LES ACIDES AMINES DR E.

FERAGA

Universités Constantine 3

Faculté de médecine

PREMIERE Année Médecine

Module de Biochimie

LES ACIDES Amines

PLAN DU COURS (2 Séances)

I. DEFINITION /STRUCTURE /ORIGINE
II. IMPORTANCE BIOLOGIQUE
III. CLASSIFICATION
IV. NOMENCLATURE DES ACIDES AMINES
A. LES ACIDES AMINES STANDARDS
B. AUTRES ACIDES AMINES
V. PROPRIETES DES ACIDES AMINES
A. PROPRIETES PHYSIQUES
B. PROPRIETES CHIMIQUES
VI. METHODES D’ETUDE DES ACIDES AMINES

OBJECTIFS PEDAGOGIQUES

• Connaitre la structure des acides aminés standards

• Décrire les principales propriétés physico-chimiques
• Connaitre les méthodes d’étude d’acides aminés

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❖ I. DEFINITION : Les acides aminés(Aa) sont les constituants fondamentaux des protéines,
Plus de 300 acides aminés ont été inventoriés. On distingue :

A- Les acides aminés standards ou acides aminés naturels : 20 différents acides aminés
protéinogènes, constitutifs des protéines et des peptides.
B- Les acides aminés non standards : ce sont soit

- Les acides aminés non protéinogènes ou Aa modifiés : acides aminés d'une protéine
modifiés après la traduction. Exemples : hydroxyproline, hydroxylysine, phosphosérine.
- Des intermédiaires du métabolisme, des éléments de construction d'autres molécules
(lipides, coenzymes) ou encore des molécules actives. Exemples : ornithine et la
citrulline intermédiaires du cycle de l’urée

STRUCTURE : Les acides aminés ou acides α-aminés sont des molécules de qui ont un
motif structural commun :
– Une fonction acide : carboxylique COOH.
– Une fonction basique : amine primaire NH2.
– Une chaine latérale ou « Radical » R variable d’un acide aminé à l’autre.
– Un Carbone α « alpha ».

• C’est la nature du radical R qui différencie les acides aminés.

• Par convention les carbones des acides organiques sont désignés par une lettre grecque à partir du
carbone porteur de la fonction carboxylique

• l’acide aminé possède un squelette hydrocarboné avec deux groupements fonctionnels amine et
carboxylique.

ORIGINE DES ACIDES AMINES : est double

- Exogène ou Alimentaire : protéines animales et végétale.

- Endogène : synthétiser par l’organisme ou par dégradation des protéines endogènes

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II. Importance biologique : le rôle des acides aminés est multiple

– Structurale : monomères des protéines.
– Métabolique : précurseurs de molécules d’intérêt biologique ou intermédiaires métabolique.
– Rôle énergétique : substrats énergétiques.
– Neurotransmetteurs cérébraux.
– Maintien de la balance azoté.

III. Classification des acides aminés standards : les acides aminés peuvent être classes selon
plusieurs critères :

1. Selon la structure de la chaine latérale R

o Acides aminés linéaires : Glycine, Alanine.

o Acides aminés hydroxylés : Sérine, Thréonine.
o Acides aminés ramifiés : Valine, Leucine, Isoleucine.
o Acides aminés soufrés : Cystéine, Méthionine.
o Acides aminés à fonction acide Dicarboxylique : Acide glutamique (Glutamate), Acide
Aspartique (Aspartate).
o Acides aminés à fonction amide : Glutamine, Asparagine.
o Acides aminés à fonction basique diamine : Lysine, Arginine
o Acides aminés aromatiques : Phénylalanine, Tryptophane, Tyrosine.
o Acide α iminé : Proline.

❑La Phénylalanine, Tryptophane, Tyrosine, Proline et histidine sont des acides aminés
cycliques, les 15 autres acides aminés standards sont dits acides aminés aliphatiques.

