Bio 214
Bio 214
Niveau 2, Biologie
Professeur Martin Luther KOANGA MOGTOMO
Professeur Rosalie Annie NGONO NGANE
Professeur Laurette EKOUE - NGO NKOT
Mme Rébecca Madeleine EBELLE ETAME
0
BIO 214 : MICROBIOLOGIE GENERALE
(CM : 25H, TD : 10H, TP : 10H, TPE : 05H)
TRAVAUX PRATIQUES
1. Bactériologie, Mycologie
Règles de sécurité
Le matériel de la salle de travaux pratiques de microbiologie et consommables
Technique d’identification et de destruction
Milieu de culture et techniques d’ensemencement des microorganismes
Techniques d’isolement et de dénombrement des bactéries et levures.
2. Parasitologie
Parasitoses du péril fécal : Identification et symptômes.
3. Virologie :
Virus, culture virale et les effets cytopathiques
Le diagnostic virologique.
FICHE DE PROGRESSION
1
PARTIE VIROLOGIE
PARTIE PARASITOLOGIE
SEQUENCES THEMES DEVELOPPES DUREE
SEQUENCE 1 I. Définitions 2h
II. Diversité et Spécificité
SEQUENCE 2 III. Types de transmission 2h
IV. Localisation du parasite chez l’hôte
SEQUENCE 3 V. Interaction hôte parasite 2h
VI. Classification des parasites
SEQUENCE 4 VII. Traitement 3h
VIII. Exemple de parasitose et espèces parasitaires associées
IX. Etude de deux cycles directs courts
PARTIE BACTERIOLOGIE
SEQUENCES THEMES DEVELOPPES DUREE
1. Définitions
SEQUENCE 1 : 2. Morphologie et structure de la cellule bactérienne
2.1 Généralités
2.2 Morphologie générale des bactéries CM : 4h
2
2. 3 Structure de la cellule bactérienne
3. Nutrition bactérienne
3.1 Besoins élémentaires des bactéries
3.2 Besoins énergétiques
3.3 Types nutritionnels ou trophiques
3.4 Besoins spécifiques : facteurs de croissance
4. Croissance des bactéries
4.1 Techniques de mesure de la croissance
SEQUENCE 2 : 4. 2 Croissance en milieu non renouvelé ou croissance
discontinue ou en batch
4.3 Phénomène de diauxie (croissance biphasique ou CM : 4h
croissance double)
4.4 Croissance en milieu renouvelé : croissance continue
4.5 Facteurs influençant la croissance bactérienne
5. Agents antimicrobiens
5.1 Définitions
5.2 Agents physiques
5.3 Agents chimiques
SEQUENCE 3 : 6 Aperçu du rôle des bactéries CM : 4h
6.1 Bactéries et environnement
6.2 Bactéries et santé
6.3 Bactéries et agriculture
6.4 Bactéries et industrie
PARTIE MYCOLOGIE
SEQUENCES THEMES DEVELOPPES DUREE
SEQUENCE 1 I. Morphologie des Champignons 2h
SEQUENCE 2 II. Mode de vie des champignons 2h
SEQUENCE 3 III. Mode de reproduction des champignons 2h
3
SOURCES DOCUMENTAIRES
PARTIE VIROLOGIE
2. Hervé Fleury. Virologie humaine. 2009. 5ème édition Collection : Abrégés connaissances et
pratique. Editeur : ELSEVIER / MASSON
PARTIRE PARASITOLOGIE
PARTIE BACTERIOLOGIE
1. Microbiologie. 2013. The French edition copyright, by De Boeck Supérieur. Prescott | Willey |
Sherwood | Woolverton, Traduction de Jacques Coyette et Max
4
PARTIE MYCOLOGIE
Steven D. Harris . (2008). Branching of fungal hyphae: regulation, mechanisms and comparison
with other branching systems. Mycologia 100: 823-832
Piskur J, et al. (2006) How did Saccharomyces evolve to become a good brewer? Trends Genet
22(4):183-6
Santos, J. E. P.; Mena, H.; Huber, J. T.; Tarazon, M., 2005. Effects of source of gossypol and
supplemental iron on plasma gossypol in Holstein steers. J. Dairy Sci., 88 (10): 3563-3574
Tamokou JD, Mbaveng TA, Kuete V. (2017) Antimicrobial activities of African medicinal spices
and vegetables. In: Medicinal Spices and Vegetables from Africa: Therapeutic Potential against
Metabolic, Inflammatory, Infectious and Systemic Diseases, 1st Edition, Elsevier, Chapter 8,
Pp207-23
5
SOMMAIRE
FICHE DE PROGRESSION ............................................................................................................. 1
SOURCES DOCUMENTAIRES ...................................................................................................... 4
SOMMAIRE ...................................................................................................................................... 6
PARTIE I : VIROLOGIE .................................................................................................................. 7
I. GENERALITE SUR LES VIRUS ............................................................................................. 7
I.1 INTRODUCTION ................................................................................................................ 7
I.2. CARACTERISTIQUES DES VIRUS ................................................................................ 8
