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BIOLOGIE DE LA REPRODUCTION Spermogramme

Le spermogramme :
un outil de choix dans l’exploration
de l’infertilité masculine et du couple
F. BOITRELLE1,2, P. CLEMENT3

résumé
Le spermogramme est l’examen de première intention dans le bilan de l’homme infertile. Soumis à des variabilités
pour un même individu, le spermogramme est difficile à interpréter et nécessite d’être répété en cas d’anomalie. De
plus, depuis une dizaine d’années, les valeurs de référence des différents paramètres spermatiques ne cessent d’être
revues à la baisse. Ces normes offrent un cadre d’interprétation pour chacun des paramètres étudiés, mais il faut intégrer
l’ensemble de ces paramètres pour interpréter un spermogramme et, le cas échéant, proposer des examens complé-
mentaires.

mots-clés : spermogramme, infertilité masculine, spermocytogramme.

I. - INTRODUCTION II. - LE SPERME ET LES CONDITIONS

PRÉANALYTIQUES DU SPERMOGRAMME
L’Assistance Médicale à la Procréation (AMP) est une
discipline médicale qui tente de diagnostiquer et de remé- Le sperme est un mélange de sécrétions qui est consti-
dier à l’infertilité des couples, en utilisant dans certains cas tué de liquide séminal, de spermatozoïdes et de cellules
des spermatozoïdes physiologiquement non fécondants. rondes issues de la lignée germinale ou sanguine. BIOLOGIE DE LA REPRODUCTION Spermogramme
L’Organisation mondiale de la santé (OMS) définit l’in-
Le spermogramme analyse ces différents constituants.
fertilité d’un couple dont la femme est en âge de procréer
C’est un examen non automatisé soumis à une variabilité
(18-45 ans) comme « l’incapacité à concevoir ou à obtenir
inter-opérateurs. L’accréditation des laboratoires doit nous
une grossesse au-delà d’un délai de 12 mois de rapports
permettre de réduire cette variabilité au maximum. Pour
sexuels réguliers non protégés » (1).
conduire à une standardisation du spermogramme, l’OMS
a édité dès 1980, un manuel de laboratoire pour l’analyse
À travers le monde, l’infertilité toucherait des dizaines
du sperme humain. Aujourd’hui, en 2014, le spermo-
de millions de personnes, soit 10 à 15 % des couples (2-
gramme et le spermocytogramme sont des techniques
4). Depuis plusieurs années, la part de l’homme dans les
rigoureusement encadrées par la cinquième édition de ce
infertilités du couple est en augmentation, et on estime
aujourd’hui qu’un facteur causal masculin (identifié ou
non) est impliqué dans la moitié des cas (2, 5-6). Pour éva- 1 Service d’Histologie Embryologie, Biologie de la Repro-
luer la fertilité et l’infertilité masculines, le spermogramme duction et Cytogénétique, Centre Hospitalier Intercom-
s’avère être un très bon examen de base permettant de munal de Poissy Saint-Germain-en-Laye, 78300 Poissy.
poser des diagnostics (en cas d’azoospermie par exemple), 2 EA 2493, Université de Versailles, Saint-Quentin- en-Yvelines,

mais aussi d’orienter le prescripteur vers des examens 78000 Versailles.

3 Laboratoire Clément, 93150 Le Blanc-Mesnil.
complémentaires.

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Tableau - Les seuils de normalité des différents paramètres spermatiques et les pathologies spermatiques qui y sont associées. D’après (7).

Paramètres Normes OMS 2009 Valeurs anormales Pathologies

0 ml Aspermie
Volume ≥ 1,5 ml et < 6 ml < 1,5 ml Hypospermie
> 6 ml Hyperspermie

pH 7,2 – 7,4 Acide, basique

Viscosité Liquéfaction en 30 min Augmentée, diminuée

> 200 millions/ml

< 15 millions/ml Polyzoospermie
< 5 millions/ml Oligozoospermie
≥ 15 millions/ml < 1 million/ml Oligozoospermie sévère
≥ 39 millions par éjaculat
Numération spermatique
Absence de spermatozoïde Oligozoospermie extrême
à l’examen direct, présence Cryptozoospermie
après centrifugation Azoospermie
Absence de spermatozoïde
≥ 40 % de a+b+c a+b+c < 40 % et/ou
≥ 32 % de a+b
Mobilité à 1 heure Asthénozoospermie
a+b < 32 %
Vitalité ≥ 58 % < 58 % Nécrozoospermie
Leucocytes < 1 million leucocytes/ml ≥ 1 million/ml Leucospermie
Agglutinats Absence Présence
Formes typiques >4% <4% Tératozoospermie
Autres Absence de sang Présence de sang Hémospermie