2. Selon la polarité de la chaine latérale R ou la charge

A. Acides aminés hydrophobes ou Acides aminés non polaires ou Acides aminés apolaires :
Glycine, Alanine, Valine, Leucine, Isoleucine, Méthionine, Phénylalanine, Tryptophane,
Proline.
B. Acides aminés Hydrophiles ou Acides aminés polaires : 3 types

• Non chargés : Sérine, Thréonine, Asparagine, Glutamine, Tyrosine, Cystéine.

• Positivement chargés : Lysine, Arginine, Histidine.
• Négativement chargés : Acide glutamique, Acide aspartique.

3. Selon l’essentialité des acides aminés :

❖ Acides aminés essentiels : ne sont pas synthétisés par l’organisme, sont source alimentaire et
au nombre de 8 chez l’homme : Leucine, isoleucine, méthionine, thréonine, lysine, valine,
tryptophane, phénylalanine.
❖
❖ Acides aminés non essentiels : ils peuvent être synthétisés par l’organisme : glycine, alanine,
cystéine, sérine, Acide glutamique, Acide aspartique, arginine, histidine, tyrosine, proline,
asparagine, glutamine.

❖ Acides aminés Semi-essentiels : dans certains conditions les acides aminés non essentiels
peuvent devenir indispensables c’est le cas de :

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- L’histidine et arginine sont des aides aminés essentiels chez l’enfant (croissance) et chez
la femme gestante.
- L’arginine est essentielle chez le nourrisson.

4. Selon qu’ils soient glucoformateurs ou cétogènes : 3 types

▪ Acide aminé glucoformateur pur :

• Est dégradé en pyruvate ou intermédiaires du cycle de Krebs.
• Susceptible d’être converti en glucose (néoglucogenèse).
▪ Acide aminé cétogène pur :
• Est dégradé en acétyl-CoA ou Acétoacétyl-CoA
• Susceptible d’être converti en acides gras ou corps cétoniques.
▪ Acide aminé mixte : à la fois et cétogène et glucoformateur.

Aa glucoformateurs purs (14Aa) Glycine, Alanine, Sérine, Thréonine, Valine, Cystéine, Méthionine,
Glutamate, Aspartate, Glutamine, Asparagine, Arginine, Proline, Histidine
Aa cétogène pur (1Aa) Leucine
Aa Mixtes (5Aa) Isoleucine, Lysine, Phénylalanine, Tryptophane, Tyrosine.
Tous les acides aminés sont glucoformateurs sauf la leucine.

IV. Nomenclature des acides aminés :

❖ Nomenclature des Aa standards : Il existe deux types de nomenclature :

– Abréviation en trois lettres (première lettre majuscule)

– Symbole en une lettre (majuscule) : plus compact, utilisé pour comparer la séquence en acides
aminés de protéines semblables.

✓ Autres acides aminés standards :

o Sélénocystéine : découvert en 1999
▪ Structure semblable à cystéine, mais avec un atome de sélénium remplace
l'habituel soufre
▪ Présent chez tous les mammifères (y compris l’homme) et chez les bactéries.
▪ Exp : enzyme peroxydases de glutathion.

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❖ Les acides aminés non standards :

• Aa non protéinogènes ou modifiés

• Acides aminés entrant dans des métabolismes

V. PROPRIETES DES ACIDES AMINES

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A-PROPRIETES PHYSIQUES :
1/ Solubilité :

– Les acides aminés sont solubles dans eau.

o La solubilité dans l’eau dépend de leur chaine latérale, Elle augmente :
▪ Avec la diminution du nombre de carbone du radical R.
▪ Si R est porteur de fonction polaire : COOH., NH2 ou fonction hydrophile : (OH).
– Les acides aminés sont faiblement solubles dans l’alcool.

2/Configuration stéréochimique :

– Tous les acides aminés ont au moins un ou deux carbones asymétriques (carbone lié à quatre
substituants différents) : ce sont des molécules chirales. À l’exception de la glycine ou glycocolle
qui ne comporte pas de carbone asymétrique (le carbone est lié à deux molécules d’hydrogènes).

