Rapport de stage :

Bactériologie médicale

Période de stage du : 22avril au 11mai 2024

Lieu : Hôpital universitaire international cheikh
khalifa ibn zaid
Filière : technicien de laboratoire 2émme année
Réalisée par : SALMA BENDAHOU

Remerciement :
Réalisée par : salma bendahou
Tout d’abord je tiens de remercier au
premier notre doyen de la faculté Pr RACHID
FARES et notre coordinateur de filière Mr
HICHAM BOUCHEHTA et nos profs et Mr
Youness, et à tout le personnel qui ont veillé
de loin ou de près, le déroulement de notre
stage.
Je tiens à exprimer, mes sincères
remerciements aux personnels de l’hôpital
qui nous ont donné leurs aides nécessaires
dans notre stage.

Réalisée par : salma bendahou

 Sommaire :

• Introduction……………………………
• Objectifs de stage……………………
• Les phases analytiques……………
• Méthodes Analytiques…………..
• Antibiogramme………………………
• HEMOCULTURE……………………….
• Conclusion………………………………

Réalisée par : salma bendahou

 Introduction:
Mon stage au laboratoire d’analyses médicales de
l’Hôpital Universitaire International Cheikh Khalifa
m’a permis d’approfondir mes connaissances en
bactériologie médicale. J’ai participé activement aux
analyses et aux procédures, collaborant avec une
équipe de professionnels dévoués. Ce rapport
retrace mon parcours et met en lumière l’apport de
cette expérience dans mon projet professionnel.
L’Hôpital Universitaire International Cheikh Khalifa
est un établissement pluridisciplinaire privé situé à
Casablanca, Maroc. Son laboratoire d’analyses
médicales est rattaché à l’Université Mohammed VI
des Sciences et de la Santé (UM6SS) et dispose d’un
plateau technique sophistiqué équipé d’automates
de dernière génération12.

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 Objectifs de stage:
o Vérifier les prélèvements et la conformité des échantillons
o Identifier les étapes pour le diagnostic des infections
courantes.
o Consigner correctement les résultats d’analyse.

• Interpréter les résultats des analyses, notamment :

o Examen cyto-bactériologique des urines.
o Examen cyto-bactériologique d’une ponction.
o Coproculture.
o Hémoculture.
o Pratiquer un antibiogramme
o
• Pratiquer des techniques telles que :
o Numération des globules blancs et rouges dans un
liquide biologique.
o Coloration de Gram (à partir d’un prélèvement et d’une
culture pure).
o Détermination de la formule leucocytaire à partir d’un
liquide de ponction.
o Numération de germes sur culture en milieu gélosé.
o Isolement bactérien en quadrants sur milieu gélosé.
o Réalisation et lecture d’un antibiogramme.

Les phases analytiques :

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Pré analytique : La phase pré-analytique en
bactériologie est essentielle pour garantir la qualité des
résultats. Voici quelques aspects pratiques concernant les
échantillons reçus :
Nature des échantillons :Les échantillons reçus peuvent
varier en fonction de la pathologie suspectée :
▪ Urine : Pour les infections urinaires.
▪ Sang : Pour les bactériémies, septicémies,
etc.
▪ Expectorations : Pour les infections
respiratoires.
▪ Ponctions : Liquide céphalorachidien, liquide
articulaire, etc.
▪ Selles : Pour les infections gastro-
intestinales.
▪ Autres : Plaies, prélèvements cutanés, etc.

Phase analytiques : la phase analytique est cruciale pour obtenir

des informations précises sur les bactéries présentes dans un
échantillon. Elle nécessite une expertise technique et une rigueur pour
garantir des résultats fiables.

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 ECBU : examen cytobactériologique des urines est un test
de biologie médicale qui permet de détecter et d’identifier
les bactéries et/ou les leucocytes (globules blancs)
présents dans les urines. Pour obtenir des résultats
fiables, il est essentiel de respecter certaines conditions
lors du prélèvement d’urine :
• Le recueil d’urine doit idéalement se faire le matin. Si
ce n’est pas possible, attendez plusieurs heures après
la dernière miction pour permettre l’accumulation des
bactéries dans l’urine.
Au laboratoire, le prélèvement est rapidement analysé. On
recherche la présence anormale de globules blancs
(leucocyturie) et de bactéries (nombre et espèces
présentes).
Un colorant peut être utilisé pour mettre en évidence
certaines cellules ou bactéries. Le comptage est effectué
par des machines automatisées.

