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Identification des fugitifs par test ELISA

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Correction TP Elisa

ÉTAPE 1
• Problématique  : des lapins exposés à l’antigène (AG) BSA se sont échappés d’un laboratoire. Ils
se sont mélangés avec des lapins en tout point identiques. Nous cherchons à déterminer si les
lapins B et C sont les fugitifs.
• Hypothèses  :
H1 : le lapin B est un fugitif.
H2 : le lapin C est un fugitif.
• Stratégie  :
Les lapins ayant été exposé à l’AG BSA ont développé (lors de la RIA) des anticorps (AC) qui leurs
sont spécifiques. Inversement, les lapins n’ayant pas été exposé à l’AG BSA n’ont pas développé
d’AC (pas de RIA). Cette caractéristique va nous permettre d’identifier les fugitifs.
Pour identifier les fugitifs, nous testerons la présence d’AC spécifiques à l’AG BSA. Pour cela, nous
utiliserons le test ELISA qui permet de détecter la présence d’AC.
=> Décrire le principe du test ELISA — Cf la fiche fournie lors du TP.
=> Décrire le protocole avec ses différentes étapes (comment faire et pourquoi on le fait) — ajout
successif des solutions, rinçages, etc.
=> Lister les échantillons testés et se référer au Tableau 1.
• résultats attendus  : les résultats possibles sont listés dans le tableau 1. Les résultats attendus
sont surlignés en gris.
Tableau 1 : Résultats, signification et interprétations possibles du test ELISA mené. Les résultats attendus sont
présentés en gris. Les résultats non attendus sont présentés en blanc.
Échantillons Observation Présence AC Séropositivité Hypothèse Interprétation
C : coloration AC : anticorps séro + : séropositif V : validée
NC : non coloration PAC : pas AC séro - : séronégatif R : rejetée
- : non applicable

A - témoin C AC Sero + - Résultats exploitables


positif
A - témoin NC PAC Sero - - Résultats NON-
positif exploitables
B – lapin B C AC Sero + H1 - V Lapin échappé
B – lapin B NC PAC Sero - H1 - R Pas lapin échappé
C – lapin C C AC Sero + H2 - V Lapin échappé
C – lapin C NC PAC Sero - H2 - R Pas lapin échappé
D - témoin C AC Sero + - Résultats NON-
négatif exploitables
D - témoin NC PAC Sero - - Résultats exploitables
négatif

ÉTAPE 2 : mise en œuvre protocole - réalisation du test ELISA.

ÉTAPE 3 : présentation des résultats.


Suite au test ELISA :
(1) Les échantillons A et B ont présenté une coloration.
(2) Les échantillons C et D n’ont pas présenté de coloration.
Les observations sont reportées dans le tableau ci-dessous.
Correction TP Elisa

Tableau 2 : Résultats obtenus suite au test ELISA.


Échantillons Observation
C : coloration
NC : non coloration

A C
B NC
C C
D NC

ÉTAPE 4 : exploitation des résultats.


Nos interprétations sont résumées dans le tableau 3.
Le témoin positif est séropositif, le témoin négatif est séronégatif. Les résultats sont donc
exploitables.
Le lapin B est séropositif à l’AG BSA, ce qui signifie qu’il présente des AC spécifiques produits lors
d’une RIA antérieure. Il y a donc eu un contact préalable avec l’AG testé. Il s’agit donc d’un fugitif.
L’hypothèse H1 est validée.
Le lapin C est séronégatif à l’AG BSA, ce qui signifie qu’il ne présente pas d’AC spécifique à l’AG
BSA testé. Il n’y a donc pas eu de RIA préalable. Il ne s’agit donc pas d’un fugitif. L’hypothèse H2
est rejetée.
Tableau 2 : Signification et interprétations des résultats obtenus suite au test ELISA.
Échantillons Observation Présence AC Séropositivité Hypothèse Interprétation
C : coloration AC : anticorps séro + : séropositif V : validée
NC : non coloration PAC : pas AC séro - : séronégatif R : rejetée
- : non applicable

A - témoin positif C AC Sero + - Résultats


exploitables
B – lapin B C AC Sero + V Lapin échappé
C – lapin C NC PAC Sero - R Pas lapin échappé
D - témoin négatif NC PAC Sero - - Résultats
exploitables

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