– L’atome de carbone asymétrique est appelé centre de la chiralité.

❖ Notion de série D, L : En fonction du groupement NH2 porté par le Cα on définit deux séries :

o Série L : NH2 à gauche

o Série D : NH2 à droite

– Les acides aminés série L représentent la majorité des acides aminés constituant les protéines.
– Les acides aminés série D se rencontrent dans certaines protéines produites par des organismes exotiques
(mollusques), peptidoglycane de la paroi bactérienne, neurotransmetteurs de cerveau (D-sérine)
– Cas d'acides aminés ayant un deuxième centre chiral Exp: Thréonine, isoleucine.
– 2n structures isomériques (n = nombre de centres chiraux)
– Cela correspond à 2 paires d’énantiomères (image l’un de l’autre dans un miroir).
– Des isomères qui diffèrent par un seul des centres asymétriques sont des diastéréoisomères ou épimères.

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3/ Pouvoir rotatoire : les énantiomères possèdent une activité optique : c’est la propriété de dévier la
lumière polarisée. Placés dans le faisceau d’une lumière polarisée plane, ils provoquent la rotation du
plan de polarisation.

- Si la rotation s’effectue dans le sens des aiguilles d’une montre, on dit que la molécule est
dextrogyre (d) (+)
- Si la rotation s’effectue dans le sens inverse des aiguilles d’une montre, on dit que la molécule
est lévogyre (l) (-)

- Cependant, il y’a pas de corrélation directe entre le sens de rotation du plan de

polarisation ou le pouvoir rotatoire et la configuration de l’acide aminé

4/Absorption dans l’ultra-violet : Les solutions d’acides aminés sont incolores, mais sont visible en
l’ultra-violet (UV) avec une absorbance à une longueur d’onde < à 230 nm.

- Les acides aminés aromatiques absorbent les rayonnements UV entre 260 -280 nm.
o La phénylalanine absorbe à 260 nm
o La tyrosine et tryptophane ont un maximum d’absorption dans l’UV à 280 nm du fait de
la présence du noyau aromatique
- Le dimère de cystéine (Cystine) absorbe à 260 nm Absorption Dans L’ultra-violet

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5/ Ionisation : Les acides aminés sont des molécules amphotères : Ils peuvent agir comme des acides et
comme des bases, car tous les acides aminés possèdent au moins deux groupements ionisables :

- Un groupement carboxyle COOH

- Un groupement amine NH2

• À pH acide (riche en protons H +) : le groupe carboxyle –COOH neutre et la fonction amine capte
un proton et s’ionise sous forme de cation–NH3+ chargé positivement, l'ensemble ayant une charge
électrique globale +1
• À un Ph proche du Phi : le groupe carboxylate –COO– chargé négativement et un groupe
ammonium –NH3+chargé positivement, l'ensemble étant globalement neutre : ion dipolaire ou
Zwitterion charge nette est nulle = 0
• À pH basique (pauvre en protons H +) : le groupe carboxylate s’ionise en –COO– chargé
négativement en libérant un proton et un groupe amine NH2 neutre, l'ensemble ayant une charge
électrique globale –1.

Le pHi : pH isoélectrique ou point isoélectrique : c’est le pH pour lequel on a un ion dipolaire ou zwitterion
de charge nulle, ne migrant pas dans un champ électrique.

Le zwittérion : possède autant de charges positives que de charges négatives, par

– Le groupement carboxylique chargé négativement

– Le groupement aminé, chargé positivement
– Les groupements ionisables de leurs chaines latérales.

– Le pHi pour les acides aminés neutres va de 4,8 à 6,3.

– Pour les acides aminés basiques, le pHi s’étende de 7,8 à 10,8

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– Pour les acides aminés acides, le pHi va de 2,7 à 3,2.

Le pHi se calcule en faisant la moyenne des pK autour de la forme zwiterrion

Le pK :de part et d’autre du Phi on définit Les pK qui sont les pH pour laquelle 50% des molécules ont un
groupement dissocié et 50% ont un groupement non dissocié (50% d’une fonction d’un couple est sous frome
acide et 50% sous forme basique).

