Méthodologie

de l’évaluation des risques d’expositions aux polluants

- synthèse -

Sylvie Tarantino
Ecotoxicologue – Biologiste

écrit dans le cadre d’un projet de document de prévention

sur les questions de toxicité et d’écotoxicité des polluants liées à l’habitat.
1er trimestre 2006

1
 Sommaire

Sommaire.....................................................................................................................................................................1

Abbreviations ..............................................................................................................................................................2

Glossaire ......................................................................................................................................................................3

1. Introduction .........................................................................................................................................................4

2. Principes et critères de décision : .......................................................................................................................4

2.1. L’identification du danger..............................................................................................................................................4

2.2. Le rapport dose / réponse...............................................................................................................................................7
2.3. La caractérisation de l’exposition..................................................................................................................................8

3. L’estimation de l’exposition : .............................................................................................................................8

3.1. Les méthodes directes et le contrôle individuel. ...........................................................................................................10

3.1.1. La dose externe.....................................................................................................................................................10
3.1.1.1. Les contaminants chimiques.........................................................................................................................10
3.1.1.2. Les contaminants physiques par rayonnement .............................................................................................12
3.1.1.3. Les contaminants biologiques.......................................................................................................................12
3.1.2. La dose interne et les biomarqueurs .....................................................................................................................13
3.1.2.1. Les contaminants chimiques.........................................................................................................................14
3.1.2.2. Les contaminants physiques et biologiques..................................................................................................16
3.2. Les méthodes indirectes................................................................................................................................................16

4. Conclusion..........................................................................................................................................................19

Bibliographie.............................................................................................................................................................20

Annexe .......................................................................................................................................................................21

Figures

Diagramme 1 : Démarche scientifique regroupant les étapes dans l’étude de l’évaluation du risque pour la santé humaine et la
santé environnementale. .................................................................................................................................................................5
Figure 1 : Représentation des doses d’exposition, à une pollution chimique, en fonction des voies et du niveau de pénétration
dans l’organisme. ...........................................................................................................................................................................9
Figure 2 : Relations entre les marqueurs d’exposition analysables et le devenir dans l’organisme du contaminant, lors d’une
intoxication à un polluant chimique. ............................................................................................................................................15
Figure 3 : Schéma de modèle d’exposition multimédia. Concordance entre les niveaux de l’évaluation d’exposition aux
polluants et la modélisation..........................................................................................................................................................18

1
 Abbreviations

ACGIH : American Conference of Governmental Industrial Hygienists

ADN : Acide DésoxyriboNucléique
AFNOR : Association Française de Normalisation
Ag : Antigène
AIEA : Agence internationale de l’énergie atomique
ARN : Acide RiboNucléique
ARNr : ARN ribosomal
CCRMD : Conseil de Contrôle des Renseignements relatifs aux Matières Dangereuses
CL(E)x : Concentration Létale (Efficace) provoquant x% d’effet de la population étudiée
CL50 : Concentration Létale provoquant 50% de mortalité.
DAPI : Di Aminido Phenyl lndol (4',6-diamidino-2-phenylindole)
DJA : Dose Journalière Admissible
DFG : Deutsche Forschungsgemein-schaft
DL50 : Dose Létale provoquant 50% de mortalité
DSET : Dose Sans Effet Toxique, cf NOE(A)L
ECOSAR : Ecological Structure Activity Relationships
ECVAM : European Center for the Validation of alternative Methods
ELISA : Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assays
EROD : Ethoxy Resorufine O Deethylase
FISH : Fluorescent In Situ Hybridization
GPC : Chromatographie en Phase Gazeuse
HAPs : Hydrocarbures Aromatiques Polycycliques
HPLC : High Performance Liquid Chromatography
ICNIRP : International Commission on Non-Ionising Radiation Protection
Ig : Immunoglobuline (= anticorps)
INRS : Institut National de Recherche et de Sécurité
ISO : International Standard Organisation
LAS : Limulus amoebocyte lysate
LOEC : Lowest Observed Effect Concentration
MSSS : Ministère de la Santé et des Services Sociaux Santé publique
NOEC : No Observed Effect Concentration
NOE(A)L : No Observed Effect (Acute) Level
NRC : National Research Council
OCDE : Organisation de Coopération et de Développement Économiques
OECD : Organisation for Economic Co-operation and Development
PBPK/PD : Physiologically Based PharmacoKinetic and PharmacoDynamic
PCBs : PolyChloroBiphényles
PCR : Polymerase Chain Reaction
PSI : Pollution Sensitivity Index
(Q)SAR : (Quantitative) Structure-Activity Relationship
REM : Rayonnement ElectroMagnétique
RIA : RadioImmunoAssay
UE : Union Européenne
UNSCEAR : United Nations Scientific Committee on the Effects of Atomic Radiation
US-EPA : United-States Environmental Protection Agency
WHO : World Health Organisation

2
 Glossaire

Dose biologiquement efficace : Quantité de substance chimique ayant une action sur la cible cellulaire et
ayant un effet sur l’individu exposé à un polluant chimique.
Dose équivalente : C’est le produit de la quantité d’énergie déposée dans un tissu exposé à une
rayonnement par un facteur de pondération qui dépend de la nature du rayonnement (la somme de cette
dose pour tous les tissus et organes constitue la dose efficace pour un individu).
Electrophilie : Elle provient d’une orbitale vacante capable d’accueillir une paire électronique, de la
polarisation d’une liaison, ou d’autre facteur diminuant localement la densité électronique d’un atome,
d’une molécule.
ELISA (principe) : Un antigène (ag) comportant deux épitopes différents connus (ag1 et ag2) est présenté
à un excès d’anticorps anti-ag1 fixé sur un support solide. Une deuxième catégorie d’anticorps anti-ag2
libre lié à une enzyme est administrée à la préparation. L’ag est donc lié aux anticorps par ses épitopes 1
et 2. En présence du substrat de l’enzyme, il y a révélation et donc confirmation de la présence de
l’antigène. L’intensité de la révélation décrit une concentration d’antigène plus ou moins importante.
Endotoxines : Ceux sont des lipopolysacharides présent dans la paroi des bactéries gram -. Ils sont libérés
en cas de lyse ou de croissance bactérienne.
Haptène : Composé exogène à bas poids moléculaire (ex : métaux lourd) qui est incapable d’induire par
lui-même une réponse immunitaire, mais lorsqu’il est couplé à une molécule de plus grande taille
(protéine, polysaccharide).
Kaw : Coefficient de partage air-eau. Il quantifie le degré de partition d’une substance à l’équilibre entre
sa solution de dissolution et l’air.
Kow : Coefficient octanol-eau. Rapport des concentrations d’une substance dans chaque phase d’un
mélange d’octanol et d’eau à l’équilibre, il permet d’estimer la bioaccumulation d’une substance dans les
graisses d’un être vivant par son caractère lipophile.
Kd : Coefficient de partition particule-eau, répartition de la masse d’une substance entre la phase solide et
la phase liquide.
LAL (principe) : Le Lysat d’Ameocyrte de Limule est un extrait aqueux de cellules sanguines (ameocyte)
de crabe Limulus Polyphemus. Les endotoxines activent un composé du LAL en une cascade de réaction
enzymatique (protéolyse). En présence d’un substrat peptidique incolore artificiel, l’action du LAL
engendre une dissociation du substrat qui libère une coloration. L’intensité dépend de la concentration
d’endotoxine.
Mycotoxines : Toxines sécrétées par des champignons, essentiellement composées d’aminoacide et de
terpènes.
Microscopie à épifluorescence : Un rayonnement ultraviolet excite des composés fluorescents contenus
dans le matériel biologique à étudier qui a été préalablement traité par un fluorochrome (molécule
fluorescente). Ce fluorochrome se fixe soit directement sur la cible, l’acridine orange se fixe sur les acides
nucléiques et émet une fluorescence rouge; soit par un fluorochrome fixé sur un anticorps (cas des
techniques directs et indirects d’immunocytochimie).
RIA (principe) : Un antigène (ag) et une molécule traceur, lié à un marqueur tel un atome radioactif, sont
présentés à un nombre d’anticorps anti-ag limité et fixé sur un support solide. Les deux molécules
spécifiques au site de l’anticorps entrent en compétition. Le dosage du traceur permet de représenter la
quantité d’antigène.
Xénobiotiques : Substances étrangères à l’organisme et reconnues comme telles. Cela peut être une
molécule chimique toxique naturelle, de synthèse ou un de ses métabolites, un composé organique ou
minérale, un agent infectieux (bactéries, virus, parasites), des radiations ionisantes et ou non ionisantes.
Valeur toxicologique de référence : Lien entre une exposition à une substance toxicologique et une
pathologie parmi la population. Elle est établit à partir d’une relation dose-réponse pour un effet, une voie
et une durée d’exposition spécifique.

