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14 a
Remic
Référentiel
en microbiologie
médicale
cae ea
a4/ERIENCE
utte contre
nfectieuses
RT" Vituo™
ID" CPS Elite
DEC® CARBA NP
DAS BRAHMS. PCT™
TEKS
Texe2
Isla
'STANCE’
Référentiel
en microbiologie
médicale
5** édition 2015
Tome IIRéférentiel en microbiologie médicale
TOME I
LICENCE D'UTILISATION ET PRECAUTIONS D'USAGE
La Socité Frangaise de Mirobclgle décine toute cesponsabils, de quelque nature
ete sol pouantrsuitr dune négigence ou dune mauvaise ubisaton de tous prods
Instruments, teeniques ou concepts presents dans ce ire.
“Tous crits de traduction, adaptation ot de reproduction pr tous procédé résavts pour ous
pays. Tole reproduction ou reprbsentaton intarle ou parte, par quelque procade quo co
$5 des page pubées dans le present ovrage, fate sane auorsaton de éciteur es che
‘et consttue une conafagen. Seules son alorsbes,¢une pat, es reproductions stitement
Teervées&Tusago priv du copie at on destinges une ulation olactve et aie pat
los coures chao jusées parla carctere slentiique ou dintamation de ooere Gans
laquelle eles sont incrpores(Loidu 1 mars 167, ate 0 et et Coda Penal, are 425.
es photocopies payantes peuvent dre réalsées avec accord do éstaur. Sacresser au
(Gente tangas deqlotsten du dot de eepi-CFC. 20 rue des Grands Augustine T5006
ana Te" 0144 074770.
(© Sect Francaise de Microbiologie
La Loidu 1 mars 1857 nts es copies ouroproduction destinges&uneullestion cotectve,
Toute représeniton ou reproducionintgrale ou partel fate par quelque procéde que ce Sok
sans le consontment do autour ou ss ays cro, eat ice et constve une conbefagon
sanctonnée parle aries 425 et sulvants di Code Penal
ISBN Socits Francaise de Microbiologie :978-2-87805-032-5
‘Toute rtéronce & un chp du Rétérentil en micrebclogie méccale se mentionne de la
{acon suvata
Soci Frangase de Mlceboiogie
“Tire cu chaptv. in: REMIC : Soc Francaise de Moblog Ed! 2015: p XXX
ana eaten
Brenanm
SRE
itera on toe moa
Las éaion du RE
paresioiogio, mycale
Gémarche nouvelle
laumende médical
Ce tava amblieux
secteur (desis
tone dans leur dom
toutaulong eager
Le premier ome tas
‘alee es dagnost
‘ames aux antnfos
Le socond tome eat
ot parastos,
Cette now dalton
loons et parastes,
Parastaioge et dele
Comme pour es és
can confi insta
‘rage, de agen cor
La Socits Frangise
‘aes qui ont permis
Le Comts Ector
Médicale quotione |
‘ows. Los Yemarquoe
alt dla Sous FrE
lo qustque nate
fae ous prot,
reservspourtous
eet dattrepar,
Me Fosue dans
Pal arte 425.
ur. Sackessr au
“Augustin, 75008,
‘tsaton calactve,
roakdé que co sot
rene contetagon
2s
2 mentionne des
5 prec.
NOTE AUX LECTEURS
La 5 éelon du REMIC avoulurassombler los principales notions de bactircogie, vlog,
axasitologie, mycologi et hygiéno ues la prague médicale. C'est doe intaon une
‘Sémarche nouvelle, vers Tnicté des preblématiques cu mende des agen fecieux posbos
‘sv monde medical Ele dove s'améhorer encore dans les hres eons
(ce aval ambitoux so traduit par deux volumes, 114 chapites ot 856 pages. Les auteurs
rdactous (esgnés par) ot rotectars, au nombre de 200, sont cans po lou oompe-
{ence dane leur domaine. Le Comte Esto! ls remeriachaleureusement pout our aval
tout au ong de la genése cece reterentol
Le premier tome rata de sujatsgénéraux an microbiolgl, del gisation on bologio med
‘ao et dos diagnostics mcrobicogques, dea sensbats et de a resistance des mere Oe
rismes aux ant infectioux des contrast la prvention
Le socond tome est ais aux microorganisms spéctiqus : bates, vis, chempignons
st parastes,
Cotte nouvelle dion romplace deco ft ton de 2010 et aussie REVIR, Pour ls cham-
pianons et parasites, ces chaps ont et fas avec le souten de la Soo8té Franqase de
Prastoogle el dela Sood Prangaiv de Mycoiogie Mécale,
Comme pou es tions précentzs, les membres du Cont do! décarantravor au
in confit inlets crectssusceptbies de porter alate aux données pubes dans cot
‘ourage, de fagonconforme aux cbecis de la Soca Francaise de Microbiologie
La Soot Frangalse de Microbiologie remerio les indies pour lure ingens comme
Clos gu ont permis de rere le coat Je production de ces deuxlives,
Le Comis Ector sounate que ls informations de oo rrr! soln ules la pratique
médicale quatiione des merobioogites et tn souten pour accretion lure abo
{otes. Les remarques oes suggestions ¢amdoraton son ls lonvenuea euprés du sec.
Iarat dela Seats Francaise de Ncrobloge,
ion codiiomont.
“Thomas Bout
René Courea
ean-tovss Hermann
autenes Laced
Brite Lamy
Patio Laudat
Béatres Pangon
Helene Piguo-atouseAUTEURS.
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Fringe catZio, Quelle mi
GENERALITES
1
2
Les taper
de microbe
Place de
ricrobilo
Notens
cen mierobh
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Séroogi:
Recher
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dane ls ir
Le Manag.
Conte
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2.
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bailar
Larectere
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piacnosrics
14
18,
16.
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hermaclts
Endocar
Dispose
(caster,‘SOMMAIRE
TOME |
2. Que mloclop 2015-1117. ete syste raven
owe is
cevenauires
1. Les étapes de anal ae aa
Len aps dere 5. 1 bens torcho gunenaten
Porters emits)
2 Pace delicate en ‘18
Saran 2520. Infections broncho-pulmonaites
2. Noone itil mbar irocore 1
cn mcene = Ht coeur s
4 Specromve de masa on 22. iectors pasate usm
ioe ee wr
4. Stroog ifcions becomes 2. oto ogi ot
Secs ss Sioa rae 20
0. Stniogeethveiow an 61 24. Claman meio ue spree
7. Recherche d'anticorps et d'antigénes ee
Sees cea oe reer 8
0. Rechte anima et fatgies 78.‘ ccs a
Sarees rectors fongasn- 78.27 iets ones ea pea et os
9. Le Management de la qualité. at Phanves. 288
cane 2 Lesonset spars crndee
%. Sate . amar dorigine bactérienne. an
29, Cottons coos tae snes
7. (dont liquides de drain et disiyse
rrosemes al aero (ont =
= 10s
20. tecion one coe
LEGISLATION EN BIOLOGIE MEDICALE 285
12. Législation en biologie médicale...113 51. Le pled diabétique infects =
vmecetriesenader 3. Meco ralone‘eis st
18. Lavedrce cig ela pret sera son
souporwnnes coe iit
‘mh lepwdba, 313
Marble do pronddreee
Dimcnosricsmenosiotociques —‘Mubilajedenounadanie
1M. Bact fongtnis-
bere top SENSIWITE eTREsIsTANCE
bes mono-onoansies
18, Enoain 0 AiKouenrconein
18. Depots reemnctee 25. ates de tomiraten dla
(caeterchaore mana. 145 °° Senin ox anos 2720. Mined cearnaton Gola 48, ets gto os sng te Sacro
secon Sactenmmere ass Season ra Bn cronion
‘37. Méthodes de détermination de la 44, Mesures dihygitne, de sécurité et de 7
‘sensibilté aux antifongiques. 341 _s0reté biclogiques au laboratoire .. 385, 7. Perea
28, Métnedologle pourla urvellanee de 45, (Micrbiologe de fnvronnement TANG
eset orem seman ras rr, ba cara
Sitowtnedoa ser Menara Oe Magy ee
cowrnbus eT Preven 4. Gone miata 2. Vance
2a Pnbmanmdacnumproaine a7, ceavucareeipue aia £3. viweem
Recherche de bactéries. ‘materel, si aa ant 84, Virus de
bers an ——=
Came melons wnat
40. Dépistage du portage de prélévements post mortem. 415 = =
sem 49. Les maladies & déclaration obligatoire: »
1. Gnmeatendon doen donee,“ mis secu am 7, vinden
Seimastas oases sourieae
on vp $0. Vales entaes- Rc een gt
42, Samenmiebidogav des rats
Soave Shs oLOssane oa Rea,
rato.