I.3. INFECTION ET MALADIE VIRALES ........................................................................... 12
I.4. FACTEURS DEFENSIFS ANTIVIRAUX ...................................................................... 12
II. VIRUS ET STRUCTURE ...................................................................................................... 14
II.1. STRUCTURE GENERALE ............................................................................................ 14
III. CLASSIFICATION ET NOMENCLATURE ....................................................................... 16
III.1 CLASSIFICATION DES VIRUS ................................................................................... 16
III.2. NOMENCLATURE DES VIRUS.............................................................................. 17
IV. TECHNIQUES D'ETUDE DES VIRUS ............................................................................... 18
IV.I. LE MICROSCOPE OPTIQUE ....................................................................................... 18
[Link]. LES MICROSCOPES ELECTRONIQUES .................................................................. 20
TRAVAUX PERSONNELS DE L’ETUDIANT ........................................................................ 22
TPE 1 : LES MIMIVIRUS ...................................................................................................... 22
TPE 2 : LA FAMILLE DES MEGAVIRIDAE (Megavirus chilensis) ................................... 24
PARTIE II. PARASITOLOGIE ...................................................................................................... 26
INTRODUCTION ....................................................................................................................... 26
I. DEFINITIONS ......................................................................................................................... 26
II. DIVERSITE ET SPECIFICITE .............................................................................................. 27
III. TYPES DE TRANSMISSION .............................................................................................. 29
IV. LOCALISATION DU PARASITE CHEZ L’HOTE ............................................................ 30
V. INTERACTIONS HOTE-PARASITE ................................................................................... 31
VI. CLASSIFICATION DES PARASITES ................................................................................ 34
VIII. EXEMPLE DE PARASITOSES ET ESPECES PARASITAIRES ASSOCIEES ............. 39
IX. CYCLES ETUDIES (Cycle Direct Court) ............................................................................ 41
PARTIE III. BACTERIOLOGIE .................................................................................................... 44
1. DEFINITIONS ........................................................................................................................ 44
2. MORPHOLOGIE ET STRUCTURE DE LA CELLULE BACTERIENNE .......................... 44
3. NUTRITION BACTERIENNE ............................................................................................... 54
4. CROISSANCE DES BACTERIES ......................................................................................... 56
4. AGENTS ANTIMICROBIENS .............................................................................................. 60
FICHE DE TD ............................................................................................................................. 64
PARTIE IV. MYCOLOGIE ............................................................................................................ 69
INTRODUCTION ....................................................................................................................... 69
III. MODE DE REPRODUCTION ............................................................................................. 73
IV. CLASSIFICATION DES CHAMPIGNONS ........................................................................ 77
6
PARTIE I : VIROLOGIE
Pr KOANGA MOGTOMO MARTIN LUTHER
(Charge horaire: CM 06 h, TD 02h30 h, TP 02h30, TPE 02h30)
L’existence d’agents infectieux particuliers responsables des maladies chez les êtres vivants
(animaux et plantes des différents), a été démontrée au cours du siècle dernier. E effet, à la
différence des microorganismes déjà connus, ces agents infectieux nouveaux, ne sont pas visibles
au microscope optique et moins encore cultivables dans les milieux de nutritifs de cultures
classiques.
En 1881, Louis Pasteur fut le premier à reproduire in vivo la pathologie rabique par injection du
fluide biologique recueilli du tissu nerveux d’animaux morts de rage. L’inoculât était stérile d’un
point de vu microbiologique, par l’absence de microbe visibles au microscope. Il recherchât sans
succès l’agent étiologique de la rage dans le matériel biologique pathogène. En conclusion, son
intuition l’a conduit à conclure que ces agents infectants étaient très petits pour être observés au
microscope.
En 1892, le botaniste Russe, Iwanowski démontre que le filtrat de plantes infectées par la
mosaïque du tabac purifié des microorganismes, était capable de transmettre la même maladie
aux plantes saines.
En 1898, Löffler et Frosch ont reproduis la fièvre aphteuse chez les bovins sains avec le filtrat de
la lymphe aphteuse provenant des bovins malades. Sanarelli démontra que la myxomatose des
lapins pouvait être transmise aux lapins sains avec le filtrat biologiquement stérile.
Enfin, en 1899 Beijerinck confirme les résultats d’Iwanowski. Il donna le nom de contagium
vivum fluidum à l’agent infectant présent dans le filtrat, lequel était capable de traverser des
bougies de filtration et infecter d’autre organisme de manière infini.
7
Le concept d’agent infectant filtrable est acquis et s’affirma au rythme des découvertes de
nouvelles maladies de l’homme, des animaux et des plantes. Avec le temps ce concept fut changé
en virus filtrable et enfin de virus tout simplement.
L’état des connaissances actuelles, permettent de définir les virus comme des entités biologiques,
sans organisation cellulaire, constitués essentiellement d’un seul type d’acide nucléique ADN ou
ARN et qui ne peut se répliquer qu’à l’intérieur d’une cellule vivante. Les virus sont une catégorie
d’agents infectieux, fondamentalement homogènes avec des caractéristiques particulières qui les
différentient des organismes à organisation cellulaire rudimentaire.
I.2.1. DIMENSION
Les virus sont si petits qu’ils sont invisibles au microscope optique, seul quelqu’un de grande
taille tels que les virus de la famille des mégaviridae, font exception avec des dimensions proches
de celles des petites bactéries. Il faut également noter que les formes virales observées, sont en
générale des amas de virus ou des virus enveloppés dans du matériel non viral.
Bien qu’ayant en commun la caractéristique d’être extrêmement petit, les virus présentent
cependant, des dimensions très différentes, les plus grands dépassant les limites de la visibilité au
microscope optique (0.2μ) et les plus petits connus à ce jour mesurent (0.02μ). Les principaux
virus des animaux présentent les dimensions suivantes :
8
I.2.2. STRUCTURE ET FORME
Les virus ont une organisation structurale simplifiée. Elle est constituée essentiellement de deux
parties :
1. une interne faite d’acide désoxyribonucléique (ADN) ou ribonucléique (ARN).
La partie interne appelée nucleus, est d’une importance fondamentale par sa nature (acide
nucléique) et son contenu (l’information génétique). Le nucleus se présente sous une forme très
dense déterminée par sa nature.
2. une externe de nature protéique (capside).
La partie externe appelée capside recouvre le nucleus, donnant ainsi une stabilité aux virons. La
capside présente diverses formes géométriques ou symétrie, reflétant les différents types
d’organisation des molécules qui la constituent. Cette symétrie est déterminée par le nombre
d’unités morphologiques élémentaires appelés capsomères, lesquels sont distribués
symétriquement pour former la capside. Les capsomères sont constitués d’unités structurales plus
petites, des chaînes polypeptidiques (unité protéique) unique ou multiple. L’étude systématique
de la structure des virus infectant les animaux, a révélé l’existence de trois principales symétries :
cubique, hélicoïde et complexe.
La symétrie cubique est formée des capsomères distribués de manière symétriquement au tour
d’un axe, pour former un polyèdre régulier, généralement un icosaèdre. Certain virus à symétrie
cubique peut présenter une forme sphéroïdale.