Mobilité : a = spermatozoïdes « progressifs rapides » ; b = spermatozoïdes « progressifs lents » ; c = spermatozoïdes « mobiles sur place ».

manuel (7), qui définit les moyens d’étude des paramètres la notion d’une maladie intercurrente, d’un épisode de
spermatiques, les modes de réalisation, les résultats atten- fièvre récent, ou encore par exemple, de la prise d’un trai-
dus et les normes, ainsi que les coefficients de variations tement antibiotique récent. Le prélèvement à domicile
attendus pour chaque technique (Tableau). De plus, les doit rester exceptionnel, non seulement parce qu’un délai
exigences imposées par l’accréditation et la norme NF EN d’acheminement trop long au laboratoire peut perturber
ISO 15189 devraient conduire la grande majorité des la- la mobilité spermatique, mais surtout parce que si une
boratoires à améliorer la standardisation des résultats ren- prise en charge en AMP est envisagée, le prélèvement
dus lors du spermogramme. devra impérativement être effectué par masturbation au
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laboratoire, pour des raisons légales. Un délai d’abstinence

Il est important de rappeler que les paramètres sperma-
sexuelle compris entre 2 et 8 jours doit être respecté. En
tiques sont variables pour un même individu d’un prélè-
deçà de 2 jours, le volume de l’éjaculat et la numération
vement à l’autre. Ainsi, un spermogramme anormal doit
spermatique peuvent être diminués et au-delà de 8 jours,
être répété à distance du premier examen. Un intervalle
les spermatozoïdes piégés dans l’épididyme meurent, ou
de trois mois, correspondant à un cycle complet de sper-
présentent des altérations de leur mobilité et de leur
matogenèse, permettra alors de confirmer ou d’infirmer
morphologie, notamment flagellaire, compromettant leur
les anomalies retrouvées.
aptitude à féconder. La date de naissance du patient, et
De plus, pour pouvoir réaliser et interpréter un sper- donc son âge, sont aussi à prendre en compte, le volume
mogramme, les conditions préanalytiques doivent être de l’éjaculat comme le nombre total de spermatozoïdes
maîtrisées. Le patient doit avoir un délai d’abstinence éjaculés tendant à diminuer avec l’âge.
sexuelle compris entre 2 à 8 jours, et le recueil doit être
Après le recueil de tous ces éléments à l’interrogatoire,
effectué au laboratoire. Les paramètres spermatiques sont
le patient pourra effectuer son prélèvement. Au labora-
en effet soumis à de nombreux facteurs de variation pour
toire, après vidange de la vessie, le patient se lave les mains,
un individu donné, dont certains sont incontournables
fait une toilette intime avec une solution antiseptique et
pour l’interprétation des résultats. Ainsi, l’interrogatoire
rinçage soigneux à l’eau, puis effectue le recueil par
notera l’âge, le délai d’abstinence sexuelle et recherchera
masturbation, dans un réceptacle évasé.

