Université Mohamed Khider de Biskra
Matière: Microbiologie Générale
Chapitre 2 :
LA CELLULE BACTÉRIENNE
-LES COMPOSANTS OBLIGATOIRES
8. Paroi Bactérienne
Année universitaire 2020/2021
Pr MOUSSI Abdelhamid
8. Paroi
• Enveloppe caractéristique des procaryotes
• Présente chez toutes les espèces bactériennes
Sauf les mycoplasmes.
• Entoure la bactérie : exosquelette
• Constitue la structure constante la plus externe.
Selon la composition et la structure on peut distingué deux
types de paroi :
1) les parois épaisses et denses (Gram positif)
2) les parois minceset lâches (Gram positif)
Composition chimique
Les éléments de la paroi :
1) Osamines
2) Acides aminés
3) Acides technoïques
4) Oses
5) lipides
1. Osamines (sucres aminés)
1. N-acétylglucosamine : NAG
CH2OH
O
O
O
N C=O
CH3 CH2OH
2. N-acétylmuranique : NAM O
N C = O
O CH3
3. Parfois, on trouve du galactosamine. H3C CH COOH
2. Acides aminés
Quatre acides aminés courants :
1. D-Alanine,
2. L-Alanine
3. Acide D-glutamique
4. L-Lysine
Ou
Acide diamino-pimélique (structure analogue à la
lysine mais possède une fonction -COOH sur le dernier carbone).
3. Acides techoïques
Uniquement chez les bactéries Gram+
Ils sont inclus dans le peptidoglycane par le carbone N ° 6 de la NAM.
4. Oses
Ils sont nombreux à être mis évidence : Glucose, Galactose,
Mannose, Fucose, etc.
5. Lipides
Ils sont en faible quantité et quasiment absents chez les bactéries
à Gram +
Comparaison de la composition chimique globale de la
paroi chez les bactéries Gram+ et les bactéries
Gram-
Éléments de la paroi Gram + Gram –
1. Osamines ++ +
2. Acides aminés 24 – 35 % 50 %
Nombre 4 à 10 16 à 17
Acide diamino-pimélique +++ Exclut la lysine – N’exclut pas la Lysine
3. Acides teichoïques +++ –
4. Oses 20-60 % 20-60 %
5. Lipides 1-2.5 % 10 – 22 %
Structure
Paroi Gram positive
acide téichoique
acide lipotéichoique
Muréine
15 à 80 nm
Membrane plasmique
Cytoplase
• Épaisse
• Ne laisse pas passer l'éthanol
Peptidoglycane
Muréine, mucocomplexe ou mucopeptide
Est constitué:
1. Partie glucidique : alternance de NAG et de NAM reliés par
des liaisons β 1-4 glucosidiques.
CH2OH CH2OH
O O
O NAG O NAM O
N C=O N C = O
CH3 O CH3
H3C CH COO
liaison β 1-4 glucosidique
L-Ala
n
2. partie peptidique : 4 acides aminés qui sont
D-Glu
reliés par une liaison amidique au niveau de L-lys ou acide diaminopimélique
la fonction acide carboxylique du résidu D-Ala
pyruvate du NAM. Vers L-Lys (pont peptidique)
• Le peptidoglycane est formé par de longues chaines répétitives
montrant une alternance NAG-NAM
• Les macromolécules ainsi formées sont réunies au niveau des
tétrapeptides pour former une structure solide
Bactéries Gram négatives
Paroi
6 à 15 nm stratifiée
Membrane plasmique
Cytoplasme
• Plus fine
• Présente une structure stratifiée plus complexe.
• Comprend trois structures polymériques:
1. Peptidoglycane
2. Couche phospholipidique : « membrane externe » (ce qui
explique que l'alcool, liposoluble, passe à travers ce type de
paroi)
3. Lipopolysaccharide (LPS) représentant l'antigène O des
entérobactéries ainsi que leur toxine.
Lipopolysaccharides
Sont des complexes macromoléculaires
LPS : trois parties
(3)
1) lipide A : c’est un glycophosphlipide, et la
partie la plus stable;
2) Partie centrale ou core : elle est commune (2)
à toutes les bactéries Gram - ;
3) Partie périphérique : appelée antigène O (1)
Coloration de Gram
• La coloration de Gram a été mise au point par un médecin
danois (Christian Gram) en 1884.
• Objectifs: double intérêt
1) Morphologie (forme, taille, groupement...) ;
2) le type de paroi.
• Technique
Il existe de nombreuses variantes
On choisi : « Technique des minutes » :
I. Préparation d’un frottis
II. Traitement de la préparation
Etat des bactéries à
Étapes mode opératoire Qu'est ce qui ce passe ?
cette étape
Le violet de gentiane colore
Coloration au violet Recouvrir la lame de Toutes les bactéries sont
les bactéries qu'elles soient
de Gentiane violet de gentiane colorées en violet
Gram + ou Gram -
Laisser agir 1 minute
Le lugol et le violet de
Recouvrir la lame de gentiane forment un Toutes les bactéries sont
Mordançage au lugol
lugol complexe qui renforce la colorées en violet
coloration
Laisser agir 20 secondes puis renouveler le mordançage 2 fois
La paroi des bactéries à
Gram + ne laisse pas
Incliner la lame puis
passer l'éthanol qui ne peut
laisser couler de Les bactéries à Gram +
dissoudre le violet de
Essai de décoloration l'éthanol (95 °GL) restent colorées en violet.
gentiane.
par l'éthanol durant 4 secondes. Les bactéries à Gram - ne
La paroi des bactéries à
Attention : cette étape sont plus colorées.
Gram - laisse passer l'alcool
est délicate !
qui dissout le violet de
gentiane.
Rincer à l'eau distillé
Recouvrir la lame de Les bactéries à Gram +
Recoloration à la d'eau et ajouter La fuchsine colore alors les restent colorées en violet.
fuschine quelques gouttes de bactéries non colorées Les bactéries à Gram -
fuschine de Zeihl sont colorées en rose.
Laisser agir 30 secondes à 1 minute puis rincer à l'eau distillé .
Coloration de Gram
Gram+ Gram+
1. Fixation
2. Violet de Gentiane
3. Lugol
4. Ethanol
5. Fuschine
Action du lysozyme
Expérience 1
Eau distillée
+Lysosome
dégrade la paroi
Bactérie G+ Protoplaste Eclatement
Expérience 2
+Lysosome Survie limité en présence de saccharose
+Saccharose (milieu
Bactérie G+ isotonique) Protoplaste
Expérience 3
+Lysosome
+Saccharose Peut survivre et reconstituer sa parois
+EDTA
Bactérie G- Protoplaste + petits REVERSION
bouts de parois
= Spheroplaste
Protoplaste: Cellule bactérienne libérée de sa paroi mucopolysaccharidique
Spheroplastes: Protoplaste isolé des cellules bactériennes Gram-
Fonction
Contre les chocs osmotiques
Responsable de l'intégrité structurale et de la forme
des bactéries
Élément essentiel de l’identification.
L'origine de la formation du septum de vision cellulaire
des bactéries
Rôle significatif dans la répartition du matériel
génétique aux deux cellules filles.
