Université des Frères Mentouri Constantine 1 Licence Microbiologie 2023/2024
Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie Travaux Pratiques :
Département de Microbiologie Techniques d’Analyse Microbiologique
Isolement et dénombrement des
microorganismes du sol
Rédigé par: BOUCHLOUKH Warda et BELMESSIKH Aicha
4. Ensemencement sur milieux gélosés : ∑C
N = ——————–———
• Sur GN pour le dénombrement des Bacté- V (n 1+ 0,1 n 2) d1
ries totales
Etaler un inoculum de 0,1 ml, de la suspension mère N: Concentration cellulaire exprimée en UFC/ml
ou de ses dilutions, par un râteau sur la gélose nutri- (UFC= Unité Formant Colonies).
tive (GN).
∑ C = somme des colonies présentes sur toutes les
Incuber à 37°C pendant 24- 48 h. boites considérées (nombre de colonies compris
entre 30 et 300).
n 1 = nombre de boites prise en compte à la pre-
• Sur OGA pour la recherche des Levures et mière dilution retenue.
des Moisissures n 2 = nombre de boites prise en compte à la deu-
Etaler un inoculum de 0,1 ml, de la suspension mère xième dilution retenue.
ou de ses dilutions, par un râteau sur le milieu d 1 = première dilution prise en compte.
Oxytetracycline Glucose Agar (OGA). V = volume de l’inoculum en ml.
Incuber à 25 - 30°C pendant 3 à 5 jours.
• Exprimer les numérations en nombre de mi-
Résultats croorganismes par gramme de terre sèche
Après incubation : (gramme de sol)
• Détecter les différences entre les boites de la
GN et celles de l’OGA.
• Dénombrer visuellement ou à l’aide d’un
compteur colonies les colonies résultantes sur
la GN
• Exprimer les numérations en nombre de mi-
croorganismes par millilitre en appliquant la
loi suivante: