République Algérienne Démocratique Populaire

Ministère de l'enseignement supérieur et de la recherche scientifique

Université M'Hamed Bougera Boumerdes

Faculté des sciences

Spécialité : biotechnologie microbienne.

Thème :

ETUDE D'EXPRESSION L'OPERON LACTOSE CHEZ LA

BACTERIE E.COLI

Réalisé par : professeur :

 Chabbi Yousra Mme bennai

 Chelouche Nora
 Abacci Yanis
 Mecili Sarah

Année universitaire :

2022/2023

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Sommaire :
Introduction ………………………………………………………………………………………………………………………3

I. Qu'est-ce qu'un opéron ………………………………………………………………………………………..4

II. Caractéristique de l'opéron…………………………………………………………………………………..4
III. Structure de l'opéron …………………………………………………………………………………………..4
IV. Le mécanisme génétique de l'opéron lactose…………………………………………………….…6
V. Régulation de l'opéron lactose ……………………………………………………………………………7
A. En présence de glucose et absence de lactose …………………………………………………...7
B. En présence de lactose et absence de glucose …………………………………………………….8
C. En présence de glucose et lactose ……………………………………………………………………….8

Conclusion ……………………………………………………………………………………………………………………….9

Référence ………………………………………………………………………………………………………………………….10

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Introduction :
Les micro-organismes sont capables de contrôler l’expression de leurs gènes. Ce contrôle permet
essentiellement à la cellule d’ajuster ses synthèses en fonction des besoins nutritionnels ,face à un
environnement changeant, de façon à assumer la croissance et la division cellulaire .

Le contrôle de l’expression des enzymes permet un ajustement rapide des activités métaboliques
en réponse aux fluctuations des niveaux intracellulaires des sucres, d’acides aminés ou de
nucléotides .

 Certaines enzymes ne sont synthétisées que lorsque leurs substrats sont présents dans la
cellule : ces enzymes sont dites inductibles .
 D’autres enzymes ne sont synthétisées que lorsque leur produit final est absent, elles sont
dites répressibles .
 Enfin, certaines enzymes sont produites par des gènes qui ne sont pas régulés, elles sont
donc produites continuellement, que leur substrat soit présent ou pas. Ces enzymes sont
dites constitutives. Les enzymes constitutives sont généralement celles dont la cellule a
continuellement besoin, comme celles du métabolisme du glucose.

Chez les procaryotes les gènes sont groupés en unités fonctionnelles appelées opérons.

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 I. Qu'est-ce qu'un opéron ?
Définition de l’opéron :

Unité de régulation d’un ensemble de gènes adjacents qui seront transcrits à l’aide d’un
même promoteur sous forme d’un seul ARNm (polycistronique), puis traduit en plusieurs protéines
différentes. Cette unité comprend des gènes de structure (CISTRONS), un ou plusieurs gènes
régulateurs codant pour des protéines régulatrices et des éléments de contrôle présent dans la
séquence d’ADN.

Figure 1 : opéron lactose

II. Caractéristiques de l'opéron lactose :

A. Les gènes de l'opéron lac ont un fort niveau d'expression seulement en présence
du lactose, et en absence du glucose (la source de carbone et d'énergie
préférée) .
B. L'opéron lac ne possède pas un promoteur fort pour cette raison la fixation de
l'ARN polymérase doit être stimulée par une protéine d'activation spécifique,
appelé protéine réceptrice d'AMPc (CRP) ou protéine activatrice du catabolisme
(CAP). Qui se fixe sur le site CAP
III. Structure d'un opéron:
Dans l’opéron lactose, on trouve trois gènes de structures, deux 0sites de contrôle et une
.séquence terminatrice, qui sont indispensables à la dégradation du lactose

 Gènes de structures :
 La β-galactosidase (gène lacZ) qui catalyse hydrolyse de la liaison β1-4 osidique des β-
galactosides.
 Le lactose perméase (gène lacY). Cette protéine membranaire permet l’entrée du lactose
dans la cellule.
 La thiogalactoside transacétylase (gène lacA). Son rôle n’est pas bien connu. Elle acétyle les
β-galactosides non métabolisables qui pe uvent alors être éliminés hors de la cellule par
diffusion à travers la membrane plasmique.

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 sites de contrôle :
 le promoteur où se fixe l'ARN polymérase
 l'opérateur non codant sur lequel peut se fixer la forme active du répresseur empêchant
l'action de l'ARN polymérase : il contrôle les 3 gènes z, y et a.
 séquence terminatrice :
En amont de l'opéron lactose on trouve le gène Lac I qui est un gène régulateur. Il a son
propre promoteur et exprime "en continu" un répresseur qui bloque l'expression de l'opéron
lactose.

Figure 2 : organisation de l'opéron lactose

Figure 3 : organisation de l'opéron lactose

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 IV. Le mécanisme génétique de l’opéron lactose :
L’exemple le plus étudié de ce type de régulation est le contrôle de l’opéron Lactose d’E.coli.
Historiquement, les expériences portées sur l’analyseGénétique de mutants bactériens a permis de
découvrir tous les éléments Régulateurs du métabolisme du lactose (disaccharide présent dans le lait
des Mammifères).

