NORME ISO
INTERNATIONALE 20184-3
Première édition
2021-05
Analyses de diagnostic moléculaire in
vitro — Spécifications relatives aux
processus préanalytiques pour les
tissus congelés —
Partie 3:
ADN extrait
iTeh STANDARD PREVIEW
Molecular in vitro diagnostic examinations — Specifications for pre-
(standards.iteh.ai)
examination processes for frozen tissue —
Part ISO
3: Isolated DNA
20184-3:2021
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Numéro de référence
ISO 20184-3:2021(F)
© ISO 2021
ISO 20184-3:2021(F)
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(standards.iteh.ai)
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
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ISO 20184-3:2021(F)
Sommaire Page
Avant-propos............................................................................................................................................................................................................................... iv
Introduction...................................................................................................................................................................................................................................v
1 Domaine d’application.................................................................................................................................................................................... 1
2 Références normatives.................................................................................................................................................................................... 1
3 Termes et définitions........................................................................................................................................................................................ 1
4 Considérations générales............................................................................................................................................................................. 5
5 Hors du laboratoire............................................................................................................................................................................................ 6
5.1 Recueil des prélèvements............................................................................................................................................................... 6
5.1.1 Généralités............................................................................................................................................................................. 6
5.1.2 Informations relatives au patient/donneur faisant l’objet du prélèvement................. 6
5.1.3 Informations relatives au prélèvement......................................................................................................... 6
5.1.4 Traitement du prélèvement..................................................................................................................................... 7
5.2 Exigences relatives au transport de tissus frais.......................................................................................................... 7
5.2.1 Généralités............................................................................................................................................................................. 7
5.2.2 Préparation pour le transport............................................................................................................................... 7
5.2.3 Au cours du transport.................................................................................................................................................. 8
6 Dans le laboratoire.............................................................................................................................................................................................. 8
6.1 Informations relatives à la réception du prélèvement.......................................................................................... 8
6.2 iTeh STANDARD PREVIEW
Évaluation de la pathologie du prélèvement et sélection de l’échantillon ou des
échantillons................................................................................................................................................................................................. 9
6.3 (standards.iteh.ai)
Congélation du prélèvement, de l’échantillon ou des échantillons......................................................... 10
6.4 Exigences relatives au stockage............................................................................................................................................. 12
6.5 Extraction de l’ADN............................................................................................................................................................................
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6.5.1https://standards.iteh.ai/catalog/standards/sist/629bdb06-c940-40cd-8560-
Généralités.......................................................................................................................................................................... 12
6.5.2 Utilisation de kits commerciaux....................................................................................................................... 13
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6.5.3 Utilisation des protocoles développés en laboratoire................................................................... 13
6.6 Évaluation quantitative et qualitative de l’ADN extrait...................................................................................... 14
6.7 Stockage de l’ADN extrait............................................................................................................................................................. 14
Bibliographie............................................................................................................................................................................................................................ 16
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ISO 20184-3:2021(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso.org/directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
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pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
(standards.iteh.ai)
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
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de l’ISO aux principes dehttps://standards.iteh.ai/catalog/standards/sist/629bdb06-c940-40cd-8560-
l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien8dc5837ff5e0/iso-20184-3-2021
suivant: www.iso.org/iso/f r/avant‑propos.
Le présent document a été élaboré par le Comité technique ISO/TC 212, Laboratoires d’analyses de
biologie médicale et systèmes de diagnostic in vitro, en collaboration avec le Comité technique CEN/
TC 140, Dispositifs médicaux de diagnostic in vitro du Comité Européen de Normalisation, conformément
à l’Accord de coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Une liste de toutes les parties de la série ISO 20184 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www.iso.org/f r/members.html.
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ISO 20184-3:2021(F)
Introduction
Le diagnostic moléculaire in vitro, y compris la pathologie moléculaire, a permis de faire
considérablement progresser la médecine. D’autres avancées sont attendues avec les nouvelles
technologies d’analyse des acides nucléiques, des protéines et des métabolites dans les tissus humains et
les fluides corporels. Toutefois, l’intégrité et le profil de ces molécules peuvent varier considérablement
au cours du prélèvement des échantillons primaires, du transport, du stockage et du traitement. En
conséquence, un résultat de diagnostic ou de recherche peut devenir peu fiable, voire impossible, car
l’analyse subséquente pourrait ne pas déterminer l’état réel du patient, mais plutôt un profil artificiel
qui est généré pendant le processus préanalytique.