3
 1. Introduction
A travers divers épisodes de pollutions accidentelles durant la deuxième moitié du XXème siècle et
l’analyse des impacts environnementaux et sanitaires des produits et des rejets de l’activité humaine, une
prise de conscience citoyenne s’amorce au profit du développement de législations françaises,
européennes et internationales (Salomon, 2003). La notion d’évaluation du risque toxicologique1 fût
développée par le NRC et l’US-EPA, dès les années quatre-vingt. Elle est intimement liée à la gestion du
risque2. Aussi, pour une cohérence et une rigueur dans la démarche d’évaluation, une transparence
procédurale et substantive3, une équité décisionnelle institutionnelle et gouvernementale, son fondement
se base sur les travaux et l’actualisation scientifiques (NRC, 1983 & US-EPA, 1989).

2. Principes et critères de décision :

La formalisation de l’évaluation du risque toxicologique à une exposition se concrétise par une
démarche scientifique structurée et standardisée avec une traçabilité des éléments qui constituent
l’expertise (sources d’informations, références bibliographiques, guides méthodologiques nationaux, etc.).
Cette évaluation est définie comme une analyse qualitative et quantitative qui vise à déterminer la
probabilité qu’une exposition à un ou des agresseurs environnementaux engendre des effets néfastes sur
la santé humaine (MSSS, 2002). Ainsi, l’analyse de l’exposition aux polluants fait partie intégrante des
trois étapes essentielles de l’évaluation du risque d’origine environnementale pour la santé humaine,
présentée dans le diagramme 1.

2.1. L’identification du danger

Connaître le danger permet de déterminer l’action potentielle d’un polluant par ses propriétés
intrinsèques et d’identifier les effets indésirables qu’il engendrerait.
o Les études de toxicités de polluants chimiques sont menées suivant trois approches: l’analyse
(Q)SAR ; les études rétrospectives épidémiologiques (voir chapitre 6); et les études prédictives
expérimentales (in vitro et in vivo).
Le (Q)SAR estime grâce à des modèles mathématiques la relation entre l’activité biologique et la
structure chimique d’un composé. Il permet d’interpréter les effets de la molécule sur l’organisme vivant,
c’est également un outil prédictif dans l’orientation des expérimentations. Il est utilisé dans l’évaluation
de la bioaccumulation, de la biodisponibilité de la substance et de sa capacité d’épuration dans
l’organisme. Ses équations peuvent être reprises en l’absence de données expérimentales ou de données
invalides, notamment dans la prédiction de toxicité pour certains organismes4.
Les études expérimentales analysent l’activité biologique et la toxicité du polluant. Le choix des
techniques dépend de l’orientation des études. Ainsi, l’utilisation de tests écotoxicologiques (voir annexe)
sera prédominante dans les études d’impacts environnementaux, les tests toxicologiques se baseront
suivant leur sensibilité sur des modèles animaux pouvant être extrapolés à l’homme. Le rapport de la dose
(concentration) d’un contaminant sur la réponse (effet) dans l’organisme sera traité dans le paragraphe
1.2.
Dans l’intérêt d’une reproductibilité des résultats et d’une acceptabilité internationale, européenne
des valeurs, une normalisation des bioessais s’est développée par les principaux organismes ISO, AFNOR,
etc. Les méthodes d’essais approuvées à l’échelle internationale sont regroupées dans les lignes directrices
auprès de l’OCDE, de l’US-EPA, du CCRMD. Il en est de même pour les essais de toxicologie génétique
décrivant le potentiel mutagène, génotoxique, cancérogène, tératogène de substances. Des méthodes
alternatives aux essais in vivo, référencées à l’ECVAM, sont en essor et utilisent des cultures cellulaires de

1
Probabilité que des effets néfastes sur la santé humaine se produisent à la suite d’une exposition à des agresseurs
environnementaux d’origine chimique, physique ou biologique (MSSS, 2002)
2
Processus d’identification, de sélection, de mise en oeuvre et d’évaluation des actions de réduction du risque toxicologique
pour la santé humaine; le but est d’intégrer de manière scientifiquement valable et économiquement efficace les actions de
réduction ou de prévention du risque toxicologique en considérant les aspects sociaux, culturels, éthiques, politiques et légaux
(MSSS, 2002).
3
Assure à chaque citoyen le respect des conditions essentielles de son bien-être et de sa santé.
4
ECOSAR est un programme d’estimation de la toxicité d’organismes aquatiques en présence de substance chimique (EPA,
2001).
4
 Diagramme 1 : Démarche scientifique regroupant les étapes dans l’étude de l’évaluation du risque pour
la santé humaine et la santé environnementale.

Evaluation de situations

Identification du danger Rapport dose / réponse Caractérisation de l’exposition

• Nature du contaminant •Valeurs toxicologiques de • Dose externe - dose potentielle
• Effets toxiques référence • Dose interne - dose absorbée
• Hypothèses d'intéractivité entre mélange •DJA, … • Dose biologiquement efficace
de polluants •NOEC - NOEL • Equivalent de dose, dose efficace
• Voies de pénétration •DL50 - CL50 • Modélisation
• Détermination des populations à risque •Coefficient de cancérogénicité

Risque = Danger × exposition

Communication
Estimation du risque du risque
• Insertitudes scientifiques • Échanges d’informations, d’opinions
entre le public et les institutions
• Perception et acceptabilité du risque

(approches psychologique, sociale,

culturelle)

Gestion du risque

Evaluation du risque
Inter-relation avec l'évaluation du risque

5
mammifères, des cultures d’organes, etc.
o Les polluants biologiques ont de nombreuses spécificités ce qui ne permet pas de transposer
unilatéralement le modèle d’étude des composés chimiques ou modèle biologique. L’aspect toxique
similaire aux études des substances chimiques est à considérer lors de l’excrétion ou de libération lytique
de toxine par le microorganisme. En revanche, les endotoxines produisent une réponse en relation avec la
dose d’exposition de l’allergène spécifique. Le pouvoir pathogène du contaminant biologique dépend du
caractère infectieux du germe, de sa virulence et de la réceptivité de son hôte. Les effets relevés sont
basés sur l’étude des cas cliniques, l’épidémiologie et l’écologie microbienne. Cependant, il semble
difficile d’associer une maladie et l’étiologie. En effet l’isolement d’un germe, les effets symptomatiques
et le relevé d’une pathologie peuvent ne pas être répertorié simultanément car les individus ne consultent
pas obligatoirement un médecin. Ainsi, les taux de toxi-infection, de mortalité, de morbidité sont souvent
sous estimés et les effets à long terme sont mal connus (Bonnard, 2001).
o La dangerosité des rayonnements physiques dépend de leur nature, de leur degré de pénétration et
d’interaction avec la matière. Les rayonnements à haute énergie, dit ionisants, concernent les nucléides
instables; ils ont tendance à revenir à leur stabilité par un mode radioactif. Celui-ci dépend de la
proportion entre le nombre de neutrons (N) et de protons (Z), ainsi que de sa masse atomique (A=Z+N).
La transmutation du nucléide engendre l’émission d’une particule chargée (alpha, bêta) et de libération
d’énergie qui peuvent ioniser5 la matière biologique qu‘ils traversent (formation de radicaux libres6). Les
rayonnements à basse énergie7, non ionisant, ou rayonnements électromagnétiques (REM) se
caractérisent par leur fréquence ondulatoire, leur énergie ou leur longueur d’onde. Il existe une grande
diversité de REM selon ces paramètres. Lors de la traversée d’un milieu biologique, la baisse de la
fréquence et de l’énergie du rayonnement est liée à une réflexion et/ou une perte d’énergie dans la
matière. L’absorption énergétique peut exciter des composés endogènes très réactif comme l’oxygène;
produire des effets thermiques8 ou des effets spécifiques non thermiques9 (Duchêne et Joussot-Dubien,
2001). Les essais expérimentaux s’axent sur les mêmes principes que les études des substances
chimiques.

