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Biotinidase
O. Rigal
Le déficit en biotinidase est un déficit héréditaire autosomique récessif du métabolisme de la biotine ayant
pour conséquence l’impossibilité de recycler la biotine à partir de ses sources alimentaires et endogènes.
Le déficit en biotinidase peut être rapidement mortel du fait des dommages neurologiques graves qu’il
peut entraîner. Les symptômes cliniques et l’âge de survenue sont très variables en fonction de la gravité
de l’atteinte secondaire de différentes carboxylases. Un diagnostic précoce de ce déficit et un traitement
rapide par la biotine peuvent faire rapidement régresser les symptômes et prévenir les séquelles. Le déficit
en biotinidase est objectivé en mesurant l’activité biotinidase sur le sérum des patients. Un dépistage
néonatal de ce déficit est programmé dans de nombreux pays qui permet de mettre en évidence les sujets
atteints de déficits profonds ou partiels asymptomatiques.
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Mots clés : Biotine ; Biotinidase ; Déficit en biotinidase ; Dépistage néonatal ; Hydrolase ;
Déficit multiple en carboxylase ; Transférase
Plan covalente aux différentes carboxylases grâce à une enzyme,
l’holocarboxylase synthétase.
¶ Intérêt physiopathologique 1 Une liaison amide s’établit entre un groupement carboxylique
Généralités 1 de la biotine et un atome d’azote d’un résidu lysine de la
Déficits héréditaires du cycle de la biotine 2 carboxylase. Cette liaison de la biotine à l’apoenzyme permet
Diagnostic différentiel du déficit multiple en carboxylases 2 son activation en holocarboxylase, enzyme active.
Lors de la deuxième partie du cycle, les holocarboxylases
¶ Étape préanalytique 2
subissent une protéolyse qui aboutit à la formation de biocytine
Modalités de recueil 2
(biotinyl-e-lysine) ou à des biotinyl peptides.
Conditions de conservation 2
La dernière étape de ce cycle correspond au clivage par la
Interférences analytiques 2
biotinidase de la partie biotinyl du groupement amidolysine,
¶ Mesure de l’activité biotinidase dans le sérum 2 libérant ainsi d’un côté la lysine ou les lysyl-peptides et de
Technique colorimétrique 3 l’autre la biotine qui peut alors être recyclée pour reconstituer
Technique fluorimétrique 3 le pool de biotine, biotine disponible pour rentrer à nouveau
Technique microbiologique 3 dans le cycle et activer les carboxylases (Fig. 1).
Techniques utilisant des substrats synthétiques radiomarqués 3 Le déficit en biotine induit un déficit secondaire de toutes les
Interférences analytiques 3 carboxylases, avec comme conséquence l’accumulation de
Interférences médicamenteuses 4 nombreux métabolites intermédiaires.
Source de variations 4
La pyruvate décarboxylase (EC [Link]) catalyse la transfor-
¶ Interprétation des résultats 4 mation du pyruvate en oxalate, un intermédiaire de la forma-
Valeurs usuelles 4 tion du phosphoenolpyruvate sur la voie de la
Variations physiopathologiques 4 néogluconogenèse.
Dépistage néonatal 4 L’acétylCoA carboxylase (EC [Link]) catalyse la transforma-
tion de l’acétylCoA en malonylCoA, première étape de la
synthèse des acides gras.
■ Intérêt physiopathologique La propionylCoA carboxylase (EC [Link]) catalyse la trans-
formation du propionylCoA en méthylmalonylCoA, une des
étapes de la voie métabolique du catabolisme des acides aminés
Généralités branchés et des acides gras à nombre impair de carbone.
