poches.

- Extracteur de plasma.
- Clampeuse soudeuse.
- Balances de précision.
- Connecteur stérile
- Laveur de cellules
6.3.2 Consommables
- Cryogants.
- Sacs de cryoconservation stériles.
- Cryotubes stériles.
- Poches de transfert stériles avec connecteur.
- Conteneurs en aluminium pour les sacs de cryoconservation.
- Blocs réfrigérants ou plaques de refroidissement.
- Étiquettes pour conteneurs et tubes.
- Bouchons de fermeture stériles.
- Seringues stériles.
- Aiguilles stériles.
- Dispositif de connexion stérile.
- Cuve d’Azote.
- Transporteur à sec d’Azote.
- Désinfectants stériles (lingettes, spray).
- Conteneurs en aluminium.

6.3.3 Réactifs/Produits chimiques

- Voir : ANS/COL/MOP07/V02/22 : PRELEVEMENT PAR APHERESE.
- DMSO (Me2SO).
- Solution stérile macromoléculaire : HSA à 5% ou HEA ou plasma autologue.
- Flacons de culture (milieu de culture aérobie, anaérobie).
- CD34 / 7-AAD.

54
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4 Description
6.4.1 Conservation des cellules souches du sang périphérique
a) Concentration des CSSP et préparation avant congélation
Pour obtenir un volume standard de 100 ml par poche, rajouter volume à volume la
suspension cellulaire et la solution cryoprotectrice :
 Volume de la suspension cellulaire après concentration = 70mL.
 Solution cryoprotectrice (Me2SO + plasma du donneur ou solution macromoléculaire)
=70ml.
Si le volume de la suspension cellulaire est >70 ml :
- Centrifuger les poches.
- Transférer les poches dans un extracteur de plasma et presser le surnageant dans le
sac vide.
- Conserver au réfrigérateur à une température comprise entre +2°C et +6°C.
Si le volume de la suspension cellulaire est < 70 ml :
- Diluer la suspension cellulaire avec le plasma du donneur (de préférence de la même
collecte) ou de l’albumine à 5%.
- Conserver au maximum 24H au réfrigérateur à une température comprise entre +2°C et
+6°C.
Préparer la solution cryoprotectrice : Utiliser du DMSO dans une solution
macromoléculaire [Sérum albumine (HSA 5%), Hydroxy-éthyl-amidon (HEA) ou plasma
autologue] de manière à obtenir une concentration finale à 10 % de DMSO.
Refroidir préalablement la solution cryoprotectrice à +4°C avant d'être mélangée à la
préparation cellulaire.
 Addition de la solution cryoprotectrice à la suspension cellulaire
- À ce stade, le congélateur à vitesse contrôlée doit être démarré et pré refroidi à la
température de démarrage (= 0°C).
- Tous les composants doivent être pré refroidis (La suspension cellulaire et la solution
cryoprotectrice doivent être refroidies à environ +4 à +6°C avant de mélanger) et les
étapes de traitement doivent être effectuées sur des plaques de refroidissement ou
des blocs réfrigérants.
- Mélanger progressivement la suspension cellulaire et la solution cryoprotectrice,
sous agitation constante et homogénéiser au mieux le produit en 10 minutes au
maximum et maintenir une température contrôlée (+4 à +10°C).
- Conserver le produit (mélange DMSO et solution cellulaire) entre +4 et +10 °C
pendant une durée n'excédant pas 30 minutes avant le début de la congélation.

55
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Nombre de
pages : 09
PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 Fractionnement / Transfert du mélange suspension cellulaire-solution de

cryoconservation dans les sacs de cryoconservation
- Placer le mélange (suspension cellulaire-milieu de cryoconservation) dans des sacs
de cryoconservation marqués d'une étiquette spéciale contenant un code individuel.
- Respecter les volumes optimaux de remplissage des poches de cryopréservation et
répartir un volume identique dans chaque poche.
- Percer l'orifice de la membrane du kit de remplissage et prélever la suspension
cellulaire comme échantillon pour le contrôle microbiologique.
- Ensemencer l'échantillon dans les flacons de culture (aérobie/ anaérobie).
- Prendre le reste du mélange et le transférer dans les cryotubes (tubes pilotes)
comme échantillons pour le contrôle qualité.
- Utiliser un suremballage afin de sécuriser les poches stockées ; il est alors important
de vider l'air du suremballage avant de procéder à sa soudure.
- Placer les sacs de cryoconservation et les cryotubes entre les plaques de
refroidissements ou sur les blocs de congélation et les mettre dans des conteneurs
en aluminium pré refroidis.
- Transférer immédiatement les conteneurs en aluminium vers le congélateur à vitesse
contrôlée.
b) Congélation
 Diminution programmée de la température et stockage
- Utiliser l’automate permettant de maîtriser et de tracer la descente en température
par injection programmée d'azote.
- Programmer une diminution de température, permettant de limiter le pic de surfusion
et poursuivre l’opération jusqu'à ce que la poche atteigne une température d'au
moins -80°C
- Visualiser à travers l'appareil la courbe propre à la poche témoin et la courbe propre
à l'enceinte de refroidissement en vue de validation.
- Conserver les poches, à une température inférieure à -150°C avec surveillance et
enregistrement de température.
- Utiliser de l’azote en l'absence d'équipement de cryogénie. En cas de panne de
ceux-ci, la congélation et le stockage peuvent être réalisés dans une enceinte à
- 80°C, préalablement validée, et pour une durée de stockage limitée, inférieure
à 6 mois.

56
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Nombre de
pages : 09
PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

c) Décongélation
- Utiliser un Bain-marie classique avec eau stérile ou à sec.
- Programmer la température entre +38°C et +40°C, en 2 à 5 minutes pour préserver
la viabilité et la fonctionnalité cellulaire.
- Maintenir la température du produit décongelé en dessous +10°C, le temps
d'exposition des cellules au DMSO (avant infusion ou avant lavage) devant être le
plus court possible.
- Doter le laboratoire d’une procédure de sauvegarde des cellules en cas de fuite à la
décongélation.
6.4.2 Le transport des cellules souches
- Le conditionnement primaire doit être clos et rendu étanche dès la fin du prélèvement,
en privilégiant les thermo-soudures aux clips.
- Le récipient de transport doit contenir des dispositifs eutectiques, non directement au
contact avec les conditionnements primaire et extérieur, permettant d’assurer le
maintien de l’intervalle de température recommandé pendant une durée de temps
supérieure ou égale à 2 fois la durée maximale prévisible du stockage temporaire et
de l’acheminement.
 Acheminement des cellules souches vers le site de greffe
- Les opérations d’acheminement peuvent être soit de la responsabilité de
l’établissement expéditeur ou de l’établissement de greffe destinataire. Néanmoins,
il est recommandé que l’unité en charge de la préparation et de la distribution valide le
circuit de transport et approuve l’organisation et les conditions du transport.
- Les colis doivent être surveillés contre tout acte de négligence ou de malveillance
durant toute la durée du transport. A cet effet, toutes les étapes de transport doivent
être sécurisées.
- Quelle que soit la personne en charge du transport, celle-ci doit être nommément
désignée, missionnée et formée. Les transports sans surveillance ou effectués par des
personnes non formées et les transports en deux-roues sont à proscrire.
6.4.3 Décongélation au laboratoire
- Procéder au lavage soit à l'aide de techniques semi-automatisées (laveur de cellules)
soit par technique manuelle avec centrifugeuse à poches.
- Utiliser une solution de dilution et de lavage [solution macromoléculaire (HSA ou
HEA)] ; celle-ci est à ajouter aux cellules le plus rapidement possible dès la
décongélation.

57
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Nombre de
pages : 09
PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Utiliser la même solution macromoléculaire que celle ayant servi au lavage pour la
suspension cellulaire.
- Définir le volume de suspension en fonction :
 Du poids et de l'état clinique du patient ;
 De la concentration cellulaire (max : 200 x 109/L)
- Filtrer les cellules avant distribution en utilisant un filtre de 200 µm.
- Transporter les greffons décongelés (à des températures comprises entre +18 et
+24°C) et lavés et les accompagner d’un enregistreur de température.
6.4.4 Décongélation au lit du patient
- Décongeler à l'aide d'un bain-marie avec réinjection immédiate au patient.
- Vérifier que la dose de DMSO à réinjecter ne doit pas excéder 1 g/kg/j et peut
nécessiter la réinjection en plusieurs jours :
▪ Les CSSP sont transportées au lit du patient en Dry Shipper*.
▪ Les transporteurs à sec (aussi appelés dry-shippers) sont conçus pour le transport
d'échantillons biologiques et d’autres matériaux aux températures cryogéniques.
▪ Les températures de stockage dans la chambre d'expédition restent à environ
-190°C, jusqu’à ce que l’azote liquide s’évapore du matériau adsorbant
▪ Réinjecter un volume maximal de 10 mL/kg/j, avec un débit maximal de
10 mL/min.
▪ Réserver une dose de 4 mL/kg/j pour les enfants de moins de 10 kg.
▪ Fractionner la réinjection des poches si la dose de DMSO à réinjecter est
supérieure, afin de limiter les effets indésirables liés à l'injection du DMSO, à
l'hypothermie, voire à la contamination importante en granulocytes.
 *Caractéristiques des transporteurs à sec :
 Matériau adsorbant de concept avancé permettant un chargement plus rapide
 Conforme aux réglementations de l’IATA concernant les réceptacles cryogéniques
(PI202-Packaging Instruction 202).
 Conception de tube d'encolure fiable et robuste, un corps en aluminium haute
résistance nervuré
 Performances isothermiques supérieures avec matériau d'isolation supérieur
offrant des durées de retenue maximum
 Enregistreur de température disponible pour tous les modèles
 Couvercle verrouillable pour la sécurité des échantillons pendant le transport
 Caisse d'expédition protectrice carrée en plastique (en option)

58
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
PREPARATION, CRYOCONSERVATION ET
ANS/COL/PRO08/ DECONGELATION DES CELLULES SOUCHES
V01/22 DU SANG PERIPHERIQUE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.5 Contrôle qualité

- Numération des cellules nucléées totales.
- Numération des cellules CD34+ par un protocole CD45/CD34.
- Détermination de la viabilité par CMF (le pourcentage des cellules CD34/7-AAD
positives).
- Contrôle microbiologique des dons : en aérobie et en anaérobie.
- Détermination de la fraction de lymphocytes T CD3+ (pour dons allogéniques) par
CMF, une dose ≥ 177 x 106 / kg augmente considérablement l’incidence de la GVH
aigue et la rechute après 2 ans.
Remarque : adapter, en interne, le seuil minimum des CD34 en fonction de la perte après
décongélation

59
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 02
ANS/COL/MOP01/ ACCUEIL DU CANDIDAT AU DON DE SANG
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/MOP01
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

61
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 02
ANS/COL/MOP01/ ACCUEIL DU CANDIDAT AU DON DE SANG
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Accueillir les candidats au don de sang, les identifier, les enregistrer et les fidéliser.
2. Domaine d’application
- Collecte fixe et mobile.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
5. Personnel concerné
- Personnel d’accueil formé et qualifié.
- Secrétaire médical(e).
- Médecin du don.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Flyer d’autoexclusion (ANS/COL/DAE01/V01/22)
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Registre des candidats au don du sang (ANS/COL/REG01/V02/22).
- Documents pré don (ANS/COL/DRD01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussée.
6.3 Matériel : Chapitre vide
6.4 Description
- Le personnel chargé de l’accueil du candidat au don doit porter une tenue règlementaire.
- Accueillir agréablement le candidat au don à son arrivée.
- Ne pas faire attendre le candidat au don trop longtemps.
- Vérifier l’identité du candidat au don en lui demandant une pièce d’identité obligatoire.
- Renseigner la partie identité du candidat sur le registre des candidats au don du
sang par le ou la secrétaire médical(e) (format papier ou numérique).
- Créer ou mettre à jour le dossier donneur.
- Mettre à la disposition du candidat au don les informations concernant :
 Le don de sang total (fréquence, effets bénéfiques du don de sang, tests effectués et
devenir de la poche de sang) (Voir Document pré don ANS/COL/DRD01/V02/22)
 Flyer d’auto exclusion pré don (ANS/COL/DAE01/V01/22)
- Orienter le candidat au don vers le médecin du don.
- Remercier le candidat au don et lui exprimer sa gratitude pour ce noble geste.

62
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/COL/MOP02/ SELECTION MEDICALE DU CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/MOP02
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission de rédaction Commission de La Directrice Générale de

et d’actualisation validation l’Agence Nationale du Sang
Dr K.L OULD KABLIA

63
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/COL/MOP02/ SELECTION MEDICALE DU CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Déterminer l’aptitude au don de sang.
- Assurer la sécurité transfusionnelle.
- La sélection médicale a un double intérêt :
 Recherche d’une affection contre-indiquant le prélèvement, par souci de protection du
donneur.
 Recherche d’une affection transmissible par la transfusion, par souci de protection du
receveur.
2. Domaine d’application
- Collecte de sang, en site fixe et mobile.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
5. Personnel concerné
- Médecin du don de sang.
6. Description de la procédure
6.1Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Questionnaire médical type (ANS/COL/FIC01/V02/22).
- Questionnaire médical type en arabe (ANS/COL/FIC08/V01/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Fiche donneur (ANS/COL/FIC02/V02/22).
- Fiche de prélèvement de sang total (ANS/COL/FIC03/V02/22).
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Registre des donneurs de sang total (ANS/COL/REG02/V02/22).
- Registre des donneurs de sang par aphérèse (ANS/COL/REG03/V02/22)
- Registre des candidats au don ajournés (ANS/COL/REG04/V02/22).
- Etiquettes d’identification du don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
- Document post don (ANS/COL/DPD01/V02/22).
6.2Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussée.
64
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/COL/MOP02/ SELECTION MEDICALE DU CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Mobilier pour le médecin et le donneur.
- Table de consultation.
- Tensiomètre.
- Stéthoscope.
- Lecteur d’hémoglobine.
- Pèse-personne.
- Toise.
6.3.2 Consommables
- Abaisse langue.
- Gants.
- Savon liquide.
6.4 Description
6.4.1 Entretien pré-don de sang total ou par aphérèse
- Renseigner sur format papier ou numérique tout document relatif au don de sang
- Accueillir le candidat au don.
- Vérifier l’identité du candidat au don et renseigner le questionnaire médical type et le
valider.
- Vérifier la date du dernier don (voir le manuel du médecin du don de sang ANS/2020)
- Veiller à ce que l’entretien médical et l’examen clinique se déroulent dans la
confidentialité adéquate.
- Utiliser un langage simple et vérifier que votre interlocuteur comprend ce que vous lui
dites.
- Vérifier si le candidat au don n’a pas été précédemment ajourné, à quelle date, et si
l’ajournement était temporaire ou définitif.
- Faire le dosage d’Hémoglobine selon l’appréciation du médecin (test rapide ou FNS).
- Mettre à jour le dossier donneur.
 Examens biologiques prédon pour aphèrese
- Hémogramme (taux de plaquettes et hémoglobine) pour cytaphérèse
- Electrophorèse des protéines (1er don puis 1/an) en cas de plasmaphérèse
- Ferritinémie à réaliser une fois par an

6.4.2 Examen physique

- Réaliser l’examen physique du donneur de sang à la recherche de contre-indication
au don en se référant aux référentiels cités dans les procédures du don de sang.
- Suite aux informations recueillies et aux résultats d’examens biologiques pré-don,
- le médecin du don décide de :

65
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/COL/MOP02/ SELECTION MEDICALE DU CANDIDAT AU DON
V02/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1 - Accepter le candidat au don de sang.

2 - Ajourner le candidat au don de sang temporairement.
3 - Ajourner le candidat au don de sang définitivement.

 Si le candidat est jugé apte au don

 Renseigner la fiche donneur de sang.
 L’enregistrer sur le registre des donneurs du sang.
 Lui attribuer un n° du don.
 Renseigner la fiche de prélèvement.
 Remettre au donneur le document d’informations post-don : (voir document
informations post-don) en apportant les explications nécessaires (carte
donneur, sérologies, informations post-don).
 Orienter le donneur vers la salle de prélèvement.
 Remercier le donneur et l’inviter pour un prochain don.

 Si le candidat est jugé inapte au don

 L’informer des motifs et de la nature de son ajournement : temporaire ou
définitif, et lui expliquer la différence.
 L’orienter si cela s’avère nécessaire vers un service spécialisé pour une
prise en charge.
 Reporter sur le registre des candidats au don ajournés les noms et les
causes d’ajournements des candidats au don de sang.
 Le remercier et l’inviter à se présenter dès la levée de sa contre-indication
(si elle est temporaire) pour un don.

66
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP03/ LA PHLEBOTOMIE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/MOP03
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

67
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP03/ LA PHLEBOTOMIE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Appliquer les bonnes pratiques de prélèvement.
- Eliminer le risque infectieux au point de ponction.
- Assurer la sécurité du donneur de sang, du personnel et du produit prélevé d’une
contamination microbienne.
2. Domaine d’application
- Collecte en site fixe et mobile.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- DASRI : Déchets des Activités des Services à Risque Infectieux.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- Poches ACD-A : Poches d’Anticoagulant à l’Acide Citrate Dextrose additionnéed’Adénine.
5. Personnel concerné
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de prélèvement de sang total (ANS/COL/FIC03/V02/22).
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Fiche de vérification de la trousse à pharmacie (ANS/COL/FIC07/V02/22).
- Registre de prélèvement (ANS/COL/REG05/V02/22).
- Etiquettes d’identification du don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée, aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau et
d’oxygène.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussée.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Fauteuils de prélèvement.
- Source d’oxygène.

68
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP03/ LA PHLEBOTOMIE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Chariots.
- Agitateurs limitateurs de poches.
- Automate d’aphérèse.
- Clampeuses soudeuses électriques.
- Portoirs pour tubes échantillons.
- Pince à clamper.
- Ciseaux.
- Conteneurs pour poches de sang.
- Potences.
- Plateaux à servir.
- Paravents.
6.3.2 Consommables
- Sparadrap.
- Conteneurs pour déchets.
- Sachets spécifiques aux DASRI et produits ménagers.
- Trousse à pharmacie voir (ANS/COL/MOP06/V02/22 : Vérification de la trousse
pharmacie).
- Poches à sang.
- Kits d’aphérèse
- Poches d’anticoagulant ACD-A
- Sérum physiologique
- Tubes échantillons
- Compresses.
- Désinfectant (Bétadine alcoolisée ou alcool à 70°C)
- Eau de javel
- Savon liquide
- Solution hydro-alcoolique
- Gants
- Garrots.
- Bandes à gaze.
6.4 Description
6.4.1 Hygiène de prélèvement
Voir fiche technique : ANS/COL/FICT01/V01/22 Hygiène de prélèvement.
6.4.2 Préparation de la poche à sang avant le prélèvement
- Poser la poche sur l’agitateur limitateur, plus bas que le point de la phlébotomie
(50 cm).
- Placer les tubulures au niveau de la clampeuse de l’automate de prélèvement.

69
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP03/ LA PHLEBOTOMIE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.3 Préparation de la zone de phlébotomie

- Choisir une veine assez grosse et ferme, de préférence dans la fosse antécubitale,
dans une zone exempte de lésions cutanées et de cicatrices en s’aidant d’un garrot.
- Désinfecter le point de phlébotomie de façon centrifuge avec une compresse imbibée
de désinfectant (en trois temps pendant au moins 30 secondes). Voir Fiche technique
: Hygiène de prélèvement (ANS/COL/FICT01/V01/22).
- Laisser la zone sécher complètement (pendant 30 secondes). Voir Fiche technique:
Hygiène de prélèvement (ANS/COL/FICT01/V01/22).
- Demander au donneur d’ouvrir et de fermer la main une ou deux fois.
6.4.4 Ponction veineuse
- Hygiène de prélèvement : Voir Fiche technique : Hygiène de prélèvement
(ANS/COL/FICT01/V01/22).
- Clamper la tubulure allant de l’aiguille de prélèvement vers la poche.
- Vérifier que les deux clamps de la poche sont fermés.
- Mettre un garrot et procéder à une ponction franche et directe de la veine.
- Introduire l’aiguille à un angle de 45° puis 15°.
- Enfoncer l’aiguille à 1 ou 2 centimètres à l’intérieur de la veine.
- Couvrir l'aiguille avec une compresse et la fixer à l'aide du sparadrap.
- Desserrer légèrement le garrot.
- Fixer la tubulure avec du sparadrap
- Ouvrir le clamp de la poche satellite,
- Remplir la poche satellite et clamper à la fin du remplissage.
- Ouvrir le clamp de la poche principale.
- Remplir les tubes échantillons à partir de la poche satellite (tubes sous vide) au
début du don.
- Vérifier que le sang circule et que l’aiguille de prélèvement est fonctionnelle.
- Demander au donneur d’ouvrir et de fermer lentement le poing toutes les 10-12
secondes pendant la collecte du sang.
- Si la première tentative de ponction a échoué, reporter le don à une date ultérieur en
renseignant l’information sur la fiche de prélèvement.
6.4.5 Fin de prélèvement
- Clamper la poche principale et la désolidariser de l’automate quand la quantité
programmée est atteinte.
- Enlever le garrot et dépiquer le donneur.
- Sécuriser l’aiguille (selon les recommandations du fournisseur) et la jeter dans un
conteneur spécifique.
- Laisser une compresse sèche sur le point de ponction et demander au donneur de

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP03/ LA PHLEBOTOMIE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

comprimer 2 à 3 minutes, bras allongé au niveau du point de ponction.

- Vérifier l’arrêt de saignement, maintenir avec une compresse et un sparadrap.
- Laisser le donneur au repos sur le fauteuil de prélèvement, s’assurer de la bonne
tolérance du don, le remercier et l’accompagner vers la salle de collation.

71
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/COL/MOP04/ LIEN DON/DONNEUR/REGLES D’ETIQUETAGE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/MOP04
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission de rédaction Commission de La Directrice Générale de

et d’actualisation validation l’Agence Nationale du Sang
Dr K.L OULD KABLIA

73
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/COL/MOP04/ LIEN DON/DONNEUR/REGLES D’ETIQUETAGE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Vérifier les différents documents relatifs au prélèvement de sang (manuel ou numérique).
- Préciser les règles d’étiquetage des poches de sang et des échantillons sanguins
au cours du prélèvement.
2. Domaine d’application
- Collecte fixe et mobile.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
5. Personnel concerné
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
- Médecin du don
6. Description de la procédure
6.1 Support d’informations : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche donneur de sang (ANS/COL/FIC02/V02/22).
- Fiche de prélèvement de sang total (ANS/COL/FIC03/V02/22).
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Registre des donneurs de sang total (ANS/COL/REG02/V02/22).
- Registre des donneurs de sang par aphérèse (ANS/COL/REG03/V02/22).
- Registre de prélèvement (ANS/COL/REG05/V02/22).
- Etiquettes d’identification du don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée, aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau et
d’oxygène.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussée.

74
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/COL/MOP04/ LIEN DON/DONNEUR/REGLES D’ETIQUETAGE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel : Chapitre vide.

6.4 Description
- Vérifier l’identité du donneur avec la fiche de prélèvement.
- Vérifier la correspondance des numéros entre cette fiche et le numéro du don de
l’étiquette.
- Etiqueter les poches et les deux tubes échantillons (pendant la phlébotomie).
- Sur chaque étiquette doivent être précisés, la date de prélèvement, et le numéro du
don.
- A la fin du prélèvement, placer les tubes dans le portoir et les poches dans les
conteneurs accompagnés des fiches de liaisons respectives.
- Vérifier la concordance entre les numéros des tubes, des poches et la fiche de liaison.
- Dépôt des poches de sang et des tubes correspondants au niveau des unités de
préparation et qualifications biologiques et accusé de réception de la fiche de liaison
après vérification de la concordance entre poches, tubes et fiche de liaison.
- En cas de prélèvement annulé ou interrompu, reporter l’information sur le registre et la
fiche de prélèvement et la fiche de liaison.

IMPORTANT
Un étiquetage commencé ne doit jamais être interrompu.

75
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP05/ PRISE EN CHARGE DES INCIDENTS LIES AU
V02/22 DON DU SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/MOP05
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP05/ PRISE EN CHARGE DES INCIDENTS LIES AU
V02/22 DON DU SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Assurer la prise en charge des donneurs présentant des incidents liés aux dons.
2. Domaine d’application
- Collecte de sang en site fixe et mobile.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
5. Personnel concerné
- Médecin du don.
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
- Personnel de la collation formé à la surveillance post don.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de prélèvement de sang total (ANS/COL/FIC03/V02/22).
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de prélèvement (ANS/COL/REG05/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau et
d’oxygène.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussée.
6.3 Matériel : Chapitre vide
6.4 Description
6.4.1 Devant les incidents indésirables suivants
 Mineurs
- Malaise.

78
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP05/ PRISE EN CHARGE DES INCIDENTS LIES AU
V02/22 DON DU SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Hématome.
- Douleur au point de ponction.
- Ponction artérielle accidentelle
- Saignement persistant.
 Majeurs
- Choc vagal.
- Choc hypovolémique.
- Convulsion.
- Lésions nerveuses.
- Signes d’hypocalcémie (Paresthésie péri buccale, digitale voire généralisée, goût
métallique, sensation de froid).
A/ Conduite à tenir en cas d’incidents mineurs
- Arrêter le prélèvement immédiatement.
- Retirer l’aiguille après avoir clamper la tubulure et assurer l’hémostase.
- Mettre le donneur en position déclive.
- Relever les membres inférieurs.
- Desserrer les vêtements.
- Rassurer le donneur.
- Contrôler la liberté des voies aériennes.
- Prévenir le médecin du don.
- Prendre sa tension artérielle.
B/ En cas d’incidents majeurs
Le médecin décide de la conduite à tenir :
- Mettre à disposition la trousse à pharmacie.
- Oxygénothérapie.
- Placer une voie d’abord et perfuser avec des solutés de
remplissage (macromolécules) si nécessaire.
- Surveiller les constantes hémodynamiques jusqu’à leur normalisation.
- Exceptionnellement, on peut être amené à avoir une action thérapeutique
plus importante et adaptée à l’incident.
- Laisser le donneur se reposer, le faire asseoir lentement, l’accompagner à
la collation et le garder sous surveillance discrète le temps nécessaire à
son total rétablissement.
C/ En cas d’aggravation de l’état général appeler le SAMU / protection civile
* Enregistrer l’incident sur la fiche de prélèvement, le registre de
prélèvement et la fiche d’anomalie.

79
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP05/ PRISE EN CHARGE DES INCIDENTS LIES AU
V02/22 DON DU SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.2 Mesures à prendre devant les différents cas d’incidents

Type Action

Douleur au point de ponction - Vérifier la position de l’aiguille.

- Arrêter le prélèvement.
Hématome
- Surélever le membre.
- Mettre un bandage alcoolisé.
Névralgie avec anesthésie
du bras ou des bouts de
doigts (lésions nerveuses) - Arrêter le prélèvement.

- Arrêt immédiat du prélèvement.

- Assurer l’hémostase par une compression
Ponction artérielle accidentelle ferme et ininterrompue par une tierce
personne pendant au moins vingt minutes.
- Garder le donneur sous surveillance.

- Assurer l’hémostase.
Saignement persistant - Garder le donneur sous surveillance.
- Faire un bilan d’hémostase.

- Arrêter le prélèvement.
- Rassurer le donneur.
Sensation de malaise - Surélever les membres.
- Réhydrater le donneur (sérum salé).
- Contrôler la tension artérielle.

Fourmillements, crises - Arrêter le don.

tétanie (hypocalcémie) - Suppléer en calcium.

- Arrêter le prélèvement.
Convulsions
- CAT devant une convulsion.

80
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP05/ PRISE EN CHARGE DES INCIDENTS LIES AU
V02/22 DON DU SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Position déclive.
- Membres inferieurs surélevés.
Choc vagal - Contrôler la tension artérielle.
- Si vomissement : position latérale +
bassin réniforme.
- Repos prolongé du donneur.
- Surveillance stricte du donneur.

- Diminuer les débits de la pompe

d’anticoagulant, de la pompe de retours et/ou
Incidents liés à l’anticoagulant mettre les pompes en pauses (Manuel
(Aphérèse) d’utilisation de la machine).
- Si les signes deviennent contraignants pour le
donneur, arrêter le prélèvement.

Nb : Devant tous types d’incidents mineur ou majeur, le médecin du don doit être
obligatoirement avisé.

81
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/COL/MOP06/ VERIFICATION DE LA TROUSSE A PHARMACIE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/MOP06
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date :04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

83
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/COL/MOP06/ VERIFICATION DE LA TROUSSE A PHARMACIE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Vérifier le contenu de la trousse à pharmacie nécessaire à la prise en charge des
incidents lors d’un don de sang.
2. Domaine d’application
- Collecte de sang en site fixe et mobile.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- IPP : Inhibiteur de la Pompe à Protons.
5. Personnel concerné
- Médecin du don.
- Infirmier de prélèvement.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Fiche de vérification de la trousse à pharmacie (ANS/COL/FIC07/V02/22).
6.2. Locaux : Chapitre vide
6.3. Matériel ; Chapitre vide
6.4. Description
6.4.1 Vérification du contenu de la trousse à pharmacie
- Vérifier le contenu de la trousse à pharmacie conformément à la liste ci-jointe avant
chaque collecte.
- Si le contenu n’est pas conforme à cette liste prévenir le responsable de la Collecte et
le responsable de l’unité de don de sang.
6.4.2 Vérification des dates de péremption
- Vérifier la date de péremption de tous les médicaments ainsi que le consommable.
- Pour les composants qui ne possèdent pas de date de péremption, (certains
consommables), inscrire la date du jour de réception du lot plus un an, cette nouvelle
date deviendra la date de péremption.
- Si la date de péremption est dépassée, retirer le produit et prévenir le responsable de
la collecte et le responsable de l’unité de don de sang.
6.4.3 Périodicité
- La vérification de la trousse à pharmacie s’effectue une fois par jour.
- L’opérateur inscrit son nom et signe sur la fiche de vérification.

84
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/COL/MOP06/ VERIFICATION DE LA TROUSSE A PHARMACIE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.4 Emplacement
- Doit être dans la salle de prélèvement mobile ou fixe.
- La fiche de vérification doit être à la portée du médecin du don et du personnel de
prélèvement chargé de la vérification.
6.4.5 Liste des médicaments et du consommable de la trousse à pharmacie
a) Médicaments
- Calcium
- Antalgique
- Corticoïde (hydrocortisone 100mg injectable ou solumedrol).
- IPP.
- Anti émétique.
- Valium 10 mg
- Magnésium
- Adrénaline
b) Liquides de remplissage
- Plasmagel.
- Sérum Glucosé isotonique 5%.
- Sérum Glucosé hypertonique 10% et 30%.
- Sérum Salé isotonique 0,9%.
c) Consommables
- Perfuseur.
- Seringues jetables de 5 cc et de 10 cc.
- Dispositifs de prélèvement de sang.
- Aiguilles.
- Compresse.
- Bande à gaze.
- Coton.
- Désinfectant Bétadine alcoolisée ou Alcool à 70°C.
- Sparadrap.
d) Equipements
- Tensiomètre.
- Stéthoscope.

85
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP07/
V02/22
PRELEVEMENT PAR APHERESE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/COL/MOP07
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus don du sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date :04/01/2022 au 09/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
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87
 ANS/COL/MOP06/ VERIFICATION DE LA TROUSSE A PHARMACIE
V02/22

AGENCE NATIONALE DU SANG

Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP07/
V02/22
PRELEVEMENT PAR APHERESE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Définir les règles de bonne pratique de prélèvement par aphérèse.
2. Domaine d’application
- Collecte en site fixe.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Manuel du médecin du don de sang ANS/2020.
4. Définitions et abréviations :
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- DASRI : Déchets d’Activité des Services à Risque Infectieux.
- IDE : Infirmier Diplômé d’Etat.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- Amorçages par l’anticoagulant : Phase de rinçage automatique du kit par l’ACD-A.
- Poches ACD-A : Poches d’Anticoagulant à l’Acide Citrate Dextrose additionnée
d’Adénine.
5. Personnel concerné :
- IDE et/ou LSP formés et qualifiés en transfusion sanguine.
- Médecin du don.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de prélèvement par aphérèse (ANS/COL/FIC04/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de prélèvement (ANS/COL/REG05/V02/22).
- Etiquettes d’identification du don de sang (ANS/COL/ETI01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La salle de prélèvement doit être propre, éclairée, aérée.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau et
d’oxygène.
- Doivent être agréables, facilement accessibles et de préférence situés au rez de
chaussée.

88
ANS/COL/MOP06/ VERIFICATION DE LA TROUSSE A PHARMACIE
V02/22

AGENCE NATIONALE DU SANG

Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP07/
V02/22
PRELEVEMENT PAR APHERESE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Fauteuils de prélèvement.
- Source d’oxygène.
- Chariots.
- Automate d’aphérèse.
- Clampeuses soudeuses électriques.
- Portoirs pour tubes échantillons.
- Pince à clamper.
- Ciseaux.
- Conteneurs pour poches de sang.
- Plateaux à servir.
- Paravents.

6.3.2 Consommables
-
Sparadrap.
-
Conteneurs pour déchets.
-
Sachets spécifiques aux DASRI et produits ménagers.
-
Trousse à pharmacie voir (ANS/COL/MOP06/V02/22 : Vérification de la trousse
pharmacie).
- Kits d’aphérèse
- Dispositifs de prélèvement de sang.
- Poches d’anticoagulant ACD-A.
- Sérum physiologique
- Tubes échantillons
- Compresses.
- Désinfectant (Bétadine alcoolisée ou alcool à 70°C)
- Eau de javel
- Savon liquide
- Solution hydro-alcoolique
- Gants
- Garrots.
- Bandes à gaze.
ANS/COL/MOP06/
V02/22
6.4 Description
6.4.1 Avant l’arrivée des donneurs
- Vérifier la disponibilité et le bon fonctionnement du matériel.
- Vérifier la date d’expiration de tous les consommables.

89
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP07/
V02/22
PRELEVEMENT PAR APHERESE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Respecter les délais d'utilisation des kits après ouverture de leur emballage, de leurs
installations et après leurs amorçages par l’anticoagulant.
6.4.2 Prélèvement du donneur
a) Préparation de l’automate d’aphérèse et installation du kit :
- Mettre l’automate sous tension et le laisser effectuer les vérifications (auto test)
nécessaires (Manuel d’utilisation de la machine).
- Préparer le kit et vérifier l'intégrité du dispositif et de la poche d’anticoagulant.
- Installer correctement le kit et commencer l’amorçage de l’anticoagulant (Manuel
d’utilisation de la machine).
b) Lavage des mains et antisepsie :
- Se référer à la Fiche technique : Hygiène de
prélèvement (ANS/COL/FICT01/V01/22).

c) Installation du donneur :
- Installer le donneur sur le fauteuil de prélèvement.
- Vérifier la fiche de prélèvement par aphérèse.
- Contrôler l’identité du donneur : en lui demandant de décliner son nom et prénom et
sa date de naissance.
- Vérifier que le numéro de don sur le jeu d'étiquettes correspond à celui de la fiche
de prélèvement par aphérèse.
- Vérifier l'état veineux du bras du donneur et l’installer en fonction du bras sur lequel
doit être pratiqué le geste de phlébotomie.
- Prendre connaissance des consignes médicales (en fonction de la demande).
- Introduire les paramètres biologiques et physiologiques du donneur (voir manuel
d’utilisation du séparateur).
d) Préparation du site de ponction et phlébotomie :
 Désinfection du site de phlébotomie :
Respecter les consignes selon la Fiche technique : Hygiène de
prélèvement(ANS/COL/FICT01/V01/22).
 Ponction veineuse et prélèvement :
- Ponctionner de façon franche et directe la veine :
Voir (ANS/COL/MOP03/V02/22) : La phlébotomie.
- Apposer les étiquettes sur les poches Voir (ANS/COL/MOP04/V02/22) : Lien
Don/Donneur / Règles d’étiquetage.
e) Surveillance du donneur :
- Le donneur doit être surveillé pendant toute la durée du prélèvement ; voir
(ANS/COL/MOP05/V02/22) : Prise en charge des incidents liés au don.

90
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/COL/MOP07/
V02/22
PRELEVEMENT PAR APHERESE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Faire des ajustements sur la machine au cours du prélèvement, en fonction des

réactions éventuelles du donneur. (Manuel d’utilisation de la machine)
6.4.3 Fin du don
L’automate annonce la fin du don lorsque la quantité programmée est atteinte :(Voir
manuel d’utilisation de l’automate d’aphérèse).
- Débrancher le donneur : en suivant les instructions proposées par la machine (manuel
d’utilisation de la machine).
 Enlever le garrot.
 Dépiquer en faisant coulisser l’aiguille, laisser une compresse sèche sur le point
de ponction et demander au donneur de comprimer 2 à 3 minutes,
- Vérifier que le saignement s’est arrêté, maintenir une compresse avec une bande à
gaze.
- Laisser le donneur au repos sur le fauteuil de prélèvement, s’assurer de la bonne
tolérance du don, le remercier et l’accompagner vers la salle de collation.
- Désolidariser la poche à l’aide d’une soudeuse.
6.4.4 Prise en charge des fiches, des poches et des tubes
a) Traitement de la fiche de prélèvement :
Noter sur la fiche de prélèvement par aphérèse :
- Les données post don (tableau récapitulatif du don).
- Les incidents survenus au cours de la séance.
- L’identification du préleveur.
b) Traitement des poches collectées :
- Souder la tubulure des poches en faisant trois soudures avec un écart d’environ
02 centimètres.
- Vérifier l’intégrité des soudures.
- Placer les poches collectées selon les recommandations du manuel d’utilisation
de la machine accompagnées de leurs fiches de liaison.

NB : Devant la survenue de tout incident, le reporter sur la fiche de prélèvement.

91
 ANNEXE
SUPPORTS D'INFORMATION

PROCESSUS DON DU SANG

93
94
 Structure de Transfusion Sanguine
……………………………….…….. QUESTIONNAIRE MEDICAL TYPE

Date :

Numéro d’identification du candidat au don de sang :

Nom (jeune fille) :

Prénoms : Épouse de

Né (e) le : à

Etat civil :

Adresse :

Téléphone :

A. Etat de santé pour pouvoir donner du sang :

1. Vous sentez-vous en forme pour donner votre sang ? OUI □ NON □

2. Avez-vous consulté un médecin récemment ? OUI □ NON □

3. Avez-vous pris (ou prenez-vous actuellement) des médicaments (Même à titre préventif) OUI □ NON □
Si oui, quand et lesquels ? …………………………………………………............
4. Avez-vous une maladie qui nécessite un suivi médical régulier ? OUI □ NON □
Si oui, laquelle ?......................................................................................................
5. Avez-vous eu récemment des saignements (du nez, des hémorroïdes, des règles abondantes) ?
OUI □ NON □

6. Avez-vous été traité(e) pour un psoriasis ? OUI □ NON □

7. Avez-vous été traité(e) pour l’acné ? OUI □ NON □

8. Avez-vous été vacciné(e) ? OUI □ NON □

Si oui, quand et lesquels ?...................................................................................
9. Avez-vous prévu une activité avec efforts physiques (sportive, professionnelle…) juste après votre don ?
OUI □ NON □ JE NE SAIS PAS □
Si oui, laquelle ? ………………………………………………………………………….
10. Avez-vous déjà été opéré(e) ou hospitalisé(e) ? OUI □ NON □
11. Avez-vous eu de l’asthme, une réaction allergique importante, notamment lors d’un soin médical ?
OUI □ NON □

12. Avez-vous une maladie de la coagulation du sang ? OUI □ NON □

ANS/COL/FIC01/V02/22
95
13. Avez-vous eu une anémie, un manque de globules rouges, un traitement pour compenser un manque de
fer ? OUI □ NON □

14. Avez-vous eu un diagnostic de cancer ? OUI □ NON □

15. Avez-vous eu un accident vasculaire cérébral, un accident ischémique transitoire, des crises d’épilepsie,
des convulsions (en dehors de l’enfance), des syncopes répétées ? OUI □ NON □
Pour les femmes :
16. Etes-vous actuellement enceinte ou l’avez-vous été dans les 6 derniers mois ? OUI □ NON □
Précisez le nombre de grossesses que vous avez eu au cours de votre vie : ……………
17. Allaitez-vous ou l’avez-vous fait dans les 6 derniers moi ? OUI □ NON □
B. Risques de transmission d’agent infectieux par le sang :
B1- Risques liés aux voyages et séjours à l’étranger :
18. Avez-vous voyagé ? OUI □ NON □

Si oui, précisez : Afrique subsaharienne □, Amérique Centrale ou du Sud □, Autre □

Si autre, précisez-le(s) pays : ……………………………………………………………….
19. Avez-vous déjà fait une crise de paludisme (malaria) ou une fièvre inexpliquée pendant ou après un séjour
dans un pays où sévit le paludisme ? OUI □ NON □

20. Avez-vous séjourné (plus d’un an cumulé) au Royaume-Uni entre 1980 et 1996 ? OUI □ NON □
B2- Risques liés à des soins reçus ou à certains antécédents médicaux :
21. Etes-vous allé(e) chez le dentiste dans les 7 derniers jours ? OUI □ NON □

22. Avez-vous eu de la fièvre (> 38 °C), un problème infectieux dans les 15 derniers jours ? OUI □ NON □

23. Avez-vous eu une lésion ou une infection de la peau dans les 15 derniers jours ? OUI □ NON □

24. Avez-vous été en contact avec une personne ayant une maladie contagieuse ? OUI □ NON □
Si oui, quelle maladie ? et quand ? …………………………………………………………………
25. Avez-vous fait un tatouage, un piercing (y compris percement d’oreilles), hijama ou acupuncture dans les 4
derniers mois ? OUI □ NON □
26. Avez-vous été en contact avec du sang humain par piqûre, plaie ou projection dans les 4 derniers mois ?
OUI □ NON □
27. Avez-vous eu une endoscopie (fibroscopie, gastroscopie, coloscopie…) dans les 4 derniers mois ?
OUI □ NON □

28. Avez-vous eu des infections urinaires au cours des 12 derniers mois ? OUI □ NON □
Au cours de votre vie :
29. Avez-vous déjà reçu une transfusion sanguine ou une greffe d’organe ? OUI □ NON □

30. Avez-vous eu une greffe de cornée ou de dure-mère ? OUI □ NON □

31. Avez-vous reçu un traitement par hormone de croissance avant 1989 ? OUI □ NON □
B3- Risques de transmission d’agents infectieux liés à une exposition par voie sanguine ou sexuelle :
32. Avez-vous déjà été testé positif pour le VIH (virus du SIDA), pour le VHB (virus de l’hépatite B), pour le
VHC (virus de l’hépatite C) ou le virus HTLV ? OUI □ NON □

33. A votre connaissance, une personne de votre entourage est-elle porteuse de l’hépatite B ? OUI □ NON □

ANS/COL/FIC01/V02/22
96
34. Avez-vous déjà utilisé, par voie injectable, des drogues ou des substances dopantes non prescrites par
un médecin (même une seule fois) dans les quatre derniers mois ? OUI □ NON □

35. Avez-vous eu des rapports sexuels non protégés avec des personnes à risque avec plus d’un (une)
partenaire sexuel(le) durant les 4 derniers mois (pratiques à risque) ? OUI □ NON □

 Aptitude au don de sang : OUI □ NON □

 Contre-indication définitive : OUI □ NON □ - Raison

 Contre-indication temporaire : OUI □ NON □

Durée :

Identité du médecin du don

et signature

ANS/COL/FIC01/V02/22
97
 ‫اﺳﺘﺒﯿﺎن طﺒﻲ ﻧﻤﻮذﺟﻲ‬ ‫ھﯿﻜﻞ ﺣﻘﻦ اﻟﺪم‬

‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫اﻟﺘﺎرﯾﺦ‪:‬‬

‫رﻗﻢ ﺗﻌﺮﯾﻒ اﻟﻤﺘﺮﺷﺢ ﻟﻠﺘﺒﺮع ﺑﺎﻟﺪم ‪:‬‬
‫اﻟﻠﻘﺐ‪:‬‬
‫زوﺟﺔ‪:‬‬ ‫اﻻﺳﻢ‪:‬‬
‫ﺑــ‪:‬‬ ‫اﻟﻤﻮﻟﻮد)ة( ﻓﻲ‪:‬‬
‫اﻟﺤﺎﻟﺔ اﻟﻤﺪﻧﯿﺔ‪:‬‬
‫اﻟﻌﻨﻮان‪:‬‬
‫رﻗﻢ اﻟﮭﺎﺗﻒ‪:‬‬

‫أ‪-‬اﻟﺤﺎﻟﺔ اﻟﺼﺤﯿﺔ اﻟﺘﻲ ﺗﺴﻤﺢ ﻟﻠﺘﺒﺮع ﺑﺎﻟﺪم‪:‬‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-1‬ھل ﺗﺷﻌر أﻧك ﻓﻲ ﺣﺎﻟﺔ ﺟﯾدة ﻛﻲ ﺗﺗﺑرع ﺑدﻣك؟‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫‪‬‬ ‫ﻧﻌم‬ ‫‪-2‬ھل ﻗﻣت ﺑزﯾﺎرة طﺑﯾب ﻣؤﺧرا؟‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-3‬ھل اﺧذت )او ﺗﺄﺧذ ﺣﺎﻟﯾﺎ( أدوﯾﺔ )ﺣﺗﻰ وﻟو ﻟﻠوﻗﺎﯾﺔ(؟‬

‫إذا ﻛﺎﻧت اﺟﺎﺑﺗك ﻧﻌم‪ ،‬ﻣﺗﻰ وﻣﺎھﻲ؟ ‪........................................................‬‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-4‬ھل ﺗﻌﺎﻧﻲ ﻣن ﻣرض ﯾﺳﺗوﺟب ﻓﺣص طﺑﻲ دوري؟‬

‫إذا ﻛﺎﻧت اﺟﺎﺑﺗك ﻧﻌم‪ ،‬ﻣﺎ ھو؟ ‪........................................................‬‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-5‬ھل ﻋﺎﻧﯾت ﻣن ﻧزﯾف ﻣؤﺧرا )ﻣن اﻻﻧف‪ ،‬اﻟﺑواﺳﯾر‪ ،‬دورة ﺷﮭرﯾﺔ ﻏزﯾرة(‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-6‬ھل ﻛﻧت ﺗﻌﺎﻟﺞ ﻣن اﻟﺻدﻓﯾﺔ؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-7‬ھل ﻛﻧت ﺗﻌﺎﻟﺞ ﺣب اﻟﺷﺑﺎب؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-8‬ھل ﺗﻠﻘﯾت ﺗﻠﻘﯾﺢ ‪:‬‬

‫إذا ﻛﺎﻧت اﺟﺎﺑﺗك ﻧﻌم‪ ،‬ﻣﺗﻰ وﻣﺎھﻲ اﻟﻠﻘﺎﺣﺎت‪ ،‬اﻟﻣﺄﺧوذة؟ ‪...................................‬‬

‫ﻻ أدري‪‬‬ ‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪ -9‬ھل ﺳﺗﻘوم ﺑﻧﺷﺎط ﯾﺳﺗوﺟب ﺟﮭد ﺑدﻧﻲ )رﯾﺎﺿﻲ‪ ،‬ﻣﮭﻧﻲ‪ (.....‬ﻣﺑﺎﺷرة ﺑﻌد اﻟﺗﺑرع ﺑﺎﻟدم؟‬

‫إذا ﻛﺎﻧت اﺟﺎﺑﺗك ﻧﻌم‪ ،‬ﻣﺎ ھو‪............................................................................ :‬‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-10‬ھل ﺧﺿﻌت ﻟﻌﻣﻠﯾﺔ ﺟراﺣﯾﺔ أو ﻣﻛﺛت ﻓﻲ اﻟﻣﺳﺗﺷﻔﻰ؟‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-11‬ھل ﻋﺎﻧﯾت ﻣن اﻟرﺑو أو ﺣﺳﺎﺳﯾﺔ ﻣﻔرطﺔ ﺧﺎﺻﺔ أﺛﻧﺎء ﻋﻼج طﺑﻲ؟‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-12‬ھل ﺗﻌﺎﻧﻲ ﻣن ﻣرض ﺗﺧﺛر اﻟدم؟‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫‪-13‬ھل ﻋﺎﻧﯾت ﻣن ﻓﻘر اﻟدم‪ ،‬ﻧﻘص ﻛرﯾﺎت اﻟدم اﻟﺣﻣراء أو اﺧذت ﻋﻼج ﻟﺗﻌوﯾض ﻧﻘص اﻟﺣدﯾد؟ ﻧﻌم ‪‬‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-14‬ھل ﺗم ﺗﺷﺧﯾص ﺳرطﺎن ﻟدﯾك؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫‪-15‬ھل ﻋﺎﻧﯾت ﻣن ﺟﻠطﺔ دﻣﺎﻏﯾﺔ‪ ،‬ﻧوﺑﺔ دﻣﺎﻏﯾﺔ ﻣؤﻗﺗﺔ ‪ ،‬ﺻرع‪ ،‬ﺗﺷﻧﺟﺎت )ﺧﺎرج ﻣرﺣﻠﺔ اﻟطﻔوﻟﺔ(‪ ،‬ﻓﻘدان اﻟوﻋﻲ اﻟﻣﺗﻛرر؟ ﻧﻌم ‪‬‬

‫اﻟﻨﺴﺎء‪:‬‬
‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-16‬ھل أﻧت ﺣﺎﻣل ﺣﺎﻟﯾﺎ أو ﻛﻧت ﺣﺎﻣﻼ ﻓﻲ اﻟﺳت أﺷﮭر اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ؟‬

‫ﺣددي ﻋدد ﻣرات اﻟﺣﻣل‪...................................................................................................... .:‬‬

‫‪-17‬ھل اﻧت ﺗرﺿﻌﯾن ﺣﺎﻟﯾﺎ أو أرﺿﻌت ﺧﻼل اﻟﺳت أﺷﮭر اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ؟‬

‫‪ANS/COL/FIC08/V01/22‬‬
‫‪99‬‬
 ‫ب ‪ -‬أﺧطﺎر اﻧﺗﻘﺎل اﻟﻌدوى ﻋن طرﯾﻖ اﻟدم‬

‫ب ‪- 1‬أﺧطﺎر ﻣرﺗﺑطﺔ ﺑﺎﻟﺳﻔر أو اﻟﻣﻛوث ﻓﻲ اﻟﺧﺎرج‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-18‬ھل ﺳﺎﻓرت؟‬

‫*إذا ﻛﺎﻧت إﺟﺎﺑﺗك ﻧﻌم‪ ،‬ﺣدد‪ :‬اﻓرﯾﻘﯾﺎ ﺟﻧوب اﻟﺻﺣراء اﻟﻛﺑرى‪ ‬أﻣرﯾﻛﺎ اﻟوﺳطﻰ أو اﻟﺟﻧوﺑﯾﺔ ‪+ ‬أﺧرى ‪‬‬

‫*اذا ﻛﺎﻧت اﺟﺎﺑﺗك أﺧرى ﺣدد أﯾن‪..................................... :‬‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-19‬ھل ﻋﺎﻧﯾت ﻣن اﻟﻣﻼرﯾﺎ أو ﺣﻣﻰ ﻣﺟﮭوﻟﺔ اﻟﺳﺑب أﺛﻧﺎء او ﺑﻌد اﻟﻣﻛوث ﻓﻲ ﺑﻠد ﺗﻧﺗﺷر ﻓﯾﮫ اﻟﻣﻼرﯾﺎ؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-20‬ھل ﻣﻛﺛت )أﻛﺛر ﻣن ﺳﻧﺔ ﺑﺎﻟﺗراﻛم( ﻓﻲ اﻟﻣﻣﻠﻛﺔ اﻟﻣﺗﺣدة ﻣﺎ ﺑﯾن ‪1980‬و‪1996‬؟‬

‫ب ‪ -2‬اﺧطﺎر ﻣرﺗﺑطﺔ ﺑﺎﻟﻌﻼﺟﺎت اﻟﻣﺗﻠﻘﯾﺔ أو ﺑﻌض اﻟﺳواﺑﻖ اﻟطﺑﯾﺔ‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-21‬ھل ﻗﻣت ﺑﻔﺣص ﻟدى طﺑﯾب اﻻﺳﻧﺎن ﺧﻼل ‪ 7‬أﯾﺎم اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-22‬ھل اﺻﺑت ﺑﺣﻣﻰ ﻓوق )‪ (38°‬او ﺣﺎﻟﺔ ﻣﻌدﯾﺔ ﺧﻼل ‪ 15‬ﯾوم اﻷﺧﯾرة؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-23‬ھل ﻋﺎﻧﯾت ﻣن ﺟرح أو ﻋدوى اﻟﺟﻠد ﺧﻼل ‪ 15‬ﯾوم اﻷﺧﯾرة؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-24‬ھل ﻛﻧت ﻓﻲ اﺣﺗﻛﺎك ﻣﻊ ﺷﺧص ﻟدﯾﮫ ﻣرض ﻣﻌدي؟‬

‫*إذا ﻛﺎﻧت إﺟﺎﺑﺗك ﺑﻧﻌم‪ ،‬ﻣﺎ ھو اﻟﻣرض وﻣﺗﻰ؟ ‪.........................‬‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-25‬ھل ﻗﻣت ﺑوﺷم‪ ،‬ﺛﻘب )ﺣﺗﻰ اﻷذن( أو ﺣﺟﺎﻣﺔ أو اﺑر ﺻﯾﻧﯾﺔ ﺧﻼل ‪ 4‬أﺷﮭر اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ؟‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-26‬ھل ﻛﻧت ﻓﻲ اﺣﺗﻛﺎك ﻣﻊ دم ﺑﺷري ﻋن طرﯾﻖ إﺑرة‪ ،‬ﺟرح أو ﺗﻧﺎﺛر ﺧﻼل ‪ 4‬أﺷﮭر اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-27‬ھل ﺧﺿﻌت ﻟﻠﻔﺣص ﺑﺎﻟﻣﻧظﺎر ﺧﻼل ‪ 4‬أﺷﮭر اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-28‬ھل ﻋﺎﻧﯾت ﻣن ﻋدوى اﻟﻣﺳﺎﻟك اﻟﺑوﻟﯾﺔ ﻣﺗﻛررة ﺧﻼل ‪ 12‬ﺷﮭر اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ؟‬

‫ﺧﻼل ﺣﯾﺎﺗك‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪ -29‬ھل ﺗﻠﻘﯾت ﺣﻘن دم أو زرع ﻋﺿو؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪- 30‬ھل ﺧﺿﻌت ﻟزرع ﻗرﻧﯾﺔ‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-31‬ھل ﺧﺿﻌت ﻟﻠﻌﻼج ﺑﮭرﻣون اﻟﻧﻣو ﻗﺑل ‪ 1989‬؟‬

‫‪3‬‬
‫ب ‪ -‬أﺧطﺎر اﻧﺗﻘﺎل ﻟﻌدوى ﻋن طرﯾﻖ اﻟدم او اﻟﺟﻧس‬

‫‪-32‬ھل ﻛﺎن ﺗﺣﻠﯾﻠك اﺟﺎﺑﻲ ﻟﻔﺣص اﻟﺳﯾدا )‪ ،(VIH‬اﻟﺗﮭﺎب اﻟﻛﺑد اﻟﻔﯾروﺳﻲ ب )‪ (VHB‬اﻟﺗﮭﺎب اﻟﻛﺑد اﻟﻔﯾروﺳﻲ ج )‪ (VHC‬او ﻓﯾروس ‪HTLV‬؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬ ‫‪-33‬ھل ﺗﻌرف ﺷﺧص ﻣن ﻣﺣﯾطك ﺣﺎﻣل ﻟﻔﯾروس اﻟﺗﮭﺎب اﻟﻛﺑد اﻟﻔﯾروﺳﻲ ب؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫‪ -34‬ھل اﺳﺗﻌﻣﻠت ﻣﺧدرات أو ﻣواد ﻣﻧﺷطﺔ ﺑدون وﺻﻔﺔ طﺑﯾﺔ )وﻟو ﻟﻣرة واﺣدة( ﻋن طرﯾﻖ اﻻﺑر ﺧﻼل ‪ 4‬أﺷﮭر اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ؟ ﻧﻌم ‪‬‬

‫‪-35‬ھل اﻗﻣت ﻋﻼﻗﺎت ﺟﻧﺳﯾﺔ ﻏﯾر ﻣﺣﻣﯾﺔ ﻣﻊ اﺷﺧﺎص ﻣﺷﺑوھﯾن ﻣﻊ أﻛﺛر ﻣن ﺷرﯾك)ة( ﺟﻧﺳﻲ )ة( ﺧﻼل ‪ 4‬أﺷﮭر اﻟﻣﺎﺿﯾﺔ )ﻣﻣﺎرﺳﺎت ﺧطﯾرة(؟‬

‫ﻻ‪‬‬ ‫ﻧﻌم ‪‬‬

‫ﻻ ‪‬‬ ‫‪‬‬ ‫‪ ‬اﻟﻘدرة ﻋﻠﻰ اﻟﺗﺑرع ﺑﺎﻟدم‪ ------:‬ﻧﻌم‬

‫‪ -‬اﻟﺳﺑب‪:‬‬ ‫‪‬‬ ‫‪ ‬ﻣﺎﻧﻊ ﻧﮭﺎﺋﻲ‬
‫‪‬‬ ‫‪ ‬ﻣﺎﻧﻊ ﻣؤﻗت‬

‫‪-‬اﻟﻣدة‪:‬‬

‫ھوﯾﺔ طﺑﯾب ﺟﻣﻊ اﻟدم واﻣﺿﺎءه‪:‬‬

‫‪ANS/COL/FIC08/V01/22‬‬
‫‪100‬‬
 Structure de Transfusion Sanguine :
…….……………………………….. FICHE DONNEUR DE SANG

IDENTIFIANT DONNEUR :

Nom, Prénom (s) :

Nom de jeune fille :
Né (e) le : à
Adresse domicile :
Groupe ABO :
Tel : E-mail :
Rhésus :
Adresse professionnelle :

Phénotype :
Tel : E-mail :

Type
N° d’identification du
Date TA Poids de Bilan Contre-indications au don et Observations
don
don

ANS/COL/FIC02/V02/22
101
 Type
N° d’identification du
Date TA Poids de Bilan Contre-indications au don et Observations
don
don

ANS/COL/FIC02/V02/22
102
Structure de Transfusion Sanguine :
…………………………………………. FICHE DE PRELEVEMENT DE SANG TOTAL

Date : Identifiant donneur :

Nom : Prénoms :

Sexe : masculin Féminin

Né (e) : Le à
Type de donneur : Régulier Familial Occasionnel

Date du dernier don :

TA : pouls : poids : Volume à prélever :

Type de poches : Double Triple Quadruple

Examens complémentaires : FNS : Nom et signature du médecin

Autre :

Prélèvement
Heure de prélèvement Durée de prélèvement Nombre et type de tubes prélevés
≤ à 10 min. ˃ à 10 min. Sec : EDTA : AUTRE

Réaction au cours du don

malaise
choc vagal
choc hypovolémie
convulsion
hématome
ponction artérielle accidentelle
saignement persistant

Autre :

Nom et signature du préleveur

ANS/COL/FIC02/V02/22
ANS/COL/FIC03/V02/22
103
 Structure de Transfusion sanguine FICHE DE PRELEVEMENT PAR APHERESE
IDENTIFIANT DONNEUR : Date :……/……/………….
Nom, Prénom(s) :
NUMERO DU DON
Nom de jeune fille : (Coller l’étiquette)
Né(e) le : à:
Adresse domicile :
Tél :

er
Type de donneur : 1 Don Occasionnel Régulier Compensation Date du dernier don / /

Bilan pré-don
GS Plaquettes Ht Hb Globules Globules
Rh Rouges Blancs

Paramètres physiologiques du donneur

Poids (kg) Taille (cm) TA (mm Hg)

Produit à collecter
Plaquettes simples Plasma simple Plaquettes/Plasma Autre
฀ ฀ ฀

Type de machine :
Trima Accel MCS+ COM TEC AMICUS Autre
฀ ฀ ฀ ฀

Type de kit de prélèvement : Réf ; Lot Type d’anticoagulant

Séance de prélèvement :
Durée (mn) Heure de début Heure fin du don
: :

Donneur (valeur post don)

Vol Sanguin Total (ml) Vol Sanguin Traité (ml) Vol AC retourné au donneur (ml) Tx Pltes Tx Ht Tx Hb

Produits collectés
Produits Volume produit (ml) Volume Anti Coagulant (ml) Taux (Rendement) x1011
Plaquettes
Plasma
Globules Rouges

Signature du Médecin

Partie à remplir par le Préleveur :

Incidents - Commentaires :
฀ Malaise ฀ Fourmillements Signature du Préleveur :
฀ Choc vagal ฀ Nausées
฀ Choc hypovolémie ฀ Goût métallique
฀ Convulsion ฀ Vomissements
฀ Hématome ฀ Sensation de froid
฀ Ponction artérielle accidentelle ฀ Crampes musculaires
฀ Saignement persistant ฀ Autre

ANS/COL/FIC04/V02/22 104
 FICHE TECHNIQUE
HYGIENE DE PRELEVEMENT

 Asepsie des mains

- Lavage simple des mains avec de l’eau et du savon liquide.
- Friction avec une solution hydro alcoolique avant chaque phlébotomie
- L’asepsie des mains est obligatoire avant la palpation de la veine du donneur

 Préparation de la zone de phlébotomie

- Porter des gants
- Désinfecter la zone de phlébotomie de façon centrifuge, en 03 temps avec des compresses
imbibées de Bétadine alcoolisée ou alcool à 70°C

Schéma de désinfection de la zone de phlébotomie

- Couvrir la zone désinfectée avec une compresse avant le prélèvement
- Ne pas revenir sur la peau désinfectée.

