INTRODUCTION
Dans le cadre du cours de la microbiologie appliquée il nous a été important
de marie la théorie avec la pratique. D’où la séance de laboratoire pour concilier
ces deux mots. Ainsi, comme tout travail scientifique se doit d’être couronné d’un
rapport qui retrace d’une manière succincte les opérations effectuées. Qui par
ailleurs est le but du présent document. C’est pourquoi, pour notre pratique, le
laboratoire biologique de la faculté de science nous a admis pour élargir nos
connaissances en matière de la pratique.
Notre pratique au sein du laboratoire biologique de la faculté de science a
eu lieu au date du 10/06/2023
A l’instar de l’introduction et la conclusion, le présent rapport portera sur,
bien attendue la présentation de l’entreprise (UNIKIN), le déroulement au sein du
département de biologie (LABORATOIRE), qui constituerons notre premier et
deuxième chapitre respectivement.
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CHAPITRE 1. PRESENTATION DE L’ENTREPRISE
1.1 INTRODUCTION
Appartenant au ministère de l’enseignement supérieur et universitaire, de la
recherche scientifique et technologique, l’université de Kinshasa est une institution
qui se voue à la formation et recherche scientifique.
1.1.1 HISTORIQUE
Lorsqu’en 1425, s’érigera l’université catholique de Louvain au centre de la
Belgique, qui put s’imaginer que 530 ans plus tard, elle s’implanterait à Kinshasa
sous son nom latin de Lovanium ?
Et le premier bâtiment à voir le jour sur le plateau de la colline inspirée à
Léopoldville qui commençait à vivre les premiers soubresauts de ce qui amènera
l’indépendance serait la faculté de sciences. En 1981, avec la création de
l’université de Kinshasa (UNIKIN), pendant la période de l’UNAZA, la faculté des
sciences garda initialement 3 départements à savoir, les mathématiques, la physique
et la chimie. Mais compte tenu de la spécificité des sciences, la faculté garda aussi
des embryons de 2 autres départements à savoir la Biologie et la Géosciences. Ces
deux embryons s’érigèrent en véritables départements au milieu des années 1980.
Le département de biologie est l’un des six départements de la faculté des
sciences a l’université de Kinshasa. Il est constitué des unités de recherche ou des
laboratoires.
1.1.2 SITUATION GEOGRAPHIQUE
L’université de Kinshasa est située a plus ou moins 25km du centre-ville de
Kinshasa, dans la commune de lemba, plus précisément sur Mont-Amba appelé
« colline inspirée »
1.1.3 LA VISION DE L’UNIVERSITE DE KINSHASA
L’Université de Kinshasa entend se maintenir dans la ligne d’excellence
tracée par ses fondateurs. Elle s’engage à offrir un enseignement et une formation
guidés par la créativité, l’innovation et l’excellence.
1.1.4 MISSION DE L’UNIVERSITE DE KINSHASA
La mission de l’université de Kinshasa vise à faire de l’Etudiant et de la
contribution de cet Etudiant au développement économique et social de son pays, le
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centre de toutes ses activités de formation, de recherche, et de développement de la
communauté
1.1.5 LABORATOIRE
Le laboratoire dans lequel nous avions fait nos expériences est situé dans la
faculté de science deuxième entrée premier niveau en longeant le couloir jusqu’à la
porte B8.
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CHAPITRE 2. DEROULEMENT DE L’EXPERIENCE AU
LABORATOIRE
2.1 INTRODUCTION
L’expérience de laboratoire, que nous abordons sous différents aspects
couvrant le développement de la microbiologie, les applications de cette disciple, la
production, les substances utiles microbiennes et leurs exploitations. En étant
Etudiant, les métiers de la recherche et de l’enseignement, pour lesquels nous
aurons les meilleures bases théoriques et pratiques, nous incombe. Cette expérience
de laboratoire nous permettra aussi d’intégrer le secteur industriel spécialisé dans
les biotechnologies microbiennes et les analyses microbiologiques. Nous sommes
aussi appelés à mettre en application nos savoir-faire dans les laboratoires pour
analyser comment les carburants sont consommés par les micro-organismes. Cette
expérience au laboratoire a pour objectif, la sélection par des tris les micro-
organismes bénéfiques (bactéries, champignons, etc.) et les caractériser.
2.2 Milieu de culture
Il est impérieux de comprendre le concept milieu de culture, qui est un
support pour la croissance de micro-organismes (bactéries, levures et moisissures)
afin de permettre leur étude. On cultive les micro-organismes en raison d’étudier
les comportements des microorganismes et cette culture se fait dans les cellules
vivantes.
