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REPUBLIQUE RCICOTE
réalisée par ERIS – [email protected]
D'IVOIRE
TRENTE ET UNIEME ANNEE. - W 14 UNION - DISCIPLINE - TRAVAIL JEUDI 13 AVRIL 1989

J URNAL 0 I IEL
DE LA REPUBLIQUE DE COTE D'IVOIRE

EDITION
LOIS ET ACTES REGLEMENTAIRES
paraissant Ie jeudi de chaque semaine

ABONNEMENTS (} MODS UN AN ABONNEMk:NTS ET INSERTIONS ANNONCES ET AVIS

Cdt!;! d'ivoire e, pays de la La Iigne..... ..... . .... 1.500 frnncs

CAPTEAO : voie ardine-ire. . . 10.000 19.000 Les abonnements et insenions seront adresscs au
Service des Joumaux orficids de Is Repuhlique (II n'est jamais compte mains de 15,(}oo francs
voie aerienne . 15.000 26.000
de Cote rl'lvoirc, B.P. V 70 Abidjan. pour les annonces).
,[ranger: France el pays extcricurs
commuos : voie ordinaire. 12.000 22,001) Toute demande de changcmen. d'adresse dcvra Chaque annonce repetec. Moili\! prix
__
_f--_---c____'c:occiecc'=',,';"''"'''n,,'~"'~=___='C".·"""""=-_JO'"'""·"""=_II eJJ_e_a~s:9J1JP_'lglJ-e-e~e~LS-O!rune_de_85---.Imncs-lI _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
AUlres pays: vole ordinairc . 12.000 22.000
vaie aerienne. 18.000 34.000 Les abonnements eI Ics IInnonccs sont payablcs
Prix du numero de J'anne!! couranle 400 d'!lvance au Service des Journaux officiels de
Prix du numero d'unc annee entericurc. .. 500 lu Repubflque de Cote d'lvoire C.C.P. 1I542 Les :mnonces devront parvenir au plus lard Ie
Par la peste : mnjoration de 85 F par numero, Abidjan. jeudi pr&:edant la date de parution du ({ J .0. )).

SOMMAIRE PARTIE OFFICIELLE

PARTIE OFFICIELLE ACTES DU GOUVERNEMENT

1989 ACTES DU GOUVERNEMENT MINISTERE DE LA SANTE PUBLIQUE

ET DE LA POPULATION

MINISTERE DE LA SANTE PUBLIQUE ARRETE n 0 250 MSP. DSPH du 18 novembre 1988 MSP.
ET m: LA POPULATION DSPH fixanl les normes Ii respecler pour fa confection
de certaines denrf?es alimentaires et de boissons nOn
1988
almalisees.
18 nov. . Arrete nO 250 MSP. DSPH. fixant les normes
a respecter pour la confection de cert;;unes den- LE MINISTRE DE LA SANTE PUBLIQUE ET DE LA POPULATION,
rees alimentaires et de boissons non alcoolisees. 117 Vu Ie dcerct nO 88~799 du 6octobre 1988 portant nomination des
rnernbres du Gouvemement ;
Vu Ie deeret n° 84 721 du 30 rnai 1984 portant attributions tlu
z

PARTIE NON OFFICIELLE ministre de la Sante publique et de 1a Population;

Vu Ie deeret n° 84-947 du 3 aout 1984 modifiantle deeret n° 84-722
du 30 mai 1984 portant reorganisation du ministere de 1a Sante
Sous-prCfecture de Danane. - Avis d'enquetc de commodo publique et de la Population;
et incommodo. 124 Vu la loi n° 63-301 du 26 juin 1963 relative a 1a repression des
Seus-prefecture de Danane. - Avis d'enquere de commodo frandes dans la vente et la fabrication des marchandises, denrees
el incommodo. alimentaires et des produits agricoles ;
124
Yu Ie decret n° 73·437 du ler septembre 1973 portant application
SOlis-prefecture de Danane, - Avis d'cnqucte de commodo de Ia Ioi n° 63-301 du 26 juin 1963 ;
et incommodo. 124
Vu les necessites de services,
Conservation de la Propriete el des Droits fonciers. - Bureau
d'Abidjan. - Avis de demandes d'immatriculations. 124 ARRETE:
Article premier. - Pour etre reconnus propres a 1a
Direction des Recettcs domaniales et de la Conservation consommation, les eaux minerales, les eaux de distribution,
fonciere. - Avis de bornage. 126 les boissons aqueuses non alcoolisees, les derives du lait, les
plats cuisines et les conserves alimentaires doivent satisfaire
Ministere de J'Agriculture. - Sous-direction des l\ffaires aux criteres micro biologiques fixes au present arrete et veri-
dom
d •. fila Ics rura Ies. - Concessions domaniales.
. - Avis
fies scion les dispositions dccrites en annexe. En outre, ils
e demandes de concessions rurales. 126 doivent etre exempts de toxines et doivent etre conformes a
Avis et annonces. 128 la composition qualitative et quantitative indiquee par Ies
fabricants.
118 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE DE COTE D"lVOIRE
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Art. 2. - Les eaux minerales et caux d'alirnentation humaine, les boissons aqueuses non alcoolisees ct les bois sons
sucrces (Fanta, orangina! jus de fruit~ etc.) doivent satisfaire aux criteres microbiologiques suivants :