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Spermogramme

III. - LE SPERMOGRAMME : clinique et paraclinique comprenant des dosages hormo-

UN EXAMEN DE BASE naux, des examens d’imagerie uro-génitale et une biochimie
séminale (dont les résultats peuvent conduire à recher-
Le spermogramme comprend différentes analyses détail- cher des mutations du gène CFTR devant une agénésie
lées ci-dessous. des canaux déférents). Si on suspecte une IGAM, un
interrogatoire minutieux, la recherche d’une leuco-
A) Évaluation du volume de l’éjaculat, de la viscosité spermie associée et la réalisation d’une spermoculture et
et du pH d’une échographie des voies uro-génitales, seront alors
1) Le volume de l’éjaculat utiles au diagnostic.
Dans la demi-heure suivant le recueil, le volume de L’hyperspermie, définie par un volume de l’éjaculat
l’éjaculat est calculé à partir de son poids (7), en admet- supérieur à 6 ml, peut être liée à la réalisation d’un double
tant que la densité du sperme est en moyenne de éjaculat par le patient, et il faut donc bien interroger le
1 g/ml, même si elle peut varier de 1,043 à 1,102 g/ml patient avant et parfois après le recueil. Tout comme
(pour revue (7)). Certains laboratoires continuent d’éva- l’hypospermie, elle peut aussi être signe d’une inflamma-
luer ce volume à la pipette graduée, mais cette méthodo- tion ou d’une infection des glandes annexes. Enfin, elle
logie sous-estimerait le volume par perte de 0,3 à 0,9 ml peut également être idiopathique.
dans la pipette d’aspiration (pour revue (7)). Ainsi, avec
l’accréditation, de nombreux laboratoires opteront peu à 2) La viscosité
peu pour une mesure calculée du volume de l’éjaculat à La viscosité du sperme s’évalue par observation de
partir de la mesure de son poids. l’écoulement du sperme d’une pipette (« soumise à la gra-
De la mesure de l’éjaculat peuvent découler plusieurs vité »). Elle est dite augmentée si le sperme ne se liquéfie
situations pathologiques. pas dans la demi-heure suivant le recueil, si le sperme n’est
pas « aspirable » dans la pipette ou s’écoule par goutte de
L’absence d’éjaculat, ou aspermie, peut correspondre à : plus de 2 cm de long (7). Cette hyperviscosité est à noter,
• une anéjaculation sans sensation orgasmique ; car elle peut gêner la correcte évaluation de la concentra-
• une éjaculation rétrograde totale avec sensation orgas- tion et de la mobilité des spermatozoïdes.
mique.
3) Le pH
Devant des antécédents évocateurs d’éjaculation rétro-
grade totale (diabète, prise médicamenteuse, atteinte Le pH du sperme est mesuré après liquéfaction, à l’aide
neurologique, antécédents de chirurgie urétrale...), une de bandelettes pH (6-10). Un pH acide orientera vers un
recherche de spermatozoïdes dans les urines après leur défaut du fonctionnement des vésicules séminales (défaut
alcalinisation, s’impose. L’alcalinisation des urines peut se de fructose), alors qu’un pH basique orientera plutôt vers
réaliser en demandant au patient de boire deux litres une insuffisance prostatique ou une infection.
d’eau alcaline (eau de Vichy) la veille du prélèvement (ou
B) Évaluation de la mobilité spermatique
au moins dans les 2 heures précédant le prélèvement).
et de la présence d’agglutinats
L’hypospermie, définie par un volume de l’éjaculat
La mobilité spermatique doit être évaluée après liqué-
inférieur à 1,5 ml, peut s’expliquer par :
faction et idéalement dans l’heure suivant l’éjaculation.
• une perte de recueil dont il faut préciser le moment ; Elle est évaluée par l’observation microscopique d’une
• un délai d’abstinence trop court ; goutte de 10 ml de sperme entre lame et lamelle, soit à tem-
• une éjaculation rétrograde partielle ; pérature ambiante, soit à 37 °C au grossissement x200 ou BIOLOGIE DE LA REPRODUCTION Spermogramme
• un hypogonadisme ; x400.
• une agénésie unilatérale ou bilatérale partielle ou totale Les spermatozoïdes peuvent avoir une mobilité progres-
des canaux déférents, des anomalies de sécrétion des sive (spermatozoïdes « progressifs rapides » (de type a)
glandes annexes ou des voies génitales masculines ; et « progressifs lents » (de type b)), une mobilité non
• une inflammation ou une infection des glandes annexes progressive (spermatozoïdes « mobiles sur place » (de type
masculines (IGAM), notamment des vésicules séminales c)), ou être immobiles (de type d). Notons que la dernière
et de la prostate. version du manuel de l’OMS regroupe les mobilités de
type a et b.
Notons qu’un recueil incomplet risque de poser
problème dans l’interprétation des résultats, puisque les Parce que la lecture de la mobilité est opérateur-dépen-
spermatozoïdes sont principalement concentrés dans les dant, des systèmes de lecture automatisée (système CASA,
premières fractions de l’éjaculat avec les secrétions prosta- pour Computer Aided Sperm Analysis) se sont développés. Ils
tiques. permettent de voir des anomalies du mouvement non
visibles à l’œil et une standardisation de la lecture, mais
Si elle se répète, l’hypospermie doit conduire à réaliser ces systèmes sont pris en défaut si des débris cellulaires
des examens complémentaires. Dans le cadre d’une hypo- sont présents dans le sperme ou si la numération sperma-
spermie associée à une azoospermie, sera prescrit un bilan tique est trop faible ou trop élevée.