– pka du groupement α-COOH, pk1 est proche de 2 pour tous les AA

– pKb du groupement α-NH2, pk2 est proche de 9-10 pour tous les AA
– pkr de la chaîne latérale pkr pour les 7 acides aminés à R ionisable(Asp ,Glu ,His ,.Lys ,Arg
,Cys , Tyr).

❖ Courbe de titration d’un acide aminé neutre

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B-Propriétés chimiques :

B1-Propriétés dues au groupement carboxylique COOH

1. Estérification par un alcool : en présence d’un acide fort

-Réaction utilisée pour la séparation des acides aminés en phase gazeuse et liquide, en
produisant des dérivés esters butyliques.

2. Amidification (liaison peptidique) : réaction du groupement carboxylique d’un

aminoacide avec NH3 conduit à un amide.

3. Décarboxylation : elle est possible par deux voies chimique ou enzymatique.

✓ Permet la formation de corps à propriétés particulières (formation d’amine par

décarboxylation) :
o La sérine donne l’éthanolamine (précurseur de la choline)
o L’histidine donne l’histamine (vasodilatateur de la réaction allergique
ou inflammatoire).
o L’acide glutamique donne l’acide gamma-aminobutyrique "GABA"
(neurotransmetteur).

B2-Propriétés dues au groupement amine NH2 :

1. Formation d’imine : « base de Schiff » : réaction avec aldéhyde par addition de

carbonyle.

- La proline dotée d’une fonction amine secondaire ne réagit pas.

2. N acylation : les acides aminés en présence d’anhydride d’acide ou chlorure d’acide

forment des dérivés N-acylés.

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3. Arylation : réaction de SANGER : Le 1-fluoro 2,4-dinitrobenzéne (FDNB) réagit

facilement en milieu alcalin à froid avec les fonctions amines pour former un dérivé N-2,4-
dinitrophénylé de coloration jaune est facile à identifier par chromatographie et doser par
spectrophotométrie à 360 nm. Elle a permis à Frederik SANGER (1953) d'établir la première
structure primaire d'une protéine : l'insuline.

4. Dansylation : Le chlorure de dansyle (1-diméthylamino-naphtalène-5-sulfonyl) réagit

facilement avec les fonctions amines donne un dansyl-aminoacide ( DNS aminoacide) stable
et fluorescent.

5. Carbamylation ou Réaction d’Edman : Le phénylisothiocyanate (PITC) réagit avec la

fonction amine pour donner :

– En milieu alcalin un dérivé N phénylthiocarbamyl (PTC-Aa).

– En milieu acide ce dernier se cyclise en phenylthiohydantoine-amine acide (PTH-Aa)
qui absorbe dans l’UV et facilement séparable par chromatographie (HPLC).

1/2
Acide

– La réaction avec l‘acide aminé N-terminal d'une protéine (n Aa) libère un

PTH-aminoacide et une protéine amputée de son Aa N-terminal (n-1 Aa)
– En répétant le processus, on peut déterminer la structure primaire de la protéine
(dégradation récurrente d’Edman).

6. Désamination : en présence de de l’acide nitreux

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-L’azote dégagé est mesuré par l’appareil gazométrie permet le dosage des acides aminés c’est la méthode de
Van Slyke.

C-Propriétés dues à la présence simultanée du groupement carboxylique COOH et amine NH2

1. Décarboxylation et désamination oxydative ou réaction avec la ninhydrine

– Etape 1: la ninhydrine conduit par désamination oxydative des acides aminés à l’aldéhyde
correspondant avec libération d’ammoniac et de CO2 et la formation de la ninhydrine réduite
(hydrindantine).
– Etape 2: l’ammoniac réagit avec l’hydrindantine et une autre molécule de ninhydrine
pour donner un composé bleu violacé ou pourpre de Rhueman (avec un amine
primaire) à 570 nm.
– Et un composé jaune (avec un amine seondaire) exemple: la proline à 400 nm.