Micro~orga~
nismes ae;'r;- Coliformes Slaphy/ococ- Salmonella
Designation bies dans Coli/ormes (ecaux par (;USaureus par dans
100 milli- par gramme gramme gramme 25 grammes
metres

Eaux mincraJes et eaux pour alimentation. 100 0 0 0 0

Boissons aqueuses non a1coolis'{,'ts, boissons
sucrees ....... > •••••••••••.. . ...... 100 0 0 0 0

~
2° La presence d'nn seul germe pathogene suffit pour declarer l'eau ou la boisson incriminee impropre ala consom- t
maHon.

I
Art. 3. - Les laits fermentes (yaourts, dogue,;, kefir, elc.), les fromages frais pasleurises el les domes fralches daivent
satisfaire aux criteres m.icrobiologiques suivants :

Micro~orga- Acidite expri~

~
nismes aero- Coli/ormes J~OIiJormes Slaphylococ- Salmon.ella mee en acide
Designation bies a 30" C 30" C (par ecaux (par eMS aureus dans lactique dans
(par gramme) gramme) gramme) (par gramme) 25 grammes fa partie non
gr-flsse

I
Laits fermentes (yaourt, degues) ..... · . 10 1 Absence
Laits geJifies et laits pasteurises aromatises 10' 10 1 Absence
. .......
Fromage frais pasteurise .... .. 10 1 10 Absence
Creme de consommation pasteurisee ... 3.10'
phosphate conditio nne 1 10 Absence 2,5
i

I
negative 10 Yrac 100
Glaces et cremes glacees ... ... . .... 3.10' 10' 1 10 Absence
Caseines ct cascinales ...... 3.10~ et flore
thermophile Absence
5.10' dans 0,1 g Absence

Art. 4. - Les criteres microbiologiques relatifs aux vi~ndes hachees, aux viandes cuitcs, aux produits de charcu-
terie, aux plats cuisines sont Ics suivants :

M icro~orga- Anaerobies
Coli/ormes COli/ormes Slaphylococ- Salmonella
nismes aero- suI. reduc-
Designation 30 C (par
0
!ecaux par cus par dans
bies 30 0 C leurs 46" C
(par gramme)
gramme) gramme gramme 25 grammes
(par gramme)

Viandes hachees a I'avance ou it la de-

mande . . . . . . . . . . . .
" • •·. • • • • • • • 0 • 5.10' 10' 10' 10' (1) 30 Absence
Plats cuisines it !'avance ............. (2) 3.10' 10' 10 10' 30 Absence
Produits de charcuterie crus, h~khes :
- Soumis a dessiccation et a consom-
mation en I'etat . ................. 3.10' 10' 10' 5.10' 50 Absence
- A consommer aprcs cuisson . 3.lO' 10' 10' 10' 10' Absence
Produits de salaison crus sales et ou seches
tranChf$ ou non .. ........... •• _" 0- (3) 3.10' 10' 10' 5.10' 50 Absence
Produits de charcuterie cuirs, tr'anches
, Oll
non, quencHes .. ...... .. ... ... " " (2)(3) 3.10' 10' 10 10' 30 Absence
"
lambon cuit entier .... . ..... · . 10' 10 Absence Absence Absence Absence
Potages deshydrates .. . ........ .. _." · . 3.10' 10' 10 10' 30 Absence

-- -- ..
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13 avril 1989 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE DE COTE ITiVOIRE 119

10 Tolerance prevue en annexe comprise;

2° Pour les pates farcies du type ravioli, cannelloni, lasagne, les quenelles et les plats cuisines auxquels est incorpore
du fromage. ce critere doit etre interpretc ;
3° Pour les produits de charcuterie eonditionnes sous pelliellle plastique et SOliS vide, Ie critere relatif aux micro-
organisme aerobies 30° C (3.10') par gramme ne s'applique qu'au stade de la fabrication (usine).