SOMMAIRE Sree
TOME Il
em
WwcRO-OROANMES PECHIOUES- 65 Litre monn nn 827 onesies
eee (66, Neisserie gonorrhoeae. 533 95. Papillomay
Sh anaerobes 451 G7, Neiesora meningitis a9 98. Poa
ee 457 69, yoobectorum boreal et sures 97. Viueaert
59. Boda soy oan as ma
SA Barta bey seas. 88 68. jaune, 7 oe, Rares
55. oreatons 17. 70, Petuaentbces ppien oo uma
5. Camere, eg coeeoe ame ttn Fest
Cuno ‘aT. Teponne pk, & oe
8. Coane te {2972 Teghenme wl sas ee
eee apes cates =e ecaesaen
60. Francia terenas. 602 wICRO-ORGANISMES SPECIFIQUES - ae
1 Hamophti nueene 507 RUS 1, Ape
Hacer pt i174. Alot AY) sor 404 conan
$8. tome, S575. Veep pe VI ttm. copece
Bh. tapas 52576. Venez VZV 607 ‘te Domaau sang stow
‘379
‘bout ot do
orate, 985
cnnement
ri (eau, a,
‘a7
ves des aude
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edulat
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obilogiste. 421
Roe du
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28.
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0.
0.
*1
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93.
9.
os.
6.
wr.
99.
99.
‘Gytmégnoves (CMV).
ews Epstein-Barr (EBV).
Herpesvius humans 6,7 et 8
(HEV, HHT, HH,
Eniéroviu
Parechovius
‘ies e Mépatte HAY)
‘ies de Matte (HEV).
‘ius de atte B (HBV).
‘us de tépatte Dota (HOV)
ius de hatte © (HCV),
‘Vue de lap.
‘Autos vius spats
reions.
Rouge
Rubio
Exytvoves 818
Retains
‘Autres vius dos gaste-entéres
Papillomavirus humaine (HPV)
Polyoavies BV ot ICV.
on
619
625
629
635
697
est
est
65s,
66a
689
679
91
683,
689)
6a
609
708
m
‘Ves de inmunodéfience Humaine
cay
Retroveus HTLV
Larage et
= Lyssavius.
100, Fibres hémoragiqus viaos
101. rbovroses
715;
79
m8
mat
753
MICRO-ORGANISMES SPECIFIQUES -
CCHAMPIGNONS
102. Proumoeystose,
103. Aspergioses
106, Condose
105. Cryptococcose
108. Dermatophyoses.
159
783
769
mm
7a
MICRO-ORGANISMES SPECIFIQUES -
PARASITES.
107, Barone ra
108. Gate, 798
109. Lolhmanises. 129
‘10, Plume, 0
‘11, Toxoplasmose, en
ANNEXES
112, Conduits @ ton au labratore
‘de miconatogie en cas de isque
Dioteronste et de pathogenes,
Smergeni.
113. Réglos ombaliage ot de ranspert
‘See matiree biloigues 299
114. Medals de conservation des
souches, sums et échariilons
Diologiues 4s
GLOSSAIREAnaérobie:
Elisabeth Nagy”
1. CONTE:
Los, boctries =
Impliquées dane
infecton bac
Ge Torgansme
{9 coe maroon
Infesione'& Clos
Source exogtne.
Infotions enaert
baclres snadret
lager 8 stv,
Les connaisany
snasrobioe sits
Intectons ¢0 sont
‘omieres anes,
‘ovale net past
1 cs dinfoton
lieu fatoure
Santbioiques ee
‘snobobies sicte
Ie awroe de cose
le co0t cunt
Purine on
‘monvent une ugh
fos anaerobes at
Unnombrecroisa
lorsque sone
Clrt to car des
ties, par exer
‘suru le bacile
Gram négat me
les groupes bact
genre Boctoroises
scles enaérobe:
a ble. Malye
enane compen
IPs important &
es bactries are
‘mieux connateChapitre I
Anaérobies
Eisabetn Nagy"
4. CONTEXTE
Les bactriee anaérobles peuvent te
implquees dans wimperte quel ype
‘infection bactiense. La fore endegdne.
4 Torganisme est fo principal reseNor
4 cos meroorganismes mais certaines
Infections 3 Clostxtum peuvent avor une
Source exogéne. Le spose de giauts dos
Infecionsenatrobies Impaquant lal des
bactées anaérebies et serobies vane de
igor 8 svi,
Los" connaissances aur los bactries
‘naérobis ste at lure ies done las
intectons se sont beaucoup ameliores cos
omieres antes. Pour aunt a ondance
lsctolarestpas on faveurdelout recherche
fn cae dinfecton, fit Tinfuonce de
Plusiours facteurs, comme ln prescrpon
Gantblouques ves efteacos sur ls actos
Snaérobies sites lore dinfectone mie,
ln dre do eoisanee de eas bacteres, of
le codt dune tte recherche
Purtant. les onnées lee lus sécentes
‘montent une augmoriaton dla résistance
foe anabrbies aux antbiotques nraiant
Uinnombrecroieant cece harapeutguss
lersq'llo sont rats oo fagon among,
Cat te cas des infections & Cosisum
siete, par exer.
1.4,__ Evolution de a taxonomie,
‘Aucoursecesvingtdemiérsarnéosetavec
Favénement cu sequengage, la taxonomio
des bacteres anaérebies a beaucoup vl
td nouveaux genes st expoces ont te
‘crt Cate dvaluton taxonamgue touche
Suraut le baciles a coce! snared, &
Gram négatt, méme s lea concomeé tous
Tes. groupes bactérons. Par exemple, Io
{gone Bactoroes ne comprond plus que dos
Iacilos anadrobes & Gram nega resistant
Ala ble. Mal oxte6veluton rapide et une
‘ertaine “complaseation au en découl,
Tee Important da connate fe taxonome
flee boctries enaérobis ces tn de
‘mew connate lee sesocatone pahoogi
cto ins partipe Faméloation dy
agrostemierbiologgue,
1.2. importance des bactérlesanaéro-
bles dans le lores normates
les bectres snaérobles ont une
composarto majeure des microfores
es dent dans de. nombroux ses
‘anatomiques, 00 eles sont pls nombres.
(que les bactéresasrobes, avec un rato de
‘vt & 1000071 Tableau).
Les trois principaux sites colonisés par les
actos anasobie srctes sont la sphére
buccale, le tacus dgesif ot Ia. sphere
vaginal. La campostion de la fore varie
do mane sgnfcaive colon les sites
nator
2. ROLE DES BACTERIES
ANAEROBIES DANS LES
PROCESSUS INFECTIEUX
Bion quo le nombre despices anaérobies
présentes dans les foros sot dlove, pou
ene les sont impiqubes dans les
Infections numaines, Os nombreux agents
pathogénes araéreies appartennent aut
More endogénes du patient et so compertont
en opportunites dans un contexte aver
‘Tres pou de syndromes sont dus & es
bactées anaérobios exopenes. Cesta cas
des infections & Costcum, par exer
les actos anaérobies sont souvent
responsabes dinfocione mes, Oans co
as [a spoce de grave va de ger 8 es
‘grave (Tableau I).
Un portage asymptematique de Costin
ici exste cher home et animal, mais
responsable de pathologies
‘lent dune dard &
le cite. pseude-membraneuse.sévére
Pour pus détais, 86 reporter au chapite
sc,
ani2015 omnes“leat, eqns clone ebecve antroto a hea Gee antes Tabeas infc
oo a at oa
ee a
Tess tampon -
cm : 3
[Peptococcus | + + 2
Peers : : g :
peers : 5 :
a : : :
Bete rac ; ; :
\Seeramas : : :
seo : :
[merce 7 3 :
i : 5
eet mac? : 7 : 3. RESIS)
eames 5 3 : ANTIBI
be pal kt
seseice : ° a tec aneh
ce é : é ‘comague
— tren, eu
= SS poe rronobecana
i Pan ern cou do fo
pened
Gos ager
femora
Donita
coeur
‘cos tao
ton covet
fr estan
Soctonert Te
ttre ag
ta Ont mestes anatomiques
‘etn ai
een)
las
“Tableau Infections impiquant réquemment des bacériesanabrobies,
RESISTANCE AUX
ANTIBIOTIQUES
De par leur métaboime respirator, Jes
haces anaérebles ont une reasiance
Intinséque & de. nombreux antiques:
‘uinlonos et froquiolanes,
DDepusle début des années 1870, ncbsore
to augmentation constant dea rsistanca
de ces bacties a der antbiciques que
Fon eroyat toujours effeaces, souls ou
fon association. Les bactéos anaérbies
acuollment os plus resistant sont
Bactorldes rags elles espaces assoclees
CCopendent, des resistances émergent
également chez les cooe anadrbies 8
(Gram post et chez los bases anabrobios
sporués qi élalent auparavantconsdr6s
‘comme rs senses aux antbiovques ant
anaérobies. Deco fa, les antbichirapies
“mpinquos sont amendos &évoluer.