Le pouvoir de toxicité, de pathogénicité d’un contaminant dépend également de sa voie de

pénétration, ainsi que de sa vitesse de transfert dans l’organisme humain.
o Dans le cas des polluants chimiques (organiques et inorganiques), les caractéristiques de leur
structure moléculaire définissent leurs propriétés physico-chimiques et surtout leurs particularités
pharmacocinétiques, toxicocinétiques. La liposolubilité joue sur l’absorption, la distribution, la
bioaccumulation, la métabolisation et l’élimination de la molécule parente dans l’organisme. Ainsi leurs
biotransformations peuvent conduire en la formation de métabolites plus ou moins toxiques. Ces
xénobiotiques peuvent être dégradés ou transformés dans l’environnement (photolyse, catalyse,
hydrolyse), excepté les éléments métalloïdes qui ne sont pas décomposables.
o Lors d’une exposition radioactive, l’émission d’une particule alpha sera d’autant plus dangereuse
après son absorption par inhalation ou par ingestion, que par contact du fait de son faible pouvoir
pénétrant10.
o D’autres voies de transfert peuvent être envisagées comme la voie trans-placentaire, la voie
percutanée, et la voie transcutanée qui peut engendrer le passage de contaminants biologiques par auto-
inoculation.

Les populations exposées n’ont pas le même degré de sensibilité aux polluants et au mode
d’exposition. Il dépend de l’âge, du sexe, des caractères individuels physiologiques, immunologiques,
pathologiques. Et la sensibilité allergène peut dépendre de l’histoire phénotypique ou génotypique de
l’individu. De plus, l’exposition peut être multifactorielle. Il faut considérer les diverses sources
5
Un atome ou une molécule neutre acquiert une charge positive ou négative.
6
Molécule contenant un ou plusieurs électrons célibataires, facteur d’instabilité et de réactivité. Pour revenir à un état stable la
molécule cédera ou captera un électron.
7
Rayonnement ayant une énergie inférieure à 12eV (1eV = 1,602 × 10-19 J), soit une longueur d’onde supérieure à 100nm.
8
En présence de REM à faible énergie, il résulte de l’effet joule dû à l’agitation des charges ; pour les REM à haute énergie
l’absorption d’un photon peut être convertie en chaleur ce qui augmente la température du milieu ciblé.
9
Interférence avec les phénomènes bioélectriques, avec les fonctions de la membrane cellulaire, etc.
10
La particule alpha (He2+) est arrêtée par la peau, mais elle ionise localement le milieu biologique traversé.
6
d’émission et leur nature, la dispersion, la dissémination différentielles des polluants dans les différents
compartiments environnementaux et leur changement d’état dans le cas de polluants chimiques.
L’évaluation d’exposition globale aux contaminants semble judicieuse car elle peut être la sommation
d’expositions importantes à ces substances dans différents milieux ou voies d’expositions (air, eau, sol,
voir alimentaire), et il peut produire un effet pathologique notable sur le risque toxicologique individuel.
En outre, la somme des expositions de plusieurs contaminants de différentes ou de même natures peut
provoquer des effets additifs voir synergiques. En présence de radon dans l’air la fumée de tabac
potentialiserait le risque de cancer du poumon (Baysson et al, 2004).

D’autres facteurs physiques liés aux installations de l’habitation peuvent modifier les paramètres
d’exposition en propageant le polluant par la ventilation. L’humidité, la température, le rayonnement
solaire, les milieux aérobies ou anaérobies peuvent favoriser la survie et la prolifération des contaminants
biologiques.

2.2. Le rapport dose / réponse

Un des paramètres majeurs de l’étude du danger est l’évaluation du rapport dose-réponse (ou
concentration-effet) en fonction du temps. Il décrit la relation entre une dose d’exposition à un
contaminant et la réponse observée. Elle permet de préciser la dose ou la concentration minimale et
acceptable pour une substance chimique, un rayonnement, un organisme pathogène exogène. La
caractérisation des risques comprend deux composantes indépendantes, la toxicité intrinsèque dans le cas
de substances chimiques, la nature du rayonnement, la pathogénicité de l’agent biologique; et le mode
d’exposition réelle ou prévisible respectivement à une substance chimique, à un rayonnement, à un
microorganisme. Elle estime l’incidence et les effets néfastes susceptibles de se produire sur un individu,
une population.

L’exposition à un polluant est définie par la quantités de polluants en contact avec l’individu ou la
population en fonction du temps ; ainsi peut être distingué les effets aiguës lors d’une exposition à court
terme, les effets chroniques lors d’une exposition à long terme. L’intensité, la durée, la fréquence
d’exposition et la nature du polluant sont liées aux effets biologiques et aux effets sanitaires encourus.
Majoritairement, les effets toxiques des composants chimiques ou physiques dépendent de la dose
biologique efficace ou dose équivalente. Il existe un seuil où l’exposition à ces composants entraîne des
effets irréversibles lorsque les mécanismes de détoxification, de réparation et de compensation de
l’organisme sont dépassés (effets toxique à seuil ou déterministe). Ainsi, l’expertise toxicologique
détermine la toxicité aiguë par la DL50 voir la DSET, et la toxicité chronique par l’étude du
développement de pathologies, des effets sur la reproduction et sur la descendance. L’ACGIH publie
annuellement le fascicule « Threshold limit values for chemical substances and physical agents and
biological exposure indices » et la DFG le « Maximumn concentrations at the workplace and biological
tolérance values for working matérials », ou d’autres instituts comme le ICNIRP, UNSCEAR et les
organismes spécifiques nationaux (INRS). Ces valeurs limites d’expositions professionnelles peuvent être
des valeurs indicatives dans le cadre non professionnel. Mais il faut rester prudent car ces données sont
calculées selon des conditions précises d’exposition, et ces valeurs sont fondées sur un risque calculé à
développer des maladies.
Il n’en est pas de même pour les substances chimiques cancérogènes et les rayonnements ionisants
dont les effets toxiques sont sans seuil ou stochastique. En effet, on considéré que la probabilité qu’une
seule molécule ou particule pénétrant dans les tissus biologiques est à l’origine d’une lignée cellulaire
cancéreuse. Les études de radioprotection sont basées sur l’hypothèse d’absence de valeur limites
d’exposition. Le seuil d’exposition préventif est établi suivant les critères d’absence d’apparition des
effets à court terme et d’une réduction de l’apparition des effets à long terme.

Les études d’écotoxicité en laboratoire permettent une première approche à l’extrapolation

environnementale. La méthodologie est similaire, elle détermine la CL(E)x, la LOEC, la NOEC via un
matériel biologique représentatif du milieu, soit des microorganismes, des invertébrés, des vertébrés et
des végétaux terrestres et aquatiques (ESE, 2003).