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L’asthénospermie est définie par une mobilité totale spermatozoïdes/éjaculat). Si la concentration sperma-
inférieure à 40 % et une mobilité progressive inférieure à tique est inférieure à ces seuils, on parle d’oligospermie.
32 %. L’asthénospermie secondaire est une asthénospermie La cryptozoospermie se définit comme la présence de
ne survenant qu’à la 4ème heure suivant le recueil, cet spermatozoïdes « cachés » (observation de quelques sper-
élément rappelant qu’un spermatozoïde n’est physiologi- matozoïdes uniquement après centrifugation du sperme).
quement pas censé survivre dans le liquide séminal. L’aki- L’azoospermie est l’absence de spermatozoïdes à l’examen
nétospermie est l’absence totale de mobilité spermatique. direct du sperme et après centrifugation. Ces anomalies de
nombre doivent être confirmées sur d’autres recueils et
Les différentes causes d’asthénospermie sont les
nécessiteront un bilan clinique et paraclinique complet,
suivantes :
pour essayer d’en comprendre l’origine. Le bilan compor-
• observation trop tardive du sperme (recueil à domicile) tera en particulier un bilan hormonal, la recherche de
ou sur une lame froide ; microdélétions du chromosome Y et un bilan génétique
• délai d’abstinence trop long ; pré-ICSI (IntraCytoplasmic Sperm Injection) (caryotype,
• viscosité spermatique augmentée ; consultation génétique) si on envisage une ICSI et, a
• présence de germes (spermoculture positive) ; fortiori, une biopsie testiculaire.
• présence d’agglutinats (rechercher la présence d’anticorps Dans le même temps, les cellules rondes sont dénom-
anti-spermatozoïdes par le MAR-test (Mixed Antiglobulin brées. Le test à la peroxydase identifie les polynucléaires
Reaction - test)) ; neutrophiles (cellules brunes peroxydase-positives). Une
• nécrospermie (un spermatozoïde mort ne bouge pas !) ; concentration en polynucléaires neutrophiles supérieure
• dyskinésie flagellaire. à 1 x 106/ml définit la leucospermie, nécessitant la réalisa-
Dans tous les cas, l’asthénospermie doit être corrélée à tion d’une spermoculture. Si les cellules observées sont
la vitalité spermatique. L’évaluation de la vitalité sperma- peroxydase-négatives, il peut s’agir de cellules germinales
tique présente d’autant plus d’intérêt que la mobilité est qui seront identifiées lors du spermocytogramme. Si la
altérée ; en effet, un spermatozoïde mobile est obligatoi- concentration en cellules germinales est supérieure à
rement vivant, il faut alors déterminer si les spermato- 10 % de la concentration en spermatozoïdes, cela oriente
zoïdes immobiles le sont. vers un trouble de la spermatogenèse.