La biotine est une vitamine hydrosoluble essentielle (vitamine Le méthylmalonylCoA est transformé en succinylCoA qui
H). Les sources de biotine chez les mammifères proviennent entre dans le cycle de Krebs.
d’une part de l’alimentation, essentiellement les viandes, les La bêta-méthylcrotonylCoA carboxylase (EC [Link]) étant sur
légumes et les fruits, et d’autre part de la synthèse par les la voie du catabolisme de la leucine, permet la transformation
bactéries de la flore intestinale. du bêta-méthylcrotonylCoA en bêta-méthylglutaconylCoA
La biotine est directement impliquée dans les processus de la (Fig. 2).
néoglucogenèse, de la synthèse des acides gras et du catabolisme La biotinidase (EC [Link]) est une enzyme ubiquitaire qui
des acides aminés branchés via son rôle comme groupement est responsable de la dernière étape du cycle de la biotine. Cette
prosthétique pour quatre carboxylases. Elle est liée de façon enzyme est une hydrolase : elle catalyse la libération de la
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Diagnostic différentiel du déficit multiple en
carboxylases
Il est évoqué en présence d’une acidocétose avec une hyper-
lactatémie et une hyperammoniémie. Le profil de la chromato-
graphie des acides organiques montre l’augmentation du 3OH
propionate, du méthylcitrate, du 3-OH isovalérate, de la
tiglyglycine et de la 3-méthylcrotonylglycine ; tous ces compo-
sés étant des métabolites accumulés sur les voies métaboliques
faisant intervenir les quatre carboxylases.
Le profil du déficit en biotinidase peut, dans certains cas, être
plus discret et ne montrer qu’une augmentation modérée de
3-OH isovalérate. Il a été décrit un cas de déficit sans acidurie
organique, ni anomalie cutanée, ni anomalie des cheveux ayant
eu une issue fatale faute de diagnostic assez précoce.
Le diagnostic différentiel du déficit en biotinidase et en
holocarboxylase synthétase se fait sur la mesure de l’activité
enzymatique sur fibroblastes en cultures pour l’holocarboxylase
synthétase, et par la mesure de l’activité biotinidase dans le
sérum pour le déficit en biotinidase.
La concentration de la biotine dans le plasma des sujets
Figure 1. Cycle de la biotine. MCC : 3-méthylcrotonylCoA carboxylase. présentant un déficit en biotinidase est basse alors qu’elle est
ACC : acétylCoA carboxylase. PC : pyruvate carboxylase. PCC : propionyl- normale pour ceux atteints de déficits en holocarboxylase
carboxylase. synthétase, mais ce marqueur n’est pas très fiable.
La concentration urinaire de biotine peut être normale chez
les déficitaires en biotinidase par pertes rénales augmentées de
biotine par hydrolyse de la liaison avec la lysine dans la la biotine, ceci jusqu’à déplétion totale en biotine. En revanche,
biocytine produite lors du turnover de différentes carboxylases, chez les déficitaires profonds en biotinidase, l’excrétion urinaire
et catalyse également la libération de la biotine liée aux de biocytine est augmentée.
protéines et joue ici un rôle fondamental en permettant le
clivage de la biotine alimentaire de ses liaisons aux protéines et
permettant ainsi sa libération [1].
■ Étape préanalytique
La biotinidase a été aussi décrite comme une protéine de
transport de la biotine : en effet, l’activité de la biotinidase dans
Modalités de recueil
le sérum est relativement élevée, comparée à la concentration Le dosage peut être réalisé dans le sérum et le sang déposé sur
de biotine. Cette observation a conduit Chauhan et al. à un papier buvard type papier de Guthrie utilisé pour le dépis-
émettre l’hypothèse qu’elle pourrait servir de ligand à la biotine tage néonatal.
et jouer un rôle de protéine de transport [2]. Le prélèvement peut être effectué sans tenir compte du
Hymes et al. ont décrit des modifications de la biotinidase en moment de la prise de biotine par le patient, celle-ci n’interfé-
présence de biocytine et décrit une activité enzymatique de rant pas dans la mesure de l’activité de la biotinidase.
transférase sous forme de biotinyltransférase [3]. Ces mêmes
auteurs ont confirmé l’existence de cette activité enzymatique Conditions de conservation
au pH physiologique et pour la concentration sérique de la Hymes et al. recommandent que le sérum soit rapidement
biocytine, et émis l’hypothèse que cette activité expliquerait séparé du sang par centrifugation et conservé à – 70 °C [7].
d’autres fonctions de la biotine, autres que celle de cofacteur des Broda et al. ont testé la conservation du sérum et des tâches
carboxylases [4]. de sang sur papier conservés à – 20 °C et à – 80 °C et n’ont pas
Il a été décrit le rôle de l’activité biotynyltransférase dans la observé de diminution d’activité au bout de 5 mois de
biotinylation des histones ; récemment, ces mêmes auteurs ont conservation [8].