L’intégrité de l’ADN dans les tissus peut varier pendant le traitement et le stockage. Les modifications
des molécules d’ADN peuvent avoir un impact sur la validité et la fiabilité des résultats d’analyse. Il
est essentiel de prendre des mesures particulières afin de réduire le plus possible les changements et
modifications de l’ADN décrits pour l’analyse ultérieure.
Par conséquent, une normalisation de l’ensemble du processus, allant du prélèvement des échantillons
primaires jusqu’à l’analyse de l’ADN, est nécessaire. Des études ont été réalisées afin de définir les
facteurs ayant un impact important. Le présent document se fonde sur ces travaux pour codifier et
normaliser les étapes des processus dits de la phase préanalytique pour tissus congelés au regard de
l’analyse de l’ADN.
Dans le présent document, les formes verbales suivantes sont utilisées:
— «doit» indique une exigence;
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— «il convient de/que» indique une recommandation;
(standards.iteh.ai)
— «peut/il est admis/permis» indique une permission;
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— «peut/il est possible» indique une possibilité ou une capacité.
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NORME INTERNATIONALE ISO 20184-3:2021(F)
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro —
Spécifications relatives aux processus préanalytiques pour
les tissus congelés —
Partie 3:
ADN extrait
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie des exigences et fournit des recommandations relatives à la manipulation,
au stockage, au traitement et à la documentation de prélèvements de tissus congelés destinés à l’analyse
de l’ADN durant la phase préanalytique précédant la réalisation d’une analyse moléculaire.
Le présent document s’applique aux analyses de diagnostic moléculaire in vitro, y compris les essais
développés en laboratoires, réalisées par les laboratoires de biologie médicale et les laboratoires de
pathologie moléculaire qui évaluent l’ADN extrait de tissus congelés. Il est également destiné à être
utilisé par les clients de laboratoires, les développeurs et fabricants de l’industrie du diagnostic in vitro,
ainsi que par les biobanques, les institutions et les organismes commerciaux spécialisés en recherche
iTeh STANDARD PREVIEW
biomédicale et les autorités réglementaires.
Le cas des tissus ayant subi un (standards.iteh.ai)
prétraitement de stabilisation chimique avant la congélation n’est pas
couvert par le présent document.
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NOTE Des réglementations ou exigences internationales, nationales ou régionales peuvent également
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s’appliquer à des sujets spécifiques traités dans le présent document.
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2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 15189, Laboratoires de biologie médicale — Exigences concernant la qualité et la compétence
ISO 15190, Laboratoires de biologie médicale — Exigences pour la sécurité
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions de l’ISO 15189 ainsi que les suivants,
s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https://w ww.iso.org/obp;
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http://w ww.electropedia.org/
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ISO 20184-3:2021(F)
3.1
aliquote
partie d’une quantité plus importante d’un matériau homogène, prélevée avec une erreur
d’échantillonnage présumée négligeable
Note 1 à l'article: Le terme s’applique généralement à des fluides. Les tissus solides sont hétérogènes et ne peuvent
donc pas être aliquotés.
[SOURCE: Compendium of Chemical Terminology Gold Book. International Union of Pure et Applied
Chemistry. Version 2.3.3, 2014; the PAC, 1990,62,1193 (Nomenclature for sampling in analytical
chemistry (Recommendations 1990)) p. 1206; et the PAC 1990, 62, 2167 (Glossary of atmospheric
chemistry terms (Recommendations 1990)) p. 2173.]
3.2
température ambiante
température non régulée de l’air environnant
3.3
analyte
composant représenté au nom d’une grandeur mesurable
[SOURCE: ISO 17511:2020, 3.2, modifiée — L’exemple n’a pas été repris.]