7
 2.3. La caractérisation de l’exposition
L’estimation de l’exposition calcule les doses de contaminants auxquelles les individus sont
exposés dans les divers compartiments et en fonction des voies de pénétration. Il peut être appréhendé
selon la quantification des composés libérés présents dans le milieu ambiant et l’environnement (dose
externe ou dose potentielle), et selon la quantité de ses polluants présents dans les milieux biologiques
(dose interne ou dose absorbée). Cette dernière reflète la quantité de produits disponibles dans le corps
vis-à-vis des sites biologiquement efficaces, les récepteurs cibles. Elle dépend de la consommation
(inhalation, ingestion) et de l’absorption cutanée de ses polluants par l’individu exposé en fonction du
temps. La figure 1 schématise cette relation « exposition - dose » par un exemple d’exposition à un
contaminant chimique.

Depuis les années soixante-dix des recherches sur l’estimation de la concentration à un polluant et
de sa source d’émission se sont développées.
o La « fraction exposante » semble une mesure relativement complète du rapport entre l’émission
d’un contaminant chimique et l’exposition humaine. Elle dépend des propriétés du polluants, de la
source d’émission et de l’état du composé, des conditions environnementales, des voies de transfert
d’expositions, des récepteurs cibles et des caractéristiques démographiques (US-EPA, 1992; Bennett et al,
2002). Ainsi par une formule simplifiée nous pouvons écrire que :

∑ masse du polluant consommée par un individu

population, durée
IF =
masse libérée dans l' environnement

IF (total) = IF (inhalation) + IF (ingestion) + IF (cutanée)

IF = Intake Fraction, fraction exposante

La diversité des polluants chimiques et biologiques accroît la complexité des inventaires, d’où
l’utilisation des polluants traceurs. Ces traceurs représentent soit directement la ou les substances
chimiques incriminées et pouvant présenter un risque pour la santé des personnes, soit un contaminant
représentatif des autres substances dangereuses. Les critères de choix peuvent être liés à la toxicité, la
valeur de la dose/réponse, la quantité émise, le comportement du polluant dans l’environnement
(persistance, etc.), la qualité des analyses, la perception du public. De même, dans l’analyse de routine
des contaminants biologiques, la recherche de germes indicateurs est plus adaptée et mieux maîtrisée.
Dans l’estimation de l’exposition aux rayonnement ionisants, c’est l’exposition totale de toutes les
sources d’émission qui est pris en compte et non l’exposition à partir de radionucléides individuels. En
effet, à la différence des polluants chimiques, quelque soit l’origine du rayonnement les effets biologiques
sont les mêmes, ils sont la conséquence d’une ionisation de la matière biologique qu’ils ont traversé. On
préfèrera ainsi calculer la dose d’exposition annuelle, au lieu de la dose d’exposition journalière dans le
cas de polluants chimiques. Elle comprend la dose externe issue de l’irradiation, la dose interne par
contamination et la dose de rayonnement des radionucléides conservés dans le corps (Santé canada,
1995).

3. L’estimation de l’exposition :
Trois approches indépendantes fondées sur des données différentes estiment quantitativement
l’exposition. Cette diversification de démarches peut être utile lors de la vérification ou de la validation
des résultats. Chacune d’entre elles ont leurs atouts et leurs faiblesses. Ainsi,
o la mesure de la concentration du polluant aux points de contact entre la personne et l’environnement
en fonction du temps, permet d‘obtenir les valeurs d‘exposition les plus exactes durant la période de
mesure. Mais cette méthode directe ne quantifie pas spécifiquement les polluants de la source d‘émission,
c‘est un échantillonnage à court terme, et les capteurs doivent être spécialisés à chaque contaminant

8
Voie cutanée : Dose biologiquement
Exposition Dose Dose Dose efficace
chimique externe appliquée interne
Effet
Métabolisme
Récepteurs
Peau cibles
Absorption
Voie respiratoire : Dose biologiquement
Exposition Dose Dose Dose efficace
chimique externe appliquée interne
Effet
Métabolisme
Récepteurs
Bouche / Nez Poumon cibles
Consommation Absorption

Voie orale :
Dose biologiquement
Exposition Dose Dose Dose efficace
chimique externe appliquée interne
Effet
Métabolisme
Récepteurs
Bouche Tractus gastro-intestinal cibles
Consommation Absorption

D’après US-EPA, 1992.

Figure 1 : Représentation des doses d’exposition, à une pollution chimique, en fonction des voies et du
niveau de pénétration dans l’organisme.

9
 recherché ce qui peut représenter un coût. De plus, cette technique peut être personnalisée nécessitant
ainsi une participation active des sujets sollicités pour l’étude.
o les mesures de la teneur en polluants sont analysées dans les divers milieux environnementaux et/ou
les voies d’expositions, séparément de la constante temps. Ces deux composantes, quantité et durée,
pourront ainsi être intégrées dans des scénarii d’exposition. Cette méthode dite indirecte exploite des
valeurs de diverses natures (expérimentales, questionnaires, etc.) à l’échelle collective, et elle peut se
développer en des études prédictives lors de simulations de situations futures en y ajoutant des facteurs
d’incertitude (Santé Canada, 1995; US-EPA, 1992).
o les doses d’indicateurs internes (biomarqueurs, niveau de contaminants excrétés).
Cette deuxième méthode dite directe caractérise la quantité de substances ayant traversées les barrières
biologiques, mais certaines de ces techniques sont réalisées par des prélèvements invasifs (biopsies) ce
qui peut causer certaines problématiques éthiques.

3.1. Les méthodes directes et le contrôle individuel.

3.1.1. La dose externe.
Elle représente des mesures du milieu ambiant sur l‘ensemble du milieu d‘exposition, ou à hauteur
des voies de pénétration comme les voies respiratoires; ou bien des mesures individuelles sur le corps, les
vêtements (capteurs cutanés, etc.). Le choix de l’instrumentation dépendra de sa sensibilité, de sa
sélectivité, de son coût, de sa rapidité d’exécution et de sa rapidité à obtenir les résultats. Plus
spécifiquement aux contaminants chimiques, de sa durabilité dans l’échantillonnage en fonction des
variations environnementales tel que la température et l’hygrométrie, du choix entre des mesures
ponctuelles ou des mesures en continu permettant un suivi optimisé de l’exposition. Et dans le cas de
polluants aériens et de mesures individuelles, de la portabilité du matériel. Ces appareils doivent satisfaire
généralement à des normes.
Les paramètres de l’échantillonnage sont importants du fait des fluctuations environnementales,
temporelles et spatiales. Aussi pour éviter une sous-évaluation ou une surévaluation, une stratégie
d’échantillonnage est mise en œuvre pour une représentativité efficace de l’exposition. Elle dépend
également de la nature du contaminant, par exemple la concentration des particules atmosphériques varie
en fonction des saisons et du temps alors que la concentration microbienne aérienne varie en fonction des
saisons, du climat, de l’emplacement, de l’altitude, de la période de journée.

Les paragraphes de la partie 3.1.1 présentent les principes méthodologiques utilisés dans
l’évaluation d’exposition externe. Les techniques spécifiquement employées pour chaque type de polluant
sont détaillées dans leur chapitre respectif.

