MANUEL DE PRÉLÈVEMENT

Service
d’Anatomie et de Cytologie Pathologiques

CRÉDIT PHOTO : GHICL - JUILLET 2015 - VERSION 1

SERVICE AN ATOMI E ET CYTOLOGIE PATHOLOGIQUES

Il réalise des examens d’anatomie et de cytologie pathologiques

Horaires d’ouverture du secrétariat :

Du lundi au vendredi
De 8h30 à 17h30

Horaires d’ouverture technique :

Du lundi au vendredi de 7h30 à 18h00
Samedi de 8h00 à 12h00
Réception des prélèvements jusque 17h30 en semaine et 11h30 le samedi hors
prélèvements particuliers

 03 20 87 45 62

 03 20 87 48 27

CONTACTS

POLE HOSPI TALO -UNIVERSI TAI RE DE BIO -P ATHO LOGIE DU GHICL

ANATOMIE ET CYTOLOGIE PATHOLOGIQUES

Chef de service : Pr Pierre GOSSET
Anatomopathologiste : Dr Stephanos PAPADOPOULOS
Anatomopathologiste : Dr Jean François QUINCHON
Anatomopathologiste : Dr Adriana MIHALACHE

CELLULE QUALITE
Biologiste Responsable Qualité : Dr Anne-France GEORGEL

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP| VERSION 1 |JUILLET 2015

Suppléant : Mme Ophélie DUMORTIER
Suppléant : M. Philippe DEJARDIN

CA DRE DE SANTE
M. Damien LAMBERTON
Suppléant : Mme Elodie DEROMBISE

Table des matières

GENERALITES ...................................................................................................................... 3
PRESCRIPTION .................................................................................................................... 4
AJOUT D’ANALYSES ........................................................................................................... 4
MATERIEL UTILISE................................................................................................................. 5
PROCEDURES D’ACHEMINEMENT .................................................................................... 6
PRELEVEMENTS ANATOMO-PATHOLOGIQUES .................................................................... 6
PRELEVEMENTS CYTOLOGIQUES ....................................................................................... 8
PROTOCOLES D’ESSAIS CLINIQUES ET THERAPEUTIQUES ............................................. 10

2
 GENERALI TES

L’EX AM EN D’ AN ATOMIE ET DE CYTOLOGIE PATHOLOGIQUES

C’est un examen qui s’appuie sur l’observation morphologique des cellules, tissus, organes
ou leurs dérivés. Il est basé sur des techniques, standards ou spéciales : histopathologiques,
histochimiques, immunohistochimiques ou moléculaires.
L’examen d’anatomie et cytologie pathologiques a plusieurs objectifs : diagnostic de maladie
ou de dépistage, thérapeutique ou de suivi particulier. Il est aussi pronostique via le recueil
des éléments clés de la réalisation de grades ou scores ; prédictif et à impact thérapeutique.
Il est finalisé par un compte rendu textuel transmis aux médecins en charge du patient dans
le cadre du soin.

Un examen d’anatomie et cytologie pathologiques se déroule en trois phases :

 la phase pré-analytique :
Le prélèvement, effectué par le préleveur demandeur, est acheminé dans le service
d’anatomie et cytologie pathologiques. Il est accompagné d’une feuille de demande
d’examen, qui est renseignée par le médecin demandeur et comporte les renseignements
d’identité et de contexte clinique nécessaires au diagnostic. L’étape administrative
d’enregistrement est importante et renseigne : identité, numéro d’examen et inventaire de
prélèvements reçus.

 la phase analytique :
Les cellules ou fragments de tissus sont traités et rendus observables au microscope par
création de préparations colorées sur lames.
Après un premier examen microscopique, le médecin pathologiste peut compléter son
diagnostic par la demande de techniques spéciales, basées sur des principes de chimie,
histochimie, histoenzymologie, immunohistochimie, et biologie moléculaire.

 la phase post-analytique :
Le médecin pathologiste traduit son observation microscopique afin d’établir une
interprétation contextuelle du résultat. Le compte-rendu est ensuite communiqué aux
différents correspondants, par courrier papier et support informatique (DPI et Apicrypt). Les
modes de transmission des comptes-rendus sont décrits par la procédure HE2-ACP-PR02-
Transmission des résultats en ACP.

3
PRESCRIPTION

La prescription est assurée par un professionnel habilité et doit répondre à une question
clinique. Elle s’appuie sur les recommandations de bonnes pratiques et si nécessaire sur
un échange entre clinicien et anatomo-pathologiste.

Le bon de demande d’examen est daté et comporte les renseignements pré-analytiques

(date, heure de prélèvement et NOM COMPLET du préleveur) et cliniques nécessaires
à l’interprétation des examens d’anatomie pathologique. S’il s’agit d’une prescription,
celle-ci doit être en plus signée.

