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Effet du pH sur l'activité de l'invertase

Le document étudie l'effet du pH sur l'activité de l'enzyme invertase. Il décrit la préparation de tampons à différents pH et le protocole consistant à mélanger l'extrait enzymatique avec du saccharose en présence des tampons. Les résultats montrent que l'activité de l'enzyme varie avec le pH, étant maximale à pH neutre.

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Le document étudie l'effet du pH sur l'activité de l'enzyme invertase. Il décrit la préparation de tampons à différents pH et le protocole consistant à mélanger l'extrait enzymatique avec du saccharose en présence des tampons. Les résultats montrent que l'activité de l'enzyme varie avec le pH, étant maximale à pH neutre.

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Rekik hiba Tp2 

: influence de PH sur l’activité de l’invertase

I. But :
Le but de cette manipulation est l’etude de l’effet du pH sur
l’activité d’enzyme .

II. Principe :
On se base sur la présence des groupements ionisable dans
les protéines, dans notre cas l’enzyme d’invertase. L’état
d’ionisation de ces protéines peut être modifier par l’effet de
variation du pH.

III. Mode opératoire:


- Préparation des tampons :

Solution A : Acide citrique (0.1M)

Solution B : Phosphate disodique (0.2M)

Pour obtenir le tampon désiré à un pH donné on mélange :


pH X(ml) Y(ml)
Xml2.6
des solutions A avec
44.6 Y ml de la solution
5.4 B
3.4 35.9 14.1
4.2 29.4 20.6
5 24.3 25.7
5.8 19.7 30.3
6.6 13.6 36.4
- Mélange de l’extrait d’enzyme avec le saccharose en
présence des solution tampon à pH diffèrent :
Tube 1 2 3 4 5 6

Saccharose à 8% 3ml dans chaque tube

Valeur de pH 2.6 3.4 4.2 5 5.8 6.6


4ml de chaque tampon
Préincubation 5 mn à 56°C
Extrait 0.5 ml dans chaque tube
enzymatique dilué
(ml)
Agitation puis incubation 10 min à 56°C
NaOH (0.1N) 2.5 ml dans chaque tube

-Puis agitation des tubes suivit de dosage du sucre réducteur


par la liqueur de Fehling.
I. résultat:

Tube 1 2 3 4 5 6
V de liqueur de 0.5 1 1 1.5 1.5 3
Fehling

II. II. Conclusion :


L’activité de l’enzyme varie lors de changement de du pH.

L’augmentation de ph qui passe de l’acidité à une état presque


neutre provoque l’amélioration de l’activité de l’enzyme .

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