SPTS 0004
A la fin de la lecture de ce document vous devez :
FICHE TECHNIQUE Connaître les principales parties de votre microscope.
Etre capable de choisir le bon objectif et les bons
Microscope oculaires.
Etre capable de régler votre microscope.
Etre capable d’entretenir votre microscope.
Oculaires
Objectifs
Vis macro et micrométrique
Platine
Condenseur avec diaphragme +
vis de réglage
Diaphragme de champ
1. Les différentes parties du microscope
Les oculaires
Pour régler les oculaires à l’écartement de vos yeux, il faut :
Ecarter lentement les deux oculaires tout en regardant une lame posée sur la platine.
Dès que vous n’avez plus qu’un champ de vision, vos oculaires sont réglés convenablement.
L’échelle se trouvant entre les deux oculaires vous permet de connaître l’écartement de vos yeux et donc un
préréglage rapide lors d’utilisations ultérieures.
L’objectif
En général le microscope dispose de 3 objectifs : 10x (ou 20x), 40x (ou 50x), 100x.
Pour certains objectifs, l’image ne devient nette, que si le lien entre la lame et l’objectif est faite à l’aide d’huile
à immersion. L’objectif 100x est toujours à immersion et certains objectifs 40x et 50x le sont également. Il est
préférable d'utiliser l’huile fournie par le fabricant du microscope ; son indice de réfraction doit avoir les mêmes
propriétés optiques que le verre des lentilles (environ une fois et demi celui de l’eau = 1,515). Les objectifs à
immersion sont rétractiles au contraire des autres objectifs.
La platine
Il s’agit du plateau sur lequel va être posé la lame. On le déplace de gauche à droite et de bas en haut.
L’échelle graduée sur le côté (échelle de Vernier) sert à repérer l’endroit exact de la préparation que vous
désirez retrouver.
Le condenseur avec diaphragme
Le condensateur sert à concentrer la lumière. Plus un objectif est petit et sans immersion, moins on a besoin
de lumière et il faut descendre le condensateur. Au contraire, le condensateur doit se trouver au maximum de
sa hauteur pour un objectif de 100x. Le diaphragme est attenant au condenseur. Il se présente comme une
petite barre métallique. Il permet de régler plus finement l’intensité de la lumière.
La vis macrométrique (mise au point rapide) et la vis micrométrique
Les deux vis situées sur les côtés du microscope sont imbriquées. La grande vis est la vis de mise au point
rapide (macro). Elle permet de descendre entièrement dans un premier temps la platine pour la mise en place
de la lame et de trouver le champ visuel à l'aider du plus petit objectif. La plus petite vis est la vis
micrométrique, elle permet d'obtenir une vision nette.
Le diaphragme de champ
Le diaphragme de champ se trouve dans le socle du microscope. Il permet d’optimaliser l’éclairage (voir
point 3).
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2. Choisir les oculaires et l’objectif
Le choix des oculaires et de l’objectif dépend du type de la préparation à examiner.
Le grossissement de l’oculaire figure sur la bague près des yeux : 6x, 7x, 10x.
Le grossissement est calculé par la multiplication du grossissement de l’oculaire par celui de l’objectif. Il donne
l’agrandissement total de l’image.
oculaires objectif Agrandissement total
7x 100x 700x
10x 100x 1´000x
Il est conseillé de travailler avec le grossissement le mieux adapté selon les exemples suivants :
- Sédiment urinaire (diminuer la lumière à l’aide du diaphragme ) :
oculaires 10x / objectif 40x = 400x
- Numération des cellules sanguines (globules blancs ou rouges) :
oculaires 10x / objectif 40x = 400x
- Répartition différentielle hématologique :
1er temps, oculaires 10x / objectif 10x ou 20x = 100x ou 200x
2ème temps, oculaires 10x / objectif 100x (ou 50x) à immersion = 1000x ou 500x
- Recherche de parasites :
1er temps, oculaires 10x / objectif 10x ou 20x = 100x ou 200x
2ème temps, oculaires 7x / objectif 100x à immersion = 700x ( idéal, si pas possible, 1000x)
3. Régler le microscope selon le réglage de Köhler
Le réglage de Köhler permet d'avoir un éclairage optimal de l’image (centré, homogène et contrasté).
1. Placer une lame propre ou une préparation colorée sur la platine.
2. Remonter le condenseur jusqu’à la butée.
3. Mettre au point avec l’objectif à plus faible grossissement (en général 10x).
4. Fermer presque entièrement le diaphragme de champ.
5. Abaisser légèrement le condenseur jusqu’à ce que l’image du diaphragme (rond noir) soit la plus nette possible (E).
6. Centrer le diaphragme de champ à l’aide des deux vis de centrage du condenseur (F).
7. Ouvrir le diaphragme de champ presque jusque sur le bord du champ visuel. Le centrer puis continuer à
l’ouvrir jusqu’à obtenir un seul rond lumineux (G).
E F G
4. Entretien du microscope
En dehors du temps d’utilisation, recouvrir le microscope d’une housse en tissu (ou plastique) pour le protéger
de la poussière.
Nettoyer les objectifs avant et après chaque utilisation à l’aide de papier spécial pour optique ou d’un chiffon en
coton très doux.
Essuyer l’objectif à immersion après chaque usage. Si des restes d’huile durcissent sur l’objectif, l’image ne
sera pas nette. En général le papier spécial « pour optique » suffit. En cas de dépôt d’huile, prendre un peu de
xylol ou de toluène (attention ! produits inflammables et irritants) pour nettoyer l'objectif, puis essuyer avec un
papier ou un chiffon sec (ne pas utiliser d’alcool ou d’autres solvants car il y a un risque de décollement des
lentilles).
Dépoussiérer le microscope à l’aide d’un petit pinceau et les zones sensibles à l'aide d’une poire en
caoutchouc pour lentilles.
2ème Mise à jour Mars 2020 Evelyne Mertz, Dagmar Kesseler
1ère Mise à jour Juin 2012 Stéphanie Bourgeois, Laurence Vernez, Dagmar Kesseler
Création Décembre 2008 Saïd Marzouk, André Deom et Michel Rossier
CSCQ. AUCUNE COPIE DE CE DOCUMENT N'EST AUTORISEE SANS L’ACCORD DU CSCQ.
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