ANS/COL/FICT01/V01/22
105
 DEMANDE DE TRANSFUSION AUTOLOGUE PROGRAMMEE
(Copie service demandeur)

Etablissement de santé :
Service demandeur :

Nom du malade : ___________________________________________________________________

Prénoms du malade: ________________________________________________________________

Date de naissance : _______ /Jour ________ /Mois_________ /Année

Sexe : Masculin ❑ Féminin ❑

Téléphone : Domicile : ________________________ mobile :____________________________

Adresse : __________________________________________________________________________

Numéro d’identification (s’il y a lieu):____________________________________________________

Type d’intervention : _______________________________________________________________

Date de l’intervention : ______________________________________________________________

Volume des PSL demandés : __________________________________________________________

Nombre d’unité de plaquettes demandés_______________________________________________

Composants requis : Culot globulaire❑ Sang total ❑

❑ Autre (spécifier): _________________________________________________________________

Nom du médecin traitant : ___________________________________________________________

Nom de chirurgien si différent _________________________________________________________

Antécédents médicaux (commentaires du médecin prescripteur) :

________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________

Examens complémentaires :

J’ai prescris un supplément de fer: ❑ Oui ❑ Non

-Si femme mastectomisée, autorisez-vous le prélèvement du même côté que l’évidement ganglionnaire
lorsqu’il n’y a pas d’autre accès veineux sur le bras opposé à la mastectomie? ❑ Oui ❑ Non

Date : Signature du médecin prescripteur :

Date :……………… Avis du médecin responsable de la structure de transfusion sanguine :

ANS/COL/FIC09/V01/22
106
 CALENDRIER DE PRELEVEMENT DE LA TRANSFUSION AUTOLOGUE
PROGRAMMEE

Nom : ___________________________________________________________________

Prénoms : ________________________________________________________________

Date de naissance : _______ /Jour ________ /Mois_________ /Année

Sexe ❑ Masculin ❑ Féminin

Téléphone : Domicile : __________________________mobile :_______________________

Adresse : ________________________________________________________________

Numéro d’identification (s’il y a lieu): ________________________________________

Type de l’intervention : ____________________________________________________

Date de d’intervention : ____________________________________________________

Service : ___________________________Centre hospitalier : _____________________________

Volume de PSL demandés : ________________________________________________________

Composants requis : ❑ Culot globulaire ❑Sang total

❑ Autre (spécifier): _________________________________________________________________

Nom du médecin traitant : ___________________________________________________________

Adresse : _________________________________ Numéro de téléphone : ___________________

Nom de chirurgien si différent _________________________________________________________

N º DON DATE
Volume prélevé (ml)
Hb Hte GB Plt

1ER DON
2ème DON
3ème DON
4ème DON
5ème DON

Médecin responsable ;

ANS/COL/FIC10/V01/22
107
 Structure de Transfusion Sanguine :
FICHE DE VALIDATION DU LIEU DE COLLECTE
…………………………………………..

Identification du site :
Nom du site :
Adresse :
Téléphone :
Type de site :
Caractéristique du site :
Dimensions : Petit Moyen Grand
Fenêtres : Portes : Cloisons : Issues de sorties et tout autre obstacle :
Toilette :
Sources d’eau :
Sources d’électricité fonctionnelles : Emplacement des prises : Eclairages :

Fonctionnement :
Ventilée –aérée : Oui Non Chauffée : Oui Non
Climatisée : Oui Non Calme : Oui Non
Propre répond aux conditions d’hygiène : Oui Non
Répond aux mesures de sécurité (issue de secours, extincteurs) : Oui Non
Eclairage de la salle permet facilement d’effectuer la phlébotomie : Oui Non
L’emplacement de la salle est accessible aux donneurs de sang : Oui Non
L’emplacement de la salle permet facilement le chargement et le de chargement du matériel : Oui Non
L’emplacement du site demande une autorisation de stationnement pour les donneurs et le personnel de la structure
de transfusion : Oui Non
L’espace de la salle permet d’organiser : Oui Non
Un secrétariat : Oui Non
Cabine médicale isolée (confidentialité) : Oui Non
Une zone de de prélèvement avec fauteuils, chaises d’attente, et plan de travail : Oui Non
Une zone de repos individualisée avec lit : Oui Non

Observations et commentaires : c-à-d. les mesures correctives à apporter avant validation

Validation du site de la collecte : (date, nom, prénom et signature)

Le :

Responsable de la structure d’accueil Responsable de la structure de transfusion

Médecin du don : Responsable de l’organisation de cette collecte

ANS/COL/FIC05/V02/22
108
Structure de Transfusion Sanguine :
………………………………………….
RAPPORT DE LA COLLECTE MOBILE

Date de la collecte : Lieu de la collecte :

Partenaire ayant participé :

Personnels :

Médical Paramédical Autres

-Nom : -Nom : -Nom :

-Nom : -Nom : -Nom :
-Nom : -Nom : -Nom :
-Nom : -Nom : -Nom :

Heure de début de collecte : Heure de la fin de collecte :

Nombre de Nombre de poches

Nombre de Nombre de
donneurs Nombre de tubes
donneurs prévus candidats au don Utilisées Prélevées
prélevés

Commentaires :

Points positifs Points négatifs

Nom et signature du médecin de collecte

ANS/COL/FIC06/V02/22
109
Structure de Transfusion Sanguine : FICHE DE VERIFICATION DE LA TROUSSE
……………………………………….… A PHARMACIE

Date : Nom et prénom :

IDENTIFICATION DE LA TROUSSE
Composition Conditionnement Quantité Péremption
Valium IM/IV Ampoule 10 mg/2ml 2
Calcium IM /IV Ampoule 1.375g/10 ml 2
Solumedrol IM/IV Ampoule 40mg/2 ml 2
Calcium per os Sachets ou comprimés 1 boite
Dafalgan per os Comp 500mg efferv ou non 1 boite
SOLUTION PERFUSION
Perfalgan IV 2
1 g/100ML
Hydrocortisone IV Ampoule 100 mg 2
Antiémétique IM Ampoule 2
Adrénaline Ampoule 1 mg /1ml 2

5 cc 6
Seringues jetables
10cc 6
IM 10
Aiguilles à prélèvement
IV 10

plasmagel 2
Sérum glucosé isotonique 5% 2
Sérum glucosé hypertonique 10% et
2
30%
Sérum salé isotonique 1 boite
Désinfectant iso-Bétadine dermique 2 flacons
Compresses stériles 5X5 cm 1 boite
Garrots 1
Coton 1+1
Bandes à gaze 5
Rouleau de sparadrap normal 1
Rouleau de sparadrap micropore 1
Perfuseurs 5
Ciseaux médicaux 1

Tensiomètre 1
Stéthoscope 1

ANS/COL/FIC07/V02/22
110
 FICHE DE LIAISON

Structure : ………………………………………. Structure : ……………………………………….

Date : ……/………………/………………… Date : ………/………………/………………….

Sexe Type de donneur Type de poche Qualification Sérologique Qualification Immuno–Hématologique

N° de Ac
N° du Nom – Nom du Nom du Tréponema
don Prénom
lot
médecin préleveur
N° du don Anti- N° de libération
poche Ag Pallidum
M F OC CP Reg D T Q HIV HCV HBc Autres GS1 GS2 Phénotype Autres
HBs (Syphilis)
111

Chef d’unité…………………… Chef d’unité………………………… Chef d’unité………………….

Validation Date : ………/………/…………. Date : ………/………/…… Date : ……/………/……….
Signature : ……………………… Signature : …………………………… Signature : ……………………

111
 Structure de Transfusion Sanguine : FICHE D’ANOMALIE
…………………………………………….

Unité :

Date de déclaration de
l’anomalie

Nom et prénoms

Localisation

Description de
l’anomalie constatée

Mesures prises

Signature

Date

Mesures Correctives
Et
Mesures préventives

Nom et signature du responsable Nom et signature du responsable de la structure

de l’unité

de la structure

ANS/STS/FIC02/V02/22
112
 FICHE DE POSTE Code : …/…/….
Structure de Transfusion Sanguine : Version : 02
Unité : Date de validation :

A - Définition
………………………. est chargé de …………………………....

B - Activités

1 - Activités principales
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 Inventaire annuel
2 - Activités secondaires

 Participation à l’application de la démarche qualité du service.

C - Liaisons

1 - Relations avec responsables hiérarchiques

 Chef de service……………….
 ………………….
 …………………….
2 - Relations transversales
 Techniciens
 Les personnels des autres services
3 - Relations subordonnées
 …………………..

D - Actions Préventives

En cas de risque sur la qualité du résultat de l’activité ou sur le personnel

citer les conduites à tenir pour y remédier

E - Délégation des tâches

………………. peut déléguer ses tâches :

 ………………………..

F - Compétences et qualifications requises

Diplôme de …………………..

G - Contraintes particulières d’exercice (Fonctions de binôme, astreintes, horaires

décalés, déplacements, e

ANS/STS/FIC04/V02/22
113
 Structure de Transfusion Sanguine :
……………………………………………… FICHE DE VIE DES EQUIPEMENTS
Référence : ………………. Indice : ……… Date de mise en service : ………………

Désignation N° de la fiche

Etendu de mesure
Instruction d’utilisation et de
maintenance préventive
Périodicité d’étalonnage

Incertitude Instruction de vérification

N° de la fiche : N° chronologique de la fiche.

INTERVENTION
PROCHAINE NOM &
DATE NATURE RESULTATS
DATE PRENOM

ANS/COL/REG04/V02/22
ANS/STS/FIC05/V02/22
114
 Structure de Transfusion Sanguine :
……………………………………… FICHE DE TRANSPORT DE PSL*

En double exemplaire
(A conserver par l’expéditeur et le destinataire)

Expéditeur Destinataire

Nom de la structure : Nom de la structure :

Nom du site :
Adresse et tél : Adresse :
Référence de la fiche d'approvisionnement :

Enlèvement Livraison

Date : Date :

Heure : Heure :

Nom du personnel expéditeur : Nom du personnel destinataire :

signature : Signature :

Nom du transporteur et signature : Nom du transporteur et signature :

Référence de la fiche d’approvisionnement

Incidents au cours du transport :

*Obligatoire entre établissement conventionnés

ANS/STS/FIC06/V02/22
115
 REGISTRE DES CANDIDATS AU DON DU SANG
Date : Nom de la secrétaire :

Date et lieu de Adresse N°

Nom Prénom Sexe
naissance (commune, Daïra, Wilaya) d’identification

ANS/COL/REG01/V02/22
116
 ANS/COL/REG02/V02/22

REGISTRE DES DONNEURS DE SANG TOTAL

Date : Nom et prénom du médecin :

Date et lieu de Type de don

N° du don Nom Prénom Sexe Adresse N° de Téléphone Groupage
naissance Rég Occ C.p
117

117
 ANS/COL/REG03/V02/22
REGISTRE DES DONNEURS DE SANG PAR APHERESE
Nom et prénom du médecin :

Type de don
N° Date et lieu de N° de
Date Nom Prénom Sexe Adresse Groupage
du don naissance Téléphone
Rég Occ C.p
118

118
 REGISTRE DES CANDIDATS AUX DONS AJOURNES
Date : Nom du médecin :

Type
Nom Prénom Sexe Age Motif d’ajournement
Déf Temp

ANS/COL/REG04/V02/22
119
 REGISTRE DE PRELEVEMENT DE SANG

Date : Nom et prénom du préleveur :

Heure de
N°du don Durée de prélèvement Incidents
prélèvement

Signature :

ANS/COL/REG05/V02/22
120
 ANS/COL/REG06/V01/22

REGISTRE DES DONNEURS DE CELLULES SOUCHES

Date : Nom et prénom du médecin :

Type de don
Date et lieu de Taux de N° de
N° du don Nom Prénom Sexe Adresse Groupage
naissance Autologue Allogénique CD34+ Téléphone
121

ANS/COL/REG05/V02/22
121
122
 CARTE DE DONNEUR REGULIER

Structure de
transfusion sanguine
……………….

CARTE DU DONNEUR
DE SANG

Groupe Rh……………………..
Photo
Phénotype…………………….

Nom ………………………………………..

Prénom ……………………………………

Date de naissance…………………….

N° pièce d’identité……………………

Carte établie le ………………………….

Visa de de la structure Visa du médecin du don

de transfusion sanguine

ANS/COL/CDR01/V02/22
123
 Observations durant le
Date Lieu N° du don Type du don Le médecin
prélèvement

ANS/COL/CDR01/V02/22
124
ANS/COL/ETI01/V02/22
125
 Tout savoir sur le don de sang
Flyer d’autoexclusion

 Y a-t-il un risque de contamination en donnant du sang ?

Non, le matériel utilisé durant le prélèvement est stérile et à usage unique.
 Je suis diabétique et / ou hypertendu, puis-je donner mon sang ?
Vous pouvez effectuer un don de sang si votre tension artérielle et / ou votre
diabète sont équilibrés avec traitement, par contre vous êtes inaptes si vous
êtes diabétique sous insuline.
 Je suis enceinte puis-je donner mon sang ?
Non, Il faut attendre 6 mois après votre accouchement pour faire un don.
 J'allaite, puis-je faire un don ?
Il faut attendre 6 mois après arrêt de l'allaitement.
 J'ai reçu des soins dentaires, puis-je donner mon sang ?
Il faut attendre une semaine après une extraction simple ou un détartrage et
attendre
2 semaines après arrêt des antibiotiques en cas d'incision d'abcès.
 Je prends des médicaments, puis-je faire un don ?
Tout dépend du médicament que vous prenez, le médecin du don établira votre
aptitude au don.
 J'ai déjà été transfusé par le passé, puis-je effectuer un don ?
Non, vous ne pouvez pas donner votre sang si vous-même avez reçu une
transfusion
sanguine au cours de votre vie.
 J’ai reçu une Hidjama, est ce que je peux faire un don ?
Il faut attendre 4 mois avant de se présenter pour un don de sang après la
Hidjama.
 En cas de piercing et de tatouage, m’est-il possible de donner mon sang ?
Il faut attendre 4 mois pour pouvoir donner son sang.
 J’ai mes menstruations, est ce que je peux faire un don ?
Il faut attendre la fin des menstruations pour faire un don.
 J’ai eu des rapports sexuels non protégés avec des partenaires multiples,
puis-je faire un don ?
Non, il faut attendre 4 mois après le dernier rapport sexuel pour pouvoir faire un
don

ANS/COL/DAE01/V01/22
126
ANS/COL/DRD01/V02/22
127
ANS/COL/DRD01/V02/22
128
 INFORMATION POST DON
Vous venez d’offrir votre sang et - En cas de sensation de faiblesse avec
bourdonnements d’oreilles, vertiges, nausées,
nous vous en remercions très
sueurs, il est recommandé de s’allonger
sincèrement, au nom des patients ce immédiatement où que l’on soit (salle, couloir,
trottoirs...) et de se reposer quelques instants
geste vous honore vous pouvez être
avant de se relever doucement.
fière de vous car grâce à votre don
vous allez sauver une à trois vies
- La quantité de cellules prélevées lors du don
nous vous en remercions. est faible par rapport à la quantité totale
circulante dans l’organisme.

LES PRECAUTIONS A PRENDRE APRES Pour une personne en bonne santé, la

UN DON DE SANG récupération après un don est rapide.

Toutefois, selon le type de don, une sensation

Pour vous-même : passagère de fatigue peut être ressentie.

- -Votre
Votreorganisme
organismeva va reconstituer
reconstituer en
en quelques
heures le volume de sang qui vient
quelques heures le volume de sang d’être prélevé.
qui
Afin d’accélérer cette récupération, nous vous
vient d’être prélevé. Afin d’accélérer
onseillons de prendre une boisson dès la fin du
cette récupération,
prélèvement nous vous dans les
et de boire régulièrement
conseillons
heures de prendre une boisson dès
qui suivent.
la fin du prélèvement et de boire
- Par précaution éviter
régulièrement danségalement : qui
les heures
 Fumer immédiatement après le don.
suivent.
 La conduite automobile prolongée et
- Par précaution
pendant éviter également :
24 heures.
 Les sports
Fumer violents ou un
immédiatement entraînement
après le don.
poussé.
 La conduite automobile prolongée et
 Toute situation vous exposant à une chute.
pendant 24 heures.
 Les sports violents ou un entraînement
poussé.
 Toute situation vous exposant à une
chute.

ANS/COL/DPD01/V02/22
129
 POUR PLUS D’INFORMATION VEUILLEZ
Afin de protéger les receveurs de tout risque VOUS RAPRROCHER DE LA STRUCTURE
DE TRANSFUSION SANGUINE.
pour leur santé vous ne devez pas hésiter à
ET DEMANDEZ UN DES MEDECINS
nous contacter si : RESPONSABLES DE COLLECTE.

 Vous remettez en cause les réponses

apportées aux questions posées lors Adresse de la structure de transfusion
sanguine :
de l’entretien médical.
 Une infection survenait dans les 5 jours
suivant le don, ou une fièvre supérieure
à 38° C.
 Cela peut vouloir dire que vous couvez
cette maladie et ça peut être dangereux
Numéro de téléphone de la structure de
pour le receveur. Veuillez nous
transfusion sanguine :
contacter afin de prendre les mesures
nécessaires.

ANS/COL/DPD01/V02/22
130
 Annexe des modifications des procédures opératoires normalisées
du processus don du sang

I. Documents rajoutés :
 Procédure du don autologue ANS/COL/PRO05/V01/22
 Demande de transfusion autologue programmée ANS/COL/FIC09/V01/22
 Calendrier de prélèvement de la transfusion autologue programmée
ANS/COL/FIC10/V01/22
 Flayer d’autoexclusion ANS/COL/DAE01/V01/22
 Questionnaire médical type en arabe ANS/COL/FIC08/V01/22

II. Documents modifiés :

 Modification du questionnaire médical
 Suppression du mode opératoire : Hygiène du prélèvement et le remplacer par
une fiche technique ANS/COL/FICT01/V01/22

131
 ‫اﻟﺟﻣﮭورﯾــــﺔ اﻟﺟزاﺋرﯾـــﺔ اﻟدﯾﻣﻘراطﯾـــﺔ اﻟﺷﻌﺑﯾــــﺔ‬
REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE
‫وزارة اﻟﺻﺣـــﺔ‬
MINISTERE DE LA SANTE

‫اﻟوﻛﺎﻟــﺔ اﻟوطـﻧﯾـــﺔ ﻟﻠدم‬

Agence Nationale du Sang

PROCESSUS PREPARATION DES

PRODUITS SANGUINS LABILES

EDITION
2022
 LISTE DE LA COMMISSION D’ACTUALISATION DU PROCESSUS
PREPARATION DES PRODUITS SANGUINS LABILES

- Pr MENDI Khalida/ Centre de Transfusion Sanguine CHU Bab El Oued Alger.

- Pr MOUEDEN Mohamed Amine/ Centre de Transfusion Sanguine CHU Oran
- Dr RIACHI Sihem/ Centre de Transfusion Sanguine EHS Daksi Constantine.
- Dr CHAIB Mohamed/ Centre de Transfusion Sanguine CHU Blida.
- Dr ZEGHLACHE Lynda/ Agence Nationale du Sang.
- Dr MESKINE Samira/ Agence Nationale du Sang.
- Mlle YAHOU Rifel/ Agence Nationale du Sang.

LISTE DE LA COMMISSION DE VALIDATION DES PROCEDURES

OPERATOIRES NORMALISEES

- Pr ALLAL TAOULI Katia / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.

- Pr BOUZEGHOUB Salima/ Laboratoire National de Référence VIH Institut
Pasteur d’Algérie.
- Pr BROUK Hacen / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr CHEKKAL Mohamed / Centre de Transfusion Sanguine EHU Oran.
- Pr MENDI Khalida / Centre de Transfusion Sanguine CHU Bab El Oued.
- Pr MOUEDEN Mohamed Amine / Centre de Transfusion Sanguine CHU
Oran.
- Pr RETIMA Abdelhak / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr ZOUAI Karima / Centre de Transfusion Sanguine EPH Rouiba.
- Dr ADDA Fatima / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.
- Dr ALIOUA Meriem / Agence Nationale du Sang.
- Dr ZEGHLACHE Lynda / Agence Nationale du Sang.
 SOMMAIRE

PROCESSUS PREPARATION DES PRODUITS SANGUINS LABILES

PRO n° 01 Préparation des PSL issus du sang total 07

PRO n° 02 Préparation des CGR, PFC, CPS 13
PRO n° 03 Stockage des PSL en quarantaine 19
PRO n° 04 Etiquetage et libération des PSL 23
MOP n° 01 Gestion des poches de sang total matière première STMP 29
MOP n° 02 La pesée 33
MOP n° 03 Centrifugation 37
MOP n° 04 Extraction des PSL 41
MOP n° 05 Surgélation 45
MOP n° 06 Connexion stérile 49
MOP n° 07 Déleucocytation 53

SUPPORTS D’INFORMATION

ANNEXE 57

ETIQUETTES
Étiquette des produits sanguins labiles qualifiés 59

FICHES
Fiche de liaison 67
Fiche d’anomalie 68
Fiche de surveillance de la température des enceintes 69
Fiche de poste 73
Fiche de vie des équipements 74
Fiche de transport des PSL 75
Fiche des caractéristiques des PSL 77

REGISTRES
Registre de réception des poches 79
Registre de préparation des PSL 80
Registre des PSL non conformes 81
Registre de validation des PSL 82
Registre d’incinération 83
Registre de filtration 84

Annexe des modifications 85

 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/PRE/PRO01/ PREPARATION DES PSL ISSUS DU SANG TOTAL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/PRO01
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normaliséesV01/17,

Version remplacée :
Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

7
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/PRE/PRO01/ PREPARATION DES PSL ISSUS DU SANG TOTAL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les différentes étapes de préparation primaire des produits sanguins labiles à
partir de sang total.
2. Domaine d’application
Préparation des produits sanguins labiles.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles-ANS.
- Médecine transfusionnelle-EFS/2013.
- Technical manual 20th edition methods and appendices AABB/2020.
- Basic and applied concept of blood banking and transfusion practices 4th
edition/2017.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CGRD : Concentré de Globules Rouges Déleucocyté.
- CPA : Concentré de Plaquettes d’Aphérèse.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PPP : Plasma Pauvre en Plaquettes.
- PRP : Plasma Riche en Plaquettes.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- QNS : Quantité Non Suffisante.
- Quarantaine : Mesure d’isolement des PSL en attente de qualifications.
- SAGM : Solution à base de chlorure de Sodium, de chlorhydrate d’Adénine, de
Glucose monohydrate et de Mannitol.
- Traceur de température : Enregistreur de données de température.
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES
en transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique,
pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.

8
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/PRE/PRO01/ PREPARATION DES PSL ISSUS DU SANG TOTAL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Fiche des caractéristiques des PSL (ANS/PRE/FIC01/V01/22).
- Registre de réception des poches (ANS/PRE/REG01/V02/22).
- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).
- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).
- Registre de validation des PSL (ANS/PRE/REG04/V02/22).
- Registre d’incinération (ANS/PRE/REG05/V02/22).
- Etiquettes des produits sanguins labiles qualifiés (ANS/PRE/ETI01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La préparation des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- La température ambiante doit être comprise entre 18°C et 24°C.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Centrifugeuses de poches réfrigérées.
- Clampeuses soudeuses.
- Banque de sang +2°C à +8°C pour CGR (quarantaine).
- Congélateur -25°C à - 80°C pour PFC (quarantaine).
- Surgélateur de plasma.
- Agitateur de plaquettes avec enceinte climatique (quarantaine).
- Extracteurs de plasma.
- Appareil pour connexion stérile.
- Balance d’équilibrage des poches de sang.
- Balance pour la pesée des poches de sang.
- Ciseaux, pinces à stripper.
- Support pour filtration.
- Conteneurs isothermes.
- Traceur de température.
9
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/PRE/PRO01/ PREPARATION DES PSL ISSUS DU SANG TOTAL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3.2 Consommables
- Gaze.
- Gants.
- Plaques de tarage.
- Produit désinfectant (pour matériel et surfaces).

6.4 Description
6.4.1 Conditions de préparation des PSL
- Le choix des PSL à préparer dépend du type de poche, du volume recueilli, de
la durée du prélèvement, du délai et des températures de transport et de
stockage entre le prélèvement et la préparation.

Tableau indicatif de la préparation des PSL unité adulte en fonction du volume du

sang total

Volume prélevé (ml)*

PSL préparé
V

V ˃ 500 Aucun PSL ne peut être préparé

- CGR ou CGRD
400 ≤ V ≤ 500 - CPS
- PFC

- CGR ou CGRD
300 ≤ V < 400
- CPS ou PFC

* Solution anticoagulante et de conservation exclue.

Voir (ANS/PRE/FIC01/V01/22 : CARACTERISTIQUES DES PSL).

10
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/PRE/PRO01/ PREPARATION DES PSL ISSUS DU SANG TOTAL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Tableau indicatif des conditions influant la nature des PSL à préparer

Température de
Nature du PSL à
Temps de conservation conservation et de
préparer
transport

- Culot globulaire
De 0 à 4h après
Entre +18°C et +24°C - Plasma frais congelé
le prélèvement
Sang total - CPS

De 04 à 24h après - Culot globulaire

Entre +18°C et +24°C
le prélèvement - CPS

Au-delà de 24h Entre +2°C et +6°C - Culot globulaire

NB :
• La demi vie du facteur VII étant de 0 à 4h, il serait optimal de préparer le PFC
dans un délai maximal.
• Au-delà de 72 heures, le sang total ne peut plus être séparé.
• Durée de prélèvement :
≤10 minutes : les 3 PSL (CGR, PFC, CPS) peuvent être préparés.
> 10 minutes : les CPS ne peuvent être préparés.

11
 AGENCE NATIONALE DU SANG

Nombre de
PREPARATION DU CONCENTRE
pages : 06
DE GLOBULES ROUGES,
ANS/PRE/PRO02/
PLASMA FRAIS CONGELE ET
V02/22 CONCENTRE DE PLAQUETTES
STANDARD

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

22Code-Document : ANS/PRE/PRO02
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide:
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
Processus préparation des PSL

Modification: Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date :14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale
Commission de rédaction et Commission de de l’Agence Nationale du
d’actualisation validation Sang
Dr K.L OULD KABLIA

13
 AGENCE NATIONALE DU SANG

Nombre de
PREPARATION DU CONCENTRE
pages : 06
DE GLOBULES ROUGES,
ANS/PRE/PRO02/
PLASMA FRAIS CONGELE ET
V02/22 CONCENTRE DE PLAQUETTES
STANDARD

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les étapes de préparation du concentré de globules rouges, du plasma frais
congelé et des concentrés de plaquettes standards.
2. Domaine d’application
Préparation des produits sanguins labiles.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles-ANS.
- Médecine transfusionnelle-EFS/2013.
- Guide de la pratique transfusionnelle. Société canadienne du sang/2021
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PRP : Plasma Riche en Plaquettes.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- QBD : Qualification Biologique du Don de sang.
- Quarantaine : Mesure d’isolement des PSL en attente de qualifications.
- SAGM : Solution à base de chlorure de Sodium, de chlorhydrate d’Adénine, de
Glucose monohydrate et de Mannitol.
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES en
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-transfusion
sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.

6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).

14
 AGENCE NATIONALE DU SANG

Nombre de
PREPARATION DU CONCENTRE
pages : 06
DE GLOBULES ROUGES,
ANS/PRE/PRO02/
PLASMA FRAIS CONGELE ET
V02/22 CONCENTRE DE PLAQUETTES
STANDARD

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).

- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Fiche des caractéristiques des PSL (ANS/PRE/FIC01/V01/22).
- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).
- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).
- Registre d’incinération (ANS/PRE/REG05/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La préparation des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- La température ambiante doit être comprise entre 18°C et 24°C.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Centrifugeuse de poche réfrigérée.
- Extracteur de plasma automatique, semi-automatique ou manuel.
- Balance d’équilibrage des poches de sang.
- Balance de pesée des poches de sang.
- Banque de sang +2°C à +8°C (quarantaine).
- Congélateur de -25°C à -80°C.
- Surgélateur de plasma.
- Agitateur de plaquettes avec enceinte climatique +20°C à +24°C.
- Clampeuses soudeuses électriques.
- Ciseaux.
6.3.2. Consommables
- Gaze.
- Plaques de tarage.
- Gants.
- Produit désinfectant (pour matériel et surfaces).
- Conteneurs de déchets.
6.4 Description
- Réceptionner, contrôler (le numéro du don, la date, l’heure, la durée du prélèvement
et l’aspect macroscopique de la poche) et enregistrer les unités de sang total.

15
 AGENCE NATIONALE DU SANG

Nombre de
PREPARATION DU CONCENTRE
pages : 06
DE GLOBULES ROUGES,
ANS/PRE/PRO02/
PLASMA FRAIS CONGELE ET
V02/22 CONCENTRE DE PLAQUETTES
STANDARD

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Peser les poches de sang total : Voir (ANS/PRE/MOP02/V02/22 : LA PESEE)

- Procéder à la première centrifugation : Voir (ANS/PRE/MOP03/V02/22 :
CENTRIFUGATION).
- Placer la poche de sang dans l’extracteur automatique ou dans la presse manuelle :
Voir (ANS/PRE/MOP04/V02/22 : EXTRACTION DES PSL).
- Transférer le SAGM dans le concentré de globules rouges.
- Clamper pour séparer la poche de CGR de la poche de plasma riche en plaquettes
(PRP).
- Bien mélanger la poche du CGR (stripper les tubulures pour homogénéiser le CGR).
- Souder la tubulure en respectant un espacement de 3 cm.
- Peser le CGR obtenu.
⇒ S’il est supérieur ou égal à 267 ml* :
• Stocker le CGR entre + 2°C et + 8°C dans la chambre froide destinée à la
quarantaine en attente des résultats de la QBD.
• Inscrire les données des CGR sur le registre de préparation des PSL.
⇒ S’il est inférieur à 267 ml *:
• Il portera la mention « non conforme » et doit être inscrit sur le registre des PSL non
conformes, le registre d’incinération et placé dans des conteneurs destinés à
l’incinération.
• *Solution anticoagulante et de conservation résiduelle incluse.
VOIR LES CARACTERISTIQUES DU CGR EN ANNEXE (ANS/PRE/FIC01/V01/22 :
CARACTERISTIQUES DES PSL)
- Procéder à la 2ème centrifugation en sélectionnant le programme spécifique Voir
(ANS/PRE/MOP03/V02/22 : CENTRIFUGATION).
- Mettre les poches dans l’extracteur Voir (ANS/PRE/MOP04/V02/22 : EXTRACTION
DES PSL).
- Casser la canule et transférer les 2/3 du surnageant (plasma) vers la 3ème poche
vidée de son SAGM, le tiers restant correspond au concentré plaquettaire.
- Séparer les tubulures par clampage et vérifier l’étanchéité de la soudure.
- Séparer les deux PSL obtenus CPS et Plasma frais congelé.
- Peser le PFC obtenu

16
 AGENCE NATIONALE DU SANG

Nombre de
PREPARATION DU CONCENTRE
pages : 06
DE GLOBULES ROUGES,
ANS/PRE/PRO02/
PLASMA FRAIS CONGELE ET
V02/22 CONCENTRE DE PLAQUETTES
STANDARD

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

⇒ S’il est supérieur ou égal à 200 ml :

• Mettre le plasma dans le surgélateur Voir (ANS/PRE/MOP05/V02/22 :
SURGELATION)
• Transférer le plasma surgelé dans le congélateur de -25°C à -80°C destiné à la
quarantaine en attente des résultats de la QBD.
• Inscrire les données du PFC sur le registre de préparation des PSL.
⇒ S’il est inférieur à 200 ml :
• Il portera la mention « non conforme » et doit être inscrit sur le registre des PSL
non conformes, le registre d’incinération et placé dans des conteneurs destinés à
l’incinération.
VOIR LES CARACTERISTIQUES DU PFC EN ANNEXE (ANS/PRE/FIC01/V01/22 :
CARACTERISTIQUES DES PSL)
Peser le CPS obtenu.
⇒ S’il est supérieur ou égal à 40 ml :
 Mettre les CPS obtenus dans l’agitateur avec l’enceinte climatique destinée à la
quarantaine en attente des résultats de la QBD.
- Stocker les CPS après validation dans l’agitateur de plaquettes pendant une durée
maximale de 05 jours en agitation continue de +20°C à + 24 °C.
- Inscrire les données sur le registre de préparation des PSL.
⇒ S’il est inférieur à 40 ml :
 Il portera la mention « non conforme » et doit être inscrit sur le registre des PSL
non conformes, le registre d’incinération et placé dans des conteneurs destinés à
l’incinération.
Remarque :
Préciser les programmes de la centrifugation et le type de poche
VOIR LES CARACTERISTIQUES DU CPS EN ANNEXE (ANS/PRE/FIC01/V01/22 :
CARACTERISTIQUES DES PSL)

17
 AGENCE NATIONALE DU SANG

Nombre de
PREPARATION DU CONCENTRE
pages : 06
DE GLOBULES ROUGES,
ANS/PRE/PRO02/
PLASMA FRAIS CONGELE ET
V02/22 CONCENTRE DE PLAQUETTES
STANDARD

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 LOGIGRAMME
QUI QUOI COMMENT

(ANS/PRE/MOP01/V02/22 :
Gestion des poches de sang
total matière première)
Contrôle de la température

Responsable
de l’unité de
préparation

(ANS/PRE/MOP03/V02/22 :
LSP ou Centrifugation)
biologiste de
la préparation
(ANS/PRE/MOP04/V02/22 :
Extraction des PSL)

(ANS/PRE/PRO02/V02/22 :
Préparation de CGR, PFC,
CPS)

(ANS/PRE/PRO03/V02/22 :
Stockage des PSL en
quarantaine)

18
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
STOCKAGE DES PRODUITS SANGUINS
ANS/PRE/PRO03/
LABILES EN QUARANTAINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/PRO03
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée:
Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission La Directrice Générale de

de rédaction et Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
d’actualisation Dr K.L OULD KABLIA

19
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
STOCKAGE DES PRODUITS SANGUINS
ANS/PRE/PRO03/
LABILES EN QUARANTAINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Assurer une bonne conservation des produits sanguins permettant de préserver de
façon optimale leurs propriétés thérapeutiques pendant toute la période de stockage
avant leurs qualifications biologiques.
2. Domaine d’application
Produits sanguins labiles préparés en attente de qualification biologique.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles-ANS.
- Médecine transfusionnelle-EFS/2013.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CPA : Concentré de Plaquettes d’Aphérèse.
- CPD : Solution anticoagulante à base de Citrate trisodique, Phosphate mono
sodique, Dextrose.
- CPDA : CPD + chlorhydrate d’Adénine.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- QBD : Qualification Biologique du Don de sang.
- SAGM : Solution à base de chlorure de Sodium, de chlorhydrate d’Adénine, de
Glucose monohydrate et de Mannitol.
5. Personnel Concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec
CES en transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en
hémobiologie-transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en
biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).

20
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
STOCKAGE DES PRODUITS SANGUINS
ANS/PRE/PRO03/
LABILES EN QUARANTAINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).

- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).
- Registre d’incinération (ANS/PRE/REG05/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation
en vigueur.
- Les locaux de stockage des PSL doivent être d’accès réservé uniquement au
personnel autorisé.
- Les locaux de stockage doivent être réservés à cet effet.
- Une alimentation électrique adaptée aux équipements de conservation du sang
avec installation d’un groupe électrogène pour pallier aux coupures de courant
électrique.
6.3 Matériel
- Chambre froide positive et/ou enceinte thermostatée +2°C à +8°C.
- Congélateur -25°C à - 80°C.
- Agitateur de plaquettes avec enceinte climatique +20°C à +24°C.
- Traceur de température avec système d’alarme.
6.4 Description
- Trois zones de stockage sont clairement définies :
• Zone de stockage de sang total en attente de séparation.
• Zone de la quarantaine des produits en attente des résultats de la QBD.
• Zone des Produits non conformes à détruire.
- Les conditions de stockage doivent être respectées, mesurées, contrôlées et
enregistrées.

6.4.1 Température et Durée de conservation des Produits Sanguins Labiles

Température de Durée de conservation

Produit Sanguin Labile
conservation
21 Jours en CPD
CGR + 02°C à + 08°C 35 Jours en CPDA
42 Jours en SAGM

PFC - 25°C à - 80°C 12 mois

5 jours en agitation lente et
+ 20°C à + 24 °C
CPS + CPA continue

21
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
STOCKAGE DES PRODUITS SANGUINS
ANS/PRE/PRO03/
LABILES EN QUARANTAINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.2 Contrôle de la température

- Contrôler et enregistrer la température à l’intérieur de la chambre froide positive
et/ou l’enceinte thermostatée, l’agitateur de plaquettes et le congélateur.
- La température est vérifiée toutes les 02 heures pendant la journée et durant la
nuit.
- Utiliser des traceurs de température qui seront placés sur les différents rayons
des enceintes thermostatées, pour détecter toute variation de température
interne :
 Après maintenance ou arrêt.
 Déplacement.
 Discordance entre deux affichages.

- Enregistrer les chiffres sur la fiche de surveillance de la température ainsi que le

nom et la signature du technicien VOIR (ANS/STS/FIC03/V02/22 : SURVEILLANCE
DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES).
- En cas de problème, mentionner sur la fiche d’anomalie et alerter le responsable
de l’unité.

22
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ETIQUETAGE ET LIBERATION DES PRODUITS
ANS/PRE/PRO04/
SANGUINS LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/PRO04
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Version :

Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée: Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de l’Agence

Commission de rédaction Commission de
Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

23
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ETIQUETAGE ET LIBERATION DES PRODUITS
ANS/PRE/PRO04/
SANGUINS LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Contrôler la conformité des Produits Sanguins Labiles mis en quarantaine.
- Étiqueter les Produits Sanguins Labiles conformes.
2. Domaine d’application
Libération des produits sanguins labiles pour la distribution.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes Pratiques Transfusionnelles –ANS.
- Médecine transfusionnelle–EFS/2013.
4. Définitions et abréviations
- Ag : Antigène.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- IH : Immuno- Hématologie.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- QBD : Qualifications Biologiques du Don.
- Quarantaine : Mesure d’isolement des PSL en attente de qualifications.
- RhD : Rhésus D.
5. Personnel Concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES en
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-transfusion
sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou Biologiste de l’unité de préparation des PSL.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de validation des PSL (ANS/PRE/REG04/V02/22).
- Registre d’incinération (ANS/PRE/REG05/V02/22).

24
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ETIQUETAGE ET LIBERATION DES PRODUITS
ANS/PRE/PRO04/
SANGUINS LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE
- Etiquettes des produits sanguins labiles qualifiés (ANS/PRE/ETI01/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- L’étiquetage doit se dérouler dans une zone réservée uniquement à cette tâche.
- Le local doit être spacieux, calme et organisé de manière à permettre le bon déroulement
chronologique de l’opération.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Echantillon de sang à tester, prélevé à partir de la tubulure.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Consommables
- Alcool.
- Plaque d’opaline.
- Coton.
- Compresse.
- Etiquettes des produits sanguins labiles qualifiés.
- Baguette de verre rodé ou tube sec (pour mélanger la goutte de sang et la goutte
de réactif).
- Gants.
- Conteneurs des déchets.
b) Réactifs
- Sérums-test de type: Anti A, Anti B, Anti A+B.
- Sérums-test anti-D.
- Sérums-test de type IgM: Anti RH2(C), Anti RH3 (E), Anti RH4 (c), Anti RH5 (e),
Anti KEL1 monoclonaux.
- Réactif DCE.
6.4 Description
 Mettre hors circuit les PSL de sérologie positive, les identifier en apposant l’étiquette
« Produit sanguin à détruire ».
 Les mettre dans des conteneurs destinés à l’incinération selon la règlementation en
vigueur.
 Renseigner le registre d’incinération.
Au même moment :
 Placer les poches selon les groupes sanguins conformément à la fiche de liaison.

25
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ETIQUETAGE ET LIBERATION DES PRODUITS
ANS/PRE/PRO04/
SANGUINS LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 Procéder au groupage sanguin (ABO+RhD) à partir de la tubulure de la poche de CGR

par méthode globulaire de Beth Vincent et anti D. Si la poche est RhD – il faut
rechercher les Ag Rh C, E (Réactifs DCE).
 Le LSP ou le biologiste de l’unité de préparation procède à l’étiquetage des poches. En
cas de présence d’Ag C et/ou E pour les poches Rh négatif, les PSL seront étiquetés
Rh positif.
 Trier les poches de PSL selon le type et en fonction des groupes sanguins et les placer
dans des bacs différents identifiés.

Libérer les poches étiquetées à l’unité de distribution.

26
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ETIQUETAGE ET LIBERATION DES PRODUITS
ANS/PRE/PRO04/
SANGUINS LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE
6.5 Logigramme
Qui Quoi Comment

 LSP ou
biologiste sous
la responsabilité
du responsable
l’unité de
préparation

Oui

Faire un groupage sanguin

ABO+RhD par méthode globulaire
et éventuellement un phénotype
Rh+Kell à partir des poches

Registre d’incinération
(ANS/PRE/REG05/V02/22)

Renseigner le registre Registre de validation

de validation des PSL
(ANS/PRE/REG04/V02/22)

27
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
GESTION DES POCHES DE SANG TOTAL
ANS/PRE/MOP01/
MATIERE PREMIERE STMP
V02/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/MOP01
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide : Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA

29
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
GESTION DES POCHES DE SANG TOTAL
ANS/PRE/MOP01/
MATIERE PREMIERE STMP
V02/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Réceptionner les poches de sang après prélèvement.
- Vérifier la cohérence entre les poches de sang prélevées, les tubes et les fiches de
liaison.
2. Domaine d’application
Unité de préparation des produits sanguins labiles.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles – ANS.
- Médecine transfusionnelle – EFS/2013.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CAT : Conduite à Tenir.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activités de Soins à Risques Infectieux.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- QBD : Qualification Biologique du Don de sang.
- STMP : Sang Total Matière Première.
5. Personnel Concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES en
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-transfusion
sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Fiche de transport des PSL (équipe mobile) (ANS/STS/FIC06/V02/22).
- Registre de réception des poches (ANS/PRE/REG01/V02/22).

30
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
GESTION DES POCHES DE SANG TOTAL
ANS/PRE/MOP01/
MATIERE PREMIERE STMP
V02/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.2 Locaux
- Les locaux doivent être situés dans un environnement qui tient compte des mesures
prises pour protéger la préparation et éviter tout risque d’altération des produits sanguins
labiles.
- La température ambiante doit être comprise entre 18°C et 24°C.
6.3 Matériel
- Conteneurs.
- DASRI et DAOM.
6.4 Description
Le LSP ou le biologiste doit :
- Réceptionner les poches de sang et les tubes provenant de l’unité de collecte,
accompagnées des fiches de liaison correspondantes.
- En cas de collecte mobile :
 Vérifier la température des conteneurs durant le transport (sonde, traceur,
thermobouton …).
 Vérifier les données (date et heure du prélèvement, du départ et de l’arrivée,) portées
sur la fiche de transport.
 Signer et archiver la fiche de transport.
- Vérifier la concordance des numéros sur les poches de sang, les tubes et la fiche de
liaison
- Vérifier l’intégrité et l’aspect des poches (poche altérée), écarter les produits non
conformes.
- Inscrire les données sur le registre de réception :
 Réception conforme : transférer les poches de sang à la zone de séparation avec la
fiche de liaison correspondante et remettre les tubes à l’unité de QBD avec la fiche de
liaison correspondante.
 Réception non conforme : établir une fiche d’anomalie, signaler au responsable de
l’unité et voir CAT (établie par le responsable de chaque unité).
- Les fiches de liaison doivent être signées par le responsable de l’unité de préparation et
seront archivées en fin d’activité.

31
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP02/ LA PESÉE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/MOP02
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

33
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP02/ LA PESÉE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Peser la poche de sang avant préparation afin d’éliminer les quantités non suffisantes
et excès de poids.
- Peser les poches de sang avant centrifugation.
- Peser les produits sanguins labiles après leur production.
2. Domaine d’application
Unité de préparation des produits sanguins labiles.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles – ANS.
- Médecine transfusionnelle – EFS/2013.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- QNS : Quantité Non Suffisante.
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec
CES en transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en
hémobiologie-transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie
clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).
- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).
6.2 Locaux
- La zone doit être isolée en raison du bruit et des risques potentiels liés aux
centrifugeuses pour le personnel.
- Bien ventilée car il existe un important dégagement de chaleur.

34
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP02/ LA PESÉE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Une pièce isolée pour les centrifugeuses par mesure de sécurité pour le
personnel.
6.3 Matériel
- Balance de pesée des poches de sang.
6.4 Description
- Nettoyer la balance.
- Valider la balance (voir document gestion des équipements et maintenance
délivré par le fournisseur).
- Tarer la balance avec la poche de recueil vide.
- Placer la poche au centre du plateau en évitant toute traction de la tubulure.
- Lire le poids affiché et calculer le volume selon la formule citée plus bas.
- Enregistrer le volume sur le registre de préparation des PSL.
- Enregistrer sur le registre des PSL non conformes et établir une fiche
d’anomalie (en cas d’anomalie).

FORMULE
Le calibrage des balances doit être effectué avant chaque série de mesure.
Formule de calcul du volume des PSL :
Volume (ml)= Poids du produit sanguin labile (gr) / Densité du constituant

 Si le produit sanguin labile n’est pas taré :

Formule de calcul du volume des PSL :
Volume (ml)= [ Poids total (gr) – Poids de la poche vide (gr) ] / Densité du constituant

- Densité sang total : 1,08

- Densité concentré globulaire : 1,07
- Densité Plasma : 1,03
- Densité plaquette : 1,03

35
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/PRE/MOP03/ CENTRIFUGATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/MOP03
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée:
Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

37
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/PRE/MOP03/ CENTRIFUGATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Séparer le sang total en ses différents constituants.
2. Domaine d’application
Préparation des produits sanguins labiles.

3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles – ANS.
- Médecine transfusionnelle – EFS/2013.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PRP : Plasma Riche en Plaquettes.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.

5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES en
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-transfusion
sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.

6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).
- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).

38
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/PRE/MOP03/ CENTRIFUGATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.2 Locaux
- La zone doit être isolée en raison du bruit et des risques potentiels liés aux
centrifugeuses pour le personnel.
- Bien ventilée car il existe un important dégagement de chaleur.
6.3 Matériel
- Centrifugeuse de poche réfrigérée.
- Balance de Roberval.
- Balance de précision.
6.4 Description
6.4.1 Mise en pots
- Séparer la poche contenant le sang total des poches satellites vides.
- Superposer les poches satellites vides et replier leurs cheminées.
- Placer la poche de sang face étiquetée devant, afin de bloquer les cheminées
repliées.
- Mettre toutes les tubulures entre les poches.
- Placer la poche de sang à l’intérieur du pot face non étiquetée au contact de la
paroi du pot.
6.4.2 Equilibrage des pots
- Peser chaque pot et les équilibrer deux à deux avec des plaques de tarage
(balance de précision).
- Équilibrer les deux pots deux à deux avec des plaques de tarage (balance de
Roberval).
- Positionner les plaques de tarage entre les poches satellites et la paroi interne
du pot, afin d’éviter la détérioration de la poche de sang.
- Choisir les poches de même volume pour équilibrage afin d’éviter la grande
différence de poids.
6.4.3 Chargement de la centrifugeuse
- Déverrouiller la porte.
- Enlever le couvercle de sécurité et l’accrocher au crochet situé sur la face
interne de la porte de la centrifugeuse.
- Positionner les pots dans la centrifugeuse en s’assurant de placer les pots de
même poids face à face pour un constant équilibre pendant toute la durée de la
mise en marche.
- Vérifier qu’aucun obstacle ne vienne gêner la libre oscillation des pots

39
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/PRE/MOP03/ CENTRIFUGATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Remettre le couvercle.
- Verrouiller la porte.
- Choisir le programme de la centrifugeuse selon le PSL à préparer (voir manuel
d’utilisation de la centrifugeuse).
- Décharger la centrifugeuse :
 Attendre l’arrêt complet de l’appareil (affichage à zéro), ouvrir la porte, enlever
le couvercle de sécurité et l’accrocher au crochet situé sur la face interne de la
porte de la centrifugeuse.
 Sortir délicatement les pots de la nacelle et les mettre sur la paillasse.
 Le déchargement doit se faire sans heurter les poches afin de ne pas
déstabiliser la zone de séparation entre le plasma et les éléments cellulaires
sédimentés.

NB : Tenir compte du manuel du fournisseur pour l’utilisation de la centrifugeuse et

ajuster les paramètres (vitesse, temps de centrifugation et température) afin
d’obtenir des PSL conformes aux normes en tenant compte du contrôle de
qualité.

Il y a deux centrifugations :
- 1ère Centrifugation douce du sang total permet d’obtenir un CGR et un PRP.
- 2ème Centrifugation forte du PRP permet d’obtenir un CPS et un PFC.

40
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP04/ EXTRACTION DES PRODUITS SANGUINS
V02/22 LABILES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/MOP04
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

41
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP04/ EXTRACTION DES PRODUITS SANGUINS
V02/22 LABILES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Extraire les différents produits du sang obtenus après centrifugation à l’aide d’extracteur
de plasma.
2. Domaine d’application
Préparation des produits sanguins labiles.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles – ANS.
- Médecine transfusionnelle – EFS/2013.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES en
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-transfusion
sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).
- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).

6.2 Locaux
- La zone doit être proche de la zone de centrifugation et séparée de cette dernière.
- Elle peut être prévue assez grande pour être évolutive en fonction des besoins de
traitement du sang futur (filtration, lavage, mélange).

42
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP04/ EXTRACTION DES PRODUITS SANGUINS
V02/22 LABILES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
- Clampeuse soudeuse électrique.
- Extracteur de plasma qui peut être soit :
 Manuel.
 Semi-automatique.
 Automatique.
- Clips de clampage.
- Dispositif de connexion stérile.

6.4 Description
- La séparation met en œuvre un processus manuel, semi-automatique ou
automatique.
- Il impose le respect des étapes suivantes :
 Transférer la poche de la centrifugeuse.
 Mettre en place la poche dans l’extracteur en évitant de remettre en suspension
les éléments cellulaires sédimentés.
 Vérifier visuellement la sédimentation des globules rouges.
 Casser le clamp de la poche mère.
 Décrocher la manette de l’extracteur et suivre la séparation.
 Arrêter l’extracteur en évitant le passage des globules rouges vers le plasma.
 Maintenir la poche contenant le plasma en position haute pour arrêter le flux.
 Décharger la poche de l’extracteur avec précaution afin d’éviter toute détérioration
des PSL produits.
 Souder les tubulures perpendiculairement aux mâchoires de la soudeuse sans
exercer de tension afin d’obtenir une obturation nette et étanche.
 Vérifier l’étanchéité des PSL obtenus, par pression manuelle sur la poche en
amont et en aval des soudures.

43
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP05/ SURGELATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/MOP05
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA

45
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP05/ SURGELATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Obtenir une congélation rapide du plasma issu du sang total et d’aphérèse.
2. Domaine d’application
Unité de préparation des produits sanguins labiles.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles – ANS.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES en
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-transfusion
sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).
- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La préparation des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- La température ambiante doit être comprise entre 18°C et 24°C.
6.3 Matériel
- Surgélateur de plasma.
- Congélateur de -25°C à -80°C.

46
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP05/ SURGELATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4 Description
- Allumer le surgélateur.
- Attendre qu’il arrive à une température suffisamment basse pour assurer une
congélation à cœur du plasma dans l’heure.
- Ouvrir le couvercle du surgélateur.
- Charger les plasmas verticalement dans le surgélateur.
- Démarrer la surgélation en vérifiant sa durée (voir manuel d’utilisation du
surgélateur).
- Attendre la fin de la surgélation : durant un cycle de surgélation ne pas interrompre
ou ouvrir l’appareil.
- Retirer délicatement le plasma du surgélateur (risque de cassure des bords).
- Vérifier la surgélation des plasmas : les bords doivent être durs.
- Trier les plasmas en fonction du type de produit et de la date de prélèvement.
- Conserver les plasmas dans le congélateur (-25°C à -80°C selon la disponibilité).
- Enregistrer les données.

47
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP06/ CONNEXION STERILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/MOP06
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée: Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

49
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP06/ CONNEXION STERILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Obtenir une connexion correcte et stérile d’une tubulure avec une autre pour assurer la
sécurité et l’intégrité du produit fini.
2. Domaine d’application
Préparation des produits sanguins labiles (Préparation des MCP, reconstitution du sang total,
CGR lavé et autres).
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles – ANS.
- Médecine transfusionnelle – EFS/2013.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- MCP : Mélange de Concentrés Plaquettaires.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES en
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-transfusion
sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).
- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.

50
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP06/ CONNEXION STERILE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- La préparation des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- La température ambiante doit être comprise entre 18°C et 24°C.

6.3 Matériel
- Dispositif de connexion stérile.

6.4 Description
- La connexion stérile est un dispositif spécial, qui permet de connecter deux poches
sans contamination, elle permet d’éliminer le risque infectieux dû à l’ouverture de la
tubulure.
- Elle comprend les étapes suivantes :
 Vérifier initialement le dispositif.
 Respecter les recommandations du fournisseur de l’appareil.
 Sélectionner les PSL.
 Positionner et connecter les tubulures.
 Contrôler l’étanchéité de la connexion.
 Enregistrer sur le registre de préparation.

