Génétique fondamentale
FMA1
2020-2021
Pr HARDIZI HOUYAM
UPR Histologie Embryologie Cytogénétique
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Comment accéder à la classroom de
Génétique fondamentale
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Mitose
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Cycle cellulaire: généralités
Le cycle cellulaire est une série d’événements organisés et
contrôlés au cours desquelles deux cellules filles identiques à
la cellule mère sont générées.
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Cycle cellulaire: généralités
Lors du cycle cellulaire, la cellule
effectue 4 tâches essentielles:
• Duplication des organites et des
macromolécules
• Réplication de l’ADN
• Ségrégation des chromosomes en 2 lots identiques
• Séparation en 2 par pincement cytoplasmique
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A chaque division cellulaire
• La répartition du matériel génétique doit
se faire à l’identique entre les deux
cellules filles
• Point de départ : début de phase S
• Si problèmes :
➢ Cancer
➢ Anomalies chromosomiques dans les
embryons avant l’implantation
• Dans des lignées cellulaires :
Perte d’un chromosome toutes les 250 à
20 000 divisions (Burns E.M et al. 1999)
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Cycle cellulaire: généralités
Le cycle cellulaire présente 2 étapes:
L’interphase (en 3 phases: G1, S, G2)
La mitose (en 6 phases: prophase, prométaphase,
métaphase, anaphase, télophase et cytocinèse)
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Cycle cellulaire: généralités
Différentes phases
du cycle cellulaire
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But du cycle cellulaire
• Assurer la prolifération cellulaire
• La croissance des tissus et/ ou
• Remplacer les cellules mortes (mort naturelle ou
accidentelle).
Le cycle cellulaire concerne les cellules somatiques mais aussi
les cellules germinales. 10
Durée du cycle cellulaire
La durée du cycle cellulaire est très variable.
Exemples:
• 12 heures pour les cellules intestinales
• 1 an pour les cellules hépatiques
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Durée du cycle cellulaire
• Dans une cellule humaine en culture, l’interphase dure en
moyenne 23 heures.
• L’interphase correspond à la
période comprise entre deux
divisions cellulaires
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Durée du cycle cellulaire
L’interphase comprend:
une phase G1
une phase S
une phase G2
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Durée du cycle cellulaire
Les durées des phases S (10-12h)
et M(1h) relativement constantes.
Les durées des phases G2 et
surtout G1 sont très variables.
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Variation de la quantité d’ADN
• Cette variation concerne les cellules à 2n
chromosomes:
= cellules diploïdes.
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Variation de la quantité
d’ADN
• La multiplication par 2 de la quantité d’ADN se
fait au cours de la phase S
• les chromosomes passent de 1 à 2
chromatides: étapes du cycle cellulaire où se
déroule la réplication de l’ADN. 17
Variation de la quantité d’ADN
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L’interphase
Elle se décompose en 3 phases:
G1, S et G2
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Phase G1
Phase de croissance et de reconstitution des réserves
pendant laquelle la cellule synthétise de l’ARN (transcription)
et des protéines (traduction).
C’est aussi une phase de « décision »
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Phase S
Phase essentiellement caractérisée par la réplication de
l’ADN.
Cependant, la transcription a encore lieu (en particulier pour
les gènes des histones).
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Phase S
La réplication de l’ADN est semi-conservative: elle aboutit
à la formation de deux molécules d’ADN contenant chacune
un brin ancien (=brin parent) et un brin nouveau (= brin
fils= brin néoformé)
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On observe également
la mise en place de la
cohésine: complexe
protéique en forme
d’anneau qui enserre les
deux chromatides
sœurs.
Ainsi, au fur et à mesure
que l’ADN est répliqué,
les deux chromatides
restent accolées. 25
Rôle des cohésines au cours du cycle cellulaire
Phase G2
Phase d’attente et de contrôle avant de lancer la mitose
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Le cycle centriolaire
Définition et rôle du centrosome: Rappel
A- Définition:
Centrosome= centre organisateur des microtubules (MT) ou MTOC.