En 1965, François Jacob, André Lwoff et Jacques Monod recevaient le prix Nobel de médecine et
de physiologie pour leurs travaux sur les mécanismes de régulation génétique chez les micro-
organismes.

Leurs découvertes venaient achever l’édifice de la biologie moléculaire. Les recherches que nous
avons déjà décrites avaient permis de déterminer la nature chimique des gènes, la structure de la
molécule d’ADN et la correspondance entre les gènes et les protéines, le code génétique. Les
résultats de F. Jacob, A. Lwoff et J. Monod permettaient de refermer la boucle des échanges
d’information au sein du monde vivant. Ils expliquaient comment certaines protéines, dites
régulatrices, contrôlaient, en se fixant sur les gènes, l’expression de ceux-ci, c’est-à-dire la synthèse
des protéines pour lesquelles ces gènes codaient.

L’organisation de l’opéron lactose Dans l’opéron lactose, on trouve les trois gènes indispensables
à la dégradation du lactose. Ils codent :

 La β-galactosidase (gène lacZ) qui catalyse hydrolyse de la liaison

 β1-4 osidique des β-galactosides
 Le lactose perméase (gène lacY).

Figure 4 : François Jacob

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 Figure 5 : Jacob et Monod ont proposé qu'un répresseur pouvait bloquer la synthèse d'ARN
d'un ensemble spécifique gène ; l'opéron lactose (lac) ; ou moins qu'un indicateur, le lactose,
se lie au répresseur Lwoff, Jacob, et Monod ont gagné le prix Nobel de médecine et de
physiologie en 1965

V. Régulation de l'opéron lactose :

A. En présence de glucose et absence de lactose :
Le gène I code pour une protéine : le Répresseur qui se lie à l'opérateur (sous une
forme tétramèrique), ce qui empêche l'ARN polymérase (fixée au promoteur) de
progresser pour Effectuer la transcription. Donc les trois enzymes ne sont pas
produites car leurs gènes Correspondants ne s'expriment pas, ils sont réprimés.

Figure 6: régulation de l'opéron lactose en présence de glucose et l'absence de

lactose

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 B. En présence de lactose et absence de glucose :
En présence de lactose une molécule inductrice est synthétisée par une réaction
de transglycosylation à partir du lactose (β, 1-4), il s‘agit de l'allolactose (β-D-
galactopyranosyl– (1-6)- β-glucopyranose). Cette molécule va se fixer sur le
répresseur et l'inactive de sorte qu'il ne puisse plus se fixer à la séquence de
l'opérateur. Permettant ainsi à l’ARN polymérase activée d’initier la synthèse de
l'ARN (la synthèse des enzymes).
En absence du glucose, les niveaux d'AMPc (synthétisée à partir de l'ATP par
Complexe CAP-AMPc se fixe sur le site CAP. Induisant une forte fixation de l'ARN
polymérase au promoteur pour augmenter le taux de la transcription (x50 fois).

Figure 7 : en présence de lactose et en absence de glucose

C. En présence de glucose et lactose :

La présence du lactose induit la synthèse de l'allolactose qui se fixe au répresseur
induisant est inactivation donc il se détache de la séquence de l'opérateur
permettant à l’ARN polymérase activée d’initier la synthèse de l'ARN et des enzymes.
Cependant, en présence de glucose les niveaux d'AMPc diminuent et le complexe
CAP-AMPc ne se forme pas et il ne se fixe pas sur le site CAP. Et donc la transcription
n’est pas accélérée (faible taux de transcription)

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 Figure 8 : en présence de lactose et glucose

Conclusion :

L'induction de l'opéron lactose nécessite deux conditions, il faut la présence de lactose

et l'absence de glucose.
Si on a présence de lactose et de glucose, l'opéron est faiblement activé (activité
basale). En effet, dans ce cas, la protéine CAP est inactive car le taux d'AMPc est faible. Donc,
en absence de CAP active, la fixation de l'ARN polymérase au promoteur est faible même si le
répresseur a été inactivé.

La transcription de l’opéron lactose est donc sous le contrôle de deux protéines régulatrices:

Le répresseur lacI se fixe au niveau de l’opérateur en absence de lactose et bloque l’ARN

polymérase, il y a une régulation négative.
La protéine CAP (ou CRP), active sous forme d’un complexe avec l’AMPc, qui se lie à
l’ADN et permet d'augmenter l'affinité de l'ARN polymérase pour le promoteur, il y a une
régulation positive en présence de lactose.

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Référence :

-Laboratoire de génétique cellulaire du collège de France de service de génétique

microbienne de l'institut pasteur.
-G.Pontecorvo، adv. in Enzymol., 13,121)1952(
-rnbio.upmc.fr
-Cours-pharmacie.com
-Rnbio.fr
- www.larousse.fr
- écologie.univ-batna2.dz
- www.futura-science.com/sante/dossiers/bilogie-bactéries-leur-monde-nous- 1433.

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