Use combinaitens ta actamines nour
botalocamases, les carbapendmes,
le. méteidazole, la tebcycine et les
Muorequnalones de quateme generation
ont consis comme les antbiotguss
Tes pus efleaces. Cependant, es roseeux
do durellance natonaux et iiematoneux
‘montent une augmentation dea reaistanes
1% des souches de Bacteroides. sont
rsitantes aux carbapénimes ot les
souches de Boctorides spp. ot do cood 8
Gram post présoriant dos resistances au
ania0s nme a5‘maondazole, Ent, en dépt de phsiours
fees therapeutques, las soucnes do C.
tise sont toujours senses fo vito & la
‘aneomyelne et au métonidazle,
Ui ealotaoe dee baci anaérobies aux
anubiotques peut passer inaperqe, du fat
ue:
Te taste valuation de ls sensibité
‘aux anibiosques sont rarament mis
fen cauvre an releon do. containes
Techniques et de cot.
+ de nomtreuees Infections sont mists
ft ‘sont eftescement tates pat
Sebriderent ou erainage
+ Totes dos anibiotques vis-.vis
fle Boctvies arias qui sont co.
Imeuqutes dane le procossusifoctoux
st eta général cu paint pouvent de
mane slgnfcaive ot faverablomont
Inuer sur eu do infocion
+ Unéenantiloninadoquat dos constions
Pré-anaiiques —napproprées, des
Iéthodes¢isentfeaton et vation
ela sents longues ot fastiieuses
lImfent a detection de Témergence de
bactresanaérobies resistant,
4, PRELEVEMENT ET
TRANSPORT DES.
ECHANTILLONS
De i qua u prétévement dépend la bon
Isolement dea bactées anagrobies & part
‘fun échanilon mono ou pluimrebion
[Céchantiion date pret do la Pore
norma saprophy. Un contenant adapte
our la rocnerehe et preservation dos
bactéies anaérobies “dat Gre utlisé
Caspr, le curetage des tissus profonds
tls bopsostssulaes sontrocommandes.
ls tenentlone sent souvent en potes
Aquanitée et dlvent ete, to cas échéant,
royds avant leur examen, mieoscopiqe
ft Tour moe en cutie. Lee chanions
‘culls aur seoillon sont déconsasés
tt dowvant tie ites & doe crconstancos
eéelses (gor, par exemple)
‘+ En cas do susie chronique ou ote
vonique, le prslevement dot oto
ffecud au moyen dune fine agutle
Par vie endascoique
+ Leg" prstevements des voles
rospiatores infriowes (abobs, par
‘xempla) sont rales por froscape
‘sate rotate.
+ Lee pelaverents soue-gingivaux ou
canalaes pouvert Be recuoais avec
os pontos do papior, tansporés en
‘aosphereanasrebie
+ Pour la recherche de Clie, 22
referer au chepite dedi
Le transport dos échantlons avec recherche
de sactnies anaoreies no dot pas ete
‘ere.
Toutes les apes do Fanayse dowvent se
fate en stmosohire anaérobie,
5. DIAGNOSTIC DES.
INFECTIONS ANAEROBIES
‘54. Examene macroscopique st
~__mleroscopique
{examen macroscopique do réchantton
peutrovleruneforteodeureteresutantce
[a précenco facies gras voates, amines
t'dHS par exemple. Co type dodeur
fet bpiquoment on faveur de. bactares
‘snstrabies. Une fuorescence rouge bigue
fivble 1a presence de” Porphyramaras
(ou de Provotla pigmentées. Des tstus
Inéerouques nore signent is présence de
bacles a Gram nbgatt pigments, A nor
pal la presence do granules do sulires.
Grice & ta coloration de. Gram, Texamen
microscpique rovelo la richesse de
chantlon en bactéres (sbondance ot
ivorsté do. morphotypes.bactérens). I
Ssuggere las miloux spciaux @ use. Tout
feat enire Tes morphologies visulsees
8 Texamen micscoprue ot ls colonies
‘blondes en cule dott mie en cause Ia
‘qualé du préiverent, de son transport dos
‘luxe culture isoudelanabrbiose
Dane quelques eas, examen mcrscopiqus
mat €0 fare lo diagnostic. Crest, par
‘example, leas pour la vaginas bacirianne
Remarques
"Le les doivent tro soigneusement
bide avant protvemont
orci anie2015
00 Fon vsuatse 1
ft 668 nomex:
(Goreporer auch
aspect ora
post ost en fx
Propionbacterin
Ls presence de
dee ecremtis
éehanilon est
perngens.
52. Cultures
Pour la plupart
recommandé ou
fon select ck
‘cationnée des:
(10%) et deviant
Les autres iow
* une gélose
poles
bactoes 4
‘Bopha
+ une eos:
kanamyeine
de mouton
Provotela¢
boctles 8G
+ une gbose
inhibee ts
facatatt oti
contains Ce
Les boutons do
au moins 14
Dactires.anaée
rials (0
dat eat que
Incubations sie
‘natrobi, En &
‘de sacs avec
48h dicubator
Texposton a fa
rmoin 6620 in
ot ire conte“enique ou cette
ment dot ots
‘une fre aiule
‘es (bets, par
par fescone
ous-ingvaux ou
re rooms avec
f transports en
> 6. aie, se
4
avec recherche
te dot pas ore
‘yee doivnt so
be.
‘es
NAEROBIES
»oplque ot
‘se échanion
ete resutant de
lates, arines
22 ype dodeur
UF do bactcos
ee rouge brique
Porphyomanes
‘ios. Des tats
Ia présence de
ments, A noter
tiesto wsutire.
‘Gram, Texamen
1 ticbesse de
(abondance et
5 action).
luca wile Tout
‘ges wsuaodes
ot les colonies
tte en cause la
son ranepor, dos
‘de annerebioee.
sr mcroscopiaue
fost. Cost, par
nose bate
10 Fon visuals la présence de clue calles
ot des nombresx morphotypes bactriens
(ee poner au chap deci).
aspect dramifcaton des baci Gram
posit est en favour de Actinomyces 890.
Propionbacterum spp. ov BiSéobacterium
9.
a présence de bales a Gram posit avec
es xromtés carées sans spores dans
Fchantlon est en faveur de” Clostrum
perengens.
52. Cumuros
Pour la plupart des échantions, I est
recommandé Sutiser un meu de cure
non. slecif de type gélose Brucsta
‘cdtlonnée de sang de cheval ou de mouton
(0% edo vain K,
Les ates mile 8 ensemencer chert
une geese. Bacteroides be-esculne
pour la recherche séecive dos
bactries du groupe Bacteroides ot
Blophie
+ une gBiose avec une association
anamyeine-vancomycin avec du sang
‘fe mouton qué pour la recherche de
Prevoela pigment ou on et autres
baciles & Gram négati;
‘+ une gilose phénylthy! alcool pour
Inhber les bacttres & Gram négatt
fecubati tiniber et ¢talement do
certains Clostilum,
Les boullons doivent dre incubés pendant
‘au moins 14 jours pour la recherche 6
Decree. anaérobies dane lee infections
‘aricalates (se reporter au chapre de).
Lidal est que toutes les manipuatins et
Incubations lent realisées en chambre
‘natrobie, En cas ullstion de ares ou
e sacs avec ginkrateur anabrobiose,
‘couxei ne dewaint pas dre owers avant
‘48h dincubaten. Avec es type de metre,
exposition & a des cures dot ee de
moins de 20min. La. qualité de Fanarobiose
ol eve conte 2u moyen indicators.
‘53. entiation des bactves
anosrobies
‘Une étape imperante esl reconnaissance
des dférnts,morphotypes de colores,
‘Cite reconnaissance se fat avec une loupe
(0 avec un stéréomicrosope. Ans 368
colonies qu semble sma & nl sont
‘ironies & la foupe Docu. Toutes
Jes clones ont icentfées, rélelees
ur ols gloses qu serontincubses sous
‘naérobiose, CO, et amosphére normale
De mame, les colonies benetcient dune
coloration de Gram si ideneaon repens
surces méthodes saseques.
dentition des bactares anséroles
repose sol sur des mathodes clasiques,
SOI sur ln specvemetie de masse 36 ype
MALOL-TOR.
La méthode dassiqe comprend Iuiisation
Ge 3 daques dantnctques : kanamycine,
Vvancomyeine, colstie.” Cote orentaon
brésompive est comple part recherche
ela mobi a croissance en présence un
‘isque a 20% do il, a reduction inl,
Isrechersbe dune ostlaes, dune urease et
dune nite reductase, Cats Wentoaton
Deut dre avanageusement remplacto par
es glories identcaton miniatures
Deputs pus de cing ans, a spectrométre do
masse MALDL-TOF permet une is bonne
‘cena des bactrias anaéobies Ee
‘2 Tavantage de reide, préise ot pou
‘oateuse, homie achat de Fapparei.
En cas. dideifcaton doutouse, lest
possibio de recourrau séquangage du gine
Se TARN 165,
54. __ Teste do senate
Les teste de senate doivent ae
‘fectuts pour les actiies anaérbies
‘inquement importantes Is dent sue
lee recommandatons du CASFMEUCAST
(se opoter au chapire ci)
55. Autres teats
Les tosis séroiogiques riont pas dinést
Pur le dlagnoste dune infecton & C.
tice, so reporter au chapive desi.
om 036 crates 810.
1",
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Cina! Microbiology 10h elton. 211
‘lum Secton I Anaerobic bacteria.
Chapors 47-51
Bartonella s
Guillaume Avot?
BonottJevinae
4. CONTEX:
EPIDEMK
CLINIQUI
Les Bartoneta eon
es hamates, capa
es calles thors
Pim 6s rent
a, plseuss powe
Larecherche de Ba
fucoure dela mala
Ionia) ot es:
ctvoniques (2. ¢
endocadte & he
‘unten 8 hence!
Palement, de act
fans domo xe
‘wanchéos (8. aun
ie au cous de
tana, 8 hensslse)«
‘cours de atecon
omic ha, par ©
Ge risque pour in
‘eontactavecies ch
poneable deiner
8, bactfoems, fe
action, ost res
ri avec hémolys
onda la pas
Wi une phase pt
eutandes rouge
pperuna) : cate «
‘istrbuion are
ee aa présence
cat rion.Chapitre
‘od asor decor
ight mass spec.
ably or he or
fanaerbie bacte=
mie. 9 217-238,
‘an E, Tos G,
2 onteaton of
seteroides by mae
Seeplonionzaton
‘pectomety. Cin
“8: 700-03,
PE, Frieden A,
sho ALT in
‘im, same re-
ss tooxygonon the
TOF ME specrum
‘la Mire In
{oar
rohit Manual of
{exon 2011
\naerebebaceri.
Bartonella spp.
‘uilloume Arlt”
BnoftJauthae
4. CONTEXTES
EPIDEMIOLOGIQUE ET
CLINIQUE
Los Bartonella sont des baci parasites
es hémates, capable dese mutipter dens
dos cols ethers de calles
Par les derentes espéces de Baronet.
1a, plusieurs peuvent infctertHomme dont
B olzabothee, 6. grahami, . hensele, 8
oetiorae, 6. quitana, B vaso, B. was:
hoonsis.
Larectercne de Bartonella spp estetectute
‘aucours dela maladie des gifs du chat (8
Inonsela) ot de syndromes gangionnaies
tvoniques (8. quitana_princpaiement,
‘endocardte & hémocultires négatves (6
‘uitene, & henselae, 8 elzabathae, pine
plement), do bactiomie chez les patents
‘sans domioe ie (8. quitan) de eve dos
ranchées (6. quinans). anglomatose be
cla au course nfecton & HV, (Buin
‘ang, 8. henslse ote pose Népatique au
cours de infection & HIV (8. honsla).
Lalenotame chronique et fabsence thy.
(Gene vostimenia (chez les patents sans
omic a, par exemple) sont des facteurs
‘de rique pur infection & 8. quintana. Le
‘contact ave les chats ot urs puces ext roe
ponsabledetnfcton 2B. hensoae.
boclforms,Tespbce type do co gene
bactéron, est responsable une septc’-
ime avec hémolyse (have dOreya) cores:
pondant la phase dinvasion ague ot su-
Wine phase plus laterte avec tumeurs
utanéos rougedires ot fables (vores
peruana) ; ete espece pathogene a une
‘Satrbuon géographique mite aux Andes,
Sib la présence d'un vecsourspécaue de
cate gion,
PRELEVEMENTS:
MICROBIOLOGIQUES
Les échatilons fs plus adeptés au de
gosto de eo infections sont
"un peloveront co sang sans ances
fgulant pour sérlogie suit dun deu
Sem preivement& quize jours dn
{ecvale minimon
+ un petlaverent sang avec antcos
‘ulant(haprine-EDTA) pour culture
+n peteveront do sang avec antes
‘ula (EDTA) pour la Bolagi molecu
tre.
Les biopsies (peau) ots prevents
‘esas (ves natvos, prothases vat
lees, prothtees vasculaes) son ecuels
dane un flacon side, Los biopsies cut
es powentéte prélovées avoc Un « pu
atblonsy» de 8mm
3. TRANSPORT DES.
ECHANTILLONS
Les ehantilons dostings & a culture sont
congelés& - 80°C et rancpoiés en carbo
(ace. Les aures échantlons sont anspor
{son 24a 46h atempscature aban. Los
‘chanilons pour recherche par arpifoaton
‘génique peuvent sre Tals cu congeles, &
eft, dos coupes paratinges peuvent és
‘lsbes
4. EXAMENS
BACTERIOLOGIQUES.
Sérologie ee
La séroogia est a méthode Ia plus utlsse
‘on route. Limmureuorescence inte
‘eta méthode de rtéconce carla sonst
{ta spéifcé ost moins bonne on ELISA
Des anigénes sempurits de Banal
9p. oblenus parti de clue cota sont
is. La sérciog permet de connate les
tives digG et dial
one2038 crates 87Un tre cigG # 64 est signal; un te
(ige > 800 a une valeur pecctve post
tive do 80% pour une endocardt I existe
une variaton danigénicté de 8. henseise
Selon les ouch, Lexistnos de ractons
fantigéniquee crosdes ost responsable dun
‘manque’ de spécifcto, notanmment avec
Cone etChiamyal, de caranes roussos
commorsals,
42. Immune-détection
Limmune-détecton do Bartonella spp. est
possi sur prlevament tissue fais Ou
fue tines: Bopsieeutane ou valve car
dave. Linmune-detecton repose sur Tu
Seaton danteorps monoconaux ot su dos
tochiques dinmuno-Ruorescence ou d=
smune-porexydase.
43, mettre,
Lisolement per ulus ee pratique wu géose
‘au sang clincubée pendant 4 semaines au
moins sous 5% de CO, La chage bacté-
fonne est plus eevee chez les pints i=
rmunodéprmes.
Liselement d Bafonaa sop dans un pre
‘erent toyours une signcaton pathol
‘ie chee rhomne
44... Mentieation
En pratique, co sont es outs 6 biloge mo-
lectare ql apprtantidntoaton de cort-
tude onde sur Famplifeaton genius sive
‘dune anaiyso dos données de sdquengage.
a
5. Amplifeation génique...
Cet une méthode ciagnostque ue quand
fle est applaube & des ganglion, des ag-
rmonts de tissu ou de pus. Pusieus cles 4,
ouvert re bliss *gbnos giA du gine
‘rev dola séquonce nar genique 165-235.
6.
58 cnn ameaois
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rame2016 ores 9Bordetella
Nicole Guiso*
4. CONTE:
Le genre Borat
ont Boreal
sont adaptdes 3
Suns co. Bordete
‘98ne do Farmal
Fospratcos chez
5. bronenisopica
aerenco 00 8.1
15, peuvent ere
tes chs Thomm
ta tansmission
rapertuscis eats
Seat par abroso
personne Intec
tussis peut iret
‘omes Fagiseat
‘sommes Agees).C
‘serve avant Th
ten, is eoqueluch
‘anil, Pomme p
uel.
B holmes ost ph
eapicas. Elo ost
‘mocutres. 36.
lrépancoytaires.
‘re eo ou
brates. On ne
ison power pe
‘ranemiston
2 OBJEC
obec princna
tedune coqueat
ravertussis rs
Fach ot retart
(Chez ts sower
fants non ou nee
episode Je Tous,
‘seodie @ une
‘agnostic dota ¢
(Chaz le enfanis
0 cna amas
heBordetella spp.
‘Nicole Guiso™
4. CONTEXTE
Le gene Bordetola comprend 9 espéces
‘ont Bordetla pertussis et Bordetella pa
Tapert sot responsable de a coque-
Iuehe chez Momme. Ces deux especes
ent adaplaes @ homme car sles sont
fies 0 Bordetella brorchiseptia. patho-
fine de Tsnimal, responsable dinfectons
rospraters cne2 le patent immunedeprine.
8. bronhisopes et Bartels holmes la
tirence de 6 pertussis et 8. parapetus-
‘35, peuvent re responssbles de baci
Ines ches Thome.
Ui tenamission de 6. perussle et 8. pa
rapertusis est stictementitrhurmaine et
fat par abrsol lors de a tux chez une
personne infecie. Linfcton due & B. per
tsi put Br és sere, surtout chez Tos
novrasons de moins de 8 mois etl per-
Sonnes fagis6es (lemme encase, per-
onnes Agbes),Confairement& ce qui alt
‘beer avant voducion de la vaccne
ton In coqueluche rest plus une madam
fant, Pomme peut te ints & imports
quale.
8 pees est pus oignée des wis auras
‘spaces. Ele est prnspaiement sage ane
Imocutires Je pation asplenques.etou
‘répanooylares. Cependant, ele peut sus
‘re lol ou déecte lors dinfectona res
Piratowes, On ne cont on reser,
ni'son powor pathogine ni son pow de
tranemseon,
2. OBJECTIFS
LLobjct principal est de raiser ie cagnos-
tedune coquoluche a B. pertussis ou B pe
‘apertussie lore une tux persistant chez
Taito et rata.
