Corrigé fiche TD N°2

Chromatographie en phase gazeuse

Correction Exercice n° 1

1) Formule R = 2 (tB – tA)/(ωB+ωA)

R2-3 = 2 (9,82-6,6)/(0,55+1) = 4,15

R3-4 = 2 (11,9-9,82)/(1+1,04) = 2,04

R4-5 = 2 (13,04-11,9)/(1,04+1,08) = 1,08

R5-6 = 2 (19,1-13,04)/(1,6+1,08) = 4,52

2) Les pics 4 et 5 sont mal résolus.

3) Comme R est proportionnel à , alors, R’/R =

Variation de R avec N La valeur de R est proportionnelle à la racine carrée du nombre de

plateaux théoriques. Si la longueur de la colonne est multipliée par 2, R est multiplié par
1,4. Cependant, N demeure un facteur important dans le processus de séparation des pics
en chromatographie.

Ainsi, (1,5/1,08) = ou L’ = 365.(1,5/1,08)2 L’= 704 cm

Correction Exercice n° 2

1) Formule N = 16 (tR/ω)2

NA =16 (60/9)2 NA = 711 plateaux

2) Formule R = 2 (tB – tA)/(ωB + ωA)

RB-C = 2 (110-100)/(15+16,5) = 0,63 (mal résolus)

RD-E = 2 (165-140)/(21+24,75) = 1,09 (mal résolus)

Comme R est proportionnel à , alors, R’/R =

Ainsi, (1,5/0,63) = L’ = 120.(1,5/0,63)2 L’= 680 cm

3) On peut déduire RD-E avec une colonne de 680 cm

Ainsi, (R’/1,09) = √(680/120) R’ = 2,6

 4) On a tR = 235 sec = 3,9 mins sur une colonne de 120 cm

Ainsi, sur une colonne de 680 cm, tR = 235.(680/120) = 1331,7 sec tR = 22,2 min

Trop long donc peut être changée la nature de la colonne.

Exercice

Un mélange d’alkyles de bromes est séparé par CPG. Les paramètres de la colonne sont : L =
150 cm, T = 140°C, gaz vecteur He, débit = 20 cm 3/min, détection FID. Le chromatogramme a été
obtenu avec un mélange de composition inconnue, néanmoins, on sait que le pic F est dû à du n-
C5H11Br. Le tableau résume les données pour les différents pics.

ω (s)

(a) Quelle peut être la longueur de la colonne minimale pour que les pics D et E puissent être
résolus avec moins de 1% de recouvrement ?

(b) Déterminer le nombre de plateaux théoriques N, pour les pics B, C, D, E et F ?

(c) Commenter la valeur de NC ?

Correction 4

(a) Formule R = 2 (tB – tA)/(ωB+ωA)

RD-E = 2 (1222-1029)/(68,6+81,5) = 2,57

Or R est proportionnel à √L et une séparation avec un recouvrement de 1 % correspond à une R = 1,5

Alors, (1,5/2,57) = √(L/150) L = 51 cm

(b) Formule N = 16 (tR/ω)2

NB = 16(177/11,8)2 = 3600 plateaux et Nc = 3030 ; ND = 3600 ; NE = 3600 ; NF = 3600

(c) Le pic C a la plus petite valeur de N. Il est probable qu’il corresponde à un mélange non séparé de deux alkyles de brome ou
plus (un pic non résolu doit avoir une valeur plus grande de ω et un N plus faible).

Exercice

Le méthyl 2,5-dihydro-2,5-diméthoxy-2-furancarboxylate est le produit d'électrolyse du

méthyl-2-furoate dans le méthanol. Dans le cadre d'une étude de cette réaction, on veut
identifier les signaux chromatographiques correspondant à ces composés. Une solution
contenant ces deux produits commerciaux est analysée par chromatographie en phase
gazeuse, dans une colonne Carbowax (polyethylenglycol). Les chromatogrammes suivant
correspondent à différents programmes de température.

C
D

T0 = 100°C/1min ; 8°C/min ; T1 = 200°C/3min

 T0 = 100°C/1min ; 15°C/min ; T1 = 200°C/3min

T0 = 100°C/1min ; 20°C/min ; T1 = 200°C/3min

Formule :

Méthanol : CH3OH
Méthyl-2-furoate :
Méthyl 2,5-dihydro-2,5-diméthoxy-2-furancarboxylate (mélange cis et trans) :

(a) Identifier les principaux pics

(b) Pour chaque chromatogramme, calculer les temps de rétentions réduits de chaque
composé, ainsi que les facteurs de sélectivité entre B et C et entre C et D.
c) Expliquer l'influence de la rampe de température sur la séparation.

Correction 5

(a) A: méthanol, B: méthyl-2-furoate, C et D: méthyl 2,5-dihydro-2,5-dimethoxy-2- furanecarboxylate (2 configurations spatiales

possibles)

(b)

(c) Plus la rampe est lente, plus la séparation est bonne ???