Le centrosome est constitué de 2 centrioles perpendiculaires l’un à l’autre et de
matériel centriolaire.
Il n’est pas délimité par une membrane et est localisé à l’extérieur du noyau, au
centre de la cellule de la majorité des cellules nucléées.
Les centrioles sont composés de MT particulièrement stables.
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Le cycle centriolaire
B- Rôle du centrosome:
1/ En interphase: en G1 et G0, le
réseau de microtubules s’organise
autour d’un centrosome unique
souvent situé en position centrale
proche du noyau.
Il permet la nucléation des
microtubules et organise la forme et
la polarité de la cellule. 28
Le cycle centriolaire
B- Rôle du centrosome:
2/ Lors de la mitose:
le centrosome, après
duplication, forme les 2
pôles du fuseau mitotique
et assure ainsi la mise en
place du fuseau .
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Le cycle centriolaire
II/ Duplication du centrosome:
Tout comme la réplication de l’ADN, la duplication du
centrosome:
• a lieu au cours de la phase S;
• est un phénomène semi-conservatif;
• est contrôlée, en partie, par des complexes semblables
(complexe Cycline S-Cdk)
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Les phases de la mitose
En phase G2:
Les chromosomes sont
dupliqués mais
décondensés et se
présentent sous forme de
fibres chromatiniennes.
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Les phases de la mitose
Le passage d’un état interphasique
à un état mitotique est déclenché et
contrôlé par l’activation brutale de
l’activité kinasique du MPF
(Mitosis Promoting Factor):
c’est la transition G2/M= passage
de la phase G2 de l’interphase à
l’entrée en mitose.
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Mitose
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Prophase: caractéristiques
• Condensation des fibres
chromatiniennes dupliquées et
disparition du nucléole.
• Mise en place des kinétochores
(Structure protéique tri lamellaire localisée au niveau des
centromères de chacune des chromatides sur lequel se
fixent les fibres du fuseau mitotique).
• Formation des microtubules mitotiques.
• Séparation des centrosomes. 37
Prométaphase: caractéristiques
• Rupture de l’enveloppe nucléaire ou
vésiculisation de l’enveloppe nucléaire (NEB:
nuclear enveloppe breack) par phosphorylation
des lamines qui sont des composants de
l’enveloppe nucléaire.
• Pénétration des MT du fuseau dans l’espace
nucléaire.
• Capture des chromosomes par les MT
du fuseau (= MT kinétochoriens)
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Métaphase: caractéristiques
• Attachement bipolaire des chromosomes
• Formation de la plaque métaphasique.
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Anaphase: caractéristiques
• Séparation des chromatides sœurs
• Déplacement des chromosomes
fils vers les pôles.
• Répartition égale du génome.
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Télophase: caractéristiques
• Arrivée des chromosomes fils aux
pôles.
• Reconstitution de l’enveloppe
nucléaire.
• Décondensation des chromosomes.
• Mise en place de l’anneau
contractile.
• Destruction du fuseau mitotique 41
Cytodiérèse
• Fin de la division cellulaire.
• Séparation des 2 cytoplasmes.
• Reconstitution d’un réseau de MT
interphasiques.
• Reconstitution du noyau
(membranes nucléaires).
• Individualisation de deux cellules
filles 42
PATHOLOGIE DE LA MITOSE
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FAIBLE POUVOIR REPRODUCTIF DES HUMAINS
• Chez les jeunes femmes : Seulement 20 à 25 % de grossesses par tentative
(Bonde et al. 1998 ; Edwards & Brody, 1995) comparé à:
• Chez les babouins captifs: 70% de grossesses par tentative.
• Chez les lapins: 90 % de grossesses par tentatives (Stevens 1997)
• 10 % à 15 % de couples stériles.