Art. 5. - Les critercs microbiologiques relatifs aux produi!s de la peche ci-dessous mentionnes sont les suivants :

Micro-orga- Coliformes Streploco- Anaerobies Salmonella

ni."Imes aero- Staphylococ-
suI. reduc-
Designation bies 30° C
fiicaux (par quesfecaux cus aureus
leurs 46° C
dans
gramme) (par gramme) (par gramme) 25 grammes
(par gramme) (par gramme)

Crustaces entiers cuits n§frigeres autres que

creveHes ......... •• -". > ••••••• -" •• l()' j - - 2 Absence dans
25 grammes
Tous crustaccs y compris crevettes entieres
cuites ou erues, congeU:s Oll surgeles,
crabes ........................ , ... ---10 1- - ----, 2 - Absence dans
25 grammes
Crevettes cuites decortiquees, fI§frigerees et
decortiquees congeiees ou surgeiees ... 10' 10 - 10' 10 Absence dans
2S grammes
Coquillages bivalves et oursins pn:sentcs
vivants ..........
" ... ....... " "" - 3.10~ 2,5 5.10' Absence dans
pour 100 mr pour 100 ml 25 grammcs
( 1)
Cuisses de grenouilles, escargots deco-
quilles surgelcs ou congeles ........ " - - - - 10' Absence dans
1 gramme
Poissons tranches, panes ou non, filets de
poissons frais refrigeres ..... ...... _. l()' 10 - 10' W Absence dans
25 gramrnes
Poissons tranches, panes ou non, filets de
poissons congeies ou surgeles ..... _ .. II)' j - 10' 2 Absence dans
25 grammes
Preparations A base de chair de poissons
haches, crues . . . . . . . . . . . . . . ......
" " 5.10' 10' - 10' 10 Absence dans
25 grammes
Coquilles SaintmJacques et moules pn!cuitcs 10' 10 10' 30 Absence dans
25 gramrnes

10 Cette recherche est effectuee en cas de suspicion particuliere, seion 1es cornmemoratifs. dans 100 millilltres de
melange ({ chair -liquide intcrvalvaire I).

Art. 6. - Les criteres microbiologiques relatifs aux ovoproduits, patisseries et cremes patissieres sont les SUl-
vants :

Micro-orga- Anaerobies
Cob/ormes Colt/ormes Staphylococ- Salmonella
nismes aero- sill. reduc-
Designation 30 0 C (par lecaw< cus aureus dans
bies 30° C
gramme) (par gramme) (par gramme) leurs 46'" C 25 grammes
(par gramme) (par gramme)

patisserie. cremes patissieres ...... 3.10' 10' j 10' 10 Absence

Ovoproduits pasteurises .. " ....... ..... 10' ]0 entero~
bateries 10' - Absence
Blanes d'reufs non pasteurises . ...... - - - - - Absence
120 JOUR"'\I <lII.lCILL DE LA RfYLHLlQUI, D[ (OTic. IYlVOIRL I J avril 1989
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Art. 7. ~ Les criteres microbiologiques relati fs al1X conserves ct semi-conserves sont les suivants

_.-- - --.---- - ._----

.- -
/vlicro-orga- Anaerobies
Co/{{ormes Coli/ormes Staphy/ococ- Salmonella
!1 isrnes aero- suI. I'i?duc-
Designation 30° C f.Oaf !ecaux (par eus aureus 46" C
dans
hies 30° C leurs
gramme) gramme) (par gramme) 25 grammes
(par gramme) (par gramme)

Conserves or semi-conserves pas-

teurisee;; (!) .. . ...... 10" Absence Absence Ab:;ence I Absence Absence

-
Semi-conserves pasteurisees (i) IQ-'
-- --
Absence Absence
-- --
Absence
! Absence Absence

'-

1 Revivification de 1a suspension mere pendant deux hcures a 1a temperature du laboratoire pour Ies semi-conserves
<:)

pastcurisees et pendant trente a quarante-cinq minute:, pour les semi-conserves non pasteurisees.

Art. 8. - L'inspection des etablissements fabricants de modalitcs d'intcrprctation des rcsultats d'analyses microblologiques,
a
produits vises Particle premier du present arrete est effec- dans Ie but d'eviter que des conclusions non justifiees ne soiem tirees
tuee par la direction des Services pharmaceutiqucs et 1'1nsti- des resuhals obtenus ;
tur d'Hygiene qui peuvent recourir au Laboratoire national
de la Sante publique, au Laboratoire de Nutrition et de Die- el) En milieu solide les denombrements donnant un nombre de
~~tique de l'InstilUl nat.ional de la Same pubHque, au labo- colonies inferieur it 10 ne peuvent conduire qu'a tine approxima"
tion numerique de la contamination d'un gramme de produiL Dans
.~.toire de l'lnstitut d'Hygiene et. a tout autre laborawirc
ce cas, i1 convicnt d'cxprimcr Ie nombrc de colonies observees pour
competent pour Ie cantIole analytique effectif des nonnes I 'inoelilum-n!el-lement-uti-lisci;-'- : - , - - - - - - - - - - - - - - - _ + _
precitees.
A Poccasion des visites d'inspection, les responsables Jc e) Afin d'ameIiorer la fiabilire des resultats, il est recommancle
ces etablissements sont tenus de presenter aux tnspecteurs, d'u[ilisel' les milieux complcts deshydratcs ou des compos ants de
Ies resultats de controle de qualite des produits vises a base des hydrates (;'[ de suivre scrupuleusemem Jes prescriptions du
l'article premier du present arrete. fabricant.