3.1.1.1. Les contaminants chimiques

i. Les particules et l’aérosol
La nocivité des particules dépend de la granulométrie, de la concentration massique, et de la nature
chimique du contaminant. Aussi, les échantillons d’airs sont prélevés à l’aide de filtres ou de plaques à
impaction avec ou sans coupure granulométrique. Dans le premier cas elle permettrait de sélectionner les
particules collectées selon leur diamètre aérodynamique, et dans le second cas d’élargir l’échantillonnage
de particules selon le débit d’aspiration d’air et la nature du filtre de l‘appareillage. La charge globale des
particules se mesure par les méthodes gravimétrique, radiométrique, réflectométrie et de variation de
fréquence. Les méthodes analytiques permettent l’analyse de la composition chimique. Les
chromatographies GPC et HPLC, liées à des détecteurs spécifiques, sont principalement utilisées pour
l’analyse de la composition chimique de composés organiques (Mathé et al, 1998).

ii. Les gaz et vapeurs

L’échantillonnage est passif ou actif. Le premier est basé sur le principe de diffusion moléculaire
naturelle des gaz à travers une membrane ou une couche d’air statique. Les contaminants sont collectés
soit par adsorption sur un support tel que le charbon actif, soit par chimiosorption11 sur un support

11
Phénomène de fixation des substances polluantes dissoutes par des interactions chimiques avec des particules solides.
10
 imprégné pour les gaz réactifs particuliers. Cette méthode n’est pas adaptée à une atmosphère à basse
vitesse d’air, ou pour un dosage sur une personne statique. Elle est privilégiée lors de mesure d’exposition
de longue durée. Le second consiste à collecter le gaz grâce à une pompe durant le temps d’exposition. Il
est prélevé dans un sac en matériaux inertes (cas de la technique sans concentration) ou sur un support
solide par adsorption ou chimisorption (technique avec concentration). Elle s’utilise dans le cas de
mesures individuelles ou d’ambiance. Quelque soit le principe, les supports subissent ensuite une
désorption des polluants pour être analysé selon les méthodes de chimie analytique précédemment
abordées. On trouve également des supports contenant un réactif à coloration positive en présence d’un
gaz spécifique permettant une détection et une concentration immédiate du polluant. Dans le cadre de
mesure individuelle, il existe deux types de capteur positionnés au voisinage des voies de pénétration, les
badges et les tubes qui diffèrent par leur sensibilité et leur durée d’exposition (Person et al, 1998).

iii. Les polluants chimiques dans l’eau

Ils sont analysés par les méthodes de séparation, d’analyse chimique précédemment abordée, ainsi que
des méthodes immunologiques (détaillées dans le paragraphe 3.1.1.3). Elles sont présentées dans le
« Guidelines for drinking water quality, third édition » du WHO, 2004.

iv. Les contaminants des solides (sol, aliments, etc.)

L’analyse de ce type de contaminants s’exécute par les techniques analytiques en vigueur. La
méthodologie de prélèvement de sol remué, semi remué ou non remué permet de prendre également en
compte l’aspect volatil de certains contaminants chimiques (FAO 2000, WHO 2000).

v. Les bioindicateurs
Les études d’évaluation de l’impact de polluants sur l’environnement ne se résument pas essentiellement
à des analyses physico-chimiques car elles ne peuvent être exhaustives. Aussi, pour représenter la qualité
du milieu et de l’écosystème, l’étude de bioindicateurs animal ou végétal apporte une réponse sur l’état de
la biodiversité, sur le niveau de pollution et permet de caractériser précocement les modifications
provoquées.

La biosurveillance peut être passive soit par dosage de contaminants bioaccumulés, tels que les
composés organiques et/ou métalliques atmosphériques concentrés dans les mousses, les lichens; soit par
constatation d’une baisse du peuplement autochtone lors de prospection sur le terrain (organismes
sentinelles, polluosencibles) et/ou la croissance d‘espèces polluotolérantes. Il est possible lors de la
détermination et de la numération des taxons de les comparer à une classification de référence pour
évaluer la qualité du milieu12. Les études de phytosociologie renseignent également sur ce point. Ces
méthodes in situ évaluent une exposition au polluant à long terme contrairement à la méthode des
transplants (voir ci-après) qui est une analyse à court terme.
La biosurveillance active ou méthode par transplant, utilise des organismes sensibles
principalement d’élevages pour les exposer à un échantillon ou au site présumé pollué, et en évaluer
ensuite les effets. Ces bioessais sont en général standardisés et font l’objet de normes. Pour exemples
(liste non exhaustive) :

ƒ les tests bactériens, sur des bactéries entières ou sur une activité enzymatique. Le principe se base
sur l’action inhibitrice du polluant sur le métabolisme (ex: NF EN ISO 11348-1 à 3), la croissance
cellulaire, sur la biosynthèse ou l’activité d’une enzyme (Durand-Thouand, 2003).
ƒ les tests sur la faune en évaluant la mobilité, la reproduction des individus, la viabilité embryonnaire,
13
d’activités enzymatiques comme l’activité EROD , etc. :
o les microcrustacés planctoniques tel que les cériodaphnies ou les daphnies (ISO 6341).
o les microarthropodes des litières du sol, les collemboles (ISO 11267)
12
Pour exemple, en rivière, on distingue l’Indice Biologique Global Normalisé (NF T90-350), l’Indice Biologique Diatomées
(NF T90-354), les indices de diversité spécifique, etc. dans le domaine de la pollution atmosphérique, l’Indice de Pureté
Atmosphérique utilisant les lichens, le Pollution Sensitivity Index, etc.
13
Le cytochrome P450 est un biomarqueur (voir paragraphe 3.1.2). On mesure son induction au niveau du tissu hépatique, elle
est quantifiée par la mesure de l’activité monooxygénase EROD. C’est une enzyme de la phase I du mécanisme de
détoxification qui est sensible à divers polluants HAPs, PCBs, etc.
11
 o les poissons
Les biotests sur d’autres invertébrés, ou vertébrés sont plutôt utilisés dans l’évaluation de substances
chimiques pures ou en mélanges, notamment dans le cadre d’homologation de produits dangereux.
ƒ les tests sur la flore
o les microalgues, elles se fondent sur les variations du métabolisme, de croissance (ISO
8692), de photosynthèse, de bioluminaissance, etc. (Blaise, 2003).
o les sphaignes, par la technique du sac de mousse « moss-bag ». La mousse sert de matrice
de dosage de polluants atmosphériques bioaccumulés.
D’autres biocapteurs peuvent être plus représentatif de l’incidence de la pollution atmosphérique sur
l’organisme humain, comme les macrophages alvéolaires. Leur analyse cinétique en présence de
contaminants, tel que l’ozone, permet d’évaluer l’impact sur des cellules humaines (Laval-Gilly et al,
2000).
Les techniques de gènes rapporteurs en biologie moléculaire sur des modèles de vertébrés, tel que les
larves de grenouilles, permettent également de déceler la présence et de quantifier certains polluants
chimiques par induction de protéines fluorescentes chez l’animal. Les modèles in vivo permettent
d’intégrer l’aspect physiologique.

3.1.1.2. Les contaminants physiques par rayonnement

i. Les rayonnements ionisants

Un grand nombre de radiamètre, de dosimètre individuels et environnementaux sont utilisés suivant la
nature du rayonnement ou de la particule émise (alpha, bêta, photon). Leurs principes sont décrits en
détail dans les annexes II et III du guide de sûreté « Évaluation de l’exposition professionnelle due aux
sources externes de rayonnements » de l’AIEA, janvier 2004. Certains sont capables de donner des
informations sur la dose absorbée. Il est possible d’analyser des prélèvements physiques tels que des
frottis superficiels (vêtements ou autres surfaces) ou bien des filtres d’air. Les supports sont spécifiques
aux radionucléides, le radon sera collecté sur un support de charbon (IAEA, novembre 2004).

ii. Les rayonnements électromagnétiques

Les mesures sont élaborées selon leurs propriétés physiques de nature ondulatoire c’est-à-dire un champ
r r
électrique E et un champ magnétique H , perpendiculaire dans un même plan. Préférentiellement ce
r r
dernier est caractérisé par la densité du flux magnétique B = µH , où µ représente la perméabilité du
milieu. Ce sont ces variations de paramètre qui seront mesurés in situ puisqu’un champ électromagnétique
uniforme est dénaturé au voisinage d’un corps. Les caractéristiques d’une onde électromagnétique
s’établissent également suivant sa fréquence, son type d’émission (électrique et/ou magnétique), selon sa
nature (continue ou pulsionnelle), sa polarisation, sa direction, selon son gradient de champs, son
intensité, etc. Les capteurs se basent sur l’analyse de la grandeur physique par une unité sensible aux
variations thermiques, électriques induisant un signal électrique détectable; sur les propriétés d’un vecteur
par des sondes sensibles à la direction, la polarisation, etc. des ondes. Du fait de la diversité des capteurs
et des détecteurs, le lecteur peut se reporter à l’ouvrage « Mesurage des rayonnements électromagnétiques
(RNI) présent dans l’environnement de l’homme » Vautrin, 2001.