51
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP07/ DELEUCOCYTATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/PRE/MOP07
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée: Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Processus préparation des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 14/02 au 29/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission de La Directrice Générale de l’Agence

Commission de
rédaction et Nationale du Sang Dr K.L OULD
validation
d’actualisation KABLIA

53
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP07/ DELEUCOCYTATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les étapes de préparation d’un PSL dépourvu de leucocytes.
2. Domaine d’application
Unité de préparation des produits sanguins labiles.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles – ANS.
- Médecine transfusionnelle – EFS/2013.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CES : Certificat d’Etudes Spécialisées.
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de préparation des PSL (Médecin ou pharmacien avec CES en
transfusion sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en hémobiologie-transfusion
sanguine, médecin ou pharmacien spécialiste en biologie clinique, pharmacien).
- LSP ou biologiste de l’unité de préparation des PSL.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de préparation des PSL (ANS/PRE/REG02/V02/22).
- Registre des PSL non conformes (ANS/PRE/REG03/V02/22).
- Registre de filtration (ANS/PRE/REG06/V01/22).
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- La préparation des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- La température ambiante doit être comprise entre 18°C et 24°C

54
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/PRE/MOP07/ DELEUCOCYTATION
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
- Dispositif de connexion stérile.
- Hotte à flux laminaire.
- Potence.
- Filtres pour concentrés érythrocytaires.
- Filtres pour concentrés plaquettaires.
- Poche de sang.
6.4 Description
- Sélectionner le filtre : Les filtres doivent être contrôlés et conformes aux exigences
techniques.
- En cas de :
• Filtre externe (filtration différée) : connecter le filtre à la poche de CGR ou de CPS à
déleucocyter en circuit ouvert sous une hotte à flux laminaire ou en circuit fermé
grâce à un appareil pour connexion stérile, placer la poche de sang sur une
potence en position verticale, le filtre vers le bas.
• Filtre intégré (filtration en ligne) : placer la poche de sang sur une potence en
position verticale, le filtre vers le bas et briser l’ouvre-circuit par un mouvement de
va et vient.
- Filtrer en respectant les spécifications et conditions d’utilisation définies par le fabricant.
- Etiqueter la poche de recueil avant la désolidarisation de la poche recueillie et porter la
mention : « déleucocyté ».
- Conserver les CGR ou CPS déleucocytés jusqu’à leur distribution.
- La transfusion du produit sanguin labile déleucocyté se fait :
• Dans les 6 heures lorsque la filtration a été faite en circuit ouvert et le mentionner
sur la poche.
• Jusqu’à la date de péremption du produit lorsque la déleucocytation a été faite en
circuit fermé.

- Remplir le registre de filtration en mentionnant :

• Le numéro du don.
• Date de prélèvement.
• Le type du produit.
• Type de dispositif (filtration en ligne ou filtration différée).
• La date et l’heure de filtration.
• Le numéro de lot du filtre.
• Le nom de l’opérateur.

55
 ANNEXE
SUPPORTS D’INFORMATION

PROCESSUS PREPARATION
DES PRODUITS
SANGUINS LABILES
NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
CONCENTRE DE GLOBULES ROUGES CONCENTRE DE PLAQUETTES STANDARD

ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE O Rh Positif GROUPE O Rh Positif

PHENOTYPE : …………………………….…………………….

DATE DE PRELEVEMENT : ……………………… DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION : ………………………… DATE DE PEREMPTION : ………………………………

Conserver entre +2°C et +8°C Conserver sous agitation lente et continue

entre +20°C et +24°C

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
PLASMA FRAIS CONGELE CONCENTRE DE PLAQUETTES D’APHERESE
ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE O Rh Positif GROUPE O Rh Positif

TAUX DE PLAQUETTES : …………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION :…………………………………… DATE DE PEREMPTION : …………………………

Conserver à ≤ -25°C
Date et heure de décongélation: Conserver sous agitation lente et continue
entre +20°C et +24°C
………………………………………………
Utilisation rapide dans un délai de moins de 2 heures
Ne jamais recongeler après décongélation

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

59
NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
CONCENTRE DE GLOBULES ROUGES CONCENTRE DE PLAQUETTES STANDARD

ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE O Rh Négatif GROUPE O Rh Négatif

PHENOTYPE : …………………………….…………………….

DATE DE PRELEVEMENT : ……………………… DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION : ………………………… DATE DE PEREMPTION : ………………………………

Conserver entre +2°C et +8°C Conserver sous agitation lente et continue

entre +20°C et +24°C

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
PLASMA FRAIS CONGELE CONCENTRE DE PLAQUETTES D’APHERESE
ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE O Rh Négatif GROUPE O Rh Négatif

TAUX DE PLAQUETTES : …………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION :…………………………………… DATE DE PEREMPTION : …………………………

Conserver à ≤ -25°C
Date et heure de décongélation: Conserver sous agitation lente et continue
entre +20°C et +24°C
………………………………………………
Utilisation rapide dans un délai de moins de 2 heures
Ne jamais recongeler après décongélation

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
CONCENTRE DE GLOBULES ROUGES CONCENTRE DE PLAQUETTES STANDARD

ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE A Rh Positif GROUPE A Rh Positif

PHENOTYPE : …………………………….…………………….

DATE DE PRELEVEMENT : ……………………… DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION : ………………………… DATE DE PEREMPTION : ………………………………

Conserver entre +2°C et +8°C Conserver sous agitation lente et continue

entre +20°C et +24°C

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
PLASMA FRAIS CONGELE CONCENTRE DE PLAQUETTES D’APHERESE
ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE A Rh Positif GROUPE A Rh Positif

TAUX DE PLAQUETTES : …………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION :…………………………………… DATE DE PEREMPTION : …………………………

Conserver à ≤ -25°C
Date et heure de décongélation: Conserver sous agitation lente et continue
entre +20°C et +24°C
………………………………………………
Utilisation rapide dans un délai de moins de 2 heures
Ne jamais recongeler après décongélation

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
CONCENTRE DE GLOBULES ROUGES CONCENTRE DE PLAQUETTES STANDARD

ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE A Rh Négatif GROUPE A Rh Négatif

PHENOTYPE : …………………………….…………………….

DATE DE PRELEVEMENT : ……………………… DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION : ………………………… DATE DE PEREMPTION : ………………………………

Conserver entre +2°C et +8°C Conserver sous agitation lente et continue

entre +20°C et +24°C

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
PLASMA FRAIS CONGELE CONCENTRE DE PLAQUETTES D’APHERESE
ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE A Rh Négatif GROUPE A Rh Négatif

TAUX DE PLAQUETTES : …………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION :…………………………………… DATE DE PEREMPTION : …………………………

Conserver à ≤ -25°C
Date et heure de décongélation: Conserver sous agitation lente et continue
entre +20°C et +24°C
………………………………………………
Utilisation rapide dans un délai de moins de 2 heures
Ne jamais recongeler après décongélation

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
CONCENTRE DE GLOBULES ROUGES CONCENTRE DE PLAQUETTES STANDARD

ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE B Rh Positif GROUPE B Rh Positif

PHENOTYPE : …………………………….…………………….

DATE DE PRELEVEMENT : ……………………… DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION : ………………………… DATE DE PEREMPTION : ………………………………

Conserver entre +2°C et +8°C Conserver sous agitation lente et continue

entre +20°C et +24°C

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
PLASMA FRAIS CONGELE CONCENTRE DE PLAQUETTES D’APHERESE
ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE B Rh Positif GROUPE B Rh Positif

TAUX DE PLAQUETTES : …………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION :…………………………………… DATE DE PEREMPTION : …………………………

Conserver à ≤ -25°C
Date et heure de décongélation: Conserver sous agitation lente et continue
entre +20°C et +24°C
………………………………………………
Utilisation rapide dans un délai de moins de 2 heures
Ne jamais recongeler après décongélation

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
CONCENTRE DE GLOBULES ROUGES CONCENTRE DE PLAQUETTES STANDARD

ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE B Rh Négatif GROUPE B Rh Négatif

PHENOTYPE : …………………………….…………………….

DATE DE PRELEVEMENT : ……………………… DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION : ………………………… DATE DE PEREMPTION : ………………………………

Conserver entre +2°C et +8°C Conserver sous agitation lente et continue

entre +20°C et +24°C

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
PLASMA FRAIS CONGELE CONCENTRE DE PLAQUETTES D’APHERESE
ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE B Rh Négatif GROUPE B Rh Négatif

TAUX DE PLAQUETTES : …………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION :…………………………………… DATE DE PEREMPTION : …………………………

Conserver à ≤ -25°C
Date et heure de décongélation: Conserver sous agitation lente et continue
entre +20°C et +24°C
………………………………………………
Utilisation rapide dans un délai de moins de 2 heures
Ne jamais recongeler après décongélation

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
CONCENTRE DE GLOBULES ROUGES CONCENTRE DE PLAQUETTES STANDARD

ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE AB Rh Positif GROUPE AB Rh Positif

PHENOTYPE : …………………………….…………………….

DATE DE PRELEVEMENT : ……………………… DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION : ………………………… DATE DE PEREMPTION : ………………………………

Conserver entre +2°C et +8°C Conserver sous agitation lente et continue

entre +20°C et +24°C

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
PLASMA FRAIS CONGELE CONCENTRE DE PLAQUETTES D’APHERESE
ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE AB Rh Positif GROUPE AB Rh Positif

TAUX DE PLAQUETTES : …………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION :…………………………………… DATE DE PEREMPTION : …………………………

Conserver à ≤ -25°C
Date et heure de décongélation: Conserver sous agitation lente et continue
entre +20°C et +24°C
………………………………………………
Utilisation rapide dans un délai de moins de 2 heures
Ne jamais recongeler après décongélation

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
CONCENTRE DE GLOBULES ROUGES CONCENTRE DE PLAQUETTES STANDARD

ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE AB Rh Négatif GROUPE AB Rh Négatif

PHENOTYPE : …………………………….…………………….

DATE DE PRELEVEMENT : ……………………… DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION : ………………………… DATE DE PEREMPTION : ………………………………

Conserver entre +2°C et +8°C Conserver sous agitation lente et continue

entre +20°C et +24°C

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION NOM DE LA STRUCTURE DE TRANSFUSION

N°………… N°…………
PLASMA FRAIS CONGELE CONCENTRE DE PLAQUETTES D’APHERESE
ANS/PRE/ETI01/V02/22

ANS/PRE/ETI01/V02/22
GROUPE AB Rh Négatif GROUPE AB Rh Négatif

TAUX DE PLAQUETTES : …………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PRELEVEMENT : ………………………

DATE DE PEREMPTION :…………………………………… DATE DE PEREMPTION : …………………………

Conserver à ≤ -25°C
Date et heure de décongélation: Conserver sous agitation lente et continue
entre +20°C et +24°C
………………………………………………
Utilisation rapide dans un délai de moins de 2 heures
Ne jamais recongeler après décongélation

N°…………………… N°…………………… N°…………………… N°……………………

 FICHE DE LIAISON

Structure : ………………………………………. Structure : ……………………………………….

Date : ……/………………/………………… Date : ………/………………/………………….

Sexe Type de donneur Type de poche Qualification Sérologique Qualification Immuno–Hématologique

N° de Ac
N° du Nom – Nom du Nom du Tréponema
don Prénom
lot
médecin préleveur
N° du don Anti- N° de libération
poche Ag Pallidum
M F OC CP Reg D T Q HIV HCV HBc Autres GS1 GS2 Phénotype Autres
HBs (Syphilis)
67

Chef d’unité…………………… Chef d’unité………………………… Chef d’unité………………….

Validation Date : ………/………/…………. Date : ………/………/…… Date : ……/………/……….
Signature : ……………………… Signature : …………………………… Signature : ……………………
 Structure de Transfusion Sanguine :
FICHE D’ANOMALIE
………………………………………………

Unité :

Date de déclaration
de l’anomalie

Nom et prénoms

Localisation

Description de
l’anomalie constatée

Mesures prises

Signature

Date

Mesures Correctives
Et
Mesures préventives

Nom et signature du responsable Nom et signature du responsable de la structure

de l’unité
 ANS/STS/FIC03/V02/22

FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES

Equipement de conservation : T° (01) : afficheur Semaine du.../....../...au.../...../.........

………………………………….. T° (02) : thermomètre à l’intérieur de l’équipement de stockage

T° T° T° T°
Jour Matin EMARG Après Midi EMARG OBSERVATION
(01) (02) (01) (02)
7: 00 h
15 :00 h
9: 00 h
DIM
11:00 h 17 :00 h
13:00 h 19 :00 h
69

7:00 h
15 :00 h
9: 00 h
LUN
11:00 h 17 :00 h
13:00 h 19 :00 h
7:00 h
15 :00 h
9: 00 h
MAR
11:00 h 17 :00 h
13:00 h 19 :00 h
7:00 h
15 :00 h
9: 00 h
MER
11 :00 h 17 :00 h
13 :00 h 19 :00 h

69
 ANS/STS/FIC03/V02/22

FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES

T° T° T° T°
Jour Matin EMARG Après Midi EMARG OBSERVATION
(01) (02) (01) (02)

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
JEU
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

7 :00 h
15 :00 h
70

9 : 00 h
VEN
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
SAM
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

70
 ANS/STS/FIC03/V02/22

FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES

Équipement de conservation : T° (01) : afficheur Semaine du.../....../...au.../...../.......

………………………………….. T° (02) : thermomètre à l’intérieur de l’équipement de stockage

Nuit T° (01) T° (02) EMARG Observations

20 :00 h
22: 00 h
DIM 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h
LUN 00 :00 h
71

02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h
MAR 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h
MER 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h

71
 ANS/STS/FIC03/V02/22

FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES

Nuit T° (01) T° (02) EMARG Observations

20 :00 h
22: 00 h
JEU 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h

22: 00 h

VEN 00 :00 h
72

02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h

SAM 00 :00 h

02:00 h

04 :00 h

72
 FICHE DE POSTE Code : …/…/….
Version : 02
Structure de Transfusion Sanguine :
Unité :
Date de validation :

A - Définition
………………………. est chargé de …………………………....

B - Activités

1 - Activités principales
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 Inventaire annuel
2 - Activités secondaires
 Participation à l’application de la démarche qualité du service.

C - Liaisons
1 - Relations avec responsables hiérarchiques
 Chef de service……………….
 ………………….
 …………………….
2 - Relations transversales
 Techniciens
 Les personnels des autres services
3 - Relations subordonnées
 …………………..
D - Actions Préventives
En cas de risque sur la qualité du résultat de l’activité ou sur le personnel citer
les conduites à tenir pour y remédier

E - Délégation des tâches

………………. peut déléguer ses tâches :
 ……………………….................................
F - Compétences et qualifications requises
Diplôme de …………………..

G - Contraintes particulières d’exercice (Fonctions de binôme, astreintes, horaires

décalés, déplacements, etc.)

ANS/STS/FIC04/V02/22
73
 Structure de Transfusion Sanguine :
……………………………………………
FICHE DE VIE DES EQUIPEMENTS

Référence : ………………. Indice : ……… Date de mise en service : ………………

Désignation N° de la fiche

Etendu de mesure
Instruction d’utilisation et de
maintenance préventive
Périodicité d’étalonnage

Incertitude Instruction de vérification

N° de la fiche : N° chronologique de la fiche.

INTERVENTION

PROCHAINE NOM &

DATE NATURE RESULTATS
DATE PRENOM

ANS/STS/FIC05/V02/22
74
 Structure de Transfusion Sanguine :
……………………………………………….
FICHE DE TRANSPORT DES PSL*

En double exemplaire
(A conserver par l’expéditeur et le destinataire)

Expéditeur Destinataire

Nom de la structure :
Nom de la structure :

Nom du site :
Adresse :
Adresse et tél :

Référence de la fiche d’approvisionnement :

Enlèvement Livraison

Date : Date :
Heure :
Heure :
Nom du personnel expéditeur :

Signature : Nom du personnel destinataire :

Nom du transporteur et signature : Signature :

Nom du transporteur et signature :

Référence de la fiche d’approvisionnement:

Incidents au cours du transport :

*Obligatoire entre établissements conventionnés

ANS/STS/FIC06/V02/22
75
 CARACTERISTIQUES DES PSL

CGR DELEUCOCYTE :

Aspect Liquide rouge sombre

Volume La notion de volume minimum est supprimée

Unité adulte : minimum 40 g

Hémoglobine
Unité enfant : minimum 22 g

Hématocrite Entre 50% et 70%

Taux de leucocytes résiduels Inférieur à 1 x 106 par unité

Entre +2°C et +8°C pendant 21jours à 42 jours (selon

Conditions de conservation
conservateur)

PLAQUETTES :
CP viro-atténué par
CPS MCPS CPA
amotosalen

Aspect Liquide moiré sans signes d’hémolyse

MCPS : 160 à 600 ml

Volume ≥ 40 ml 80 à 600 ml < 600 ml *
CPA : < 600 ml
Contenu MCPS : 2,2 à 6 x1011
11 11 11
minimal en 0, 375 x 10 1 x 10 2 x 10
plaquettes CPA : 2,2 à 6 x 1011

Taux de
leucocytes < 1 x 106 /unité < 1 x 106 /unité
résiduels

Conditions de + 20 °C à +24 °C en enceinte thermostatée

conservation 5 jours, en agitation lente et continue

pH à +22 °C ≥ 6,4

Taux résiduel
- - - ≤ 2 µM
d’amotosalen

* Pas de volume minimum, si contenu ˃ 2 x 1011, le ratio quantité/volume doit être

environ de 1,2 x 109 plaquettes /cm3.

ANS/PRE/FIC01/V01/22
77
PLASMA

Plasma thérapeutique
PFC
PFC viro
Sécurisé par PFC viro
atténué par Plasma pour
quarantaine atténué par
Solvant- fractionnement
amotosalen
détergent

Aspect Liquide limpide à légèrement trouble sans signe visible d’hémolyse

Volume Supérieur à 200 ml 150 à 875 ml

0,7 UI/ml
Taux de facteur VIII 0,5 UI/ml 0,5 UI/ml 0,7 UI/ml
-
Fibrinogène g/L ≥ 2 g/l ≥ 2 g/l -
-
Protéines - - 50 g/l

Taux résiduel de
≤ 6 x 109 / L -
Globules Rouges
Taux résiduel en
≤ 25 x 109 / L -
plaquettes
Taux résiduel en
≤ 1 x 104 /L ≤ 1 x 106 /L
leucocytes

≤ - 25 °C
pendant 1 an
Conditions de ≤ - 25 °C ≤ - 25 °C ≤ - 30 °C pendant 1
à partir de la
conservation pendant 1 an pendant 1 an an
date de
préparation

Taux résiduel
- - ≤ 2 µM -
d’amotosalen

CONCENTRE DE GRANULOCYTES D’APHERESE

Aspect Suspension sans signe d’hémolyse

Volume ≤ 650 ml

Contenu en granulocytes > 2 x 1010

+ 20 °C à + 24 °C pendant 12 heures
Conditions de conservation En cas d’ouverture intentionnelle du circuit clos : +
20 °C à + 24 °C pendant 6 heures

ANS/PRE/FIC01/V01/22
78
 REGISTRE DE RECEPTION DES POCHES

Poche de sang Conformité

Heure de N° du
Date
reception don Type de N° de lot Volume Oui Non Causes
poche

ANS/PRE/REG01/V02/22
79
 REGISTRE DE PREPARATION DES PSL

Poche de
PSL préparé Volume PSL/ mL Nom/
sang
Causes
N° Heure de Signature
Date
don préparation d’élimination du
Type CGR CGR du PSL
Volume CGR PFC CPS CGR PFC CPS
DEL DEL technicien
poche

ANS/PRE/REG02/V02/22
80
 REGISTRE DES PSL NON CONFORMES

Motif de non-conformité

Nom
Type
N° du /Signature
N° poche de
don du
PSL Défaut PFC PFC
Excès de Séro technicien
QNS de CPS CPS Péremption Retour Autres
poids positive
soudure hématique lipémique

ANS/PRE/REG03/V02/22
81
 REGİSTRE DE VALIDATION DES PSL

Type de PSL débloqués Etiquetage

N° N˚ Groupage
Date Sérologie Observations
don poche Sanguin Phénotype Nom/
Nom/
CGR Signature
CGR PFC CPS CPA Heure Signature du
Del du chef
technicien
d’unite

ANS/PRE/REG04/V02/22
82
 REGISTRE D’INCINERATION

Structure de transfusion sanguine : ....................................

PSL
Date et heure de N° du PV
Date N° d’ordre N° de la levée des PSL à d’incinération
N˚ du don Type
poche incinérer

ANS/PRE/REG05/V02/22
83
 REGISTRE DE FILTRATION

Date de N° du Type du N° du lot Date et heure de Nom de

Type de dispositif
prélèvement don produit de filtre filtration l’opérateur

Filtration Filtration
en ligne différée

ANS/PRE/REG06/V01/22
84
 Annexe des modifications des procédures opératoires normalisées
du processus préparation des produits sanguins labiles

I-Documents rajoutés
- Tableau indicatif de la préparation des PSL unité adulte en fonction du volume
du sang total : Préparation des PSL issus du sang total
(ANS/PRE/PRO01/V02/22).
- Préparation du concentré de globules rouges, plasma frais congelé et
concentré de plaquettes standard (ANS/PRE/PRO02/V02/22).
- Annexes :

- Caractéristiques des PSL (ANS/PRE/FIC01/V01/22).

- Registre de filtration (ANS/PRE/REG06/V01/22).

II-Documents modifiés
- Logigramme de la procédure (ANS/PRE/PRO01/V01/17) modifié et déplacé
vers la nouvelle procédure (ANS/PRE/PRO02/V02/22).
- Fusion des trois procédures :(ANS/PRE/PRO02/V01/17, ANS/PRE/PRO03/V01/17,
ANS/PRE/PRO04/V01/17) en une seule procédure (ANS/PRE/PRO02/V02/22).
- Tableau : Température et durée de conservation des produits sanguins labiles :
Stockage des produits sanguins labiles en quarantaine
(ANS/PRE/PRO03/V02/22)
- Logigramme : Etiquetage et libération des produits sanguins labiles
(ANS/PRE/PRO04/V02/22).
- Annexes modifiées :
- Fiche de liaison
- Fiche d’anomalie.
- Fiche de vie des équipements.
- Registre de préparation des PSL.
- Registre de validation des PSL.
- Registre d’incinération.
- Etiquette des produits sanguins labiles qualifiés.

85
 ‫اﻟﺠﻤﮭﻮرﯾــــﺔ اﻟﺠﺰاﺋﺮﯾـــﺔ اﻟﺪﯾﻤﻘﺮاطﯿـــﺔ اﻟﺸﻌﺒﯿــــﺔ‬
REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE
‫وزارة اﻟﺼﺤـــﺔ‬
MINISTERE DE LA SANTE

‫اﻟﻮﻛﺎﻟــﺔ اﻟﻮطـﻨﯿـــﺔ ﻟﻠﺪم‬

Agence Nationale du Sang

PROCESSUS QUALIFICATION
IMMUNO- HEMATOLOGIQUE
DU DON DE SANG

EDITION
2022
 LISTE DE LA COMMISSION D’ACTUALISATIOIN DU PROCESSUS QUALIFICATION
IMMUNO-HEMATOLOGIQUE DU DON DE SANG

- Pr BROUK Hacen/ Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.

- Dr REMACHE Fatma Hanane/ Centre du Sang de la Wilaya d’Alger.
- Dr ADDA Fatma / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.
- Dr FELLA Lilia / Centre de Transfusion Sanguine EPH Kouba Alger.
- Dr BOULENOUAR Amina /Centre de Transfusion Sanguine EHU régional de la sureté
nationale Oran.
- BATEL Zineb / Agence Nationale du Sang Alger.

LISTE DE LA COMMISSION DE VALIDATION DES PROCEDURES OPERATOIRES

NORMALISEES

- Pr ALLAL TAOULI Katia / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.

- Pr BOUZEGHOUB Salima/ Laboratoire National de Référence VIH Institut Pasteur
d’Algérie.
- Pr BROUK Hacen / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr CHEKKAL Mohamed / Centre de Transfusion Sanguine EHU Oran.
- Pr MENDI Khalida / Centre de Transfusion Sanguine CHU Bab El Oued.
- Pr MOHAMMEDI Dhakya / Institut Pasteur d’Algérie.
- Pr MOUEDEN Mohamed Amine / Centre de Transfusion Sanguine CHU Oran.
- Pr RETIMA Abdelhak / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr ZOUAI Karima / Centre de Transfusion Sanguine EPH Rouiba.
- Dr ADDA Fatima / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.
- Dr ALIOUA Meriem / Agence Nationale du Sang.
- Dr ZEGHLACHE Lynda / Agence Nationale du Sang.
 SOMMAIRE

PROCESSUS QUALIFICATION IMMUNO-HEMATOLOGIQUE DU DON DE SANG

PRO n° 01 Groupage ABO-RH1 007

PRO n° 02 Phénotype RH-KEL1 013
PRO n° 03 Phénotype étendu 019
PRO n° 04 Recherche de l'antigène D faible 025
PRO n° 05 Recherche des anticorps anti-érythrocytaires irréguliers (RAI) 031
PRO n° 06 Epreuve directe de compatibilité au laboratoire 039
PRO n° 07 Contrôle qualité en immuno-hématologie 047
PRO n° 08 Résolution des difficultés et discordances du groupage sanguin ABO 057
PRO n° 09 Gestion des échantillons en immuno-hématologie du receveur 071
PRO n° 10 Gestion des échantillons en immuno-hématologie du donneur 077

MOP n° 01 Groupage ABO-RH1 081

MOP n° 02 Phénotype restreint RH-KEL1 089
MOP n° 03 Test direct à l’antiglobuline 095
MOP n° 04 Test indirect à l’antiglobuline 101
MOP n° 05 Recherche d’hémolysine anti A-anti -B 107
MOP n° 06 Recherche des substances ABH/LEWIS SALIVAIRES 111
MOP n° 07 Fixation élution 117
MOP n° 08 Préparation des hématies tests A1, A2, B et O 125
MOP n° 09 Préparation des solutions enzymatiques 129
MOP n° 10 Sensibilisation d'hématies par un anticorps de classe lgG 133
MOP n° 11 Solution LISS 137
MOP n° 12 Solution saline albumineuse 141
MOP n° 13 Solution saline 145
MOP n° 14 Solution tampon PBS 149
MOP n° 15 Suspension d'hématies en solution LISS 153
MOP n° 16 Suspension d'hématies en solution saline 157
MOP n° 17 Technique d'adsorption 161
MOP n° 18 Technique de traitement enzymatique des hématies 165
MOP n° 19 Techniques de base en immuno-hématologie lavage des hématies 169
MOP n° 20 Test aux enzymes 173
MOP n° 21 Solution de SÔRENSEN 179
MOP n° 22 Recherche du D faible 183

ANNEXE SUPPORTS D’INFORMATION 191

FICHES
Fiche de demande d’examen Immuno-Hématologique pour receveur 193
Fiche de liaison 194
Fiche d’anomalie 195
Fiche de poste 196
Fiche de vie des équipements 197
REGISTRE DE QUALIFICATION IMMUNO-HEMATOLOGIQUE 198
CARTE DE DE GROUPAGE SANGUIN 199
ANNEXE DES MODIFICATIONS 200
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO01/
GROUPAGE ABO-RH1
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO01
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction l’Agence Nationale du Sang
Commission de validation
et d’actualisation Dr K.L OULD KABLIA

7
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO01/
GROUPAGE ABO-RH1
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Déterminer le groupe sanguin ABO-RH1.
2. Domaine d’application
- Qualification immuno-hématologique du don de sang.
- Contexte pré-transfusionnel.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définition et abréviations
- Ag : Antigène.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RH : Rhésus.
- Lectines : Glycoprotéines qui se lient aux antigènes de groupe sanguin, provoquant
l’agglutination des globules rouges.
5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).

8
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO01/
GROUPAGE ABO-RH1
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).

- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être situés dans une zone délimitée physiquement, indépendante de toute zone
d’activité transfusionnelle différente.
- Doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Echantillon de sang à tester, prélevé sur anticoagulant.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Agitateur pour microplaque.
- Bain Marie réglable de 20°C à 60°C ou étuve.
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour microplaque.
- Centrifugeuse et incubateur pour carte de filtration.
- Automate d’Immuno-Hématologie.
- Armoire réfrigérée pour les réactifs.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
b) Consommables
- Alcool 70%.
- Plaques d'opaline.
- Tubes secs de 5 ml.
- Microplaques en polystyrène de 96 cupules, en forme U (12x8).
- Embouts.
- Coton.
- Compresses.
- Portoir à tubes.
- Gants.
- Pipettes Pasteur.
- Sachets jaunes pour DASRI.
- Sachets noirs pour DAOM.
- Conteneurs de déchets.

9
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO01/
GROUPAGE ABO-RH1
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

c) Réactifs
- Sérum-tests : Anti-A, Anti-B, Anti-AB et Anti-D monoclonaux. (Deux lots de réactifs
différents sont nécessaires et un 3ème est souhaitable en cas de résultats
discordants).
- Contrôle réactif (RH1).
- Lectines : Anti-A1 et Anti-H.
- Solution saline à 0.9 % Voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : (SOLUTION SALINE)
- Tween 20 (0.005%) : facultatif, pour permettre aux agglutinations de ne pas trop se
coller au fond de la cupule.
- Hématie-tests A1, B voir : ANS/QBIH/MOP08/V03/22 : PREPARATION DES
HEMATIES TESTS A1, A2, B ET O.
- Colonne de filtration.
6.4 Description
6.4.1 Principe
a) Groupage ABO
La mise en évidence de la présence ou l'absence des antigènes A et/ou B à la
surface des globules rouges (épreuve globulaire Beth Vincent) et des anticorps anti
A et anti B (épreuve sérique de Simonin) par méthode d'hémagglutination directe.
b) Groupage RH1
La mise en évidence de la présence ou l'absence de l'antigène RH1 (Ag D) à la
surface des globules rouges par méthode d'hémagglutination directe.
6.4.2 Méthode
a) Groupage ABO
Chaque détermination du groupe sanguin ABO comporte deux épreuves
complémentaires réalisées simultanément :
 L'épreuve globulaire (Beth Vincent) consistant à rechercher la présence des
antigènes A et B avec les réactifs anti-A, Anti-B et Anti-AB.
 L'épreuve plasmatique de Simonin consistant à rechercher les anticorps anti-A et
anti-B avec des hématies tests A1 et B.
- Des contrôles de qualité internes appropriés sont systématiquement utilisés voir :
ANS/QBIH/PRO07/V03/22 : CONTROLE QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
b) Groupage RH1
- Test indissociable du groupage ABO
 Chaque détermination du groupe RH1 comporte l'étude des hématies à l'aide
des réactifs anti-RH1 et d’un contrôle négatif, soit un réactif de composition

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO01/
GROUPAGE ABO-RH1
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

identique au réactif anti-RH1 mais dépourvu de toute activité anticorps, soit du

sérum salé à 0.9%.
 L’anti-D utilisé pour les groupes sanguins des receveurs doit être DVI-.
 L’anti-D utilisé pour les groupes sanguins des donneurs doit être DVI+ ; dans ce
cas l’anti-D Blend (IgM+IgG) peut être utilisé mais sur tube ou microplaque
seulement.
 L'ordre des dépôts des réactifs est à définir une fois pour toutes pour un laboratoire et
leur changement est à proscrire (Exemple Anti A- Anti B- Anti A+B- Anti-D - Control RH-
GRB - GRA1).
 Quatre supports de réaction de groupage sanguin ABO-RH1 seront décrits
ANS/QBIH/MOP01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1.
- Sur plaque.
- En tube.
- En microplaque.
- En filtration.
 La détermination manuelle des groupes ABO-RH1 doit être réalisée en double par deux
techniciens utilisant de préférence deux lots de réactifs différents, une seule
détermination suffit, en cas d’automatisation.
[Link] Contrôle de qualité interne
- Ces contrôles seront réalisés quotidiennement dans les mêmes conditions
techniques que celles des échantillons voir : ANS/QBIH/PRO07/V03/22 :
CONTROLE QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
[Link] Interprétation et validation analytique
La validation analytique repose sur :
- Les résultats attendus des CQI voir : ANS/QBIH/PRO07/V03/22 : CONTROLE
QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
- Un profil réactionnel cohérent (Concordance entre épreuves globulaire et sérique).
- La concordance des deux réalisations de groupage réalisées par les techniciens.
- L'absence d'ambigüité réactionnelle avec chaque réactif.
- L’absence d’image de double population érythrocytaire.
- L'absence de discordance avec l'éventuelle antériorité.
• En cas de discordance entre les deux épreuves ou de difficultés de groupage, signaler
au praticien et se référer aux procédures de gestion des difficultés de groupage
ANS/QBIH/PRO8/V03/22 : RESOLUTION DES DIFFICULTES ET DES
DISCORDANCES DE GROUPAGE SANGUIN.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO01/
GROUPAGE ABO-RH1
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Le groupe ABO : conclu si le profil réactionnel correspond à la grille d'interprétation

Suivante :
Epreuve
Epreuve globulaire
plasmatique de
de BETH -VINCENT
SIMONIN
Résultats
Sérums- test Hématies- test
Anti A Anti B Anti A+B B A1
+3 à +4 - +3 à +4 + - A
- +3 à +4 +3 à +4 - + B
+3 à +4 +3 à +4 +3 à +4 - - AB
- - - + + O

- Le phénotypage RH1 : conclu si le profil réactionnel correspond à la grille

d’interprétation suivante :

Sérums test anti-D

Résultats Contrôle RH
1er Lot 2ème Lot
RH1 Positif +3 à +4 +3 à +4 -
RH1 Négatif - - -

Tout groupage D négatif chez le donneur de sang est obligatoirement complété par :

 La recherche de l'Ag D faible Voir ANS/QBIH/PRO04/V03/22 : RECHERCHE DE

L’ANTIGENE D FAIBLE.
 La recherche des Antigènes C et E Voir ANS/QBIH/PRO02/V03/22 : PHENOTYPE
RH-KEL1.

6.4.3 Saisie des résultats

- Saisie manuelle des résultats par deux personnes différentes.
- Inscrire les résultats du groupage ABO-RH1 des donneurs dans le registre de
groupages et/ou l’outil informatique, ainsi que :
 Date de réalisation du groupage.
 Numéro de lot des réactifs utilisés.
 Nom du technicien qui a effectué le test.
 Le nom et le cachet du spécialiste qui a validé le résultat.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO02/ PHENOTYPE RH-KEL1
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO02
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date :03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO02/ PHENOTYPE RH-KEL1
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Déterminer les phénotypes RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) et KEL1 (K).
2. Domaine d’application
2.1 Contexte pré-transfusionnel : se référer aux textes règlementaires ANS.
- Obligatoire pour les patients :
• Ayant ou ayant eu un (des) allo-anticorps anti-érythrocytaire(s) (RAI positive).
• De sexe féminin, de la naissance jusqu'à la fin de la période procréatrice.
- Fortement recommandé pour :
• Les polytransfusés.
2.2 Qualification Immuno-hématologique du don de sang :
- Unités de sang RhD négatif : Recherche des antigènes C et E.
- Unités de sang destinées à être transfusées aux receveurs cités.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définition et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- RH : Rhésus.
5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO02/ PHENOTYPE RH-KEL1
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être situés dans une zone délimitée physiquement, indépendante de toute zone
d’activité transfusionnelle différente.
- Doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Echantillon de sang à tester, prélevé sur anticoagulant EDTA. Conservé moins de 72h à
+4°C.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour microplaque.
- Centrifugeuse et incubateur pour carte de filtration.
- Armoire réfrigérée pour les réactifs.
- Automate d’immuno-hématologie.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
b) Consommables
- Alcool 70%.
- Plaques d'opaline.
- Tubes secs de 5 ml.
- Embouts.
- Microplaques en polystyrène de 96 cupules, en forme U (12x8).
- Portoir à tubes.
- Coton.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO02/ PHENOTYPE RH-KEL1
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Compresses.
- Gants.
- Pipettes pasteur.
- Sachets jaunes pour DASRI.
- Sachets noirs pour DAOM.
- Conteneurs de déchets.
c) Réactifs (toujours se référer aux instructions du fournisseur)
- Sérums-test de type IgM: Anti RH2(C), Anti RH3 (E), Anti RH4 (c), Anti RH5 (e), Anti
KEL1 monoclonaux. (Deux lots de réactifs différents sont souhaitables).
- Réactifs témoins adéquats.
- Solution saline à 0.9 % voir : ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE.
- Tween 20 (0.005%) : facultatif, pour permettre aux agglutinations de ne pas trop se
coller au fond de la cupule.
- Colonne de filtration.
6.4 Description
6.4.1 Principe
Mise en évidence de la présence ou l'absence à la surface des globules rouges des
antigènes RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) et KEL1.
6.4.2 Méthodes
- Tester les hématies du sujet préalablement mises en suspension appropriée vis-à-vis
des cinq réactifs Anti RH2(C), Anti RH3 (E), Anti RH4 (c), Anti RH5 (e), Anti KEL1 et du
(des) réactif(s) témoin(s) adéquat(s).
- Le réactif témoin est dépourvu de toute activité anticorpale et sa capacité
d’agglutination d’hématies sensibilisées in vivo doit être strictement identique à celle du
ou des réactifs utilisés pour déterminer la présence ou l’absence des antigènes.
- Différentes techniques sont disponibles, mais il est préconisé d’utiliser des supports à
usage unique et en particulier ceux permettant l’automatisation telles les microplaques
ou colonnes de filtration.
- Saisie manuelle des résultats par deux personnes différentes.
[Link] Contrôle de qualité interne
- Pour chaque lot de réactif les antisérums utilisés seront testés vis-à-vis d’au moins
deux échantillons, l’un dépourvu de l’antigène et l’autre d’expression hétérozygote.
Exemple :
Anti-C (RH 2) : Un échantillon Cc (RH : 2,4) et un cc (RH : -2,4)
Anti- E (RH 3) : Un échantillon Ee (RH : 3,5) et un ee (RH : -3,5)
Anti-c (RH 4) : Un échantillon Cc (RH : 2,4) et un CC (RH : 2,-4)

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Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO02/ PHENOTYPE RH-KEL1
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Anti-e (RH 5) : Un échantillon Ee (RH : 3,5) et un EE (RH : 3,-5)

Anti-KEL1 : Un échantillon KEL : 1 et un échantillon KEL : -1
[Link] Validation analytique
La validation analytique repose sur :
- Les résultats attendus des CQI voir : ANS/QBIH/PRO07/V03/22 : CONTROLE
QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
- La négativité du témoin réactif.
- L'absence d'ambigüité réactionnelle avec chaque réactif, si présence se référer voir :
ANS/QBIH/PRO8/V03/22 : RESOLUTION DES DIFFICULTES ET DES
DISCORDANCES DE GROUPAGE SANGUIN.
- L’absence de double population érythrocytaire.
- Le profil réactionnel cohérent (présence d'au moins un des deux antigènes
antithétiques, par exemple).
- L’absence de discordance avec l'éventuelle antériorité.
- Une double lecture des résultats par deux techniciens différents est souhaitable.
Une fois interprétés, les résultats sont rendus sous format numérique international et, si
besoin, pour faciliter l’interprétation, en nomenclature traditionnelle (par exemple, RH : -
2,3,4,5 ; KEL : -1 ou C-, E-, c+, e+ ; K-).
[Link] Transcription des résultats
- Reporter les résultats du phénotype RH-KEL1 des donneurs de sang sur le registre de
groupages des donneurs de sang ainsi que les cartes de groupages sanguins.
- Reporter les résultats du phénotype RH-KEL1 des receveurs sur le registre de
groupages des receveurs ainsi que les cartes de groupages sanguins.
- Saisir les données par voie informatique, imprimer et les archiver en cas d’automation.
[Link] Gestion des difficultés de groupage
- Voir ANS/QBIH/PRO08/V03/22 : RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
DISCORDANCE DE GROUPAGE.
- La constatation d’une difficulté lors de la phase de validation analytique du phénotypage
RH-KEL1 impose l’intervention du praticien biologiste.
La conduite à tenir :
• Ne pas rendre le résultat tant que la difficulté n’est pas levée.
• Donner un conseil transfusionnel provisoire en cas d'urgence.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO03/ PHENOTYPE ETENDU
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO03
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO03/ PHENOTYPE ETENDU
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Rechercher un ou plusieurs antigènes érythrocytaires autres que ceux qui sont déterminés
par le groupage ABO-RH1 et par le phénotypage RH-KEL1.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-hématologie du don de sang.
- Contexte transfusionnel.
- Préparation du panel d’hématies pour RAI.
- Constitution d’une banque de groupes sanguins rares.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- LISS: Low Ionic Strength Solution.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- RH : Rhésus.
- TIA: Test Indirect à l’Antiglobuline.
5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO03/ PHENOTYPE ETENDU
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).

- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être situés dans une zone délimitée physiquement, indépendante de toute zone
d’activité transfusionnelle différente.
- Doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Echantillon de sang à tester, prélevé sur anticoagulant EDTA. Conservé moins de 72h à
+4°C.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour microplaque.
- Centrifugeuse et incubateur pour carte de filtration.
- Automate d’immuno-hématologie.
- Bain Marie réglable de 20°C à 60°C ou étuve.
- Armoire réfrigérée pour les réactifs.
- Congélateur à - 20°C.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
b) Consommables
- Tubes secs de 5 ml.
- Embouts.
- Microplaques en polystyrène de 96 cupules, en forme U (12x8).
- Portoir à tubes.
- Coton.
- Compresses.
- Gants.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO03/ PHENOTYPE ETENDU
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Sachets jaunes pour DASRI.

- Sachets noirs pour DAOM.
- Conteneurs de déchets.
c) Réactifs
- Sérums-test monoclonaux et polyclonaux :
- Anti-RH8 (Cw).
- Anti-FY1, Anti-FY2.
- Anti-JK1, Anti-JK2.
- Anti-MNS1, Anti-MNS2, Anti-MNS3, Anti-MNS4.
- Anti-KEL2, Anti-KEL3, Anti-KEL4.
- Anti-LE1, Anti-LE2.
- Anti-LU1, Anti-LU2.
- Anti-P1.
- Anti-XG1.
- Tampon LISS.
- Enzyme protéolytique (bromeline).
- Réactifs témoins (dépourvu de toute activité anticorpale).
- Solution saline à 0.9 % voir : ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE.
- Tween 20 (0.005%) : facultatif, pour permettre aux agglutinations de ne pas trop se
coller au fond de la cupule.
- Antiglobuline humaine.
- Colonne de filtration.
6.4 Description
6.4.1 Principe
Mise en évidence de la présence ou l'absence à la surface des globules rouges des
antigènes autres que ceux déterminés lors de groupages ABO-RH1 et par le
phénotypage RH-KEL1.
6.4.2 Méthodes
- Se référer aux instructions du fabricant pour la mise en œuvre de la technique
adoptée.
- Le phénotypage étendu est réalisé généralement en :
 TIA voir : ANS/QBIH/MOP04/V03/22 : TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE.
 Technique saline voir : ANS/QBIH/MOP01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1.

22
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO03/ PHENOTYPE ETENDU
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Un contrôle négatif est utilisé pour chaque échantillon dans la technique utilisée.
- Pour chaque série d’analyse, les antisérums utilisés seront testés vis-à-vis d’au moins
deux échantillons, l’un dépourvu de l’antigène et l’autre d’expression hétérozygote.
- Une détermination de phénotype étendu repose sur deux réalisations exécutées par
deux techniciens différents ; ceci en dehors du contexte d’automation (une seule
détermination suffit).
- Un phénotypage étendu est dit valide lorsqu’on dispose de deux résultats issus de
deux prélèvements différents.
[Link] Validation analytique
Repose sur :
- Des résultats conformes des contrôles qualité internes
- L’absence d’ambiguïté réactionnelle avec chaque réactif.
- L’absence d’image de double population
- La négativité du témoin réactif.
- Le profil réactionnel cohérent (présence d'au moins un des deux antigènes
antithétiques…).
- L’absence de divergence entre deux réalisations.
- L’absence de discordance avec une antériorité de résultat.
[Link] Interprétation
- Absence d'agglutination : Résultat négatif = Absence de l'antigène recherché.
- Présence d'agglutination : Résultat positif = Présence de l'antigène recherché.
Une fois interprétés, les résultats sont rendus sous format numérique international et si
besoin, pour faciliter l’interprétation, en nomenclature traditionnelle.
Par exemple : JK:1,-2 ou Jk(a+b-).
[Link] Transcription des résultats
- Reporter les résultats du phénotype étendu des donneurs de sang sur le registre de
groupage des donneurs de sang ainsi que les cartes de groupage sanguin.
- Reporter les résultats du phénotype étendu des receveurs sur le registre de groupage
des receveurs ainsi que les cartes de groupage sanguin.
- Saisir les données par voie informatique, imprimer et les archiver en cas d’automation
[Link] Gestion des anomalies
La constatation d'une anomalie lors de la phase de validation analytique du phénotypage
impose l'intervention du praticien biologiste.
La gestion de l'anomalie repose alors sur :
- Une attitude sécurisée en termes d'exploitation :

23
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO03/ PHENOTYPE ETENDU
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

• Ne pas rendre le résultat.

• Rendre un conseil transfusionnel provisoire en cas d’urgence.
- Une nouvelle détermination du phénotype :
• Si l'anomalie n'est pas retrouvée, le résultat est validé.
• Si l'anomalie est retrouvée une poursuite de l’exploration.
- Une attitude cohérente en terme d'exploration de l'anomalie qui tiendra compte :
• Du contexte clinique.
• Du profil réactionnel obtenu (témoins adéquats inclus).

24
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO04/ RECHERCHE DE L’ANTIGENE D FAIBLE
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO04
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

25
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO04/ RECHERCHE DE L’ANTIGENE D FAIBLE
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Recherche d'une expression faible de l'antigène RH1 non détecté en hémagglutination
directe.
2. Domaine d’application
Qualification immuno-hématologique du don de sang : se fait systématiquement chez tous
les donneurs de sang RH1 négatifs.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th
Edition/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- Ig : Immunoglobuline.
- LISS: Low Ionic Strength Solution.
- PSL: Produits Sanguins Labiles.
- RH : Rhésus.
- TDA : Test Direct à Antiglobuline.
- TIA: Test Indirect à l’Antiglobuline.
5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.

26
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO04/ RECHERCHE DE L’ANTIGENE D FAIBLE
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur

(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être situés dans une zone délimitée physiquement, indépendante de toute zone
d’activité transfusionnelle différente.
- Doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Echantillon de sang à tester, prélevé sur anticoagulant EDTA.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Bain Marie réglable de 20 à 60°C ou étuve.
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour microplaque.
- Centrifugeuse et incubateur pour carte de filtration.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
b) Consommables
- Tubes secs de 5 ml.
- Embouts.
- Microplaques en polystyrène de 96 cupules, en forme U (12x8).
- Portoir à tubes.
- Coton.
- Compresses.
- Gants.
- Sachets jaunes pour DASRI.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO04/ RECHERCHE DE L’ANTIGENE D FAIBLE
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Sachets noirs pour DAOM.

- Conteneurs de déchets.
c) Réactifs
- Solution saline à 0.9 % voir : ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE.
- Tampon LISS voir ANS/QBIH/MOP11/V03/22 : SOLUTION LISS.
- Anti-D IgG ou anti-D (IgG+ IgM).
- Antiglobuline humaine polyvalente ou anti-IgG.
- Colonne de filtration anti-IgG.
6.4 Description
6.4.1 Principe
La mise en évidence des sites antigéniques RH1 faiblement exprimés par technique
d'hémagglutination indirecte à l'antiglobuline (TIA).
6.4.2 Méthodes
La recherche du RH1 faible se fait par la méthode du TIA voir :
ANS/QBIH/MOP04/V03/22 : TEST INDIRECT A ANTIGLOBULINE.
- L'étape de sensibilisation utilise les hématies du sujet avec le réactif anti-D (IgG) ou
(IgM+ IgG), un échantillon sanguin RH+ est utilisé comme témoin positif.
- Si la recherche de D faible est positive, réaliser un TDA. Il doit être négatif.

6.4.3 Résultats et interprétations

Résultat de la
Témoin Résultats de
recherche du Interprétation
RH1 faible positif l’analyse
Conduite à tenir
Validation de Ag RH1 faible
Négatif Positif
l’analyse négatif
Si négatif, validation de
Ag RH1 faible positif.
l’analyse.
Analyse Réaliser Si positif, analyse non validée
temporairement un TDA. Voir ANS/QBIH/MOP04/ Recherche
Positif Positif
non validée V03/22 : test indirect à d’antigène D faible
l’antiglobuline (causes non concluante.
d’erreur).

Reprendre l’analyse Voir ANS/QBIH

Analyse non /MOP04/V03/22 : TEST INDIRECT A
Négatif Négatif
validée L’ANTIGLOBULINE (causes
d’erreurs).

28
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Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/PRO04/ RECHERCHE DE L’ANTIGENE D FAIBLE
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

N.B :
- En cas de résultat RH1 faible positif, les PSL issus de ce don sont étiquetés RH1 positif.
- Expliquer au donneur ce résultat et lui remettre une carte de groupage RH1 négatif avec
mention de D faible positif à utiliser en tant que receveur.
- S’il s’agit d’une femme en âge de procréer, expliquer la nécessité de la prophylaxie anti-D.
- Dans le cas d’un donneur régulier, lui remettre une carte de donneur RH1 positif.
- Les CGR issus d’un don avec TDA positif doivent être détruits, les donneurs du sang
convoqués, examinés par le médecin du don et suivis à long terme.

29
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO05/ RECHERCHE DES ANTICORPS ANTI-
V03/22 ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO05
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

31
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Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO05/ RECHERCHE DES ANTICORPS ANTI-
V03/22 ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Dépister et identifier les anticorps anti-érythrocytaires autres que les anti-A et anti-B.
2. Domaine d’application
- Diagnostic et prévention des accidents transfusionnels immuno-hémolytiques allo
immunisations post-transfusionnelles anti-érythrocytaires.
- Diagnostic et prévention des allo-immunisations fœto-maternelles anti-érythrocytaires.
- Qualification immuno hématologique du don de sang.
- Contexte de transplantation.
- La Maladie Hémolytique du Nouveau-Né.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Procédures opératoires en immuno-hématologie 2017.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
- Basic and applied concepts of blood banking and transfusion practices 2017.
- Dacie and Lewis practical haematology 12th edition 2017.
4. Définitions et abréviations
- AGH : Antiglobuline Humaine.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux.
- DTT : Dithiothréitol.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- LISS: Low Ionic Strength Solution.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PEG : Polyéthylène Glycol.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- RH : Rhésus.
- TDA : Test Direct à l’Antiglobuline.
- TIA : Test Indirect à l’Antiglobuline.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO05/ RECHERCHE DES ANTICORPS ANTI-
V03/22 ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être situés dans une zone délimitée physiquement, indépendante de toute zone
d’activité transfusionnelle différente.
- Doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
- Sérum ou plasma frais obtenu à partir d’un spécimen de sang prélevé avec EDTA.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour microplaque.
- Centrifugeuse et incubateur pour cartes de filtration ou colonne de billes de verre.
- Bain Marie réglable de 20 à 60°C ou étuve.
- Automate d’immuno-hématologie.
- Armoire réfrigérée pour les réactifs.
- Hotte chimique.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.

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ANS/QBIH/PRO05/ RECHERCHE DES ANTICORPS ANTI-
V03/22 ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Consommables
- Tubes secs de 5 ml.
- Microplaques en U de 96 cupules, en forme U (12x8).
- Embouts.
- Gants.
- Portoirs à tubes.
- Compresses.
- Marqueur indélébile.
- Sachets jaunes pour DASRI.
- Sachets noirs pour DAOM.
- Conteneurs de déchets.
c) Réactifs
- Solution saline à 0.9 % voir : ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE
- AGH polyvalente.
- Tampon LISS ou Albumine bovine ou PEG.
- Enzyme (papaïne, ficine…).
- DTT.
- Tween 20 (0.005%): facultatif, pour permettre aux agglutinations de ne pas trop se
coller au fond de la cupule.
- Cartes de filtration polyvalentes et neutres.
- Panel d’hématies test de dépistage prêt à l’emploi.
- Panel d’hématies test d’identification prêt à l’emploi
- Hématies D positif sensibilisées ou contrôle de Coombs.
6.4 Description
6.4.1 Principe
Consiste à mettre en évidence, par TIA et à l’aide d’une gamme d’hématies tests de
groupe O de phénotype connu dans les différents systèmes de groupes sanguins (panel
RAI), un ou plusieurs anticorps anti-érythrocytaires irréguliers présents dans le
sérum/plasma du patient ou du donneur.
Elle comporte deux étapes, dépistage et identification.
Les hématies doivent posséder tous les antigènes correspondants aux anticorps
dangereux en transfusion, appartenant aux systèmes suivants : RH, KEL, DUFFY, KIDD,
MNS, LEWIS et P (tableau 1).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO05/ RECHERCHE DES ANTICORPS ANTI-
V03/22 ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Tableau 1 : Les hématies-tests homozygotes recommandées du panel RAI.

Hématies homozygotes
Système Antigène
recommandées

C R1R1 ou Rw1R1
c R2R2
RH D R1R1 et R2R2
E R2R2
e R1R1 ou Rw1R1
K Non
KEL
k Non
Fya Oui
FY
Fyb Oui
Jka Oui
JK
Jkb Oui
M Non
N Non
MNS
S Oui
s Oui
Lea Non
LE
Leb Non
P P1 Non

6.4.2 Méthodes
Un CQI des réactifs est effectué avant toute analyse voir ANS/QBIH/PRO07/V03/22 :
CONTROLE QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
[Link] Dépistage
- La recherche d’anticorps anti-érythrocytaires est réalisée en TIA
ANS/QBIH/MOP04/V03/22 : TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE avec les
hématies du panel de dépistage.
- Si les réactions sont négatives (absence d’agglutination ou d’hémolyse), la RAI est
négative et la procédure prend fin.
- Si une réaction positive est observée avec une ou plusieurs hématies, il faut
procéder à l'identification des anticorps dépistés.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO05/ RECHERCHE DES ANTICORPS ANTI-
V03/22 ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

[Link] Identification
L’identification de la spécificité d’anticorps est réalisée à l’aide du panel d’identification.
Elle s’effectue à la température optimale et dans le milieu de réaction optimal du ou des
anticorps irréguliers dépistés :
Par TIA (technique de référence) voir : ANS/QBIH/MOP04/V03/22 : TEST INDIRECT A
L’ANTIGLOBULINE.
Elle peut être complétée par d’autres techniques additionnelles (techniques
enzymatiques, traitements chimiques…) Voir : ANS/QBIH/MOP18/V03/22 :
TECHNIQUE ENZYMATIQUE.
Réaliser en parallèle :
 Un auto contrôle : le témoin autologue consiste à tester la réactivité du plasma du
patient ou du donneur vis-à-vis d’une suspension de ses propres hématies dans les
mêmes conditions (même milieux, même température) voir :
ANS/QBIH/MOP15/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION LISS.
 Un TDA, il permet de mettre en évidence la sensibilisation in vivo des hématies
patient ou donneur par un anticorps et/ou le stigmate de son passage (la fraction
C3d du complément) grâce à l’utilisation de l’antiglobuline humaine voir
ANS/QBIH/MOP10/V03/22 : SENSIBILISATION D'HEMATIES PAR UN
ANTICORPS DE CLASSE lgG.
- Noter le nom et prénom du patient ou du donneur sur le tableau antigénique
accompagnant le panel et y reporter l’intensité de l’agglutination avec chaque
hématie dans les deux milieux dans les cases prévues à cet effet.
- Phénotyper les hématies du sujet à tester et vérifier l’absence de l’antigène
correspondant à l’allo anticorps identifié pour confirmer qu’il s’agit bien d’un allo
anticorps et non d’un auto anticorps.
[Link] Interprétation et validation analytique
La validation est basée sur les résultats attendus des CQI
voir :ANS/QBIH/PRO07/V03/22 : CONTOLE QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
 L’interprétation de la RAI est basée sur :
- Historique du patient.
- Résultat d’autocontrôle et du TDA.
- L’intensité de la réaction et son homogénéité.
- La(les) technique(s) utilisée(s).
- La règle de 3 : elle repose sur l’obtention d’au moins 3 hématies-tests positives
(porteuses d’antigène correspondant à l’anticorps identifié) et 3 hématies-tests
négatives (dépourvues d’antigène correspondant à l’anticorps identifié). Cette règle
est difficile à appliquer lorsqu’il s’agit d’antigènes de faible fréquence.

36
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO05/ RECHERCHE DES ANTICORPS ANTI-
V03/22 ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 La détermination de la spécificité du ou des anticorps présents dans le sérum du sujet à

tester se fait en confrontant les réactions positives et négatives avec la distribution
antigénique des hématies du panel RAI.
 Dans chaque support analytique donnant une réaction négative, exclure tous les anticorps
correspondants aux antigènes présents sur les hématies d’identification en tenant en
considération les caractéristiques propres (température, milieux de réaction) du ou des
anticorps soupçonnés.
 Après avoir appliqué la méthode d’exclusion, tenter d’expliquer chacune des réactions
positives et négatives en groupant par deux après par trois les anticorps non éliminés.
Cette démarche doit être poursuivie jusqu’à ce que l’on trouve un groupe d’anticorps
expliquant chacune des réactions positives et négatives.
 L’utilisation d’un autre panel ou des hématies informatives est parfois nécessaire pour
résoudre certaines difficultés d’identification en particulier les situations de mélange
d’anticorps.
 Saisie des résultats :
- Saisie manuelle des résultats par deux personnes différentes.
- Retranscrire les résultats sur le registre et/ou un support numérique.
- Noter la date de réalisation et de validité de la RAI : le numéro de lot, le technicien qui a
manipulé et le biologiste qui a validé.
- Mentionner la présence et la date de découverte d’un ou plusieurs anticorps anti-
érythrocytaires sur la carte de groupage sanguin ABO-RH1.
- Le nom et le cachet du spécialiste qui a validé le résultat.

 La durée de validité de la RAI est de :

 03 semaines au maximum en l'absence de circonstances d’immunisation anti-
érythrocytaires supérieures à 6 mois.
 72 heures au maximum en présence d'antécédents transfusionnels de 3 semaines à 6
mois, ou obstétricaux inférieurs à 6 mois.
 24 heures au maximum en présence d'antécédents transfusionnels inférieur à 3
semaines ou antécédents inconnus.

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ANS/QBIH/PRO06/ EPREUVE DIRECTE DE COMPATIBILITE AU
V03/22 LABORATOIRE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITÉ

Code-Document : ANS/QBIH/PRO06
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée : processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

Commission de rédaction Commission de La Directrice Générale de

et d’actualisation validation l’Agence Nationale du Sang
Dr K.L OULD KABLIA

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ANS/QBIH/PRO06/ EPREUVE DIRECTE DE COMPATIBILITE AU
V03/22 LABORATOIRE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITÉ

1. Objectif
Délivrer des CGR compatibles.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du CGR.
- Prévention des accidents immunologiques post-transfusionnels chez :
 Receveur présentant une RAI positive ou antécédents de RAI positive
 Nouveau-né présentant un test direct à l'antiglobuline positif ou né de mère allo-
immunisée.
 En cas de transfusions itératives.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Procédures opératoires en immuno-hématologie 2017.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définitions et abréviations
- Ac : Anticorps.
- Ag : Antigène.
- AGH : Antiglobuline Humaine.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- ATCD : Antécédant.
- CGR : Concentré de Globule Rouge.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux.
- EDCL : Epreuve Directe de Compatibilité au Laboratoire.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- HPTR : Hémolyse Post-Transfusionnelle Retardée.
- LISS: Low Ionic Strength Solution.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- MHNN : Maladie Hémolytique du Nouveau-Né
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.

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ANS/QBIH/PRO06/ EPREUVE DIRECTE DE COMPATIBILITE AU
V03/22 LABORATOIRE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITÉ

- RH : Rhésus.
- TDA : Test Direct à l’Antiglobuline.
5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- Doivent être situés dans une zone délimitée physiquement, indépendante de toute zone
d’activité transfusionnelle différente.
- Doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
- Echantillon de sang à tester, prélevé sur anticoagulants EDTA.
- Tubulures des CGR à compatibiliser.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour microplaque.
- Centrifugeuse pour cartes de filtration.
- Armoire réfrigérée pour les réactifs.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO06/ EPREUVE DIRECTE DE COMPATIBILITE AU
V03/22 LABORATOIRE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITÉ

b) Consommables
- Dispositifs de perforation de tubulures à usage unique ou une paire de ciseaux.
- Tubes secs de 5 ml.
- Microplaques en polystyrène de 96 cupules, en forme U (12x8).
- Embouts.
- Gants.
- Portoirs à tubes.
- Sachets jaunes pour DASRI.
- Sachets noirs pour DAOM.
- Conteneurs de déchets.
c) Réactifs
- Solution saline à 0.9 % prête ou préparée voir : ANS/QBIH/MOP13/V03/22
SOLUTION SALINE.
- AGH polyvalente ou mono-spécifique (Anti-IgG).
- Tween 20 (0.005%) : facultatif, pour permettre aux agglutinations de ne pas trop se
coller au fond de la cupule.
- Cartes de filtration polyvalentes ou mono-spécifiques (Anti IgG).
- Tampon LISS prêt ou préparé voir ANS/QBIH/MOP11/V03/22 : SOLUTION LISS.
- Hématies sensibilisées par des IgG voir ANS/QBIH/MOP10/V03/22 HEMATIES
SENSIBILISEES PAR DES IG.
- Sérum de contrôle (CQI : Anti-RH1 de titre 4) voir : ANS/QBIH/PRO07/V03/22 :
CONTROLE QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
6.4 Description
6.4.1 Principe
C'est une analyse basée sur le principe du test indirect à l’antiglobuline et qui consiste
à tester l'échantillon de plasma du receveur vis-à-vis d'un échantillon représentatif du
concentré du globule rouge à transfuser.
6.4.2 Méthodes
[Link] Sélection des unités à compatibiliser
- Vérifier le statut Immuno-Hématologique du receveur :
 Notion d'incident transfusionnel ;
 Le groupage ABO-RH1 ;
 Le phénotypage RH-KEL1 ;

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO06/ EPREUVE DIRECTE DE COMPATIBILITE AU
V03/22 LABORATOIRE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITÉ

 TDA ;
 RAI ;
 Phénotype étendu.
- Sélectionner les unités de CGR à transfuser en fonction du statut immunologique du
receveur :
 Groupe sanguin ABO-RH1 ;
 Phénotype RH-KEL1 ;
 Absence d'un autre antigène cible d'un allo-anticorps présent dans le sérum du
receveur.
- Identifier les tubulures du CGR à compatibiliser avant de les désolidariser.
[Link] Exécution technique
- Identifier les tubes utilisés pour les tests.
- Adsorber les auto anticorps sur les hématies correspondantes avant d'effectuer
l'EDCL Si le sérum contient des auto anticorps
ANS/QBIH/MOP17/V03/22 : TECHNIQUE D’ADSORPTION.
- Mettre en contact les suspensions d’hématies et le plasma/sérum du receveur et
incuber le mélange à 37°C (étape de sensibilisation).
- Mettre en évidence la formation des complexes AG-AC par l’utilisation d’une anti-
globuline humaine (étape de révélation).
- Troistechniques d’EDCL seront décrites voir : ANS/QBIH/PRO05/V03/22 :
RECHERCHE DES ANTICORPS ANTI-ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI).
 Sur tube.
 Sur microplaque.
 Filtration.
[Link] Contrôle du système analytique
- Utiliser des hématies sensibilisées comme un contrôle positif et le sérum contrôle
(CQI) pour valider le système analytique.
[Link] Interprétation et validation analytique
- Si la réaction est négative = l’unité est compatible.
- Si la réaction est positive = l’unité est incompatible, refaire l'EDCL avec d'autres
unités de CGR sélectionnées.
- Une RAI est réalisée de préférence après un EDCL positif sur le même échantillon.
- L’EDCL doit être réalisée moins de 72 h avant transfusion et reste valide jusqu'à la
transfusion.

43
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO06/ EPREUVE DIRECTE DE COMPATIBILITE AU
V03/22 LABORATOIRE
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE
Quoi
6.5 Logigramme Comment
Echantillon Receveur /Mère
Qui .ANS/QBIH/MOP01/
V03/22 : Groupage
Polytransfusés ABO-RH1.
1
.ANS/QBIH/PRO05/
.LSP/BIOLOGISTE Phénotype érythrocytaire ABO-RH-KEL1 valide V03/22 : Recherche
.Praticien des Anticorps Anti-
spécialiste érythrocytaires
Irréguliers (RAI).
Drépanocytaire RAI
. Praticien .ANS/QBIH/MOP02/
Spécialiste V03/22 : Phénotype
Négative
44

Positive Restreint RH-KEL1.

Immunisé

OUI NON
ATCD RAI ATCD RAI
positive ATCD HPTR
positive
Choix de CGR isogroupe isorhésus OUI NON OUI NON OUI NON
ou ABO-RH1 compatible et
Anti-RH, phénocompatible RH-KEL1
-KEL

OUI NON EDCL recommandé Choix de CGR Choix de CGR isogroupe Choix de CGR ANS/QBIH/PRO
isogroupe isorhésus isorhésus ou ABO-RH1 isogroupe 03/V03/22 :
ou ABO-RH1 compatible et isorhésus ou
compatible et Choix de CGR ABO-RH1
Choix de CGR Phénotype
Phénotype phénocompatible Choix de CGR isogroupe Etendu.
phénocompatible isogroupe compatible et
isogroupe isorhésus ou
étendu FY, JK, isorhésus ou
isorhésus ou phénocompatible
ABO-RH1 ABO-RH1
MNS ABO-RH1 compatible et
Sélection des CGR compatible et
Sélection des CGR compatible et phénocompatible
dépourvus de l'antigène phénocompatible
. Praticien Choix de CGR
E correspondant à l'ancien
dépourvus de l'antigène phénocompatible Sélection des
correspondant à CGR dépourvus
Spécialiste Choix de CGR isogroupe isorhésus D et le nouveau anticorps
l'anticorps présent dans le de l'antigène
isogroupe ou ABO-RH1 C présent dans le sérum du correspondant à
sérum du patient l'anticorps
isorhésus ou compatible et patient
ABO-RH1 phénocompatible L antérieurement
identifié Concordance
compatible et RH-KEL1 avec Concordance
phénocompati informatique informatique
respect du
ble RH-KEL1 ou EDCL ou EDCL
phénotype étendu EDCL EDCL abrégée EDCL abrégée
FY, JK, MNS

44
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/PRO06/ EPREUVE DIRECTE DE COMPATIBILITE AU
V03/22 LABORATOIRE
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE
Quoi
Qui Comment
1

MHNN
.ANS/QBIH/PRO05/V03/22 :
. LSP/ BIOLOGISTE Recherche des Anticorps
RAI Mère Anti-érythrocytaires
. Praticien spécialiste Irréguliers (RAI).
45

Positive ANS/QBIH/MOP03/V03/22 :
Négative avec TDA négatif Test Direct à L’Antiglobuline

Choix de CGR isogroupe

Choix de CGR isogroupe
isorhésus, phénocompatible
isorhésus, phénocompatible
RH-KEL1
RH-KEL1

Sélection des CGR dépourvus

de l'antigène correspondant à
. Praticien l'anticorps présent dans le
Spécialiste sérum de la mère

Concordance informatique ou EDCL

EDCL abrégée

45
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO07
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

47
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Assurer la sécurité transfusionnelle Immuno-Hématologique.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du don.
- Contexte pré-transfusionnel.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQ : Contrôle Qualité.
- CQE : Contrôle Qualité Externe.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux.
- EDCL : Epreuve Directe de Compatibilité au Laboratoire.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- GR : Globule Rouge.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RH : Rhésus.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- TDA : Test Direct à Antiglobuline.
5. Personnel concerné
- Responsable du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine.
- Responsable du laboratoire de contrôle qualité.
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou biologistes).

48
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique.
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
6.2. Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.

6.3. Description
6.3.1. Procédure
Applicables aux techniques manuelles ou automatiques.
*Normes de qualité particulières et contrôles plus détaillés des réactifs destinés aux
machines de groupe sanguin assurés par les fabricants des appareils.

6.3.2. Méthodes
[Link]. CONTROLE DE QUALITE INTERNE
1) CQ des équipements
- Centrifugeuses.
- Bain marie.
- Incubateurs.
- Réfrigérateurs.
- Enceintes thermostatiques.
- Micropipettes.

2) Contrôle des réactifs

- Standards minimum d’activité (réactif anti-A, anti-B, et anti-RH1).
- Réactifs de groupes sanguins.
- Réactifs Anti-globuline.
- Echantillons.

49
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

2.1) Contrôle à réception des réactifs

A. Consiste à vérifier si les conditions de transport n’ont pas affecté la qualité des réactifs,
en procédant d’abord au contrôle de la température de transport (pas de rupture de la
chaine de froid), à un contrôle visuel, qui nous permet de constater une éventuelle
dégradation des kits de réactif, flacons cassés, aspect trouble d’une solution, GR
hémolysés… et enfin tester la conformité des réactifs aux exigences analytiques.
B. Les lots contrôlés doivent être marqués à l’aide d’une pastille ou un stylo, puis séparés
des lots non contrôlés.
C. Avant de mettre en route la validation analytique, il faut vérifier que la référence de la
notice du lot reçu correspond bien à celle utilisée en routine au laboratoire, sinon relire
la notice afin d’appliquer les nouvelles conditions d’utilisation. Après vérification, le
technicien doit dater et signer la nouvelle notice.
D. En cas d’anomalie constatée, ne pas accepter la réception du produit, appeler le
fournisseur, prévenir le chef de service.
• Vérifier le mode d’emploi et la conservation selon le mode opératoire préconisé par le
fabricant.
• Marquer les dates de préparation et de péremption sur les réactifs préparés ou
reconstitués (archivage et enregistrements)

2.2) CQ des globules rouges tests

Paramètre à Fréquence des

Norme de qualité contrôles Lieux
vérifier

Pas d’hémolyse Laboratoire de

Apparence Journalier
Pas de turbidité détectable qualification

Réactivité et Réactions nettes des Laboratoire de

Chaque lot
spécificité antigènes avec réactifs qualification

50
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

2.3) CQ .des réactifs ABO

Fréquence des
Paramètre à vérifier Norme de qualité Lieux
contrôles

Pas de précipité
Pas de particules ou de Laboratoire de
Apparence Journalier
formation de gel (examen qualification
visuel)

Pas d’hémolyse immune

Pas de formation de rouleaux ou
Réactivité et phénomène de zone Laboratoire de
/ nouveau lot
spécificité Réaction nette avec les GR à qualification
activité affaiblie
Pas de fausse réaction
Réactif non dilué
Réaction +3 à +4 avec
suspension de GR à 3% en
milieu salin, Température
ambiante Laboratoire de
Activité / nouveau lot
qualification
Titre 128 pour anti-A, anti-B et
anti-AB avec les GR A1 et B
Titre 64 Avec les GR A2 et
A2B

 LES NORMES
a) Anti-D

Réactif Hématies test Intensité Titre Score

Anti-D D+C+c+E+e+ +++ 32 40

51
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

b) Réactifs Anti-C, Anti-E, Anti-c, Anti-e et Anti-Kell

Réactif Hématies test Intensité Titre Score

Anti-C D-C+c+E-e+ +++ 16

Anti-E D- C-c+E+e+ +++ 16
Anti-c D- C+c+E-e+ +++ 16 30
Anti-e D- C-c+E+e+ +++ 16 30
Anti-Kell Kell + +++ 16 35

+++ = score 10: Agglutinats non dissociés par le décollement du culot et

fragmentés en trois amas maximum.
++ = score 8 : Culot fragmenté en 4 à 10 amas lors du décollement.
+ = score 5 : Réaction formée de plus de 10 petits amas, agglutinats
dissociés par le décollement.
(+) = score 2 : Agglutination très fine mais encore visible.
- = score 0 : Absence d’agglutination.

2.4) CQ des réactifs RH-K1

Paramètre à Fréquence des

Norme de qualité
vérifier contrôles

Apparence Identique à celle des réactifs ABO Journalier

Réactivité et Chaque nouveau

Identique à celle des réactifs ABO
spécificité lot

Le sérum non dilué doit donner une réaction

+3 à +4 dans le test prévu pour chaque sérum,
Chaque nouveau
Activité un titre 16 pour anti-RH2, anti-RH3, anti-RH4, lot
anti-RH5, anti-KEL1 et anti-CDE au moyen de
GR hétérozygotes appropriées

52
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

2.5) CQ de l’antiglobuline polyvalente

Paramètre à vérifier Norme de qualité Fréquence des contrôles

Pas de précipité
Apparence Journalier
Pas de particules ou de formation de gel

 Pas d’activité hémolytique et pas

Chaque nouveau lot
d’agglutination des GR non
sensibilisées, après incubation,
comme dans l’épreuve de
compatibilité, avec du sérum
compatible.
 Agglutination de GR sensibilisées Chaque nouveau lot
Réactivité et avec un sérum anti-D contenant une
spécificité activité anticorps maximal de 10ng/ml
(005 UI/mL d'activité AC)
 Agglutination de GR sensibilisés par Chaque nouveau lot
un allo anticorps fixant le complément
(anti-Jka) à un titre plus élevé en
présence qu’en l’absence du
complément, ou agglutination de
GR recouverts de C3b et C3d

2.6) CQ des enzymes

Paramètre à vérifier Norme de qualité Fréquence des contrôles

- Pas de précipité
Apparence - Pas de particules ou de formation de Chaque lot
gel
- Pas d'agglutination ou d'hémolyse
d’hématies traitées par les enzymes
en présence de sérum AB
Chaque lot
- Agglutination des GR sensibilisées
Réactivité avec des ant-RH1 de titre faible de
type IgG
- Pas d'agglutination avec des GR non Chaque nouveau lot
sensibilisées et pas d'activité
hémolytique

53
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

2.7) CQ sérum physiologique

Paramètre à vérifier Norme de qualité Fréquence des contrôles

- Pas de turbidité ou de
Apparence particules détectables à Chaque jour
l'examen visuel

Teneur en NaCl 0,154 mol/L (9 g/L) Chaque nouveau lot

Chaque nouveau lot pour le

PH 6.6 à 7.6
sérum physiologique tamponné

2.8) CQ du tampon LISS

Paramètre à vérifier Norme de qualité Fréquence des contrôles

- Pas de turbidité ou de
Apparence particules détectables à Chaque jour
l'examen visuel

PH 6.6 à 7.6 Chaque nouveau lot

2.9) CQ de l'albumine

Paramètre à vérifier Norme de qualité Fréquence des contrôles

- Pas de turbidité ou de
Apparence particules détectables à Chaque jour
l'examen visuel

- Pas d'agglutination de GR
non sensibilisées
Réactivité Chaque nouveau lot
- Pas d'activité hémolytique
- Pas de phénomène de zone

54
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

3) Contrôle des techniques de manipulation

Paramètre à Echantillons témoin Fréquence du

Normes minimales
vérifier contrôle

1. Groupage ABO
Echantillon de groupe Série de tests ou
épreuve Utiliser deux réactifs différents
O, A1 et B 1/j
globulaire

2. Groupage ABO Série de tests ou

Utiliser des hématies A et B. /
épreuve sérique 1/j

Double détermination avec

deux anti D provenant de
deux clones différents,
Pour le donneur, la technique
3. Groupage Echantillon RH1 et Série de tests ou
doit permettre de reconnaitre
RH1 RH-1 1/j
l'Ag D faible, des variants
D les plus importants
(notamment DVI), comme
RH1positifs.
Contrôle positif : GR
hétérozygote pour
/ nouveau lot
4. Phénotype RH l’antigène testé
Réactifs mono spécifiques (réactifs
et autres Contrôle négatif : GR
monoclonaux)
sans l’antigène
testé

Ajouter au test négatif

5. Test à des hématies
Laver au moins 3 fois les GR Chaque test
l’antiglobuline en sensibilisées pour
avant ajout de l’antiglobuline donner une réaction négatif
tube réactionnel
positive

Echantillon de sang
contenant des titres
6. Recherche d’anti A et B immuns
GR A1 et B > aux titres admis / série
d’hémolysines
pour agglutination
saline

55
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 10
ANS/QBIH/PRO07/ CONTROLE QUALITE
V03/22 EN IMMUNO-HEMATOLOGIE

DIRECTION DE NORMALISATION ET QUALITE

Paramètre à Fréquence du
Normes minimales Echantillons témoin
vérifier contrôle

Utiliser au moins un test

indirect à l'antiglobuline ou
un autre test de sensibilité Sérums contenant des Occasionnel à la
équivalente manuellement demande du
7. RAI (receveur) Ac anti GR de
ou sur automate et des biologiste ou lors
spécificité connue
GR homozygotes pour de CQE
les principaux antigènes
cliniquement importants

Réaliser au moins un test

indirect à l’antiglobuline ou Sérums contenant des Occasionnel à la
8. Epreuve de un autre test de sensibilité Ac anti GR de demande du
compatibilité biologiste ou lors
équivalente manuellement spécificité connue
de CQE
ou sur automate

[Link]. CONTROLE DE QUALITE EXTERNE

1) Objectif
• Evaluation des performances.
• « Contrôle normal » et « contrôle problème ».

2) Local
• Laboratoire de référence.
• Ou comparaison à un autre laboratoire.

3) Matériel
Echantillons de sang.

4) Procédure
Echantillons :
Communication des résultats aux laboratoires pour comparaison des normes de qualité
inter laboratoire y compris le laboratoire de référence.

56
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO08
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

57
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Résoudre les difficultés et les discordances rencontrées lors du groupage ABO.
2. Domaine d’application
- Contexte pré-transfusionnel.
- Validation immuno-hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th.
Edition/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
- Technical manual standards ,20th édition, AABB/ 2020.
4. Définition et abréviation
- Ag : Antigène.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CAT : Conduite A Tenir.
- CQE : Contrôle Qualité Externe.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères.
- DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux.
- DP : Double Population.
- DTT : Dithiothréitol.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- GR : Globule Rouge.
- Ig : Immunoglobuline.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- RH : Rhésus.
- TDA : Test Direct à l’Antiglobuline.
- Lectines : Glycoprotéines qui se lient aux antigènes de groupe sanguin, provoquant
l’agglutination des globules rouges

58
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1. Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2. Locaux
- Laboratoire d'Immuno-Hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3. Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Echantillon de sang à tester, prélevé sur anticoagulant EDTA.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Bain Marie réglable de 20 à 60°C ou étuve.
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour microplaque.
- Centrifugeuse pour cartes de filtration.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
b) Consommables
- Alcool 70%.
- Plaques d'opaline.
- Tubes secs de 5 ml.
- Embouts.
- Microplaques en U de 96 cupules, en forme U (12x8).
- Sachets jaunes pour DASRI.
- Sachets noirs pour DAOM.
- Conteneurs de déchets.

59
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

c) Réactifs
- Serum-tests: Anti-A, Anti-B, Anti-A+B monoclonaux.
- Contrôle réactif, Plasma AB.
- Sérum-tests : Anti A1 et Anti H.
- Solution saline à 0.9 % Voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : (SOLUTION SALINE)
- Tween 20 (0.005%) : facultatif, pour permettre aux agglutinations de ne pas trop se
coller au fond de la cupule.
- Hématie-tests A1, A2, B et O voir : ANS/QBIH/MOP08/V03/22 : PREPARATION
DES HEMATIES-TESTS A1, A2, B ET O.
- Antiglobuline polyvalente.
- Colonne de filtration.
6.4. Description
6.4.1. Principe
La mise en œuvre de techniques et d’investigations complémentaires lors des
discordances et difficultés de groupage ABO.
6.4.2. Méthode
Devant toute difficulté ou discordance de groupage ABO :
 Contrôler les réactifs : périmés, mal conservés, hématies-tests hémolysées.
 Contrôler l’échantillon (conservé >72 h, hémolysé..).
 Ne pas remettre le résultat de groupage sanguin.
 Refaire le groupage en réalisant les témoins :
- Témoin Auto : sérum ou plasma échantillon + hématies échantillon.
- Témoin Allo : sérum ou plasma échantillon + hématies tests groupe O (plusieurs
hématies O est recommandé).
- Témoin Réactif : témoin contrôle + hématies échantillon.
- Refaire le groupage sur un nouveau prélèvement.
- Se renseigner sur l’historique médical du patient :
 Age.
 Diagnostic médical.
 Déterminations antérieures du groupage sanguin.
 Antécédents transfusionnels.
 Antécédents de greffe.
 Prises médicamenteuses.

60
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

A. INCOHERENCE AU COURS DE L’EPREUVE SERIQUE/PLASMATIQUE

1. Incohérence par défaut réactionnel
1.1. Absence d’anticorps attendus à l’épreuve sérique/plasmatique
1.1.1. Groupage d’un adulte Ceci s’observe dans les cas suivants :
Causes :
 Sujet âgé.
 Déficit immunitaire acquis ou héréditaire (Hypo/agammaglobulinémie, Myélome,
Leucémie lymphoïde chronique…).
 Support technique peu sensible.
Conduite à tenir :
 Refaire l’épreuve plasmatique en tube : ANS/QBIH/MOP01/V03/22: GROUPAGE ABO-
RH1 après incubation de 5-10 volumes de sérum/plasma à +4°C pendant 30 minutes
avec un volume de la suspension d’hématies à 2% et centrifugation à 1000 tour/mn
pendant une minute voir : ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D’HEMATIES EN
SOLUTION SALINE.
 Demander les renseignements cliniques et biologiques (une électrophorèse des
protéines, une immunoélectrophorèse, un dosage des immunoglobulines…).
> Un 2ème prélèvement et éventuellement un autre après traitement, pour refaire le groupage
voir : ANS/QBIH/MOP01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1.
1.1.2. Groupage d’un nouveau-né
Causes :
 Les anticorps naturels de l’enfant ne sont pas encore développés à un niveau détectable.
Conduite à tenir :
 Le groupage d’un nouveau-né/nourrisson de moins de 6 mois est rendu sur une carte
provisoire.
 Il ne peut être effectué que par la seule épreuve globulaire de BETH – VINCENT :
ANS/QBIH/MOP01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1.
 Refaire après l’âge de 6 mois.
1.2. Agglutination faible ou infra détectable : Présence d'hémolysines anti-A et/ou
anti-B dans le sérum
Se voit lorsque le groupage est effectué sur sérum. Le cas le plus fréquent est la
présence des hémolysines anti-A dans le sang du sujet de groupe O l'agglutination
attendue avec les hématies test A1 est plus faible que celle observée avec les hématies
test B due à la lyse des hématies A, provoquée par ces hémolysines qui fixent le
complément.

61
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Conduite à tenir :
 L’utilisation de plasma prélevé sur EDTA ou de suspension d’hématies-tests contenant
l’EDTA prévient l’hémolyse par le complément.
 Décomplémenter le sérum du sujet par chauffage à 56°C pendant 20 minutes. En cas
d'urgence le diluer au 1/10 et refaire l'épreuve plasmatique.
2. Incohérence par excès réactionnel au cours de l’épreuve plasmatique
2.1. Témoin allo positif (témoin auto négatif):
Un témoin allo positif signale la présence dans le plasma, d'allo anticorps actifs à 22°C
tels que : anti-H du phénotype Bombay, anti-Lea, anti-M, anti-N, Anti-P1.
Conduite à tenir :
 Identifier l’anticorps par une RAI : ANS/QBIH/PRO05/V03/22 : RECHERCHE DES
ANTICORPS ANTI-ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI).
 Phénotyper les hématies du sujet dans le système concerné.
 Refaire l’épreuve plasmatique avec des hématies tests B, A1, A2 et O dépourvues de
l’antigène cible voir : ANS/QBIH/MOP01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1 Les résultats
devraient être concordants avec ceux de l’épreuve globulaire.
 Demander des renseignements cliniques.
 Signaler la présence de l’anticorps sur la carte de groupage.
 Au cas où il y aurait agglutinations avec toutes les hématies du panel d’identification :
 Il faut penser à la présence d’anticorps anti-H ou anti-HI.
 Rechercher la substance H globulaire voir : ANS/QBIH/MOP01/V03/22 :
GROUPAGE ABO-RH1 « Si la recherche de la substance H globulaire est
négative sur plaque, refaire cette recherche par fixation – élution car le sujet est H
nul ou H faible voir ANS/QBIH/MOP07/V03/22 : FIXATION ELUTION.
 Demander un 2éme prélèvement pour groupage et un autre sur tube sec et refaire
tous les examens ainsi que la R.A.I, après adsorption des anticorps anti A et anti
B sur les hématies A et B correspondantes dépourvues de substance H
ANS/QBIH/MOP17/V03/22 : TECHNIQUE D’ADSORPTION.
 Rechercher les substances solubles ABH dans la salive voir :
ANS/QBIH/MOP06/V03/22 : RECHERCHE DES SUBSTANCES ABH/LEWIS
SALIVAIRES.
 Faire une enquête familiale.
 Conclure à un groupe rare Bombay H nul, Bombay H faible ou para-Bombay.
 Signaler le cas à l’Agence Nationale du Sang où il sera inscrit dans le fichier
national des groupes rares pour s’y référer en cas de besoin.
62
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Cas particulier et exceptionnel : Anticorps anti-Ag privé (de faible fréquence).

Témoin Allo faussement négatif avec excès de réactivité au niveau de l’épreuve
sérique/plasmatique. Refaire l’épreuve sérique en utilisant d’autres hématies tests.
2.2. Témoins allo et auto positifs
Il s’agit de la présence d’auto-anticorps froids libres dans le sérum, il y aura alors
agglutination avec toutes les hématies-tests A1, B, O et auto.
Le chauffage à 37°C de la plaque ou du tube de groupage peut faire disparaître ces
agglutinations.
Remarque : il y a parfois persistance de la positivité du témoin allo, après adsorption des
anticorps froids, il y a donc présence d’allo anticorps dans le plasma.
Conduite à tenir :
 Effectuer une recherche d'anticorps irréguliers sur le plasma ou le sérum adsorbé.
 Demander un 2ème prélèvement sur tube sec et refaire la RAI sur sérum adsorbé.
Identifier l'anticorps. Voir : ANS/QBIH/PRO05/V03/22 : RECHERCHE DES
ANTICORPS ANTI-ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI).
 Phénotyper les hématies du sujet dans le système correspondant à l'anticorps trouvé.
 Inscrire les résultats du phénotype et de l'anticorps identifié, sur la carte de groupe
sanguin.

2.3. Témoins allo et auto négatifs

Présence d'un anticorps naturel irrégulier anti-A1 chez certains sujets A2B, A2 ou A
faibles
A l'épreuve plasmatique, on peut trouver un anticorps anti-A1.
Conduite à tenir :
1. Tester les hématies avec la lectine Dolichos biflorus (anti-A1).
2. Tester les hématies avec la lectine Ulex Europaeus (Anti-H).
3. Tester le sérum ou le plasma avec plusieurs hématies A1, A2 et O.
Interprétation :
- Les hématies du sujet ne doivent pas agglutiner avec l’anti-A1.
- Les hématies du sujet doivent agglutiner avec l’anti-H.
- Le sérum doit agglutiner uniquement les hématies A1.
- Etablir un document de groupage sanguin faisant état de ce phénotype particulier et
éventuellement.
- Indiquer une attitude transfusionnelle adaptée : les anti-A1 sont cliniquement significatifs
s’ils sont actifs à 37°C. Dans ce cas, les sujets A2, doivent recevoir des GR A2 ou O. Les
sujets A2B doivent recevoir des GR B, O, A2, A2B.
63
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

B. INCOHERENCE AU COURS DE L’EPREUVE GLOBULAIRE

1. Incohérence par défaut réactionnel
1.1. Agglutination faible ou infra détectable
a) Affaiblissement physiologique de la réactivité à l'épreuve globulaire du nouveau-né
Conduite à tenir :
Le groupage d'un nouveau-né/nourrisson de moins de 6 mois est rendu sur une carte
provisoire.
b) Etats pathologiques tels que
 Atteintes malignes des systèmes hématopoïétiques qui se caractérisent par la
diminution ou la disparition des antigènes du système ABO.
 Cancers digestifs.
Conduite à tenir :
 Refaire le groupage ABO-RH1 sur un 2ème prélèvement accompagné de
renseignements cliniques voir : ANS/QBIH/MOP01/V03/22: GROUPAGE ABO- RH1.
 Refaire éventuellement une 3ème détermination après guérison ou rémission.
 Remettre une carte de groupage provisoire avec un conseil transfusionnel.
c) Groupes faibles
Groupe A faible
Substance
Epreuve Globulaire Epreuve sérique
Soluble
A Salive
Anti-A Anti-B Anti-AB Anti-H GRB GRA1 GRA2
A H
Groupes

A1 +++ - +++ - +++ - - + +

A2 ++ - +++ +++ +++ + ou - - + +

A3 ++/- - ++/- +++ +++ +ou- - + +

Ax ( +) - + +++ +++ + ou - + +
Groupes faibles

Aend (+)/- - (+)/- +++ +++ +ou- (+)/- - +

Am - - - +++ +++ - + +

Ay - - - +++ +++ - - ( +) (+)

Ael - - - +++ +++ +++ ++ou - - +

++/- ou +/- : double population

(+) : très faible agglutination

64
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Groupes B faible
Salive
B Anti-A Anti-B Anti-AB Anti-H B A1 A2 Substance Substance
B H
B3 - ++/- ++/- +++ - +++ ++ + +

Bx (+) ou - - (+) +++ + ou - +++ ++ (+) ++

+
Bm - - - +++ - +++ ++ +

Bel - - - +++ ( + ) ou - +++ ++ - +++

Conduite à tenir :
 Faire l'épreuve de fixation-élution voir ANS/QBIH/MOP07/V03/22 : FIXATION ELUTION
 Rechercher la substance H sur les hématies et les substances ABH solubles dans la
salive ANS/QBIH/MOP06/V03/22 : RECHERCHE DES SUBSTANCES ABH/LEWIS
SALIVAIRES.
 Faire une enquête familiale.
2. Incohérence par excès réactionnel (Contrôle réactif positif)
2.1. Pseudo-agglutination
Ex : Cas du nouveau- né prélevé sur sang du cordon. (Prélèvement non conforme
car risque de contamination avec le sang maternel).
 Laver au moins 6 fois les hématies de cordons pour éliminer la gelée de Wharton, avant
d'effectuer l'épreuve globulaire.
2.2. Présence d'agglutinines froides à titre élevé
On observe une agglutination dans le tube de prélèvement même, due :
 D'une part aux auto-anticorps fixés sur les hématies du malade.
 D'autre part aux auto-anticorps libres dans le plasma.

Conduite à tenir :
 Refaire l'épreuve globulaire de BETH- VINCENT après avoir effectué jusqu’à 10 lavages
des hématies à 37°C afin d’éluer les auto-anticorps fixés sur les GR.
 Refaire l'épreuve plasmatique de SIMONIN après avoir adsorbé plusieurs fois les
anticorps froids contenus dans le plasma sur les propres hématies du sujet à +4°C ou sur
des hématies de groupe O voir ANS/QBIH/MOP17/V03/22 : TECHNIQUE
D’ADSORPTION. Parfois il est nécessaire de pratiquer l'adsorption des auto- anticorps
par des hématies papaïnes voir :

65
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

ANS/QBIH/MOP09/V03/22 : PREPARATIONS DES SOLUTION ENZYMATIQUE

ANS/QBIH/MOP18/V03/22 : TECHNIQUE DE TRAITEMENT ENZYMATIQUE DES
ENZYMES.

 Centrifuger à 4°C.
 Refaire les témoins avec le plasma adsorbé et les hématies lavées du malade. Les
témoins doivent être négatifs sinon continuer lavages et adsorptions ou faire une élution
à 56°C, le contrôle réactif doit se négativer et le témoin auto qui reste positif sera inutile.
D’autres techniques peuvent être utilisées afin de détruire les anticorps froids de type IgM
fixés au GR, comme le traitement par le DTT dithiothreitol, qui détruit les ponts disulfures.
2.3. Rouleaux
L'examen microscopique du sang montre un empilement des hématies les unes sur les
autres. C’est une sédimentation très rapide des hématies qui peut passer pour une
agglutination et qui s'observe dans les cas suivants :
• Macroglobulinémie de WALDENSTROM.
• Myélome.
• Hyperfibrinémie.
Conduite à tenir :
 Epreuve globulaire.
Laver 3 fois les hématies du sujet en solution saline à 0.9 % et refaire l'épreuve.
Voir : ANS/QBIH/MOP19/V03/22 : TECHNIQUES DE BASE EN IMMUNO HEMATOLOGIE
LAVAGE DES HEMATIES.
 Epreuve sérique.
> Demander, avec les renseignements cliniques, un 2éme prélèvement pour groupage et un
autre sur tube sec.
> Faire l'épreuve sur sérum et non sur plasma (pas de fibrinogène) en tube.
> Diluer au 1/2 ou au 1/3 le sérum en solution saline à 0.9% :
Ceci diminue la concentration de la protéine responsable mais diminue aussi la
concentration des anticorps anti A et anti B qui risquent d'être alors difficiles à déterminer.
3. Incohérence par présence d’une image de double population (DP)
Elle se caractérise par la présence d'une 1ère population d'hématies agglutinées qui
apparaît sur un fond rose représentant une 2ème population d'hématies non agglutinées.
Cause :
1. Sujet récemment transfusé avec du sang compatible non iso groupe ABO :
Exemple : Sujet A ou B transfusé avec du sang O.

66
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

2. Transfusion incompatible si les hématies transfusées ne sont pas entièrement

hémolysées (Le témoin auto pourrait être positif dans ce cas).
3. Groupage d'une variante rare A ou B (voir Tableaux).
4. Modification pathologique d'un groupe A ou B :
 Leucémie.
 Syndromes myéloprolifératif.
 Anémie réfractaire.
5. Chez nouveau-né ou sujet âgé.
6. Chimère ou mosaïque :
- greffes de moelle ou de cellules souches.
- double fécondation ou chez certains jumeaux.
Conduite à tenir :
1. Demander un 2ème prélèvement accompagné de renseignements cliniques.
2. En cas de transfusion non iso groupe incompatible :
• Faire un test direct à l'anti globuline selon la procédure voir :
ANS/QBIH/MOP04/V03/22 TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE.
• Vérifier le groupe du sang transfusé.
• Séparation des hématies autologues des hématies transfusées par micro-
centrifugation capillaire et refaire le groupage ABO.
• Effectuer le génotypage ABO .
3. En cas de pathologie maligne, refaire le groupage après traitement voir :
ANS/QBIH/MOP01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1.
4. En cas de suspicion de groupe faible, effectuer une recherche de substance ABH dans la
salive voir : ANS/QBIH/MOP06/V03/22 : RECHERCHE DES SUBSTANCES
ABH/LEWIS SALIVAIRES.
Groupe rare : faire en plus, étude génétique.
5. Chimère ou mosaïque des greffes.
• Rechercher le groupe du greffon.
• Rechercher en plus, la DP dans d'autres systèmes de groupes sanguins.
C. DISCORDANCE ENTRE DEUX RESULTATS DE GROUPE SANGUIN ABO
 Vérifier la conformité des CQI.
 Demander un nouveau prélèvement.
 Reprendre si possible avec d’autres réactifs ou d’autres conditions techniques.

67
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

D. DIFFICULTES DANS LA DETERMINATION DU GROUPAGE RH1

 Contrôle réactif positif, CAT idem à ABO.
 Image de double population, idem ABO.
 Réactivité faible ou divergence en fonction des réactifs, oriente vers un RhD variant (RhD
faible et RhD partiel).

68
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 13
ANS/QBIH/PRO08/ RESOLUTION DES DIFFICULTES ET
V03/22 DISCORDANCES DU GROUPE SANGUIN ABO

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 Logigramme

Qui Quoi Comment

Les difficultés et discordances de groupage ABO

. LSP/ Biologiste
. Praticien .ANS/QBIH/MO
spécialiste Vérifier les échantillons et les réactifs et l'historique médical. P01/ V03/22 :
Refaire le groupage avec les témoins allo et auto. Groupage ABO-
Demander un nouveau prélèvement. RH1.

Incohérence au cours de Incohérence au cours

l'épreuve globulaire de l'épreuve sérique

Excès Défaut Double Excès Défaut

réactionnel réactionnel population réactionnel réactionnel

Contrôle réactif
positif

Transfusion
compatible.
Transfusion Allo-
Nouveau- .ANS/QBIH/PRO
incompatible, anticorps né
. Praticien Auto Nouveau-né,
05/V03/22 :
spécialiste groupes RECHERCHE DES
anticorps modification Auto-
faibles, ANTICORPS ANTI-
froids, pathologique, anticorps Sujet âgé
modifications ERYTHROCYTAIRE
phénomènes groupes pathologiques S IRREGULIERS
Anticorps
de rouleaux faibles sang du (RAI)
passif Sujet
cordon,
Anticorps immuno-
Chimeres et
déprimé
mosaïques anti-A1

69
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO09/ GESTION DES ECHANTILLONS EN
V03/ 22 IMMUNO-HEMATOLOGIE DU RECEVEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO09
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

71
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO09/ GESTION DES ECHANTILLONS EN
V03/ 22 IMMUNO-HEMATOLOGIE DU RECEVEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Contrôler, traiter et conserver des échantillons conformes aux exigences analytiques en
Immuno- Hématologie
- Gérer les non conformités.
2. Domaine d'application
Sécurité Immuno-Hématologique du receveur.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- IH : Immuno-Hématologie.
5. Personnel concerné
- Personnel médical, paramédical et biologistes.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’informations : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen Immuno-Hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Registre de qualification Immuno-Hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
6.2. Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3. Matériel
a) Equipements
- Centrifugeuses de paillasse pour tubes.
- Armoire réfrigérée à +4°c.
- Congélateur (-25° et/ou -80°C).
- Micropipettes fixes et réglables.

72
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO09/ GESTION DES ECHANTILLONS EN
V03/ 22 IMMUNO-HEMATOLOGIE DU RECEVEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Consommables
- Gants à usage unique.
- Tubes secs 5 ml, 10ml.
- Portoirs pour tubes.
- Embouts.
- Compresses.
- Pissettes.
- Micropipettes Pasteur.
- Boîtes isothermes.
- Securicut.
- Paire de Ciseaux.
6.4. Description
6.4.1. Réception des échantillons biologiques et des fiches de demandes
- Les échantillons doivent être obligatoirement accompagnés d’une fiche de
demande d’examens Immuno-hématologiques pour receveur.
6.4.2. Enregistrement des échantillons réceptionnés
- Notifier les examens sur la fiche navette d’hospitalisation.
- Enregistrer les échantillons réceptionnés sur les registres correspondants.
6.4.3. Conditionnement et transport des échantillons
- Vérifier que les tubes sont obturés et placés dans des portoirs.
- Vérifier le délai et la température d'acheminement des échantillons en fonction du
paramètre à réaliser.
6.4.4. Conformité des documents d’accompagnement des échantillons
- Vérifier les documents d'accompagnement des échantillons (Fiche de demande
d'examens pour receveur).
6.4.5. La conformité des échantillons biologiques
- Vérifier la nature, la qualité et l’identification des échantillons :
Le nom et prénoms, doivent être écrits lisiblement sur l'échantillon et concordant
avec la fiche de demande d’examens Immuno-hématologiques du receveur.
6.4.6. Qualité et nature du prélèvement
- Vérifier la nature de l’anticoagulant.
- Vérifier l’aspect macroscopique de l’échantillon :
• Les volumes prélevés.
• L’absence de caillot dans l’échantillon par retournement du tube.

73
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO09/ GESTION DES ECHANTILLONS EN
V03/ 22 IMMUNO-HEMATOLOGIE DU RECEVEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.7. Etape pré analytique

- Centrifuger les tubes bouchonnés.
- Le programme de vitesse choisi est fonction du paramètre à réaliser.
- Eviter les prélèvements d'aspect lipémique (si interférence du plasma avec certains
équipements ou techniques).
- Lorsque le traitement est différé de plus de 12 heures, les échantillons sont
conservés entre +2°C et +8°C (sang total) et –20°C (plasma) et la durée de
conservation est fonction du paramètre à réaliser.
6.4.8. Gestion des non conformités
- Mettre en quarantaine les échantillons non conformes avant incinération
- Remplir et remettre la fiche d’anomalie au service prescripteur

NB :
On distingue deux types de non-conformité de prescription d'examens d'immuno-
hématologie (IH) et/ou d'échantillon(s) biologique(s) :
- Les non-conformités majeures qui feront l'objet d'un refus de prescription (non-réalisation
des examens d'IH) ;
- Les non-conformités mineures qui feront l'objet d'une correction de prescription.
Quelle que soit la non-conformité, majeure ou mineure et concernant soit la prescription, soit
les échantillons biologiques, celle-ci sera obligatoirement consignée et notifiée au
prescripteur.

74
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO09/ GESTION DES ECHANTILLONS EN
V03/ 22 IMMUNO-HEMATOLOGIE DU RECEVEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Non-conformités mineures
Non-conformités majeures
Non-conformité Refus de la demande sauf si
Refus de la demande
régularisation rapide

- Absence de prescription. - Date de naissance,

- Absence d'identification du Sexe et le cas échéant
prescripteur. nom d'usage.
- Absence d'identification du
- Absence (ou non lisibilité)
service de soins. du nom du préleveur.
- Absence (ou non lisibilité) de
nom de famille, prénom. - Renseignements cliniques
Anomalies de la
prescription - Nature des examens non pertinents relatifs aux
précisée. examens (si nécessaires
- Absence de date de doivent être demandés par
prélèvement. le biologiste).
- Absence d'heures de
prélèvement ou de critères
permettant de différencier les 2
déterminations demandées
simultanément.

- Absence de tube.
- Absence de date de
- Absence (ou non lisibilité) de
naissance, sexe et le cas
nom de famille, prénom.
échéant nom d'usage.
- Double étiquetage.
- Discordance entre identités sur - Absence de date et heure
Anomalies de(s) prescription et tube(s). de prélèvement sauf si date
(l') échantillon(s) et heure présentes sur la
- Absence de date et heure de
biologique(s) prescription.
prélèvement (sauf si date et
heure présentes sur la - Prélèvement hémolysé sauf
prescription). si incident transfusionnel ou
- Tubes non adaptés. contexte clinique
- Prélèvement hémolysé (sauf si d'hémolyse.
incident transfusionnel ou
contexte clinique d'hémolyse.

75
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/PRO09/ GESTION DES ECHANTILLONS EN
V03/ 22 IMMUNO-HEMATOLOGIE DU RECEVEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5. Logigramme
Qui Quoi Comment
Schéma de gestion des échantillons non-conformes d’Immuno-
Hématologie

Réception d'une prescription d'examens

IH et d'échantillon(s) biologique(s)

Personnel
médical,
paramédical Constatation de non-
ou biologistes. conformité concernant la Non
Réalisation de
prescription d’examens IH l’examen
et ou les échantillons
biologiques

Oui

Non Non-conformité
Non-conformité mineure
majeure

Oui
Correction
de la non-
Notification de l’anomalie sur la fiche conformité
de non-conformité IH et la transmettre
au prescripteur
Non Oui

Notifier au prescripteur Notification de

la non-conformité l’anomalie sur la
mineure non corrigée fiche de non-
conformité IH et la
transmettre au
prescripteur

Non-réalisation de
l’examen Réalisation de
l’examen

76
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/PRO10/ GESTION DES ECHANTILLONS EN IMMUNO-
V03/22 HEMATOLOGIE DU DONNEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/PRO10
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

Commission de La Directrice Générale de

Commission de l’Agence Nationale du Sang
rédaction et
validation
d’actualisation Dr K.L OULD KABLIA

77
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/PRO10/ GESTION DES ECHANTILLONS EN IMMUNO-
V03/22 HEMATOLOGIE DU DONNEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Contrôler, traiter et conserver des échantillons conformes aux exigences analytiques en
immuno-hématologie.
- Gérer les non conformités.
2. Domaine d'application
- Sécurité Immuno-Hématologiques du donneur et du receveur.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
2015.
- Les analyses Immuno-Hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
5. Personnel
- Personnel médical.
- Paramédical et biologistes.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’informations : Renseigner sur support papier ou numérique
- Registre de qualification Immuno-Hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de demande d’examen Immuno-Hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
6.2. Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.

78
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/PRO10/ GESTION DES ECHANTILLONS EN IMMUNO-
V03/22 HEMATOLOGIE DU DONNEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3. Matériel
a) Equipements
- Centrifugeuses de paillasse pour tubes.
- Armoire réfrigérée à +4°c.
- Congélateur (-25° et/ou -80°C).
- Micropipettes fixes et réglables.
b) Consommables
- Gants à usage unique.
- Tubes secs 5 ml, 10ml.
- Portoirs pour tubes.
- Embouts.
- Compresses.
- Pissettes.
- Micropipettes Pasteur.
- Boîtes isothermes.
- Securicut.
- Paire de Ciseaux.
6.4. Description
6.4.1. Réception des échantillons biologiques et des fiches de demandes
- Les échantillons doivent être obligatoirement accompagnés d’une fiche de liaison.
6.4.2. Enregistrement des échantillons réceptionnés
- Enregistrer les échantillons réceptionnés sur les registres correspondants.
6.4.3. Conditionnement et transport des échantillons
- Vérifier que les tubes sont obturés et placés dans des portoirs.
- Vérifier l'intégrité des segments ou tronçons des tubulures provenant des PSL.
- Vérifier le délai et la température d’acheminement des échantillons en fonction du
paramètre à réaliser.
6.4.4. Conformité des documents d’accompagnement des échantillons
- Vérifier les documents d'accompagnement des échantillons.
- Vérifier concordance entre les tubes et les numéros inscrits sur la fiche.
6.4.5. La conformité des échantillons biologiques
- Vérifier la nature, qualité et identification des échantillons :
L'échantillon doit porter une étiquette bien apposée et lisible dans son intégralité,
concordant avec la fiche.

79
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/PRO10/ GESTION DES ECHANTILLONS EN IMMUNO-
V03/22 HEMATOLOGIE DU DONNEUR

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.6. Qualité et nature du prélèvement

- Vérifier la nature de l’anticoagulant.
- Vérifier l’aspect macroscopique de l’échantillon :
 Les volumes prélevés.
 L’absence de caillot dans l’échantillon par retournement du tube.
6.4.7. Etape pré analytique
- Centrifuger les tubes bouchonnés.
- Le programme de vitesse choisi est fonction du paramètre à réaliser.
- Eviter les prélèvements d'aspect lipémique (si interférence du plasma avec certains
équipements ou techniques).
- Lorsque le traitement est différé de plus de 12 heures, les échantillons sont
conservés entre +2°C et +8°C (sang total) et –20°C (plasma) et la durée de
conservation est fonction du paramètre à réaliser.
6.4.8. Gestion des non conformités
Voir ANS/QBIH/PRO09/V03/22 : GESTION DES ECHANTILLONS EN IMMUNO-
HEMATOLOGIE DU RECEVEUR (schéma de gestion des échantillons non-
conforme en immuno-hématologie).
- Mettre en quarantaine les échantillons non conformes avant incinération.
- Remplir et remettre la fiche d’anomalie l'unité du don de sang, à l'unité de
distribution.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP01/
V03/22 GROUPAGE ABO-RH1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP01
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

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Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP01/
V03/22 GROUPAGE ABO-RH1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Groupage ABO
La mise en évidence des antigènes A et/ou B à la surface des globules rouges (épreuve
globulaire Beth Vincent) à l’aide d’anticorps monoclonaux anti-A et anti-B et des anticorps
correspondants aux antigènes absents (épreuve sérique de Simonin) à l’aide d’hématies test,
par méthode d'hémagglutination directe.
Groupage RH1
La mise en évidence de la présence ou l'absence de l'antigène RH1 (D) à la surface des
globules rouges par méthode d'hémagglutination directe.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-hématologie du don de sang.
- Contexte pré-transfusionnel.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th Edition
/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RH : Rhésus.
5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).

82
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP01/
V03/22 GROUPAGE ABO-RH1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur

(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
6.2 Locaux
Voir : ANS/QBIH/PRO01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Voir : ANS/QBIH/PRO01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1.
6.3.2 Matériel expérimental
Voir : ANS/QBIH/PRO01/V03/22 : GROUPAGE ABO-RH1.
6.4 Description
6.4.1 Etape pré-analytique
• Enregistrer et classer les échantillons par ordre numérique croissant ;
• Centrifuger le tube de sang à tester de manière à séparer les hématies du plasma.
6.4.2 Contrôle de qualité
• Effectuer un CQI des sérums tests et hématies tests voir ANS/QBIH/PRO07/V03/22 :
CONTROLE QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE .
6.4.3 Analyse
Se conformer aux instructions spécifiques du fabricant.
[Link] Technique sur plaque
• Préparer en tube, une suspension d’hématies à tester à 10 % en solution saline à
0.9% voir : ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN
SOLUTION SALINE ;
• Bien nettoyer et dégraisser la plaque d’opaline à l’alcool.
• A l’aide d’une pipette Pasteur, déposer côte à côte sur la plaque
- Une (01) goutte de chaque suspension d’hématie tests : A1, B ;
- Une (01) goutte de chaque sérums tests : anti-A, anti-B, anti-AB, anti-D,
Contrôle négatif ;
• Prélever et déposer, à côté de chaque hématie-test, 1 goutte du sérum à tester en
prenant soin de ne pas créer de contact entre les gouttes ;

83
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP01/
V03/22 GROUPAGE ABO-RH1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

• Prélever et déposer, à côté de chaque réactif, 1 goutte de la suspension
d’hématies à tester en prenant soin de ne pas créer de contact entre les gouttes ;
• A l’aide d’un fond de tube, mélanger soigneusement les hématies et plasmas ou
sérums tests en un disque de 3 cm de diamètre environ, en essuyant le tube entre
chaque mélange, avec du coton ou de la gaze ;
• Faire chalouper légèrement la plaque.
 Lecture et interprétation
• Observer macroscopiquement la présence ou l’absence d’agglutination.
• Noter les résultats.
N.B : Les tests qui ne montrent aucune agglutination ne doivent pas être observés pendant
plus de 2 minutes. La dessiccation à la périphérie ne doit pas être interprétée comme
un indice d’agglutination.
Le groupe ABO-RH1 : est conclu si le profil réactionnel correspond à la grille
d'interprétation suivante : le tableau ci-dessous.
[Link] Technique en tube
• Préparer en tube une suspension d’hématies à tester de 5% en solution saline à
0.9% voir : ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN
SOLUTION SALINE.
• Identifier pour chaque échantillon à tester 7 tubes de 5ml : A, B, AB, D, CTL, HB
(hématie B), HA1 (hématie A1),
• Déposer dans les tubes A, B, AB, D, CTL respectivement, 1 goutte des sérums
tests : anti A, anti B, anti AB, anti D, Contrôle négatif ;
• Déposer dans les tubes HB, HA1, respectivement, 1 goutte de chaque suspension
d’hématie tests : B, A1 ;
• Dans les tubes contenant les sérums tests, déposer 1 goutte de la suspension
d’hématies à tester et dans les tubes contenant les hématies tests 2 gouttes de
plasma à tester.
• Homogénéiser les mélanges en agitant légèrement les tubes.
• Centrifuger à 1000 tours/min pendant 1 min.
 Lecture :
- Agiter légèrement les tubes pour décoller le culot globulaire à la recherche
d’agglutination.
- Si le culot d’hématies se fragmente facilement en un ou plusieurs blocs, voire pour
les réactions faibles en un fin granité, la réaction est positive.
- Si, au contraire les hématies se remettent facilement en suspension, il n’y a pas
d’agglutination, la réaction est alors négative.

84
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP01/
V03/22 GROUPAGE ABO-RH1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Noter les résultats.

- Le groupe ABO : est conclu si le profil réactionnel correspond à la grille
d'interprétation suivante : le tableau ci-dessous.
[Link] Technique sur microplaque
• Préparer en tube une suspension d’hématie de 2 à 3 % en solution saline à 0.9 % :
ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION SALINE ;
• Identifier pour chaque échantillon à tester, les cupules A, B, AB, D, CTL, HB (hématie
B), HA1 (hématie A1) ;
• Déposer dans les cupules A, B, AB, D, CTL respectivement, 1 volume des sérums tests
: anti A, anti B, anti AB, anti D, Contrôle négatif ;
• Déposer dans les cupules HB, HA1, respectivement, 1 volume de chaque suspension
d’hématie tests : B, A1 ;
• Dans les cupules contenant les sérums tests, déposer 1 volume de la suspension
d’hématies à tester et dans les cupules contenant les hématies tests 2 volumes de
sérum/plasma à tester ;
• Mélanger doucement le tout en agitant la microplaque ;
• Centrifuger à 1000 tours/min pendant une minute.
 Lecture
- Tapoter pour décoller les culots.
- Les agglutinations se présentent sous forme de culot en un ou plusieurs blocs.
- Si elles se remettent facilement en suspension, la réaction est négative.
[Link] Technique en microfiltration
Préparer en tube une suspension d’hématies à tester de 0,8 à 1% selon les
recommandations du fabricant.
 Epreuve globulaire de Beth-Vincent :
- Identifier la colonne de filtartion par le numéro d’échantillon correspondant.
- Retirer la languette aluminium de la carte avec précaution pour éviter les
contaminations inter-microtubes.
- Déposer dans chaque cupule de la microcolonne de filtration où sont pré-inclus les
réactifs anti-A, anti-B, anti-AB, anti D et contrôle réactif, un volume de la suspension
d’hématies à tester selon les recommandations du fabricant.
 Epreuve plasmatique de Simonin :
- Identifier la carte de filtration par le numéro d’échantillon correspondant.
- Déposer dans chaque cupule de la microcolonne de filtration, un volume d’hématies-
test B et A1, respectivement selon les recommandations du fabricant.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP01/
V03/22 GROUPAGE ABO-RH1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Ajouter dans chacune des cupules un volume du plasma à tester selon les
recommandations du fabricant.
- Centrifuger les cartes de filtration à l’aide d’une centrifugeuse adaptée et préréglée
par le fournisseur.
 Lecture
- La présence d’agglutinats en surface ou dispersés dans le gel correspond à un
résultat positif indiquant la présence de l’antigène érythrocytaire correspondant.
- Un culot de globules rouges collecté au fond du microtube correspond à un résultat
négatif indiquant que l’antigène correspondant est absent.
6.4.4 Interprétation
- Les épreuves globulaires et plasmatiques doivent être concordantes
En cas de discordance entre les deux épreuves ou de difficultés de groupage signaler au
praticien et se référer aux procédures de gestion des difficultés de groupage voir :
ANS/QBIH/PRO8/V03/22 : RESOLUTION DES DIFFICULTES ET DES
DISCORDANCES DE GROUPAGE SANGUIN.

EPREUVE GLOBULAIRE GROUPAGE EPREUVE PLASMATIQUE

CONTROLE RESULTATS
BETH-VINCENT RHESUS SIMONIN

HEMATIE HEMATIE
Anti A Anti B Anti AB Anti D CTL GROUPE
A B

-
+++ +++ +++ - - + A RH Positif

+++ - +++ - - - + A RH Négatif

- +++ +++ +++ - + - B RH Positif

- +++ +++ - - + - B RH Négatif

+++ +++ +++ +++ - - - AB RH Positif

+++ +++ +++ - - - - AB RH Négatif

- - - +++ - + + O RH Positif

- - - - - + + O RH Négatif

86
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP01/
V03/22 GROUPAGE ABO-RH1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.5 Saisie des résultats

Saisie manuelle des résultats par deux personnes différentes.
Inscrire les résultats du groupage ABO-RH1 dans le registre de groupages et/ou introduire
les résultats sur ordinateur.
- Date de réalisation du groupage ;
- Numéro de lot des réactifs utilisés ;
- Nom du technicien qui a effectué le test ;
- Le nom et le cachet du spécialiste qui a validé le résultat inscrit sur la fiche de liaison et
des cartes de groupage.

87
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP02/
V01/22 PHENOTYPE RESTREINT RH-KEL1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP02
Version-Document : V01/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Première version

Modification : Aucune

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Rédigé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP02/
V01/22 PHENOTYPE RESTREINT RH-KEL1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Déterminer les phénotypes RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) et KEL1 (K).
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-hématologie du don de sang.
- Contexte pré-transfusionnel.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components 18th
Edition /2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RH : Rhésus.
5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologiques pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
Voir : ANS/QBIH/PRO02/V03/22 : PHENOTYPE RH-KEL1.
90
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP02/
V01/22 PHENOTYPE RESTREINT RH-KEL1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Voir : ANS/QBIH/PRO02/V03/22 : PHENOTYPE RH-KEL1.
6.3.2 Matériel expérimental
Voir : ANS/QBIH/PRO02/V03/22 : PHENOTYPE RH-KEL1.
6.4 Description
6.4.1 Etape pré-analytique
- Enregistrer et classer les échantillons par ordre numérique croissant (voir
ANS/QBIH/PRO10/V03/22 : GESTION DES ECHANTILLONS EN IMMUNO-
HEMATOLOGIE DU DONNEUR).
- Ramener les réactifs et les hématies de contrôle à température ambiante avant
utilisation.
6.4.2 Analyse
- Effectuer un CQI des sérums tests voir ANS/QBIH/PRO07/V03/22 : CONTROLE
QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
- La technique dépend du support analytique utilisé.
[Link] Technique sur plaque d’opaline
- Préparer en tube une suspension des hématies à tester en solution saline à 10% voir
ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION SALINE.
- Bien nettoyer et dégraisser la plaque d’opaline à l’alcool.
- Déposer 6 gouttes de la suspension des hématies à tester.
- Déposer les anti-sérums anti-RH2 (C), anti-RH3 (E), anti-RH4 (c), anti-RH5 (e), anti-
KEL1 (K) et le témoin négatif.
- A l’aide d’un fond de tube, mélanger soigneusement les hématies et sérums tests en
un disque de 3 cm de diamètre environ, en essuyant le tube entre chaque mélange,
avec du coton ou de la gaze.
- Faire chalouper légèrement la plaque.
- Observer macroscopiquement la présence ou l’absence d’agglutination.
- Noter les résultats.
[Link] Technique en tube
- Préparer en tube une suspension d’hématies à tester de 5% en solution saline à
0.9% voir : ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN
SOLUTION SALINE.
- Identifier pour chaque échantillon à tester 6 tubes de 5ml : RH2 (C), RH3 (E), RH4
(c), RH5 (e) et KEL1 (K) et le témoin négatif.
91
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP02/
V01/22 PHENOTYPE RESTREINT RH-KEL1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Déposer respectivement dans les tubes, 1 goutte des sérums tests : anti-RH2 (C),
anti-RH3 (E), anti-RH4 (c), anti-RH5 (e), anti-KEL1 (K) et le témoin négatif.
- Déposer 1 goutte de la suspension d’hématies à tester dans chaque tube.
- Homogénéiser les mélanges en agitant légèrement les tubes.
- Centrifuger à 1000 tours/min pendant 1 min.
- Lecture : Agiter légèrement les tubes pour décoller le culot globulaire à la recherche
d’agglutination.
- Si le culot d’hématies se fragmente facilement en un ou plusieurs blocs, voire pour
les réactions faibles en un fin granité, la réaction est positive.
- Si, au contraire les hématies se remettent facilement en suspension, il n’y a pas
d’agglutination, la réaction est alors négative.
- Noter les résultats.
[Link] Technique sur microplaque
- Préparer en tube une suspension d’hématie de 2 à 3 % en solution saline à 0.9 % :
ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION SALINE .
- Identifier pour chaque échantillon à tester, les cupules RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c),
RH5 (e) et KEL1 (K) et le témoin négatif.
- Déposer respectivement dans les cupules, 1 volume des sérums tests : anti-RH2 (C),
anti-RH3 (E), anti-RH4 (c), anti-RH5 (e), anti-KEL1 (K) et le témoin négatif.
- Dans chaque cupule contenant les sérums tests, déposer 1 volume de la suspension
d’hématies à tester.
- Mélanger doucement le tout en agitant la microplaque.
- Centrifuger à 1000 tours/min pendant une minute.
- Tapoter pour décoller les culots.
- Les agglutinations se présentent sous forme de culot en un ou plusieurs blocs.
- Si elles se remettent facilement en suspension, la réaction est négative.
[Link] Sur carte de microfiltration (Lire les instructions du fournisseur)
- Préparer en tube une suspension d’hématies à tester comme indiqué par le fabricant.
- Identifier la carte par le numéro d’échantillon correspondant.
- Retirer la languette aluminium de la carte avec précaution pour éviter les
contaminations inter-microtubes.
- Déposer dans chaque cupule de la microcolonne de filtration où sont pré-inclus les
réactifs RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) et KEL1 (K) et le contrôle réactif, un
volume de la suspension d’hématies à tester selon les recommandations du
fabricant.

92
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP02/
V01/22 PHENOTYPE RESTREINT RH-KEL1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- La présence d’agglutinats en surface ou dispersés dans la microcolonne correspond
à un résultat positif indiquant la présence de l’antigène érythrocytaire correspondant.
- Un culot de globules rouges collecté au fond de la microcolonne correspond à un
résultat négatif indiquant que l’antigène correspondant est absent.
6.4.3 Résultats et interprétation
Absence d’agglutination : Résultat négatif : Absence de l’antigène recherché.
Présence d’agglutination : Résultat positif : Présence de l’antigène recherché.
Témoins :
• Témoin réaction : Une goutte d'hématies à tester à 5% et une goutte de solution saline.
• Témoin positif : Une goutte d'hématies à 5% contenant l'antigène recherché.
• Témoin négatif : Une goutte d'hématies à 5% dépourvu de l'antigène recherché.
Tableau N°1 : Exemples de résultats de phénotypes restreints RH-KEL1
Anti-K Phénotype correspondant
Anti-D Anti-C Anti-c Anti-E Anti-e
Anti-
Anti-RH1 Anti-RH2 Anti-RH4 Anti-RH3 Anti-RH5 Classique Numérique
KEL1

DCcee RH :1,2,-3,4,5
+ + + - + -
K négatif KEL : -1
DCCee RH : 1,2,-3,-4,5
+ + - - + -
K négatif KEL : -1
ddccee RH : -1,-2,-3,4,5
- - + - + -
K négatif KEL : 1
DCcEe RH : 1,2,3,4,5
+ + + + + +
K positif KEL : 1
DccEe RH : 1,-2,3,4,5
+ - + + + +
K positif KEL : 1
Dccee RH : 1,-2,-3,4,5
+ - + - + +
K positif KEL :1
DccEE RH : 1,-2,3,4,-5
+ - + + - -
K négatif KEL : -1
ddCcee RH : -1,2,-3,4,5
- + + - + -
K négatif KEL : -1
DCCEe RH : 1,2,3,-4,5
+ + - + + -
K négatif KEL : -1
ddccEe RH : -1,-2,3,4,5
- - + + + +
K positif KEL :1
ddCCEe RH : -1,2,3,-4,5
- + - + + +
K positif KEL : 1

93
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP02/
V01/22 PHENOTYPE RESTREINT RH-KEL1

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Saisie des résultats :

Saisie manuelle des résultats par deux personnes différentes.
Inscrire les résultats du phénotypage RH-KEL1 dans le registre de groupage/phénotype
et noter :
 Date de réalisation du phénotypage ;
 Numéro de lot des réactifs utilisés ;
 Nom du technicien qui a effectué le test ;
 Le nom et le cachet du spécialiste qui a validé le résultat.

94
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP03/
TEST DIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP03
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

Commission de La Directrice Générale de

Commission de l’Agence Nationale du Sang
rédaction et
validation
d’actualisation Dr K.L OULD KABLIA

95
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP03/
TEST DIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Mettre en évidence une sensibilisation in vivo des hématies humaines, par des anticorps
de nature IgG et/ou des fractions du complément.
2. Domaine d’application
- Exploration d’une anémie hémolytique immunologique.
- Dans le cadre de la mise en évidence d'auto-anticorps lors de la RAI afin de détecter leur
capacité à se fixer in vivo.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- Ac : Anticorps.
- AGH : Antiglobuline Humaine.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- C3d : Cluster de Différenciation 3.
- CQI : Contrôle de Qualité Interne.
- EDTA : Acide Ethylène-Diamine-Tétra-Acétique.
- GR : Globule Rouge.
- Ig : Immunoglobulines.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- TDA : Le Test Direct à l'Antiglobuline.
- TIA: Test Indirect a l’Antiglobuline.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
96
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP03/
TEST DIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).

- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
- Echantillon de sang à tester, prélevé sur anticoagulants EDTA.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour micro plaque.
- Centrifugeuse pour carte de filtration ou colonne de bille de verre.
- Microscope optique.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
b) Consommables
- Tubes secs de 5 ml.
- Micro plaques en forme U (12x8) en polystyrène de 96 cupules.
- Embouts.
c) Réactifs
- Solution saline à 0.9 % Voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : (SOLUTION SALINE)
- AGH polyvalente (colorée) et mono-spécifique (Anti IgG, Anti C3d).
- Réactif témoin (diluant du réactif dépourvu de l’Ac).
- Tween 20 (0.005%) : facultatif, pour permettre aux agglutinations de ne pas trop se
coller au fond de la cupule.
- Cartes de filtration polyvalente et mono-spécifique (Anti IgG, Anti C3d, anti IgM,
anti IgA).
- Hématies sensibilisées à l'IgG voir : ANS/QBIH/MOP10/V03/22 : SENSIBILISATION
D'HEMATIES PAR UN ANTICORPS DE CLASSE lgG.
6.4 Description
6.4.1 Etape pré-analytique
- Voir ANS/QBIH/PRO10/V03/22 : GESTION DES ECHANTILLONS EN IMMUNO-
HEMATOLOGIE DU DONNEUR.
- Enregistrer et identifier les échantillons.
97
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP03/
TEST DIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.2 Contrôle de qualité

- Effectuer un CQI de l’antiglobuline polyvalente par TIA voir
ANS/QBIH/PRO07/V03/22: CONTROLE QUALITE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
6.4.3 Analyse
a) TDA en tube (Technique de référence)
 Méthode :
- Identifier pour chaque échantillon et témoins les tubes nécessaires.
- Laver le culot globulaire de l’échantillon à tester 4 fois Voir :
ANS/QBIH/MOP19/V03/22 : TECHNIQUES DE BASE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE
LAVAGE DES HEMATIES.
- Préparer une suspension d’hématies à 03 à 05% à partir du culot globulaire lavé voir :
ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION SALINE.
- Mettre 100μl de la suspension d’hématies dans un tube sec.
- Centrifuger à 3000 tr/ mn pendant 1mn.
- Eliminer le surnageant.
- Ajouter immédiatement 100μl à 200μl d'antiglobuline humaine, selon les
recommandations du fabricant.
- Mélanger et centrifuger à 1000 tr/min pendant 1mn.
 Lecture et interprétation :
- Agiter doucement le tube et observer l'agglutination.
- Noter l’intensité de l’agglutination :
 Le culot se détache en formant un seul agglutinat : +4
 Le culot se détache en quelques gros agglutinats : +3
 Le culot se détache sous forme de plusieurs agglutinats de taille moyenne et le
fond est clair : +2
 Le culot se désagrège sous forme de très nombreux de petits agglutinats et le fond
est trouble : +1
 Le culot se désagrège sous forme d’un très fin granité et le fond est trouble : (+)
 Le culot est remis en suspension sans aucun agglutinats (négatif) : 0
- Si l'antiglobuline polyvalente ou anti complément sont utilisés et que la réaction est
apparemment négative, laisser le tube à la température du laboratoire pendant 5
minutes, recentrifuger et lire de nouveau.

98
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP03/
TEST DIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Ajouter un volume d'hématies sensibilisées à l'lgG à tous les tubes donnant une
réaction négative.
 Centrifuger et lire les réactions d'agglutination.
 L'observation d'agglutinations indique que l'antiglobuline est disponible, et que le test
négatif observé est bien négatif.
 Si, par contre, l'agglutination n'est pas observée, cela indique très probablement que
l'antiglobuline a été neutralisée à cause de lavages mal effectués. Il faut donc refaire
le test.
 En cas de réaction positive, refaire le TDA en utilisant une antiglobuline spécifique
(anti IgG, anti C3d) et un contrôle négatif.

b) TDA en filtration
 Méthode :
- Identifier la carte de filtration par le numéro d’échantillon correspondant.
- Retirer la languette aluminium de la carte avec précaution pour éviter les
contaminations inter-microtubes.
- Préparer une suspension de 0.8 à 1 % d’hématies du culot globulaire de l’échantillon
selon les recommandations du fabriquant.
- Distribuer un volume (indiqué par le fabriquant) de la suspension d’hématies dans le
microtube de la carte de filtration polyvalente (IgG, C3d).
- Centrifuger selon les recommandations du fabriquant.
 Lecture et interprétation :
- Lire selon les recommandations du fabricant.
- Noter l’absence ou la présence d’agglutination.
- Si positif, noter l’intensité de l’agglutination conformément aux recommandations du
fabricant.
- En cas de réaction positive, refaire le TDA en utilisant une antiglobuline spécifique
(anti IgG, anti C3d …).

Un résultat de TDA positif chez un donneur de sang doit être confirmé par un deuxième
prélèvement. Si le résultat est toujours positif adresser le donneur à un service spécialisé pour
une éventuelle prise en charge.

99
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP03/
TEST DIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.4 Causes d’erreurs

a) Faux positifs :
- Utilisation d’un échantillon sanguin coagulé conservé à + 4°C, en présence d’un
caillot;
- Vitesse et temps de centrifugation excessifs ;
- Hypergammaglobulinémie (phénomène de rouleaux : agglutination avant lavage).
b) Négatifs :
- Lavage insuffisant des hématies (neutralisation de l’AGH)
- Forte agitation du tube au moment de la remise en suspension du culot d’hématies par
suite d’une centrifugation à vitesse trop élevée ;
- Dissociation de l’anticorps des hématies durant les lavages à cause d’interruption
entre les lavages ou au moment de la lecture des résultats ;
- Nombre d’Ig fixées sur les GR < au seuil de détection ;
- TDA type IgA (si la polyvalente ne contient pas une anti IgA).

100
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP04/
TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP04
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17, processus

Version remplacée :
qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

Commission de La Directrice Générale de

Commission de l’Agence Nationale du Sang
rédaction et
validation
d’actualisation Dr K.L OULD KABLIA

101
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP04/
TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Mise en évidence de la sensibilisation in vitro des hématies par des immunoglobulines
humaines à la recherche de :
- Antigène D faible.
- Antigènes des systèmes Duffy et MNS.
- Anticorps immuns anti érythrocytaire de type IgG.
2. Domaine d’application
- La recherche du D faible.
- L’épreuve de compatibilité.
- La recherche et l’identification des anticorps (RAI).
- Le phénotype étendu des hématies.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- AGH : Antiglobuline Humaine.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle de Qualité Interne.
- C3d : Cluster de différenciation 3.
- GR : Globules Rouges.
- Ig : Immunoglobuline.
- LISS : Low Ionique Strength Saline.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- TDA : Test Direct a l’Antiglobuline.
- TIA : Test Indirect a l’Antiglobuline.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
102
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP04/
TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).

- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
- Suspensions d'hématie-tests ou à tester à 5 % en solution saline,
- Sérums tests ou à tester.
- Hématies sensibilisées fraîchement préparées ou commercialisées, par des IgG pour la
validation des tests négatifs voir : ANS/QBIH/MOP10V03/22 : SENSIBILISATION
D'HEMATIES PAR UN ANTICORPS DE CLASSE lgG.
6.3.2 Matériel expérimental
- Solution saline Voir : ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE.
- Solution saline albumineuse voir : ANS/QBIH/MOP12/V03/22 :SOLUTION SALINE
ALBUMINEUSE.
- Solution LISS voir : ANS/QBIH/MOP11/V03/22 : SOLUTION LISS.
a) Consommables
- Plaques d'opaline.
- Tubes secs de 5 ml.
- Micro plaques en polystyrène de 96 cupules, en forme U (12x8).
- Embouts.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
b) Réactifs
- Réactifs antiglobuline humaines (AGH) poly-spécifiques et mono-spécifiques anti IgG
et anti complément.
- Système de filtration prêt à l’emploi.
6.4 Description
6.4.1 Etape pré-analytique
- Enregistrer et identifier les échantillons.

103
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP04/
TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.2 Contrôle de qualité

- Effectuer un CQI des réactifs voir ANS/QBIH/PRO07/V03/22 : CONTROL QUALITE
EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.
6.4.3 Analyse
a) TIA en tube
 TIA salin
- Identifier pour chaque échantillon et témoins les tubes nécessaires.
- Mettre 200 μl de sérum dans un tube.
- Ajouter 100 μl d'hématies en suspension saline à 5 %.
- Incuber à 37 °C pendant 30-60 minutes.
- Centrifuger.
- Observer s'il ya hémolyse ou agglutination.
- Laver les hématies 3 ou 4 fois avec une solution saline puis décanter complètement
l'eau de lavage.
- Ajouter 1 ou 2 gouttes d'AGH, selon les recommandations du fabricant, au fond du
tube sur les hématies.
- Bien mélanger.
- Centrifuger 800 à 1000 tours/ minute pendant une minute et lire la réaction.
 TIA LISS
- Identifier pour chaque échantillon et témoins les tubes nécessaires.
- Mettre 100 μl de sérum dans un tube.
- Ajouter 100 μl de suspension d'hématies en solution LISS voir :
ANS/QBIH/MOP15/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION LISS.
- Mélanger et incuber 10-15 minutes à 37°C.
- Centrifuger.
- Observer s'il y a réaction d'hémolyse ou d'agglutination.
- Laver 3 fois avec la solution saline et éliminer complètement l'eau de lavage
résiduelle.
- Ajouter immédiatement 100 μl d'antiglobuline humaine, selon les
recommandations du fabricant.
- Mélanger.
- Centrifuger à 1000 tr/min pendant 1 minute.
- Observer l'agglutination en décollant doucement la pastille d'hématies au fond du
tube.

104
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP04/
TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Si l'antiglobuline polyvalente ou anti complément est utilisée et que la réaction est
apparemment négative, laisser le tube à la température du laboratoire pendant 5
minutes.
- Recentrifuger et lire de nouveau, cela favorise la détection de la sensibilisation par
des fractions complément.
- Ajouter 50 μl d'hématies sensibilisées par l'lgG à tous les tubes donnant une réaction
négative.
b) TIA en micro plaque
- Mettre dans une cupule 10-20 μl de sérum ou sérum-test et 10 à 20 μl d'une
suspension de globules rouges à 03% en solution saline pour le test salin et en
solution LISS pour le test LISS. (pour le TIA LISS on doit utiliser des volumes
identiques de sérum et de suspension globulaire).
- Mélanger.
- Incuber :
• 30-45 minutes pour le test salin.
• 15 minutes pour le test LISS.
- Centrifuger et observer s'il y a réaction d'hémolyse ou d'agglutination.
- Laver 3 fois en solution saline.
- Décanter complètement l'eau de lavage.
- Ajouter 10-20 μl d'AGH.
- Mélanger et centrifuger.
- Lire la réaction.
- Aux cupules donnant une réaction négative, ajouter 10 μl d'une suspension de GR
sensibilisés, pour valider les réactions négatives.
c) TIA en filtration
- Identifier la carte gel par le numéro d’échantillon correspondant.
- Retirer la languette aluminium de la carte avec précaution pour éviter les
contaminations inter-microtubes.
- Distribuer un volume (indiqué par le fabriquant) de la suspension d’hématies et un
volume du sérum dans le microtube de la carte polyvalente (IgG, C3d) selon les
recommandations du fabricant.
- Incuber :
• 30-45 minutes pour le test salin.
• 10-15 minutes pour le test LISS.
- Centrifuger et lire selon les recommandations du fabriquant.
- Lire la réaction.

105
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QBIH/MOP04/
TEST INDIRECT A L’ANTIGLOBULINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

d) Témoins
Les témoins positifs, autologues et négatifs sont réalisés en fonction des épreuves
utilisant le TIA.
Exemple : RAI (voir ANS/QBIH/PRO05/V03/22 : RECHERCHE DES ANTICORPS
ANTI-ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI)) ; D faible (voir :
ANS/QBIH/MOP22/V01/22 : RECHERCHE DU D FAIBLE) ; ou épreuve de
compatibilité (voir : ANS/QBIH/PRO06/V03/22 : EPREUVE DIRECTE DE
COMPATIBILITE AU LABORATOIRE).
6.4.4 Lecture et interprétation
- Une hémolyse ou une agglutination, après incubation à 37°C, constitue un test
positif.
- Une hémolyse ou une agglutination, après addition d'AGH, constitue un test
positif.
- Le test est négatif si aucune hémolyse ou agglutination n'est observée, sous
réserve d'une validation par l'agglutination d'hématies sensibilisées à l'IgG. Sinon
le test doit être refait.
6.4.5 Causes d'erreurs
a) Faux positifs
- Les hématies présentant un TDA positif ;
- Tubes souillés ;
- Contamination des GR à tester ou de l’AGH ;
- Vitesse et temps de centrifugation excessifs ;
- Hyper gamma-globulinémie (phénomène de rouleaux : agglutination avant
lavage).
b) Faux négatifs
- Réactifs mal conservés.
- Les lavages insuffisants.
- L'interruption des opérations.
- Conservation inadéquate, une contamination bactérienne.
- Omission de l'addition du réactif AGH.
- Centrifugation inadéquate.
- Présence d'une cryoprotéine.

106
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages: 04
ANS/QBIH/MOP05/ RECHERCHE D'HEMOLYSINES
V03/22 ANTI-A ET ANTI-B

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP05
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

107
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages: 04
ANS/QBIH/MOP05/ RECHERCHE D'HEMOLYSINES
V03/22 ANTI-A ET ANTI-B

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Rechercher les anticorps anti-A et/ou anti-B hémolysants (hémolysines).
2. Domaine d’application
Donneur de sang de groupe O, A et B.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- mn : minute.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique.
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno- hématologie de la structure de transfusion sanguine
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
Echantillon de sang à tester prélevé sur tube sec.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Bain Marie réglable de 20 à 60°C ou étuve.
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube, pour micro plaque.
- Armoire réfrigérée.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.

108
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages: 04
ANS/QBIH/MOP05/ RECHERCHE D'HEMOLYSINES
V03/22 ANTI-A ET ANTI-B

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Consommables
- Gants.
- Tubes de 5 et 10 ml.
- Microplaques.
- Compresses.
- Embouts.
- Portoirs à tubes.
c) Réactifs
- Solution saline à 0.9 %, voir : Voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE.
- Hématies A1 et B en suspension (10% en solution saline) fraichement
préparées voir : ANS/QBIH/MOP16/V03/22 SUSPENSION D'HEMATIES
EN SOLUTION SALINE.
- Source de complément : Pool de sérums AB frais ou congelé.
6.4 Description
6.4.1 Principe
La réaction consiste à détecter l'hémolyse éventuelle des hématies A ou B connues,
par le sérum à examiner contenant éventuellement une hémolysine anti A et / ou anti B
en présence du complément.

6.4.2 Etape pré analytique

- Enregistrer et identifier les échantillons.
6.4.3 Analyse
[Link] Test d'Hémolyse sur sérum frais
- Disposer 4 tubes dans un portoir.
- Distribuer à la pipette les quantités, en volume (v), figurant sur le tableau
ci-dessous.
- Incuber 30 mn à 37°C.
- Observer l'hémolyse éventuelle.

Tubes témoins

N° Tube T1 T2 T3 T4
Sérum frais 4v 4v
Solution saline 4v 4v
Hématies A 2v 2v
Hématies B 2v 2v

109
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages: 04
ANS/QBIH/MOP05/ RECHERCHE D'HEMOLYSINES
V03/22 ANTI-A ET ANTI-B

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

[Link] Test d'hémolyse sur sérum conservé

- Décomplémenter le sérum à examiner par chauffage au bain-marie à 56°C
pendant 30 mn.
- Disposer 6 tubes dans un portoir.
- Distribuer à la pipette les quantités, en volume (v), figurant sur le tableau ci-
dessous.
- Mettre le portoir au Bain-Marie ou à l'étuve à 37°C pendant 30 mn.
- Observer l'hémolyse éventuelle.
Tubes témoins
N de tube T1 T2 T3 T4 T5 T6

Sérum à tester 4v V4 4v
Sérum AB frais
4v
(complément)
Solution saline 8v 8v 4v 4v
Hématies A 2v 2v 2v 2v
Hématies B 2v 2v

6.4.4 Résultats et interprétation

- Les tubes témoins n° T3, T4, T5 et T6 ne présentent aucune hémolyse, la réaction
est interprétable.
- Une hémolyse dans le tube 1 indique la présence d'hémolysine anti A.
- Une hémolyse dans le tube 2 indique la présence d'hémolysine anti B.
- L'absence d'hémolyse dans les tubes 1 et 2 indique l'absence d'hémolysine.
- Un des tubes témoins présente une hémolyse. La réaction n'est pas interprétable,
se référer au responsable de l’unité.

6.4.5 Saisie des résultats

- Transcrire les résultats sur le registre des hémolysines et/ou saisie informatique.
- Noter la date de réalisation : date de préparation des hématies, le technicien qui a
manipulé et le biologiste qui a validé.

110
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP06/ RECHERCHE DES SUBSTANCES
V03/22 ABH/LEWIS SALIVAIRES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP06
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

111
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP06/ RECHERCHE DES SUBSTANCES
V03/22 ABH/LEWIS SALIVAIRES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
La mise en évidence des substances solubles ABH/LEWIS dans la salive pour :
- Identifier les sujets sécréteurs et non sécréteurs.
- Identifier les sous-groupes A et B faibles.
- Identifier les groupes rares (Bombay)
- Déterminer les phénotypes du système Lewis.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- Tr/mn: Tour/Minute.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de
transfusion sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno- hématologie de la structure de transfusion sanguine
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
- Recueillir dans un tube à essai, 5 ml de salive après rinçage buccal.

112
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP06/ RECHERCHE DES SUBSTANCES
V03/22 ABH/LEWIS SALIVAIRES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3.2 Matériel expérimental

a) Equipements
- Bain Marie réglable de 20°C à 60°C ou étuve.
- Centrifugeuse de paillasse avec nacelles pour tube.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
b) Consommables
- Tubes secs en verre.
- Embouts.
c) Réactifs
 Sérum - tests
- Anti A1.
- Anti B.
- Anti H.
- Anti LE1.
- Anti LE2.
 Hématies voir : ANS/QBIH/MOP08/V03/22 : PREPARATION DES HEMATIES-TESTS
A1, A2, B ET O
- A1.
- B.
- O.
- O LE1.
- O LE2.
 Témoins
- Salive fraîche ou congelée à -20° après inhibition enzymatique provenant d'un
sujet sécréteur.
- Salive fraîche ou congelée à -20° après inhibition enzymatique
provenant d'un sujet non sécréteur.
- Témoin négatif : remplacer la salive par de l’eau physiologique.
Solution saline à 0.9% Voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION
SALINE.
6.4 Description
6.4.1 Principe
Les substances solubles de groupes sanguins sont mises en évidence dans la
salive, par inhibition de l'hémagglutination, suite à une inactivation préalable des
enzymes salivaires par la chaleur.

113
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP06/ RECHERCHE DES SUBSTANCES
V03/22 ABH/LEWIS SALIVAIRES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.2 Analyse
Les salives du sujet à tester et des sujets témoins sont analysées dans les mêmes
conditions selon les étapes suivantes :
 Inhibition des enzymes salivaires :
- Chauffer la salive au Bain-Marie à 56°C pendant 30 mn ou la faire bouillir pendant
10mn (pour détruire les substances de groupe).
- Centrifuger à 3000 tr / mn pendant 5 mn.
- Recueillir le surnageant.
- Effectuer le test immédiatement ou répartir en aliquotes et conserver à -20°C.
 Détermination de la dose optimale de sérums-tests à utiliser :
- Pratiquer une série de dilutions de demi en demi, du sérum-test spécifique de la
substance qu’on recherche.
- Mettre une goutte de chaque dilution du sérum test et ajouter une goutte de
suspension à 5% des hématies correspondantes.
- Mélanger, laisser en contact, puis effectuer la lecture de l’agglutination.
Note : La dilution de sérum test, à utiliser dans la réaction de neutralisation correspond à
une dilution 4 fois moindre que la dernière dilution ayant donné une agglutination.
Exemple : Si le titre est de 64, diluer le sérum-test au 1/16 (titre x ¼).
 Dilution de la salive
Préparer, dans 10 tubes à hémolyse, une série de dilutions du surnageant salivaire -
obtenu à l’étape 1 - à l’aide de solution saline à 0.9%.
Cette série va de 1 / 2 à 1 /1 024, en portant le volume initial à 0.5 ml.
 Epreuve de neutralisation
Dans une 2ème série de 10 tubes à hémolyse, répartir 3 gouttes des différentes
dilutions salivaires, en partant de la plus grande dilution vers la plus petite.
- Ajouter dans chaque tube, 3 gouttes de sérum-test convenablement dilué.
- Mélanger.
- Laisser incuber pendant 15 mn à température ambiante.
- Dans une 3ème série de 10 tubes à hémolyse, déposer 2 gouttes du mélange
précédent.
- Ajouter dans chaque tube, 2 gouttes d'hématies en suspension de 3 à 5% de
groupe correspondant au sérum test mis au départ.
- Incuber 10mn à température ambiante.
- Centrifuger 1 mn à 1000 tr / mn.
- Lire et observer la présence ou l’absence d’agglutination.

114
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP06/ RECHERCHE DES SUBSTANCES
V03/22 ABH/LEWIS SALIVAIRES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.3 Résultats et interprétation

 Témoins concordants
 Présence d’agglutinations = Absence de substance de groupe correspondante :
Le sujet est non sécréteur.
 Absence d'agglutinations = Présence de substance de groupe correspondante :
- Le sujet est sécréteur.
- Le titre de la substance de groupe sanguin correspond à la dernière dilution ne
présentant pas d'agglutinations.
 Témoins discordants : Refaire le test.

6.4.4 Causes d’erreur

- Congélation incorrecte.
- Sérums-test non convenablement dilués.
- Témoins non effectués.
- Hématies non conformes.

115
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Nombre de
pages : 08
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Code-Document : ANS/QBIH/MOP07
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

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Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
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Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

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ANS/QBIH/MOP07/ FIXATION ELUTION
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
La détermination d’un antigène ou d’un anticorps inconnu dans le cadre du :
 Groupage ABO et Rhésus.
 Allo-immunisation.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviation
- Ag : Antigène.
- AGH : Antiglobuline Humaine.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- Ig : Immunoglobuline.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- Mn: Minute.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- RH : Rhésus.
- TIA : Test Indirect à l’Antiglobuline.
- Tr/mn: Tour/Minute.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
- (ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).

118
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Nombre de
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ANS/QBIH/MOP07/ FIXATION ELUTION
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
- Un prélèvement de 5 ml sur EDTA.
- Un prélèvement sur tube sec, maintenu à 37°C (2 H), afin d'empêcher la fixation
d'éventuels anticorps froids.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Réfrigérateur à + 4°C.
- Bain-Marie à 37°C +56°C.
- Incubateur à + 37°C.
- Centrifugeuse réfrigérée et à température du laboratoire.
- Centrifugeuse pour carte de filtration.
- Pipettes réglables.
b) Consommables
- Plaque pour groupage sanguin.
- Tubes en plastique de 5 ml.
- Verrerie.
- Cristallisoirs.
- Portoirs.
c) Réactifs
- Disposer de 3 lots d’hématies-tests de phénotype connu A1, B, O.
- Anti-sérums connus anti-A1 et anti-B.
- AGH.
- Support de filtration pour TIA.
- Solution de basse force ionique.
- Colonne de filtration.
6.4 Description
6.4.1 Principe
Repose sur la fixation in vitro de l’anticorps sur l’antigène correspondant suivie de son
élution.
La fixation-élution d'un anticorps sur son antigène se fait en deux étapes :
- Fixation in vitro de l'anticorps sur les hématies dans des conditions optimales.
- Elution de l'anticorps fixé.

119
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/QBIH/MOP07/ FIXATION ELUTION
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.2 Etape pré-analytique

Enregistrer et identifier les échantillons voir ANS/QBIH/MOP10/V03/22 : GESTION
DES ECHANTILLONS EN IMMUNO-HEMATOLOGIE DU DONNEUR.
6.4.3 Analyse
a) Mise en évidence d’anticorps anti-A ou anti-B faible par fixation élution
 Objectif et contexte d’utilisation
 Résultat incohérent du fait d’une agglutination attendue absente à l’épreuve
plasmatique.
 La fixation-élution permet par ses capacités de concentration de l’anticorps de
retrouver des anticorps faibles.
 Méthode
- Sensibilisation in vitro :
 Laver 3 fois en solution saline 0.9% 1 vol. de culot d’hématies adsorbants A1 et
B voir : ANS/QBIH/MOP16 /V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION
SALINE.
 Ajouter 2 vol. du plasma à tester vis-à-vis de ces 2 culots d’hématies.
 Incuber les tubes bouchés et couchés 2 heures à +4 °C.
 Agiter toutes les 15 minutes.
 Réaliser les mêmes opérations avec un plasma témoin de groupe A et un plasma
de groupe B.
- Lavage des hématies :
 Après incubation, les hématies sont centrifugées et lavées en solution saline 0.9%
à + 4°C.
- Elution (voir ci-dessous).
Résultats et interprétation
GR-Test GR-Test GR-Test
GR-Test B GR-Test B GR-Test B 01 02 03 DEL
A1 A1 A1

Témoin Plasma A/GRA 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Témoin Plasma A/GRB 0 0 0 + + + 0 0 0 0

Témoin Plasma B/GRA + + + 0 0 0 0 0 0 0

Témoin Plasma B/GRB 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Présence d’anti-A et B + + + + + + 0 0 0 0

Présence d’anti-A faible + + + 0 0 0 0 0 0 0

Présence d’anti- B faible 0 0 0 + + + 0 0 0 0

120
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/QBIH/MOP07/ FIXATION ELUTION
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Mise en évidence d’antigène A ou B faible par fixation élution

 Objectif et contexte d’utilisation
 Résultat incohérent du fait d’une agglutination attendue absente à l’épreuve
globulaire.
 La fixation-élution permet par ses capacités de révéler des antigènes faibles.
 Méthode
- Sensibilisation in vitro :
 Laver 3 fois en solution saline 0.9%, 1 vol. de culot d’hématies à tester voir
ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION
SALINE.
 Ajouter 2 vol. d’antisérum de spécificité connue anti-A et anti-B vis-à-vis des
hématies à tester.
 Incuber les tubes bouchés et couchés 2 heures à +4 °C.
 Agiter toutes les 15 minutes.
- Lavage des hématies :
 Apres incubation, les hématies sont centrifugées et lavées en solution saline 0.9%
à + 4°C
- Elution (voir ci-dessous)
Résultats et interprétation
GR-Test GR-Test GR-Test GR-Test GR-Test GR-Test
01 02 03 DEL
A1 A1 A1 B B B

Présence d’Ag A
+ + + 0 0 0 0 0 0 0
faible

Présence d’Ag B
0 0 0 + + + 0 0 0 0
faible

6.4.4 Elution
a. Technique
 Elution à la chaleur
- Laver 6 fois les hématies en solution saline à 37°C ou à + 4°C, selon la nature de
l'anticorps qu'on veut éluer.
- Conserver la dernière eau de lavage et la tester en même temps que l'éluat.
- Mettre dans un tube :
1 volume de culot lavé.
1 volume de solution saline, de sérum AB ou de tampon phosphate voir :
ANS/QBIH/MOP14/V03/22 : SOLUTION TAMPON PBS.
121
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/QBIH/MOP07/ FIXATION ELUTION
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Porter les tubes au bain-marie à 56°C pendant 15 mn.

- Centrifuger rapidement : 1 à 2 mn à 4000 tr / mn. Les plots de la centrifugeuse
sont à demi remplis d'eau à 56°C.
- Récupérer le plus vite possible le surnageant qui est l'éluat contenant les
anticorps.
 Elution à l'éther ou technique de RUBIN
- Laver 6 fois les hématies en solution saline à 37° ou à + 4°C et conserver la
dernière eau de lavage.
- Mettre dans un tube :
1 volume de culot lavé.
1 volume de sérum AB ou tampon phosphate.
1 volume d'éther.
- Boucher et agiter vigoureusement pendant 1 mn.
- Centrifuger 10 mn à 3000 tr/mn.
- Recueillir la partie inférieure laquée du contenu du tube contenant l'éluat avec
l'hémoglobine.
 Elution à l’acide : se référer aux recommandations du fabricant
b. Etude de l'éluat
 Identification
■ à 37°C
Mettre dans un tube :
02 gouttes d'éluat.
01 goutte de chaque hématie du panel RH ou P ou MNS. Incuber 45 minutes à 37°C.
La lecture de l'agglutination se fait par étalement sur plaque.
■ à + 4°C
Mettre dans un tube :
02 gouttes d'éluat.
01 goutte d'hématie du panel li.
Incuber :
01heure à +4°C pour le test salin.
45 minutes à +4°C pour le panel traité à la broméline.
La lecture de l'agglutination se fait par étalement sur plaque.
 Titrage
■ à 37°C, à +4°C, test d'hémolyse
Effectuer une série de dilutions de raison 2 de l'éluat en solution saline.
122
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/QBIH/MOP07/ FIXATION ELUTION
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Rajouter dans chaque dilution 1 goutte d'hématie portant l'antigène correspondant à

l'anticorps élue.
Incuber à la température optimale d'activité de l'anticorps, soit 45 mn à 37°C ou 2 h à 4°C.
Lire l'agglutination sur plaque.
6.4.5 Fixation-Élution
Technique
 Fixation
■ Laver 3 fois, en solution saline à 37°C, 1ml de culot globulaire du sujet.
■ Ajouter au culot globulaire ainsi lavé 1ml d'antisérum correspondant à l'antigène
recherché.
■ Incuber à la température optimale d'activité de l'anticorps : 02 h à + 4°C pour les
anticorps du système ABO, 01h à 37°C pour les anticorps du système RH.
 Elution
Se référer au paragraphe 6.4.4 Elution ci -dessus,
a. Etude de l'éluat
Elle se fait parallèlement à la sixième eau de lavage et dans la technique la plus
sensible pour l'anticorps utilisé.
 Identification
Mettre dans une série de tubes :
02 gouttes d'éluat.
01 goutte d'hématies du panel approprié. Incuber 2 h à température adéquate : +4°C,
+ 22°C ou +37°C voir : ANS/QBIH/PRO05/V03/22 : RECHERCHE DES
ANTICORPS ANTI-ERYTHROCYTAIRES IRREGULIERS (RAI).
Lire la réaction.
 Titrage
Il se fait à la température optimale d'activité de l'anticorps.
6.4.6 Résultats et Interprétation
 Positifs
 Elution
Anticorps chauds, généralement de classe IgG anti RH dans la réaction à 37°C ou
anticorps froids dans la réaction à +4°C ;
- IgG anti Rh ou d'autres spécificités (allo -ou auto- anticorps).
- IgG anti A et anti B dans la MHNN par incompatibilité ABO.
- Anticorps froids le plus souvent de spécificité anti lb de classe IgM.
- Hémolysine biphasique de spécificité anti P
123
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 08
ANS/QBIH/MOP07/ FIXATION ELUTION
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 Fixation - élution
- Recherche de l'antigène Rh D faible.
- Groupes ABO faibles.
- Autres phénotypages.
 Négatifs
Absence de l'antigène ou de l'anticorps recherché.
6.4.7 Causes d'erreur
 Elution
- Lavage des hématies à la température ne correspondant pas à la nature de
l'anticorps qu'on veut éluer.
- Refroidissement et refixation de l'anticorps, si les godets de centrifugation ne sont
pas remplis d'eau à 56°C.
 Fixation-élution
Lavages mal effectués : la sixième eau, testée en parallèle, peut contenir l'anticorps,
ce qui ne saurait être que l'anticorps mis en réaction
6.4.8 Fixation ou adsorption
Recherche d’un Antigène faible du système ABO (Ag A ou Ag B) ou Rhésus (Du).
- Laver 3 fois les hématies à tester en solution saline 0.9%.
- Faire une suspension de ces hématies à 2 à 5%.
- Mettre dans un tube 2 volumes de la suspension d’hématie
- Ajouter 2 volumes de l’antisérum test correspondant à l’antigène recherché
- Incuber à la température optimale de l’activité de l’antisérum test :
 2h à 4°C pour les anticorps du système ABO.
 1h à 37°C pour les anticorps du système Rhésus.

124
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP08/ PREPARATION DES HEMATIES-TESTS
V03/22 A1, A2, B ET O

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP08
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
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Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP08/ PREPARATION DES HEMATIES-TESTS
V03/22 A1, A2, B ET O

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Préparation des hématies-tests A1, A2, B et O utilisées dans l'épreuve plasmatique
(SIMONIN) du groupage ABO.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique.
- FNS : Formule de Numération Sanguine.
- FSP : Frottis de Sang Périphérique.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RH : Rhésus.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.

126
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP08/ PREPARATION DES HEMATIES-TESTS
V03/22 A1, A2, B ET O

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
6.3.1. Matériel biologique
Des échantillons de sang des donneurs de groupe A1, A2, B et O recueilli sur tube
EDTA.
6.3.2. Matériel expérimental
a) Equipements
- Pipettes automatiques de 10 à 100 µl et de 100 à 1000 µl.
- Pissettes.
- Centrifugeuses de paillasse avec nacelles pour tube.
- Armoire réfrigérée.
b) Consommables
- Tubes à hémolyse de 5 et 10 ml.
- Flacons en verre avec bouchons.
- Pipettes Pasteur.
- Embouts.
- Bandes à gaze.
- Etiquettes autocollantes.
c) Réactifs
- Solution saline.
- Tampon phosphate à pH 7,3.
- Solution de conservation des hématies.
6.4 Description
6.4.1 Principe
Sélection et mise en suspension des hématies donneurs lavées de groupe A1, A2, B et
O dans une solution de conservation appropriée.
6.4.2 Technique
- Sélectionner les hématies des donneurs séronégatifs de groupe A1, A2, B et O.
Dans le cas d’utilisation d’une solution de conservation, il est souhaitable de
sélectionner des hématies de morphologie normale en procédant à une FNS et FSP
afin d’éviter les hémolyses précoces.
- Laver 3 fois les hématies sélectionnées avec de l’eau physiologique ou du tampon
phosphate. Voir ANS/QBIH/MOP19/V03/22 : TECHNIQUES DE BASE EN
IMMUNO-HEMATOLOGIE LAVAGE DES HEMATIES.
- Ecarter les échantillons présentant des signes d’hémolyse après lavage.

127
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP08/ PREPARATION DES HEMATIES-TESTS
V03/22 A1, A2, B ET O

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Préparer une suspension d’hématies de 3% à 5% en solution saline ou de

conservation, à partir d’un mélange d’au moins de 3 culots lavés du même groupe
ABO et RH1. Voir ANS/QBIH /MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN
SOLUTION SALINE.
- Répartir dans des flacons stériles étiquetés, portant les caractéristiques des
suspensions préparées et la date de préparation.
- Réaliser un contrôle de qualité des hématies tests préparées à l’aide des
échantillons de groupage ABO connu.
- Conserver les hématies tests préparées à 4°C.
6.4.3 Saisie des données
Sur un support papier ou numérique noter :
- La date de préparation des hématies test.
- Les numéros des échantillons utilisés.
- Le numéro de lot des réactifs ABO et RH1 utilisés.
- Les résultats du contrôle qualité.
- Le nom du technicien.
- Le nom et le cachet du spécialiste.

128
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP09/
PREPARATION DES SOLUTIONS ENZYMATIQUES
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH /MOP09

Version-Document : V03/22

Valide : Date effective : 03/07/2022

Date d’expiration : 03/07/2027

Version Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

remplacée : processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Direction normalisation et qualité

Distributeu:
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction
Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA.

129
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP09/
PREPARATION DES SOLUTIONS ENZYMATIQUES
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Utiliser les solutions enzymatiques pour le traitement des hématies dans la recherche des
anticorps irréguliers et la détermination de certains antigènes.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- Ig : Immunoglobuline.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RH : Rhésus.

5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de
transfusion sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine
6.3 Matériel
a) Equipements
- Bain-marie à thermostat ou étuve à 37°C et 56°C.

130
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP09/
PREPARATION DES SOLUTIONS ENZYMATIQUES
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Réfrigérateur 4°C ou chambre froide.

- Congélateur à-30°C à -80°C.
- Micro pipettes réglables 0-100 µI et 100-1000 µI.
- Balance de précision.
b) Consommables
- Bêcher.
- Portoirs pour tube 5 ml et 10 ml.
- Filtres.
- Entonnoirs.
- Etiquettes autocollantes.
c) Réactifs
- Anti-D polyclonal de type IgG d’origine humaine ou sérum test.
- Enzymes pures sous forme anhydre :
 Papaine
 Trypsine
 Bromeline
 Ficine.
- Solution saline à 0.9% Voir : ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE.
- Chlorhydrate de cystéine.
- Solution de SORENSEN voir : ANS/QBIH/MOP21/V03/22 : SOLUTION DE
SORENSEN.
- Eau distillée.
- Phosphate disodique.
6.4 Description
6.4.1 Principe
- Dissolution de l'enzyme dans une solution tampon appropriée
6.4.2 Technique
1) Papaïne
- Solution a : 1 g de papaïne dans 100 ml solution saline à 0.9 %.
- Solution b : Dissoudre 0,4 g de chlorhydrate de cystéine dans 200 ml d'eau distillée.
- Solution c : Dissoudre 3.6 g de phosphate disodique (Na2HP04) dans 100 ml de
solution saline.

131
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP09/
PREPARATION DES SOLUTIONS ENZYMATIQUES
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Solution de travail : Mélanger un volume de solution a + deux volumes de solution

b + un volume de solution c.
- Répartir en aliquotes.
- Congeler à-20°C.
2) Trypsine
- Solution a : 0.1 g de trypsine dans 100 ml solution saline.
- Laisser dissoudre 18 h à 4°C.
- Solution b : Solution de Sorensen à pH 7.3.
- Ajouter au 100 ml de la solution a : 25 ml de la solution b.
- Répartir en aliquotes.
- Congeler à - 20°C.
3) Broméline
- 0.25 g de Broméline.
- Solution de Sorensen à pH 6.0 voir : ANS/QBIH/MOP21/V03/22 : SOLUTION DE
SORENSEN.
- Laisser dissoudre la broméline dans 100 ml de la solution pendant 18 H à 4°C.
- Filtrer.
- Répartir en aliquotes.
- Congeler à - 20°C.
4) Ficine
- Ficine : 1 g
- Solution de Sorensen à pH 7.3 voir : ANS/QBIH/MOP21/V03/22 : SOLUTION DE
SORENSEN
- Laisser dissoudre la ficine dans 100 ml de la solution.
- Répartir en aliquotes.
- Congeler à - 20°C.
Remarque : Il existe dans le commerce des préparations d'enzymes prêtes à l’emploi.
5) Contrôle de spécificité
- Après préparation, l'activité et la spécificité des enzymes doivent être contrôlées :
 Rechercher une éventuelle agglutination spontanée des hématies traitées.
 Tester des hématies avant et après traitement enzymatique avec l'anti-D. La
réaction doit être négative avec les hématies Rh négatif.
 Rechercher l'hémolyse des hématies traitées après conservation à 4°C,
22°C, 37°C.

132
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP10/ SENSIBILISATION D'HEMATIES PAR UN
V03/22 ANTICORPS DE CLASSE lgG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP10
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au
Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction et l’Agence Nationale du Sang
Commission de validation
d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA

133
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP10/ SENSIBILISATION D'HEMATIES PAR UN
V03/22 ANTICORPS DE CLASSE lgG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Sensibiliser les hématies par anticorps lgG afin de valider les tests à l'antiglobuline.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- Ig : Immunoglobuline.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- RH : Rhésus.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3 Matériel
a) Equipements
- Bain marie ou étuve à 37 °C.
- Centrifugeuse de paillasse.

134
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP10/ SENSIBILISATION D'HEMATIES PAR UN
V03/22 ANTICORPS DE CLASSE lgG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Consommables
- Tubes de 5 ml.
- Micropipettes de 50 à 100 µI.
c) Réactifs
- Solution saline à 0.9%.
- Hématies RhD.
- Sérum anti D de classe lgG.
- Antiglobuline polyvalente ou anti lgG.
6.4 Description
6.4.1 Principe
- Des hématies RhD sont mises en contact avec des anticorps lgG anti D.
6.4.2 Technique
- Dans un tube :
 Mettre 1 goutte de culot d'hématies RhD et 5 gouttes de sérum contenant un
anticorps anti D lgG (sérum de sujet immunisé ou sérum test).
 Incuber 30-60 mn à 37°C.
 Laver 4 fois avec une solution saline à 0.9% Voir : ANS/QBIH /MOP19/V03/22 :
TECHNIQUES DE BASE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE LAVAGE DES HEMATIES
 Décanter complètement le surnageant après le dernier lavage.
 Ajouter 20 gouttes de solution saline pour obtenir une suspension d'hématies
sensibilisées à 5%.
 Test de contrôle :
- Sur une plaque d'opaline, mettre une goutte de cette suspension et une goutte d'anti
globuline humaine polyvalente.
- Mélanger et lire l'agglutination.
6.4.3 Résultats
- L'observation d'une agglutination indique que les hématies sont bien sensibilisées.
Ce test est impératif avant toute utilisation de ces hématies.
Remarque
- Ces hématies doivent être préparées en même temps que le test à l'antiglobuline, pour
éviter l'élution des lgG.
- On peut aussi utiliser des hématies sensibilisées du commerce qui sont stables et
d'utilisation simple.

135
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP11/
SOLUTION LISS
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP11
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
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et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

137
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP11/
SOLUTION LISS
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Diminuer la durée d'incubation du premier temps du test indirect à l'antiglobuline et
améliorer de sa sensibilité.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- BFI : Basse Force Ionique.
- IgG : Immunoglobuline de type G.
- KH2PO4 : Phosphate mono potassique
- LISS: Low Ionic Strength Solution.
- LSP : laborantin de santé publique.
- NaCI : Chlorure de sodium.
- Na2HP4 : Phosphate dissodique.
- NaOH : Acide de sodium.
- pH : Potentiel Hydrogène.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de
transfusion sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22

138
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP11/
SOLUTION LISS
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.2. Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3. Matériel
a) Equipements
- Balance de précision.
- pH-mètre.
b) Consommables
- Récipient jaugé de préparation.
- Récipient de stockage.
- Etiquettes autocollantes.
c) Réactifs
- Solution d'étalonnage pour pH-mètre.
- Chlorure de sodium.
- Glycine.
- Phosphate mono potassique.
- Phosphate dissodique.
- Soude.
- Acide de sodium.
- Eau distillée ou désionisée.
6.4. Description
a) Principe
- La solution ou tampon LISS (LOW IONIC STRENGTH SOLUTION), dite aussi
solution ou tampon BFI de basse force ionique est une solution réactive utilisée en
immuno hématologie pour favoriser et accélérer la réaction antigène-anticorps par
les anticorps de classe lgG.
b) Technique
Dans un récipient de 1litre de capacité, procéder comme suit :
- Déposer :
 NaCI. 01,75 g
 Glycine 18 g
 KH2PO4 11,3 ml
 Na2HP4 08,7 ml
- Mélanger.

139
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP11/
SOLUTION LISS
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Compléter à 1litre par 980 ml d'eau distillée.

- Ajuster le pH à 6.7 avec du NaOH.
- Ajouter 0.5 g d'acide de sodium.
- Homogénéiser la solution finale.
- Répartir en récipient de conservation.
- Etiqueter.

140
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP12/
V03/22 SOLUTION SALINE ALBUMINEUSE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP12
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP12/
V03/22 SOLUTION SALINE ALBUMINEUSE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Utiliser de cette solution dans le test indirect à l'antiglobuline en microplaque.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé publique.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2. Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3. Matériel
a) Equipements
- Micropipettes.
b) Consommables
- Récipient jaugé de préparation.
- Récipient de stockage.

142
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP12/
V03/22 SOLUTION SALINE ALBUMINEUSE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Etiquettes autocollantes.
- Embouts.
c) Réactifs
- Solution saline à 0.9% Voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE.
- Albumine bovine à 30 %.
- Tween 20.

6.4. Description
6.4.1. Principe
- Cette solution est utilisée pour le lavage des hématies après l'incubation dans le test
indirect à l'antiglobuline afin d'éviter leur adhérence au fond des cupules suite à
l'addition de l'antiglobuline humaine.

6.4.2. Technique
- A un litre de solution saline à 0.9 %, ajouter 6 ml d'albumine bovine à 30 %.

Remarque : Le tween 20 peut être utilisé au 1/120 000, dans une solution saline à
0.9% (50 µl de tween 20 pour un litre de solution saline).
- Conserver à +4°c et avant utilisation, bien homogénéiser les solutions.

143
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP13/
SOLUTION SALINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP13
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
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145
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP13/
SOLUTION SALINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Utiliser la solution saline à 0.9% pour :
- Le lavage des hématies.
- La préparation des suspensions d'hématies.
- La dilution des sérums et Sérum –tests
2. Domaine d'application
- Qualification immuno-hématologique de don du sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- NaCI : Chlorure de sodium.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’informations Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3 Matériel
a) Equipements
- Balance de précision.

146
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP13/
SOLUTION SALINE
V03/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Consommables
- Etiquette autocollante.
- Récipient jaugé de préparation.
- Récipient de stockage.
c) Réactifs
- Chlorure de sodium (NaCI) pur.
- Eau distillée.
6.4 Description
6.4.1 Principe
- C'est la préparation d'une solution saline par dissolution de chlorure de sodium dans
de l'eau distillée.
6.4.2 Technique
- Peser 9 g de chlorure de sodium.
- Dissoudre dans 1000 ml d'eau distillée.
- Répartir en petites quantités.
- Etiqueter.
- Stocker.

147
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP14/
V03/22 SOLUTION TAMPON PBS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP14
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation Dr K.L OULD KABLIA

149
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP14/
V03/22 SOLUTION TAMPON PBS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Solution utilisée en Immuno-Hématologie pour servir de tampon à certains réactifs
pouvant varier de pH.
2. Domaine d'application
- Qualification immuno-hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviation
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- NaCI : chlorure de sodium.
- NaH2P04 : phosphate monosodique.
- Na2 HP04 : phosphate dissodique.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de
transfusion sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’informations Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3 Matériel
a) Equipements
- Balance de précision.
- pH-mètre.
150
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP14/
V03/22 SOLUTION TAMPON PBS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Consommables
- Etiquettes autocollantes.
- Récipient jaugé de préparation.
- Récipient de stockage.
c) Réactifs
- Chlorure de sodium.
- Phosphate monosodique.
- Phosphate dissodique.
- Eau distillée ou désionisée.
6.4 Description
6.4.1 Principe
Dissolution de chlorure de sodium (NaCI), de phosphate dissodique (Na2 HP04), de
phosphate monosodique (NaH2P04) dans de l'eau distillée afin d'obtenir une solution
à pH = 7,2

6.4.2 Technique
Dans un récipient de 1 litre de capacité, mettre :
 NaCI....................... 7,650 g
 NaH2P04................ 0,210 g
 Na2HP04................ 0,724 g
- Eau distillée.................................. 20 ml
- Mélanger.
- Compléter à 1litre par 980 ml d'eau distillée.
- Homogénéiser la solution finale et vérifier le pH à 7,2
- Répartir en récipient de conservation.
- Etiqueter.

151
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP15/ SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION
V03/22 LISS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP15
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au
Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

153
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP15/ SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION
V03/22 LISS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Mettre en suspension les hématies en milieu LISS pour raccourcir la durée d'incubation du
premier temps du test indirect à l'antiglobuline et améliorer la sensibilité du test.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-hématologie du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LISS: Low Ionic Strenght Solution.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine
6.3 Matériel
a) Consommables
- Tubes à hémolyse de 5 et 10 ml.
- Pipettes Pasteur.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.

154
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP15/ SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION
V03/22 LISS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Embouts.
- Gaze.
- Etiquettes autocollantes.
- Pissettes.
- Flacons en verre avec bouchons.
b) Réactifs
- Solution LISS Voir : ANS/QBIH/MOP11/V03/22 : SOLUTION LISS.
6.4. Description
6.4.1 Principe
- Repose sur la mise en suspension en solution LISS d'hématies débarrassées des
protéines sériques.
6.4.2 Technique
- Laver les hématies 3 fois en solution saline à 0.9% Voir : ANS/QBIH
/MOP19/V03/22 TECHNIQUES DE BASE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE
LAVAGE DES HEMATIES.
- Mise en suspension : Mettre dans un tube à hémolyse, 1 volume de culot
globulaire + 19 volumes de solution LISS.
- Répartir dans des flacons étiquetés portant les caractéristiques des suspensions
préparées.
- Conservation à 4°C.

155
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP16/ SUSPENSION D'HEMATIES
V03/22 EN SOLUTION SALINE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP16
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
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157
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Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP16/ SUSPENSION D'HEMATIES
V03/22 EN SOLUTION SALINE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Mettre en suspensions les hématies pour la recherche des antigènes présents à la
surface des érythrocytes et des anticorps anti-érythrocytaires.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-hématologie du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : laborantin de santé publique.
5. Personnel Concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine
6.3 Matériel
- Tubes à hémolyse de 5 et 10 ml.
- Pipettes Pasteur.
- Pipettes automatiques fixes et réglables.
- Embouts.
- Gaze.

158
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP16/ SUSPENSION D'HEMATIES
V03/22 EN SOLUTION SALINE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Etiquettes autocollantes.
- Pissettes.
- Flacons en verre avec bouchons.
6.4. Description
6.4.1 Principe
- Repose sur la mise en suspension en solution saline 0.9 % d'hématies débarrassées
des protéines sériques par centrifugation et lavées à la surface des érythrocytes et
des anticorps anti-érythrocytaires.
6.4.2 Technique
 Lavage des hématies 3 fois en solution saline à 0.9% Voir : ANS/QBIH
/MOP19/V03/22 : TECHNIQUES DE BASE EN IMMUNO-HEMATOLOGIE LAVAGE
DES HEMATIES.
 Mise en suspension :
- Disposer d'un tube et mettre un volume V1 de culot globulaire lavé.
- Ajouter un volume V2 (selon concentration voulue) de solution saline à 0.9%.

Concentration 2% 3% 5% 10% 40%

V1 culot
1 Volume 1 Volume 1 Volume 1 Volume 1 Volume
globulaire

V2 solution
50 Volumes 30 Volumes 20 Volumes 10 Volumes 1.5 Volumes
saline à 0.9%

 Répartir dans des flacons étiquetés portant les caractéristiques des suspensions
préparées.
 Ces hématies peuvent être conservées à 4°C pendant 48 heures.

