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Enzymologie Avancée: Inhibition et Cinétique

Le document présente deux exercices sur l'enzymologie. L'exercice 1 demande de déterminer les paramètres cinétiques Vmax et Km d'une enzyme à partir de données expérimentales, ainsi que le type d'inhibition et la constante d'inhibition KI de deux inhibiteurs. L'exercice 2 présente des courbes enzymatiques et demande de déterminer divers paramètres cinétiques à partir de ces courbes.

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Enzymologie Avancée: Inhibition et Cinétique

Le document présente deux exercices sur l'enzymologie. L'exercice 1 demande de déterminer les paramètres cinétiques Vmax et Km d'une enzyme à partir de données expérimentales, ainsi que le type d'inhibition et la constante d'inhibition KI de deux inhibiteurs. L'exercice 2 présente des courbes enzymatiques et demande de déterminer divers paramètres cinétiques à partir de ces courbes.

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Université de Batna 2- Département de Microbiologie-Biochimie

TD 4 d’enzymologie approfondie (3ème année Licence de Biochimie)

Exercice 1
Les résultats suivants sont obtenus au cours d’une réaction enzymatique, (1) en l’absence d’inhibiteur, (2) et (3) en
présence de deux inhibiteurs différents à la concentration de 5 mM. La concentration de ET est la même dans chaque
expérience.

[S] (1) (2) (3)


(mM) v(μ mol/ml/s) v(μ mol/ml/s) v(μ mol/ml/s)
1 12 4,3 5,5
2 20 8 9
4 29 14 13
8 35 21 16
12 40 26 18

a. Déterminez Vmax et Km de l’enzyme.


b. Déterminez le type d’inhibition et le KI pour chaque inhibiteur.

Exercice 2

La courbe A représente les résultats d’une étude cinétique de l’activité d’une enzyme E sur un substrat S dans des
conditions bien définies.

a) Calculer le Km de l’enzyme pour son substrat.


b) Calculer la Vmax.
c) A quoi correspond la pente de cette courbe ? Calculer sa valeur en précisant les unités.
La courbe B représente les résultats d’une cinétique obtenue dans les mêmes conditions mais en présence dans le
milieu d’incubation d’un inhibiteur à une concentration de [I] = 8.10 -5 M.
d) Dans quel type d’inhibition peut-on classer cet inhibiteur ? Justifier votre réponse.
e) Calculer la constante d’inhibition (K I) de l’inhibiteur pour l’enzyme.
f) Déterminer v0 et v0 app (v0 apparente) pour [S]1 = 0,2. 10-4 M et pour [S]2 = 1.10-4 M. En déduire le pourcentage
d’inhibition. Commenter l’évolution de ce pourcentage lorsque [S] augmente.

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