3.1.1.3. Les contaminants biologiques

vi. Les bioaérosols
Ils regroupent une grande diversités d’éléments des bactéries, des spores de champignons, des grains de
pollens, des virus, de la matière particulaire d’origine animale, végétale, microbienne, de particules
venant de la combustion de matières énergétiques fossiles, etc., dites poussières organiques. Ils peuvent
former des allergènes à haut poids moléculaire. Certaines bactéries et champignons peuvent contenir
respectivement des endotoxines et des mycotoxines souvent carcinogène14. Les méthodes de
quantification des pathogènes et des allergènes dépendront de leur nature.
Les principes physiques d’échantillonnages des microbes et des autres particules en aérosol sont
14
Agent capable de déclencher le cancer.
12
 similaires, outre l’analyse gravimétrique, on distingue les techniques de filtration, de préleveurs à
impaction15, de préleveurs à piégeage liquide16.
L’ensemencement des spores, des bactéries sur milieux de culture solide gélosé, semi solide, ou
liquide selon les techniques de microbiologie, permet une quantification ou une identification des
colonies obtenues après incubation. Il est possible de sélectionner des organismes par la nature du milieu.
Dans le cas de virus, l’incubation se fait sur des cellules d’origine humaine ou de primates dont les
lignées sont spécifiques aux virus étudiés. Le principe de la culture cellulaire permet de déterminer la part
viable des contaminants recueillis. Toutefois, il se peut que certains microorganismes ne se développent
pas sur les milieux de culture du fait d’un stress environnemental ou de l’inadaptation du milieu. Par les
méthodes de culture, les débris cellulaires et microbiens, les toxines ne sont pas détectés. Aussi, l’analyse
par microscopie à épifluoréscence permet le dénombrement total viable et non viable des composants
recherchés. La cytométrie de flux quantifie et analyse les cellules ou les particules en suspension dans un
liquide. Il permet de faire passer individuellement ces composés à grande vitesse devant un ou plusieurs
faisceaux lasers. Le système optique analyse les propriétés optiques des cellules et l’utilisation de
molécules fluorescentes (ex : DAPI, FISH) permet d’augmenter le nombre de paramètres étudiés par
cellule. L’hybridation in situ fluorescente (FISH) permet d’utiliser une sonde spécifique
d’oligonucléotides couplés à un marqueur fluorescent et de déceler la présence de l’ARNr bactérien
recherché. Ces caractéristiques génétiques peuvent permettre de déterminer le genre, l’espèce de
microorganismes. La purification d’ADN et l’amplification par PCR17 d’une séquence d’acide nucléique
permettent une identification rapide. La microscopie photonique donne des indications sur les taxons des
microorganismes selon leur morphologie (cas des champignons, des pollens), par colorations préalables
(chez les bactéries, les pollens); alors que le microscope électronique met en évidence des détails
structuraux nécessaire à l’identification de virus.
Les bioallergènes sont analysés qualitativement et quantitativement par les techniques de dosage
immunologiques de type ELISA (méthode immunométrique), ou RIA (méthode par compétition).
Les endotoxines, pro-inflammatrices selon leur concentration et caractéristiques de la présence de
bactéries gram -, se dosent principalement par les techniques in vitro LAL. De nombreux ouvrages
actualisés font références aux « Bacterial Endotoxines Test » (Greff-Mirget, 2002).
Les mycotoxines sont des toxines spécifiques à chaque espèce de moisissures, elles peuvent donc
s’analyser par les méthodes d’immunochimie précédemment abordées, ou par les méthodes de chimie
analytique. Celles-ci ont une meilleure sensibilité, mais un coût et un délai d’exécution plus important
vis-à-vis des essais immunologiques.
Le (1→3)-ß-D- glucanes, polysaccharide induisant une réponse inflammatoire, est principalement
présent dans les parois cellulaires de champignons ou de végétaux, de microorganismes. Il s’analyse par
les techniques d’immunochimie et de LAL (WHO, 2000; Dowes et al, 2003).

vii. Les agents microbiens de l’eau

L’évaluation des parasites, des bactéries, des virus se fonde sur les mêmes principes et développement des
techniques utilisés dans l’air à savoir des méthodes de filtration, de cytométrie de flux, de microscopie,
de culture cellulaire, d‘immunologie, de biologie moléculaire et d’autres plus spécifique au milieu
hydrique tel que la centrifugation, la floculation, etc. (WHO et OECD, 2003).

3.1.2. La dose interne et les biomarqueurs

Les indicateurs internes reflètent la réponse biologique à une exposition de différentes natures. Les
biomarqueurs sont définis comme un changement observable et/ou mesurable au niveau moléculaire,
biochimique, cellulaire, physiologique ou comportemental, et révèle l'exposition présente ou passée d'un
individu à au moins un composé chimique à caractère polluant (Lagadic et al, 1997), il en est de même
pour certains rayonnements physiques et contaminations biologiques.
Les éléments biologiques couramment utilisés pour les analyses d’intoxication chimique sont:
ƒ les cellules sanguines (les globules blancs totaux, la fraction lymphocytaire B et/ou T)
15
Les microorganismes sont collectés directement sur un milieu de culture.
16
Les microorganismes sont collectés dans un liquide de ramassage.
17
La technique de PCR permet grâce à deux amorces d’oligonucléotides d’amplifier une portion d’ADN ou d’ARN.
13
 ƒ le sérum (les anticorps, les adduits aux protéines)
ƒ l’urine pour une analyse des polluants mutagènes, carcinogènes et les modifications de base de
l’ADN qu‘ils peuvent engendrer.
ƒ les cellules des muqueuses buccale, nasale pour une détection des adduits et des cassures de
l’ADN.
ƒ les cellules exfoliées coliques, urotéliques; les cellules germinales masculines, épithéliales
cervicales, les cellules issues de lavages broncho alvéolaires, etc. Elles permettent de mettre en
évidence diverses mutations ou adduits.
ƒ les tissus kératines, osseux, etc.
Dans le cadre des radionucléides, ils se basent également sur les excrétas (urine, matières fécales), le
sang, l’air expiré, les tissus biologiques, etc. Et, les contaminants biologiques induisent une réponse du
système immunitaire, elle peut être quantifiable par l’intermédiaire des anticorps dans le sérum.