Art. 9,- Les conclusions des rapports d'inspection seront,

Ie cas echeam, transmises aux differcnts ministeres dont rele- 10 Echan(iilon pour /aboralOire el technique de prise d'essui
vent les statuts des etabJissements concernes.
1.1. _. Echantillon pour laborawire :
Art. 10. - Lc non respect des normes fixees dans Ie pre- La taiHe de l'echamillon pour laborawire d'un produit de meme
sent arrete expose Petablissemem concernc aux sanctions pre- nature doit etre comprise comme suit:
vues par la 10; nO 63-301 du 26 juin 1963 et par 10 deerel
n" 73-437 du 1" septembre 1973. - Portions unitaires de viande et denrecs visees aux articles 2
et 3, tant au niveau de 1a fabrication que des points de vente;
Art. 1J. - La direction des Services pharmaccutiques et S1 possible au mOlns cinq unItes;
l'lnstitut d'Hygiene sont charges de veiller a I'application du - Conserves: cinq unites;
present arrete qui sera public au Journal officiel de la Repu- - Coquillages: Hombre suffisant pour obtenir au laboratoire
blique de Cote d'lvoire. ('inq fois au moins 25 gramrnes de chair et de liquide intervalvaire.
Abidjan, Ie 18 novembre 1988. Il est a noter que Ic laboratoirc doit disposer, pour
conduire les analyses completes, d'environ 500 grammes de produits,
AJphoJlSC DJEDJE MADY. soit cinq fois 100 grammes. ees JOO grammes peuvent etre fournis
---- par une ou plusieurs pieces.
ANNEXE
Cas particulier :
it ('arrete n" 250 du 18 novembre 1988 i\1SP. D.,)·PH. FY.({fl[ les flor- !..ofsqu'jl s'agit d'une production artlsanale pour !aquefle Ie pre-
mes a respecler pour /a con/eCliofl de cenaines denn}es a/imen- levemcnt de cinq ecltantiIlons rem s'averer trop im, -ortant au regard
faires ei de ooissons non aJcoo/isees. a
de ia quantite fahriquee, it pourra etre pTocedc un etalement dans
Ie temps de la prise d;: ces echanldlons.
ObservOlions :
a) Lcs rcsuitals des denornbrements doivent ttre rap· 1.2. - Technique de prise d'essai ;
pones au gramme au au miltilitrc. En cas de recherche, Ie poids
La prise d'cssai deslinee a In preparation de la sllspension mere
ou Ie volume d'ino\.:ulurn doir etre precise;
c[ des dilmions de'imalc:s pone:
0) Les valeurs indiquccs dans Jes rabkaux c!u prese::1t arrete c()r-
rcspondent aux niycaux de contamina1iop. rnicrobienne 00 il est habi- _. Sur lcs parties superfidel;es er profondes, llotamment pour
tue! d'artendre des produits fabriques, transportes et distribues les produit<; en tranche, haches ou divises, ains! que les plats cuisj~
dans des conditions de boones pra[iques professionnelJes en a
nes !'avance ;
matiere d'hygiene ; - Sur la panic profondc du prodult pom Ies viandes (pieces),
c) ~lalgre les cOmraillleS lice:, en rmrticulier a la divcrsire des fabri- IC5 produl[<; de charcuterie (pieces) et !es poissons entiers, apn::s cau-
cat tons dans none pays, il a ete [ell11 Ie plus grand comple posslble te::-isation de la surface;
dans 1a presentc annexc de l'esprir des travaux menes actuel!emem - - Pf)Uf Ies produirs laltiers et seIon la nature des produits,
au ::;cin des insrances intemationates dans les domaines de I'echan- elle pone sur Ie produit homoge~lei::;t au sur ks parties superfi-
tillonnage el de I'interpretation des resuhats, notamment quant aux cielles et profondes.
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13 avril 1989 JOt;RI'AL OFF.ICII'L DE LA REPUBLIQUE DE COTE D-IVOIRE 121

