Glycémie et diabète Chapitre 1 TP n°1
Hydrolyse enzymatique de l’amidon
L’amidon est une macromolécule de glucide contenue dans de nombreux féculents comme les pâtes ou le
riz. Seuls les nutriments (molécules simples) sont absorbés par l’organisme, l’amidon doit donc être réduit,
hydrolysé.
Hydrolyse = réaction chimique au cours de laquelle il y a une rupture de liaison chimique faisant intervenir une
molécule d’eau.
Une enzyme est une molécule qui catalyse une réaction chimique c'est-à-dire qu’elle accélère la vitesse de
cette réaction dans des conditions de milieu particulières.
Vous démontrerez avec les résultats de vos expériences et du document de référence que l’amylase est
une enzyme digestive :
- qui catalyse l’hydrolyse de l’amidon,
- qui reste présente et intacte à la fin de la réaction
- qui a une activité influencée par les conditions du milieu.
Votre compte rendu présentera l’ensemble des expériences et résultats sous la forme de votre choix et
votre analyse des expériences pour démontrer que l’amylase répond à tous les critères ci-dessus.
Document de référence : Résultats de l’hydrolyse spontanée de l’amidon (sans enzyme)
Dans chaque tube : empois d’amidon à 37°C
Bleu foncé Bleu clair Bleu clair Orange
L’eau iodée met en évidence la présence d'amidon par une coloration bleu nuit. Il suffit d'ajouter quelques
gouttes d'eau iodée pour révéler la présence d'amidon.
La liqueur de Fehling forme un précipité rouge brique à chaud en présence de sucres réducteurs de faible
poids moléculaire comme le glucose, le lactose ou le maltose (sucres « simples »).
Glycémie et diabète Chapitre 1 TP n°1
Auto
Capacités Indicateurs de réussite Prof
éval
REALISER Toutes les étapes sont réalisées
Mettre en œuvre un Consignes respectées
protocole de manière La paillasse est propre et bien organisée
satisfaisante et obtenir des
résultats exploitables
On attend du candidat qu’il présente une
production :
- techniquement correct (soignée,
COMMUNIQUER lisible, approprié, …)
Exprimer les résultats selon - bien renseignée (informations
le mode le plus adapté complètes et exactes dans le cadre du
moyen de communication choisi)
- bien organisée (informations traduites
dans le sens du problème à traiter)
On attend du candidat qu'il :
RAISONNER - exploite l'ensemble des résultats = je
Déduire et mettre en vois que
relation les résultats pour - intègre des notions (issues des
déterminer le rôle d’une ressources, de la mise en situation ou
enzyme, ses propriétés, d'un apport du candidat) = je sais que
ainsi que l’influence du - construise une réponse au problème
milieu sur son activité posé explicative et cohérente intégrant
les résultats = j’en déduis que
Glycémie et diabète Chapitre 1 TP n°1
Protocole expérimental :
Numérotez de 1 à 6, les tubes à essai, sur le haut et les pipettes pasteur.
Numérotez les puits de votre plaque de titration comme suit : 1 t0 (pour tube n°1
à 0 minute) puis 1 t10 (pour tube n°1 à 10 minutes). Faites la même chose pour
les puits correspondant aux 5 autres tubes.
Faire le test à l’eau iodée :
Versez une goutte d’eau iodée dans chacun des puits de votre plaque de
titration.
Remplissez les 6 tubes à essai avec 5 ml d’empois d’amidon à 10g.L-1.
Versez 1ml d’eau distillée dans les tubes 2, 4 et 6 et prélevez 1 goutte dans
chacun des tubes (1 pipette numérotée par tube). Déposez chaque goutte dans
le puits t0 correspondant de la plaque de titration.
Versez 1ml d’amylase dans les tubes 1, 3 et 5 et prélevez immédiatement 1
goutte de mélange de chacun des tubes. Déposez la goutte dans le puits t0
correspondant de la plaque de titration. Amenez rapidement les tubes 3 et 4
dans la glace une fois les mélanges effectués et les 5 et 6 dans le bain marie à
85°C.
Placez les tubes 1et 2 dans un bain marie à 37°C.
Au bout de 10 minutes, homogénéisez vos tubes en les remuant et prélevez une
goutte de chaque pour la déposer dans le puits t10 correspondant de la plaque
de titration.
Faire le test à la liqueur de Fehling pour un seul tube :
Prélevez ensuite 1mL de solution à tester (choisissez 1 tube différent par
groupe) et mélangez-le dans un autre tube à qq gouttes de liqueur de Fehling.
Placez ce tube dans le bain marie à 85°C quelques minutes. Observez la
formation d’un précipité rouge brique ou non.
Dans le tube 1, ajoutez pour la seconde fois de l’empois d’amidon puis 37°C. Au
bout de 10 nouvelles minutes versez qq gouttes d’eau iodée, homogénéisez et
observez.
Glycémie et diabète Chapitre 1 TP n°1