(Chez fos noweaux nts ot les Jeunes en
fanls non ou incomplétement vaciné, fut
pode de tour, quel que sot sa dus
‘sssocie & une apnée dot fare évoquer I
Sagnoste dela coqueluche
(Chez les enfants vacinés, les adolescents
chaptre BY
tes shits, une tox de plus de 7 jours
‘ol enn ia rechorne de cos baci
3. METHODES
24,__Prlavement
3.1.4. Powrfampiietn génaue.
Le plevement fe plus spprop est =p
ration neso-pharyngée @ Taide dun cathéor
fone place au bout dune seringue de 10
ri Le volume de sécréton recall dt ere
fe ordre de 500
LLempio de mileu de anspor, de type
Aamios avec ou sans chart, interes pos
‘voce resulta ela POR,
2 deat, Temples dun écouvlon sur tige
‘exe eat posable. scowl dot impe-
ratvement te en dacon alginate est i
Sieur def Taq polymérase) a ige monte
fest insérbe dans la nine paiement au
palais ot poussée doucement aust an que
possible dane lo nasopharynx postu
{oir ste 3 CNR), La PCR ost nutes
tour paronysique est prévente depuis plus
Se toi somainos,
2.4.2. Pourla cue
Ls mes échanilons (aspiration, &oifaut
‘Soul sont recuis pura ctr.
La culture pout re mise en cowe durant
les tos premitros smaines dei tux, mais
la proba cTsclorent décro rapidement
‘pre la promire semaine, Sa senile et
flovéo chez la reuvoauin (60 8 70%) Ele
fest pus fable chez Taccesoent el acute
hoz ule cagnostc st eps souvent r=
tarde,
Ue cituraeat nue la toux paronstique
fest prasente depuis plus de tis semaines
(8 51 fe patent rexoit uno antbithranie
‘apie depuis ours ou plus.
our la recherche par cut, a durée de
‘anspor des échenilons est critque. Un
miles de anspor protégeat la baci est
focommandé ice tomes dot excécor 2 &
‘empratre embante Letomps de anspor
onic 016 crate otne dl pas excéder 4. Ine faut pas Geo
"Wlonnerla gorge ou recuali los achat
32. Amplification génique.
En raison de sa sensbilté ot doa rapide
‘exbouton, Tampteaton génaque est un
‘iagnoste de cho pour a eoquluche. Oi
teres fomats de PCR an temps rl sont
‘ujourthul dsponbes. La POR en temps
Feat est plus sana que la culture pour le
Gétecion de 8 paussi, 8 parapartisis ot
holmes uraut dans le phases aries
de nfecton ou aprés une entbohérepie. A
Tinta de aout, la sons dof PCR
der avoc i credo os.
Le plupart des laberatores.utisnt com.
mmo bles do la PCR on lomps rol Ios
sbquenens dinsertons1S407 et IS00%. La
technique fon sur la géteton de 18483
pose des pobiomes en terme de spite
ar ole pout dtecterB. hamesi, 8. pare
‘pertussis et B.brontiseptea. De méme, is
PCR fondée sur 181001 permet a detation
{4 8. porepertese mole pare aussi de
brorchiseptcs. Ca sont onc des dagros-
tes de presence de Bordetla, lest ¬or
{quo ladetocton do Bote a pour Tins-
tantjamais 6 observa chez des enfants de
moins de 10 ans on France, bien aul ait
‘te dans aos pays
Larégion promotes du gine codantiatxine
eB. pertusai (pbe-P) ext Une ate cle
our une PCR en temps rel spsciique de
‘pertussis. ampliicaon de coi region ost
Spbatique canon présena chez 8. paraper
tussi et & olmest, mals ae ost vera ls
‘moms sensible qu la POR détoctant 15481
a sensi de Tamplieaton génique est
‘ova pendants 23 promires comainos
fe tous
33. Miloux de ctr et factors
—leuengant a cular
La cule pomet disci ot aidentir
agent responeabie mals aussi de. deter
miner so sensbilé aux antiques. Des
Souenes rsistates aux macrolides ont 6
Ieoles en Chine, une seule en France
Lorsque Ios mieux de cuture sont dspo-
nies, a echerene de Bordetta spp. st
‘ectube par ensemencement de. mieux
‘contenant 10% 15% de sang de cheval ov
{8 moulon (Regen-Lowe = céphalenne 40
aim), Borst Gengou, par exemple). Le
‘ubstluion de la cephalonne par de Foxe
line (0,25 pain ou do la meting (25
Haim) pemet a evlssance de B. holmes.
Ua conservation de ces mieux west que de
‘semaines Les miloux de cure sont ino
bis ju 8 jours a onion 35°.
Los foes sont envoyes au Canto National
Reference de la coqueluche et ates bor
‘eteloses pour Wena, typage st at
Dogremme
La sboogle de la coquliche presente di
‘érens neorvdrgnts qui ont conduit & eon
‘bandon
une. absence ce tests commerciaux
vices
+ unos mauvaisespéciet-Incapects
‘ateencer ancorpsvaccnaux tan
{eos infectoux:
+ la rocnerche danteomps antperusis
sera de plus en pus resins du fat
{o faugmonation dol couverture vac-
‘ale.
4, INTERPRETATION
La sents de I PCR ost rb bonne chez
les nowvoaux nés ts jeunes enfants. Chaz
lee adoisoonts ets actos, alle depend i
‘ll entre debut al tou a opel
tment ant que de a charge Dacione,
{a senso 6 a etur var auvant rage
Feta inmun du patient: ele est a pus
Serbo cries nouriseone non vaccinés on
‘debut do maladie ot la plus basse chaz es
adolosconts ot adutes présertant une tox
‘puis plus de vais semanes.
2 cure et la PCR sont les lagnoses
iologiques & prvi. sont tous los
deux remboursds
Ceauiy a tou de fare on praquolers dune
‘comment, ce qui aval jamais 68 cbserve suspicion do coqulucho est inqué Sansa
‘vant en Europe. Figue 1
2 -crapne 5 ame a0is
Figure 1. Dagnost
BIBLIOGRAPE
4. Guiso N. Coc
enfant ot 2
son SAS, 6
inecteuses,
2 Hegere N.
‘whooping c
Ta poruses,
‘301-1403.520g de cheval ou
+ tphaoxne ($0
par example). La
Drie par Foxe
Pia mle (25
ce de 8 holes
lous rest que de
(scutre sont.
‘on 35°C.
aU Cento Nationa!
the et toe bor.
lon, ypage et ent
che présente a.
‘ont cond & 200
sts commerciaux
‘eit incapacie
oxps ant-penusss
> Tesvene du fat
‘a cower vac
TION
st bs bonne chez
Ines enfants. Chez
tes, ele dopond du
tour tf preeve-
rebacteenne.
‘ara suivant ge
leet a los
‘is non vaceings on
Us basse chez les
{eenlant une fou
tls agnostics
Ts sont tous es
pratquelor tune
‘stinlqué dane
Figure 1. Dlagnosti Bloque en pratiave
oH
Points forts
© Le dlagnoste bactériolgique de la
eagudice repose sur la PCR et a
tlre mises en core durante 23
semaines suvant ie début lataux
= La senablté de Famplfcaton o& 4
rique est sevée pendant los 2 8 9
promires semaines de oux
~ a séroogie est abandonnée en ra
son do son incapacté &distnguer des
antcorps vaccnaux de ceux produits 5
lors une ntti,
~ Dans locas dune tux de pus de 3
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In nasopharyngeal samples om French
patents wih suspected pertussis. Cin
Nerobil 2071 49 4347-4348,
9. Guile 8, Descour G, Gilet Y, Etenne
{Flore D, Guo N’ Macralderecis-
‘ant Borie porusss infection in
owbor gif, France. Emerg Infect Ds
2012.18 966968.
10, Pitot LF, Emonet S, Schrenzel J
Slogist © A, Postey-Barbe KM. Bor
‘otella homes: an under cognised
Bordetella species. Lancatnfecion D+
sooges 2014.14: 510-510
Se internat
+ phn pester rechercheluntos!
fim_ crews te du CNR pour a
‘ealsaon du plover)
4 One 53 ene2eis
Borrelia bu
Benoit Jaunc*
‘Sylvie I de Mart
La borrliose de.
teeta Zoonase ba:
fiques La ps 6
Nora: Cate nec
rochétes du genn
Borrelia burgers
for 3) dont 18.¢
dort danse
‘Spies expeces
ont Bazil
‘onou so (63)
fandis quaux E&
pahogéne ost
‘spaces, Bisse
Taina, on 6
rue et encore
ta" tansmision
Fone 20 pred
hématopnage, a
Irodes reinus on
parton gograp!