Dans Ie cas d'examcns mrcrobiotogiques, it la suile de toxi- Lorsque les va!curs sont superieures it M, les resultals sont
infections alimentaires, il est necessaire de pra[iquer 1a consideres comme 110n salisfaisants. Mais il est bien evident qu'au-
recherche des germes pathogenes toxicogenes et ou de Jeurs toxines dcla d'un ccrtain ordre de grandeur, la notion de toxicite s'impose
aussi bien en surface qu'cn profondcur. de plus en plus: en tOi.!t etat de cause, Ie produit dojt etre considere
comme wxique ou corrompu lorsque 1a contamination atteit1l1a
2° Inierpretation des resu/tals valcllf microbienne Iimire S qui est fixee dans Ie cas general it 10'.
LC$ 101e~ances liccs aux techniques d'analyses ne sont pas appllca-
Remarque. -- n convient de retenir que la valeur des methodes hIes aux vaJeurs de TVI et de S.
de denombrement microbien n'est pas absolue, queUe que soit la
nature des milieux de culture utilises. II est gcneraicmem admis que
la variabilite peut atteindre 1/2 log. avec les milieux solides et 1 log. 2.2. - Plan a deux classes .
avec les milieux liquides. Ce plan est ainsi designc car les resulta[s des examens interpn!!cs
sur .::ette base permettem de determiner seulement deux classes de
2.1. - Plan a trois: classes contamination. Ce type de plan, qui n'accepte aucune tolerance,
meme de caractere analytique, correspond Ie plus sou vent aux
Principcs :
expressions :
Ce plan es[ ainsi designe patTe que les resultms des examens inter-
pn!tes sur cette base permettent de flxer trois classes de contanti- {( Absence dans ) : le-resultal est (;onstdere comme satisfaisant ;
nalion: « Presence dans » : Ie resultat est considere comme non satisfai-
Celle infcricurc on cgale au critere: m ; sarli; lc p~·oduit est declare impropre it la consommation,
Celie comprise entre le critere m et Ie senil :vI ;
En outre, dans certains cas particuJiers mentionnes aux articles 2
Celie superieure au scuil M ; et 5 du present arrete, it est fait application du plan a deux classes,
m : critere fixe au present arrete. Tous les resultats egaux avec la tolerance analytique.
ou inferieurs sont consideres comme satisfaisants ;
Nt: scuirImme d-<Jacceptat5iTifc, au-dill duquelles rcsu tats
ne sonl plus considenSs cornme satisfaisams, sans que pour autant Nola. - Cc plan est en particulicr applicable aux contaminations par
Ie produit soil cansidere comme toxique. salmonc1k:. Cep~ndam, pour lcs voJaillcs,lO!'squ'il s'agil de contaminar]on
Les valeurs de M sont fixees a: superficielle, Ie 1o .. est considcre commc satisfaisant lorsque Ie rapport
d
_. M = 10 m lors du denombrcmcnl cffcctue en milieu solide ; - ..;;; 1/5, Clam Ie nombre d'unitcs de !'cchanlillon donI Ics rcsllltats sonr
n
.- M = 30 m lors du denombrement effccme en milieu pOSL[ifs.
Jiquide;
- n : nombre d'unites cornposant !'cchantillon ;
2.3. - Cas parliculier des conserves:
- C : nombrc d'unites de l'cchantillon donnant de.'; va leurs
siluecs entre m ct M. Lorsque les conserves a base de denrt~es animares ou d'origine
animalc nc repondcnt pas aux epreuves de slabilitc fixecs a !'ani-
Arplication pratique ([errant compte des variations liees a la tech-
nique microbiotogique, remarque supra) : de 7 du presem alTere la transposilion au lot d'origine ne pOU~fa
intervenir Que dans ]a mesure ou un pian d'6;hantillonnage prea a

a) La quaJite dlliot est consideree comme s3tisfaisantc ou accep- lablemem defini aura etc mis en oeuvre.
table en application de l'article premier du present arrete iorsque,
aucun rcsultat ne dcpasse M
3 ° Dispositions partieuiferes relatives aux echantillons soumis
Les valeurs observees sont a
fa congelation en vue d'une analyse microbi%gique
~ 3 m Lors d'emploi de dijjeriie
milieu solide Rernarque. -- La congelation d'llH echantillon (plat cuisine,
~ 10 m lors d'cmplol Quaiite sarisfaisante viande hacb~c) ... provoque une dlminution plus au moins scnsible,
de milieu liquide . selon Ie cas, du oombre de germes servant de test pour le jugemenr
de la qualit.e rnicrobiologiqut' telle que dennie par la reglernenta-
Les valeLlfs observees sont comprises: tion en vigueur.

Entre 3 r.1 et 10 m (= M) en milieu soUcie j Le fait de congeier un echantiHon d'un produit refrigere peut etre
de nature a pro\'oquer certains litiges (e::hantillon refrigere juge inac-
Entre 10 m ct 30 m (= M) en milieu liquide ceptable, alors qll'un cchamillon du mcmc lot, mais ayant subi une
c congelation, Se revek saci:sra~sant an plan bacteriologique). II
et - t'st ~ 2/5 avec Ie plan n = 5 et e = 2 convient, pour eviter au maximum t'apparition de cette disparile,
n
quali[e acceptable (au tout autre plan d'efficacitc cqui- dt: traiter !es echanlillons dans lcs conditions 5uivantes, lorsqu'ils
valcme ou superieure). devront etre congelcs el conserves en I'eta:.:, prcalablcmcm it ICJ;r
analyse bac\.eriologique.
b) lC5 re!;uita1:s sont consideres cornrne non satisfaisants

