BIOLABO

www.biolabo.fr PHOSPHATASE ALCALINE ( D E A )

FABRICANT : Réactif pour le dosage quantitatif de l’activité Phosphatase Alcaline
BIOLABO SAS, [ EC 3.1.3.1 ] dans le sérum et le plasma humains
Les Hautes Rives REF 92214 R1 8 x 30 mL R2 8 x 30 mL
02160, Maizy, France
REF 92314 R1 10 x 100 mL R2 10 x 100 mL

IVD
|
SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
Tel : (33) 03 23 25 15 50
Fax : (33) 03 23 256 256 Made In France
[email protected] I : correspond aux modifications significatives
Dernière révision : www.biolabo.fr

USAGE PREVU PRECAUTIONS

Ce réactif est réservé pour un usage professionnel en laboratoire · Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur
(méthode manuelle ou automatisée). www.biolabo.fr
Il permet de quantifier l’activité globale de l’enzyme phosphatase · Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
alcaline dans le sérum et le plasma humains. · Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
· Traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme
GENERALITES (1) potentiellement infectieux. Respecter la législation en vigueur.
Les phosphatases alcalines (PAL) sont présentes dans de nombreux I Tout incident grave survenu en lien avec le dispositif fait l'objet d'une
tissus, dont les os, le foie, les intestins, les reins et le placenta. La notification au fabricant et à l'autorité compétente de l'État membre
détermination des PAL dans le sérum présente un intérêt pour le dans lequel l'utilisateur et/ou le patient est établi.
diagnostic des maladies hépatobiliaires (hépatite, cirrhose ou cancer)
ou de maladies osseuses associées à une augmentation de l’activité PREPARATION DES REACTIFS
ostéoblastique (rachitisme chez l’enfant par carence en vit. D, maladie Utiliser un objet non coupant pour enlever la capsule.
de Paget, hyperparathyroïdie à implication osseuse, carcinome Verser sans délai le contenu du flacon R2 dans le flacon R1.
métastasique).
Mélanger doucement jusqu’à dissolution.
PRINCIPE (1) (4) (5)
Méthode optimisée basée sur les recommandations de la DGKC STABILITE ET CONSERVATION
(Société allemande de chimie clinique, 1972) et de la SCE (Société Stockés à l’abri de la lumière, dans le flacon d’origine bien
scandinave de chimie clinique). bouché à 2-8°C, les réactifs sont stables, s’ils sont utilisés et
En milieu alcalin, les phosphatases alcalines catalysent l’hydrolyse du conservés dans les conditions préconisées :
Avant ouverture :
p-nitro phényl phosphate en p-nitrophénol et phosphate.
· Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret.
La vitesse d'apparition du p-nitrophénol, proportionnelle à l'activité PAL
est mesurée à 405 nm. Après ouverture :
· Reconstituer le réactif R2 immédiatement après ouverture
· Le réactif R1 est stable au moins 6 mois.
REACTIFS
Après reconstitution :
R1 PHOSPHATASE ALCALIN Tampon
· Transférer la quantité utile et stocker le flacon d’origine à 2-8°C.
Tampon D.E.A. (Diéthanolamine) pH 10 (25°C) 1 mol/L · Le réactif de travail est stable au moins 30 jours
Chlorure de Magnésium 0,5 mmol/L · Rejeter tout réactif trouble ou si le blanc réactif à 405 nm > 0,800.
Conservateur · Ne pas utiliser le réactif de travail après la date de péremption.
Danger Eye Dam.1 : H318 – Provoque des lésions oculaires graves
P280 : Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (2)
équipement de protection des yeux/du visage, P305+P351+P338 : EN CAS DE
CONTACT AVEC LES YEUX: Rincer avec précaution à l'eau pendant plusieurs Sérum non hémolysé ou plasma hépariné, immédiatement réfrigérés.
minutes. Enlever les lentilles de contact si la victime en porte et si elles peuvent L’activité PAL est stable dans le spécimen :
être facilement enlevées. Continuer à rincer , P310 : Appeler immédiatement un · 2 à 3 jours à 2-8°C.
CENTRE ANTIPOISON ou un médecin. Substance à l’origine de la classification
: Diéthanolamine 2,5 - < 10%. Pour plus de détails, consulter la Fiche de
· 1 mois à –25°C.
données de Sécurité (FDS)

R2 PHOSPHATASE ALCALIN Substrat LIMITES (3)

p-nitro phényl phosphate 10 mmol/L Ne pas utiliser de sérum hémolysé.
Young D.S. a publié une liste des substances interférant avec le
Ce réactif n’est pas classé comme dangereux selon le règlement dosage.
1272/2008/CE
Après reconstitution : Réactif de travail classé comme R1.
REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES
1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales.
2. Spectrophotomètre ou Automate de biochimie.