‘ins superposab
Ces demrs exo
Diotopes hamide
sete slsonnie
‘sraphique ts sor
Sees comme ep
fue dos zones ot
moves. richu
de Lyme on Eur
tion gtogranhige
te Sud ent ls
39°N (aud dot
Ned (unis, A
vers TEst do TE
jusex‘en Ruse
Ente fe abut dk
tore, os es |
bcssaie aleur
(oot alos pouvechapire EI
Borrelia burgdorferi sensu lato
Benoit Jouthac®
‘Sylvie J.de Martino”
La borrioe de Lyme (ou maladie de Lyme)
feta zoonote bactrenne tansmise par lot
tauos fa pls fequonte dans Themsphire
Nor, Cote ntectin ost cause par des sp
rochétes du gonre Borla et complexe
Borrelia burgdofe sons lato (B. burgdor-
fon 8) dont 18 vspices sont acualomnt
‘dcrtas dans le monde. En Europe les pi
‘Spalos espéces pahogéres peur Thome
SontB. azll 8. bavaronas, 6, burgdor
Ssenau stricto (ss). B. gar et B. spleinan
tanais qvaux Etats-Unis, la souo ospéce
pathogbne est B.burgdover ss. Tres autres
pbcas, bisa, 8 staniae and B. va-
lasana, ont 616 rapportes comme patho-
(genes, copandat, os données sont ctl
Femenianeedotques et our valeur pathogé-
que est encore iscatde
Us" tranemiesion de oss proche &
"Homme 56 produ par paar ¢artropode
hamatophage, [aque cure du gene odes,
Inodes neras on Europe ocidntao. La ré-
Parton gsogrphique da cai Infection ast
Sins superpsatie cate de ses vecteurs
(Coe demiescolnisent néoessarement deo
otopes hunsées ce qu condone teu
fone scleonnare et leur eaten go
(raphique ls sont absents des Botopes roy
Sees comme le pourtour médteranéen ans
(que des zones data aurdessus do 1 500
Iaves, rious, vecteur de le boross
fe Lyne en Europe, présenie une dsb
ton geographique qu send du Nora vers
te Sus ene es lthudes 65 °N (Iande) et
29H (gud de tal), ans qu'en Alique du
Nord (Tui, Algée, Maoe) et de TOvest
vers TEst de Europe depuis Te Portugal
Jusau'en Russe
Eni le abut du cirps tt in de Fa
tome, lestiques effectuent un repas eanguin
neessaire a eur veloppement pendant ie
‘quel elles peuvent acnubri les bactres &
urge, ec tous ts states de tur
‘eveloppement lave, nymphe ou acute, La
Uansmission vans-ovarenne est excapin-
nel. Le reserva est pingpalement const
{us parts pots mamafres, les Oe,
lee conve
En Europe, fncdonce de la bordliose de
[jme augments globalement selon un ra
‘ont Sud Nord ot Ouest Ext. Ele et max
‘male dans Es do Europe en Sioveni, plus
446220 cas pour 100 000 habia. Eo ost
‘galemontdlovbo aux Pays Bas, Suisse et
‘Ati (> 100 eas pour 100 000 aban)
{inccence en Alemagne et en Repubiue
“Teneque atin enon 40 eas pour 100.000
hablarts. Ele est plus fable en Espagne,
Portugal t Royaume-Unl(de 2810 eas pour
100 000 habits) En France, ls donngos
renee montent une inedenes moyenne
fe 42 cas pour 100 000 habs. Line
‘dence est sabia do 2009 8 2072, (1 8
eas pour 100 000 hati) En fonction dos
régions tangases, inadonce moyen ost
‘arial 184 ons pour 100000 habitants en
Umousi, 157 pour 100 000 habants on A
soe, 0 en Nord-Pas-de-Calas el en Bout
omne. Vincdence augments de Juin & Oo
tobre, période dace maximal des tques,
ss pie de tron de ge de as ont
tenia Set 1Uane etS0 et 7O.ane, Le sexo
est procte de
4
‘ots pg de aus ete pe Ba
burpdare a até este en Europe
tue sou 5 Gest Sovoppent ure
Icon ave oO ot secre
35 signe clique. Cate donnée est
imporans & pence an compte pou
alsaton et Miterpetaton des resutats sé
rologiques
En cat infection active, risa naturete
dela raise 6vlue en trois phases, locale
‘to, dlsseminge pésace et ave. Le dt
moyen de Tepptiton des signs dntecton4 Bort upart sr
prbcoe est 628 +10 jours, infection in
fale loraiage se vadut dane ps co 90%
es cas, par un Ste migrant (EM). I
‘Sagt dune lesion ungue Je pus souvent
{cu multiple dane mains de 10% dos cas
fen Europa). dvolaion cantuge, centre
parla pire do tquo. EM no dot pas dre
Confer avec la eacton éyhmateuse l-
alo qui appara on quelques houes, due 8
1a pig ete mm pet dure phsiours
semaines 3 plusours mois et ain un
Ganéte de’ pluseurs zaines de. cent-
‘motes va 'amonder, mime on Fabsance
eaten, mais es sprechétes peuvent
pesister plus longkemps dans le derme. A
e sla, Tanthiotérapi réduit fremont
1 due de Tevluon da TEM, prevent las
compaicaton et peut logue e devaloppe-
‘ment dela reponse humoral sf ratemont
fat précoce
En absence de alten, environ 10% des
EM évoluont en Europe vers une infcton
ssominge. La phase disséminbe proce
69 infection survant en quolques semaines
quelques mo inatoment, les patients
fxésentnt une bacteémie Fanstore non
‘etetale, asymplomatque ou pave! symo-
tomatque eyndrome pseudorappal modé-
1) a suede aquele peuvent se dve-
Topper dverses manifestations slo a loos
[eaten tosuiare des speochatos.
En Europe, ls manestatons neuroogiquos
sont prédominantes_(méningoaieloné-
‘its, prajses facials chez enfant
autos manifostatons powvent te obsor-
woos: thumatolgiques (mono- ou oigo-ar
thls réicvaries dos roses arteulatons)
principalement, mais auss cutesy
Bhocyome born), cariaques ou oct
laes. Des artvaigis dituses peuvent re
sbservées rimporte que stade de a male
fo les sont alors assecéos acautres ma
hitestatons evocatices. loos, os ava
(es cuss sont inautiantes pour pose le
‘agnostic de borélese do Lyme.
En Tabsenee de tratemant infecton peut
‘evolu vrs ls chaniot ot dos mantel
tions tardves neurlogaues cuts acro
rata chronique avophiante) ou rhums-
‘ologiques pawent ere ebsorvées,
2. OBJECTIFS
I convient de connate stuatonsnéces-
‘tant la relation tate pour confer
ne infection .burgdoia Tableau
3. PRELEVEMENTS
Les prlbvement réalser sont fonction du
sage cinique do la male:
ST Au sade inital atime migrant
lorsque lain et pique, clgnos-
te est purement cingue.Aucun pre
‘vement rest neste pour contre
ledlagnoste. En eas de sion atypique,
tun ais dermatlogque et souhataio
‘ot uno rechorche draco par PCR ou
par cuture sur biopsle cutange pout
tire realicee
+ Aursade dséming, les prléverents
ot anaiyoos realise vant en fone:
ton des sgnes cinaves,
© Newroborrlses = priivemonts do
‘sérum (600 Lau minimum) ou wn
{ube sec de sang (9 m.) et de LCR
(600 pL a 1 mL) protoves to méme
Jour et ransporés on 24 a 48 h 3
ti temperate ent + 2 et
°C, pour une sérogie spéctique
ft recherche st Besoin dune sy
these invainéeale fantcors spo
‘iques. En eas do noureborloss
‘igus précoce (15 promiors ours)
‘ten fabsence de detection ant
‘carpe dans Te LOR. une rechorcne
‘rece du pathogene par PCR spe
‘flue peut ere ndquée (500 9
rnimum, acheming 8 4°C on 24%
‘ou congee 80°C),
+ Arteta do Lyme : pétéverent de
‘sérum (600 pau minimum) ou un
{ube sec do sang Sm) pour sério-
fl spootique. La recherche AON
‘Se & bureorten si par PCR spb
‘flue sur prelavemeat de. base
farculae ot de teu synovial est
indiqute s le tableau cinigue west
as typique (600 pL do qude art-
‘ular au minim, aoheminé 8 ons
temperate entra? 2°C et BC an
‘zarou congelé 880°C).
es 05+ aries
La mise enévdone
catre ou par POR.
{sou synovial) ov
(CCR. thud ate
vail (auour de
‘synovi, t 20%
Ceutre ndcosst
at des prélevene
tla vechercne ur
‘umicroazope 3 fe
phase. Le di 36
‘Se habituelemente
Soren ses une
fas _arate brani 54
stuatons ndoss-
‘5 pout eontimer
fist (Teles
irs
er sot fonction du
Sethéme migrant,
‘pique le diagnos”
Iauo.Aucun pr
se pour confer
otosion atpige,
Ge est eounaiadle
redia par PCR ou
Sele cand. pout
les preevements
be vation on fone
rolovenents do
4 minimum) ou un
(Gm) st de LOR
proloves to méme
fenmaane
wots + 20 et
loge spdcaue
besoin dune syn
fe dantcors sp6-
40 neurborrlos
'S premiers jours)
le detection dant
JR, une recherone
‘ne par POR spe
esque (500 pl av
ing 4°C on 24 6
©),
‘xleverent do
4 nim) ou an
(mL) pour sécio-
"recherche AON
SL par POR 96.
vement do que
issu synovial est
feau cinq rest
1 do ieuide art
mvachemne une
rece eC en
a0").
