Dosage AST sur ARCHITECT et AEROSET
Dosage AST sur ARCHITECT et AEROSET
ASPARTATE
AMINOTRANSFERASE
7D81-21
49-1284/R1
B7D8B2
ASPARTATE
AMINOTRANSFERASE
Cette notice contient des informations relatives à l'utilisation du dosage Aspartate Aminotransferase
sur les analyseurs ARCHITECT c Systems et AEROSET.
REMARQUE : Lire attentivement cette notice avant d'utiliser le dosage et suivre scrupuleusement
les instructions. La fiabilité des résultats du dosage ne peut pas être garantie si ces instructions
ne sont pas strictement respectées.
Décembre 2009
©2009 Abbott Laboratories
DENOMINATION MISES EN GARDE ET PRECAUTIONS
ASPARTATE AMINOTRANSFERASE Précautions d'emploi
DOMAINE D'APPLICATION 1. Pour diagnostic in vitro.
Le dosage Aspartate aminotransferase (AST) est utilisé pour la 2. Ne pas utiliser les composants au-delà de leur date d'expiration.
détermination quantitative de l'aspartate aminotransférase dans le sérum 3. Ne pas mélanger des composants provenant de kits portant des numéros
ou le plasma humain. de lots différents.
RESUME ET EXPLICATION DU TEST 4. ATTENTION : Ce produit nécessite la manipulation d'échantillons
L'aspartate aminotransférase (AST), également appelée transaminase humains. Il est recommandé de considérer tous les composants d'origine
glutamo-oxaloacétique (TGO), appartient à un groupe d'enzymes qui humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon
catalysent l'interconversion des acides aminés et des acides α-céto les règles "OSHA Standard on Bloodborne Pathogens".3 Les produits
par le transfert de groupes aminés. L'AST et l'alanine aminotransférase contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent
(ALT) se trouvent normalement toutes deux dans la plupart des fluides être manipulés selon les règles de biosécurité de niveau 24 ou autres
corporels mais pas dans l'urine, excepté dans des cas de lésions rénales. règles de biosécurité en vigueur5,6.
Les concentrations d'AST les plus élevées se trouvent dans les tissus PRELEVEMENT ET MANIPULATION DES ECHANTILLONS
du cœur, du foie, des muscles et des reins. Des lésions de ces tissus
peuvent entraîner d'importantes augmentations des concentrations d'AST Echantillons à utiliser
sérique. A la suite d'un infarctus du myocarde, l'AST contenue dans le Les échantillons de sérum et de plasma sont appropriés pour cette
sérum commence à augmenter dans les 6 à 8 heures suivant l'apparition analyse.
de la douleur, atteignant un pic dans les 18 à 24 heures et retombant à • Sérum : Utiliser du sérum prélevé selon les techniques standard de
un niveau normal le quatrième ou le cinquième jour. Les concentrations ponction veineuse dans des tubes en verre ou en plastique avec ou
sériques peuvent atteindre 10 à 15 fois les concentrations normales sans gel séparateur. S’assurer que la coagulation est terminée avant
et l'augmentation est quasiment proportionnelle au degré de lésion d’effectuer la centrifugation. Lors du traitement des échantillons,
tissulaire.1,2 séparer le sérum des globules rouges ou du gel selon les instructions
du fabricant des tubes de prélèvement des échantillons.
PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE
La coagulation de certains échantillons, notamment de ceux provenant
L'AST présente dans l'échantillon catalyse le transfert du groupe aminé de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peut durer
de la L-aspartate vers l'α-cétoglutarate en formant de l'oxaloacétate et du plus longtemps. Des caillots de fibrine peuvent se former dans ces
L-glutamate. En présence de NADH et de malate déshydrogénase (MDH), sérums et engendrer des résultats erronés.
