NOM :RAZAFISON Angelo Jean Noel

N° :31 / GM3

1. Généralité

Le microscope électronique de transmission (MET) est un instrument utilisé pour examiner des
échantillons à une échelle microscopique en utilisant des faisceaux d'électrons au lieu de la
lumière visible. Il permet une résolution bien supérieur à celle des électrons à travers l'échantillon
plutôt que de le réfléchir, produisant des images détaillées de la structure interne des objets à
l'échelle nanométrique.

Comme son nom indique ,le microscopie électronique n'est pas basé sur des photons mais sur des
électrons. La résolution du MET est bien plus élevée que celle des microscope optique
traditionnels .En général, la résolution d’un MET peut atteindre jusqu’à quelques pifomètre .Cela
signifie qu’il peut discerner des détails extrêmement petits dans l’ordre de la grandeur des
atomes . Un faisceau d'électrons de haute énergie est transmis à travers un échantillon mince et
l'image se forme sur un écran phosphorescent couplé à un caméra numérique.

La MET permet de nombreuses applications associées aux différentes techniques de préparation

dont notamment des observations fines de structures interne de cellules, bactéries, virus...

2. Définition :

Le microscope électronique de transmission (MET) est un technique permettant d'observer des

organites intercellulaires sur les échantillons coupés ,localiser des molécules avec des marqueurs.

1
C'est en Allemagne que débutent les premiers travaux autour de la conception d'un appareil
optique électronique. Au début des années 30,Max Knoll développe un analyseur à faisceaux
d'électrons, qu'il intègre dans ce que fût le premier microscope électronique de transmission
(MET).

Les chercheurs les utilisent pour examiner les matières biologie (tels que les micros organisme et
les cellules), une grande variété de molécules, les échantillons de biopsie médicales métaux et les
structures cristallines et les caractéristiques des différentes surfaces.

2
 3. Principe de fonctionnement :

Le microscope électronique de transmission (MET) utilise un faisceau d'électrons au lieu de la

lumière pour former un image à très haute résolution.

Voici brièvement comment il fonctionne :

Source d'électrons: Un filament émetteur d'électrons chauffé libère des électrons. Ces électrons
sont accélérés à travers un champ électrique pour former un faisceau d'électrons.

Condensateur magnétique: Le faisceau d'électrons passe à travers un condensateur magnétique,

qui le focalise en un faisceau étroit et parallèle.

Objectif magnétique: Le faisceau d'électrons traverse ensuite un ensemble de lentilles

magnétiques qui agissent comme un objectif pour focaliser davantage les électrons.

Échantillon: Le faisceau d'électrons traverse l'échantillon ultra-mince préparé, généralement en

utilisant une coupe transversale très fine.

Lentilles de projection: Les lentilles magnétiques de projection focalisent à nouveau le faisceau

d'électrons pour former une image sur un écran fluorescent ou un capteur.

Détecteur: Un détecteur enregistre les électrons qui passent à travers l'échantillon, produisant
une image en noir et blanc qui représente la densité électronique de différentes parties de
l'échantillon.

Le MET permet une résolution bien supérieure à celle des microscopes optiques traditionnels en
raison de la courte longueur d'onde des électrons, mais il nécessite une préparation d'échantillons
complexe et coûteuse en raison de la nécessité d'obtenir des coupes très minces pour la
transmission des électrons.

 En cas de préparation :Un échantillon pour le microscope électronique de transmission

(MET) est une étape cruciale pour obtenir des images de haute qualité.

Voici les étapes générales du processus :

Fixation: L'échantillon biologique ou la matière doit être fixé pour préserver sa structure. Cela
peut impliquer l'utilisation de fixateurs chimiques comme le glutaraldéhyde.

Déshydratation: L'échantillon est déshydraté en passant à travers une série de bains d'alcool ou
d'autres solvants pour remplacer l'eau par un milieu compatible avec la résine.

Infiltration: L'échantillon est imprégné d'une résine époxy ou d'un autre polymère qui durcira
pour former une coupe très fine. Cela permet de maintenir la structure de l'échantillon.

3
Inclusion: L'échantillon est placé dans un moule avec de la résine liquide, puis durcit. Cela forme
un bloc solide avec l'échantillon inclus.

Coupe ultra-mince: À l'aide d'un instrument comme un microtome ultramince, des coupes de
l'échantillon d'une épaisseur de quelques nanomètres à quelques centaines de nanomètres sont
réalisées.

Recueil des coupes: Les coupes ultra-minces sont recueillies sur des grilles de support spéciales,
généralement en cuivre ou en nickel.

Contraste: Les coupes peuvent être contrastées à l'aide de colorants spéciaux ou de métaux
lourds pour améliorer la visibilité des structures.

Une fois ces étapes terminées, la grille avec les coupes est prête à être insérée dans le microscope
électronique de transmission pour l'observation. Ce processus garantit que la lumière traverse
facilement l'échantillon, permettant aux électrons de le traverser efficacement pour former des
images détaillées.

4
 4. Rôle spécifique dans la formation de l'image :
 Canon à électrons (gun électronique): source d'électrons qui émet un faisceau
d'électrons.
 Échantillon (specimen): la structure ou la substance à étudier sous le microscope
électronique.
 Porte échantillons (specimen holder): maintient l'échantillon en place pendant
l'observation.
 Sas Canon : Permet d'assurer une étanchéité à vide , nécessaire pour maintenir les
conditions appropriées à l'intérieur de la colonne électrique.
 Diaphragme de condenseur : contrôle la quantité de lumière qui atteint l'échantillon.
 Diaphragme de contraste : Est utilisé pour aju le contraste de l'image. Améliorant ainsi
la visibilité des détails fins dans l'échantillon observé.

5
  Diaphragme de diffraction : contrôle la quantité de la lumière et de la direction de la
lumière diffractée dans le microscope électronique, influençant ainsi la résolution et les
caractéristiques de diffraction de l'image.
 Porte objet : C'est l'endroit où l'échantillon est placé pour être observé sous le faisceau
d'é[Link] doit être conçue pour supporter l'échantillon de manière stable.
 Binoculaire : Permet à l'opérateur de visualiser l'échantillon en trois dimensions en
combinant les images provenant de deux sources,facilant ainsi l'observation détaillée.
 Ecran fluorescent : Affiche l'image résultant obtenue à partir des électrons transmis.

5. Conclusion

Le microscope électronique de transmission (MET) est qu'il s'agit d'un outil puissant permettant
une résolution élevée et une observation détaillée des structures cellulaires et des échantillons à
l'échelle nanométrique. Son utilisation est essentiel en biologie cellulaire,en recherche des
matériaux et en sciences des matériaux, offrants une compréhension approfondie des propriétés et
des caractéristiques des échantillons étudiés . Cependant, le MET nécessite une préparation
minutieuse des échantillons et une expertise technique, ce qui peut représenter des défis pour
certains chercheurs.