Master-1 (chimie analytique)
2021/2022
TP1 : Dosage de l’acide ascorbique dans un produit pharmaceutique
(Comprimés de vitamine C, jus d’orange)
L’acide L-ascorbique ou vitamine C, est un composé organique hydrosoluble, très répandu dans le monde
vivant. Il est présent naturellement dans de très nombreux aliments, en particulier dans les produits frais,
légumes verts et fruits. La vitamine C est une substance essentielle pour l’Homme, qui ne peut pas être
synthétisée par l’organisme et qui doit donc être apportée par l’alimentation.
Une carence prolongée en vitamine C dans le corps humain provoque beaucoup de maladies : le scorbut,
la maladie de foie, les réactions allergiques, l'artériosclérose, etc. En effet, la vitamine C intervient dans
diverses réactions d'oxydo-réduction cellulaires en jouant un rôle antioxydant largement reconnu pour
renforcer les fonctions immunitaires en neutralisant les radicaux libres à l’échelle cellulaire.
L'acide ascorbique a pour formule brute C6H8O6 :
Objectif du TP
1- Dosage de l’acide ascorbique dans un produit pharmaceutique (Comprimés de vitamine C), ou alimentaire
(jus d’orange) afin de vérifier son pourcentage inscrit sur l’étiquette de ce produit
Plusieurs méthodes peuvent être utilisées pour doser l'acide ascorbique : titrimétrie (dosage acido-
basique, dosage oxydo-réduction), voltamétrie, potentiométrie, fluorométrie, spectrophotométrie,
chromatographie gazeuse, HPLC
I/ Protocole du dosage par titrage.
1- Dosage acido-basique
Ce type de dosage consiste à neutraliser l’acide ascorbique (vitamine C) par une solution titrante
de NaOH en présence d’un indicateur coloré approprie.
Couple acide base (C6H8O6(aq)/ C6H7O6-(aq))
2- Dosage oxydo-réduction (dosage en retour)
L’acide ascorbique est mis en présence d’un excès de solution de diiode avec lequel il réagit, l’excès
de diiode est ensuite dosé par une solution de thiosulfate de sodium (Na2S2O3).
Les couples d’oxydo-réductions mis en jeu au cours des réactions de titrages sont :
(C6H6O6(aq)/ C6H8O6(aq)), (I2(aq)/I-(aq)) et (S4O62-(aq) / S2O32-(aq))
II/ Méthode Spectrophotométrique
L'acide ascorbique a des spectres d'absorption UV caractéristiques et ses maximums varient selon pH :
Dans un milieu fortement acide HCl 0,01N, l’absorption maximale est observée pour une longueur
d’onde (λ = 245 nm)
Dans un milieu neutre, pH = 6,4 (λ = 265 nm).
Mode opératoire
1- Préparation d’une solution mère de l’acide ascorbique de concentration massique Cm = 10 mg/L
(solvant : HCL 0.01N)
2- A partir de la solution-mère de l’acide ascorbique, on prépare une série de solutions filles de
concentrations différentes (S1 à S9) voir le tableau ci-dessous.
solution S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9
Concentration massique (mg/l) 0.1 0.25 0.5 1 2 3 4 5 7
Volume Vm de la solution mère à
prélever
3- Régler préalablement le spectrophotomètre à la longueur d’onde de 245 nm et régler le « zéro »
avec une cuve contenant du solvant (HCl 0.01N).
4- protéger les solutions déjà préparées d’une lumière vive et mesurer par le spectrophotomètre
l’absorbance A de chaque solution-fille ainsi que celle du comprimé vitamine C
5- Tracer la courbe d’étalonnage A = f (Cf).
6- Déduire la concentration massique de l’acide ascorbique dans le produit pharmaceutique
Questions
1- Rédigez un petit protocole expérimental permettant de doser l’acide ascorbique par les deux
méthodes : dosage acido-basique et le dosage oxydo-réduction.
2- Expliquer pourquoi on a choisi une longueur d’onde λ dans le domaine de l’ultra-violet pour
établir la droite d’étalonnage de l’acide ascorbique.