Tableau | Recommandatons pour le diagnest bilegque en fonction ds formes cniqus
oe
Se
=
ree ee
SS cus
=e.
—— =
eee
=| See ewer
ee
— Se
=| =
=
ss
—
‘nr at err Se rere neon Nant
“TeSjnnae nthe ong poco bre a tana
plc ngun co pasar
‘Ataintes cutanées (acrodermatte 4, METHODES
vonique trophonts, hymphocy-
tome bomen, lion erynama:
touso alypque on Fabeonce daute
cause): punch biopsie de peau (28
‘41mm de Gamote apres anoshésic
locale) pour cultire en aboratore
Spécaoe (8 achomingr en 26 848%
én mille de anspor BSK a tomb.
Fature emblanto au CNR dos Bore.
fa) evou PCR spécinque (congeise
220°),
La mise on evidence de 8 burgdofe at.
‘ure ou par PCR & part de lope (pe
tissu synovial) ou de
(CCR, tnuide ariuiae) est de sonsbte
re cian
Ls _démarche sérlopique_recommande
pour le dagnostic dels beetose do Lyme
‘ompont en France comme dans de nom
bree pays Europe, doux tops.
Un premior tes de dépistage, pus souvent
par ELISA, pus, so résuat est post ou
‘outoux, un test do entation par rm
no-empreinte sur fo méma échanilon afin
‘Cavgmener a spécfcte de la séoogie
Lintocion par &burpdortsindt une
Tqudes Biclogques ment
valle (autour de 60% pour Ia peau et ia nécessare
‘synoviae, © 20% pour le LCR),
Lcultur nacesste fensamenoementinmé-
Sat dos prélovements sur mlleu spatiqus
‘tla recherche dune crisance bacerianns
‘au micosoope a fond nor ou a coneast co
‘hase. Le dia de reponse do la culture ast
‘Se habitalement do somsines car 8 burg
‘over sl eat une bacrie a crssance ee
4 ponse immune humoral spéctque gu
‘intneiia au cour du tne sana rae
‘ila phase dlsséminde précooe,# peut ote
analyser deux préléverents
fealsés a 3 ou 4 tomaines dineral
Pour les tests de dpstago par ELISA ot
=
Jct ie @ ia ecture vuole ds bandos.
tors la phase précoce de nfcton, la
tétecton par immune-empreint ¢anteorps
fe ype igh igas contol protine desu
fee OspC et a fapstno fa suspecter une
Infection debutant. Lore des phases secon
ates ot taives, oo test permet de metre
ten evidence un prof antares de ype Ia
‘éigds conte de multpes sragenes do B
Durpdoror sf Ces méthoses immuno
pron, dot la speiiots est suporoure 8
‘ole de ELISA ne dovent ro ulises que
our confmer les série ce depisiagos
postves ou doutouses. En cas de négatve
16 des tests ELISA. est & dre en absence
‘Fanta en quantié detectable avec un
test ELISA bon conduit, mest ps ule de
‘aber un test dimmuno-empromt. Geb
lement, Ins feciques dimmuno-empreins
‘ont fa méme senate quo TELISA. En re:
‘anche, en cas de mansion disséminge
proce, un sul sérlopque & 3 semaines
pout eve ube,
5. _ INTERPRETATION
La sérooge pour le dlagnaste do Ia bor
ralose de Lyme est uno aide majeure, en
‘association avec les arguments anamnos-
Tues, cngues ot Blgiques dvocaeurs,
se rissa de ete sbologle dovent tu
ours interprets n forcon du contests
Cinque et éidémisigique et ne 95%). Ee rete
postve plus longtemps que ia SAW. Co tst
{st tbs ube en zone Senden mais pr
‘Sone ts mamos ites que 2 SAD (ae.
tions costes) e ne peel ps dab un
tive serotoique
42.3. La méthode gimmunctuorscence
indrecte et ELISA
La méthode dimmunotorescence indrecte
rest pas slandariste. Elo pormet coper-
‘ant de tire le gt tes IgG separément
Des tres de 80 en lt et £00 on IgG sont
habtustementconlesrés comme sess de
postive an zone non andémave, mals cos
‘Souls powentverer dun laboratore @ un
‘uve. Un profi pariculercorespendant aun
{aux ts Slo on IgG ot abo ou negation
IgM sobsore chez ls paints présoniant
tne infection chronique & Brcela (tar
rent au cours des becomes Nepabque ou
Spidniues). Comme les autres metodes,
les reactions sroogiques crosses sont &
Tenigine do faux posts, en parculer pout
‘Yentercalica ©: 9
La ménode ELISA est cottous et manque
‘galoment do spécict. Ele ct reserv6o
atx onguties séroépidémiologques. pout
Tesquetes un grand nombre scantons
de seu sont testes,
5. INTERPRETATION
5..___ Diagnostic formel de bevellose
Lislement une soucne de Buco, tune
hrmocuture ou da tout ae preevement,
fst une confmatenformala du lagnostc
{de bruce, La détorminaion de Tespsce
ot du bivar ect rbalséo parla CNR. Son
intr est clagnostque,idéminiogique
(réservr probable, mode de transmission)
‘st pronoetque car 8 meiosis wx spon
Sable dos fom ls plus graves de bre
5.2. Intért du diagnostic sérologique
stmodaltes
salagnoste secogque de labruceose a
‘intr que sila care vt pas rete
‘ume on défaut, par exemple on phase
aig ou chronique ola malaco Los testsstrlogiques divent re combing e lus
Souvent un EAT et une SAW, en particule
angles pays ob ndence da brucalose
fest fale. En cas ds post, Ia conte:
‘lon est éiabte parle CNR. des Braco
‘serlogiques st toujours ciffo ot no pout
'efare quan foncion du contest nique et
episemitegque
LEAT ef la SAW devinnent habtualerent
posts 2 44 semaines aprile début dos
‘Sines cinigues. Linmmunaivorescence in
fecte déteco des IgM a ce siade, pus dos
Ig6-118 2 semaines plus tas. Une sérclo-
ie négative nsimine pas formalemont Io
Siagnstc de buestose I peut sgl dun
alot pole en phase précoce deta ma
‘io, ela reptilon des tess 3 84 semaines
‘pl tard monte une seroconversion ou une
‘ugmentaion ‘slvioalve un fociour #
Ges tres sclogques. Habiuolment, 16s
tives dos antoorpe ategront un maximum
(sau 5 120 ou pls) 2 83 meis apes te
ut dos signas criques, pus ciminuent
progressivement. En pase chronique, on
pout observer a persistance des Ig spe
‘fiques par technique. dimmunotuores
‘once, alors que la SAW eat negave. Par
‘allours, cerns patents ent une reponse
humocie fae ore négatve male p=
‘eure semaines dévohaon de la malade,
‘ors meme quune souche de. Brucafa ot
islée La limite majoure du clagnostic s6-
rolgiqu ost son mangue de spect. Du
{ait des nombrevees reactions s6oigiquee
ois ot de la possi de persistance
Drolongée des antcorps apres infection, la
‘Secouverte dun tire sérloique signet
Sur un sérum iol ne sult pas & confer
Ue brucelose, Une seroconversion ou une
rultpleation par .0u pl des tes S80.
‘hq sur dx sacums proves & au meine
‘deve semaines interval est plus spec
‘iqu, male esa imine pas fermetement
tune réaction séologique coisée en paca
ler avec nterocaiice © = 9. La VPP da
Alagnosic sérlogque est ts abe on zone
how endémique, en pariculor on France 0
Te nombre de yersiniosos est supéiur&co-
74cm ome2015
Iu des brucaloses. Les tone striogiques
elvan done toujours to intorpréts avec:
‘des données cng
‘epidomiloiquos.
La notion dun voyage réconton zane don
‘trie ou d'un risque professionnel (echni-
‘en de labora) est esse, mas a
‘contamination peut pars remoter & pl
Sure ml,
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ress asCampyloba
CGhristophe Buruc
Phippe Lehours*
4. CONTEX
(Campylobacter et
‘les 8 Grom née
Te mucus du td ¢
srimaux Is sont
‘inales humaines
tes do Campy
tls sour-eepicos
Lots du processus
fe vole sont ¢
lebacterprésents
sources dela cor
‘uliples. Ee pout
Sande do voatle
te ps souvent, ll
tion code alt
‘us. Le respect de
ane la préparator
scent pour pe
‘posbos. Laconso
araorsme pou ©
facie do risque
{infections Pama
Héson Europe 4 ur
Tota ou eau sont
‘inaton. ta con
eau aul echape
habitual put ote
(gando amplour.€
apni, notamen
‘savages (movet
jouer une doe
fas dinoctons hu
CCampyioecter cc
peut ee 8 Tora
ful se mentost s
Sagt dala premié
fection testa
vant ls. sane
Deut gus sponta
‘ate nfecton est
Campyobecter pe
tion ganraio ral
‘se boctriomis,€
powwoe baci
8 ois ae etChapitre
Campylobacter spp.