159
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP17/
V03/22 TECHNIQUE D’ADSORPTION

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP17
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

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Numéro d’identification de la copie : 0001

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Date : 09/01/2022
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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP17/
V03/22 TECHNIQUE D’ADSORPTION

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Eliminer un autoanticorps qui pourrait gêner l'identification d'un allo-anticorps.
- Eliminer un anticorps qui pourrait gêner le groupage sanguin.
- Utiliser cette technique dans le cas d’un mélange complexe d'anticorps.
2. Domaine d'application
- Qualification immuno-hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2. Locaux
- Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3. Matériel
a) Equipements
- Bain-marie ou étuve à 37°C.
- Réfrigérateur à 4°C.
- Centrifugeuse de paillasse.
- Pipettes Pasteur ou micropipettes.

162
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP17/
V03/22 TECHNIQUE D’ADSORPTION

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Consommables
- Tubes à hémolyse 5 et 10 ml.
c) Réactifs
- Sérum à tester.
- Panel d'hématie-tests.
- Solution saline à 0.9%.
6.4. Description
6.4.1. Principe
Réaction consistant à constater la disparition d'un anticorps du sérum après mise en
contact avec des hématies. Cette méthode n'est utilisée que pour se débarrasser de
certains anticorps.
6.4.2. Méthode
- Mélanger à volume égal, culot d'hématies lavées 3 fois et sérum.
- Laisser agir à température idéale pendant un temps suffisant :
• A 4°C pendant 2 h à 24 h.
• A 37° C pendant ½ h à 1 h.
- Centrifuger à 3000 tr/mn pendant 5 mn.
- Recueillir le surnageant.
- Tester et recommencer si nécessaire avec le surnageant recueilli.
- Réadsorption :
• Répéter la procédure à partir du début.
• Parfois, c'est à partir de plusieurs adsorptions qu'on arrive à se débarrasser de
l’anticorps.

163
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP18/ TECHNIQUE DE TRAITEMENT
V03/22 ENZYMATIQUE DES HEMATIES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP18
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

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Commission de rédaction et
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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP18/ TECHNIQUE DE TRAITEMENT
V03/22 ENZYMATIQUE DES HEMATIES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Traiter les hématies par les enzymes à la recherche de certains anticorps irréguliers de
classe lgG et de certains antigènes globulaires.
2. Domaine d'application
- Qualification immuno-hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- Ac : AntiCorps.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2. Locaux
Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3. Matériel
a) Equipements
- Centrifugeuse.
- Etuve ou Bain Marie réglable.
- Réfrigérateur.

166
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP18/ TECHNIQUE DE TRAITEMENT
V03/22 ENZYMATIQUE DES HEMATIES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Consommables
- Tube de 5 ml.
c) Réactifs
- Solution saline à 0.9% voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE
- Hématies à traiter :
 Panel de groupe O, phénotypé dans les systèmes les plus importants,
nécessaire à la recherche d'Ac irréguliers,
 Ou hématies de sujet à phénotyper en particulier pour la recherche du RhD
faible
- Solutions enzymatiques voir ANS/QBIH/MOP09/V03/22 : PREPARATION DES
SOLUTIONS ENZYMATIQUES
6.4. Description de la procédure
6.4.1. Principe
- Le traitement des hématies par les enzymes permet de décaper leurs surfaces en
libérant des fragments polypeptidiques négatifs appartenant aux glycoprotéines des
antigènes de groupes sanguins.
- La charge électrique négative des hématies (qui leur permet de ne pas s'agglutiner
spontanément) va ainsi être réduite. Les hématies vont pouvoir se rapprocher et
permettre aux anticorps de classes lgG qui sont de petites tailles de former un pont
entre les hématies. Ces dernières vont ainsi s'agglutiner en formant un réseau.
- Plusieurs enzymes peuvent être utilisées : Papaïne, Trypsine, Bromeline ou Ficine.
Ces enzymes permettent d'augmenter la puissance de certains antigènes, mais
peuvent aussi inhiber ou détruire d'autres antigènes :
 Les anticorps du système Rh et du système Kidd sont en effet mieux détectés
après traitement aux enzymes des hématies portant l'antigène correspondant.
 L'anticorps anti Jka est en particulier mieux détecté par le test indirect à
l'antiglobuline, après traitement des hématies Jka par la papaïne et surtout par la
trypsine. Cependant la puissance des antigènes M, N, et S par exemple, est
diminuée après traitement enzymatique et les antigènes Fya et Xga sont détruits
par la papaïne et certains lots de trypsine.
6.4.2. Technique
a) Traitement des hématies à la papaïne
- Déposer dans un tube de 5ml, 1volume de culot globulaire lavé.
- Ajouter 1volume de solution finale de papaïne.
- Agiter.
- Incuber 7 minutes exactement au bain marie à 37°C.

167
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH/MOP18/ TECHNIQUE DE TRAITEMENT
V03/22 ENZYMATIQUE DES HEMATIES

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Laver trois fois les hématies en solution saline à 0.9 %.

- Préparer une suspension à 5% en solution saline à 0.9 %.
- Conserver à 4°C durant 24 heures.

b) Traitement des hématies à la trypsine

- Déposer dans un tube de 5ml, 1volume de culot globulaire lavé.
- Ajouter 1,5 volume de la solution de trypsine.
- Agiter.
- Incuber 15 à 20mn au bain marie ou à l'étuve à 37°C.
- Laver 3 fois les hématies en solution saline à 0.9 %.
- Préparer une suspension à 3% en solution saline à 0.9 %.
- Conserver à 4°C durant 24 heures.

c) Traitement des hématies à la bromeline

- Déposer dans un tube de 5ml, 1volume de culot globulaire lavé.
- Ajouter 1,5 volume de la solution de bromeline.
- Agiter.
- Incuber 15 minutes au bain marie ou à l'étuve à 37°C.
- Laver 3 fois les hématies en solution saline à 0.9%
- Préparer une suspension à 3% en solution saline à 0.9%.
- Conserver à 4°C durant 24 heures.

d) Traitement des hématies à la ficine

- Préparer une suspension d'hématies à 2% Solution saline à 0.9 %.
- Déposer dans un tube de 5ml, 9 volumes de cette suspension.
- Ajouter1 volume de solution finale de ficine.
- Agiter.
- Incuber 15 minutes au bain marie à 37°C.
- Laver 3 fois les hématies en solution saline à 0.9 %.
- Préparer une suspension à 2% en solution saline à 0.9 %.
- Conserver à 4°C durant 24 heures.

168
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP19/ TECHNIQUES DE BASE EN IMMUNO
V03/22 HEMATOLOGIE LAVAGE DES HEMATIES
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP19
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications.

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP19/ TECHNIQUES DE BASE EN IMMUNO
V03/22 HEMATOLOGIE LAVAGE DES HEMATIES
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Hématies -tests ou échantillon utilisés pour la détection d'anticorps anti érythrocytaires ou
la détermination d'un antigène érythrocytaire.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-hématologie du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information Renseigner sur support papier ou numérique
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
6.2. Locaux
- Laboratoire d'immuno- hématologie de la structure de transfusion sanguine.
6.3. Matériel
6.3.1 Equipements
- Centrifugeuse.
- Pipette Pasteur ou micropipette automatique à volume variable.
6.3.2 Consommables
- Tubes de 5 ou 10 ml.
- Pissette.
- Etiquette et marqueur.
170
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 03
ANS/QBIH/MOP19/ TECHNIQUES DE BASE EN IMMUNO
V03/22 HEMATOLOGIE LAVAGE DES HEMATIES
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3.3 Réactifs
- Solution saline à 0.9% Voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE
6.4. Description
6.4.1 Principe
- Lavage d'une suspension d'hématies, débarrassée de son plasma par centrifugation,
en solution saline à 0.9% .
6.4.2 Méthodes
- Centrifuger l'échantillon de façon à séparer les hématies du plasma/sérum et à mettre
ce dernier dans un tube propre et étiqueté.
- A l'aide d'une pipette Pasteur ou pipette automatique, déposer 0.2 à 0.5 ml
d’hématies.
- Remplir le tube avec la solution saline à 0.9% à un centimètre du bord.
- Centrifuger une à deux minutes à 3 200 tr/mn.
- Eliminer complètement le surnageant.
- Tapoter le tube pour remettre le culot globulaire en suspension ; ceci constitue
le premier lavage.
- Répéter les étapes 3 à 6 au moins deux fois. Le dernier surnageant doit être clair,
sans trace d'hémolyse.

171
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP20/ TEST AUX ENZYMES
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP20
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

Version remplacée :
processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction et Commission de l’Agence Nationale du Sang
d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

173
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP20/ TEST AUX ENZYMES
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Rechercher des anticorps irréguliers dont l’anticorps anti Jka.
- Compatibiliser des PSL.
- Rechercher des antigènes globulaires en particulier Rh D faible.
2. Domaine d’application
Qualification immuno-hématologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définition et abréviation
- Ac : Anticorps.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra-Acétique .
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- RH : Rhésus.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguin

174
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP20/ TEST AUX ENZYMES
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.3 Matériel
a) Equipements
- Etuve ou bain marie réglables
- Réfrigérateur
- Microscope éventuel
b) Réactifs
- Solution saline à 0.9 % Voir ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE
- Hématies traitées aux enzymes VOIR ANS/QBIH/MOP18/V03/22 TECHNIQUE DE
TRAITEMENT ENZYMATIQUE DES HEMATIES Panel de groupe O, phénotypé
dans les systèmes les plus importants, nécessaire à la recherche d’Ac irréguliers, ou
hématies de sujet à phénotyper en particulier pour la recherche du D faible.
- Sérum à tester, ou sérum-tests ex : anti D de classe lg G pour la recherche du
D faible.
- Témoin positif : Exemple : Sérum de femme immunisée (RAI) ou hématies 0 positif
(pour la recherche du D faible).
- Témoin négatif : Exemple : Sérum AB dépourvu d'anticorps (RAI) ou hématies
0 négatif (pour la recherche du D faible).
6.4 Description
6.4.1 Principe
- Le test aux enzymes permet d'identifier les anticorps de classe lgG non agglutinants.
- Ces derniers ne peuvent pas être mis en évidence directement en présence
d'hématies portant l'antigène correspondant. Pour cela, on peut utiliser plusieurs
artifices dont l'un d'eux consiste à traiter les hématies par des enzymes
protéolytiques.
6.4.2 Technique
Méthodes en tube : Un volume (vol) =une goutte =50 µI
Microméthodes : Un volume (vol) =10 à 25 µl
a. Technique en tube :
 Test à la papaïne
- Dans un tube de 5 ml, déposer 1 vol de sérum.
- Préparer parallèlement un témoin positif et un témoin négatif dans les mêmes
conditions que l'échantillon à tester.
- Ajouter 1 vol de suspension d’hématies papaïnées.
- Incuber 45 minutes à 37 °C.

175
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP20/ TEST AUX ENZYMES
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Rechercher une éventuelle hémolyse due aux anticorps hémolysants.

- Agiter légèrement chaque tube à la recherche d'une agglutination éventuelle.
- Lecture macroscopique et éventuellement microscopique.
 Test à la trypsine
 Test simple :
- Déposer dans 3 tubes de 5 ml : 1 vol de sérum.
- Préparer parallèlement un témoin positif et un témoin négatif dans les mêmes
conditions que l'échantillon à tester.
- Ajouter 1 vol de la suspension d'hématies traitées à la trypsine.
- Incuber :
 le 1er tube 1 h à 4°C.
 le 2éme tube 1 h à 22°C.
 le 3éme tube 1 h à 37°C.
- Agiter légèrement chaque tube à la recherche d'une agglutination éventuelle.
- Lecture macroscopique et éventuellement microscopique.
 Test associé au test indirect à l'antiglobuline :
Les hématies du panel, permettant la recherche des anticorps irréguliers
particulièrement des anticorps anti Jka, sont préalablement traitées à la trypsine
avant d'effectuer un test indirect à l'antiglobuline.
 Test à la broméline
- Déposer dans trois tubes de 5ml 1 vol de sérum.
- Préparer parallèlement un témoin positif et un témoin négatif dans les mêmes
conditions que l'échantillon à tester.
- Ajouter 1 vol de la suspension d'hématies traitées à la bromeline
- Incuber :
 le 1er tube 1 h à 4°C.
 le 2éme tube 1 h à 22°C.
 le 3ème tube 1h à 37°C.
- Agiter légèrement chaque tube à la recherche d'agglutinations éventuelles.
- Lecture macroscopique et éventuellement microscopique.
 Test à la ficine
- Déposer dans un tube de 5ml 1vol de sérum
- Préparer parallèlement un témoin positif et un témoin négatif dans les mêmes
conditions que l'échantillon à tester.
- Ajouter 1 volume de suspension d'hématies ficinées à 2%
- Incuber 15 à 60 mn à 37°C
- Agiter légèrement chaque tube à la recherche d'agglutinations éventuelles.
- Lecture macroscopique ou éventuellement microscopique.

176
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/QBIH/MOP20/ TEST AUX ENZYMES
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b. Technique en microplaque :
- Même technique qu'en tube, en utilisant un volume de 10 à 25 µI par cupule.
- Le mélange se fait par agitation douce de la plaque sur la paillasse.
- Incuber selon la température et le temps prescrits par le fabricant.
- Les agglutinations se présentent sous forme de culot en un ou plusieurs blocs, si
elles se remettent facilement en suspension, la réaction est négative.
6.4.3 Résultats et interprétation
a. Témoins concordants :
 Recherche d'agglutinines irrégulières avec un panel d'hématies traité aux enzymes :
- Négatif : Absence d'anticorps irréguliers dirigés contre les antigènes présents sur les
hématies traitées.
- Positif : Présence d'anticorps irréguliers, à identifier et à titrer par la même
technique.
 Recherche d'antigène faible sur hématies traitées aux enzymes
- Négatif : Absence de l'antigène recherché.
- Positif : Présence de l'antigène recherché en particulier RhD faible
- Témoins discordants : Voir causes d'erreurs ci-dessous
b. Témoins discordants : Voir causes d'erreurs ci-dessous
6.4.4 Causes d'erreurs
1. Témoins non effectués : Résultats douteux.
2. Témoin « positif » négatif
- Hématies insuffisamment traitées.
- Choix incorrect du témoin.
3. Témoin « négatif » positif
- Temps d'incubation des hématies dépassant le temps prescrit par le fabricant.
- Lavages insuffisants après traitement enzymatique.
- Contamination microbienne.
6.4.5 Conduite à tenir
- Ne pas oublier d'effectuer les témoins.
- Respecter le mode d'emploi du fabricant.
- Refaire le traitement des hématies en respectant le temps d'incubation prescrit
par le fabricant.
- Le témoin « positif » est toujours négatif : refaire le test
- Le témoin « négatif » est toujours positif : refaire le test, et éventuellement sur un
autre prélèvement.

177
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH /MOP21/
V03/22
SOLUTION DE SÔRENSEN

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP21
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel des procédures opératoires normalisées V01/17,

processus qualification immuno-hématologique du don de sang.

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
01/04/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction
Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
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V03/22
SOLUTION DE SÔRENSEN

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Utiliser le tampon Phosphate à un pH de 6.8 à 7.1 pour la préparation des solutions
enzymatiques.
2. Domaine d’application
- Qualification Immuno-Hématologique.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
5. Personnel concerné
- Personnel technique du laboratoire d’immuno-hématologie de la structure de transfusion
sanguine (LSP ou Biologiste).
- Praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour
receveur (ANS/QBIH/FIC01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
Laboratoire d'immuno-hématologie de la structure de transfusion sanguin
6.3 Matériel
a) Equipements
- Balance de précision.
- pH-mètre.
b) Consommables
- Récipient jaugé de préparation.
- Récipient de stockage.

180
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
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V03/22
SOLUTION DE SÔRENSEN

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Etiquette autocollante.
c) Réactifs
- Phosphate disodique Na2HPO4.
- Phosphate monopotassique KH2PO4.
- Eau distillée.
6.4 Description
6.4.1 Principe
- SORENSEN a développé une solution tampon à base de phosphates de sodium et
de potassium qui couvre la gamme physiologique de pH.
6.4.2 Technique
 Phosphate mono potassique KH2PO4 0.1 M 13.6 g anhydre.
- Peser 13.6 g de KH2PO4.
- Dissoudre dans 1 000 ml d'eau distillée.
- Répartir en petites quantités.
- Etiqueter.
- Stocker.

 Phosphate disodique Na2HPO4 0.1 M 14.2 g anhydre.

- Peser 14.2 g de Na2HPO4.
- Dissoudre dans 1 000 ml d'eau distillée.
- Répartir en petites quantités.
- Etiqueter.
- Stocker.

181
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QBIH /MOP21/
V03/22
SOLUTION DE SÔRENSEN

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

pH Na2HPO4 0.1 M : 14.2 g/I KH2PO4 0.1 M : 13.6 g/l

ml ml

5.288 2.5 97.5

5.589 5.0 95.0

5.906 10.0 90.0

6.239 20.0 80.0

6.468 30.0 70.0

6.643 40.0 60.0

6.813 50.0 50.0

6.979 60.0 40,0

7.168 70.0 30.0

7,381 80.0 20.0

7.731 90.0 10.0

8.043 95.0 5.0

182
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
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V01/22 RECHERCHE DU D FAIBLE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QBIH/MOP22
Version-Document : V01/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Première version.

Modification : Aucune.

Agence Nationale du Sang

Distributeur:

Numéro d’identification de la copie : 0001

Rédigé Validé Approuvé

Date : 09/01/2022
au Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022
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Commission de rédaction
Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
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Dr K.L OULD KABLIA

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Nombre de
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ANS/QBIH/MOP22/
V01/22 RECHERCHE DU D FAIBLE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Mise en évidence de la sensibilisation in vitro des hématies par des immunoglobulines
humaines anti-D IgG à la recherche de l’antigène D faible.
- La mise en évidence de l’antigène D faible est effectuée par le TIA ou par d’autres
techniques plus sensibles telles que la fixation-élution.
2. Domaine d’application
Qualification immuno-hématologique du don de sang : se fait systématiquement chez
tous les donneurs de sang RH1 négatifs.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles/ANS.
- Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components
18th Edition/2015.
- Les analyses immuno-hématologiques et leurs applications cliniques EFS/2011.
- Les groupes sanguins érythrocytaires EFS / 2015.
- Guide de bonne exécution des analyses de biologie médicale /1999.
4. Définition et abréviation
- AGH : Antiglobuline Humaine.
- ANS : Agence Nationale du Sang.
- CQI : Contrôle Qualité Interne.
- GR : Globules Rouges.
- Ig : Immunoglobuline.
- LISS: Low Ionic Strength Solution.
- LSP: Laborantin de Santé Publique.
- RH : Rhésus.
- TIA: Test Indirect à l’Antiglobuline.
- tr/min: Tour/Minute.
5. Personnel concerné
- Manipulation technique et validation analytique par le personnel qualifié (LSP ou
biologistes).
- Validation biologique par le praticien spécialiste.
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande d’examen immuno-hématologique pour receveur
(ANS/QBIH/FIC01/V02/22).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP22/
V01/22 RECHERCHE DU D FAIBLE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).

- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Registre de qualification immuno-hématologique (ANS/QBIH/REG01/V02/22).
- Carte de groupage sanguin (ANS/QBIH/CGS01/V02/22).
6.2 Locaux
Voir : ANS/QBIH/PRO04/V03/22 : RECHRCHE DE L’ANTIGENE D FAIBLE.
6.3 Matériel
6.3.1 Matériel biologique
- Suspensions d'hématies à tester à 5 % en solution saline.
- Hématies sensibilisées fraîchement préparées ou commercialisées, par des IgG pour la
validation des tests négatifs voir : ANS/QBIH/MOP10/V03/22 : SENSIBILISATION
D'HEMATIES PAR UN ANTICORPS DE CLASSE lgG.
6.3.2 Matériel expérimental
a) Equipements
- Voir : ANS/QBIH/PRO04/V03/22 : RECHRCHE DE L’ANTIGENE D FAIBLE.
b) Consommables
- Plaques d'opaline
- Voir : ANS/QBIH/PRO04/V03/22 : RECHRCHE DE L’ANTIGENE D FAIBLE.
c) Réactifs
- Solution saline Voir : ANS/QBIH/MOP13/V03/22 : SOLUTION SALINE
- Solution LISS Voir : ANS/QBIH/MOP11/V03/22 : Solution LISS.
- Réactifs antiglobuline humaines (AGH) poly-spécifiques et mono-spécifiques anti IgG
et anti complément.
- Anti-D IgG ou BLEND (IgG+IgM).
- Système de filtration prêt à l’emploi.
6.4 Description
6.4.1 Etape pré-analytique
- Enregistrer et identifier les échantillons.
6.4.2 Contrôle de qualité
- Effectuer un CQI des réactifs voir ANS/QBIH/PRO07/V03/22 : CONTROL QUALITE
EN IMMUNO-HEMATOLOGIE.

185
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP22/
V01/22 RECHERCHE DU D FAIBLE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4.3 Analyse
A. TIA
1) TIA en tube
 TIA salin
- Identifier pour chaque échantillon et témoins les tubes nécessaires.
- Mettre 200 μl de sérum anti-D IgG ou IgG+IgM dans un tube.
- Ajouter 100 μl d'hématies à tester en suspension saline à 5 %.
- Incuber à 37 °C pendant 30-60 minutes.
- Centrifuger.
- Observer s'il ya hémolyse ou agglutination.
- Laver les hématies 3 ou 4 fois avec une solution saline puis décanter complètement
l'eau de lavage.
- Ajouter 1 ou 2 gouttes d'AGH, selon les recommandations du fabricant, au fond du
tube sur les hématies.
- Bien mélanger.
- Centrifuger 800 à 1000 tours/ minute pendant une minute et lire la réaction.
- Validation des réactions négatives : Ajouter 100 μl d'une suspension de GR
sensibilisés pour chaque tube non réactionnel.

 TIA LISS
- Identifier pour chaque échantillon et témoins les tubes nécessaires.
- Mettre 100 μl de sérum anti-D IgG ou IgG+IgM dans un tube.
- Ajouter 100 μl de suspension d'hématies en solution LISS voir :
ANS/QBIH/MOP15/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION LISS.
- Mélanger et incuber 10-15 minutes à 37°C.
- Centrifuger.
- Observer s'il y a réaction d'hémolyse ou d'agglutination.
- Laver 3 fois avec la solution saline et éliminer complètement l'eau de lavage
résiduelle.
- Ajouter immédiatement 100 μl d'antiglobuline humaine, selon les
recommandations du fabricant.
- Mélanger.
- Centrifuger à 1000 tr/min pendant 1 minute.

186
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP22/
V01/22 RECHERCHE DU D FAIBLE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Observer l'agglutination en décollant doucement la pastille d'hématies au fond du

tube.
- Validation des réactions négatives : Ajouter 100 μl d'une suspension de GR
sensibilisés pour chaque tube non réactionnel.

2) TIA en micro plaque

- Mettre dans une cupule 10-20 μl du sérum-test anti-D IgG ou IgG+IgM et 10 à 20 μl
d'une suspension de globules rouges à tester à 03% en solution saline pour le TIA et
en solution LISS pour le TIA LISS. (pour le TIA LISS on doit utiliser des volumes
identiques de sérum et de suspension globulaire).
- Mélanger.
- Incuber :
• 30-45 minutes pour le TIA.
• 15 minutes pour le TIA LISS.
- Centrifuger et observer s'il y a réaction d'agglutination.
- Laver 3 fois en solution saline.
- Décanter complètement l'eau de lavage.
- Ajouter 10-20 μl d'AGH.
- Mélanger et centrifuger.
- Lire la réaction.
- Aux cupules donnant une réaction négative, ajouter 10 μl d'une suspension de GR
sensibilisés, pour valider les réactions négatives.

3) TIA en filtration
- Identifier la carte gel par le numéro d’échantillon correspondant.
- Retirer la languette aluminium de la carte avec précaution pour éviter les
contaminations inter-microtubes.
- Distribuer un volume (indiqué par le fabriquant) de la suspension d’hématies et un
volume du sérum dans le microtube de la carte (IgG ou polyvalente) selon les
recommandations du fabricant
- Incuber :
• 30-45 minutes pour le TIA.
• 10-15 minutes pour le TIA LISS.
- Centrifuger selon les recommandations du fabriquant.
- Lire la réaction.

187
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP22/
V01/22 RECHERCHE DU D FAIBLE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

B. FIXATION-ELUTION
1) Fixation/Adsorption
- Laver 3 fois en solution saline 0.9%, 1 vol. de culot d’hématies à tester voir
ANS/QBIH/MOP16/V03/22 : SUSPENSION D'HEMATIES EN SOLUTION SALINE.
- Ajouter 2 vol. d’anti-sérum anti-D IgG.
- Incuber les tubes bouchés et couchés 2 heures à +4 °C.
- Agiter toutes les 15 minutes.
- Lavage des hématies :
 Apres incubation, les hématies sont centrifugées et lavées en solution saline
0.9% à + 4°C.
- Elution (voir ci-dessous).

2) Elution
 Elution à la chaleur
- Laver 6 fois les hématies en solution saline à 37°C.
- Conserver la dernière eau de lavage et la tester en même temps que l'éluât.
- Mettre dans un tube :
1 volume de culot lavé.
1 volume de solution saline, de sérum AB ou de tampon phosphate voir :
ANS/QBIH/MOP14/V03/22 : SOLUTION TAMPON PBS.
- Porter les tubes au bain-marie à 56°C pendant 15 mn.
- Centrifuger rapidement : 1 à 2 mn à 4000 tr / mn. Les plots de la centrifugeuse sont à
demi remplis d'eau à 56°C.
- Récupérer le plus vite possible le surnageant qui est l'éluât contenant les anticorps.
 Elution à l'éther ou technique de RUBIN
- Laver 6 fois les hématies en solution saline à 37° et conserver la dernière eau de
lavage.
- Mettre dans un tube :
1 volume de culot lavé.
1 volume de sérum AB ou tampon phosphate.
1 volume d'éther.
- Boucher et agiter vigoureusement pendant 1 mn.
- Centrifuger 10 mn à 3000 tr/mn.
- Recueillir la partie inférieure laquée du contenu du tube contenant l'éluât avec
l'hémoglobine.

188
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QBIH/MOP22/
V01/22 RECHERCHE DU D FAIBLE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 Elution à l’acide : se référer aux recommandations du fabricant.

3) Etude de l'éluât
 Sur tube
- Mettre 02 gouttes d'éluât avec 01 goutte d’hématie-tests connues O RH :1 à 5%
dans une solution saline.
- Incuber 45 minutes à 37°C.
- Laver 3 fois, décanter complètement la dernière eau de lavage.
- Ajouter 2 gouttes d’AGH.
- Centrifuger 1000 tr/mn.
- Lire l’agglutination.
 Sur colonne de microfiltration
- Identifier la carte de microfiltration par le numéro d’échantillon correspondant.
- Retirer la languette aluminium de la carte avec précaution pour éviter les
contaminations inter-microtubes.
- Distribuer un volume (indiqué par le fabriquant) de la suspension d’hématies O
RH :1 et un volume de l’éluât dans le microtube de la carte polyvalente (IgG, C3d)
ou monospecifique (Anti-IgG) selon les recommandations du fabricant.
- Incuber :
 30-45 minutes pour le TIA.
 10-15 minutes pour le test LISS.
- Centrifuger et lire selon les recommandations du fabriquant.
- Lire la réaction.

6.4.4 Témoins
- Témoin négatif : Une goutte d'hématies à tester et 2 gouttes Rh Contrôle.
- Témoin Positif :
 Hématies Rh positif + Anti-D IgG.
 Anticorps de type IgG + Hématies pourvues d’antigène.

6.4.5 Résultats et Interprétation

 Positifs
- Recherche de l'antigène Rh D faible est positive.
 Négatifs
- Absence de l'antigène Rh D faible

189
 ANNEXE
SUPPORTS D’INFORMATION

PROCESSUS QUALIFICATION
IMMUNO-HEMATOLOGIQUE
DU DON DE SANG

191
 FICHE DE DEMANDE D’EXAMEN
IMMUNO-HEMATOLOGIQUE DU RECEVEUR

Traitement de Traitement de
Non-conformité Non-conformité
la demande la demande
- Nom et prénom du receveur :
La prescription échantillon(s) biologique(s)
- Age : 
Absence de prescription Refus Absence de tube Refus
- Sexe : 
Absence (ou non
Absence (ou non lisibilité) de nom de
Refus 
lisibilité) de nom Refus
- Date et heure du prélèvement : famille et prénom
de famille, prénom

Double 
- Les examens demandés : Absence de date de prélèvement Refus  Refus
étiquetage

MAJEURES
Tubes non 
- Les renseignements cliniques nécessaires : Nature des examens non précisée Refus  Refus
adaptés
Absence d'identification du service 
Refus 
de soins
Discordance entre
Cachet du service Nom et signature du Absence d'identification du prescripteur Refus identités sur
Refus
prescripteur prescription et
Absence d'heures de prélèvement ou de
critères permettant de différencier les 2 tube(s)
Refus 
déterminations demandées
simultanément

Absence de date 
de naissance,
Refus Sauf si Refus Sauf si
Absence de date de naissance, sexe et le
régularisation sexe et le cas régularisation
cas échéant nom d'usage échéant nom
rapide rapide
d'usage


MINEURES

Absence de date Refus sauf si date

Refus sauf si
Absence (ou non lisibilité) du nom du et heure de et heure
régularisation 
préleveur prélèvement présentes sur la
rapide
prescription

Refus sauf si
Refus sauf si Prélèvement incident
Absence des renseignements cliniques
régularisation hémolysé transfusionnel ou
pertinents relatifs aux examens
rapide contexte clinique
d'hémolyse
 FICHE DE LIAISON

Structure : ………………………………………. Structure : ……………………………………….

Date : ……/………………/………………… Date : ………/………………/………………….

Type de
Sexe Type de poche Qualification Sérologique Qualification Immuno–Hématologique
donneur

Ac
N° du Nom – N° de lot Nom du Nom du Tréponema
N° du don N° de libération
don Prénom poche médecin préleveur Anti-
Ag Pallidum
M F OC CP Reg D T Q HIV HCV HBs HBc Autres GS1 GS2 Phénotype Autres
(Syphilis)

Chef d’unité…………………… Chef d’unité………………………… Chef d’unité………………….

Validation Date : ………/………/…………. Date : ………/………/…… Date : ……/………/……….
Signature : ……………………… Signature : …………………………… Signature : ……………………
Structure de Transfusion Sanguine :
…………………………………………… FICHE D’ANOMALIE

Unité :

Date de déclaration
de l’anomalie

Nom et prénoms

Localisation

Description de
l’anomalie constatée

Mesures prises

Signature

Date

Mesures Correctives
Et
Mesures préventives

Nom et signature du responsable Nom et signature du responsable de la structure

de l’unité

de la structure

ANS/STS/FIC02/V02/22
195
 FICHE DE POSTE Code : …/…/….
Structure de Transfusion Sanguine : Version : 02
Unité : Date de validation :

A - Définition
………………………. est chargé de …………………………....

B - Activités

1 - Activités principales
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 Inventaire annuel
2 - Activités secondaires

 Participation à l’application de la démarche qualité du service.

C - Liaisons

1 - Relations avec responsables hiérarchiques

 Chef de service……………….
 ………………….
 …………………….
2 - Relations transversales
 Techniciens
 Les personnels des autres services
3 - Relations subordonnées
 …………………..
D - Actions Préventives

En cas de risque sur la qualité du résultat de l’activité ou sur le

personnel citer les conduites à tenir pour y remédier

E - Délégation des tâches

………………. peut déléguer ses tâches :

 ………………………..
F - Compétences et qualifications requises
Diplôme de …………………..

G - Contraintes particulières d’exercice (Fonctions de binôme, astreintes,

horaires décalés, déplacements, etc.)

ANS/STS/FIC04/V02/22
196
 Structure de Transfusion Sanguine :
………………………………………….
FICHE DE VIE DES EQUIPEMENTS

Référence : ………………. Indice : ……… Date de mise en service : ………………

Désignation N° de la fiche

Etendu de mesure
Instruction d’utilisation et de
maintenance préventive
Périodicité d’étalonnage

Incertitude Instruction de vérification

N° de la fiche : N° chronologique de la fiche.

INTERVENTION
PROCHAINE NOM &
DATE NATURE RESULTATS
DATE PRENOM

ANS/STS/FIC05/V02/22
197
 REGISTRE DE QUALIFICATION IMMUNO-HEMATOLOGIQUE
N° de lot
Date de
Anti Anti Anti Anti Anti Anti Anti Anti Anti Anti préparation des
A B A+B D C c E e K globuline hématies

N° du don
1ère détermination 2ème détermination
DU TCI RAI hémolysines
ABO Phénotype Phénotype
ABO Rh
Rh Rh Kell Rh Kell

Manipulateur Visa Visa Visa Visa Visa Visa

Date Date Date Date Date Date

ANS/QBIH/REG01/V02/22
198
 Structure de
transfusion sanguine

……………….

CARTE DE GROUPAGE
SANGUIN

Groupe Rh…………………….. Photo

Phénotype…………………….

Nom ………………………………………..

Prénom ……………………………………

Date de naissance…………………….

N° pièce d’identité……………………

Carte établie le ………………………….

Visa de de la structure Visa du responsable du laboratoire

de transfusion sanguine d’immuno-hématologie

ANS/QBIH/CGS01/V02/22
199
Annexe des modifications des procédures opératoires normalisées
du processus Qualification Immuno-Hématologique du Don de Sang

Liste des procédures, modes opératoires et fiches modifiés :

 Procédure N°1: Groupage ABO-RH1.

 Procédure N2 : Phénotype RH-KEL1.
 Procédure N3 : Phénotype étendu.
 Procédure N°5 : Recherche des Anticorps Anti-Erythrocytaires Irréguliers (RAI).
 Procédure N°6 : Epreuve Directe De Compatibilité Au Laboratoire.
 Procédure N°8 : Résolution des difficultés et discordances du groupe sanguin
ABO.
 Procédure N°9 : Gestion des échantillons en immuno-hématologie du receveur.
 Mode opératoire N°4 : Test indirect à l’antiglobuline.
 Mode opératoire N°8 : Préparation des hématies tests.
 Fiche de demande d’examen Immuno-Hématologique pour receveur.

Liste des Procédures, modes opératoires et fiches ajoutés :

 Mode opératoire N°2 : Mode opératoire Phénotype étendu remplacé par un

nouveau mode opératoire : Phénotype Restreint RH-KEL1.
 Mode opératoire N°22 : Recherche du D Faible.

200
‫اﻟﺠﻤﻬﻮرﻳ ـ ـﺔ اﻟﺠﺰاﺋﺮﻳـ ـﺔ اﻟﺪﻳﻤﻘﺮاﻃﻴـ ـﺔ اﻟﺸﻌﺒﻴ ـ ـﺔ‬

‫وزارة اﻟﺼﺤـ ـﺔ‬

‫اﻟﻮﻛﺎﻟ ـﺔ اﻟﻮﻃـﻨﻴـ ـﺔ ﻟﻠﺪم‬

‫‪EDITION‬‬
‫‪2022‬‬
 LISTE DE LA COMMISSION D’ACTUALISATION DU PROCESSUS
QUALIFICATION MICROBIOLOGIQUE DU DON DE SANG

- Pr MOHAMMEDI Dhakya / Institut PASTEUR d’Algérie.

- Dr CHAIB Mohamed /Centre de Transfusion Sanguine CHU Blida.
- Dr BENSALEM Aicha / Laboratoires des Hépatites Virales Institut PASTEUR d’Algérie.
- Dr KHOBZI Farid / Agence Nationale du Sang.

LISTE DE LA COMMISSION DE VALIDATION DES PROCEDURES OPERATOIRES

NORMALISEES

- Pr ALLAL TAOULI Katia / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.

- Pr BOUZEGHOUB Salima/ Laboratoire National de Référence VIH Institut Pasteur
d’Algérie.
- Pr BROUK Hacen / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr CHEKKAL Mohamed / Centre de Transfusion Sanguine EHU Oran.
- Pr MENDI Khalida / Centre de Transfusion Sanguine CHU Bab El Oued.
- Pr MOHAMMEDI Dhakya / Institut Pasteur d’Algérie.
- Pr MOUEDEN Mohamed Amine / Centre de Transfusion Sanguine/ CHU Oran.
- Pr RETIMA Abdelhak / Centre de Transfusion Sanguine/ CHU Annaba.
- Pr ZOUAI Karima / Centre de Transfusion Sanguine EPH Rouiba.
- Dr ADDA Fatima / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.
- Dr ALIOUA Meriem / Agence Nationale du Sang.
- Dr ZEGHLACHE Lynda / Agence Nationale du Sang.
 SOMMAIRE

PROCESSUS QUALIFICATION MICROBIOLOGIQUE DU DON

PRO n° 01 Qualification microbiologique du don de sang 07

PRO n° 02 Technique de dépistage immuno-enzymatique basée sur le principe ELISA 13
PRO n° 03 Stratégie de dépistage des marqueurs infectieux chez le donneur de sang 19
PRO n° 04 Technique de dépistage EIA sur automate 27
PRO n° 05 Technique de dépistage de la syphilis par hémagglutination passive (TPHA) 33
PRO n° 06 Non conformités des tests EIA 39

Annexe : Processus qualification microbiologique du don de sang 43

FICHES
Fiche d’anomalie 45
Fiche de liaison 46
Fiche de poste 47
Fiche de vie des équipements 48
Fiche de résultats de la sérologie infectieuse 49
Fiche de surveillance de la température des enceintes 50

REGISTRE
REGISTRE DE LA SEROLOGIE INFECTIEUSE 54

ANNEXE DES MODIFICATIONS 55

 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO01/ QUALIFICATION MICROBIOLOGIQUE DU DON
V03/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QMD/PRO01
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

Version remplacée : V02/17
Processus qualification microbiologique du don de sang (QMD)

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : du 30/01 au 15/03/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO01/ QUALIFICATION MICROBIOLOGIQUE DU DON
V03/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les étapes de la qualification microbiologique du don de sang.
2. Domaine d’application
Qualification Microbiologique du Don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires de transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelle.
- Guide National du diagnostic biologique de l’infection à VIH/SIDA / 2015.
- Directive nationale de l’hygiène / 2015
- Dépistage des infections transmissibles par transfusion dans les dons de sang
Recommandations OMS / 2010.
- Arrêté n° 01 du 02 janvier 2022, rendant obligatoire le dépistage systématique des
infections causées par le VIH, le VHB, le VHC et par Treponema pallidum pour tout don
de sang.
4. Définition et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- CMIA : Chemiluminescent Microparticle ImmunoAssay
- DASRI : Déchets d'Activités de Soins à Risques Infectieux
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères
- ECLIA : Electro-ChemiLuminescence ImmunoAssay
- EDTA : acide Ethylène-Diamine-Tétra-Acétique
- ELISA : Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay
- EPI : Equipement de Protection Individuelle
- HIV : Virus de l’Immunodéficience Humaine
- OMS : Organisation Mondiale de la Santé
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- QMD : Qualification Microbiologique du Don
- STS : Structure de Transfusion Sanguine
- VHB : Virus de l’Hépatite B
- VHC : Virus de l’Hépatite C
- VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de qualification microbiologique du don de sang.
- Personnel technique qualifié et formé.
- Responsable de la STS /chef de service.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO01/ QUALIFICATION MICROBIOLOGIQUE DU DON
V03/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de résultats de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/FIC01/V02/22).
- Registre de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/REG01/V02/22)
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Dossier de qualification et d’étalonnage du matériel : Compte rendu et Fiche technique.
6.2 Locaux
Laboratoire de microbiologique de la structure de transfusion sanguine.
- Doit répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doit disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- L’alimentation électrique doit être adaptée aux équipements avec installation d’un groupe
électrogène pour pallier aux coupures de courant électrique.
- La qualification des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité.
- Les locaux doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Chaîne ELISA avec imprimante :
• Laveur de microplaques ELISA.
• Incubateur de microplaques ELISA ou étuve.
• Lecteur de microplaques ELISA.
• Imprimante.
Ou automate de sérologie/ELISA/CMIA/ECLIA
- Centrifugeuse de paillasse adaptable aux tubes utilisés.
- Réfrigérateur (+4 à +8°C).
- Congélateur (à - 20°C ou -80°C).
- Micropipettes réglables à monocanal et à canaux multiples.
- Minuteries.
- Portoirs pour tubes adaptés.
- Agitateur de type vortex.

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V03/22 DE SANG

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6.3.2 Consommables
- Embouts de 10 à 200μl (jaunes ou blancs).
- Embouts 200μl à 1000μl (bleus).
- Portes-embouts.
- Tubes en polystyrène de 10 ml avec obturateur (bouchons).
- Tubes en polystyrène de 5 ml avec obturateur (bouchons).
- Verrerie appropriée (éprouvettes de 500ml et 1000ml, ballons de 500ml et 1000ml ou
autres).
- Cryotubes : petits tubes résistants à la congélation pour aliquoter les sérums.
- Récipients jetables pour réactifs (type Auget, à utiliser avec les pipettes multicanaux).
- Conteneurs de paillasse pour déchets tranchants et piquants.
- Conteneur pour déchets DASRI 10 à 15 L.
- Sachets jaunes pour DASRI.
- Sachets noirs pour DAOM.
- Gants de laboratoire à usage unique.
- Pissettes.
- Gaze hydrophile.
- Papier absorbant.
6.3.3 Réactifs
a) Choix et achat des réactifs
Les réactifs sont choisis en fonction du choix des automates à système fermé ou
ouvert.
b) Utilisation et contrôle des réactifs
Il est nécessaire de souligner l'importance d'un contrôle rigoureux de la date de
péremption et de l'aspect macroscopique de chaque réactif d'une même trousse
- Au moment de leur utilisation, tous les composants d'une trousse doivent pouvoir
être identifiés comme appartenant à une même trousse afin d'éviter les erreurs
d'association.
- Les composants appartenant à des lots différents ne doivent pas être utilisés au
cours d'une même série.
- Les réactifs doivent être conservés selon les recommandations de leurs fabricants.
c) Gestion des stocks des réactifs
Une gestion des stocks des réactifs doit être mise en place dans le but de :
- Rationaliser l’usage des réactifs, notamment par rapport à leurs dates de péremption.
- Définir et constituer des stocks critiques et des stocks d’urgence.
- Estimer les besoins pour définir les quantités et les fréquences de
réapprovisionnement.

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ANS/QMD/PRO01/ QUALIFICATION MICROBIOLOGIQUE DU DON
V03/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Interdire l'utilisation des lots non conformes (périmés, non contrôlés, détériorés).
- Avoir une traçabilité des réactifs.
6.4 Description
6.4.1 Le prélèvement des échantillons
Le prélèvement de sang peut se faire sur tube sec, EDTA ou hépariné selon les bonnes
pratiques transfusionnelles.
6.4.2 Réception et contrôle des tubes
Réception et contrôle des tubes échantillons
a) Lorsqu'il s'agit de la même structure
- Les tubes doivent être bouchés hermétiquement et déposés en position verticale
dans des portoirs appropriés régulièrement nettoyés et désinfectés.
- Les portoirs sont accompagnés d’une fiche de liaison mentionnant le nombre et les
références des tubes échantillons à soumettre aux qualifications sérologiques
obligatoires.
- Ce nombre doit correspondre au nombre de donneurs prélevés.
- La (ou les) qualification(s) sérologique(s) supplémentaire(s) est (ou sont) également
mentionnée(s) pour chaque prélèvement concerné.
- À la réception, le technicien de l’unité de QMD doit vérifier :
 La concordance entre échantillons et documents ;
 L’aspect, le volume, l’identification et les autres données utiles.
b) Réception à partir d'une autre structure
Les échantillons doivent être réceptionnés par l’unité de QMD dans les délais requis en
respectant les conditions de transport des produits biologiques :
- Les récipients étanches contenant les échantillons doivent être insérés dans une
boite étanche, tapissée par un matériau absorbant (coton hydrophile), l'ensemble
étant alors placé dans un emballage résistant aux chocs.
- L’emballage extérieur doit mentionner les références et les coordonnés de
l’expéditeur (unité et/ou établissement) et ceux du destinataire (unité et/ou
établissement
- L’emballage doit porter la mention « Ouvrir avec précaution, risque de
contamination biologique ».
- La température de conservation des échantillons pendant le transport doit être
respectée (entre +2°C et +8°C).
6.4.3 Centrifugation des tubes
- La centrifugation doit être effectuée avec les tubes fermés.
- Les conditions de centrifugation doivent être définies :

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ANS/QMD/PRO01/ QUALIFICATION MICROBIOLOGIQUE DU DON
V03/22 DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 Vitesse moyenne : 2000 à 3000 tours / minute.

 Durée : 10 à 15 minutes.
 Température moyenne de centrifugation : ambiante
6.4.4 Manipulation des tubes échantillons
- L'ouverture et la manipulation des tubes doivent être effectuées en respectant les
conditions d'hygiène et de sécurité du personnel (port des EPI)
- Les bouchons ne doivent pas être réutilisés et seront éliminés dans des conteneurs
DASRI.
- Toutes les analyses doivent être faites à partir du tube primaire après centrifugation
dans les 24 heures qui suivent le prélèvement.
Si ce délai est dépassé, transférer le sérum dans un ou plusieurs autres tubes
correctement étiquetés.
- Les échantillons non conformes (hémolysés, hyperlipémies ou autres non-
conformités) doivent être éliminés.
6.4.5 Conditions de conservation
a) Avant analyse
- Les analyses doivent être effectuées le plus rapidement possible après le
prélèvement.
- Lorsque l'analyse est différée, les échantillons (sérum et plasma) doivent être
conservés à une température comprise entre +2°C et +8°C pendant au maximum
cinq (05) jours au-delà de ce délai ils doivent être congelés à -20°C.
- Ils seront remis à la température ambiante avant analyse.
b) Après analyse
- Après réalisation des analyses, les tubes peuvent être conservés à une température
comprise entre +2°C et +8°C durant un temps de quatre jours en moyenne.
- La conservation de tous les échantillons (positifs, négatifs et douteux) pendant une
durée réglementée (constitution d’une sérothèque, à -20°C ou mieux à -80°C) est
fortement recommandée.
- Les tubes de prélèvement traités sont correctement fermés et placés dans un
conteneur solide en vue de leur incinération (se référer à la procédure sur la gestion
des déchets).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO02/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE IMMUNO
V03/22 ENZYMATIQUE BASEE SUR LE PRINCIPE ELISA

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QMD/PRO02
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/22

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

Version remplacée : V02/17
Processus qualification microbiologique du don de sang (QMD)

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : du 30/01 au 15/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

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Nombre de
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ANS/QMD/PRO02/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE IMMUNO
V03/22 ENZYMATIQUE BASEE SUR LE PRINCIPE ELISA

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les étapes de réalisation d’un test de dépistage de type ELISA sur un système
semi-automatique (communément appelé chaîne ELISA), ou automatique (automate).
2. Domaine d’application
Unité de Qualification Microbiologique des Dons de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires de transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelle.
- Guide National du diagnostic biologique de l’infection à VIH/SIDA / 2015.
- Directive nationale de l’hygiène / 2015.
- Dépistage des infections transmissibles par transfusion dans les dons de sang
Recommandations OMS / 2010.
- Arrêté n° 01 du 02 janvier 2022, rendant obligatoire le dépistage systématique des
infections causées par le VIH, le VHB, le VHC et par Treponema pallidum pour tout don
de sang.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- DASRI : Déchets d'Activités de Soins à Risques Infectieux
- DO : Densité Optique
- EIA : Enzyme Immunosorbent Assay
- ELISA : Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay
- OMS : Organisation Mondiale de la Santé
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- QMD : Qualification Microbiologique du Don
- SIDA : Syndrome d'Immuno Déficience Acquise
- STS : Structure de Transfusion Sanguine
- VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine
- VHC : Virus de l’Hépatite C
- VS : Valeur Seuil
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de qualification microbiologique du don de sang.
- Personnel technique qualifié et formé.
- Responsable de la STS /chef de service
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO02/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE IMMUNO
V03/22 ENZYMATIQUE BASEE SUR LE PRINCIPE ELISA

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de résultats de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/FIC01/V02/22).

- Registre de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/REG01/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).
- Dossier de qualification et d’étalonnage du matériel : Compte rendu et Fiche
technique.
6.2 Locaux
- Unité de Qualification Microbiologique du Don de sang.
- Doit répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doit disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- L’alimentation électrique doit être adaptée aux équipements avec installation d’un
groupe électrogène pour pallier aux coupures de courant électrique.
- La qualification des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité.
- Les locaux doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Chaîne ELISA avec imprimante :
• Laveur de microplaques ELISA.
• Incubateur de microplaques ELISA ou étuve.
• Lecteur de microplaques ELISA.
• Imprimante.
- Centrifugeuse de paillasse adaptable aux tubes utilisés.
- Réfrigérateur (+2 à +8°C).
- Congélateur (à -20°C ou -80°C).
- Micropipettes réglables à monocanal et à canaux multiples.
- Minuteries.
- Portoirs pour tubes adaptés.
- Agitateur de type vortex.
6.3.2 Consommables
- Embouts de 10 à 200μl (jaunes ou blancs).
- Embouts 200μl à 1000μl (bleus).
- Portes-embouts.
- Tubes en polystyrène de 10 ml avec obturateur (bouchons).
- Tubes en polystyrène de 5 ml avec obturateur (bouchons).

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO02/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE IMMUNO
V03/22 ENZYMATIQUE BASEE SUR LE PRINCIPE ELISA

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Verrerie appropriée (éprouvettes de 500ml et 1000ml, ballons de 500ml et 1000ml

ou autres).
- Cryotubes : petits tubes résistants à la congélation pour aliquoter les sérums.
- Récipients jetables pour réactifs (type Auget, à utiliser avec les pipettes
multicanaux).
- Conteneurs de paillasse pour déchets tranchants et piquants.
- Conteneur pour déchets 10 à 15 L.
- Sachets jaunes pour DASRI.
- Gants de laboratoire à usage unique.
- Gaze hydrophile.
- Papier absorbant.
6.3.3 Réactifs
- Trousse de réactifs de dépistage des antigènes-anticorps anti-VIH 1/2.
- Trousse de réactifs de dépistage des anticorps ou antigènes-anticorps anti-VHC.
- Trousse de réactifs de dépistage de l’antigène HBs.
- Trousse de réactifs de dépistage des anticorps anti-HBc.
- Trousse de réactifs de dépistage des anticorps anti-tréponème pallidum.
6.3.4 Autres solutions
- Eau distillée.
- Solution d’arrêt si non fournie par le fabricant.
6.4 Description
6.4.1 Principe
La technique ELISA est une technique immuno-enzymatique colorimétrique qui permet
de visualiser la réaction antigène-anticorps grâce à l’action, sur un substrat, d’une
enzyme préalablement fixée.
6.4.2 Méthodes
Le dépistage est obligatoire dans les marqueurs sérologiques suivants :
- Antigènes p24, anticorps anti-VIH.
- Anticorps ou antigènes-anticorps anti-VHC.
- Antigène HBs.
- Anticorps anti-HBc.
- Anticorps anti-tréponème pallidum.
Plusieurs types de technique ELISA (simple ou combinée):
- ELISA sandwich
- ELISA indirect

16
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO02/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE IMMUNO
V03/22 ENZYMATIQUE BASEE SUR LE PRINCIPE ELISA

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

[Link] Phase pré-analytique

- Les échantillons à analyser sont le sérum ou le plasma. Se conformer aux
recommandations du fabricant.
- Pour les dispositions générales concernant les échantillons à analyser, voir
ANS/QMD/PRO01/V03/22 : Qualification microbiologique du don de sang.
- Vérifier la disponibilité, l’adéquation et le bon fonctionnement du matériel.
- Vérifier la disponibilité, l’adéquation et la qualité des consommables et réactifs
nécessaires.
[Link] Etape analytique
- Nettoyer et désinfecter les paillasses.
- Lire attentivement le mode d’emploi qui accompagne la trousse de réactifs pour
s'informer des recommandations du fabricant et des éventuelles modifications du
procédé analytique.
- Ne jamais modifier le procédé analytique.
- Allumer l'incubateur à la température choisie 30 minutes avant le début de l’analyse
(pour assurer la stabilité et l'uniformité de la température dans l'incubateur) et
vérifier le contenu de la trousse.
- Sortir les réactifs 30 minutes avant le début du test pour les amener à la
température ambiante (de +22° à +25°C).
- Sortir le nombre de barrettes ELISA selon le nombre de tests à effectuer.
- Remettre le reste dans leur emballage d'origine et le sceller. Conserver entre +4°C
et +8°C.
- Etablir le plan de distribution et d'identification des échantillons à analyser sur la
fiche de paillasse en respectant les indications du fabricant concernant le nombre et
la position des témoins.
- Lancer l’analyse en respectant les instructions du fabricant.
a) Mesures à prendre après la manipulation
- Conserver les échantillons au réfrigérateur ou au congélateur.
- Exécuter les opérations de maintenance, de nettoyage et de désinfection prévues.
- Éteindre et débrancher les appareils : lecteur, incubateur, laveur.
- Couvrir les appareils de housses de protection.
- Nettoyer les paillasses.
- Trier les déchets.
- Suivre les filières d’élimination des déchets d’activité de soin.
- Enlever les gants, se laver les mains avant de passer à l’interprétation des
résultats.

17
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO02/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE IMMUNO
V03/22 ENZYMATIQUE BASEE SUR LE PRINCIPE ELISA

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Validation du test
- Déterminer les valeurs de DO pour chaque contrôle positif et négatif, et ce pour
chaque série de tests (plaque).
- Les résultats d'une série de tests sont validés si, et seulement si, les critères fixés
par le fabricant concernant les contrôles positifs et négatifs sont respectés.
- Les anomalies relevées durant le procédé analytique sont reportées sur la fiche
d’anomalie (voir ANS/QMD/PRO06/V03/22 : Non conformités des tests EIA)
c) Lecture des résultats et calculs
- Chaque plaque doit être considérée séparément pour le calcul de la Valeur Seuil
(VS) quel que soit le nombre de plaques traitées simultanément.
- Se conformer aux instructions du fabricant pour le calcul de la valeur seuil.
[Link] Etape post analytique
a) Interprétation des résultats
Se conformer aux instructions du fabricant pour l’interprétation des résultats.
Pour la conduite à tenir vis à vis des résultats réactifs, douteux ou non réactifs, voir :
ANS/QMD/PRO03/V03/22 : Stratégie de dépistage des marqueurs infectieux chez
le donneur de sang
b) Transcription des résultats
Les résultats doivent être transcrits sur :
- Fiche de résultats de la sérologie infectieuse.
- Fiche de liaison
- Registre de la sérologie infectieuse.
- Support informatique.
Ces documents doivent être archivés sur un support approprié.
Une traçabilité des données doit être assurée concernant toutes les étapes du
procédé analytique, notamment :
- La date et l’heure de l’analyse.
- Le nom du manipulateur précisé pour chaque paramètre.
- Les échantillons analysés (nature, origine et références).
- Les réactifs utilisés (numéro du lot, nom de fabricant et date de péremption).
- Les résultats obtenus.
- Date, heure et responsable de la validation.

NB : Les anomalies des tests ELISA est présenté dans :

ANS/QMD/PRO06/V03/22 : Non conformités des tests EIA.

18
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QMD/PRO03/ STRATEGIE DE DEPISTAGE DES MARQUEURS
V03/22 INFECTIEUX CHEZ LE DONNEUR DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QMD/PRO03
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

Version remplacée : V02/17
Processus qualification microbiologique du don de sang QMD

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : du 30/01 au 15/03/2022 Date : 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

19
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QMD/PRO03/ STRATEGIE DE DEPISTAGE DES MARQUEURS
V03/22 INFECTIEUX CHEZ LE DONNEUR DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire la démarche à suivre selon le résultat de dépistage des échantillons.
2. Domaine d’application
Unité QMD - Préparation - Don – Laboratoire de confirmation.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires de transfusion sanguine / ANS
- Arrêté N° 01 du 02 janvier 2022, rendant obligatoire le dépistage systématique des
infections causées par le VIH le VHB, le VHC et par le treponema pallidum pour tout don de
sang.
- Bonnes pratiques transfusionnelles.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- EIA : Enzyme Immunosorbent Assay
- QMD : Qualification Microbiologique du Don
- TPHA : Treponema Pallidum Hémagglutination Assay
- VHC : Virus de l’Hépatite C
- VHB : Virus de l’Hépatite B
- VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine
- Test réactif répétable : test positif répétable au moins deux fois.
5. Personnel concerné
Personnel des unités concernées
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information
- Fiche de résultats de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/FIC01/V02/22).
- Registre de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/REG01/V02/22).
6.2. Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- L’alimentation électrique doit être adaptée aux équipements avec installation d’un groupe
électrogène pour pallier aux coupures de courant électrique.
- La qualification des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- Les locaux doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.

6.3. Matériel Chapitre vide

20
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QMD/PRO03/ STRATEGIE DE DEPISTAGE DES MARQUEURS
V03/22 INFECTIEUX CHEZ LE DONNEUR DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4. Description
6.4.1 Principe général
- La qualification microbiologique du don de sang se fait obligatoirement par :
• Technique immuno enzymatique (automatisé ou manuel) ou chimiluminescence
à la recherche de l’Ag VIH p24 et des Ac anti-VIH 1 et 2, l’Ag HBs, les Ac anti-HBc
totaux, les Ac anti-VHC
• Techniques immuno enzymatique ou TPHA à la recherche des Ac spécifiques de
Treponema Pallidum
- Tout résultat non réactif répond aux normes de qualification microbiologique du don de
sang
- Devant un résultat de dépistage « Réactif » ou « Douteux » les produits sanguins
labiles issus du don en question doivent faire l’objet d’une incinération.
- Tout résultat de dépistage « Réactif » ou « Douteux » répétable doit faire l’objet d’une
procédure de confirmation. Cette dernière doit être réalisée obligatoirement dans un
laboratoire de confirmation.
• Un aliquote d’un deuxième prélèvement sera adressé au laboratoire de
confirmation. Voir algorithmes.
• L’acheminement des prélèvements vers le laboratoire de confirmation doit se faire
en respectant les règles d’hygiène et de sécurité du transport des matières
infectieuses (biosécurité).
- Après confirmation de la positivité des résultats du dépistage, le donneur est
adressé pour une prise en charge dans un service spécialisé.