l'oxaloacétate est réduit en L-malate. Au cours de cette réaction, le NADH
est oxydé en NAD. La réaction est contrôlée en mesurant la diminution de • Plasma : Utiliser du plasma prélevé selon les techniques standard de
l'absorbance à 340 nm, provoquée par l'oxydation du NADH en NAD. ponction veineuse dans des tubes en verre ou en plastique. L'héparinate
de lithium (avec ou sans gel séparateur) ou l'héparinate de sodium
Méthodologie : NADH (sans P-5'‑P)
peuvent être utilisés comme anticoagulants. Ne pas utiliser d'héparinate
REACTIFS d'ammonium.7 S'assurer que la centrifugation est adéquate pour éliminer
Kit de réactifs les plaquettes sanguines. Lors du traitement des échantillons, séparer
le plasma des globules rouges ou du gel selon les instructions du
Le kit de réactifs AST, 7D81, contient deux réactifs liquides prêts à
fabricant des tubes de prélèvement des échantillons.
l'emploi conditionnés comme suit :
Pour connaître le volume total d'échantillon requis, se référer au
10 x 70 ml paragraphe PARAMETRES DE DOSAGE de cette notice, spécifique à
10 x 21 ml l'analyseur utilisé et au Chapitre 5 du Manuel Technique correspondant.
Le nombre de tests réalisables par kit est estimé à 3 621. Conservation des échantillons
Ce calcul est fondé sur le volume minimum de réactif dans chaque kit. Sérum et plasma
Composants réactifs Concentration
Durée maximale
Température Bibliographie
β-NADH 0,16 mg/ml de conservation
Malate déshydrogénase 0,64 U/ml 20 à 25 °C 4 jours 8
Lactate déshydrogénase 0,64 U/ml 2 à 8 °C 7 jours 8, 9
L-aspartate 232 mmol/l -20 °C 12 semaines 8
α-cétoglutarate 51,3 mmol/l Guder et coll.8 recommandent de ne pas conserver des échantillons
L-aspartate 100 mmol/l congelés à -20 °C plus longtemps que pendant la durée indiquée ci-
dessus. Dans la pratique, les laboratoires cliniques se voient cependant
MANIPULATION ET CONSERVATION DES REACTIFS obligés d'établir une plage de température autour de -20 °C pour la
Manipulation des réactifs conservation des échantillons. Cette plage peut être déterminée soit à
partir des spécifications du fabricant de congélateurs, soit sur la base
Si des bulles d'air sont présentes dans la cartouche de réactif, les éliminer
des procédures de fonctionnement standard de votre laboratoire relatives
à l'aide d'un bâtonnet neuf. Il est également possible de laisser les réactifs
à la conservation des échantillons.
reposer à la température de conservation appropriée pour permettre aux
bulles de se dissiper. Afin de limiter la perte en volume, ne pas utiliser de REMARQUE : Vérifier l'absence de particules en suspension dans les
pipette de transfert pour éliminer les bulles. échantillons conservés. En cas de présence de particules, homogénéiser et
centrifuger les échantillons afin d'éliminer les particules avant l'analyse.
ATTENTION : La présence de bulles d'air dans les réactifs peut
compromettre la détection correcte du niveau de réactif dans la cartouche, PROCEDURE
entraînant une aspiration insuffisante de réactif pouvant influencer les Matériel fourni
résultats.
7D81 Kit de réactifs AST
Conservation des réactifs
Matériel nécessaire mais non fourni
Les réactifs non ouverts sont stables jusqu'à leur date d'expiration s'ils
• Contrôles
sont conservés entre 2 et 8 °C.
• Solution saline (0,85 à 0,90 % de NaCl) pour les échantillons nécessitant
Le réactif ouvert conservé à bord de l'appareil est stable pendant
une dilution
30 jours.
Procédure de dosage
Pour obtenir la description détaillée de la réalisation d'un dosage, consulter
le Chapitre 5 du Manuel Technique correspondant à l'analyseur utilisé.
