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Corrige Type Enzy

Ce document contient les corrections d'un exercice portant sur la cinétique enzymatique. Il présente plusieurs exercices visant à déterminer des constantes de Michaelis, des activités moléculaires spécifiques ou encore des pourcentages d'inhibition en présence d'inhibiteurs compétitifs.

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Corrigé Type "TD 11"

Exercice 1 :
1- Pour déterminer les constantes de Michaelis (KM) et (Vmax), on porte 1/Vi = f(1/S).
Il s'agit de la représentation de Linewever et Burk qui est linéaire, correspond à
l'équation 1/Vi = (KM / Vmax). (1/S) +1/Vmax.
1/S 2.102 5.102 10.102 14,2.102 20.102
3
1/Vi 6,5.10 9,7.103 14,5.103 18,2.103 24,6.103
D’où le graphe suivant :

Du graphe :
-L'intersection avec l'axe des abscisses 1/S= -4,5.102 qui correspond à -1/KM.

D’où S=0,22.10-2M donc KM = 22.10-4M.

-L'intersection avec l'axe des ordonnées 1/Vi=4,5.103 correspond à1/Vmax.


Donc : Vmax = 220.10-6mol/mn/mgenzyme.
2- L'activité moléculaire spécifique en moles de substrat par mol d'enzyme par mn
(AMS) :

Vmax=220.10-6molsubstrat/mn →1mg d'enzyme

AMS = X →13500.103mg=1mold'enzyme
X=13500.103×220.10-6= 2970
Donc, l'AMS = 2970 molsubstrat/mold'enzyme/mn.
Exercice : 2

Du graphe : Vmax(a)>Vmax(b)et KM(a)=KM (b) = Cte.

Alors les propositions correctes sont : 1 ;2 et 4 (voir le coure).


Exercice : 3
Selon la figure :

-1/KM (1) >-1/KM (2) → KM (1) > KM (2) ; donc E2 à plus d'affinité pour S que E1.
Exercice : 4
(Ii) et un inhibiteur compétitif : Vmax=V'max= Cte et K'M=KM ×(1+(Ii) /KI).
On a : KM=10-3M ; K'M=10-2M.
K'M=KM ×(1+(Ii) /KI) Alors (Ii)/KI=(K'M/KM) -1. AN : (Ii)/KI= (10-2/10-3) -1=9.
K"M en présence d'une concentration d'inhibiteur=2(Ii) :
K"M=KM× (1+2(II)/KI) →K"M=10-3(1+2×9) =19.10-3=1,9.10-2M.
Exercice : 5
Oui, il est possible de définir la constante de Michaelis KM à partir de ces données.
KM= la concentration de substrat [S] en molarité (mol/l) correspondante a la moitié de la
vitesse maximale (Vmax). Donc on doit convertir les unités de 50µg/ml en mol/l.
50.10−6 .103
KM = =25.10-5=2,5.10-4M
200
Exercice : 6
La vitesse de la réaction en absence d'inhibiteur V0 :

D'après la relation de Michaelis V0 = (Vmax /(KM+[S])) ×[S].

V0 = (55 / (2.10-4+2.10-4)) ×2.10-4 = 55/2 = 27,5µM/mn.


En présence d'inhibiteur compétitif : Vmax=V'max= Cte et K'M=KM ×(1+[I] /KI).
K'M=2.10-4× (1+2,5.10-3/2,5.10-3) = 4.10-4M.
Donc la vitesse initiale (Vi) en présence de l'inhibiteur :

Vi = (Vmax / (K'M+[S])) ×[S]

Vi = (55 / (4.10-4+2.10-4)) ×2.10-4 = 55/3 = 18,33µM/mn.


Pour décrire le pourcentage d'inhibition on calcule d'abord le pourcentage de la vitesse
relative en présence d'inhibiteur.
Vi×100/V0 =18,33×100/27,5 = 66,73٪.
Ainsi le pourcentage d'inhibition = 100 – 66,73 = 33,27٪.

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