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LES ABERRATIONS CHROMOSOMIQUES
Très forte sélection de la conception à la
naissance
➢FCS précoces 60%
➢FC tardives
➢MFIU, mort-nés 5%
➢Naissances vivantes 0,6%
Dans les cellules malignes
➢Hémopathies
➢Tumeurs solides
ANOMALIES DE NOMBRE
Notion de ploïdie
✓ diploïdie normale : 2 lots haploïdes
✓ 46 chromosomes dans l’espèce humaine
✓ aneuploïdie :
▪ excès d ’un chromosome (trisomie) ou
▪ perte d ’un chromosome (monosomie)
✓ polyploïdie: plus de 2 lots haploïdes
Causes????
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INSTABILITÉ CHROMOSOMIQUE DES
PREMIÈRES MITOSES EMBRYONNAIRES
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MITOSE NORMALE
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NON-DISJONCTION MITOTIQUE :
ORIGINE POST-ZIGOTIQUE
MOSAÏCISME 50
La première semaine du développement
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La première semaine du développement
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DPI: diagnostic préimplantatoire
Couple à risque de transmettre une anomalie génétique
FIV/ ICSI
→ Biopsie embryonnaire à J3/ J5
→ Diagnostic génique (NGS, séquençage)
ou chromosomique (FISH)
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INSTABILITÉ CHROMOSOMIQUE DES 3 PREMIÈRES
DIVISIONS EMBRYONNAIRES: UNE DÉCOUVERTE
DU DPI
Images de FISH
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Triploïdie
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LA PREMIÈRE SEMAINE DU DÉVELOPPEMENT
De J1 à J3: Protéines d’origine maternelle Checkpoints non actifs
J3 : Activation du génome zygotique
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INSTABILITÉ CHROMOSOMIQUE ET BLASTOMÈRE
• Le mosaïcisme embryonnaire est responsable du blocage
embryonnaire avant le stade blastocyste
• Tous les chromosomes (les grands +++)
• Indépendant de l’âge
• Près de 70 % de non-implantation
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LA PREMIÈRE SEMAINE DU DÉVELOPPEMENT
L’existence du fort taux d’anomalies
chromosomiques dans les 3 premiers
jours suggèrent: UNE DÉFAILLANCE
DES « POINTS DE CONTRÔLE »
Points de contrôle de la division mitotique :
le spindle checkpoint
➢ Dysfonctionnement du fuseau mitotique
(protéine de centrosomes)
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MITOSE ET CANCERS
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ANOMALIES DE NOMBRE DES CHROMOSOMES ET TUMEURS
PLK4 code pour un membre de la famille polo des sérine / thréonine protéine kinases .
La protéine se localise dans les centrioles ( structures à base de microtubules complexes trouvées dans les centrosomes) - et
régule la duplication des centrioles pendant le cycle cellulaire .
La surexpression de PLK4 entraîne une amplification des centrosomes et le renversement de PLK4 entraîne la perte de 63
centrosomes.
ANEUPLOIDIES ET CENTROSOMES
Amplifications des centrosomes et aneuploïdies
– Rapportées dans de très nombreux cancers solides
– Rapportées aussi dans les hémopathies malignes
Pour éviter les mitoses multipolaires :
coalescence des centrosomes
Risque :
aneuploidie par « lagging chromosome »
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Un Peu de lecture !!
• PLK4 : Gène maitre de la régulation de la
biogenèse du centriole (Hadedanck et
al.2005)
• Surexpression de PLK-4 : amplification du
centrosome chez la drosophile et
augmentation modeste des aneuploidies avec
tumeurs. (Basto R et al. 2008)
• MEF avec PLK-4+/ — :
« amplification » du centrosome par anomalie
de la cytodiérèse avec tétraploïdies. Tumeurs
(Rosario C.O. et al. 2010)
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CONCLUSIONS
Les anomalies de nombre des chromosomes sont une des
causes majeures du faible pouvoir reproductif chez les
humains
• Il existe une grande instabilité chromosomique lors des
premières divisions mitotiques
• Rôle putatif des gènes à effet maternel
• Mutations des gènes à effet maternel et infertilité
• Elles sont associées à de nombreux cancers
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FIN
FIN
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