évoqué le rôle des histones biotinylées au niveau du noyau. Les En revanche, le stokage à 4 °C ou à 20-25 °C entraîne une
histones interagiraient avec l’ADN au niveau des groupes diminution significative de l’activité de 20 % au bout de
nucléosidiques de la thymine et de la cytosine et par ce biais 2 semaines [9].
réguleraient les fonctions des gènes [5]. En pratique, le transport à 4 °C est possible entre le lieu de
prélèvement et le laboratoire où est effectué le dosage. Le
stockage doit être le plus bref possible à –20 °C.
Déficits héréditaires du cycle de la biotine
On connaît deux déficits héréditaires autosomiques récessifs Interférences analytiques
du métabolisme de la biotine : le premier décrit par Gompertz En théorie tous les composés susceptibles d’interférer sur la
et al. en 1971 [6] est le déficit en holocarboxylase synthétase et réaction finale sont susceptibles de donner des faux négatifs, par
le second, décrit par Wolf et al. [1] en 1983, le déficit en exemple les sulfonamides avec la réaction au BPABA. Une étude
biotinidase. Ces deux déficits conduisent de façon secondaire à sur l’influence de la bilirubine sur le dosage de la biotinidase a
la même entité clinique, le déficit multiple en carboxylase mis en évidence un effet inhibiteur de celle-ci. Les auteurs
(MCD). Cliniquement, les désordres qu’ils entraînent sont recommandent d’indiquer la concentration de bilirubine
semblables, à type de difficultés alimentaires, d’anomalies mesurée sur les cartons de Guthrie pour assurer une évaluation
neurologiques et d’anomalies cutanées. On observe des diffé- correcte de la biotinidase [10].
rences sur l’âge de survenue et la gravité clinique. Les deux
déficits répondent rapidement et efficacement au traitement par
la biotine ; cependant, le déficit en holocarboxylase nécessite ■ Mesure de l’activité biotinidase
des doses plus fortes. Sans traitement, ces deux déficits peuvent dans le sérum
conduire à des retards de développement sévères et même
entraîner la mort. Un traitement tardif du déficit en biotinidase Le principe général du dosage repose sur l’utilisation de
peut laisser des séquelles auditives, une atrophie optique et une l’activité d’hydrolytique de la biotinidase vis-à-vis de substrats
ataxie (Tableau 1). naturels ou synthétiques.
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Figure 2. Voies métaboliques des enzymes biotine dépendantes. Les métabolites encadrés sont ceux qui s’accumulent dans le déficit multiple en
carboxylases. MCC : 3-méthylcrotonylCoA carboxylase. ACC : acétylCoA carboxylase. PC : pyruvate carboxylase. PCC : propionylcarboxylase.
Tableau 1. réagit avec du naphtyléthylènediamine, en présence de sulfa-
Déficit multiple en carboxylases. Clinique. mate d’ammonium pour donner un composé coloré par réac-
Déficit en holocarboxylase Déficit en biotinidase
tion de diazotation. La quantité de PABA libéré est quantifiée
par mesure de la coloration à 546 nm en référence à une courbe
Néonatal +++ Néonatal + 7 sem. d’étalonnage réalisée dans les mêmes conditions. Les résultats
Tardif + (6 ans) Tardif +++ sont exprimés par nmol de PABA libéré par minute et par ml de
Expression néonatale sérum (nmol/min/ml).