Enfin, l’examen microscopique peut aussi mentionner D) Évaluation de la vitalité spermatique

la présence d’agrégats ou d’agglutinats. Il s’agit là de deux
phénomènes bien distincts. L’agrégation concerne un La lecture d’un frottis de sperme coloré à l’éosine-
grand nombre de spermatozoïdes qui sont immobiles et nigrosine évalue la vitalité spermatique. Seuls les sperma-
qui s’agrègent « naturellement » entre eux, sur des débris tozoïdes morts se laisseront pénétrer par l’éosine et seront
cellulaires ou des cellules épithéliales. L’agglutination colorés en rose. D’après le manuel de l’OMS (2), si moins
consiste elle, en l’accrochage de quelques spermatozoïdes de 58 % de spermatozoïdes sont vivants, on parle de
mobiles les uns aux autres, entre 3 et 50, soit par le flagelle, nécrospermie, dont les causes sont les suivantes :
soit par la tête. Le compte rendu doit préciser leur • un problème de recueil (contamination du sperme dans
fréquence, leur taille, ainsi que leur mode d’accrochage. le réceptacle par la solution antiseptique) ;
À l’inverse de l’agrégation, l’agglutination, si elle est confir- • un délai d’abstinence trop long ;
mée (présence d’anticorps anti-spermatozoïdes au MAR-test • une infection des glandes annexes masculines ;
et au test aux immunobilles) a une valeur pathologique, • une immunisation (anticorps anti-spermatozoïdes cyto-
la première conséquence étant l’incapacité des spermato- toxiques).
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zoïdes, même de ceux qui sont libres du phénomène

d’agglutination, à traverser la glaire cervicale et donc à Cette nécrospermie est parfois associée à une polykys-
remonter dans le tractus génital après un rapport sexuel. tose rénale, sans qu’on ne connaisse aujourd’hui le subs-
tratum physiopathologique de cette association.
C) Évaluation de la concentration spermatique
et de la concentration en cellules rondes E) Évaluation de la morphologie spermatique

Après fixation et sédimentation de quelques microlitres Complétant le spermogramme de base, le spermocyto-

de sperme dans un hémacytomètre (cellule de Neubauer gramme consiste en une évaluation de la morphologie des
modifiée, ou cellule de Malassez par exemple), les sper- spermatozoïdes fixés et colorés avec la coloration de
matozoïdes sont dénombrés et une extrapolation permet Schorr ou de Papanicolaou.
de déterminer la concentration spermatique. Le spermiologiste doit la définition d’un spermatozoïde
La polyzoospermie (concentration supérieure à 200 x normal en microscopie optique aux équipes de David
106 spermatozoïdes/ml) n’a que peu de valeur patholo- (1975), puis de Kruger (1986), qui sont les pères des deux
gique, mais incite à rechercher des signes d’infection. classifications utilisées aujourd’hui pour l’évaluation de la
tératozoospermie.
Les seuils inférieurs de normalité ont été revus à la
baisse en 2010 (15 x 106 spermatozoïdes/ml et 39 x 106 La classification de David a été modifiée en 2000 (8) et
demeure aujourd’hui un outil diagnostique clé de l’infer-