On distingue :
Le milieu de culture général : c’est un milieu qui n’est pas beaucoup plus
exigeant pour que les micro-organismes poussent ;
Milieu ritone : c’est un milieu qui est sélectionné pour faire le test
antibiogramme qui consiste à prendre l’antibiotique pour adapter au
microbe ;
Milieu spécifique : c’est un milieu qui est spécifique pour X et Y germe. Le
fabriquant conditionne les nutriments pour la croissance des micro-
organismes.
2.3 Les coliformes
Les coliformes décrivent les bactéries à coloration de gram négative
fermentant le lactose avec production de gaz a 35 – 37°C en 48h, ce sont des
bacilles non sporulant, donnant une repose négative au test a l’oxydase, aérobies ou
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anaérobies facultatives, capables de cultiver en présence de sels biliaires ou
équivalents.
Les coliformes comprenant des bactéries vivant dans les intestins
d’animaux à sang chaud, leur présence dans l’eau ou les aliments suppose une
pollution fécale. Ce sont donc des organismes indicateurs de la qualité de l’eau et
des aliments.
On distingue :
Les coliformes totaux : qui renseignent sur une contamination ancienne ;
Les coliformes fécaux : qui renseignent sur une contamination récente.
2.4 Milieux de stérilisation
La stérilisation est une technique destinée à détruire tout germe microbien
par exemple d’une préparation. La première technique a consisté à porter cette
préparation à haute température, c.à.d. 100 à 180°C
On distingue :
Les traitements thermiques : à la chaleur sèche, à la vapeur d’eau
(autoclavage) le processus de stérilisation a la chaleur sèche est accompli
par conduction. En effet, la chaleur est absorbée par la surface extérieure du
dispositif que l’on veut stériliser. Ensuite la chaleur diffuse dans la couche
suivante. Finalement, la totalité de l’élément atteint la bonne température
nécessaire pour obtenir la stérilisation.
figure 1: mini-autoclave
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Les traitements dits « basse température » comme :
Le traitement chimique souvent avec l’oxyde d’éthylène
Le traitement par rayonnements UV ou par rayonnements ionisants par
exposition a un rayonnement gamma
2.5 SABOURAUD DEXTROSE AGAR
A l’aide d’une balance analytique, nous avons pesé 9,75g de la solution de
notre échantillon qui est celui de Sabouraud Dextrose Agar. Pour peser, nous avons
taré la balance. Grâce à l’Erlen Meyer, nous avons mis notre solution, puis nous
avons utilisé le Bechet de 700ml, nous avons également ajouter 150ml de l’eau
dans notre solution de Sabouraud, nous avons utilisé l’éprouvette pour prélever
notre échantillon de l’eau SWISSTA à 150ml, puis nous avons versé dans la
solution. Nous avons amené notre solution à l’ébullition pour faire un mélange
complet, mettre la solution dans le four qui est le Mini-Autoclave (où la
température doit être à 121°C pour stériliser la solution et nous avons lu la
température à l’aide d’un baromètre.
figure 2: Un échantillon de l'eau swissta et le sabouraud dextrose agar
2.6 Montage d’un Kit à filtration
Pour faire le montage d’un kit à filtration, nous avons utilisé une fiole à
vide, un entonnoir bucher, un papier filtre, un Bechet ouvert. Lorsque nous avons
fait le montage du kit de filtration, nous avons prélevé 150ml d’eau, pour la filtrée
dans une fiole à vide. Pour couler le milieu, nous avons utilisé le tube (on incline le
tube pour couler facilement le milieu). On coule également le TBX via le tube.
Après avoir coulé le milieu, nous avons attendu que le milieu se refroidisse pour
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incorporer le milieu. Nous avons incorporé de l’eau (échantillon) dans le TBX. La
qualité d’eau doit être à 1mm pour éviter que la solution soit diluée. Nous avons
mis le papier filtre sur le TBX, puis nous avons attendu les microbes poussés. Nous
avons pris le micro- pipette (on règle la pipette à 100µl qui est équivaut à 1ml).
Pour le prélèvement de l’échantillon qui est de l’eau, on verse cette eau dans le
tube, puis incuber à 30°C pour ensemencer le champignon.
figure 3: kit a filtration Biologique
2.7 Matériels utilisés
Erlen Meyer, Bechet, Eprouvette, Balance analytique, Mini-Autoclave, Réchaud à
gaz, etc.
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CONCLUSION
Somme toute, l’expérience faite au laboratoire ne nous pas seulement
permis de concilie la théorie et la pratique, mais nous a aidée à voir les choses sous
un angle différent qu’auparavant. Ainsi, cette expérience a été d’une importance
capitale du point de vue scientifique et professionnelle et nous tenons a remercié
nos encadreurs car ils se sont sacrifier pour nous donner cette connaissance
pratique qui va nous aider tout au long de notre vie.