DNN type II / Type III
Cette méthode a été automatisée [12] puis modifiée pour être
adaptée aux méthodes en microplaque pour le dépistage
Expression tardive Expression tardive néonatal sur papier buvard [13].
- Accès aigus de coma Encéphalopathie progressive
- Acidocétose + retard - Hypotonie, convulsions, ataxie Technique fluorimétrique
psychomoteur - Anomalies respiratoires
C’est la technique la plus couramment utilisée. La méthode
stridor, accès de polypnée, + apnées
initiale de Wastell et al. [14] utilise un substrat synthétique la
+ Anomalies cutanées + Anomalies cutanées biotine-6-amido-quinoline (BAQ) ; elle a été modifiée par Broda
+ alopécie Alopécie +++, cils, sourcils et al. [8] pour augmenter la sensibilité.
Dermite, perlèche, onyxis Le principe est le même : la biotinidase plasmatique hydro-
Kératoconjonctivite lyse la liaison amide et libère l’amidoquinoline dont l’émission
de fluorescence est mesurée à 535 nm après excitation à
Diagnostic tardif = séquelles (NGC) 355 nm.
Surdité, atrophie optique Cette méthode a été automatisée et est très couramment
utilisée dans les centres de dépistage néonatal.
Toutes les techniques utilisent les mêmes étapes : Technique microbiologique
• une étape d’hydrolyse à 37 °C, dans des conditions de pH
optimales pour l’activité hydrolase de la biotinidase (pH 6,0- La réaction fait intervenir l’hydrolyse de la biocytine qui
6,5) ; libère de la biotine ; celle-ci est séparée et déposée sur un gel
• l’arrêt de la réaction par inactivation de l’enzyme soit par d’agar et permet la culture d’un lactobacillus. Le diamètre de la
chauffage à 90 °C, soit par modification du pH, par addition zone de croissance étant proportionnel à la quantité de biotine
d’acide ; libérée, celle-ci est dosée en référence à une courbe d’étalonnage
• puis une étape de centrifugation, suivie de la récupération du réalisée dans les mêmes conditions [9].
surnageant et le dosage du composé libéré, par différents
types de méthodes : soit après réaction colorée, soit directe- Techniques utilisant des substrats
ment par fluorométrie, soit par méthode microbiologique,
soit radiométrique.
synthétiques radiomarqués
La mono-125 iodotyramine biotinylée est utilisée pour des
Technique colorimétrique dosages radio-immunologiques [15].
Historiquement, la première technique développée par
Knappe et al. [11] utilisait un substrat synthétique le biotinyl
Interférences analytiques
para-aminobenzoate de sodiun (BPAB). En théorie tous les composés susceptibles d’interférer sur la
En présence de la biotinidase du sérum, l’hydrolyse de la réaction finale sont susceptibles de donner des faux négatifs, par
liaison amide conduit à la libération de l’acide para-amino exemple les sulfonamides avec la réaction au BPABA. Une étude
benzoïque (PABA). Dans un deuxième temps le PABA libéré sur l’influence de la bilirubine sur le dosage de la biotinidase a
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mis en évidence un effet inhibiteur de celle-ci. Les auteurs et le faible coût du traitement de supplémenter en biotine tous
recommandent d’indiquer le taux, la concentration de biliru- les enfants déficitaires profonds quelle que soit l’activité
bine mesurée sur les cartons de Guthrie pour assurer une résiduelle et quelle que soit la mutation [23].
évaluation correcte de la biotinidase [10].
Interférences médicamenteuses ■ Références
Une étude sur l’effet de différentes doses d’acide valproïque [1] Wolf B. Disorders of biotin metabolism. In: Scriver CR, Beaudet AL,
sur l’activité biotinidase a montré une corrélation inverse entre Sly WS, Valle D, Childs B, Kinzler KW, et al., editors. The metabolic
la concentration d’antiépileptique sanguin et le taux d’activité and molecular bases of inherited disease. New York: McGraw-Hill;
biotinidase mesuré. Les auteurs suggèrent que la toxicité de 2001. p. 3935-56.
l’acide valproïque entraîne un dysfonctionnement hépatique [2] Chauhan J, Dakshinamurti K. Role of human serum biotinidase as
responsable de cette perte d’activité [16]. biotin-binding protein. Biochem J 1988;256:265-70.