Lorsque les vakurs observees sam cOH"Iprises 3.1. - Modaliti:s de congClmion e[ de decongelation

Entre 3 m et 10 m en milieu solide ; a) Conge!at~on precoce ccn.:-luite de mnniere it atleindre la tem-

perature de 10° C k plus raplt!.ement po:,:.ib1e ;
Entre 3 m et 10 m ( = M) en milieu solide
c b) 5LOckagc ct transpon a Hoe temperature ~ - 18° C. La duree
Cl- s;,;2/5. de swckage ne cloit pas cxceder un mois ;
n
, Dans tous les cas Oll les valeurs supcrieures a M som: obser. c) Dccongclation rapide a l'air ambiant ~ une temperature de
v~.. ~e~ndant, Ie seuil de depassement pour Jes micro-organismes I'ordre de 20° C pendant Ie temps Ie plus court possible (inferieur
~e,robles a + 30" C, alars que les aUlres crjU~res sont respecics, dait .{ ltois hellres) sans depasser Ie stade 01; la consistance du produit
laIrc.I'objet d'une interpretation, nOlamment pour :cs viandcs, per me! Ie prelcvement necessairc a la preparation de la suspension
votallles et produits crus. mei·e nemperature voi.~ille de DC C).
122 JOURNAL OFFJeIEL DE LA REPUBLIQUE DE COTE O'IVOIRE 13 avril 1989
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ANNEXE II Couler dans chaque bo'ite 15 millilitres de gelose pour denom~

brement pfealablemem fondue et ramenee a 47° C (+ 10 C). Bien
METHODES GENERALES D' ANALYSES BACTERIOLOGlQUES meianger inoculum et milieu.
1 <I Preparalion de IJechantillon pour essai. - Prise d'essai L 'ensemble de ces operations ne doit pas durer plus de quinze
minutes.
Chaque fois qu'ij est necessaire, il est procede it une homogenei-
sation du produit it I'aide de technique et d'apparcils appropries
(broyeur-homogeneisateur par exemple). Nota. - n est indispensable d' employer des pipettes sterilcs changees pour
chaque dilution et d'homogeneiser a I'aide d'un agitateur pour tubes a essai
Les prises d'essai soot effectuees sur l'echantillon homogimeise Placer les boites retournees dans une etuve a 30'" C
(± I" C). Les laisser soixante-douze hemes (± trois heures).
en tenant compte de la nature des produits et des operations analy-
tiques a conduire. Hies sont en principe de 10, 25 ou 50 grammes Ne rcrenar pour Ie denombrement que ies boites contenant moins de
(dans ce dernier cas, 25 grarnmes sont reserves a la recherche des 300 colonies (et plus de 30 51 possible).
salrnoneHes).
5° Denombrement des interobacteriaceses
2" Suspensions meres et dilutions decimates
Le denombrement s'effectue en gelose au crista! violet, rouge
Dans un flacon contenant 90, tOO ou 125 millilitres de diluant, "eutre, bile, glucose (V.R.B.G.).
introduire asseptiquement 10 ou 25 grammes de produit afin de rca- A partir du flacon contenant la suspension mere (l/5 ou 1/10)
User des suspensions au 1/5 ou 1110. Homogeneises. porter 1 millilitre dans une bOlte de Petri sterile (90 Ii 100 miHi-
Les diluants suivants sont preconises : metres de diametre). Faire I'essai en double.
2.1. - Cas general: Couler 12/13 millilitre de gelose selective fondue et ramenec a
47° C (± 1 0 C). Bien melanger inoculum et milieu. Laisser solidi~
Tryptone sci : fier. Couler en surface environ 9 miltilitres de milieu selectif vierge
"rryptone ........... , , ......... . 1g ramcne a 47° C (± 1 0 C). Les laisser vingtmquatre
heures (± deux heures). Denombrer les colonies {k:s ent~robac~
Chlorure de sodium .. 8,5 g tt:ries sont oxydases et fermentent Ie glucose},"._ _ _ _ _ _ _ _ _-j
Eau dislillee .............. . 1000 ml
Preparation: 6 0 Denombrement des coli/ormes
Chauffer lentement jusqu'a complete dissolmion, ajuster si neces- Les coliformes sont denombrees, SOil en milieu solide (gelose
salre Ie PH it 7,0 (± 0,1), repartir puis steriliser vingt minutes a desQxycholate lactose), soit en milieu liquide par la technique du
121°C±1. nombre Ie plus probable (N.P.P.) a l'aide du bouillon lactose bilie
au vert brillant n:~parti dans des tubes contenant des cloches de
Durham (10 millilitres de bouillon par tube).
Eau peptonnee tampon nee :
Bacto peptone .. 20 g 6.1. - Le denombrement en milieu solide s'effectue a partir du
produit s'il est liquide, des suspensions meres dans les autrcs cas
Chlorure de sodium ................. . 5g et des dilutions decimaJes retenues selon la nature du produit en
Phosphate disodique ..... 9g portam I millililre dans une boite de Petri sterile (90 - 100 milli-
Phosphate monopotassiquc ... 1,5 g metres de diametre). Realiser chaque encemencement en double.
Eau distillee " 1000 ml
Couler cnsuite 13 millilitres environ de gelose desoxycho!ate lac~
Steriliser a 121 "C ± I pendant vingl minutes. pH tose fondue et ramenee a 47° C (± 10 C). Bien melanger inoculum
!inal ; 7,2. et milieu. Laisser solidifier. Recouvrir d'une cOliche de gelose
desoxycholate lactose vierge (9 millilitres environ), laisser solidificr.
2.2. - Cas des produits laitiers . Porter les bOltes retournees a I'ctuve a 30° C. Les laisscr vingt-
quatre heures (± d.eux heures).
Eau peptonnee pour Ie yaourt ; Dcnombrer [es colonies caracteristiques rouge fonce! d'un diametre
Tryptone-se! pour les laits gelifies el empresu[(!s, superieur a 0,5 millimetre en prenam si possible une serie de deux
Phosphate dipotassique a 2 p. 100 pH final entre 7,4 et 7,6 pour boites ou Ie nombre est compris entre 15 et 150.
les cremes frakhes, les framages frais et les caseinates.
A partir des suspensions meres, preparer les dilutions dccimales 6.2. - Le denombrement en milieu liquide s'effectue en triple
en utilisant Ie diluant correspondanl. essal en transferant dans chaque tube de milieu selectif I millilitre
du produit 5'il est liquide ou de la suspension mere puis en operant
de la me-me maniere pour les dilutions suivantes .
3 ° Rectification - Porter les tubes a l'etuve a 30 0 C (± 10 C). Les laisser vingt~
quatre quarante-huit heures (± deux heures) ;
A I'exclusion des produits laitiers, 5i Ie produit a subi un traitem
- Pour chaque dilution (y compris suspension mere et produit
mem thermique ou s'il a ete congele ou encore s'il renferme des sels Jiquide) compter les tubes positifs, c'est-a-dire ceux qui presentent
pouvant exercer une action inhlbitrice (Na No 3, NaNo 2) ... apres un degagement gazeux dans la cloche de Durham et calculer le nom-
homogeneisation, laisser Ie flacon a la temperature du laboratoirc
bre Ie plus probable a Paide des tables de reference.
(20 0 C ± 2{1 C) pendant trente a quarante-cinq minutes (optimum
quarante minutes).
7° Denombrement des coli/ormes !ecaux
4° Denombrement des micro-organismes aerobies iJ 30" C Enterobacteries permettant Je lactose aux temperatures elev~s.
II s'effectue :
Porter en double I millilitre de l'echantillon pour essai s'il est
liquide ou 1 millilitre de suspension mere dans Ie cas des aut res pro- -- Soit en milieu solide, selon ies memes modalites que pour
duits, dans des boites de Petri steriles (90 a 100 millimetres de dia~ les coliformes mais portant les boTtes de Petri ense-
metre). Pratiquer de la meme maniere a partir des dilutions rete~ mencees a + 44 0 C (± 0,5 0 C) durant vingt~quatre heures
nues en foncHon du produit a analyser. (± deux heures) •

