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Vecteurs en Biologie Moléculaire et cDNA

Le document présente un exercice sur la génétique moléculaire contenant des questions sur les vecteurs utilisés, leur fonction et leurs caractéristiques. Il aborde également la production de cDNA et d'hormone de croissance humaine dans des bactéries à l'aide de vecteurs d'expression.

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Vecteurs en Biologie Moléculaire et cDNA

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L3 B.M.

TD de Génie Génétique 2021/2022

TD 03
Exercice 01 : Marquez la/les bonnes réponses
1. Les vecteurs utilisés en biologie moléculaire :
A. Sont le plus souvent des plasmides.
B. Contiennent au moins un gène de résistance à un antibiotique.
C. Permettent d’amplifier in vitro un fragment d’ADN.
D. Doivent contenir au moins une origine de réplication.
E. Peuvent être de nature glucidique.
2. Un vecteur :
A. Doit être capable d’intégrer un fragment d’ADN étranger.
B. Doit pouvoir détruire son organisme hôte.
C. Doit pouvoir se répliquer dans son organisme hôte.
D. Peut-être transfecté dans des cellules eucaryotes.
E. Peut permettre la synthèse de protéines recombinantes.
Exercice 02 :
1. Les gènes eucaryotes sont de grandes tailles et en structure mosaïque. Ils sont donc difficiles à
manipuler. C’est pourquoi des cDNA sont généralement générés. En vous appuyant sur le schéma ci-
dessous expliquez ce qu’est un cDNA et quelles sont les séquences du gène présentes sur ce cDNA.

 Qu’est ce que la réverse transcriptase ? Quelle est son activité enzymatique ? Dans quel organisme la
trouve-ton ?
2. L’hormone de croissance humaine utilisée en thérapeutique peut être produite en grande quantité dans
la bactérie. La première étape consiste à introduire l’ADN codant pour l’hormone de croissance dans
un vecteur d’expression bactérien.
 Les vecteurs d’expression sont des molécules d’ADN permettant à la séquence qu’on y introduit de se
maintenir dans la cellule cible. Le vecteur utilisé dans cette expérience est un plasmide portant un gène
de résistance à l’ampicilline.
A. Expliquer la nécessité de la présence du gène de résistance à l’ampicilline.
B. Quels éléments doivent être présents sur ce vecteur afin que l’ADN inséré soit transcrit et traduit en
une protéine ?
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