Haemophilus ducreyi
A l’usage des étudiants de la 3ème année BM/ TLP
Année scolaire 2019- 2020
Ali Zoromé, Biologiste médical, Mastérien en Ingénierie Biologie Médicale
(Responsable du LBM-ASACOBAFA)
Sekou DOUMBIA, Biologiste médical, Mastérien en Ingénierie Biologie Médicale
OBJECTIFS PEDAGOGIQUES
• Donner l’habitat d’Haemophilus ducreyi ;
• Décrire la morphologie et les caractères de culture de
Haemophilus ducreyi.
• Citer les caractères biochimiques d’Haemophilus
ducreyi.
• Décrire le pouvoir pathogène d’Haemophilus ducreyi.
• Décrire le diagnostic bactériologique d’Haemophilus
ducreyi.
• Citer aux moins deux (2) antibiotiques capables
d’inhiber la croissance d’Haemophilus ducreyi.
PLAN
• Habitat
• Caractères bactériologiques
• Pouvoir pathogène
• Diagnostic bactériologique
• Sensibilité aux antibiotiques
HABITAT
• C’est une bactérie strictement adaptée à
l’homme. Elle a été découverte pour la première
fois en 1889 par Ducrey comme bactérie
responsable du chancre mou, une maladie
sexuellement transmissible.
• C’est une bactérie qui n’a jamais été observée en
dehors du chancre mou ou du bubon qui
l’accompagne. Elle peut persister à l’état
commensal sur les muqueuses vaginales de
porteuses saines.
CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
• Morphologie :
• Haemophilus ducreyi est un coccobacille à Gram
négatif acapsulé, asporulé mais peu colorable au
Gram. Dans les produits pathologiques colorés au
bleu de méthylène ou au Giemsa, il se présente
au microscope comme un bacille court à bout
arrondis, intra ou extracellulaire, isolé ou groupés
deux par deux ou en amas parallèles ou en
chainette avec une coloration bipolaire évoquant
une épingle de sureté.
• Caractères de culture :
• C’est une bactérie à culture difficile. De nombreux milieux
sont proposés pour sa culture :
• Gélose au sang de mouton défibriné
• Gélose Trypticase-Soja au sang cuit
• Gélose Columbia au sang frais (30%) de mouton ou de lapin
• Gélose chocolat avec 1% d’Isovitalex
• La température d’incubation est de 37°C sous une
atmosphère humide enrichie en CO2 (5%).
• Les colonies sont visibles en 2 à 5 jours. Elles sont petites,
blanches et grisâtres, centrée par un point blanc opaque.
• Caractères biochimiques :
• Haemophilus ducreyi ne produit ni H2S, ni LDC,
ni ADH, ni Uréase, ni catalase. Il réduit les
nitrates en nitrites et possède l’oxydase.
• POUVOIR PATHOGENE
• Haemophilus ducreyi est l’agent étiologique du chancre
mou. La transmission essentiellement sexuelle est favorisée
par un contact direct et une effraction cutanée. Après
incubation d’une semaine voir exceptionnellement 15 à 30
jours, il apparait une papulo-pustule qui rompue laisse
place à une ulcération douloureuse à bords irréguliers,
décollés plus ou moins surélevés, à fond recouvert d’un
enduit jaune nécrotique et purulent.
• Le chancre siège dans la majorité des cas sur la partie
cutanée des organes génitaux. Chez l’homme il est observé
sur le sillon balano-préputial, le prépuce, et les bourses et
chez la femme sur le versant cutané des grandes lèvres, le
clitoris et l’anus.
DIAGNOSTIC BACTERIOLOGIQUE
• Le diagnostic est fait par l’examen microscopique
du frottis coloré ou par l’isolement de la bactérie
par la mise en culture du prélèvement.
• 1-Prélèvement :
• Il est fait en grattant sans faire saigner la zone de
décollement du chancre à l’aide d’une curette ou
d’un écouvillon en en alginate ou par ponction du
bubon avec une seringue pour recueillir le pus.
• 2- Examen microscopique après coloration :
• Le frottis réalisé avec la sérosité du chancre ou du pus
du bubon subira une coloration (prolongée) au bleu de
méthylène ou au Giemsa car la coloration de Gram ne
permet pas de mieux reconnaître le bacille.
• A l’examen microscopique à immersion la présence de
bacilles courts intra ou extracellulaire à coloration
bipolaire, à bouts arrondis en épingle de sureté en
amas de longues chaines parallèles souvent au sein
d’une flore abondante de surinfection est
caractéristique de H. ducreyi.
• 3-Culture:
• La culture est faite sur gélose au sang ou sur gélose
chocolat+ Isovitalex. Compte tenu de la présence fréquente
de bactéries de surinfection, ces milieux sont rendus
sélectifs par addition vancomycine et de polymyxine.
L’incubation est faite à 37°C en atmosphère humide
enrichie en CO2. Les colonies sont visibles après 2 à 5 jours
d’incubation.
• L’identification repose sur les tests suivants : coloration au
bleu de méthylène suivi de l’examen microscopique à
immersion, la réduction des nitrates en nitrites, la mise en
évidence de l’oxydase et l’exigence du facteur X à partir de
l’acide delta aminolevunique.
SENSIBILITE AUX ANTIBIOTIQUES
• H. ducreyi est régulièrement sensible in vitro à
de nombreux antibiotiques : céfalotine,
aminosides, chloramphénicol, cyclines, acide
nalidixique.
• Certaines souches sont résistantes aux
bétalactamines par production d’une
bêtalactamase codée par un plasmide
transférable à E. coli.