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On considère qu’il y a une infection si le nombre de
bactéries excède 100 000/ml. Entre 103 et 105
bactéries/ml, le résultat est moins clair mais n’exclut pas
une infection urinaire.
Méthodes analytiques :
L’ensemencement : en bactériologie est une étape
essentielle pour cultiver et étudier les micro-
organismes en laboratoire.
Avant d’ensemencer, il faut préparer un milieu de
culture approprié. Les milieux de culture

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Les milieux de culture utilisés en bactériologie sont
essentiels pour la croissance, l’identification et l’étude des
micro-organisme :
Gélose nutritive (GN) :
Milieu généraliste, riche en nutriments.
Permet la croissance de diverses bactéries.
Gélose au sang :
Contient du sang d’origine animale.
Utilisée pour l’isolement et l’identification des bactéries
pathogènes.
Gélose au chocolat :
Contient du sang chauffé pour libérer des facteurs de
croissance.
Utilisée pour les bactéries exigeantes.

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 Gélose Nutritive

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Gélose au sang

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Gélose au chocolat

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La coloration de Gram : est une technique de base
en microbiologie et microscopie optique. Elle permet de
différencier deux grands groupes de bactéries en fonction
de la composition de leur paroi cellulaire. Voici comment
elle fonctionne :
- Les bactéries colorées en rose sont dites à coloration de
Gram négative Leur paroi est plus complexe, contenant
une membrane externe riche en lipides et une fine couche
de peptidoglycane.
- Les bactéries colorées en violet sont à coloration de
Gram positive. Leur paroi est plus épaisse et a un degré de
réticulation plus élevé, ce qui les rend moins sensibles à la
décoloration.
En plus de cette distinction, la coloration de Gram révèle
également la morphologie globale des bactéries,
permettant de les étiqueter en tant que bacilles ou cocci .

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Réalisée par : salma bendahou
Antibiogramme : est un test in vitro qui détermine la
sensibilité ou la résistance des bactéries à des
antibiotiques spécifiques.
Il est réalisé en exposant le micro-organisme à différents
antibiotiques dans un environnement de laboratoire
contrôlé pour évaluer leur efficacité à inhiber ou à tuer les
bactéries.
Les résultats de l’antibiogramme aident les cliniciens à
choisir le ou les antibiotiques les plus efficaces pour traiter
une infection bactérienne.
plusieurs méthodes sont utilisées pour évaluer la
sensibilité des bactéries aux antibiotiques :
Méthode de diffusion (méthode Kirby-Bauer) : Des
disques d’antibiotiques sont placés sur une boîte de
gélose avec des bactéries. La zone d’inhibition autour de
chaque disque est mesurée et comparée à des critères
d’interprétation.
Méthode Etest : Des bandelettes avec un gradient de
concentrations d’antibiotiques sont placées sur des
plaques de gélose.

Systèmes automatisés : La croissance ou l’inhibition

bactérienne est mesurée à l’aide de méthodes optiques ou

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colorimétriques, les résultats étant interprétés par un
logiciel.

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Hémoculture : également appelée culture
sanguine, est un examen de laboratoire essentiel
pour détecter la présence de bactéries ou de
champignons dans le sang d’une personne.
Pour effectuer l’hémoculture, on prélève du sang
dans des flacons contenant un milieu de culture
liquide qui favorise la croissance des micro-
organismes.
Généralement, deux flacons sont prélevés lors d’un
seul prélèvement : l’un pour les organismes aérobies
(qui nécessitent de l’oxygène) et l’autre pour les
organismes anaérobies (qui n’en ont pas besoin).
Ces deux flacons constituent un ensemble
d’hémocultures.
Si un organisme n’apparaît que dans l’un des deux
flacons, il est plus susceptible de représenter une
contamination par la flore cutanée que par une
véritable infection du sang.

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Flacon d’hémoculture

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 Conclusion :

En résumé, ce stage m’a permis d’acquérir des

compétences essentielles dans le domaine de la
bactériologie et de la microbiologie. J’ai pu observer
et participer à des analyses de laboratoire,
comprendre les différentes étapes de
l’ensemencement, de l’antibiogramme et de la
coloration de Gram. J’ai également appris
l’importance de la collaboration entre les différents
acteurs du laboratoire pour garantir des résultats
fiables.
Ce stage a renforcé ma passion pour la recherche
scientifique et m’a donné un aperçu concret du
travail quotidien des professionnels de la santé. Je
suis reconnaissant(e) envers toute l’équipe pour leur
encadrement et leur partage d’expérience.

Réalisée par : salma bendahou