3.4
performance analytique
l’exactitude, la précision et la sensibilité d’un essai pour mesurer l’analyte (3.3) concerné
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Note 1 à l'article: D’autres caractéristiques de performance d’essai, telles que la robustesse ou la répétabilité,
peuvent également s’appliquer. (standards.iteh.ai)
3.5 ISO 20184-3:2021
«biobanking»mise en banque de matériel biologique
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processus d’acquisition et de stockage, ainsi que tout ou partie des activités liées au prélèvement, à la
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préparation, à la préservation, aux tests, à l’analyse et à la distribution de matériels biologiques définis,
y compris les informations et les données associées
[SOURCE: ISO 20387:2018, 3.6]
3.6
ischémie froide
état d’un tissu suite à son prélèvement de l’organisme jusqu’à sa stabilisation ou sa fixation
[SOURCE: ISO 20184-2:2018, 3.5]
3.7
diagnostic
identification d’un état de santé sain ou pathologique à partir de ses signes et/ou symptômes, dans
laquelle le processus de diagnostic peut impliquer des analyses (3.10) et essais pour la classification
de l’état d’un individu en catégories ou sous-classes distinctes, laquelle permet la prise de décisions
médicales concernant le traitement et le pronostic à établir
[SOURCE: ISO 20184-2:2018, 3.6]
3.8
ADN
acide désoxyribonucléique
polymère de désoxyribonucléotides se présentant sous la forme de double brin (ADNdb) ou de brin
simple (ADNsb)
[SOURCE: ISO 22174:2005, 3.1.2]
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ISO 20184-3:2021(F)
3.9
DNase
désoxyribonucléase
enzyme catalysant la dégradation de l’ADN (3.8) en composants plus petits
[SOURCE: ISO 20184-1:2018, 3.8]
3.10
analyse
phase analytique
ensemble des opérations destinées à déterminer la valeur ou les caractéristiques d’une propriété
Note 1 à l'article: Les processus débutent avec l’analyte (3.3) extrait et comprennent toutes sortes d’essais
paramétriques ou de manipulations chimiques en vue de réaliser l’analyse quantitative ou qualitative.
[SOURCE: ISO 15189:2012, 3.7, modifiée — Les Notes à l’Article 1 à 3 ont été supprimées. La Note 1 à
l’article a été ajoutée, le terme a été modifié et «phase analytique» a été ajouté comme terme privilégié.]
3.11
macroscopie
analyse macroscopique
contrôle de prélèvements pathologiques à l’œil nu, au cours de leur traitement à des fins d’analyse (3.10)
microscopique ultérieure, en vue d’obtenir des informations de diagnostic
[SOURCE: ISO 20184-1:2018, 3.10]
3.12 iTeh STANDARD PREVIEW
homogène
(standards.iteh.ai)
de structure et de composition uniformes
[SOURCE: ISO 20184-1:2018, 3.11] ISO 20184-3:2021
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3.13
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substance interférente
substance endogène d’un prélèvement (3.18)/échantillon (3.17) ou substance exogène (par exemple
solution de stabilisation) susceptible d’altérer le résultat d’une analyse (3.10)
[SOURCE: ISO 20184-1:2018, 3.12]
3.14
processus préanalytique
phase préanalytique
flux de travail préanalytique
processus commençant chronologiquement par la prescription des analyses par le clinicien, comprenant
la demande d’analyse (3.10), la préparation et l’identification du patient, le prélèvement de l’échantillon
primaire (3.18), son acheminement jusqu’au laboratoire et au sein du laboratoire médical ou de
pathologie, l’extraction des analytes (3.3), et finissant au début de l’analyse (3.10)
Note 1 à l'article: La phase préanalytique comprend des processus de préparation qui influencent le résultat de
l’analyse (3.10) prévue.
[SOURCE: ISO 15189:2012, 3.15, modifiée — Un terme supplémentaire a été ajouté et des détails
supplémentaires ont été inclus.]
3.15
essai d’aptitude
évaluation de la performance d’un participant par rapport à des critères préétablis au moyen de
comparaisons interlaboratoires
[SOURCE: ISO/IEC 17043:2010, 3.7, modifiée — Le terme et la définition sont repris ici sans les notes
d’origine.]
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ISO 20184-3:2021(F)
3.16
température de laboratoire
pour les besoins du présent document, température dans la plage de 18 °C à 25 °C
Note 1 à l'article: Des réglementations locales ou nationales peuvent stipuler des définitions différentes.
[SOURCE: ISO 20184-1:2018, 3.19]
3.17
échantillon
une ou plusieurs parties prélevées à partir d’un échantillon primaire (3.19)
[SOURCE: ISO 15189:2012, 3.24, modifiée — L’exemple n’a pas été repris.]
3.18
spécimen
échantillon primaire
prélèvement
partie discrète d’un liquide corporel, d’une haleine, d’un cheveu ou d’un tissu prélevé à des fins d’analyse
(3.10), d’étude ou d’analyse d’une ou plusieurs grandeurs ou propriétés pour déterminer le caractère de
l’ensemble
[SOURCE: ISO 20184-1:2018, 3.14]
3.19
stabilité
iTeh STANDARD PREVIEW
caractéristique d’un échantillon (3.17), lorsqu’il est entreposé dans des conditions spécifiées, à
conserver une valeur de propriété spécifiée dans des limites spécifiées pendant une période de temps
spécifiée (standards.iteh.ai)
Note 1 à l'article: L’analyte (3.3) pour les besoins du présent document est l’ADN (3.7).
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[SOURCE: Guide ISO 30:2015, 2.1.15, modifié — L’expression «matériau de référence» a été remplacée
8dc5837ff5e0/iso-20184-3-2021
par «échantillon».]