6.4.2 Algorithmes décisionnels de dépistage :

Algorithme 1 : Dépistage d’une infection au VHB chez les donneurs de sang.
Algorithme 2 : Dépistage d’une infection au VHC chez les donneurs de sang.
Algorithme 3 : Dépistage d’une infection au VIH chez les donneurs de sang.
Algorithme 4 : Dépistage de la Syphilis chez les donneurs de sang.

21
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QMD/PRO03/ STRATEGIE DE DEPISTAGE DES MARQUEURS
V03/22 INFECTIEUX CHEZ LE DONNEUR DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

ALGORITHME 1 DEPISTAGE DE L’INFECTION AU VHB

CHEZ LES DONNEURS DE SANG PAR LA RECHERCHE DE L’ANTIGENE HBs ET DE
L’ANTICORPS ANTI HBc
er
1 Prélèvement Test 1

- Ag HBs réactif ou douteux avec

- Ag HBs non réactif Ac anti-HBc non réactif ou -Ag HBs non réactif
avec avec
- Ac anti-HBc non réactif - Ag HBs réactif ou douteux avec
-Ac anti-HBc réactif
Ac anti-HBc réactif
ou douteux

Incinérer la poche
de sang

Refaire le Test 1 en double Refaire le Test 1 en double

Test 1 réactif Test 1 non Test 1 réactif

répétable réactif répétable

ème ème
Faire 2 prélèvement envoyer Faire 2 prélèvement envoyer un
un aliquote au laboratoire des aliquote au laboratoire des
hépatites virales de l’IPA* pour hépatites virales de l’IPA* pour
confirmation confirmation

Le don de sang répond aux

normes de qualification
microbiologique
Reprendre le donneur
dans le circuit du don

* IPA : Institut Pasteur d’Algérie

22
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QMD/PRO03/ STRATEGIE DE DEPISTAGE DES MARQUEURS
V03/22 INFECTIEUX CHEZ LE DONNEUR DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

ALGORITHME 2 DEPISTAGE DE L’INFECTION AU VHC

CHEZ LES DONNEURS DE SANG

1 er prélèvement Test 1

Test 1 non Test 1 réactif Incinérer la

réactif ou douteux poche de sang

Le don de sang répond aux

normes de qualification
microbiologique
Refaire le Test 1
en double

Test 1 réactif
Test 1 non réactif ou douteux

Reprendre le Faire 2éme prélèvement envoyer

donneur dans le un aliquote au laboratoire des
circuit du don hépatites virales de l’IPA* pour
confirmation

*IPA : Institut Pasteur d’Algérie

23
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QMD/PRO03/ STRATEGIE DE DEPISTAGE DES MARQUEURS
V03/22 INFECTIEUX CHEZ LE DONNEUR DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

ALGORITHME 3 DEPISTAGE DE L’INFECTION AU VIH

CHEZ LES DONNEURS DE SANG

1 er prélèvement Test 1

Test 1 non Test 1 réactif Incinérer la

réactif ou douteux poche de sang

Le don de sang répond

aux normes de
qualification Refaire le Test 1
microbiologique en double

Test 1 réactif
Test 1 non réactif
ou douteux

Reprendre le Faire 2éme prélèvement envoyer

donneur dans le un aliquote au LNR* en VIH
circuit du don pour confirmation

*LNR : Laboratoire National de Référence (IPA)

24
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 07
ANS/QMD/PRO03/ STRATEGIE DE DEPISTAGE DES MARQUEURS
V03/22 INFECTIEUX CHEZ LE DONNEUR DE SANG

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

ALGORITHME 4 DEPISTAGE DE LA SYPHILIS

CHEZ LES DONNEURS DE SANG

1 er prélèvement / sérum dilué

Test 1 (TPHA ou EIA)*

Test 1 réactif Incinérer la

Test 1 non
ou douteux poche de sang
réactif

Le don de sang répond

aux normes de
qualification Refaire le Test 1
microbiologique en double

Test 1 réactif
Test 1non réactif
ou douteux

Reprendre le Orienter le donneur

donneur dans le vers un service de
circuit du don soins spécialisés

*Selon la technique utilisée

25
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO04/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE EIA SUR
V03/22 AUTOMATE
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QMD/PRO04
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

Version remplacée : V02/17
Processus qualification microbiologique du don de sang (QMD)

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : du 30/01 au 15/03/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

27
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO04/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE EIA SUR
V03/22 AUTOMATE
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les principes des tests de dépistage de type EIA sur automates.
2. Domaine d’application
Unité de qualification microbiologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires de transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelle.
- Guide National du diagnostic biologique de l’infection à VIH/SIDA / 2015.
- Directive nationale de l’hygiène / 2015
- Dépistage des infections transmissibles par transfusion dans les dons de sang
Recommandations OMS / 2010.
- Arrêté n° 01 du 02 janvier 2022, rendant obligatoire le dépistage systématique des
infections causées par le VIH, le VHB, le VHC et par Treponema pallidum pour tout don
de sang.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères
- DASRI : Déchets D’Activités De Soins à Risque Infectieux
- EIA : Enzyme Immunosorbent Assay
- OMS : Organisation Mondiale de la Santé
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- QMD : Qualification Microbiologique du Don
- SIDA : Syndrome de l’Immuno Déficience Acquise
- STS : Structure de Transfusion Sanguine
- VHC : Virus de l’Hépatite C
- VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de qualification microbiologique du don de sang.
- Personnel technique formé et qualifié.
- Responsable de la STS /chef de service.
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de résultats de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/FIC01/V02/22).
- Registre de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/REG01/V02/22)
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
28
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO04/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE EIA SUR
V03/22 AUTOMATE
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).

- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Dossier de qualification et d’étalonnage du matériel : Compte rendu et Fiche technique.
6.2 Locaux
Unité de Qualification Microbiologique du Don de sang.
- Doit répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doit disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- L’alimentation électrique doit être adaptée aux équipements avec installation d’un groupe
électrogène pour pallier aux coupures de courant électrique.
- La qualification des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- Les locaux doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.

6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Automate de sérologie infectieuse, principe immuno-enzymatique EIA.
- Centrifugeuse de paillasse adaptable aux tubes utilisés.
- Réfrigérateur (+4° à +8°C).
- Congélateur (à - 20°C ou -80°C)
- Micropipettes réglables à monocanal et à canaux multiples.
- Minuteries.
- Portoirs pour tubes adaptés.
- Agitateur de type vortex.
Pour les équipements spécifiques, suivre les instructions du fabricant de l’automate
et des réactifs utilisés.
6.3.2 Consommables
- Embouts de 10 à 200μl (jaunes ou blancs).
- Embouts 200μl à 1000μl (bleus).
- Portes-embouts.
- Tubes en polystyrène de 10 ml avec obturateur (bouchons).
- Tubes en polystyrène de 5 ml avec obturateur (bouchons).
- Verrerie appropriée (éprouvettes de 500ml et 1000ml, ballons de 500ml et 1000ml ou
autres).
- Cryotubes : petits tubes résistants à la congélation pour aliquoter les sérums.
- Récipients jetables pour réactifs (type Auget, à utiliser avec les pipettes multicanaux).
- Conteneurs de paillasse pour déchets tranchants et piquants (DASRI).
- Sachets noirs pour DAOM.

29
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO04/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE EIA SUR
V03/22 AUTOMATE
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Conteneur pour déchets 10 à 15 L.

- Sachets jaunes pour DASRI.
- Gants de laboratoire à usage unique.
- Pissettes.
- Gaze hydrophile.
- Papier absorbant.
- Consommable spécifique à l’automate.
6.3.3 Réactifs
La trousse de dépistage doit être accompagnée de son mode d’emploi.
- Trousse de réactifs de dépistage des antigènes-anticorps anti-VIH1/2
- Trousse de réactifs de dépistage des anticorps ou antigènes-anticorps anti-VHC
- Trousse de réactifs de dépistage de l’antigène HBs
- Trousse de réactifs de dépistage des anticorps anti-HBc
- Trousse de réactifs de dépistage des anticorps anti-tréponème pallidum
6.3.4 Autres solutions
- Eau distillée.
- Solution d’arrêt si non fournie par le fabricant.
6.4 Description
6.4.1 Principe
Ce sont des techniques immuno-enzymatiques dans lesquelles les étapes de distribution
des sérums et des réactifs, le lavage, l’incubation ainsi que la lecture des signaux sont
totalement prises en charge par un automate multiparamétrique connecté à un logiciel qui
assure la gestion informatique des processus analytiques.
• La révélation du marqueur recherché (Anticorps et /ou Antigène) relève de plusieurs
principes :
- Chimiluminescence
- Electro-chimiluminescence
- Immunofluorescence
- Colorimétrie
6.4.2 Etape pré-analytique
- Assurer la maintenance recommandée par le fabricant
- L’échantillon à analyser peut-être du sérum ou du plasma, se conformer aux
recommandations du fabricant.
- Respecter les recommandations concernant la nature et la proportion de
l’anticoagulant.
- Pour les dispositions générales concernant les échantillons à analyser, voir
ANS/QMD/PRO01/V03/22 : Qualification microbiologique du don de sang.

30
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO04/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE EIA SUR
V03/22 AUTOMATE
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Le personnel technique chargé de l’exécution reçoit un Bordereau d’Analyse établit par

le responsable de l’unité de QMD.
- Vérifier la disponibilité, l’adéquation et le bon fonctionnement du matériel.
- Vérifier la disponibilité, l’adéquation et la qualité des consommables et réactifs
nécessaires.
6.4.3 Etape analytique
- Veiller à ce que la maintenance, les calibrations et l’étalonnage soient effectués
périodiquement.
- Lire attentivement le mode d’emploi qui accompagne la trousse de réactifs pour
s'informer des recommandations du fabricant et des éventuelles modifications du
procédé analytique.
- Ne jamais modifier le procédé analytique.
- Allumer l’automate avant le début de l'opération pour le mettre en mode « Prêt » ou «
Ready », selon les instructions du fabricant.
- Sortir les réactifs 30 minutes avant le début du test pour les amener à la température
ambiante (de +22° à +25°C).
- Entrer les données des échantillons selon les instructions du fabricant, pour les
systèmes disposant d’une interface de gestion de ces derniers.
- Reconstituer les réactifs selon les instructions du fabricant.
- Lancer la manipulation en suivant les instructions du fabricant de l’automate et des
réactifs utilisés.
a) Mesures à prendre après la manipulation
- Remettre les réactifs non utilisés en conservation selon les recommandations du
fabricant.
- Conserver les échantillons (au réfrigérateur ou au congélateur).
- Exécuter les opérations de maintenance, de nettoyage et de désinfection prévues,
conformément à la fiche technique du fabricant.
- Eteindre et débrancher les appareils électriques.
- Couvrir les appareils avec des housses de protection.
- Nettoyer et désinfecter les paillasses ;
- Suivre les filières d’élimination des déchets d’activité de soin
- Enlever les gants, se laver les mains avant de passer à l’interprétation des résultats.

b) Validation du test
- Les résultats d'une série de tests sont validés si, et seulement si, les critères fixés
par le fabricant concernant les contrôles positifs et négatifs sont respectés.
- Les anomalies relevées durant le procédé analytique sont reportées sur la fiche
d’anomalie.

31
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO04/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE EIA SUR
V03/22 AUTOMATE
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

c) Lecture des Résultats

Se conformer aux instructions du fabricant
6.4.4 Etape post analytique
a) Interprétation des résultats
Interpréter les résultats de chaque série séparément conformément aux instructions
du fabricant.
Pour la conduite à tenir vis à vis des résultats réactifs, douteux ou non réactifs, voir :
ANS/QMD/PRO03/V03/22 : Stratégie de dépistage des marqueurs infectieux chez
le donneur de sang.
b) Transcription des résultats
Les résultats doivent être transcrits sur :
- Fiche de résultats de la sérologie infectieuse.
- Fiche de liaison.
- Registre de la sérologie infectieuse.
- Support informatique.
Ces documents doivent être archivés sur un support approprié.
Une traçabilité des données doit être assurée concernant toutes les étapes du procédé
analytique, notamment :
- La date et l’heure de l’analyse.
- Le nom du manipulateur (préciser pour chaque paramètre).
- Les échantillons analysés (nature, origine et références).
- Les réactifs utilisés (numéro du lot, nom de fabricant et date de péremption).
- Les résultats obtenus.
- Date, heure et responsable de la validation.
NB : les anomalies des tests sont présentées dans : ANS/QMD/PRO06/V03/22 :
Non conformités des tests EIA.

32
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO05/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE DE LA SYPHILIS
V03/22 PAR HEMAGGLUTINATION PASSIVE (TPHA)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QMD/PRO05
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

Version remplacée : V02/17
Processus qualification microbiologique du don de sang (QMD)

Modification : Voir annexe des modifications.

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : du 30/01 au 15/03/ 2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction et Commission de
l’Agence Nationale du Sang
d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA.

33
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO05/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE DE LA SYPHILIS
V03/22 PAR HEMAGGLUTINATION PASSIVE (TPHA)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Dépister les anticorps anti Treponema pallidum.
2. Domaine d’application
Unité de qualification microbiologique du don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelle.
- Guide National du diagnostic biologique de l’infection à VIH/SIDA / 2015.
- Directive nationale de l’hygiène / 2015.
- Dépistage des infections transmissibles par transfusion dans les dons de sang
Recommandations OMS / 2010.
- Arrêté n° 01 du 02 janvier 2022, rendant obligatoire le dépistage systématique des
infections causées par le VIH, le VHB, le VHC et par Treponema pallidum pour tout don de
sang.
4. Définitions et abréviations :
- ANS : Agence Nationale du Sang
- DAOM : Déchets Assimilés aux Ordures Ménagères
- DASRI : Déchets d’Activités de Soins à Risque Infectieux
- EIA : Enzyme Immunosorbent Assay
- OMS : Organisation Mondiale de la Santé
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- QMD : Qualification Microbiologique du Don
- SIDA : Syndrome d'Immuno Déficience Acquise
- STS : Structure de Transfusion Sanguine
- TPHA : Treponema Pallidum Hemagglutination Assay
- VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine
5. Personnel concerné :
- Responsable de l’unité de qualification microbiologique du don de sang.
- Personnel technique qualifié et formé.
- Responsable de la STS /chef de service
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Fiche de résultats de sérologie infectieuse (ANS/QMD/FIC01/V02/22).
- Registre de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/REG01/V02/22).
34
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO05/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE DE LA SYPHILIS
V03/22 PAR HEMAGGLUTINATION PASSIVE (TPHA)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).

- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Dossier de qualification et d’étalonnage du matériel : Compte rendu et Fiche technique.
6.2 Locaux
Unité de Qualification Microbiologique du Don de Sang.
- Doit répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doit disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- L’alimentation électrique doit être adaptée aux équipements avec installation d’un groupe
électrogène pour pallier aux coupures de courant électrique.
- La qualification des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- Les locaux doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel
6.3.1 Equipements
- Centrifugeuse de paillasse adaptable aux tubes utilisés.
- Réfrigérateur (+4 + 8°C).
- Congélateur (à - 20°C ou -80°C).
- Micropipettes réglables monocanale et à canaux multiples.
- Minuterie.
- Portoirs pour tubes adaptés.
- Agitateur de type vortex.
6.3.2 Consommables
- Plaques de microtitration fond en U (96 cupules)
- Embouts de 10 à 200μl (jaunes ou blancs).
- Embouts 200μl à 1000μl (bleus).
- Portes-embouts.
- Tubes en polystyrène de 10 ml avec obturateur (bouchons).
- Tubes en polystyrène de 5 ml avec obturateur (bouchons).
- Verrerie appropriée (éprouvettes de 500ml et 1000ml, ballons de 500ml et 1000ml ou
autres).
- Cryotubes : petits tubes résistants à la congélation pour aliquoter les sérums.
- Récipients jetables pour réactifs (type Auget, à utiliser avec les pipettes multicanaux).
- Conteneurs de paillasse pour déchets tranchants et piquants (DASRI).
- Sachets noirs pour DAOM
- Conteneur pour déchets 10 à 15 L.
- Sachets jaunes pour DASRI.
35
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO05/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE DE LA SYPHILIS
V03/22 PAR HEMAGGLUTINATION PASSIVE (TPHA)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Gants de laboratoire à usage unique.

- Gaze hydrophile.
- Papier absorbant.
6.3.3 Réactifs
- Trousse de dépistage TPHA contenant :
 Hématies test (cellules test) sensibilisés avec des antigènes tréponémique,
 Hématies contrôle non sensibilisées (Cellules de contrôle ou Control-cells)
 Diluant d'adsorption
 Sérum de contrôle positif
 Sérum de contrôle négatif.
 Mode d’emploi
- Respecter les instructions du fabricant.
6.4 Description
6.4.1 Principe
La réaction d’Hémagglutination passive repose sur la détection des anticorps anti
Treponema pallidum, éventuellement présents dans le sérum, par l’intermédiaire
d’hématies sensibilisées à l’antigène tréponémique.
- La particule sensibilisée est constituée par un lysat de Treponema pallidum adsorbé
sur des globules rouges ovins ou aviaires (moutons ou dindes).
- Les hématies sensibilisées constituent les « hématies test » dans la réaction de
TPHA.
6.4.2 Etape pré-analytique
- Les échantillons à analyser peuvent être du sérum ou du plasma, se conformer aux
recommandations du fabricant.
- Les échantillons sont accompagnés de fiche de liaison établie par le personnel de
l’unité de prélèvement.
Pour les dispositions générales concernant les échantillons à analyser, voir
ANS/QMD/PRO01/V03/22 : Qualification microbiologique du don de sang.
- Vérifier la disponibilité, l’adéquation et le bon fonctionnement du matériel.
- Vérifier la disponibilité, l’adéquation et la qualité des consommables et réactifs
nécessaires.
6.4.3 Etape analytique
- Lire attentivement le mode d’emploi qui accompagne la trousse de réactifs pour
s'informer des recommandations du fabricant et des éventuelles modifications du
procédé analytique.
- Ne jamais modifier le procédé analytique.

36
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO05/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE DE LA SYPHILIS
V03/22 PAR HEMAGGLUTINATION PASSIVE (TPHA)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Allumer l'incubateur à la température choisie 30 minutes avant le début de l'opération

(pour assurer la stabilité et l'uniformité de la température dans l'incubateur) et vérifier
le contenu de la trousse.
- Sortir les réactifs 30 minutes avant le début du test pour les amener à la température
ambiante (de +22° à +25°C).
- Etablir le plan de distribution et d'identification des échantillons à analyser sur la fiche
de paillasse en respectant les indications du fabricant concernant le nombre et la
position des témoins.
- Reconstituer les réactifs selon les instructions du fabricant.
- Vérifier avant chaque manipulation l’aspect macroscopique des hématies.
- Nettoyer et désinfecter les paillasses.
- Suivre les filières d’élimination des déchets d’activité de soin.
a) Manipulation
Se référer aux instructions du fabricant pour les détails techniques.
b) Mesures à prendre après la manipulation
- Remettre la trousse de réactif à + 4°C.
- Conserver les échantillons au réfrigérateur ou au congélateur.
- Exécuter les opérations de nettoyage et de désinfection prévues
- Nettoyer les paillasses.
- Trier les déchets.
- Enlever les gants, se laver les mains avant de passer à la lecture des résultats.
c) Validation du test
Les résultats d'une série de tests sont validés si, et seulement si :
- Les critères fixés par le fabricant concernant les contrôles positifs et négatifs sont
respectés.
- La sédimentation des hématies contrôle est effective.
- Chaque série est considérée séparément pour la validation du test.
- Les anomalies relevées durant le procédé analytique sont rapportées sur la fiche
d’anomalie
d) Lecture des Résultats
Se conformer aux instructions du fabricant pour la lecture des résultats.
6.4.4 Etape post analytique
a) Interprétation des résultats
Interpréter le résultat selon les instructions du fabricant.
Pour la conduite à tenir vis à vis des résultats réactifs, douteux ou non réactifs, voir :
ANS/QMD/PRO03/V03/22 : Stratégie de dépistage des marqueurs infectieux chez
le donneur de sang.

37
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
ANS/QMD/PRO05/ TECHNIQUE DE DEPISTAGE DE LA SYPHILIS
V03/22 PAR HEMAGGLUTINATION PASSIVE (TPHA)

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Transcription des résultats

Les résultats doivent être transcrits sur :
- Fiche de résultats de sérologie infectieuse (ANS/QMD/FIC01/V02/22).
- Registre de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/REG01/V02/22).
- Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).
- Support informatique.
Ces documents doivent être archivés sur un support approprié.
Une traçabilité des données doit être assurée concernant toutes les étapes du procédé
analytique, notamment :
- La date et l’heure de l’analyse.
- Le nom du manipulateur, précisé pour chaque paramètre
- Les échantillons analysés (nature, origine et références).
- Les réactifs utilisés (numéro du lot, nom de fabricant et date de péremption).
- Les résultats obtenus.
- Date, heure et responsable de la validation.
NB : Les anomalies des tests TPHA sont présentées dans : ANS/QMD/PRO06/V03/22 :
Non conformités des tests EIA.

38
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QMD/PRO06/ NON CONFORMITES DES TESTS EIA
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/QMD/PRO06
Version-Document : V03/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration :03/07/2027

Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

Version remplacée : V02/17
Processus qualification microbiologique du don de sang (QMD)

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : du 30/01 au 15/03/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date :03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

39
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QMD/PRO06/ NON CONFORMITES DES TESTS EIA
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Relever les anomalies rencontrées lors de la réalisation des tests EIA et déterminer la
conduite à tenir devant chaque cas.
2. Domaine d’application
Unité de Qualification Microbiologique du Don de sang.
3. Documents de référence
- Textes règlementaires transfusion sanguine / ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelle.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- EIA : Enzyme Immunosorbent Assay
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- STS : Structure de Transfusion Sanguine
- TMB : Tétra Méthyl Benzidine
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de qualification microbiologique du don de sang.
- Personnel technique formé et qualifié.
- Responsable de la STS /chef de service.
6. Description de la procédure
Unité de qualification microbiologique du don de sang.
6.1 Supports d’information
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Mode d’emploi de la trousse, fournie par le fabriquant
6.2 Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en
vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- L’alimentation électrique doit être adaptée aux équipements avec installation d’un
groupe électrogène pour pallier aux coupures de courant électrique.
- La qualification des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette
activité pour éviter les erreurs et les confusions.
- Les locaux doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.
6.3 Matériel Chapitre vide

40
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QMD/PRO06/ NON CONFORMITES DES TESTS EIA
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.4 Description
6.4.1 Description des anomalies
Types
Effets Causes possibles Solutions
d’anomalies
Non-respect :
- de la température. - Vérifier la procédure technique
- du temps d'incubation. - Refaire le test.
Méthode - des volumes.
- Préparation incorrecte des
réactifs. - Vérifier la procédure technique
- Erreur de dilution, - Refaire le test.
- Réactifs mal mélangés

- Pipeter soigneusement.
- Contamination croisée des
- Ne pas intervertir les bouchons.
contrôles
Manipulation - Répéter l'essai
Contrôle hors - Utilisation de composantes de
- Ne pas interchanger les composants de lots
gamme lots différents
différents.

- Vérifier que le filtre utilisé est à la longueur

Matériel d'onde préconisée.
- Longueur d'onde de lecture
+ Si on n'utilise pas un filtre de référence à 620
incorrecte
Manipulation nm, la densité optique augmente
approximativement de 0,050.

Matériel - Vérifier le lecteur.

- Interférence dans le chemin
+ - Essuyer ou sécher le fond des puits.
optique
Méthode - Vérifier qu'il n'y a pas de bulles d'air.
- Répéter la lecture.

Matière - Ne pas utiliser les réactifs de la trousse au-

- Réactifs périmés delà de la date de péremption.

- Un réactif ou plus n'a pas été

- Vérifier la procédure
ajouté ou interversion dans la
séquence de distribution - Répéter le test.

Pas de Manipulation Substrat inactif :

- Toujours utiliser une solution de substrat
coloration ou Mauvaise conservation ou dilution TMB récemment préparée.
coloration incorrecte
- Vérifier la procédure.
faible en fin Contamination croisée avec la
solution d'arrêt - Refaire le test
de réaction
Manipulation - Conjugué inactif : Dilution - Vérifier les contaminations : Aspect trouble.
+ incorrecte, mauvaise - Revérifier la procédure
Matière conservation - Refaire le test
- Toujours conserver les barrettes non
- Micro plaque inactive : Mauvaise
Matière utilisées dans le sachet de conservation.
conservation
- Refaire le test

41
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/QMD/PRO06/ NON CONFORMITES DES TESTS EIA
V03/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- S'assurer que le TMB est parfaitement

liquide avant utilisation.
- S'assurer que le TMB est bien mélangé
- Contamination, oxydation ou dans le tampon substrat.
préparation impropre du - Utiliser des récipients lavés à l'acide ou à
substrat. usage unique.
- Refaire le test.
- Vérifier que le substrat est incolore,
Manipulation éliminer si virage de couleur.
- Utilisation d'une solution de - Utiliser uniquement la solution de lavage du
lavage d'autre fabricant. kit utilisé.
- Vérifier la qualité de l’eau distillée ou
désionisée utilisée pour diluer le tampon.
- Répéter l'essai.
- Problèmes de lavage
- Vérifier le système de lavage.
- Vérifier que tous les puits soient remplis et
aspirés complètement.
Tous les puits Manipulation - Réactifs contaminés ou mal
- Vérifier les contaminations : aspect trouble.
sont colorés + - Vérifier les dilutions.
préparés.
Matière - Répéter l'essai.

- Vérifier la qualité de l'eau distillée utilisée

Matière - Solution de lavage contaminée ou désionisée utilisée pour diluer le tampon.
- Répéter l'essai.

- Lavage insuffisant.
- Vérifier le système de lavage.
Matériel - Volume de remplissage et/ou - Vérifier que tous les puits soient remplis et
+ aspiration insuffisant ou pas aspirés complètement.
Manipulation uniforme.
- Respecter le nombre de cycles de lavage.
- Nombre de cycles de lavage
- Après lavage, retourner la plaque sur un
insuffisant ou système de lavage
papier absorbant.
contaminé.
- Dilution incorrecte des - Vérifier la procédure.
Matériel
échantillons - Répéter l'essai.

- Respecter le nombre de cycles de lavage.

- Après lavage, retourner la plaque sur un
Manipulation papier absorbant.
- Utiliser uniquement la solution de lavage du
kit utilisé.
Nombre élevé
d'échantillons - Pipettes mal calibrées. - Utiliser uniquement des pipettes calibrées
Matériel
réactifs - Embouts pas bien fixés. et pipeter soigneusement en évitant les
+
- Distribution incorrecte. bulles et les éclaboussures.
Manipulation
- Répéter l'essai.
- Réactifs ou sérums :
- Bien mélanger tous les réactifs et les
- mal mélangés.
Manipulation sérums et les laisser s’équilibrer à la
- Non ramenés à la température
température ambiante avant utilisation
ambiante avant utilisation.

42
 ANNEXE
SUPPORTS D’INFORMATION

PROCESSUS QUALIFICATION
MICROBIOLOGIQUE DU DON DE SANG

43
 Structure de Transfusion Sanguine :
……………………………………………..
FICHE D’ANOMALIE

Unité :

Date de déclaration
de l’anomalie

Nom et prénoms

Localisation

Description de
l’anomalie constatée

Mesures prises

Signature

Date

Mesures Correctives
Et
Mesures préventives

Nom et signature du responsable Nom et signature du responsable de la structure

de l’unité

45
 FICHE DE LIAISON

Structure : ………………………………………. Structure : ……………………………………….

Date : ……/………………/………………… Date : ………/………………/………………….

Sexe Type de donneur Type de poche Qualification Sérologique Qualification Immuno–Hématologique

N° de Ac
N° du Nom – Nom du Nom du Tréponema
lot N° du don Anti- N° de libération
don Prénom médecin préleveur Ag
poche Pallidum
M F OC CP Reg D T Q HIV HCV HBc Autres GS1 GS2 Phénotype Autres
HBs (Syphilis)
46

Chef d’unité…………………… Chef d’unité………………………… Chef d’unité………………….

Validation Date : ………/………/…………. Date : ………/………/…… Date : ……/………/……….
Signature : ……………………… Signature : …………………………… Signature : ……………………
 FICHE DE POSTE Code : …./…/…..
Structure de Transfusion Sanguine : Version : 02
Unité :
Date de validation :

A - Définition
………………………. est chargé de …………………………....
B - Activités
1 - Activités principales
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 Inventaire annuel

2 - Activités secondaires
 Participation à l’application de la démarche qualité du service.

C - Liaisons
1 - Relations avec responsables hiérarchiques
 Chef de service……………….
 ………………….
 …………………….
2 - Relations transversales
 Techniciens
 Les personnels des autres services
3 - Relations subordonnées
 …………………..
D - Actions Préventives
En cas de risque sur la qualité du résultat de l’activité ou sur le personnel citer les
conduites à tenir pour y remédier

E - Délégation des tâches

………………. peut déléguer ses tâches :
 ………………………..

F - Compétences et qualifications requises

Diplôme de …………………..

G - Contraintes particulières d’exercice

(Fonctions de binôme, astreintes, horaires décalés, déplacements, etc.)

ANS/STS/FIC04/V02/22
47
 Structure de Transfusion Sanguine :
FICHE DE VIE DES EQUIPEMENTS
.............................................................

Référence : ………………. Indice : ……… Date de mise en service : ………………

Désignation N° de la fiche

Etendu de mesure
Instruction d’utilisation et de
Périodicité maintenance préventive
d’étalonnage

Incertitude Instruction de vérification

N° de la fiche : N° chronologique de la fiche.

INTERVENTION
PROCHAINE NOM &
DATE NATURE RESULTATS
DATE PRENOM

ANS/STS/FIC05/V02/22
48
 Structure de Transfusion FICHE DE RESULTATS DE LA SEROLOGIE
Sanguine
............................................ INFECTIEUSE

Partie à remplir par le médecin du don :

N° du don : ………………..…………..........................

Nom Prénom : …………………….…………………...

Date du don : ………/………/……..

Visa du médecin du don :

Partie à remplir par le chef d’unité sérologie infectieuse :

N° du don : ……………….…………...

Marqueur Technique Résultat du dépistage

Ac anti VIH1 et VIH2

Ag HBs

Ac anti-HBc

Ac anti-VHC

TPHA / EIA Syphilis

Autres marqueurs

Date :………./…………./…………..

Visa du chef d’unité

ANS/QMD/FIC01/V02/22
49
 FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES
ANS/STS/FIC03/V02/22

Équipement de conservation : T° (01) : afficheur Semaine du.../....../...au.../...../.......

…………………………….. T° (02) : thermomètre à l’intérieur de l’équipement de stockage

T° T° Après T° T°
Jour Matin EMARG EMARG OBSERVATION
(01) (02) Midi (01) (02)

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
DIM
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h
50

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
LUN
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
MAR
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h
 FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES
ANS/STS/FIC03/V02/22

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
MER
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
JEU
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

7 :00 h
51

15 :00 h
9 : 00 h
VEN
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
SAM
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h
 FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES
ANS/STS/FIC03/V02/22

Équipement de conservation : T° (01) : afficheur Semaine du.../....../...au.../...../.......

……………………………….. T° (02) : thermomètre à l’intérieur de l’équipement de stockage

T° T°
Nuit EMARG Observations
(01) (02)
20 :00 h
22: 00 h
DIM 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
52

20 :00 h
22: 00 h
LUN 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h
MAR 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
 FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES
ANS/STS/FIC03/V02/22

20 :00 h
22: 00 h
MER 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h
JEU 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
53

20 :00 h
22: 00 h
VEN 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h
SAM 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
 ANS/QMD/REG01/V02/22

REGISTRE DE LA SEROLOGIE INFECTIEUSE

AUTRES MARQUEURS
VIH VHB (Ag HBs) VHB (Ac anti-HBc) VHC SYPHILIS CONFIMRATION CMV
………………………………

DEP CTR1 CTR2 DEP CTR1 CTR2 DEP CTR1 CTR2 DEP CTR1 CTR2 DEP CTR1 CTR2 VIH VHB VHC SYPH IgG IgM DEP CTR1 CTR2 CONF

DATE

Laboratoire de
TECHNICIEN
confirmation

N° DU LOT
REACTIF

RESULTATS DES ANALYSES

54

AUTRES MARQUEURS
VIH VHB (Ag HBs) VHB (Ac anti-HBc) VHC SYPHILIS CONFIMRATION CMV
N° du Don …………………………………….

DEP CTR1 CTR2 DEP CTR1 CTR2 DEP CTR1 CTR2 DEP CTR1 CTR2 DEP CTR1 CTR2 VIH VHB VHC SYPH IgG IgM DEP CTR1 CTR2 CONF
 Annexe des modifications du processus qualification
microbiologique du don de sang

Liste des procédures, modes opératoires fiches et registres modifiés :

 Procédure N° 02
« Technique de dépistage ELISA » devenu « Technique de dépistage
immuno-enzymatique basée sur le principe ELISA ».

 Procédure N° 03
Modification de l’algorithme 1 : Algorithme de dépistage de l’infection au
VHB chez les donneurs de sang.

 Procédure N° 04
« Technique de dépistage sur automate » devenu « Technique de
dépistage EIA sur automate ».

 Procédure N° 06
Modifications du tableau de description des anomalies rencontrées lors de
la réalisation des tests EIA.

 Fiche de résultats de la sérologie infectieuse (ANS/QMD/FIC01/V02/22).

 Fiche de liaison (ANS/STS/FIC01/V02/22).

 Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).

 Fiche de vie des équipements (ANS/STS /FIC05/V02/22).

 Registre de sérologie infectieuse (ANS/QMD/REG01/V02/22).

55
 ‫اﻟﺟﻣﮭورﯾــــﺔ اﻟﺟزاﺋرﯾـــﺔ اﻟدﯾﻣﻘراطﯾـــﺔ اﻟﺷﻌﺑﯾــــﺔ‬
REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE
‫وزارة اﻟﺻﺣـــﺔ‬
MINISTERE DE LA SANTE

‫اﻟوﻛﺎﻟــﺔ اﻟوطـﻧﯾـــﺔ ﻟﻠدم‬

Agence Nationale du Sang

PROCESSUS DISTRIBUTION DES

PRODUITS SANGUINS LABILES

EDITION
2022
 LISTE DE LA COMMISSION D’ACTUALISATION DU PROCESSUS DE
DISTRIBUTION DES PRODUITS SANGUINS LABILES

- Pr TAOULI Katia / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.

- Pr MENDI Khalida / Centre de Transfusion Sanguine CHU Bab El Oued
Alger.
- Dr RIACHI Sihem / Centre de Transfusion Sanguine EHS Daksi Constantine.
- Dr CHAIB Mohamed / Centre de Transfusion Sanguine CHU Blida.
- Dr ADDA Fatima / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.
- Dr BENKHENICHE Nassima / Agence Nationale du Sang Alger.
- Dr KERRI Sofiane / Agence Nationale du Sang Alger.

LISTE DE LA COMMISSION DE VALIDATION DES PROCEDURES

OPERATOIRES NORMALISEES

- Pr ALLAL TAOULI Katia / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.

- Pr BOUZEGHOUB Salima/ Laboratoire National de Référence VIH Institut
Pasteur d’Algérie.
- Pr BROUK Hacen / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr CHEKKAL Mohamed / Centre de Transfusion Sanguine EHU Oran.
- Pr MENDI Khalida / Centre de Transfusion Sanguine CHU Bab El Oued.
- Pr MOHAMMEDI Dhakya / Institut Pasteur d’Algérie.
- Pr MOUEDEN Mohamed Amine / Centre de Transfusion Sanguine CHU Oran.
- Pr RETIMA Abdelhak / Centre de Transfusion Sanguine CHU Annaba.
- Pr ZOUAI Karima / Centre de Transfusion Sanguine EPH Rouiba.
- Dr ADDA Fatima / Centre de Transfusion Sanguine CHU Tlemcen.
- Dr ALIOUA Meriem / Agence Nationale du Sang.
- Dr ZEGHLACHE Lynda / Agence Nationale du Sang.
 SOMMAIRE

PROCESSUS DISTRIBUTION DES PRODUITS SANGUINS LABILES

PRO n° 01 Distribution des PSL 07

MOP n° 01 Approvisionnement en PSL 13
MOP n° 02 Distribution nominative des PSL 19
MOP n° 03 Distribution des CGR 29
MOP n° 04 Distribution de PFC 35
MOP n° 05 Distribution des CPA et CPS 41
MOP n° 06 Décongélation du PFC 47
MOP n° 07 Gestion de stock des PSL 51

Annexe : supports d’information 55

FICHES
Fiche de demande de produits sanguins labiles 57
Fiche de mouvement du stock de PSL 58
Fiche d’approvisionnement en PSL 59
Fiche de distribution nominative 63
Fiche d’incident transfusionnel 65
Fiche de programme hebdomadaire de commande des PSL 66
Fiche de convention type 67
Fiche d’anomalie 71
Fiche de surveillance de la température des enceintes 73
Fiche de poste 77
Fiche de vie des équipements 78
Fiche de transport de PSL 79

REGISTRES
Registre de distribution nominative 80
Registre de retour des PSL 81
Registre des commandes non satisfaites 82

Annexe des modifications du processus distribution des PSL 83

 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
DISTRIBUTION DES PRODUITS SANGUINS
ANS/DIS/PRO01/ LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/DIS/PRO01
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité

transfusionnelle V01/17, processus distribution des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisée Validée Approuvée

Date : du 17/01 au 22/04/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation Dr K.L OULD KABLIA

7
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
DISTRIBUTION DES PRODUITS SANGUINS
ANS/DIS/PRO01/ LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
- Décrire les étapes indispensables pour la distribution des produits sanguins labiles.
- Assurer une sécurité transfusionnelle optimale.
- Assurer le conseil transfusionnel.
2. Domaine d’application
Unité de distribution.
3. Documents de Référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles –ANS.
- Le conseil transfusionnel : de la thérapeutique consensuelle aux alternatives adaptées
EFS/2016.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CP : Concentré Plaquettaire
- CPA : Concentré Plaquettaire d’Aphérèse.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- EDCL : Epreuve Directe de Compatibilité au Laboratoire
- LISS: Low Ionic Strength Solution
- LSP : Laborantin de Sante Publique.
- MCP : Mélange de Concentrés Plaquettaires.
- MOP : Mode Opératoire
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- RAI : Recherche d’Agglutinines Irrégulières.
- RH : Rhésus
- STS : Structure de Transfusion Sanguine.
- UV : Urgence Vitale
- UVI : Urgence Vitale Immédiate
- UR : Urgence Relative
5. Personnel Concerné
- Responsable de l’unité de distribution (médecin ou pharmacien formé en transfusion
sanguine).
- Laborantin de santé publique (LSP).
- Biologiste.

8
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
DISTRIBUTION DES PRODUITS SANGUINS
ANS/DIS/PRO01/ LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6. Description de la procédure
6.1. Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande de PSL (ANS/DIS/FIC01/V02/22).
- Fiche d’approvisionnement en PSL (ANS/DIS/FIC03/V02/22).
- Fiche de mouvement du stock de PSL (ANS/DIS/FIC02/V02/22).
- Fiche de distribution nominative (ANS/DIS/FIC04/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche d’incident transfusionnel (ANS/DIS/FIC05/V02/22).
- Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de distribution nominative (ANS/DIS/REG01/V02/22).
- Registre de retour des PSL (ANS/DIS/REG02/V02/22).
- Registre des commandes non satisfaites (ANS/DIS/REG03/V02/22).
6.2. Locaux
- Doivent se situer à proximité de la zone de stockage des PSL.
- Doivent disposer de moyens de communication rapides adaptés à l’activité et à l’urgence.
- Doivent répondre aux exigences du bon déroulement chronologique de l’opération, de la
réception de la commande jusqu'à la délivrance du PSL demandé.
6.3. Matériel
a) Equipements
- Chambre froide et /ou banque de sang +4°C.
- Congélateur de -25°C à -80°C.
- Agitateur de plaquettes avec enceinte climatique de +20°C à +24°C.
- Appareil pour décongélation de plasma ou Bain Marie.
- Conteneurs réfrigérés pour transport des PSL.
- Enregistreur de température (thermo-bouton, traceur, sonde).
- Automate immuno-hématologie selon la cadence.
- Centrifugeuse de paillasse.
- Etuve à 37°C

9
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
DISTRIBUTION DES PRODUITS SANGUINS
ANS/DIS/PRO01/ LABILES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

b) Réactifs
- Kit de groupage ABO.
- Anti D.
- Anti H, Anti A1.
- Hématies test (A1 et B)
- Panel RAI
- Rh Contrôle
- Réactifs de phénotypage (RH KEL1)
- Anti globulines humaines polyvalentes ou monospécifiques (IgG).
- Tampon Liss.
- Eau physiologique.
c) Consommables
- Sacs pour décongélation du plasma.
- Compresse.
- Gants.
- Tubes à essai.
- Pipettes à usage unique.
- Embouts.
- Alcool.
- Désinfectant.
- Plaque de groupage (plaque d’opaline) et/ ou Cartes Gel et/ou Microplaques
- Ciseaux.
6.4. Description
 La distribution des PSL est assurée 24H sur 24H, 7 jours sur 7 jours.
 La distribution proprement dite ; voir :
• ANS/DIS/MOP01/V02/22 : Approvisionnement en PSL d’une structure de transfusion
sanguine.
• ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution nominative des PSL.

10
 6.5 Logigramme de la distribution
11
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
APPROVISIONNEMENT EN PSL D’UNE STRUCTURE
ANS/DIS/MOP01/ DE TRANSFUSION SANGUINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/DIS/MOP01
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus distribution des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : du 17/01 au 22/04/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction et Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA

13
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
APPROVISIONNEMENT EN PSL D’UNE STRUCTURE
ANS/DIS/MOP01/ DE TRANSFUSION SANGUINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les modalités d’approvisionnement en PSL des structures de transfusion sanguine.
2. Domaine d’application
Unité de distribution.
[Link] de référence
- Textes réglementaires, Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles -ANS.
- Le conseil transfusionnel : de la thérapeutique consensuelle aux alternatives adaptées-
EFS/2016.
- Décision N° 252 du 31 aout 2021, fixant la convention type relative aux conditions et aux
modalités d’approvisionnement et de cession des produits sanguins labiles des
établissements de santé publics et privés.
4.Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CPA : Concentré Plaquettaire d’Aphérèse.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- LISS : Low Ionic Strength Solution
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- MCP : Mélange de Concentrés Plaquettaires
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- RH : Rhésus
- RAI : Recherche d’Agglutinines Irrégulières.
- STS : Structure de Transfusion Sanguine.
[Link] Concerné
- Responsable de l’unité de distribution (Médecin ou pharmacien formés en transfusion
sanguine).
- Laborantin de santé publique (LSP).
- Biologiste.
[Link] de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Convention entre établissements de santé dotés de structures de transfusion sanguine
(ANS/DIS/FIC07/V01/22).

14
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
APPROVISIONNEMENT EN PSL D’UNE STRUCTURE
ANS/DIS/MOP01/ DE TRANSFUSION SANGUINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche d’approvisionnement en PSL (ANS/DIS/FIC03/V02/22).

- Fiche de mouvement du stock de PSL (ANS/DIS/FIC02/V02/22).
- Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Registre de distribution nominative (ANS/DIS/REG01/V02/22).
- Registre de retour des PSL (ANS/DIS/REG02/V02/22).
- Registre des commandes non satisfaites (ANS/DIS/REG03/V02/22).
6.2 Locaux
- Les zones de distribution et de stockage doivent être clairement identifiées et
exclusivement réservées à ces activités et le cas échéant aux activités de transformation.
- Les locaux de distribution doivent répondre aux exigences du bon déroulement
chronologique de l’opération, de la réception de la commande jusqu'à la délivrance du PSL
demandé.
6.3 Matériel
a) Equipements
- Chambre froide et /ou banque de sang +4°C.
- Congélateur de -25°C à -80°C.
- Agitateur de plaquettes avec enceinte climatique de +20°C à +24°C.
- Appareil pour décongélation de plasma ou Bain Marie.
- Conteneurs réfrigérés pour transport des PSL.
- Enregistreur de température (thermo-bouton, traceur, sonde).
- Automate immuno hématologie selon la cadence.
- Centrifugeuse de paillasse.
- Etuve à 37°C
b) Réactifs
- Kit de groupage ABO.
- Anti D.
- Anti H, Anti A1.
- Hématies test (A1 et B)
- Panel RAI

15
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
APPROVISIONNEMENT EN PSL D’UNE STRUCTURE
ANS/DIS/MOP01/ DE TRANSFUSION SANGUINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Rh Contrôle
- Réactifs de phénotypage (RH KEL1)
- Anti globulines humaines polyvalentes ou monospécifiques (IgG).
- Tampon Liss.
- Eau physiologique.
c) Consommables
- Sacs pour décongélation du plasma.
- Compresse.
- Gants.
- Tubes à essai.
- Pipettes à usage unique.
- Embouts.
- Alcool.
- Désinfectant.
- Plaque de groupage (plaque d’opaline) et/ ou Cartes Gel et/ou Microplaques
- Ciseaux.
6.4 Description de l’approvisionnement en PSL d’une structure de transfusion sanguine
 Réceptionner la fiche de demande d’approvisionnement en PSL (en double exemplaire)
adressée à la STS.
 Identifier la STS.
 Vérifier la fiche de demande d’approvisionnement :
- Nombre et type de PSL demandés.
- Date et signature du responsable de la STS.
- Date et heure souhaitées pour la livraison.
 Vérifier la disponibilité des PSL demandés sur la fiche de mouvement du stock de PSL.
 Vérifier l’hygiène et l’intégrité des conteneurs.
 Procéder à la livraison des PSL.
 Sortir les CGR de la chambre froide, vérifier :
- Les numéros des poches.
- La date de péremption.
- Leur intégrité et les placer dans les conteneurs adaptés avec les traceurs de
température.
 Sortir les PFC du congélateur, vérifier :

16
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
APPROVISIONNEMENT EN PSL D’UNE STRUCTURE
ANS/DIS/MOP01/ DE TRANSFUSION SANGUINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Les numéros des poches.

- La date de péremption.
- Leur intégrité et les placer dans les conteneurs adaptés au transport de PFC avec les
traceurs de température.
NB : Ne pas décongeler les PFC
 Sortir les CPS ou CPA de l’agitateur de plaquette, vérifier :
- Les numéros des poches.
- La date de péremption.
- L’intégrité des poches, l’indice de tournoiement et mettre les CPS ou CPA dans les
conteneurs adaptés avec traceurs de température.
 Porter sur le registre de distribution (ou support informatique) :
- Le numéro de la demande d’approvisionnement.
- L’établissement demandeur.
- Nombre et type des PSL distribués.
- Le numéro de poche de chaque PSL distribué.
- La date de péremption des PSL.
- Date et heure de livraison.
- Nom, prénom et identifiant du transporteur.
- Nom, prénom et signature ou identifiant du technicien chargé de la livraison des PSL.
 Compléter la fiche de demande d’approvisionnement de PSL par les renseignements
déjà mentionnés sur le registre de distribution.
 Remplir la fiche de transport vers les STS en double exemplaire, un exemplaire sera
remis au transporteur avec les conteneurs, et un exemplaire restera au niveau du service
de distribution :
- Nombre et type de PSL livrés.
- Le nombre de conteneurs.
- Date et heure de livraison.
- Nom, prénom et /ou identifiant du personnel chargé de la distribution.
- Nom, prénom du transporteur.
- Nom, prénom et signature du responsable de l’unité de distribution.
 Remettre un exemplaire de demande d’approvisionnement de PSL au transporteur.
 Garder le deuxième exemplaire pour comptabilité et archivage.

17
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 06
APPROVISIONNEMENT EN PSL D’UNE STRUCTURE
ANS/DIS/MOP01/ DE TRANSFUSION SANGUINE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 Logigramme
Qui Quoi Comment

Voir
ANS/DIS/MOP01/V02/22 :
Réception de la demande Approvisionnement en PSL.
d’approvisionnement

LSP ou
biologiste Consultation du stock
et choix des PSL

Vérification des
conteneurs de transport

Blocage et mesure Non

Conforme
corrective et fiche
?
d’anomalie

Oui

Livraison

Enregistrement

18
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/DIS/MOP02
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version Manuel procédures opératoires normalisées activité

remplacée: transfusionnelle V01/17, processus distribution des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : du 17/01 au 22/04/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

Commission de La Directrice Générale de

Commission de
rédaction et l’Agence Nationale du Sang
validation
d’actualisation Dr K.L OULD KABLIA

19
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les modalités de distribution nominative.
2. Domaine d’application
Unité de distribution.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine - ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles –ANS.
- Le conseil transfusionnel : de la thérapeutique consensuelle aux alternatives adaptées
EFS/2016.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CPA : Concentre Plaquettaire d’Aphérèse.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- FDN : Fiche de Distribution Nominative.
- IH : Immuno-Hématologie
- LSP : Laborantin de Sante Publique.
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- RAI : Recherche des Agglutinines Irrégulières.
- RH : Rhésus.
- STS : Structure de Transfusion Sanguine.
- UV : Urgence Vitale.
- UVI : Urgence Vitale Immédiate.
- UR : Urgence Relative
5. Personnel Concerné
- Responsable de l’unité de distribution (médecin ou pharmacien formés en transfusion
sanguine).
- Laborantin de santé publique (LSP).
6. Description de la procédure
6.1 Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche de demande de PSL (ANS/DIS/FIC01/V02/22).
- Fiche de mouvement du stock de PSL (ANS/DIS/FIC02/V02/22).
- Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22).

20
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de distribution nominative (ANS/DIS/FIC04/V02/22).

- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de distribution nominative (ANS/DIS/REG01/V02/22).
- Registre des commandes non satisfaites (ANS/DIS/REG03/V02/22).
- Programme hebdomadaire de commande des PSL (ANS/DIS/FIC06/V01/22)
6.2 Locaux
- Doivent se situer à proximité de la zone de stockage des PSL.
- Doivent disposer de moyens de communication rapides adaptés à l’activité et aux
situations d’urgence.
- Doivent répondre aux exigences du bon déroulement chronologique de l’opération, de la
réception de la commande jusqu'à la délivrance du PSL demandé.
6.3 Matériel : Chapitre vide
6.4 Description
6.4.1 Etape d’identification et d’enregistrement de la demande de PSL
1. Réceptionner les documents nécessaires à la demande de PSL :
 Fiche de prescription des PSL (en double exemplaire).
 Fiche navette ou tout autre document justifiant l’hospitalisation du patient.
 Résultats valides d’examens d’Immuno-hématologie du receveur.
2. Réceptionner le tube échantillon et vérifier la concordance et la conformité du tube
échantillon avec la demande de PSL (identité).
3. Vérifier la conformité de la prescription de PSL.
 Prescription de PSL médicale et nominative remplie avec précision émanant d’un service
clinique.
 En cas de service clinique appartenant à un établissement différent qui ne dispose pas de
banque de sang, une convention signée par les 2 partenaires doit être exigée.
 Identification du demandeur :
▪ Identification de l’établissement de santé demandeur et du service de soins.
▪ Identification du prescripteur.
▪ Signature et griffe du prescripteur.
 Identification du patient :
▪ Nom de famille ou nom de naissance

21
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

▪ Prénom
▪ Date, lieu de naissance et sexe.
 Identification des PSL demandés :
▪ Date de la prescription.
▪ Degré de l’urgence transfusionnelle ou heure souhaitée de délivrance.
▪ Type, quantité, qualification et/ou transformation des PSL.
 Renseignements spécifiques obligatoires :
▪ Pour les concentrés de plaquettes : poids du patient, dernière numération
plaquettaire datée et posologie souhaitée.
▪ Pour le plasma thérapeutique : indication conforme aux recommandations
professionnelles (informations cliniques et biologiques utiles).
4. Vérification de la conformité des résultats d’examens d’Immuno- hématologie :
 Résultats de deux déterminations de groupage ABO-RH1 du malade avec ou sans
phénotype RH-KEL1(Rh-K), réalisées sur 2 actes de prélèvements différents
obligatoires (deux comptes rendus de résultats indépendants ou d’une carte de
groupage sanguin) ou à défaut un résultat d’une seule détermination de groupage ABO-
RH1 valide, accompagné d’un échantillon de prélèvement sanguin permettant de
l’effectuer.
 Carte de groupage sanguin éditée (retranscription manuelle ou étiquettes de groupe
autocollantes interdites) et validée (nom du laboratoire agréé, adresse et téléphone,
griffe du médecin ou pharmacien biologiste, date de réalisation, nom, prénom, sexe,
date et lieu de naissance du patient).
 Cas particulier du nouveau-né : document valide jusqu’à l’âge de 6 mois (document de
groupage mention « groupe sanguin de nouveau-né, valide jusqu’au : date de
naissance +6 mois »).
 En absence de carte de groupage (situation particulière), 2 tubes de prélèvement
sanguin (actes réalisés à 2 temps différents, date et heure exigées).
 Résultat de la RAI pour la sélection de CGR : voir (ANS/DIS/MOP03/V02/22) :
Distribution des CGR et la procédure relative à la recherche des anticorps anti
érythrocytaires irréguliers (RAI) : (ANS/QBIH/PRO05/V03/22), à défaut un
échantillon biologique permettant de réaliser cet examen.
 Délai habituel de validité de la RAI est de 72h (3 jours) (peut être reporté à 21 jours en
absence d’antécédents transfusionnels ou épisodes immunisants, dans le cadre d’un
protocole transfusionnel préétabli ou indication formelle du prescripteur), le délai de 21
jours de la RAI doit être notifié par le prescripteur.
 Cas particulier du nouveau-né : jusqu’à 4 mois (120 jours), résultat RAI valide, à défaut
le résultat de la RAI de la mère peut être utilisé.
22
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 Si RAI positif, les CGR doivent être compatibilisés

 Les résultats des examens IH du laboratoire délivreur doivent être disponibles sur le
logiciel ou enregistrés, les résultats IH émanant d’un laboratoire extérieur
accompagnant le dossier de prescription de PSL doivent être enregistrés et faire l’objet
d’une double saisie manuelle par le service de délivrance ou archiver une copie ou
scanner le document IH.
 Les résultats IH du receveur sont transmis au service demandeur pour être archivés
dans le dossier médicotechnique du malade.
6.4.2 Etape de distribution
A. PRISE EN COMPTE D’UNE PRESCRIPTION DE PSL ET RESULTATS D’EXAMENS IH
CONCORDANTS
1. Saisie manuelle (registre) ou informatique des données : Ensemble de données d’identité
présentes sur la prescription des PSL, résultats IH receveur saisis et rendus au
prescripteur (vigilance accrue indispensable par les personnes habilitées : date et heure
de péremption des PSL, présence d’hémolysines...etc.)
2. Sélection du PSL en cohérence avec la prescription.
3. Tenir compte du protocole transfusionnel défini ou des critères cliniques ou biologiques du
patient.
 Consulter la fiche de mouvement de stock de PSL.
 Toute discordance entre la prescription et le protocole établi, toute indisponibilité de
PSL demandé, fait l’objet d’une concertation entre le service de délivrance et le service
de soins, les modifications de prescription initiale notifiées par le service prescripteur,
seront formellement validées par le responsable de l’unité de distribution et tracées sur
la prescription.
4. Sélection des PSL en cohérence avec les résultats IH :
 La sélection des CGR est réalisée dans le respect de la sécurité immunologique des
groupes érythrocytaires.
 La règle de transfusion plaquettaire se base sur l’identité cellulaire ABO, chaque fois
que cela est possible.
 La transfusion de plasma thérapeutique obéit aux règles de compatibilité ABO adaptée
aux plasmas.
5. Sélection des PSL par le personnel habilité après contrôle de concordance conforme entre
les données de prescription des PSL, les résultats d’examens IH et l’historique du patient
(si disponible). En cas de discordance, bloquer la sélection et contacter le service
prescripteur.
En cas de non disponibilité ou non conformité ou modification de prescription initiale
notifier sur le registre (ou logiciel) des commandes « non satisfaites ».
23
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

B. DELIVRANCE SECURISEE DES PSL

1. Sélection des PSL par le personnel habilité après contrôle de concordance conforme entre
les données de prescription des PSL, les résultats d’examens IH et l’historique du patient
(si disponible).
2. Délivrance autorisée par le responsable de l’unité de distribution.
3. Retirer de l’enceinte de conservation le PSL répondant aux exigences de la demande dont
la date de péremption est la plus proche ou de durée de conservation conforme aux
critères de sélection.
4. Vérifier l’intégrité, l’aspect et la date de péremption du PSL.
5. Édition de la fiche de distribution nominative FDN (manuelle ou numérisée) pour chaque
demande de PSL.
 Comporte l’association systématique de l’identification des produits délivrés et de
l’identité du patient.
 Fiche de délivrance éditée par demande de PSL, date et heure de délivrance
enregistrées sur papier ou sur le logiciel.
C. CONTROLE, CONDITIONNEMENT ET REMISE DES PSL
Edition et validation de de la fiche de délivrance nominative (FDN) (02 exemplaires).
1. Contrôle de cohérence : avant fermeture du conteneur, dernière vérification portant
cohérence entre la prescription médicale, la fiche de délivrance, les résultats IH et les
produits délivrés.
2. Conditionnement des PSL :
• Respecter les conditions de conservation.
• Conteneurs isothermes, protecteurs, étanches et clos spécifiques au transport des PSL.
• Portés et maintenus aux températures prévues pour chaque type de PSL.
• Mention « transfusion produit sanguin, fragile ».
3. Remise des PSL :
Remise du PSL avec la FDN correspondante à la personne qui assure le transport
(mandatée) (nom, prénom et matricule apposés du transporteur sur la fiche de transport
horodaté ou sur le registre de distribution ou sous forme numérique et sur la FDN).
4. Porter tous les renseignements sur le registre de distribution ou sur format numérique :
• PSL distribués.
• Résultats d’Immuno-hématologie des PSL distribués et du patient receveur.
• Nombre, type et groupe sanguin des PSL
• Date et heure de délivrance des PSL.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

5. Réalisation de la traçabilité du PSL :

Le document réglementaire de confirmation de la transfusion sanguine du PSL au service
de soin est la fiche de délivrance nominative (FDN), qui doit être renseignée et complétée
au lit du malade par la personne ayant réalisé l’acte transfusionnel, un exemplaire de la
fiche est à retourner au service de délivrance de la structure de transfusion sanguine, un
exemplaire sera conservé dans le dossier transfusionnel du malade.
6.4.3 Distribution nominative des PSL en situations particulières
[Link] Distribution des PSL pour les transfusions programmées :
Ceci concerne les transfusions réalisées en dehors des urgences vitales, tous les
programmes transfusionnels doivent être faits entre le service demandeur et l’unité de
distribution des structures de transfusion sanguine.
Le service demandeur doit :
 Communiquer le programme hebdomadaire des actes transfusionnels au responsable de
l’unité de distribution des PSL (dans un délai d’une semaine), voir
(ANS/DIS/FIC06/V01/22)
Le responsable de l’unité de distribution doit :
 Réceptionner le programme des actes transfusionnels et organiser la disponibilité des
PSL demandés.
 Transmettre au responsable de l’unité du don de sang les besoins en PSL tel que les
groupes sanguins rares.
 Réserver les PSL sélectionnés.
 Les PSL réservés ne seront remis en circulation qu’après l’autorisation du médecin
prescripteur.
[Link] Distribution des PSL pour les transfusions en situation d’urgence :
Définir les niveaux d’urgence transfusionnelle :
Urgence Vitale Immédiate (UVI) : délivrance des Produits sanguins labiles (PSL) réalisée
sans aucun délai (les PSL peuvent être délivrés avant la connaissance des résultats des
examens immuno-hématologiques prétransfusionnels prévus par la règlementation en
vigueur).
Urgence Vitale (UV) : délai d’obtention du PSL inférieur à 30 mn. Les CGR sont
distribués dans la mesure du possible avec 2 déterminations de groupage sanguin,
éventuellement avant la connaissance des résultats de RAI si ceux-ci non encore
disponibles.
Urgence Relative (UR) : délai d’obtention de 2 à 3h, ce qui permet la réalisation de tous
les examens IH pré transfusionnels selon la règlementation. Les CGR sont délivrés ABO
compatibles, au besoin compatibilisés au laboratoire (selon le résultat de la RAI), voir
(ANS/QBIH/PRO06/V03/22 : Epreuve Directe de Compatibilité au Laboratoire).