Procédures de dilution des échantillons Des données de performance indicatives sont indiquées dans les
Les analyseurs ARCHITECT c Systems et l'AEROSET possèdent des paragraphes VALEURS ATTENDUES et CARACTERISTIQUES
fonctions de dilution automatique ; pour de plus amples informations, se SPECIFIQUES de cette notice. Les résultats peuvent varier d'un laboratoire
référer au Chapitre 2 du Manuel Technique correspondant. à l'autre.
Sérum et plasma : Les échantillons dont les concentrations en AST LIMITES DE LA METHODE
sont supérieures à 913 U/l (4 202 U/l pour la linéarité Flex Rate) sont Se reporter aux paragraphes PRELEVEMENT ET MANIPULATION DES
accompagnés d'une annotation et peuvent être dilués à l'aide du protocole ECHANTILLONS et CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES de cette notice.
de dilution automatique ou selon la procédure de dilution manuelle.
VALEURS ATTENDUES
Protocole de dilution automatique
Plage de référence
Lors de l'utilisation du protocole de dilution automatique, le système
effectue une dilution de l'échantillon et corrige automatiquement la valeur Sérum/plasma10
de l'activité enzymatique en multipliant le résultat obtenu par le facteur de
dilution approprié. Pour de plus amples informations sur la configuration Plage (U/l)
de l'option de dilution automatique, se référer au Chapitre 2 du Manuel Adulte 5 à 34
Technique correspondant à l'analyseur utilisé.
Il est recommandé à chaque laboratoire de déterminer sa propre plage de
Procédure de dilution manuelle
référence en fonction des caractéristiques locales et de population.
La dilution manuelle doit être effectuée comme suit :
• Utiliser une solution saline (0,85 à 0,90 % de NaCl) pour diluer CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES
l'échantillon. Linéarité
• Saisir le facteur de dilution dans l'écran des demandes patient ou Le dosage AST est linéaire jusqu'à 913 U/l.
de contrôles. Le système utilise ce facteur de dilution pour corriger La linéarité Flex Rate est de 4 202 U/l. Pour utiliser la linéarité Flex Rate,
automatiquement la valeur de l'activité enzymatique en multipliant le l'utilisateur doit régler la valeur de linéarité haute sur 4202 dans l'écran
résultat par le facteur saisi. correspondant.
• Si le facteur de dilution n'est pas saisi, le résultat doit être multiplié par • ARCHITECT c Systems - fenêtre Configuration des paramètres de
le facteur de dilution utilisé avant d'être communiqué. dosage - Résultats
REMARQUE : Si un résultat d'échantillon dilué est accompagné d'une • AEROSET - écran Paramètres de dosage, page Généralités
annotation indiquant que sa valeur est inférieure à la limite linéaire basse, La linéarité a été vérifiée à l'aide du protocole NCCLS EP6-P du CLSI
ne pas rendre le résultat. Réanalyser l'échantillon en utilisant une dilution (Clinical and Laboratory Standards Institute).11
adéquate.
Limite de détection (LD)
Pour de plus amples informations sur les demandes de dilutions, se référer La LD pour le dosage AST est de 2 U/l. La LD correspond à la concentration
au Chapitre 5 du Manuel Technique correspondant à l'analyseur utilisé. moyenne d'un échantillon sans analyte + 2 E.T., où E.T. représente l'écart
CALIBRATION type intra-série global de l'échantillon sans analyte. Une étude réalisée
La calibration est stable pendant environ 30 jours (720 heures) et doit sur un analyseur ARCHITECT c System et sur l'AEROSET a fourni une LD
être effectuée à chaque changement de numéro de lot de réactifs. de 0,9 U/l pour le dosage AST.
Vérifier la calibration avec au minimum deux niveaux de contrôles, selon Limite de quantification (LQ)
les procédures de contrôle de qualité établies dans le laboratoire. Si les La LQ pour le dosage AST est de 2,2 U/l. La LQ est la concentration
résultats des contrôles se situent en dehors des limites acceptables, une d'analyte pour laquelle CV = 20 %.
nouvelle calibration peut s'avérer nécessaire.