[3] Hymes J, Fleischhauer K, Wolf B. Biotinylation of histones by human
Source de variations serum biotinidase: assessment of biotinyl-transferase activity in sera
from normal individuals and children with biotinidase deficiency.
Le foie est une source majeure de biotinidase et les affections Biochem Mol Med 1995;56:76-83.
hépatiques peuvent conduire à une diminution d’activité [4] Hymes J, Wolf B. Human biotinidase isn’t just for recycling biotin.
biotinidase : les patients atteints d’affections chroniques J Nutr 1999;129(suppl2):485S-489S.
hépatiques à type de cirrhose ou de maladie de Wilson ont une [5] Wolf B. Biotinidase: its role in biotinidase deficiency and biotin
activité biotinidase significativement diminuée [17]. metabolism. J Nutr Biochem 2005;16:441-5.
[6] Gompertz D, Draffan GH, Watts JL, Hull D. Biotin-responsive beta-
methylcrotonylglycinuria. Lancet 1971;2:22-4.
■ Interprétation des résultats [7] Hymes J, Fleischhauer K, Wolf B. Biotinidase in serum and tissues.
Methods Enzymol 1997;279:422-34.
[8] Broda E, Baumgartner ER, Scholl S, Stopsack M, Horn A, Rhode H.
Valeurs usuelles Biotinidase determination in serum and dried blood spots--high
Plusieurs études sur des sujets normaux ont été réalisées sur sensitivity fluorimetric ultramicro-assay. Clin Chim Acta 2001;314:
sérum et sur papier Guthrie. 175-85.
Une première étude réalisée sur 936 sujets sains a donné des [9] Kumasaka K, Muratsugu M, Fukui T, Kimura M, Takagi Y,
valeurs de l’activité moyenne à 7,0 ± 1,9 nmol/min/ml sur le Hashizume N. A new quantitative analytical method of serum
sérum et une moyenne à 0,24 ± 0,07 nmol/min/ml pour des biotinidase activity using biocytin as a substrate and its clinical
taches de sang sur papier buvard pour 651 nouveau-nés, âgés de significance in Japan. Clin Chim Acta 2001;306:71-7.
[10] Schulpis KH, Gavrili S, Tjamouranis J, Karikas GA, Kapiki A,
7 jours.
Costalos C. The effect of neonatal jaundice on biotinidase activity.
Ils expliquent la grande différence des valeurs mesurées en
Early Hum Dev 2003;72:15-24.
partie par les conditions de transport et de conservation
[11] Knappe J, Bruemmer W, Biederbick K. Purification and properties of
différentes et pour partie par des températures de réaction et des biotinidase from swine kidney and lactobacillus casei. Biochem Z 1963;
temps d’incubation différents selon les protocoles, la technique 338:599-613.
étant fluorimétrique [8]. [12] Weissbecker KA, Gruemer HD, Heard GS, Miller WG, Nance WE,
Une autre étude a permis d’établir chez 129 adultes sains des Wolf B. An automated procedure for measuring biotinidase activity in
valeurs de 5,29 ± 1,29 nmol/min/ml par la technique classique serum. Clin Chem 1989;35:831-3.
au BPAB et 2,71 ± 0,93 pmol/min/ml par une technique [13] Pettit DA, Amador PS, Wolf B. The quantitation of biotinidase activity
microbiologique [9]. in dried blood spots using microtiter transfer plates: identification of
biotinidase-deficient and heterozygous individuals. Anal Biochem
Variations physiopathologiques 1989;179:371-4.