...
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13 avril 1989 JOURNAL OFFICIEl DE LA REI'UBLIQUE DE COTE 1YIVOIRE 123

_ Soit en milieu liquide (technique du N.P.P.) en repiquant 10 0 Denombrement des Sfreptocoques !ecaux
a I'aide d'une anse bouch;~e les tubes de bouillon lactose bile au vert (ne concerne que fes produits de fa peche)
brillant trouves positifs lars du denombrement des coli formes, dans
des tubes de ce rneme bouillon. II s'effectue en milieu liquide par la technique du nombre le plus
probable (N.P.P.).
Les tubes cnscmcnces sont incubes en bain d'eau a 44 c 0

(± 0,5 0 C) vingt-quatre -
quarante-huit heures (± deux hcures).
Ensemencer chaque tube de 10 miHilitres de milieu de tothe avec
Compter les tubes positifs, c'cst-a-dire ceux presentant un dega- 1 mi!iilitre de suspension mere au des differentes dilutions au 1/20 t
gement gazeux dans les cloches de Durham et calculer Ie nombre 1/200, 1/2000 (ensemencer trois tubes par dilution).
a
Ie plus probable l'aide des tables de reference.
Faire incuber les tubes a 37° C (± J ° C) vingt-quatre
- quarante-huit heures.
8 <;I Denombrement de staphylococcus aureus
A partir du produit, s'il est liquide, de la suspension mere et/ou Repiquer lcs tubes positifs, c'est-a-dire ceux montant une crois-
des dilutions retenues selon la nature du produit, porter 0,1 milli- sance bacterienne. dans des tubes con tenant du milieu de lilsky (une
litre sur une boite de Petri contenant du milieu de Baird Parker et anse boudee).
etaler I'inoculum a I'aide d'un etaleur de verre sur la surface prea-
lablement sechee du milieu. Ce dernier ne doit pas avoir plus de Faire incuber les lubes it 37<' C (± 10 C) vingtzquatre
quarante-huit heures et do it etre conserve au froid. Effectuer cha- - quarante-huit heures.
que enscmenccrncnt en double. Pour les produits iaitiers, ense-
mencer 1 rnillilitre en milieu de Baird Parker. Compter les tubes positifs (troubles etlou avec pastille violette
au fond des tubes) pour chaque dilution et ca1culer Ie N.P.P. en
Les boltes sont incubees a I'etuve it 37° C (± ]" C) pendant vingt- utilisant les tables de reference .
•atre puis quarante-huit heures.

