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Université des Frères Mentouri Constantine 1 Licence Microbiologie 2023/2024

Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie Travaux Pratiques :


Département de Microbiologie Techniques d’Analyse Microbiologique

Isolement et dénombrement des


microorganismes du sol

Rédigé par: BOUCHLOUKH Warda et BELMESSIKH Aicha

4. Ensemencement sur milieux gélosés : ∑C


N = ——————–———
• Sur GN pour le dénombrement des Bacté- V (n 1+ 0,1 n 2) d1
ries totales

Etaler un inoculum de 0,1 ml, de la suspension mère N: Concentration cellulaire exprimée en UFC/ml
ou de ses dilutions, par un râteau sur la gélose nutri- (UFC= Unité Formant Colonies).
tive (GN).
∑ C = somme des colonies présentes sur toutes les
Incuber à 37°C pendant 24- 48 h. boites considérées (nombre de colonies compris
entre 30 et 300).
n 1 = nombre de boites prise en compte à la pre-
• Sur OGA pour la recherche des Levures et mière dilution retenue.
des Moisissures n 2 = nombre de boites prise en compte à la deu-
Etaler un inoculum de 0,1 ml, de la suspension mère xième dilution retenue.
ou de ses dilutions, par un râteau sur le milieu d 1 = première dilution prise en compte.
Oxytetracycline Glucose Agar (OGA). V = volume de l’inoculum en ml.

Incuber à 25 - 30°C pendant 3 à 5 jours.


• Exprimer les numérations en nombre de mi-
Résultats croorganismes par gramme de terre sèche
Après incubation : (gramme de sol)

• Détecter les différences entre les boites de la


GN et celles de l’OGA.

• Dénombrer visuellement ou à l’aide d’un


compteur colonies les colonies résultantes sur
la GN

• Exprimer les numérations en nombre de mi-


croorganismes par millilitre en appliquant la
loi suivante:

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