D-Propriétés liées à la chaine latérale : ces propriétés sont celles des fonctions portées par la
chaine latérale.
• Groupement thiols : Oxydation des groupement SH et formation de ponts disulfures
o La cystéine peut être oxydée en cystine.
• Fonctions alcool de la sérine et la thréonine, la fonction phénol de la tyrosine aussi
o Phosphorylation par l’acide phosphorique : formation d’un ester phosphate
o O-Glycosylation
• Fonctions amide
o N-Glycosylation

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VI. Méthodes d’étude :

1. Electrophorèse :

– Principe : séparation des acides aminés par différence de mobilité dans un support sous
influence de champs électrique et dans un milieu tamponné.
– La vitesse de chaque espèce (Aa) migrante dépend :
o Du pH de la solution tampon.
o De la charge de l’Aa qui dépend du point isoélectrique de l’acide aminé pHi.
– La Migration des acides aminés :
▪ Si pH > pHi : Aa chargé (-) : migre vers l’anode (électrode positive).
▪ Si pH = pHi : Aa sous forme zwitterion : ne migre pas.
▪ Si pH < pHi : Aa chargé (+) : migre vers la cathode (électrode négative).

❖ Electrofocalisation (IEF -IsoElectric Focussing) :

– On utilise des tubes étroits contenant un gel.

– Le gradient de pH est généré par des ampholytes, molécules amphotères de synthèse
introduites dans le gel au moment de sa fabrication.
– La migration est effectuée dans un gradient de pH ; chaque Aa migre jusqu'à l'endroit où
le pH est égal à son pHi où leur charge devient nulle.

2. Chromatographie : elle permet la séparation des mélanges par suite à un équilibre entre une
phase mobile (liquide ou gaz) et une phase stationnaire généralement solide (colonne, papier,
gel).

A. Chromatographie sur Couche Mince (CCM) : c’est une chromatographie de partage entre
une phase stationnaire qui est une couche mince uniforme de gel (hydrophile) et la phase
mobile qui est le solvant (hydrophobe).

Elle s’effectue en plusieurs étapes :

– Déposition de l’échantillon (composition inconnue) et des standards

(composition connue) à l’extrémité de la plaque.
– La plaque est disposée dans une enceinte fermée.

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– Migration des Aa par capillarité : Les Aa hydrophobes migrent le plus.

– Révélation des taches de l’échantillon (par la ninhydrine).
– Calcul des Rf (rapport frontal) et interprétation des résultats.

• Rf varie entre 0 et 1.
o Si soluté soluble dans la phase stationnaire = Rf faible.
o Si soluté soluble dans la phase mobile = Rf vers 1.

B. Chromatographie sur Papier : c’est une chromatographie de partage entre une phase
stationnaire qui est l’eau dans la feuille de papier (hydrophile) et la phase mobile : solvant
(hydrophobe).

-Elle s’effectue en plusieurs étapes (mêmes étapes que la chromatographie sur couche
mince)

C. Chromatographie sur colonne : La phase stationnaire est placée dans une colonne, parcourue par
la phase mobile. Les deux phases sont en contact intime.

• Les principales chromatographies sur colonne sont :

- La chromatographie en phase gazeuse (CPG) : le partage se fait entre une phase mobile
qui est un gaz chimiquement inerte et une phase stationnaire représentée par la colonne.
- La chromatographie d'échange d'ions : elle sépare les acides aminés en fonction de leur
pHi ou en fonction de la force ionique (compétition).
▪ La phase stationnaire est une colonne contenant des billes de résine :
• Soit une résine échangeuse de cations (à charges négatives).
• Soit une résine échangeuse d’anions (à charges positives).
▪ La phase mobile : Eluant (une solution) versée en haut de la colonne.
• La chromatographie liquide à haute performance (HPLC) : La phase mobile est poussée
par une pression élevée (grâce à des pompes à haute pression).

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