----Denombr-er-ies-colonies-caracteristiques-;-c'-est::a-::-dire-nolres-;-brH~
lantes d'un diametrc compris entre 0,5 et 2 millimetres, presentant Recherche de salmonella
un liscn.~ blanc opaque, entourees d'une aureole d'cclaircissement En cas d'expertise se conformer aux indications de la norme
du milieu. Certains staphylocoqucs retrouves dans les produits lai~ AFNOR V 08-13. Dans Ies autres cas, utiliscr la technique suivante :
tiers peuvent donner des colonies dcpourvues d'aureole.
Preenrichissement : s' effectue en eau peptonee tamponnee (voir
Repiquer au moins cinq colonies pour les soumeHre au test de annexe 2, 2. I), pendant quatre heures a 37° C
1a coagulase ou de la thermonuclease. (± 10 C) pour res ovoproduits ct ceux dont la teneur microbienne .
initiaIe est presumee importante, et pendant seize it vingt heures a
En cas d'expertise, sc conformer aux indications de Ja norme
AFNOR V OS-OI4. 37 0 C (± I C) dans les autres cas.
<I

Le rapport entre Ia prise d'essai ct Ie volume du milieu doit

elre II 10.
9" Denombrement des anaerobies suljito-rf?ducfeurs d (46 C) D

Ce denombrement peut s'effectuer en milieu S.P.S., T.S.N. ou Enrichissement ; it partir du milieu de precnrichissement, porter
T.S.C. (tryptone sulfite cycloserine), ce dernicr milieu Hant 1 milIilitre dans 10 rnillilitres de tetrathionate de Na et vert brillant
recommande. En raison de sa relative nouveaute, sa composition (T. V.B.) et ! millilitre dans 10 milliIitres de bouillon en seU:nite de
est rappciee ci-apres : Na. Faire incuber a 37" C (± 10 C) pendant vingt~quatrc heures.

Preparation du milieu base : Isolement ; apres vingtzquatre heures et eventueHement quarante-

15 g huit heures d'incubation effectuer, a partir des milieux d'enrichis~
Tryptone ........... _............ .
sement, des isolements a la surface d'un deuxieme milieu seiectif.
Soytone ..... . 5g
Extrait de Ievurc ... " 5g Faire incuber les boites a 37" C (± 10 C) pendant vingt heures
Met.bisulfite de sodium anhydre (SZ Os NaZ) (± deux heures). SI Ie dcveloppement cst insuffisant, poursuivre
1 g
I'incubation.
Citrate de fer ammoniacal: S'il y a presence de colonies caracteristiques ou dou-
Agar-agar. . ... > • __ •••• , 12 Ii 18 g tcuses, en repiquer un nombre suffisant et les soumettre aUK essais
Eau "'" .. " 1 000 mil biochimiques classiques.

Ajuster Ie pH de sorte qu'apres sterilisation, il soit a

7,6 ± 0,1 a 25° c. Repartir en tube de 20 X 200 a raison de Nota:· Dans I'(':ventualite ou l'analyse porte sur de nombreux
19 millilitres par tube. Steriliser quinze minutes a 121 0 C echantillons d'un meme lot, une technique simplifiee peut etre mise
± I C. Conserver a 45 0 C au maximum quinzc jours.
<I en ceuvre. BIle com porte :

Solutions de D cycloserine: Preenrichissement (sans changement) ;

D cycloserine cristallisee 4g
- Enrichissement :
fau ." 100 mil
Un tube de bouillon tetrathionatc incubi: it 43" C
Dissoudre la cycloserine dans ['eau, steriliser par filtrat.ion.
Preparation du milieu complel. (± 0,5 0 C).

Au moment de I'emploi, ajouter la solution de D cycloserine pour lsolement :

~btenir une concentration finale de 4oo/1g/millilitre, soit I milli-
ht.re pour 100 millilitres de milieu, soit 0,20 millilitre pour 20 milli- Sur gelose au vert briHant et rouge de phenol seulement.
mitres ou 0,25 millilitre pour 25 millilitres de milieu.
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