[14] Wastell H, Dale G, Bartlett K. A sensitive fluorimetric rate assay for
Les déficits en biotinidase peuvent être divisés en deux biotinidase using a new derivative of biotin, biotinyl-6-
grandes catégories de patients : les sujets avec des déficits aminoquinoline. Anal Biochem 1984;140:69-73.
profonds, qui possèdent une activité résiduelle entre 0 et 10 % [15] Livaniou E, Kakabakos SE, Evangelatos SA, Evangelatos GP,
par rapport aux sujets sains, et les sujets avec des déficits Ithakissios DS. Determination of serum biotinidase activity with
partiels dont l’activité résiduelle est comprise entre 10 et 30 % radioiodinated biotinylamide analogs. Methods Enzymol 1997;279:
de celle des témoins. 442-51.
Les déficits profonds incluent les enfants non traités deve- [16] Schulpis KH, Karikas GA, Tjamouranis J, Regoutas S, Tsakiris S. Low
nant symptomatiques et ceux détectés par le screening néona- serum biotinidase activity in children with valproic acid monotherapy.
tal. Les déficits partiels correspondent aux enfants dépistés par Epilepsia 2001;42:1359-62.
le screening néonatal. [17] Pabuccuoglu A, Aydogdu S, Bas M. Serum biotinidase activity in
L’incidence des sujets déficitaires profonds est de 1/60 000 en children with chronic liver disease and its clinical significance.
Australie et de 1/54 000 au Canada [18]. J Pediatr Gastroenterol Nutr 2002;34:59-62.
Il a été décrit des patients déficitaires profonds, adultes, sans [18] Moslinger D, Stockler-Ipsiroglu S, Scheibenreiter S, Tiefenthaler M,
signes cliniques, ces patients ayant été dépistés par études des Muhl A, Seidl R, et al. Clinical and neuropsychological outcome in 33
patients with biotinidase deficiency ascertained by nationwide newborn
familles d’enfants déficitaires au dépistage néonatal [19].
screening and family studies in Austria. Eur J Pediatr 2001;160:277-
82.
Dépistage néonatal [19] Baykal T, Gokcay G, Gokdemir Y, Demir F, Seckin Y, Demirkol M,
et al. Asymptomatic adults and older siblings with biotinidase
Le gène de la biotinidase a été isolé et caractérisé, il est
deficiency ascertained by family studies of index cases. J Inherit Metab
localisé sur le chromosome 3p25 [20].
Dis 2005;28:903-12.
Actuellement, aucune corrélation nette n’a été établie entre [20] Knight HC, Reynolds TR, Meyers GA, Pomponio RJ, Buck GA,
génotype et phénotype malgré un grand nombre de mutations Wolf B. Structure of the human biotinidase gene. Mamm Genome 1998;
décrites [21]. 9:327-30.
Il est à remarquer que les mutations retrouvées lors du [21] Hymes J, Stanley CM, Wolf B. Mutations in BTD causing biotinidase
screening néonatal ont une fréquence différente de celles des deficiency. Hum Mutat 2001;18:375-81.
enfants symptomatiques [22]. Les auteurs émettent l’hypothèse [22] Norrgard KJ, Pomponio RJ, Hymes J, Wolf B. Mutations causing
que certaines de ces mutations communément retrouvées dans profound biotinidase deficiency in children ascertained by newborn
les dépistages ne développent pas de signes cliniques ou des screening in the United States occur at different frequencies than in
signes intermédiaires ; ils préconisent, étant donné l’innocuité symptomatic children. Pediatr Res 1999;46:20-7.
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Biotinidase ¶ 90-10-0215
[23] Wolf B. Children with profound biotinidase deficiency should be
treated with biotin regardless of their residual enzyme activity or
genotype. Eur J Pediatr 2002;161:167-8.
O. Rigal ([Link]@[Link]).
Service de biochimie-hormonologie, hôpital Robert-Debré, 48, boulevard Sérurier, 75019 Paris, France.
Toute référence à cet article doit porter la mention : Rigal O. Biotinidase. EMC (Elsevier Masson SAS, Paris), Encyclopédie Médico-Biologique, 90-10-0215,
2006.
Disponibles sur [Link]
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décisionnels supplémentaires Animations légaux au patient supplémentaires évaluations
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