Une information doit être donnée au patient et son consentement obtenu notamment dans
le cadre de la tumorothèque et de foetopathologie.

Deux bons de demande d’examens spécifiques au service d’anatomie et cytologie

pathologiques sont disponibles :

Prescription d’étude anatomo-cyto- Fiche de liaison pour examen cytologique et

pathologique non urgente histopathologique
Prescription d’étude anatomo-cyto- Bon d’urgence
pathologique urgente

Les bons de demande doivent être complétés à l’aide des cases prévues à cet effet et
l’ensemble des informations demandées doit y être retrouvé.

Eviter les abréviations.

Signaler sur les fiches de liaison les prélèvements à risque contaminant

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP| VERSION 1 |JUILLET 2015

Tous les prélèvements, même ceux qui seront traités par un laboratoire extérieur à
l’établissement, doivent transiter par le service d’anatomie et cytologie pathologiques
qui prend en charge leur acheminement, en accord avec le service demandeur.

AJOUT D’ANALYSES

Il est possible de réaliser certaines analyses complémentaires sur les prélèvements déjà
reçus.
Le rajout est validé par le laboratoire en fonction du volume d’échantillon restant.
Il doit être confirmé par l’envoi d’une nouvelle prescription.

4
 MATERIEL UTILISE (fourni par le service d’ACP)

20 mL de formol ROSE
Flacons à bouchon bleu
tamponné pbs 4 %

65 mL de formol
Flacons à bouchon bleu
tamponné pbs 4 %

Sachet TissueSAFE® 498 mm x 298mm

Pots pour transport des pièces Contenance :

anatomiques 1 L ou 2.5 L ou 5 L

Cubi (10L) Formol dilué

Flacons à bouchon jaune Alcool à 50 %

Kit frottis liquide Thinprep + cytobrush

Flacons à bouchon vert Liquide de Michel

Cryotubes

Tubes coniques de 50 mL à bouchon

Cytolyt
bleu

Lames et boites de transport de

lames

Prescription médicale non urgente

Prescription médicale urgente

Glacières pour transport de

Réservées aux blocs opératoires
prélèvements

Sachets Tissue Safe pour transport

Réservés aux blocs opératoires
de pièce fraîche sous-vide

Sachets secondaires Réservés aux prélèvements

de transport sur route extérieurs à Saint Vincent

5
Commande du matériel
La commande de matériel s’effectue via le bon de commande disponible sur intranet. La
demande doit parvenir au service d’anatomie et cytologie pathologiques le lundi dernier délai
pour une préparation et une livraison dans la semaine. Cette demande peut parvenir par fax
au [Link].27 ou directement dans le service d’Anatomie et Cytologie Pathologiques.

PROCEDURES D’ACHEMINEMENT

Les prélèvements en provenance de l’Hôpital Saint Philibert sont à déposer par les services
de soins au Laboratoire de Biologie de Saint Philibert. Un cahier de traçabilité de dépôt de
prélèvements (HC3-ENR10 - Cahier de traçabilité des prélèvements d'anatomo-cyto-
pathologie déposés au LBM St Philibert) est à renseigner à l’accueil du laboratoire. Tous les
champs doivent être complétés et il est demandé d’annoter un patient par ligne.

 Pour les prélèvements nécessitant un transport sur route (respect du triple emballage) :
 Mettre le pot dans un sachet de transport (+ absorbant).
 Mettre une étiquette patient sur le sachet de transport.
 Insérer la prescription dans la poche kangourou.

Prélèvements anatomo -pathologiques :

Prélèvements anatomo-pathologiques URGENTS : Bon d’Urgence

Sans fixateur : flacon vide ou pot

Ou compresse imbibée de sérum physiologique pour les petits fragments
Types de prélèvements Acheminement en « urgence immédiate »

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP| VERSION 1 |JUILLET 2015

 Examen extemporané,  Prévenir 48 h à l’avance le service
d’anatomie et cytologie
 Prélèvement ganglionnaire (pour
pathologiques au [Link].62 ou
recherche de lymphome),
42.13 en précisant le service
 Sarcome, tumeur pédiatrique, demandeur, la date, l’heure et la
nature du prélèvement
 Fœtus,
 Faire parvenir au service d’anatomie
 Etude en biologie moléculaire, et cytologie pathologiques avant 17h
 Biopsies musculaires, en semaine (15h pour les biopsies
musculaires) et avant 11h le samedi
 Etude en immunofluorescence (pour
Saint Vincent de Paul),  A remettre en mains propres au
personnel d’anatomie et cytologie
 Vaccinothérapie. pathologiques

Seuls les examens ayant été soumis à cette procédure seront assurés avec certitude.