3.1.2.1. Les contaminants chimiques

On distingue les biomarqueurs d’exposition, les biomarqueurs d’effet, les biomarqueurs de
successibilité génétique individuelle ; on peut rajouter les éléments du système immunitaire.

i. Le biomarqueur d’exposition
Il représente la quantité de substances exogènes ou la quantité de ses métabolites présents dans un
compartiment de l’organisme tels que les cellules, les tissus, les liquides corporels. Ce sont des marqueurs
de la dose interne. Les méthodes analytiques dont l’HPLC mesurent cette dose grâce à des échantillons
de sang, d’urine, de fèces, de tissus.
Le biomarqueur d’exposition peut être également le produit d’interactions entre le xénobiotique et les
macromolécules cellulaires ADN, ARN, protéines, etc., au niveau d’un site donné cible ou non cible
(marqueur de la dose biologiquement efficace). Lorsque c’est un site cible et qu’il a un rôle connu dans la
genèse des cancers, il est appelé marqueur de la réponse biologique précoce. Cette dose se détecte par
mesure des adduits aux protéines hémoglobine et albumine; des adduits à l’ADN par prélèvement sanguin
et tissulaire (Cuzick et al, 1990; Savela et Hemminki, 1991). Le niveau des composés parents, des
métabolites mesurés dans le sang et les urines reflète l’exposition des derniers jours alors que les adduits
de l’hémoglobine reflètent une exposition issue de plusieurs mois (Schnell, 1994). La figure 2 illustre les
relations entre les marqueurs d’exposition analysable en fonction du devenir du composé dans
l’organisme.
La mutagènicité d’une substance ou l’imprégnation mutagène d’un individu exposé à une substance
cancérogène peut être mis en évidence par simple prélèvement urinaire via le test d’Ames18. En revanche,
l’échange de chromatides sœurs et les cassures de l’ADN se révèlent par prélèvement sanguin, tissulaire,
ou de cellules exfoliées. Il existe divers essais de génotoxicité pour l’homme et l’environnement (Le
Curieux, 2003) classé par l’OCDE.
L’indice biologique d‘exposition en situation professionnelle est une valeur de référence de la dose
interne. Elle peut être indicative dans le cadre d’exposition non professionnelle. Ces valeurs actualisées
sont consultables auprès de l’ACGIH et du DFG (Schneider et Brondeau, 2001).

ii. Les marqueurs du système immunitaire et l’immunotoxicité

Ce sont des indicateurs précoces de toxicité, les effets des xénobiotiques surviennent à des concentrations
inférieures à celles qui causent l’apparition d’une toxicité aiguë; ils altèrent les fonctions immunitaires en
une immunodépression ou une immunostimulation. Les anomalies du système immunitaire peuvent être
recherchées sur les structures du système immunitaire (les organes lymphoïdes, les leucocytes circulants,
les protéines plasmatiques), sur l’immunité non spécifique (la phagocytose, la réponse inflammatoire, les
cellules tueuses), sur l’immunité spécifique (la réponse anticorps par le taux d’anticorps circulant, le
nombre de cellules sécrétrices; la réponse cellulaire).
On peut suggérer que les anticorps IgG, prélevés dans le sérum, sont des marqueurs indirects de
l’exposition qu’elle soit d’origine biologique ou chimique (haptène). Ce sont des anticorps à action
18
Le test d’Ames permet de déterminer le pouvoir mutagène d’une substance en étudiant sa capacité à induire des mutations
reverses sur une souche bactérienne Salmonella typhymurium (Pélissier et al, 1996).
14
 Compartiment Échantillon
L’environnement :
contrôle
Nourriture Sol Eau Air
environnemental
ABSORPTION
Portail d’entrée : peau, poumon, tractus gastro-intestinal
contrôle
Le corps : biologique
sang
DISTRIBUTION de la molécule parente
biopsie de tissus
METABOLISME essentiellement dans le foie
réactions d’oxydation
et de conjugaison

ACTIVATION DETOXIFICATION

DISTRIBUTION des métabolites

électrophilie produits de dégradation

sang
FORMATION D’ADDUIT EXCRETION
PROTEINE ADN urine, fèces, air expiré
hémoglobine, sérum, lymphocytes
albumine produits de
réparation
lésions irréversibles, dégradation
réparations fautives,
Cancer
lésions précancéreuses
Rate Foie

D’après Schnell, 1994.

Figure 2 : Relations entre les marqueurs d’exposition analysables et le devenir dans l’organisme du contaminant,
lors d’une intoxication à un polluant chimique.

15
 prolongée contre des antigènes solubles, et ils sont les principales immunoglobulines de la réponse
secondaire du système immunitaire, après une première exposition.
Les IgE sont des marqueurs d’hypersensibilités, ils participent aux réactions d’hypersensibilité
immédiate, et sont responsables des mécanismes de physiopathologie de l’allergie. Ils sont présents
également lors d’infections parasitaires.
On peut souligner que les IgM sont caractéristiques de la réponse primaire du système immunitaire.

iii. Le biomarqueur d’effet ou de toxicité

Il se distingue des biomarqueurs d’exposition car les dommages biologiques engendrés par le polluant
chimique ou physique sont irréversibles. En effet, antérieurement aux lésions cellulaires et tissulaires
irréversibles, des mécanismes de détoxification, de réparation de l’ADN s’activent pour compenser
l’agression du polluant ou des dommages engendrés par sa présence, son action. Ce biomarqueur
quantifie un composé biochimique, physiologique endogène, une altération fonctionnelle dans un organe
ou des aberrations chromosomiques. Cela nécessite que les mécanismes d’action du polluant soient
connus à l’état normal.
Pour exemple, l’inhibition de la cholinestérase dans le système nerveux central chez l’homme ou le
système nerveux périphérique chez l’animal est révélateur de contamination par des insecticides de type
organophosphoré ou carbamate (Ehrich, 1996; Padilla et al, 1996), on retrouve une augmentation d’acide
xanthurénique19 dans les urines 6 à 48h et cela peut confirmer l’exposition à ce type de pesticides (Seifert,
1996). Le nombre et la spécificité des marqueurs de toxicité (hépatotoxique, nephrotoxique,
neurotoxique, tumoraux…) sont croissants du fait de la performance des méthodes d’analyses, de la
connaissance des organes atteints, des cibles cellulaires et moléculaires des polluants chimiques (SFT,
2004).

iv. Le biomarqueur de successibilité génétique individuelle

Il n’est pas fondamentalement un marqueur de l’exposition ou de la toxicité, mais il dépend de la
sensibilité induite par des facteurs extrinsèques comme divers autres polluants chimiques, physiques, et
infections parasitaires; ainsi que par des facteurs intrinsèques héréditaires ou acquis lors d’exposition(s)
durant le développement. Cette sensibilité peut affecter le métabolisme, les systèmes de sauvegarde et de
réparation de l’ADN, le système immunitaire, etc. Ainsi une population peut être plus ou moins sensible à
une exposition par son polymorphisme génétique (Khalek et al, 1996). La version allélique peut
déterminer ou non la possibilité d‘adduit à l‘ADN en présence d‘un polluant (Rojas et al, 2000; Nature
2003). Il est identifiable par les techniques de biologie moléculaire.

3.1.2.2. Les contaminants physiques et biologiques

i. Les radionucléides et les REM

La quantification des radionucléides incorporés peut se déterminer directement in vivo, dans le cas
d’émission de rayonnements pénétrant. Ou bien sur le même principe que les substances chimiques, la
dose interne sera mesurée dans les excrétas, le sang, les tissus par l’activité volumique ou massique de la
matière biologique prélevée (IAEA, novembre 2004). En revanche, la dose interne exacte des REM ne
peut pas se mesurer car les mécanismes précis provoquant les effets potentiels ne sont pas clairement
identifiables. On estime une dosimétrie par les techniques analytiques électromagnétiques standard, et
entre les relations de la dose externe, des courants induits dans le corps et la nature du REM (NIEHS /
EMF, 1998).

ii. Les biocontaminants

Ce reporter au paragraphe 3.1.2.1 ii.

3.2. Les méthodes indirectes

La modélisation décrit sous une forme mathématique le comportement, le transfert de polluants
19
Neuromodulateur présent à l’état endogène dans le cerveau. Il est le produit de la transformation de la kynurénine provenant
du métabolisme de l’acide aminée tryptophane.
16
dans un milieu. Elle permet d’estimer une exposition globale et une prise en compte multifactorielle des
polluants. Elle n’a pas pour fonction de remplacer les essais en laboratoire mais de comprendre et de
prédire des mécanismes d’intoxication au sein des écosystèmes, ou au sein de l’organisme humain. Trois
approches méthodologiques peuvent se distinguer :
ƒ modéliser les phénomènes de dispersion de polluants dans un milieu précis,
ƒ déterminer le dosage interne de contaminants selon une voie d’exposition spécifique,
ƒ calculer l’exposition en fonction des doses de polluants dans l’espace et le temps,

Ces approches sont applicables, soit en utilisant une série de modèles spécifiques mais la conservation de
la masse ne semble pas être assurée et les transferts secondaires ne sont pas considérés de manière
complète; soit en intégrant le transfert des contaminants dans l’ensemble des milieux, et des voies de
pénétrations en un modèle intégrateur. Ce dernier, évalue l’exposition directe et indirecte des différents
milieux touchés.