Christophe Burucoa
ripe Lshoure™
4. CONTEXTE
Campylobacter ot Arcobacer ot 60s ba-
Gos 8 Gram nga adapts & lave dans
le mucus du tbe aigestt ae homme et dos
‘samaux. ls son.&forgine dinfectons nies
finales humaine, I exist 45 expéoes va
‘es do Campycbsctor,ceraines eluant
es sous sspecos.
Lire du provessu dabaltago, les carcasses
{e volale sont contaminées par Camoy-
Taboctor prverts a nivead caceal. Loe
{oureas dela contamination humaine sont
Imps Ele peut avo lou par ingestion de
‘iande de voaleiauflsarnment cute mas,
lous soavet, ela sunient par contamina.
tion ctsée aliments qu sorent mangés
‘rus. Le respect de ragies Chyiéne de base
‘dane la préparation desropas est un élmont
scent pour proven cos contariratons
troisbes. a consommation do vane bovine
Eensonée pu cut a és rouvée comme
facteur de isque en France. Cera cas
‘infections humsines ont sgaloment et r=
lide on Europe 2 une eignacapene. Pars,
lela ou eau sontles vehicles ce aco
nation, La_conaminaion a réeenors
‘eau qui échappe ensue au vateront
habtet pout ee 2 rorigne dépicérios de
grande emplou Enfr, fos anaux de com-
agri, notamment ls hots oes ani
Feuvagos (moveties), peuvent. également
[over un re direct ov inet dans cotains
35 cinfectonshumaines.
Campylabecter colonise is ube digest et
pout due & Tenge dune ciarhee ivasve
ful se mantest surtout au niveau cotave.
Sgt da la premiere cause bactrionne r-
fecton nfctnao dan les pave dove-pp6e
‘lovant les salmoneloses, Cate infection
out guérespertanément. La pathopine de
at infection est mal Jie
‘Campylobacter peut passer dans ia crus
tion generate mals est raement @ forging
de bacurimie,sout Cetus qu rsa 20
powolrbacericide du sérum. Cate demise
spice ost auss @ Forge de locatsations
Seoandaies sepiquessutut chez des me
lades ayant une pathologe sous jaconte. La
moral asocée aux infections ivasives 8
Cote est non négigeabie.
Les infections & Campyfobactr powontin-
te des pathologies postneciouses do
‘ype immunciogique comme Tarte réac-
tlonele tle syndrome do Gulla Bar,
(Ce demior syndrome essenteioment 0 &
cetans sérogroupes de C elunl, qu suc
‘ent Jans 1 83 cas pour 1009 infections.
‘st paricuibromont grav et peut ents
es séquoes nevloniues
2. OBJECTIFS
La détecton des. Campylobacter sp. fait
abe des bacines recherche sytémat-
‘quement au cours des dares infoctouses
4o plus de 48 hau méme tre que la détec-
tion do Salmonotes car la fréquence des
CCampylocter spp., a Tongine dinfecton
Intestinal, exctde Gales dae Seimonelee
dane nove pays.
Elle est done Indquée notamment dans le
cas de arte sigue sbvére (hmoragiqe,
synéromo dysensrique) ou rebole (peri
tant pus do tis ous), aux ages extrdmes
dea vie, en ca8 de erin ral, au retour
‘fun voyage en pays topical et en cas de
‘oxinfocton amen caleciv.
3. PRELEVEMENTS:
Ls recherche des Campylobacter spp. st
la plus sowent rialsse parr do elles
fou dhémocutues, Dautres prelvemants
‘went éventualement permetre la cure
e ces bactries(iqude bislonques, Bo
sos) do mane forute ou orentbe par
examen microscopiq.
rani015 ‘spree 47756 coneycsosrep.
4, METHODES
MIGROBIOLOGIQUES
441.1. Coprecature
Duiait ein agit des Campylobacter spp.
les soles dent eve achemanées en moins
{ie 2h eulaboratora ou conserves cans un
Ill de wansport de type Cay Bar mod
fo avec da Tagar (16%) & uno lempsrature
‘compres enre #2°C at + 6°C. Lem parla
posta re conven pas.
{culture ext efecto sur un mie riche,
bic ot gu azworbe les radeaux onyg6:
és res toxques: miu au sang (Skirow,
Buta par exemple) ova charbon (Karma:
I par exemple). Des mileux commeriaux
xstnt,chomogénes ou non.
Bion quo los Campyicbacor ermotoéants
sent une ompéreture optimal do cute 3
42°C, lest rcommande dinober les botes
‘emviron 26°C. Con est exromement i:
portant ear, une part, eat template n'a
as de consequence négative surlacuture
fle C. fount eC. cal (es 2 principales es-
Pose loles) et aut art el permet a
ute de . fet, de Arcobactret dares
lespices de Campyabectr plus rare,
{ncubation ost ratio impératvoront on
simosphire miro-abrobie et les gbloses
foivent ere incubées Inmédatementaprés
fensemencamont Les cultures sont obser.
‘os apres 24, dB et 72h incubation.
Us cute des Campylopecte se adult par
4s peties colonies lisse, sant, couvent
ftalses ou en nappe.Lidentifestion au n-
veau du genre Campylobacter se fat. cure
Sur aspect des colonies, ela morphologic
incur ou spraiée au merescope et su la
présence dune oxysase,
Eeaieaton rea do espten eu
fe réaobe smperent par qulau
senoypines "tyaayse, de Thppute,
onsite ls fling euture 8 25°C, par
fxomple. Cependant, oes tests ont ordi do
leur int depuis la genéralsaton dans les
laboratores de. Tidenicaton ‘bactérenne
bar specrométie de masto de typo MAL:
DL-TOF. Lisenfieation MALDI-TOF est pa
ticuldrementperormante pou ideniiation
des Campylobacter t permet didentiier des
‘genes ot espdces dfclement accuses
Bar dos tests cidenticationconventionels,
notamment : Campylobacter far, Campy-
lopactor upsalnsis, les Campyobactors
anaérobies» (Campylobacter ureoyicus
notamment), los Acobactrs et les Helo.
bce enrrhépaiques dont pour certains
la patogénie est proche des Campyfobac-
ters (notamment Holobacter pullorum, He:
loobactor cnaed). Lconictionsystima-
tue par spacrométie de masse, méthode
rapide et peu codtauss, de puseurs colonies
(y compris daepectaypique) poussant sur
los roux blects augment e tux dea
tection,
44.2, Recherche dana es sles
par méthode mole ou
immuno-enzymatique
La recherche pt amplieation génique n'est
pas encore réalsée on routine. extraction
{60 TADN ne pose on général pas do pro-
biome carla charge bactérianne en Can
pylabacter spp. est imporant, @ candion
‘uber un Kk fxracton adapt & Fen
naton ciahibtours de PCR souvent présents
‘dans les sales. La POR on temps rol ost
plus sensible qo acute et permet obto-
rir dos résultats rapes. Des trousses sont
‘commerciaisées pour ls recherche dan es
sles
Dee tts ELISA et des tots mmuno-enay-
matques rapes tont maintenant comme:
Class pour ia dbtecton do Campyfobactr
9p. dans ls el, Los tots ELISA capo
ible sur fe marché ont une bonne condor
‘dance avec la PCR en temps rte, sont
us senses que la cute tut en ayant
tne bonne spc. Leu inconvénion et
‘Fe ite & Ia seule rcherene 86 C. i
et C. col et non des auras Campyibac-
for spp. t dee bactéries spparenies Les
tests apldes immuno-enaymatques ont une
moins tonne splat (20% de tess post
1s lsclément- Des evaluations compiémen-
tes sont nécessates
Asi, es tests EL
‘6 rocornmand
‘Campyibacterers
(ne Wansplantin
413. Hémootun
prelovemen
LLutisaton de facar
Ges sytomos ect
Is eoossance becte
lorer ts dttetion
pylbacter spp. La
rmeroscopique vo
Campyiecterspp.
‘mosphere mica
Be mime, lob pt
Sout, vascular,
Incubas en aims
Pr cont, i nest
chorchor syiémat
tes prleveronts pk
‘malt Msclomont¢
2 pe de prleve
Faromentimptiqué
roots.
En detors des 6p
fection systimigue
Vernent surtout ch
fu tages. tes 90
Important (18%
42,___ Méthode in
Le stroagnoste +
athlon postin
4 sycome. de C
{ate par ELISA ou
‘au complément.
Sent pnts)
centres specials,
5. INTERPR
La mise on évider
dana les sles dan
tion itasinale do
En dehors do pall
‘exist pas de ot
prlbacter.
Ube espboos les ot
tres danas soo
(65%), © cot (107
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