Des protocoles spécifiques sont disponibles sur intranet à l'emplacement : Services

Hospitaliers - Laboratoires - Protocoles - Prélèvements - Anapath.

6
 Prélèvements Anatomo-pathologiques NON URGENTS :
Acheminement non urgent:

 Isoler la fiche de liaison du flacon (pas de contamination par le formol)

 Identifier le contenant par une étiquette patient

 Numéroter les flacons si plusieurs

Grosses pièces opératoires : orienter la pièce (fils) si nécessaire,

Plusieurs contenants possibles :

Formol : choisir la taille adéquate du

Sachets TissueSAFE® pour pièce fraîche contenant par rapport au prélèvement :
sous-vide (blocs opératoires Saint Philibert
et Saint Vincent) : à conserver au  Flacons à bouchon bleu pré-remplis
réfrigérateur avant transport en formol

 Pots vides : 1 volume de formol dilué

égal au 2/3 du volume de la pièce.

Biopsies ou petites pièces opératoires :

Petits flacons à bouchon bleu : formol

Etude en immunofluorescence (Saint Philibert et extérieurs au GHICL) :

Petits flacons bouchon vert : liquide de Michel

7
Prélèvements c ytol ogiques :

Prélèvements cytologiques URGENTS : Bon d’Urgence

Sans fixateur
Acheminement en « urgence immédiate »:

 Faire parvenir au service d’anatomie et cytologie pathologiques dans les plus brefs
délais avant 17h en semaine et avant 11h le samedi (sinon à conserver à 4°C)

 A remettre en mains propres au personnel d’anatomie et cytologie pathologiques

Types de prélèvements

Particularité : cils bronchiques :

LCR  Amenés immédiatement dans
LBA sérum physiologique à
température ambiante
Liquide articulaire
 Prévenir le service d’anatomie et
cytologie pathologiques au
[Link].62 ou 42.13 la veille

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP| VERSION 1 |JUILLET 2015

8
 Prélèvements Cytologiques NON URGENTS :
Acheminement non urgent :

 Isoler la fiche de liaison du flacon (pas de contamination par le fixateur)

 Identifier le contenant par une étiquette patient

 Numéroter les flacons si plusieurs

Plusieurs types de fixations possibles

Alcool : flacons Lames fixées : Lames sèches : Cytolyt : flacon Milieu liquide : kit
bouchon jaune : vaporiser un sécher à l’air 50 mL conique à Thinprep (flacon
spray fixateur à + libre au moins 10 bouchon bleu : bouchon blanc et
Fixation
de 20 cm de la mn avant de cytobrush) :
immédiate en Projeter le
lame, laisser ranger dans les
quantité matériel et/ou Détacher et
sécher avant de porte-lames.
équivalente au rincer la seringue déposer la tête
ranger dans les
volume de dans le tube de la brosse
porte-lames.
liquide cytolyt. dans le flacon de
fixateur après
réalisation du
frottis.

Prélèvements cytologiques usuels

Liquide urinaire,
Liquide pleural,
Liquide péricardique, Alcool
Liquide d’ascite ou péritonéal,
Aspiration bronchique
Prélèvements particuliers

Frottis cervico-vaginaux en cytologie

Lames fixées
conventionnelle :
Frottis cervico-vaginaux en cytologie en
Milieu liquide
couche mince :
Lésion solide ou semi-solide : cytolyt
Ponctions d’organes profonds : Prélèvement purement liquidien : alcool

Prélèvement superficiel : étalement

Ganglions et autres prélèvements (cytologie Etalements secs et fixés à préciser sur la fiche
voies biliaires, thyroïde…) : de liaison et sur le porte-lame, ainsi que leur
nombre

Les examens immunocytochimiques ne seront possibles que sur étalement sec.

9
PROTOCOLES D’ESSAIS CLINIQUES ET THERAPEUTIQUES

Avant la mise en place d'un protocole, le chef de service d’Anatomie Pathologique doit être
informé. Un cahier des charges du protocole d'essai clinique doit lui être adressé et les bons
de demande soumis à son approbation :
 Nom du protocole,
 Marche à suivre,
 Durée,
 Envoi des échantillons à l'extérieur : la logistique de l’envoi est à la charge du
responsable de l’essai
 Financement de la société de transport
 Commande du milieu de transport (ex : carboglace)
 Prise en charge des analyses,
 Et toute autre information permettant d’effectuer le protocole dans les meilleures
conditions

Aucune analyse ne sera réalisée et aucun prélèvement ne sera conservé sans concertation.

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP| VERSION 1 |JUILLET 2015

10