La modélisation étant en évolution rapide, ce paragraphe 3.2. illustre son principe mais n’a pas
vocation d’établir une liste exhaustive et comparative des modèles et des logiciels des différentes classes
de polluants.
Plusieurs niveaux sont à considérer dans le choix, et la construction d’un modèle, l’aspect
mathématique, la description du milieu et la description du polluant. Chaque niveau comprend des
approches indépendantes décrivant une même réalité physique selon un point de vue différent, et les
choix dépendront des objectifs à représenter. Si l’on prend pour exemple une substance chimique, la
description de ce polluant comprendra deux principales approches, le concept de fugacité20 décrivant le
devenir du toxique, et celui des concentrations s’orientant sur la représentation de leurs effets.
21
o Les modèles de fugacité de Mac Kayraf permettent de simuler l’évolution de toute substance dans
un compartiment (eau, air, sol). Le calcul de la capacité fugace est plus ou moins complexe suivant les
milieux considérés. Ces modèles permettent de comprendre la dispersion et la proportion de
contaminants dans les media22. Outre l’application locale, l’utilisation de données locales au sein d’un
Système d’Information Géographique (SIG) permet une application de ces modèles au niveau régional.
o Plusieurs modèles en écotoxicologie tentent de décrire les effets toxiques, du modèle
compartimental simple de Chew et Hamilton 1985, en intégrant la constante temps ils proposent
l’hypothèse que le seuil toxique interne correspond à une probabilité de survie; à la théorie du budget
énergétique23. Cette dernière, modélise les phénomènes physiologiques liés à la pénétration d’un toxique
dans le milieu intérieur des organismes vivants. Cette modélisation, répertoriée dans le guide de l’OCDE,
nécessite la connaissance de divers paramètres tel que la croissance, la reproduction de l’espèce, etc.
(Koojman, 2003).
Certains modèles sont développés essentiellement pour la toxicologie humaine, tel que les modèles
de pharmacocinétique24 (PBPK/PD). Ils prennent compte des mesures d’exposition pour calculer
significativement les doses biologiques recevables. Ils peuvent reconstituer la dose de xénobiotiques
reçue par l’organisme grâce à l’analyse des biomarqueurs, de la concentration du composé parent ou de
ses métabolites dans les tissus (Blancato et al, 1994).
Parallèlement à ces deux approches, la substance peut être décrite suivant ses paramètres physico-
chimiques (volatilité, solubilité, coefficients de diffusion, Kaw, Kow, Kd, etc.), ses réactions chimiques,
sa biodégradation, sa dégradation abiotique, etc.
La figure 3 schématise la correspondance entre les différents niveaux de l’évaluation d’exposition
20
Il permet de calculer la répartition d’un produit dont on connaît le taux de rejet dans l’environnement. Il s’intéresse aux
différents compartiments (air, eau, sol).
21
Ses modèles environnementaux servent à l'évaluation réglementaire des produits chimiques dans le monde, notamment
parmi les pays de l’UE et l’US-EPA. Ils sont disponibles sur le site Web du Canadian Environmental Modelling Centre,
www.trentu.ca/envmodel
22
Compartiments.
23
Logiciels DEBtox, DEBtool disponibles sur le site web du département « Theoretical Biology » de l’Université
d’Amsterdam, http://www.bio.vu.nl/thb/deb/.
24
Le site web http://pbpk.org regroupe la documentation du domaine et certains logiciels sont disponibles depuis ce site, ainsi
que sur le site de l’US-EPA http://www.epa.gov/heasd/erdem/erdem.htm.
17
 Source de contamination
Modèles
chimique
microbiologique décrivant le transport, le devenir

Transport /
Transformation Modèles
dispersion calcul d’exposition
cinétique
thermodynamique
variabilité spatiale
distribution
météorologie
Caractéristique
Modèles
environnementale
PBPK,
air effets toxiques
eau, eau usée
sol, poussière Exposition
alimentation
voie de individuelle
pénétration communauté Dose Effet
durée
Voies d’exposition,
fréquence
population absorbée aiguë
sénarii d’activité intensité Profil statistique appliquée chronique
Sensibilité individuelle, du
groupe
Distribution de la population

D’après Rigas, 2002.

Figure 3 : Schéma de modèle d’exposition multimédia. Concordance entre les niveaux de l’évaluation
d’exposition aux polluants et la modélisation.

18
et les modèles mathématiques nécessaire à la construction d’un modèle d’exposition multimédia.
Les données réelles disponibles sont utilisées en priorité dans les scénarii, car elles sont plus
représentatives de la réalité. Mais, les données mesurées lors de l’évaluation de l’exposition humaine ne
sont pas toujours accessibles pour des raisons techniques et financières. Dans le cas de doute sur la
validité de celles-ci, il est préférable de confronter ces valeurs avec des données calculées sur la base de
scénario approprié. En l’absence de valeurs, il est nécessaire de se procurer des données complémentaires
sur la nature et les propriétés du contaminant pour en évaluer les concentrations et le devenir; sur les
émissions lorsque l’on souhaite établir des estimations de production et d’usage. En revanche,
l’intégration des données mesurées ou des données transposées25 introduisent des incertitudes dans
l‘évaluation, celles-ci sont quantifiables par les méthodes d’analyses et de sensibilités des incertitudes (Le
Gall, 2004).

Pour éviter l’utilisation de modèles inadaptés et obtenir des résultats erronés ne correspondant pas à la
réalité, il faut avoir connaissance de l’existence de plusieurs types d’incertitudes.
ƒ L’incertitude structurelle du modèle, en cas de méconnaissance du milieu, de la simplification de
l’environnement par découpage en compartiments homogènes, et de l’inadéquation des équations
du modèle. Cette dernière peut être éliminée ou amoindrit par l’étude détaillée du modèle et des
concepts.
ƒ Les incertitudes naturelles, elles décrivent les paramètres du milieu. Elles ne sont pas prises en
compte dans des modèles simplifiés ou des modèles regroupant des données géographiques
vastes.
ƒ L’incertitudes des données précédemment abordées et regroupant les erreurs aléatoires (mauvaise
méthodologie des mesures), l’erreur systématique (méthodes de mesures inadéquates), la
variabilité biologique, etc.
De plus, l’extrapolation des effets toxiques aiguës à des effets toxiques chroniques ne procède pas
aux mêmes mécanismes biologiques, ce qui peut intégrer de nouvelles incertitudes dans l‘évaluation.

4. Conclusion
De multiples facteurs sont à considérer en amont de toutes évaluations, de l’aspect physico-
chimique / biologique à l’impact physiologique et cancérigène; une connaissance approfondie du devenir,
des interactions et de la toxicité des polluants est primordiale. Pour englober la problématique, elle fait
appel à différents outils de diverses disciplines qui ont été abordées succinctement dans cette synthèse.
Ainsi la spécificité, la sensibilité, le développement et l’innovation des techniques en recherche
scientifique permettent d’optimiser graduellement les connaissances à prendre en compte dans l’expertise
et l’évaluation d’exposition aux polluants.
Plusieurs bases de données informatiques sur les études et les effets de polluants chimiques voir
physiques sont disponibles, mais il semble moins évident de trouver une base de donnée regroupant les
informations spécifiquement aux contaminants biologiques.

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Données relevées ailleurs dont les paramètres environnementaux ou le mode de vie sont similaires.
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