25
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Confirmation téléphonique du niveau d’urgence transfusionnelle : en l’absence de

l’appel, contacter le service de soins pour :
- Confirmer l’authenticité du besoin en UVI ou UV avant délivrance.
- Informer que les PSL sont prêts.
Dans le cas de prescription de PSL en UVI et UV en absence de résultats IH (ABO
disponibles) ou absence de lien entre le patient et ses examens, il est recommandé de
transfuser des CGR de groupe O RH négatif, ou des PFC de groupe AB négatif.
Demander des prélèvements pré transfusionnels pour réaliser les tests immuno-
hématologiques afin de réajuster la prescription des PSL.

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 09
ANS/DIS/MOP02/ DISTRIBUTION NOMINATIVE DES PSL
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE
6.5 Logigramme Prise en charge d’une prescription de PSL
QUI QUOI COMMENT

Réception d’une prescription de PSL et examens IH associés

Concordance entre prescription et examens IH associés

Prise en charge d’une prescription de PSL avec résultats IH

Laborantin de concordants
santé publique
(LSP). Identification conforme du demandeur/patient/PSL demandés ANS/DIS/MOP02/V02/
22 :
Distribution
Renseignements spécifiques obligatoires nominative des
PSL.
Responsable
Prescription de PSL conforme
de l’unité de
distribution
Vérification de la conformité Résultats IH :
Résultats de groupage et phénotypes valides/Résultats de RAI
valides/Résultats d’examens associés et enregistrés

Résultats IH conformes

Saisie manuelle ou informatique des données

Cohérence de prescription

Sélection de PSL en cohérence avec la prescription et avec les

résultats d’examens IH et l’historique du patient

PSL sélectionné contrôle de concordance conforme entre les

données de prescription de PSL les résultats d’examens IH et
l’historique du patient

Enregistrement des données du PSL

Délivrance autorisée

Edition de la FDN

Contrôle de cohérence

Contrôle de conditionnement

Remise du produit

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
DISTRIBUTION DES CONCENTRES DE
ANS/DIS/MOP03/
GLOBULES ROUGES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/DIS/MOP03
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus distribution des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : du 17/01 au 22/04/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA

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 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
DISTRIBUTION DES CONCENTRES DE
ANS/DIS/MOP03/
GLOBULES ROUGES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les modalités de distribution des CGR aux patients.
2. Domaine d’application
Unité de distribution.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS
- Bonnes pratiques transfusionnelles ANS.
- Le conseil transfusionnel : de la thérapeutique consensuelle aux alternatives
adaptées EFS/2016.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- FDN : Fiche de Distribution Nominative.
- IH : Immuno-Hématologie.
- LSP : Laborantin de Santé Publique.
- PON : Procédures Opératoires Normalisées
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- RAI : Recherche d’Agglutinines Irrégulières.
- STS : Structure de Transfusion Sanguine
5. Personnel concerné
- Responsable de l’unité de distribution (médecin ou pharmacien formés en
transfusion sanguine) ou responsable de la STS /chef de service
- Laborantin de santé publique (LSP).
6. Description de la procédure
6.1. Supports d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande de PSL (ANS/DIS/FIC01/V02/22).
- Fiche de distribution nominative (ANS/DIS/FIC04/V02/22).
- Fiche de mouvement du stock de PSL (ANS/DIS/FIC02/V02/22).
- Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).

30
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
DISTRIBUTION DES CONCENTRES DE
ANS/DIS/MOP03/
GLOBULES ROUGES
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Registre de distribution nominative (ANS/DIS/REG01/V02/22).

- Registre des commandes non satisfaites (ANS/DIS/REG03/V02/22).

6.2. Locaux
- Doivent se situer à proximité de la zone de stockage des PSL.
- Doivent disposer de moyens de communication rapides, adaptés à l’activité et à
l’urgence.
- Doivent répondre aux exigences du bon déroulement chronologique de l’opération,
de la réception de la commande jusqu'à la délivrance du PSL demandé.

6.3 Matériel : chapitre vide

6.4 Description de la distribution des CGR
6.4.1 Distribution du CGR : voir ANS/DIS/PRO01/V02/22 : Distribution des produits
sanguins labiles.
1. Réceptionner les documents nécessaires à la demande de CGR
2. Réceptionner le tube échantillon et vérifier la concordance du tube échantillon
avec la demande de PSL (identité).
3. Vérifier la conformité de la prescription de CGR
4. Vérifier la conformité des résultats d’examens IH

A. PRISE EN COMPTE D’UNE PRESCRIPTION DE CGR ET RESULTATS

D’EXAMENS IH CONCORDANTS :
Voir ‘’prise en compte d’une prescription de PSL et résultats d’examens d’immuno-
hématologie concordants’’ (ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution nominative des
PSL)
1. Saisie manuelle (registre) ou informatique des données
2. Sélection de CGR en cohérence avec la prescription
3. Tenir compte du protocole transfusionnel défini ou des critères cliniques ou
biologiques du patient
 Consulter la fiche de mouvement de stock de PSL
 Toute discordance entre la prescription et le protocole établi, toute
indisponibilité de PSL demandé, fait l’objet d’une concertation entre le service
de délivrance et le service de soins, les modifications de prescription initiale
notifiées par le service prescripteur, seront formellement validées par le responsable
de l’unité de distribution et tracées sur la prescription.

31
 4. Sélection des CGR en cohérence avec les résultats IH :
 La sélection des CGR est réalisée dans le respect de la sécurité
immunologique des groupes érythrocytaires
 RAI positive avec allo anticorps autre que le système RH –KEL1, délivrer
des CGR phénotypés RH-KEL1 et phénotypes étendus choisis selon la
spécificité de l’(des) Allo-Ac identifié(s) et compatibilisé(s)
 Si RAI négative, prescrire des CGR non phénotypés à l’exception des
patients de sexe féminin en âge de procréer ; patient polytransfusé, groupe
sanguin rare ou hémoglobinopathie, délivrer des CGR phénotypés
RH-KEL1 (si drépanocytaire, +compatibilisés)
 Vérifier les critères de sélection des CGR :
 Le choix du groupe ABO RH1 : CGR idéalement ABO-RH1 identiques,
éventuellement compatibles en limitant autant que possible l’utilisation de
groupe O Négatif
 Le choix du type de CGR : Quantité, qualification (Phénotype RH-KEL1
Phénotype étendu et compatibilisé et/ou transformation particulière des CGR :
Irradiation, Préparation pédiatrique, Réduction de volume et déplasmatisation
selon les indications et disponibilité)
 Date et heure de péremption du CGR : choisir les dates et heures de
péremption les plus proches (à l’exception des CGR nouveau-né), et tenir
compte du délai de transport
5. Sélection des CGR par le personnel habilité après contrôle de concordance
conforme entre les données de prescription des PSL, les résultats d’examens IH
et l’historique du patient (si disponible). En cas de discordance, bloquer la
sélection et contacter le service prescripteur
B. DELIVRANCE SECURISEE DES CGR : voir ‘’Délivrance sécurisée des PSL’’
(ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution nominative des PSL)
C. CONTROLE CONDITIONNEMENT ET REMISE DES CGR : voir ‘’contrôle
conditionnement et remise des PSL’’ (ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution
nominative des PSL)

32
6.5 Logigramme

QUI QUOI COMMENT

Réception de la demande de
Responsable STS/ LSP ANS/DIS/MOP02/V02/22
prescription et résultats IH

Vérification conformité de
prescription et résultats IH

Prise en compte d’une prescription de CGR et

résultats d’examens IH concordants

Saisie manuelle ou
informatique des données

Sélection de CGR en cohérence avec

la prescription et les résultats IH (RAI)

RAI (+) avec allo anticorps autre Vérifier les critères de RAI (-)
que le système RH –KEL1 sélection des CGR

Délivrer des CGR phénotypes RH- Prescrire des CGR non phénotypés à
KEL1 et phénotypes étendus l’exception des patients de sexe féminin en
choisis selon la spécificité de l’(des) âge de procréer ; patient polytransfusé,
Allo-Ac identifiés et compatibilisés groupe sanguin rare ou hémoglobinopathie,
délivrer des CGR phénotypés RH-KEL 1 (si
drépanocytaire, +compatibilisés)

Quantité, qualification
Choisir les dates et heures de
transformation particulière des
CGR selon les indications et péremption les plus proches (à
disponibilité l’exception des CGR nouveau-né), et
tenir compte du délai de transport
CGR idéalement ABO-RH1
identiques, ou compatibles

Contrôle de concordance
Bloquer la
Non conforme entre les données de
prescription/contacter prescription des PSL, les
service prescripteur résultats d’examens IH et
l’historique du patient

Oui

Délivrance sécurisée des CGR Contrôle

conditionnement et remise des CGR

33
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/DIS/MOP04/ DISTRIBUTION DE PLASMA FRAIS CONGELE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/DIS/MOP04
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

Version remplacée :
V01/17, processus distribution des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : du 17/01 au 22/04/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de
l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

35
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/DIS/MOP04/ DISTRIBUTION DE PLASMA FRAIS CONGELE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les modalités de distribution des PFC.
2. Domaine d’application
Unité de distribution.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles ANS.
- Le conseil transfusionnel : de la thérapeutique consensuelle aux alternatives adaptées
EFS/2016.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- FDN : Fiche de Distribution Nominative.
- IH : Immuno-Hématologie.
- LSP : Laborantin de Sante Publique.
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
5. Personnel Concerné
- Responsable de l’unité de distribution (médecin ou pharmacien formés en transfusion
sanguine).
- Laborantin de santé publique (LSP).
6. Description de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique
- Fiche de demande de PSL (ANS/DIS/FIC01/V02/22).
- Fiche de distribution nominative (ANS/DIS/FIC04/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche de mouvement du stock de PSL (ANS/DIS/FIC02/V02/22).
- Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de distribution nominative (ANS/DIS/REG01/V02/22).
- Registre des commandes non satisfaites (ANS/DIS/REG03/V02/22).

36
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/DIS/MOP04/ DISTRIBUTION DE PLASMA FRAIS CONGELE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.2. Locaux
- Doivent répondre aux normes d’hygiène et de sécurité selon la règlementation en vigueur.
- Doivent disposer d’une source d’alimentation électrique et d’une source d’eau.
- L’alimentation électrique doit être adaptée aux équipements avec installation d’un groupe
électrogène pour pallier aux coupures de courant électrique.
- La qualification des PSL doit se faire dans une zone réservée exclusivement à cette activité
pour éviter les erreurs et les confusions.
- Les locaux doivent être d’accès réservé uniquement au personnel autorisé.

6.3. Matériel : Chapitre vide

6.4 Description
6.4.1 DISTRIBUTION
1. Réceptionner les documents nécessaires à la demande de PFC.
2. Réceptionner le tube échantillon, et vérifier la concordance du tube échantillon avec la
demande de PSL (identité).
3. Vérifier la conformité de la prescription de PFC et celle des résultats d’examens IH.
A. PRISE EN COMPTE D’UNE PRESCRIPTION DE PFC ET RESULTATS D’EXAMENS IH
CONCORDANTS : voir ‘’prise en compte d’une prescription de PSL et résultats
d’examens d’immuno- hématologie concordants’’ (ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution
nominative des PSL)
1. Saisie manuelle (registre) ou informatique des données.
2. Sélection de PFC en cohérence avec la prescription
3. Tenir compte du protocole transfusionnel défini ou des critères cliniques ou biologiques
du patient
 Consulter la fiche de mouvement de stock de PSL
 Toute discordance entre la prescription et le protocole établi, toute indisponibilité de PSL
demandé, fait l’objet d’une concertation entre le service de délivrance et le service de
soins, les modifications de prescription initiale notifiées par le service prescripteur seront
formellement validées par le responsable de l’unité de distribution et tracées sur la
prescription.
4. Sélection des PFC en cohérence avec les résultats IH :
 Vérifier les critères de sélection des PFC :
 Critères d’identité ABO identiques : délivrer le plasma iso groupe ABO identiques sinon
compatibles (compatibilité plasmatique), dans l’urgence vitale les plasmas délivrés seront
systématiquement de groupe AB

37
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/DIS/MOP04/ DISTRIBUTION DE PLASMA FRAIS CONGELE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

 Critères de dates de péremption : pour une meilleure gestion de stock ; préférer les dates
de péremption les plus proches
 Décongélation : voir (ANS/DIS/MOP06/V02/22 : Décongélation du PFC)
 Sélection des PFC par le personnel habilité après contrôle de concordance conforme
entre les données de prescription des PSL, les résultats d’examens IH et l’historique du
patient (si disponible). En cas de discordance, bloquer la sélection et contacter le service
prescripteur
B. DELIVRANCE SECURISEE DES PFC : voir ‘’Délivrance sécurisée des PSL’’
(ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution nominative des PSL)

C. CONTROLE, CONDITIONNEMENT ET REMISE DES PFC : voir ‘’contrôle,

conditionnement et remise des PSL’’ (ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution nominative
des PSL)

38
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 05
ANS/DIS/MOP04/ DISTRIBUTION DE PLASMA FRAIS CONGELE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 Logigramme

Qui QUOI COMMENT

Réception de la demande de
prescription et résultats IH
Receveur

Vérification conformité de
Responsable ANS/DIS/PRO01/V02/22
prescription et résultats IH
Unité distribution/
LSP
Prise en compte d’une prescription de PFC et
résultats d’examens IH concordants

Saisie manuelle ou informatique

des données

Sélection de PFC en cohérence avec la

prescription et les résultats IH

Vérifier les critères de sélection

des PFC

Critères d’identité ABO respectés

Critères de dates de péremption

Décongeler le plasma en cas de distribution ANS/DIS/MOP06/ V02/22

nominative

Sélection de PFC et délivrance

sécurisée des PFC

Contrôle conditionnement et
remise des PFC

39
 AGENCE NATIONALE DU SANG Nombre
de
pages :
DISTRIBUTION DES CONCENTRES PLAQUETTAIRES
ANS/DIS/MOP05/ 05
D’APHERESE ET DES CONCENTRES DE PLAQUETTES
V02/22 STANDARDS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/DIS/MOP05
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité

transfusionnelle V01/17, processus distribution des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : du 17/01 au 22/04/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction Commission de l’Agence Nationale du Sang
et d’actualisation validation
Dr K.L OULD KABLIA

41
 AGENCE NATIONALE DU SANG Nombre
de
pages :
DISTRIBUTION DES CONCENTRES PLAQUETTAIRES
ANS/DIS/MOP05/ 05
D’APHERESE ET DES CONCENTRES DE PLAQUETTES
V02/22 STANDARDS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les modalités de distribution des CPA et CPS.
2. Domaine d’application
Unité de distribution.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine /ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles ANS.
- Le conseil transfusionnel : de la thérapeutique consensuelle aux alternatives
adaptées- EFS/2016.
- Manuel des procédures opératoires normalisées ANS/2017
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- CP : Concentré Plaquettaire
- CPA : Concentré Plaquettaire d’Aphérèse.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- FDN : Fiche de Distribution Nominative.
- HLA : Human Leucocyte Antigen (Antigènes leucocytaires)
- HPA : Human Platelet Antigen (Antigènes plaquettaires)
- IH : Immuno-Hématologie
- LSP : Laborantin de Sante Publique.
- PON : Procédures Opératoires Normalisées
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
- RAI : Recherche d’Agglutinines Irrégulières
- RH : Rhésus
5. Personnel Concerné
- Responsable de l’unité de distribution (médecin ou pharmacien formés en transfusion
sanguine).
- Laborantin de santé publique (LSP).
6. Description de la procédure :
6.1. Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique :
- Fiche de demande des PSL (ANS/DIS/FIC01/V02/22).
- Fiche de distribution nominative (ANS/DIS/FIC04/V02/22).
- Fiche de mouvement du stock de PSL (ANS/DIS/FIC02/V02/22).

42
 AGENCE NATIONALE DU SANG Nombre
de
pages :
DISTRIBUTION DES CONCENTRES PLAQUETTAIRES
ANS/DIS/MOP05/ 05
D’APHERESE ET DES CONCENTRES DE PLAQUETTES
V02/22 STANDARDS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

- Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22).

- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de distribution nominative (ANS/DIS/REG01/V02/22).
- Registre des commandes non satisfaites (ANS/DIS/REG03/V02/22).
6.2. Locaux
- Doivent se situer à proximité de la zone de stockage des PSL.
- Doivent disposer de moyens de communication rapides adaptés à l’activité et à
l’urgence.
- Doivent répondre aux exigences du bon déroulement chronologique de l’opération, de
la réception de la commande jusqu'à la délivrance du PSL demandé.
6.3. Matériel : Chapitre vide
6.4. Description
 Définir le degré d’urgence ou toute autre situation spécifique.
6.4.1 Distribution du CPA ou CPS : voir ANS/DIS/PRO01/V02/22 : Distribution des
PSL.
1. Réceptionner les documents nécessaires à la demande de CPA ou CPS
2. Réceptionner le tube échantillon, et vérifier la concordance du tube échantillon avec la
demande de PSL (identité).
3. Vérifier la conformité de la prescription des CPA ou CPS et les renseignements
spécifiques
4. Vérifier la conformité des résultats d’examens d’immunohématologie (IH)
A. PRISE EN COMPTE D’UNE PRESCRIPTION DE CPA OU CPS ET RESULTATS
D’EXAMENS D’IMMUNOHEMATOLOGIE CONCORDANTS : voir
(ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution nominative des PSL)
1. Saisie manuelle (registre) ou informatique des données
2. Sélection de CPA ou CPS en cohérence avec la prescription
3. Tenir compte du protocole transfusionnel défini ou des critères cliniques ou biologiques
du patient
 Consulter la fiche de mouvement de stock de PSL
 Toute discordance entre la prescription et le protocole établi, toute indisponibilité de PSL
demandé, fait l’objet d’une concertation entre le service de délivrance et le service de
soins, les modifications de prescription initiale notifiées par le service prescripteur seront

43
 AGENCE NATIONALE DU SANG Nombre
de
pages :
DISTRIBUTION DES CONCENTRES PLAQUETTAIRES
ANS/DIS/MOP05/ 05
D’APHERESE ET DES CONCENTRES DE PLAQUETTES
V02/22 STANDARDS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

formellement validées par le responsable de l’unité de distribution et tracées sur la

prescription.
4. Sélection des CPA ou CPS en cohérence avec les résultats IH :
 Identité ABO respectée, en cas de non disponibilité, des CP ABO incompatibles peuvent
être délivrés mais sans hémolysines
 En cas d’incompatibilité RH1 :
- Si receveur RH -1 (RH Négatif) de sexe féminin avec avenir obtétrical et sans
immunosupression profonde et transfusion de plaquettes Rhesus positif inévitable : la
prévention de l’immunisation anti RH1 par injection dans les 72h au moins de 100
microgramme d’anti D doit etre effectuée.
- Le choix du type de CPA ou CPS : la qualification (Phénotype HLA ou HPA) et la
compatibilisation et/ou transformation particulière (Irradiation, Réduction de volume et
déplasmatisation) selon les indications et la disponibilité
- Criteres de posologie :
Posologie habituelle : 0.5 à 0.7*1011 plaq/10kg de poids
Chez le nouveau-né : 0.1 à 0.2*1011plaq/kg de poids soit un volume de 15ml/kg
sans dépasser 20ml/kg
- La présence ou non d’hémolysines dans le produit (un CP contenant des anticorps à
titre élevé anti A et/ou anti B doit être mentionné sur l’étiquette et ne doit pas etre
transfusé à un patient porteur du ou des antigenes correspondants du système ABO).
- Date et heure de péremption du CPA ou CPS : choisir les dates et heures de
péremption les plus proches et tenir compte du délai de transport.
 Vérifier le résultat et la validité de la RAI (le délai habituel de validité de la RAI est de 3
jours (72 heures)). (voir ANS/QBIH/PRO05/V03/22 : Recherche des anticorps anti
érythrocytaires irrégulièrs RAI).
5. Sélection des CPA ou CPS par le personnel habilité après contrôle de concordance
conforme entre les données de prescription des PSL, les résultats d’examens IH et
l’historique du patient (si disponible). En cas de discordance, bloquer la sélection et
contacter le service prescripteur
B. DELIVRANCE SECURISEE DES CPA ou CPS : voir ‘’Délivrance sécurisée des PSL’’
(ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution nominative des PSL)
C. CONTROLE, CONDITIONNEMENT ET REMISE DES CPA ou CPS : voir ‘’contrôle
conditionnement et remise des PSL’’ (ANS/DIS/MOP02/V02/22 : Distribution
nominative des PSL)

44
 AGENCE NATIONALE DU SANG Nombre
de
pages :
DISTRIBUTION DES CONCENTRES PLAQUETTAIRES
ANS/DIS/MOP05/ 05
D’APHERESE ET DES CONCENTRES DE PLAQUETTES
V02/22 STANDARDS

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5. Logigramme
Qui Quoi Comment

Réception de la demande de
prescription et résultats IH
receveur

Vérification conformité de prescription

et résultats IH et renseignements
ANS/DIS/PRO01
spécifiques /V02/22
LSP
Prise en compte d’une prescription de
CPA et résultats d’examens IH
concordants

Saisie manuelle ou informatique des

données

Sélection de CPA ou CPS en

cohérence avec la prescription et les
résultats IH

ABO compatibles ou incompatibles sans Receveur RH-1 incompatibles femme

hémolysines et non contaminés par les en âge de procréer injection d’anti D Voir
globules rouges (si indisponible) ANS/QBIH/PRO06/
V03/22
Vérifier les critères de
sélection des CPA/ CPS

Choix du type de CPA ou CPS :

quantité, qualification et/ou
transformation particulière adaptée

Choisir les dates et heures de

11
péremption les plus proches, et
Posologie : 0.5 à 0.7*10 plaq/10kg de poids tenir compte du délai de transport
Chez nouveau né : 0.1à 0.2*1011plaq/kg de
poids soit un volume de 15ml/kg sans dépasser
20ml/kg

Contrôle de concordance conforme entre les

données de prescription des PSL, les résultats
d’examens IH et l’historique du patient (si
disponible)

Non
Oui
Délivrance sécurisée des CPA ou CPS
Contrôle conditionnement et remise des CPA
Bloquer la prescription/ ou CPS
contacter service prescripteur

45
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
DECONGELATION DU PLASMA FRAIS
ANS/DIS/MOP06/ CONGELE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/DIS/MOP06
Version-Document : V02/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Manuel procédures opératoires normalisées activité transfusionnelle

V01/17, processus distribution des PSL

Modification : Voir annexe des modifications

Agence Nationale du Sang

Distributeur :
Numéro d’identification de la copie : 0001

Actualisé Validé Approuvé

Date : du 17/01 au 22/04/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction et Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA

47
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
DECONGELATION DU PLASMA FRAIS
ANS/DIS/MOP06/ CONGELE
V02/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les modalités de décongélation du PFC pour préserver son intégrité et ses qualités
thérapeutiques.
2. Domaine d’application
Unité de Distribution.
[Link] de référence
- Textes réglementaires Transfusion Sanguine/ANS.
- Bonnes pratiques transfusionnelles ANS.
- Le conseil transfusionnel : de la thérapeutique consensuelle aux alternatives adaptées
EFS/2016.
4. Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- LSP : Laborantin de Sante Publique.
- MOP : Mode Opératoire
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PSL : Produits Sanguins Labiles.
5. Personnel Concerné
- Responsable de l’unité de distribution (médecin ou pharmacien formé en transfusion
sanguine).
- Laborantin de santé publique (LSP).
6. Description de la procédure
6.1. Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Fiche d’approvisionnement en PSL (ANS/DIS/FIC03/V02/22).
- Fiche de demande de PSL (ANS/DIS/FIC01/V02/22).
- Fiche de mouvement du stock de PSL (ANS/DIS/FIC02/V02/22)
- Fiche de distribution nominative (ANS/DIS/FIC04/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Fiche d’incident transfusionnel (ANS/DIS/FIC05/V02/22).
- Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Registre de retour des PSL (ANS/DIS/REG02/V02/22).
- Registre de distribution nominative (ANS/DIS/REG01/V02/22).
- Registre des commandes non satisfaites (ANS/DIS/REG03/V02/22).

48
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/DIS/MOP06/ DECONGELATION DU PLASMA FRAIS
V02/22 CONGELE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.2. Locaux
- Doivent se situer à proximité de la zone de stockage des PSL.
- Doivent disposer de moyens de communication rapides, adaptés à l’activité et à l’urgence.
- Le local de distribution doit répondre aux exigences du bon déroulement chronologique
de l’opération, de la réception de la commande jusqu'à la délivrance du PSL demandé.
6.3. Matériel
6.3.1. Equipements
- Conteneurs pour le transport des PSL avec enregistreurs de température.
- Congélateur pour le stockage des PFC.
- Appareil pour décongélation de plasma ou Bain Marie.
6.3.2. Consommables
- Papier absorbant ou gaze.
- Gants.
- Compresses.
- Emballages plastiques.
6.4. Description
 Réceptionner la fiche de demande de PSL. Voir (ANS/DIS/MOP04/V02/22)
 Vérifier le dossier du malade. Voir (ANS/DIS/MOP04/V02/22)
 Vérifier la fiche de stock :
 Si produit non disponible : remplir le registre des demandes non satisfaites.
 Si produit disponible procéder à sa décongélation :
Bain Marie
o Vérifier que le Bain Marie est propre avant toute utilisation.
o Allumer le Bain Marie et régler sa température à 37°C (+/- 2°C).
o Vérifier la stabilité de la température à 37°C pour assurer une décongélation à
cœur de plasma dans les vingt minutes qui suivent.
o 30 mn pour les PFC < 400 ml
o 40 mn pour les PFC entre 400 et 600 ml
o 50 mn pour les PFC > 600ml
o Déposer la poche de plasma dans le Bain Marie, en la mettant dans un emballage
plastique.
Décongelateur
o Allumer le décongelateur.
o Vérifier les paramètres programmés de décongélation.

49
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/DIS/MOP06/ DECONGELATION DU PLASMA FRAIS
V02/22 CONGELE

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

o Déposer les poches de plasma dans le décongélateur selon le mode d’emploi du

décongélateur.
 Apres décongélation du plasma
 Vérifier visuellement
 Si présence de défauts ou aspect de contenu suspects : Fuites, altération de la couleur
ou floculation…, écarter la poche, Mentionner sur le registre des PSL non conformes
(voir : ANS/PRE/REG03/V02/22) et enregistrer sur le registre d'incinération (voir :
ANS/PRE/REG05/V02/22).
 Si présence de glace : replacer la poche de plasma dans le décongélateur ou au bain-
marie jusqu’à décongélation complète.
 Essuyer la poche de plasma à l’aide de papier absorbant ou de gaze.
 Mentionner sur l’étiquette du Plasma frais décongelé (date et heure de la
décongélation) avec la mention :
Heure limite de transfusion de plasma thérapeutique (02 heures après l’heure de
décongélation)
 Placer les poches de Plasma frais décongelé dans les conteneurs adaptés.
 Suivre le MOP de distribution du PFC : ANS/DIS/MOP04/V02/22 : distribution de PFC

50
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/DIS/MOP07/ GESTION DE STOCK DES PSL
V01/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

Code-Document : ANS/DIS/MOP07
Version-Document : V01/22

Date effective : 03/07/2022

Valide :
Date d’expiration : 03/07/2027

Version remplacée : Première version

Modification : Aucune

Agence Nationale du Sang

Distributeur :

Numéro d’identification de la copie : 0001

Rédigé Validé Approuvé

Date : du 17/01 au 22/04/2022 Date : du 20 au 30/06/2022 Date : 03/07/2022

La Directrice Générale de
Commission de rédaction et Commission de validation l’Agence Nationale du Sang
d’actualisation
Dr K.L OULD KABLIA

51
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/DIS/MOP07/ GESTION DE STOCK DES PSL
V01/22

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

1. Objectif
Décrire les principes de gestion de stock des PSL d’une structure de transfusion sanguine.
2. Domaine d’application
- Unité de distribution.
- Unité de préparation.
3. Documents de référence
- Textes réglementaires, Transfusion Sanguine- ANS
- Bonnes pratiques transfusionnelles -ANS.
- Le conseil transfusionnel : de la thérapeutique consensuelle aux alternatives adaptées-
EFS/2016.
- Décision N° 252 du 31 aout 2021, fixant la convention type relative aux conditions et aux
modalités d’approvisionnement et de cession des produits sanguins labiles des
établissements de santé publics et privés.
4.Définitions et abréviations
- ANS : Agence Nationale du Sang
- CGR : Concentré de Globules Rouges.
- CPA : Concentré Plaquettaire d’Aphérèse.
- CPS : Concentré de Plaquettes Standard.
- LSP : Laborantin de Sante Publique.
- MCP : Mélange de Concentrés Plaquettaires
- PFC : Plasma Frais Congelé.
- PSL : Produit Sanguin Labile.
- STS : Structure de Transfusion Sanguine.
- Dépôt d’urgence : dépôt qui conserve seulement des CGR de groupe O et
éventuellement des plasmas AB distribués par la STS de référence et les délivre en
urgence vitale pour un patient hospitalisé dans le service de santé. Le nombre maximal de
PSL doit être précisé dans la convention.
- Dépôt de délivrance : dépôt qui conserve des PSL distribués par la STS de référence et
les délivre pour un patient hospitalisé dans l'établissement de santé.
[Link] Concerné
- Responsable de l’unité de distribution et de préparation : Médecin ou pharmacien formés
en transfusion sanguine.
- Laborantin de santé publique (LSP).
- Biologiste.

52
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/DIS/MOP07/
V01/22 GESTION DE STOCK DES PSL

DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

[Link] de la procédure
6.1 Support d’information : Renseigner sur support papier ou numérique.
- Conventions entre établissements de santé dotés de structures de transfusion sanguine
(ANS/DIS/FIC07/V01/22)
- Fiche d’approvisionnement en PSL (ANS/DIS/FIC03/V02/22).
- Fiche de mouvement du stock de PSL (ANS/DIS/FIC02/V02/22).
- Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22).
- Fiche d’anomalie (ANS/STS/FIC02/V02/22).
- Fiche de poste (ANS/STS/FIC04/V02/22).
- Fiche de vie des équipements (ANS/STS/FIC05/V02/22).
- Fiche de surveillance de la température des enceintes (ANS/STS/FIC03/V02/22).
- Registre des commandes non satisfaites (ANS/DIS/REG03/V02/22).
- Registre de distribution nominative (ANS/DIS/REG01/V02/22).
- Registre de retour des PSL (ANS/DIS/REG02/V02/22).
6.2 Locaux
- Les zones de distribution et de stockage doivent être clairement identifiées et
exclusivement réservées à ces activités et le cas échéant aux activités de transformation.
- Les locaux de distribution doivent répondre aux exigences du bon déroulement
chronologique de l’opération, de la réception de la commande jusqu'à la délivrance du
PSL demandé.
6.3 Matériel : Chapitre vide
6.4 Description
Voir logigramme

53
 AGENCE NATIONALE DU SANG
Nombre de
pages : 04
ANS/DIS/MOP07/ GESTION DE STOCK DES PSL
V01/22
DIRECTION NORMALISATION ET QUALITE

6.5 Logigramme
Qui Quoi Comment

Responsable Analyse des besoins

STS/ en PSL
Etiquetage et
Distribution

DEPOT 1 DEPOT DE 1 : Fonction de la

D’URGENCE DELIVRANCE consommation
(1/semaine ou
1/15j pour CGR)
Approvisionnement régulier
CGR Site de délivrance CGR et plasma
GROUPE O différents
Stock minimum et maximum
RH/-1,-2,- définis /ETS groupes
3,4,5 KEL-1 et sanguins ABO-
RH :1,2,-3,-4,5 RH1 et
KEL : -1 phénotype RH
KEL1
Surveillance régulière stock
CGR et Plasma/j et chaque /7j
Produits plaquettaires 1 fois/j
LSP REPRISE DES
et certains phénotypes RH KEL
PSL
Biologiste et groupe ABO RH1 rares /j
CONFORMES
OU NON

Seuils d’alerte : 10 jours SITUATION DE TENSION

pour les CGR et 6 DANS LES STOCKS
semaines pour les PFC

Informer le secteur
prélèvement ou préparation
Extraction /7j ou /j (spécificités)
PSL proches de la
date de péremption

Support de communication
Organiser des collectes de sang
pour les associations pour le
et/ou Convocation élective des
don de sang bénévole
donneurs de sang

REAJUSTEMENT DE
STOCK DE PSL DANS LE
DEPÖT

54
 ANNEXE
SUPPORTS D’INFORMATION

PROCESSUS DISTRIBUTION DES PRODUITS

SANGUINS LABILES

55
 FICHE DE DEMANDE DE PRODUITS SANGUINS LABILES
UR
UV UVI
(30min) (sans délai) (2 à 3h)
Date de la demande Degrés
d’urgence
Nom et prénom du malade : Age : Sexe :

Service : Lit : Matricule : Dossier n° :

Groupe Rhésus :
Phénotype :
sanguin : (En toutes lettres)

Diagnostic :

Date de la dernière
Polytransfusé : NON OUI
transfusion :

Date de la dernière RAI Résultat :

Date prévue de la transfusion : Nombre de grossesses antérieures :

Réactions transfusionnelles antérieures : NON OUI Type :

PSL DEMANDES QUANTITES QUALIFICATIONS TRANSFORMATIONS

CGR Phénotype Lavé

PFC CMV négatif Déleucocyté

CPS Compatibilisé Déplasmatisé

1
CPA Autres Autres

Autres

Nom du médecin prescripteur TEL Signature Cachet

Joindre à la demande : - Carte de groupage sanguin2

- Echantillon de sang du malade pour test de compatibilité

NB : - Remplir complètement la fiche

1- Joindre une FNS obligatoire et poids du malade.
2- Cette demande doit être obligatoirement accompagnée de la carte de groupage valide du
patient avec double détermination ou une seule détermination et un échantillon sanguin
du receveur.

ANS/DIS/FIC01/V02/22 57
 ANS/DIS/FIC02/V02/22

FICHE DE MOUVEMENT DU STOCK DE PSL

INTERVALLE HORAIRE
De ……Hr à ……Hr

TECHNICIEN
Nombre Disponible Nombre distribué
DATE
Groupe CGR CGR
CGR CGR CGR CGR
Sanguin CGR DEL- PFC CPS CPA OBS CGR DEL- PFC CPS CPA OBS
DEL Phé DEL Phé
Phé Phé
58

O+
O-
A+
A-
B+
B-
AB+
AB-
 FICHE D’APPROVISIONNEMENT EN CGR
ETABLISSEMENT DISTRIBUTEUR ETABLISSEMENT DEMANDEUR

Référence :

GS
RHESUS Type PSL Nombre Numéro Observation
ABO
A CGR
CGR DEL
Positif
CGR-Phé
CGR
CGR DEL
Négatif
CGR-Phé
B CGR
CGR DEL
Positif
CGR-Phé
CGR
CGR DEL
Négatif
CGR-Phé
CGR
CGR DEL
Positif
CGR-Phé
AB CGR
CGR DEL
Négatif
CGR-Phé
CGR
CGR DEL
Positif
CGR-Phé
O CGR
CGR DEL
Négatif
CGR-Phé

Demandeur Transporteur Distributeur

Nom de la structure Nom de la structure
Adresse et tél Date : …. Adresse et tél
Date : …. Heure : ………. Date : ….
Heure : ………. Nom et signature : ………… Heure : ……….
Nom et signature : ………… Nom et signature : …………

Remarques Remarques Remarques

Urgence : livraison immédiate des produits

ANS/DIS/FIC03/V02/22 59
 FICHE D’APPROVISIONNEMENT EN CP
ETABLISSEMENT DISTRIBUTEUR ETABLISSEMENT DEMANDEUR

Référence :

GS ABO Type PSL Nombre Les numéros Observation

CPS
O+
CPA
CPS
A+
CPA
CPS
B+
CPA
CPS
AB+
CPA
CPS
O-
CPA
CPS
A-
CPA
CPS
B-
CPA

CPS
AB-
CPA

Demandeur Transporteur Distributeur

Nom de la structure : Nom de la structure :
Date : ….
Adresse et tél : Adresse et tél :
Heure : ……….
Date : …. Date : ….
Nom et signature : …………
Heure : ………. Heure : ……….
Nom et signature : ………… Nom et signature : …………

Remarques Remarques Remarques

Urgence : livraison immédiate des produits

ANS/DIS/FIC03/V02/22 60
 FICHE D’APPROVISIONNEMENT EN PFC
ETABLISSEMENT DISTRIBUTEUR ETABLISSEMENT DEMANDEUR

Référence :

Type
GS ABO Nombre Les numéros Observation
PSL
PFC
O+
Cryo
PFC
A+
Cryo
PFC
B+
Cryo
PFC
AB+
Cryo

PFC
O-
Cryo

PFC
A- Cryo

PFC
B-
Cryo
PFC
AB- Cryo

Demandeur Transporteur Distributeur

Nom de la structure Nom de la structure

Date : ….
Adresse et tél Adresse et tél
Heure : ……….
Date : …. Date : ….
Nom et signature : …………
Heure : ………. Heure : ……….
Nom et signature : ………… Nom et signature : …………

Remarques Remarques Remarques

Urgence : livraison immédiate des produits

ANS/DIS/FIC03/V02/22 61
 FICHE DE DISTRIBUTION NOMINATIVE FDN (RECTO)

ETABLISSEMENT DE TRANSFUSION SANGUINE

N° de prescription : ----------------------------Date et heure du dépôt du dossier ----------------------------

Distribué le-------------------à------------------

Destinataire : Structure-----------------------------------Service : ----------------------------------------------------

M/Prescripteur : Nom du Médecin--------------------------------------------------------------------------------------

Receveur Nom : -----------------------------------Prénom : -------------------------------Age : --------------------------

Nom de jeune fille : ------------------------sexe : -----------------date de Naissance-----------------

Groupe Sanguin du Receveur

ABO/RH 1ère Détermination----------------------le------------------------------------------------------------------

2ème Détermination----------------------le------------------------------------------------------------------

Phénotype RH KEL----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Dernière RAI le Résultats :

N° de prescription :

Produits distribués DDP Quantité Qualification/Transforma N° de la poche

tion
CGR

Produits distribués DDP Quantité Qualification N° de la poche

CPS

Produits distribués DDP Quantité Qualification N° de la poche

PFC

Produits distribués DDP Quantité Qualification N° de la poche

CPA

Signature ou cachet de l’établissement

UNITE DE DISTRIBUTION

ANS/DIS/FIC04/V02/22 63
 FICHE DE DISTRIBUTION NOMINATIVE FDN (VERSO)
PARTIE A REMPLIR PAR LE SERVICE PRESCRIPTEUR/TRANSFUSEUR
Confirmation de l’Identité du Receveur

ETABLISSEMENT---------------------------SERVICE DEMANDEUR ----------------- DATE ----------------------------------

TRANSPORT ET RECEPTION PSL----------------------------------

DATE----------------------------------HEURE DE RECEPTION----------------------------------

RECEPTION CONFORME NON CONFORME(Préciser)

Receveur/Nom : --------------------------------------------Prénom : ----------------------------------------------------------------------------------------

Nom de jeune fille : --------------------------------------sexe : ------------------------------date de Naissance : -------------------------

Contrôle ultime au lit du malade (CUM) (contrôle ABO) RESULTATS Valide non valide (préciser)

PSL Transfusés

N° de prescription :

Produits RESULTATS/ Cross match au lit du malade

N° de la poche DDP
distribués Conforme / non conforme

CGR

Produits distribués DDP Quantité Qualification N° de la poche

CPS

Produits distribués DDP Quantité Qualification N° de la poche

PFC

Produits distribués DDP Quantité Qualification N° de la poche

CPA

Nom et prénom du médecin transfuseur

Nom : ---------------------------------------------- Prénom : -------------------------------------------------TEL/Mail--------------------------------------

Date : ------------------------------------- Heure de l’acte transfusionnel : -------------------------------------------------

SIGNATURE DU MEDECIN TRANSFUSEUR

NB / En cas de non administration des PSL distribués, ceux-ci doivent être retournés (registre
de retour de PSL) à l’établissement de transfusion sanguine délivreur.

ANS/DIS/FIC04/V02/22 64
 FICHE D’INCIDENT TRANSFUSIONNEL

Hôpital : …………………………………… Service : …………………………… N° du dossier :

Structure ayant délivré le produit : …………………………………………….

Patient :
Nom :…………………………………………………………… Prénom : ………………………………………………
Date de naissance : / / Sexe : Masculin Féminin

Antécédents :
Grossesse Oui Non Inconnu
Antécédents obstétricaux Oui Non Inconnu
Antécédent transfusionnel Oui Non Inconnu
Antécédent chirurgical Oui Non Inconnu
Antécédent allergique Oui Non Inconnu
Antécédent d’incident transfusionnel Oui Non Inconnu
Ac anti-érythrocytaires préexistants Oui Non Inconnu

Diagnostic :

Incident transfusionnel :

Date et heure de transfusion : Date et heure de déclaration :

Date et heure de survenu :
Manifestations cliniques et biologiques :

Gravité de l’incident transfusionnel :

0 1 2 3 4

0 : sans manifestation clinique et /ou biologique

1 : absence de menace vitale ou à long terme
2 : morbidité à long terme
3 : menace vitale immédiate
4 : décès
Produits sanguins labiles incriminés :

CGR Groupage ABO-RH1 N° de la poche

PFC Groupage ABO-RH1 N° de la poche

CP Groupage ABO-RH1 N° de la poche

Date : __/__/____

Signature du médecin :

Joindre copie de FDN (verso) renseignée (obligatoire)

ANS/DIS/FIC05/V02/22 65
 FICHE DE PROGRAMME HEBDOMADAIRE DE COMMANDE
DES PSL

Programme de la semaine du ..…/..…/20…. au.…/…../20….

Date
Type de
Nom/prénom Service prévue
PSL Quantité Qualification(s) Transformation(s)
du patient demandeur de la
demandé(s)
transfusion

NB : Ces commandes sont préétablies par le service demandeur (service de soins médicaux
ou chirurgicaux) et préalablement transmis à la structure de transfusion sanguine.

ANS/DIS/FIC06/V01/22
66
 FORMULAIRE DE LA CONVENTION TYPE ENTRE LES
ETABLISSEMENTS PUBLICS DE SANTE FOURNISSEURS
DE PSL ET LES ETABLISSEMENTS PUBLICS OU PRIVES
DE SANTE DEMANDEURS

CONVENTION TYPE

Entre l’Établissement Public de Santé……………………………………..…………

fournisseur de Produits Sanguins Labiles, sis …………………………………………
N° téléphone :…………………………………………………………………………
Email :…………………………………………………………………………………
représenté par ….............................................................................................................

Ci-après dénommé Etablissement de Santé fournisseur d’une part,

Et l’Etablissement……………………………… ……………………………………
demandeur de Produits Sanguins Labiles, sis …………………………………………
N° téléphone : ……………………………………………………………………….
Email : ……………………………………………………………………………….
représenté par …………………………………………………………..……..............

Ci-après dénommé Etablissement de Santé demandeur d’autre part

Il a été convenu et arrêté ce qui suit :

ANS/DIS/FIC07/V01/22 67
OBJET DE LA CONVENTION

Article 1er : La présente convention a pour objet de fixer les conditions et les modalités
d'approvisionnement et de cession des produits sanguins labiles aux établissements de
santé.

OBLIGATIONS DE L'ETABLISSEMENT DE SANTE DEMANDEUR DE PRODUITS

SANGUINS LABILES.

Art. 2 : La commande périodique des produits sanguins labiles pour l’approvisionnement des
structures de transfusion sanguine, dont les modalités sont fixées en commun accord, est
adressée à l’établissement fournisseur.

Art. 3 : La commande nominative de produits sanguins labiles et celle à titre exceptionnel en

cas d’urgence, doit être adressée à l’établissement fournisseur, accompagnée d’un dossier
conforme comportant les documents suivants :
- Le formulaire de demande de produits sanguins labiles renseigné, conforme aux
exigences réglementaires. ;
- Une double détermination valide du groupage sanguin du malade, ou à défaut un
prélèvement sanguin du receveur permettant ainsi d’effectuer un deuxième
groupage à la charge de l’établissement demandeur.
- En cas d’une demande de concentrés érythrocytaires compatibilisés, un tube
échantillon du receveur doit être transmis à la structure de transfusion sanguine afin
de pratiquer un test de compatibilité au laboratoire ;
- La fiche navette, le billet d'hospitalisation ou tout document administratif relatif à
l’hospitalisation du receveur.

Art. 4 : L'établissement de Santé demandeur s'engage à orienter les donneurs de sang

volontaires vers la structure de transfusion sanguine de l’établissement de santé fournisseur.

Art. 5 : L’établissement de santé demandeur s'engage à assurer sous sa responsabilité,

l’acheminement des produits sanguins labiles fournis en respectant les conditions de
conservation et de transport.
Le conteneur isotherme utilisé pour le transport sera exclusivement destiné aux produits
sanguins labiles remis.
Les produits sanguins labiles sont remis à un représentant médical ou paramédical ou
personne habilitée de l’établissement demandeur muni d’un badge de service.

Art. 6 : Dans le cadre de la traçabilité, les produits sanguins labiles non transfusés doivent
être retournés à l’établissement fournisseur pour incinération. L’établissement demandeur
n’est pas autorisé à redistribuer les produits sanguins labiles du fournisseur à d’autres
établissements de santé.

ANS/DIS/FIC07/V01/22 68
OBLIGATIONS DE L'ETABLISSEMENT DE SANTE FOURNISSEUR DE PRODUITS
SANGUINS LABILES.

Art. 7 : L’établissement de santé fournisseur atteste que les produits sanguins labiles
délivrés sont prélevés, qualifiés, préparés, conservés et distribués conformément à la
réglementation en vigueur.

Art. 8 : L’établissement de santé fournisseur de produits sanguins labiles s'engage à

répondre aux commandes des produits sanguins labiles dans la limite de leur disponibilité.

Art. 9 : Selon le cas, l’établissement fournisseur remet une fiche de distribution nominative
ou une fiche d’approvisionnement à l’établissement demandeur accompagnant les produits
sanguins labiles distribués. L’établissement fournisseur doit assurer la traçabilité avec
l’établissement demandeur des produits sanguins labiles distribués.

TARIF DE CESSION

Art. 10 : Les tarifs de cession fixés par voie réglementaire doivent être respectés par les
deux parties sans aucun profit ou majoration.

Art. 11 : En dehors des produits sanguins labiles, les modalités de règlement des examens
de biologie transfusionnelle associés peuvent être définies en commun accord.

MODALITES DE PAIEMENT

Art. 12 : Après réception de la facture établie par l’établissement de santé fournisseur, le

paiement est effectué par l’établissement de santé demandeur, et conformément à la
réglementation en vigueur.

DUREE DE LA CONVENTION

Art. 13 : La présente convention est établie pour une durée d'une année et prend effet à
compter de la date de sa signature par les deux contractants. Elle est renouvelable
annuellement.

REGLEMENT DES LITIGES

Art. 14 : Lorsque la situation l'exige, les deux parties conviennent de se rencontrer en vue de
s'entendre à l'amiable et toute modification fera l’objet d’un avenant.

Art. 15 : Les deux parties se reconnaissent le droit de résilier la présente convention

moyennant un préavis de trois (03) mois après dénonciation, dûment notifiée par lettre
recommandée avec accusé de réception.

ANS/DIS/FIC07/V01/22 69
 CLAUSES FINALES

Art. 16 : La présente convention est établie en six (06) exemplaires, cotés et paraphés par
l’établissement fournisseur dont les destinataires sont :
- Trois (03) pour l’établissement fournisseur :
 Direction Générale de l’établissement.
 Structure de Transfusion Sanguine.
 Direction des Finances et de la Comptabilité.
- Un (01) pour l’établissement demandeur.
- Un (01) pour la Direction de la Santé et de la Population.
- Un (01) pour l’Agence Nationale du Sang.

Art. 17 : L’utilisateur affirme avoir reçu et pris connaissance des dispositions de l’arrêté du
24 Mai 1998 relatif aux conditions de distribution du sang et de ses dérivés labiles et de
l’arrêté du 24 Mai 1998 relatif à la prévention et aux mesures à prendre en cas d’accident
transfusionnel immunologique ou septique.

Fait à................................., le.............................................

Lu et approuvé Lu et approuvé Lu et approuvé

Signature du responsable Signature du responsable Signature du responsable
de la structure de transfusion de l’établissement fournisseur de l’établissement demandeur
sanguine

ANS/DIS/FIC07/V01/22 70
 Structure de Transfusion Sanguine :
FICHE D’ANOMALIE
……………………………….………

Unité :

Date de déclaration
de l’anomalie

Nom et prénoms

Localisation

Description de
l’anomalie constatée

Mesures prises

Signature

Date

Mesures Correctives
Et
Mesures préventives

Nom et signature du responsable Nom et signature du responsable

de l’unité de la structure

ANS/STS/FIC02/V02/22 71
 FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES
ANS/STS/FIC03/V02/22

Équipement de conservation : T° (01) : afficheur Semaine du.../....../...au.../...../.......

………………………………….. T° (02) : thermomètre à l’intérieur de l’équipement de stockage

T° T° Après T° T°
Jour Matin EMARG EMARG OBSERVATION
(01) (02) Midi (01) (02)
7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
DIM
11 :00 h 17 :00 h
13 :00 h 19 :00 h
7 :00 h
15 :00 h
73

9 : 00 h
LUN 11 :00 h 17 :00 h
13 :00 h 19 :00 h
7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
MAR 11 :00 h 17 :00 h
13 :00 h 19 :00 h
7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
MER
11 :00 h 17 :00 h
13 :00 h 19 :00 h
 FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES
ANS/STS/FIC03/V02/22

T° T° Après T° T°
Jour Matin EMARG EMARG OBSERVATION
(01) (02) Midi (01) (02)
7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
JEU
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

7 :00 h
15 :00 h
VEN 9 : 00 h
74

11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h

7 :00 h
15 :00 h
9 : 00 h
SAM
11 :00 h 17 :00 h

13 :00 h 19 :00 h
 ANS/STS/FIC03/V02/22 FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES

Équipement de conservation : T° (01) : afficheur Semaine du.../....../...au.../...../.......

……………………………….. T° (02) : thermomètre à l’intérieur de l’équipement de stockage

T° T°
Nuit EMARG Observations
(01) (02)
20 :00 h
22: 00 h

DIM 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
75

22: 00 h

LUN 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h

MAR 00 :00 h
02:00 h

04 :00 h
 FICHE DE SURVEILLANCE DE LA TEMPERATURE DES ENCEINTES
ANS/STS/FIC03/V02/22

20 :00 h
22: 00 h
MER 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h
JEU 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
76

20 :00 h
22: 00 h
VEN 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
20 :00 h
22: 00 h

SAM 00 :00 h
02:00 h
04 :00 h
 FICHE DE POSTE Code : …/…/….
Structure de transfusion sanguine : Version : 02
Unité : Date de validation :

A - Définition
………………………. est chargé de …………………………....

B - Activités

1 - Activités principales
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 ……………………………….
 Inventaire annuel

2 - Activités secondaires

 Participation à l’application de la démarche qualité du service.

C - Liaisons

1 - Relations avec responsables hiérarchiques

 Chef de service……………….
 ………………….
 …………………….

2 - Relations transversales
 Techniciens
 Les personnels des autres services

3 - Relations subordonnées
 …………………..

D - Actions Préventives
En cas de risque sur la qualité du résultat de l’activité ou sur le personnel citer
les conduites à tenir pour y remédier

E - Délégation des tâches

………………. peut déléguer ses tâches :
 ………………………..
F - Compétences et qualifications requises
Diplôme de …………………..

G - Contraintes particulières d’exercice (Fonctions de binôme, astreintes, horaires

décalés, déplacements, etc.)

ANS/STS/FIC04/V02/22 77
 Structure de Transfusion Sanguine :
FICHE DE VIE DES EQUIPEMENTS
………………………………………………

Référence : ………………. Indice : ……… Date de mise en service : ………………

Désignation N° de la fiche

Etendu de mesure
Instruction d’utilisation et de
maintenance préventive
Périodicité d’étalonnage

Incertitude Instruction de vérification

N° de la fiche : N° chronologique de la fiche.

INTERVENTION
PROCHAINE NOM &
DATE NATURE RESULTATS
DATE PRENOM

ANS/STS/FIC05/V02/22 78
 Structure de Transfusion sanguine
………………………………
FICHE DE TRANSPORT DE PSL*

En double exemplaire
(A conserver par l’expéditeur et le destinataire)

Expéditeur Destinataire

Nom de la structure : Nom de la structure :

Nom du site :
Adresse :
Adresse et tél :

Référence de la fiche d’approvisionnement :

Enlèvement Livraison

Date : Date :

Heure : Heure :

Nom du personnel expéditeur : Nom du personnel destinataire :

Signature : Signature :

Nom du transporteur et signature : Nom du transporteur et signature :

Référence de la fiche d’approvisionnement :

Incidents au cours du transport :

*obligatoire entre établissements conventionnés

ANS/STS/FIC06/V02/22 79
ANS/DIS/REG01/V02/22

REGİSTRE DE DİSTRİBUTİON NOMINATIVE

Structure: ....................................

DONNEES RECEVEUR
NOM DU PSL DEMANDE
HEURE SERVICE
DATE MEDECIN
N° D’ORDRE RECEPTION GR SANG/ DEMANDEUR
NOM ET PHEN PRESCRIP
COMMANDE
PRENOM
ère ème
1 2 GR SANG/
TYPE NBRE
DET DET PHEN
80

PSL DISTRIBUE
Test de NOM
HEURE NOM ET SIGNATURE
compatibilité ET N° BADGE
DISTRI DISTRIBUTEUR
(EDCL) PORTEUR
QUAL/
GRPE TRANSFORMATIONS
DATE
TYPE SANG/ NBRE N° DE LA POCHE
PEREMP
PHEN
 REGİSTRE DE RETOUR DES PSL

Structure: ....................................

PSL
DATE ET
LA
N° GR HEURE DU
DATE PROVENANCE MOTIF
D’ORDRE TYPE
SANG
N° RETOUR

ANS/DIS/REG02/V02/22 81
 REGİSTRE DES COMMANDES NON SATISFAITES

PSL NOMBRE DE
PSL
DATE DE LA DEMANDES
DEMANDE TYPE GROUPE NON SERVICE DEMANDEUR
SANGUIN SATİSFAİTS

ANS/DIS/REG03/V02/22 82
Annexe des modifications du processus distribution
des produits sanguins labiles

Liste des procédures, modes opératoires et fiches modifiées :

 Procédure N°01 : distribution des produits sanguins labiles
 MOP N°02 : distribution nominative des PSL
 MOP N°03 : distribution des concentrés de globules rouges
 MOP N°04 : distribution de plasma frais congelé
 MOP N°05 : distribution des CPA et des CPS
 Fiche d’incident transfusionnel (ANS/DIS/FIC05/V02/22)
 Fiche de distribution nominative (ANS/DIS/FIC04/V02/22)
 Fiche de transport de PSL (ANS/STS/FIC06/V02/22)

Liste des Procédures, modes opératoires et fiches ajoutées :

 MOP N°02 (distribution nominative des PSL) : Nouveau logigramme

 MOP N°07 : Gestion de stock des PSL

 Fiche N°06 : Fiche de programme hebdomadaire de commande de

PSL

 Fiche N°07 : Formulaire de la convention type entre les

établissements publics de santé fournisseurs de produits sanguins
labiles et les établissements demandeurs

83