Un facteur de calibration doit être saisi. Pour toute information sur la valeur Substances interférentes
à saisir, se référer au paragraphe PARAMETRES DE DOSAGE de cette Des études d'interférence ont été menées conformément au protocole
notice, spécifique à l'analyseur utilisé. NCCLS EP7-P du CLSI.12 Les effets des substances interférentes ont été
• ARCHITECT c Systems - fenêtre Configuration des paramètres de étudiés par les méthodes de dose-réponse et des différences appariées,
dosage - Calibration au seuil de décision médicale de l'analyte.
• AEROSET - écran Paramètres de dosage, page Calibration Substance Concentration de la n Cible Valeur
Pour obtenir une description détaillée de la calibration d'un dosage, interférente substance interférente (U/l) observée
consulter le Chapitre 6 du Manuel Technique correspondant à l'analyseur (% de la
utilisé. valeur cible)
CONTROLE DE QUALITE 30 mg/dl (513 µmol/l) 4 72,2 95,8
La procédure suivante est recommandée par Abbott pour le contrôle de Bilirubine
qualité. Consulter les procédures de fonctionnement standard et/ou le 60 mg/dl (1 026 µmol/l) 4 72,2 91,9
programme d'assurance de qualité du laboratoire pour connaître les autres 62 mg/dl (0,62 g/l) 4 64,5 105,7
exigences en matière de contrôle de qualité et les mesures correctives Hémoglobine
125 mg/dl (1,25 g/l) 4 64,5 111,6
éventuelles à appliquer.
550 mg/dl (5,5 g/l) 4 69,0 95,4
• Deux niveaux de contrôle (normal et haut ou bas) doivent être analysés Intralipid
toutes les 24 heures. 625 mg/dl (6,25 g/l) 4 69,0 103,9
• Si des contrôles plus fréquents sont nécessaires, suivre les procédures Les concentrations de bilirubine ont été obtenues par addition de bilirubine
de contrôle de qualité en vigueur dans le laboratoire. à des pools de sérum humain. Les concentrations d'hémoglobine ont été
• Si les résultats du contrôle de qualité ne répondent pas aux critères de obtenues par addition d'hémolysat à des pools de sérum humain. Les
validation définis par le laboratoire, il se peut que les valeurs obtenues concentrations d'Intralipid ont été obtenues par addition d'Intralipid à des
pour les patients soient erronées. Suivre les procédures du contrôle de pools de sérum humain.
qualité en vigueur dans le laboratoire. Une recalibration peut s'avérer Les interférences provoquées par des médicaments ou des substances
nécessaire. endogènes peuvent avoir une incidence sur les résultats.13
• Vérifier les résultats du contrôle de qualité et les critères de validation
à chaque changement de lot de réactifs.
RESULTATS
Pour de plus amples informations sur le calcul des résultats, se référer
au Manuel Technique correspondant.
• Manuel Technique ARCHITECT — Annexe C
• Manuel Technique AEROSET — Annexe A
Reproductibilité 14. Kennedy JW, Carey RN, Coolen RB, et al. Evaluation of Precision
L'imprécision du dosage AST est ≤ 4,6 % (CV total). Des données Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline
indicatives d'études réalisées à l'aide du protocole NCCLS EP5-A14 du (EP5-A). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory
CLSI sont résumées ci-après. Standards, 1999.
Contrôle Niveau 1 Niveau 2 15. Kennedy JW, Carey RN, Coolen RB, et al. Method Comparison and
Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline (EP9-A).
n 80 80
Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards,
Moyenne (U/l) 32,4 174,2 1995.
E.T. 0,36 0,61
Intra-série MARQUES COMMERCIALES
CV (%) 1,1 0,4
La famille des analyseurs ARCHITECT c System est constituée des
E.T. 0,24 0,32 analyseurs c 4000, c 8000 et c 16000.