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Spermogramme

tilité masculine, puisqu’elle per-

met de définir la tératozoo-
spermie, c’est-à-dire d’évaluer le
pourcentage de spermatozoïdes
typiques et atypiques d’un
sperme et de décrire le type et le
nombre d’anomalies portées par
chaque spermatozoïde (index
d’anomalies multiples ou IAM).
La classification de David modi-
fiée évalue les anomalies de la
tête, de la pièce intermédiaire et
du flagelle.
Sont ainsi décrites :
– 7 anomalies de la tête : allon-
gée, amincie, microcéphale,
macrocéphale, multiple, ano-
malie de la région acroso-
mique, anomalies de la base ;
Fig. - Exemples de morphologies spermatiques (spermocytogramme).
– 3 anomalies de la pièce inter-
médiaire : reste cytoplasmique,
pièce intermédiaire grêle, pièce est souvent posé sur l’association d’un terrain particulier
intermédiaire angulée ; (origine du patient, notion de consanguinité), de signes
– 5 anomalies du flagelle (ou pièce principale) : absent, cliniques respiratoires (allergies mal étiquetées, dyspnée
écourté, de calibre irrégulier, enroulé et multiple. dues à des anomalies ultra-structurales des cils
qui présentent la même ultra-structure que le flagelle),
La figure détaille quelques-unes de ces anomalies.
d’une asthénospermie et d’une tératospermie touchant le
La norme est placée à 30 % de spermatozoïdes typiques. flagelle. Un test de Hühner analysera l’aptitude des
spermatozoïdes à progresser dans la glaire en période péri-
Dans notre laboratoire, nous sommes restés fidèles à la
ovulatoire. Si ce test est négatif, malgré une glaire de
classification de David et au principe de l’IAM, tout en
bonne qualité, une dyskinésie flagellaire est suspectée. La
appliquant une lecture plus sévère des anomalies. De ce
dyskinésie flagellaire est une indication d’ICSI. L’enquête
fait, notre norme de pourcentage de formes typiques est
familiale est indispensable et on réalise un bilan pré-ICSI
de 15 %. Mais d’après le dernier manuel de l’OMS, la
avec notamment une consultation génétique.
tératozoospermie est définie comme un pourcentage de
spermatozoïdes typiques inférieur à 4 % ; il est probable Finalement, dans un autre contexte, un spermocyto-
que ces nouvelles recommandations ne seront pas géné- gramme retrouvant des anomalies monomorphes de
ralisées à l’ensemble des laboratoires avant quelques la tête avec 40 % de spermatozoïdes microcéphales ou
années. macrocéphales devra aussi nous faire douter de la norma-
lité de la tête des autres 60 % !
Quoi qu’il en soit, en matière de morphologie, le typage
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des anomalies et leurs associations sont au moins aussi
importants que le pourcentage de formes typiques. D’une IV. - CONCLUSION
façon générale, si les anomalies morphologiques sont
variables pour un sperme donné, il existe des cas où une Le spermogramme est un examen simple, qui nécessite
anomalie va se retrouver de façon homogène sur l’ensem- un laboratoire et des locaux adaptés répondant aux règles
ble des spermatozoïdes. Certaines anomalies sont en effet de bonnes pratiques, mais aussi et surtout des opérateurs
plus volontiers associées à des pathologies particulières. entraînés, qualifiés, habilités et soucieux du respect des
Des flagelles enroulés peuvent être observés si des germes normes de qualité, qui sont seules garantes du rendu au
sont présents dans le sperme. Des têtes allongées ou amin- praticien prescripteur d’un spermogramme interprétable
cies peuvent suggérer une varicocèle. L’association d’ano- et interprété.
malies flagellaires (flagelles de calibre irrégulier, courts ou
écourtés, enroulés et pièces intermédiaires grêles) incite Le spermogramme permet de faire (ou d’aider à faire)
à suspecter une dyskinésie flagellaire. des diagnostics essentiels, comme l’azoospermie ou une
dyskinésie flagellaire, mais il ne permet pas de s’affranchir
Le diagnostic formel de dyskinésie flagellaire est fait par de l’examen clinique et ne suffit pas toujours à diagnosti-
la microscopie électronique, qui permet d’analyser l’axo- quer l’infertilité masculine. En effet, certaines autres ano-
nème et les structures péri-axonémales du flagelle. Mais malies peuvent être retrouvées, y compris chez un patient
étant donné la difficulté de cette technique, le diagnostic dont le spermogramme est normal. Il s’agit, par exemple,

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de la mise en évidence d’une mauvaise qualité de l’ADN centrifugation. Cette préparation de spermatozoïdes dits
spermatique : fragmentation de l’ADN, décondensation « migrés » est la préparation de base de toute AMP, et permet
de la chromatine ou encore présence de vacuoles cépha- en amont de déterminer la technique envisageable entre
liques spermatiques au fort grossissement en MSOME (Mo- insémination intra-utérine, fécondation in vitro ou ICSI. Il
tile Sperm Organellar Morphology Examination). est donc important de répéter un spermogramme et de le
compléter par des examens complémentaires, pour connaître
Le spermogramme est aussi très souvent répété et com-
les qualités intrinsèques du spermatozoïde et adapter au
plété par un test qu’on appelle le test de migration-survie
mieux la prise en charge des couples infertiles en AMP.
(TMS). Ce TMS permet de connaître la numération, la
mobilité et la morphologie de spermatozoïdes qu’on aura
sélectionnés par migration sur un gradient de densité et
Conflit d'intérêt

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