QCM

Parmi les propositions suivantes à propos de la chromatographie en

phase gazeuse ?

a) La colonne est placée dans un four

b) L’éthanolémie se dose fréquemment de cette façon

c)On peut la coupler à la spectrométrie de masse

d)L’étalonnage interne est la méthode la plus utilisée et la plus fiable

e) La phase stationnaire peut être solide, liquide ou gazeuse

18. Parmi les propositions suivantes concernant la chromatographie en phase gazeuse

, quelles sontcelles qui sont exactes ?

a) Il existe une vitesse linéaire optimale de la phase mobile

b) La phase mobile est compressible

c) Le temps de rétention des composés augmente avec l'augmentation de la température del'analyse

d) La pression à l'entrée de la colonne est supérieure à celle de la sortie de la colonne

e) L'hydrogène peut être utilisé comme gaz vecteur

19. Parmi les affirmations suivantes caractérisant les colonnes de chromatographie, une seule est
vraie.Laquelle ?

a) Le polyéthylèneglycol est apolaire

b)La B cyclodextrine peut etre utilisée pour la chromatographie chirale

c) Le temps d'analyse est plus long en CPG qu'an CLHP

d) Les colonnes en CLHP sont très longues

e) le phénomène de rétention est effectif en chromatographie d'exclusion

Concernant la chromatographie, lesquelles de ces propositions sont vraies ?

a) Plus la HEPT est grande, plus la colonne est efficace

b) Le nombre de plateaux s’élève quand l’efficacité diminue

c) On considère que 2 pics ne se recouvrent pas si le facteur de résolution est supérieure ou égale à
1,5

d)La formule de Van Deemter permet d’obtenir la vitesse optimale de la phase mobile pour avoir la
meilleure efficacité possible

e) Si le diamètre des particules de la colonne est divisé par 10, la perte de charge est aussi diminuée
d’un facteur 10

Parmi les propositions suivantes sur les méthodes chromatographiques , quelle(s) est(sont) celle(s)

qui est(sont) exacte(s) ?

a) Le détecteur à ionisation de flamme est un détecteur utilisé en chromatographie liquide

b)La colonne de chromatographie en phase gazeuse est toujours placée dans un four thermostaté

c)La phase stationnaire silice greffée C18 permet de réaliser des chromatographies de partage
d) La phase mobile utilisée en chromatographie liquide d'échanges d'ions est une phase tamponnée

e) Tous les détecteurs utilisés en chromatographie en phase gazeuse détruisent les substances à
analyse

Parmi les propositions suivantes concernant les méthodes chromatographiques, laquelle est
exacte ? :

a) La chromatographie en phase gazeuse de type Gaz/Solide est une

chromatographied'adsorption

b) La chromatographie de partage en phase normale permet de séparer les solutés très

polaires

c) La dérivatisation s'applique aux molécules fortement polaires ou thermostables

d) La chromatographie par filtration sur gel utilise une phase mobile organique

e) La chromatographie de partage s'applique aux molécules de haut poids moléculaire (>10

000Da)

POUR LES PARTIES I ET II VOUS DEVEZ REPONDRE DIRECTEMENT SUR L’ENONCE EN Y PRECISANT

VOTRE NUMERO D’ANONYMAT

Partie I : Questionnaire à choix multiples. Cocher les bonnes réponses.

Question 1 : Classiquement les débits utilisés en chromatographie liquide haute performance la

phase mobile sont de

l’ordre de :

 0,1 mL/min

 1 mL/min

 10 mL/min

 100 mL/min

 1000 μL/min

Question 2 : En chromatographie liquide haute performance la phase mobile s’écoule:

 par gravité

 par l’action d’une pompe

Question 3 : L’équation de Van Deemter relie :

 la hauteur équivalente à un plateau théorique à la vitesse linéaire de la phase mobile

 la hauteur équivalente à un plateau théorique à la température de la colonne

 la résolution au débit de solvant appliqué

 la résolution à la température de la colonne

 le temps de rétention d’un analyte au débit de solvant appliqué

 le temps de rétention d’un analyte à la résolution

Question 4: En chromatographie en phase gazeuse, la phase mobile est:

 un gaz

 un liquide

 un mélange liquide-gaz

Question 5: En chromatographie liquide, l’efficacité d’une colonne s’exprime par le paramètre

suivant :

 le facteur de rétention de l’espèce la plus retenue

 la hauteur équivalente à un plateau théorique qui dépend de la longueur de la colonne

 la hauteur équivalente à un plateau théorique qui ne dépend pas de la longueur de la colonne

 le coefficient de distribution

 le coefficient A de l’équation de Van Deemter

Question 6: Les colonnes de chromatographie liquide sont des colonnes :

 remplies de billes de silice de 10 millimètres de diamètre

 remplies de billes de silice de 10 micromètres de diamètre

 vides

Question 7: En chromatographie liquide de partage à polarité de phase inversée, la phase mobile:

 contient de l’eau

 ne contient pas d’eau

Question 8: En chromatographie par exclusion de taille, les petites molécules sortent:

 au temps mort

 au volume mort

 au volume d’exclusion total

 au volume de perméation total

Question 9: Dans un appareillage de chromatographie liquide, la colonne se place :

 avant la boucle d’injection

 avant le détecteur

 entre la boucle d’injection et le détecteur

Partie II: Questions ouvertes

Barrez les mentions inutiles.

La chromatographie d’interaction hydrophobe utilise des phases stationnaires

polaires/apolaires/amphiphiles et des

phases mobiles riches en eau/méthanol/acétonitrile. Elle est utilisée pour la séparation des
composés

hydrophobes/hydrophiles telles que les protéines/polysaccharides. L’analyse débute en

présence/absence de sel et se

termine en présence/absence de sel dans la phase mobile.

Partie III: Exercices

Exercice 1:

En chromatographie en phase gazeuse deux composes A et B ont des temps de rétention de 5.4 et
13.3 mn

respectivement. La largeur des pics à la base est de 0.41 mn et 1.07 mn respectivement. Un compose
non retenu traverse

la colonne en 3.1 mn.

1/ Calculer les facteurs de rétention (k’) de A et B,

2/ Calculer la résolution (Rs) entre les deux pics,

3/ Calculer le nombre de plateaux théoriques N et la hauteur équivalente à un plateau théorique

pour les 2 composés A

et B, si la colonne a une longueur de 10 m.