IVD H2O

Fabricant Date de péremption In vitro diagnostic Température de conservation Eau déminéralisée Risque biologique

REF LOT ®
Référence Produit Consulter la notice Numéro de lot Stocker à l’abri de la lumière Suffisant pour Diluer avec

ALP_DT_200a_IFU_92214-92314_FR_V01_20190904
CONTRÔLE DE QUALITE CALIBRATION
· REF 95010 EXATROL-N Taux I · REF 95015 Multicalibrator traçable sur Masterlot interne.
· REF 95011 EXATROL-P Taux II La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants : et des conditions de conservation du réactif.
· Au moins un contrôle par série
· Au moins un contrôle par 24 heures PROCEDURE
· Changement de flacon de réactif Méthode manuelle
· Après opérations de maintenance sur l’analyseur Ramener les réactifs et échantillons à température ambiante.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de
confiance, appliquer les actions suivantes : Introduire dans une cuve thermostatée (37°C) de 1 cm de trajet optique :
1. Préparer un sérum de contrôle frais et répéter le test.
Réactif 1000 µL
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un flacon de
calibrant frais. Calibrant/Contrôle ou Spécimen 10 µL
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, répéter le test en
utilisant un autre flacon de réactif. Mélanger. Après 1 minute, lire l'absorbance à 405 nm puis toutes les minutes
Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service pendant 3 minutes.
technique BIOLABO ou le revendeur local Calculer la moyenne des variations d’absorbance par minute (DAbs/min.).

INTERVALLES DE REFERENCE (2) Remarques

1. Les performances en technique manuelle devront être établies par
UI/L à 37°C Homme Femme l’utilisateur.
20-29 ans 100-320 70-260 2. Les applications Kenza et d’autres propositions d’applications sont
disponibles sur demande.
30-39 ans 90-320 70-260
40-49 ans 100-360 80-290 CALCUL
50-59 ans 110-390 110-380
Avec multicalibrateur sérique :
60-69 ans 120-450 110-380
Activité PAL = (∆Abs/min) Dosage x Concentration du Calibrant
> 69 ans 120-460 90-430
(∆Abs/min) Calibrant
Chez l’enfant, les valeurs sont augmentées (jusqu’à 3 fois pendant la
puberté). Avec facteur théorique :
Exemple de valeurs données à titre indicatif : 245-768 UI/L à 37°C
Activité (U/L) = ΔAbs/min x Facteur
Il est recommandé à chaque laboratoire de définir ses propres
intervalles de référence pour la population concernée.
VR x 1000
Facteur = ———————
PERFORMANCES à 37°C sur KENZA 240TX 18.35 x VE x P
Où:
Se référer à l’application validée de l’analyseur Kenza utilisé VR = Volume réactionnel total en mL
Domaine de mesure : entre 50 et 1500 UI/L VE = Volume Echantillon en mL
18.35 = Coefficient d’extinction molaire du PNPP à 405 nm
Limite de détection : environ 35 UI/L P = Trajet optique en cm.
Précision : Exemple, en technique manuelle,
Intra-série Taux Taux Taux Inter-série Taux Taux Taux (1 cm de trajet optique, à 37°C, 405 nm):
N = 20 bas normal haut N = 20 bas normal haut
UI/L = (DAbs/min) x 5450
Moyenne Moyenne
UI/L
41 172 404 UI/L
49 171 399
UI/L
S.D. UI/L 1,0 1,9 4,5 S.D.UI/L 2,3 5,2 15,5 µkat/L =
C.V. % 2,3 1,1 1,1 C.V. % 4,6 3,1 3,9 60

Comparaison avec réactif du commerce :

REFERENCES
Etude réalisée sur sérums humains (n=67) entre 53 et 459 UI/L (1) TIETZ N.W. Textbook of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R.
y = 0,9811 x + 2,5 r = 0,9964 Ashwood, W.B. Saunders (1999) p. 676-684 et p.1429-1431.
(2) Clinical Guide to Laboratory Test, 4th Ed., N.W. TIETZ (2006) p. 80-83
Sensibilité analytique : approx. 0,012 abs/mn pour 10 UI/L (3) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995)
P.3-26 à 3-35
Interférences : (4) Scandinavian Journal of clinical and laboratory investigation (1974), vol.33,
Turbidité p.291-306
Pas d’interférence jusqu’à 0.291 abs
(5) Recommendations of the German Society for Clin. Chemistry Z .Klin.
Acide ascorbique Pas d’interférence jusqu’à 25 g/L Chem. Klin. Biochem. (1972), 10, p.290-291
Bilirubine totale Interférence négative à partir de 390 µmol/L
Bilirubine directe Pas d’interférence jusqu’à 373 µmol/L
Hémoglobine Interférence négative à partir de 152 µmol/L
Glucose Pas d’interférence jusqu’à 10,88 g/L
D’autres substances sont susceptibles d’interférer (voir § Limites)
Stabilité à bords : 13 jours
Fréquence de calibration : 5 jours
Effectuer une nouvelle calibration en cas de changement de lot de
réactif, si les résultats des contrôles sont hors de l’intervalle établi, et
après opération de maintenance.

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