L3-SVT
Le cycle cellulaire
Chap #1
Catherine Riva
[email protected]
Cours online 2020-2021
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Plan
1- Introduction générale
2- Mise en évidence de l’existence d’un contrôle du cycle cellulaire
3-La régulation de la succession des 4 phases du cycle par les complexes Cyclines-
CdK
4-Mécanismes de surveillance contrôlant les transitions G1/S, G2/M, et
Métaphase/Anaphase
5- Le passage de G2 en M, déclenchement de la mitose
6- Le point de surveillance de G2/M
7- Comment une cellule en G0 peut-elle renter en G1
- Le passage de G1 à la suite du cycle
8- Cycle cellulaire et transition vers d’autres états de la vie cellulaire
Differenciation; Senescence; Apoptose
9- Les miRNAs
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1-Introduction générale
Cycle cellulaire et transitions vers d autres états de la vie cellulaire
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1-Introduction générale
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1-Introduction générale
- Le mot cycle nous vient du grec “kyklos” qui
signifie circule.
- Un cycle est un événement qui se répète
- Alors les cellules vivantes se dupliquent elles
mêmes après un cycle cellulaire.
- Mais le cycle cellulaire n’ est pas une
répétition simple parce qu’il implique une
duplication de la cellule et de son contenu
suivi d’ une division cellulaire.
- On trouve des divisions binaires dans la
plupart des cellules mais aussi des divisions
par bourgeonnement dans quelques levures.
- Pour produire 2 cellules filles identiques,
l’ADN doit être correctement répliqués.
- Les chromosomes dupliqués doivent ségréger
dans 2 cellules filles différentes de façon à ce
que chacune reçoive 1 copie entière du
matériel génétique
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1-Introduction générale
Les caractéristiques universelles du cycle cellulaire:
1/ L’information génétique doit être répliquée (Réplication de l’ADN
à La réplication exacte du matériel génétique a été expliquée par Watson et Crick avec
leur modèle de la double hélice en 1953 et démontré par Meselson et Stahl en 1958
2/ Les originaux et les copies doivent être séparés (Ségrégation des chromosomes)
à La ségrégation des chromosomes dupliqués aux deux cellules filles a été proposée
originalement dans la théorie chromosomique de l’inhérence en 1902 par Walter Sutton
et Théodore Boveri : http://www.nature.com/celldivision/milestones/full/milestone01.html
3/ Une cellule est divisée en deux cellules filles(cytokinesis)
à La cytokinèse est facilement observable au microscope
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1-Introduction générale
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1-Introduction générale
Les différentes phases du cycle cellulaire
Durant deux de ces phases, phase S et phase M, les
cellules exécutent les deux événements fondamentaux
du cycle : réplication de l’ADN (phase S, pour
synthèse) et partage rigoureusement égal des
chromosomes entre les 2 cellules filles (phase M, pour
mitose).
Les deux autres phases du cycle, G1 et G2,
représentent des intervalles (Gap ou Growth) : au
cours de la phase G1, la cellule effectue sa croissance,
intègre les signaux mitogènes ou anti-mitogènes et se
prépare pour effectuer correctement la phases S ; au
cours de la phase G2, la cellule se prépare pour la Division 5%
phase M. Interphase 95%
Et la phase G0: cellules au repos
Durée du cycle:
Levure: 3hr
Embryon: 20 min
Fibroblaste: 24hr
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1-Introduction générale
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1- Introduction générale / Méthodes d’études du cycle cellulaire
Observation directe des cellules en phase de mitose par coloration
Cellules de l'apex racinaire de jacinthe:
coloration de Feulgen et vert lumière
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1- Introduction générale / Méthodes d’études du cycle cellulaire
Mise en évidence des différentes phases du cycle cellulaire
Repérage de la PHASE S par incorporation de Thymidine tritiée
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1- Introduction générale / Méthodes d’études du cycle cellulaire
Mise en évidence des différentes phases du cycle cellulaire
Repérage de la PHASE S par incorporation de BrdU
à A partir de la proportion de cellules marquées (index de marquage) on peut estimer
la durée de la phase S, fraction de la durée du cycle cellulaire.
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d(S)/f(S)=d(C)/f(C)
1- Introduction générale / Méthodes d’études du cycle cellulaire
Mise en évidence des différentes phases du cycle cellulaire
Repérage de la PHASE S à l’aide d’anticorps: ex PCNA
PCNA (proliferating cell nuclear antigen)
Le PCNA (proliferating cell nuclear antigen) est une protéine qui a pour rôle d'augmenter fortement
la processivité des ADN polymérases réplicatives chez les eucaryotes lors de la réplication de l’ADN.
Donc un marquage du PCNA montrent la présence des cellules en phase S.
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1- Introduction générale / Méthodes d’études du cycle cellulaire
Mise en évidence des différentes phases du cycle cellulaire
La cytométrie de flux (analyse FACS) est une
méthode qui permet d'évaluer les protéines de la
membrane cellulaire, les protéines intracellulaires
ainsi que les peptides et l'ADN.
Le principe sous-jacent de l'analyse FACS est une
réaction antigène-anticorps, les anticorps étant
marqués par fluorescence.
La quantification de la cytométrie de flux est réalisée
en intercalant des marqueurs de couleur (sans
l'anticorps).
La base d'une analyse FACS repose sur une
suspension (colorée et) marquée de cellules
individuelles soumise à un faisceau laser focalisé.
Des forces capillaires poussent les cellules à franchir
la cellule de flux, où les marqueurs sont stimulés par
le rayonnement du laser.
La lumière fluorescente émise par les fluorophores
(combinés aux anticorps) et la lumière diffusée sont
détectées séparément.
1- Introduction générale / Méthodes d’études du cycle cellulaire
Mise en évidence des différentes phases du cycle cellulaire
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1- Introduction générale / Méthodes d’études du cycle cellulaire
Mise en évidence des différentes phases du cycle cellulaire
Voici un résultat typique de FACS pour
étudier le cycle cellulaire avec l’iodure de
propidium qui marque l’ADN.
La plupart des cellules se trouvent en
G0/G1 parce que c’est l’étape la plus
longue.
En G1 les cellules sont diploïdes.
En phase S, l’ADN commence à se dupliquer
alors l’intensité de la fluorescence
augmente puis aIeindra le double de la
valeur de G1 dans les cellules en G2 et M
qui ont complètement dupliquée leur ADN
(cellules tétraploïdes).
On peut déterminer les durées des phases
G1, S et G2+M en suivant une populaRon
de cellules préalablement synchronisées.
Leur contenu en ADN révèle alors leur
progression à travers le cycle
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1- Introduction générale / Méthodes d’études du cycle cellulaire
Mesure de la prolifération cellulaire
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1- Introduction générale / Contrôle et régulation du cycle cellulaire
à Est-ce qu’il existe un système de
commande du cycle cellulaire?
à Qu’est-ce qui permet l’avancée du cycle?
à Qu’est-ce qui coordonne les évènements
qui caractérisent chaque phase?
àExiste-il des points de contrôle en G1, en
G2 et en M
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1- Introduction générale / Contrôle et régulation du cycle cellulaire
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