3.20
stockage
conservation d’une matière biologique dans des conditions définies et normalisées en vue de l’utilisation
prévue
Note 1 à l'article: Le stockage à long terme a généralement lieu dans les sites d’archivage des laboratoires ou dans
les biobanques.
3.21
validation
confirmation par des preuves objectives que les exigences pour une utilisation spécifique ou une
application prévues ont été satisfaites
Note 1 à l'article: Le terme «validé» est utilisé pour désigner l’état correspondant.
[SOURCE: ISO 9000:2015, 3.8.13, modifiée — Les Notes 1 et 3 n’ont pas été reprises.]
3.22
vérification
confirmation par des preuves objectives que les exigences spécifiées ont été satisfaites
Note 1 à l'article: Le terme «vérifié» est utilisé pour désigner l’état correspondant.
Note 2 à l'article: La confirmation peut couvrir des activités telles que:
— la réalisation d’autres calculs;
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ISO 20184-3:2021(F)
— la comparaison d’une spécification de conception nouvelle avec une spécification de conception similaire
éprouvée;
— la réalisation d’essais et de démonstrations;
— la revue de documents avant diffusion.
[SOURCE: ISO 9000:2015, 3.8.12, modifiée — La Note 1 et la Note 2 à l’article ont été supprimées; la
Note 3 à l’article a été renumérotée en tant que Note 1 à l’article; une nouvelle Note 2 à l’article a été
ajoutée.]
3.23
ischémie chaude
situation avant que le tissu soit prélevé de l’organisme, mais dans laquelle il est privé de son apport
sanguin normal
[SOURCE: ISO 20184-1:2018, 3.25]
Note 1 à l'article: La perturbation de l’apport sanguin normal varie significativement d’un cas à un autre. Par
conséquent, la durée de l’ischémie chaude et ses effets dépendent des cas individuels et peuvent également
dépendre de l’anatomie artérielle.
3.24
flux de travail
série d’activités nécessaires à la réalisation d’une tâche
[SOURCE: ISO 20184-1:2018, 3.26]
iTeh STANDARD PREVIEW
4 (standards.iteh.ai)
Considérations générales
Pour les instructions générales relatives ISOaux systèmes de management de la qualité de laboratoire
20184-3:2021
de biologie médicale et portant en particulier sur le prélèvement, la réception et la manipulation
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d’échantillons primaires (y compris la prévention des contaminations croisées), voir l’ISO 15189,
8dc5837ff5e0/iso-20184-3-2021
l’ISO/IEC 17025 ou l’ISO/IEC 17020. Les exigences relatives aux équipements de laboratoire, aux
réactifs et aux consommables conformément à l’ISO 15189 doivent être respectées; l’ISO/IEC 17025 et
l’ISO/IEC 17020 peuvent également s’appliquer.
Toutes les étapes des processus préanalytiques, analytiques et postanalytiques (c’est-à-dire le flux
de travail complet) peuvent influencer le diagnostic ou les résultats de l’étude de recherche. Par
conséquent, ce flux de travail complet doit être spécifié, vérifié et validé au cours du développement
de l’analyse. Cela comprend notamment toutes les étapes du processus préanalytique telles que la
demande d’analyse, la préparation et l’identification du patient, le prélèvement de l’échantillon ou des
échantillons primaires, leur acheminement jusqu’au laboratoire de biologie médicale et au sein du
laboratoire de biologie médicale, le stockage et l’extraction des analytes. Les étapes du flux de travail
qui ne peuvent pas toujours être contrôlées (par exemple, l’ischémie chaude) doivent être documentées.
Contrairement à l’ARN ou aux protéines, l’ADN dans le tissu est relativement stable durant les ischémies
chaude et froide. Les modifications de l’ADN, des séquences et des nombres de copies (par exemple,
profils d’hybridation génomique comparative [CGH]) dues à de longues durées d’ischémies froide et
chaude sont inconnues[9]. Cependant, les profils de méthylation de l’ADN peuvent varier en réponse à
l’ischémie[10]. Il convient d’écourter autant que possible le délai jusqu’à la congélation du prélèvement
afin d’éviter une dégradation enzymatique de l’ADN. La durée avant la congélation doit être consignée
et il convient de documenter la température avant la congélation[9].
Au cours de la conception et du développement d’une analyse basée sur l’ADN, une appréciation du
risque doit être effectuée (voir également l’ISO 14971). Des mesures d’atténuation visant à réduire ou
éliminer les risques identifiés doivent être prises, le cas échéant, afin de garantir les performances de
l’analyse.
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