Inter-séries
CV (%) 0,8 0,2 AEROSET, ARCHITECT, c 4000, c 8000, c 16000, c System et SmartWash
sont des marques commerciales d'Abbott Laboratories dans plusieurs
E.T. 0,53 0,96
Inter-jours pays.
CV (%) 1,6 0,6 Toutes les autres marques commerciales sont la propriété de leurs
E.T. 0,68 1,18 détenteurs respectifs.
Total
CV (%) 2,1 0,7
PARAMETRES DE DOSAGE ARCHITECT c SYSTEMS
Configuration des paramètres de dosage – Général Configuration des paramètres de dosage – SmartWash
● Général о Calibration о SmartWash о Résultats о Interprétation о Général о Calibration ● SmartWash о Résultats о Interprétation
Dosage : AST Type : Photométrique Version : † Dosage : AST
Numéro : 1023
Composant Réactif / Dosage Lavage Volume Répliques
● Définition de la réaction о Réactif / Echantillon о Contrôles validité R1 AMIK9 Détergent A 345 1
Mode de réaction : Cinétique décroissante
R1 DIG00 Détergent A 345 1
Primaire Secondaire Temps de lecture
R1 VANCO Détergent A 345 1
Longueur d'onde : 340 / 380 Principale : 21 – 33
Dernière lecture requise : 33 Flex : 17 – 22 R1 GENT9 Détergent A 345 1
Limites d'absorbance : 0.4000 – 1.5000 Correction couleur : 14 – 16 R1 TOBRA Détergent A 345 1
Type blanc échantillon : Aucun R1 DGT0B Détergent A 345 1
R2 AMIK9 Détergent A 345 1
о Définition de la réaction ● Réactif / Echantillon о Contrôles validité R2 DIG00 Détergent A 345 1
R1 R2 R2 VANCO Détergent A 345 1
Réactif : AST00 Volume de réactif : 160 40 R2 GENT9 Détergent A 345 1
Diluant : Saline Volume d'eau : ___ ___ R2 TOBRA Détergent A 345 1
Mode distribution du diluant : Type 0 Mode de distribution : Type 0 Type 0 R2 DGT0B Détergent A 345 1
Echantillon Dilution par Cuvette Trig Détergent B à 10 % 345
Nom dilution Echantillon dilué Diluant Eau Facteur dilution défaut
STANDARD : 5.3 ___ ___ ___ = 1:1.00 ●
_________ : ___ ___ ___ ___ = о Configuration des paramètres de dosage – Résultats
_________ : ___ ___ ___ ___ = о о Général о Calibration о SmartWash ● Résultats о Interprétation
Dosage : AST Numéro du dosage : 1023
Plage de dilution par défaut : Unités résultat : U/L
о Définition de la réaction о Réactif / Echantillon ● Contrôles validité Linéarité basse : 3‡‡
Vérif. réaction : Point final Diff Abs
Linéarité haute : 913
A B
Limites spécifiques à l'âge et au sexe :
Temps de lecture : 1 – 1 2–2
Sexe Age (unités) Normales Extrêmes
Limites de calculs : 0.0001 – 9.9999
Indifférent 0 – 130 (A) 5 – 34
% Linéarité ratio : 10
† Les numéros de version peuvent varier en raison de différences au niveau des appareils et des configurations utilisés.
‡ Le facteur de calibration est 8141 pour les analyseurs c 4000 et c 8000 et 8492 pour l'analyseur c 16000.
‡‡ La valeur linéaire basse (Linéarité basse) est la LQ arrondie au nombre de décimales défini dans le champ des décimales.
PARAMETRES DE DOSAGE AEROSET
Pour de plus amples informations, se référer au paragraphe Paramètres de dosage au Chapitre 2 du Manuel Technique AEROSET.
* Valeur définie par l'utilisateur ou l'analyseur.
** La valeur linéaire basse (B-Plage Lin.) est la valeur LQ arrondie au nombre de décimales défini dans le champ des décimales.