La symétrie hélicoïdale est formée par des capsomères organisés pour former une spirale autour
du nucleus, donnant à l’ensemble une forme tubulaire ou sphérique. Un tour de spire complet
est formé par 16 capsomères, qui sont de grosses molécules protéiques allongées, formées de 168
acides aminés. L’espace longitudinal interne de la capside est en partie occupé par l’acide
nucléique sous forme de filament en spiral. Certain virus à symétrie hélicoïdale peut présenter une
forme sphérique ou filamenteuse avec toujours la capside en spirale.
La symétrie complexe est formée par l’association de deux parties, une cubique et l’autre
hélicoïdale. L’ensemble de ces deux parties constitue la capside de la particule virale complète.
Chez certains virus, la capside est recouverte par une enveloppe ou membrane virale toujours
d’origine cellulaire. Elle concoure à la détermination de la forme virale.
9
- l’acide nucléique qui forme le génome viral au milieu de la capside encore appelée core viral. La
molécule d’acide nucléique est toujours de l’ADN ou l’ARN compactes dans l’espace du
nucléocapsidique.
L’acide nucléique viral et les protéines virales sont de même nature chimique que ceux trouvés
chez les êtres vivants infectables par un virion. Ils sont cependant spécifiques aux virions,
spécifiant l’information génique qui lui est propre. Chez certains virions, le génome viral
représente 40% du poids sec du virus, alors que d’autres ont un appareil enzymatique spécifiques.
I.2.5. LA RESISTANCE
Les virus présentent une résistance variée aux agents physique et chimique :
1. La chaleur se présente ainsi, comme un excellent moyen de désinfection des instruments
souillés par des virus. Cependant certains virus sont très résistants à la chaleur par des formes
végétatives comme certaines bactéries. Lorsqu’ils sont exposés à des températures de 55°- 60°
pendant 30-60 mm ils sont détruits. Les virus survivent pendant une très longue période à de très
basse températures (-60° à –70°), ce qui permet de les conservés et de façon optimale sous forme
lyophilisée. Ils supportent par contre mal la glace à une température autour de 0°.
Les virus se comportent diversement en fonction du pH. Certains virus résistent jusqu’à trois
heures à pH2 et à 37°c, d’autres par contre sont très sensibles à une légère acidification et plus
tolérants à l’alcalisation. Cependant, les capacités infectantes des virus sont conservées au tour de
pH 7.
2. Les rayons UV, X et en général toutes les radiations ionisantes inactivent les virus avec des
effets variés selon les doses utilisées.
10
3. Déshydratation : certains virus comme le virus de la variole supporte parfaitement la
dessiccation et après plusieurs mois le virus conserve toujours sa capacité d’infection.
4. Agent chimique : les virus ont une faible résistance aux désinfectants communs. Leurs
comportements sont différents au contact du formaldéhyde, de l’acide phénique, de l’éther et de la
glycérine. Le formaldéhyde à la concentration idéale, inactive certains virus sans en modifiés les
propriétés antigéniques. L’acide phénique peut être utilisé pour extraire l’acide nucléique des
virus infectants. Certains virus sont résistants à l’éther, quand d’autres y sont sensibles. Cette
caractéristique est utilisée comme critère de classification. La glycérine est très intéressante au vu
de la résistance des virus, en solution aqueuse de 50% elle est utilisée pour la conservation du
matériels biologiques pathogènes, tels que les tissus nerveux d’animaux morts de rage, des
fragments de tissus pulmonaire.
Antibiothérapie : Les virus ne sont pas sensibles aux antibiotiques.
11
I.3. INFECTION ET MALADIE VIRALES
La pénétration du virus dans une cellule n’est pas toujours suivie par sa réplication. L’infection
peut être abortive, latente ou productive. Sur la base de cette caractéristique, On distingue les
virus :
- Cytocides, la réplication du virion conduit à la cytolyse des cellules de toutes les cellules
infectées ;
- Sous modérés, la réplication du virion conduit une cytolyse partielle des cellules infectées, qui
peuvent même entrer en division ;
- Modérés, la réplication du virion ne conduit pas à la cytolyse la cellule infectée et n’entrave pas
la physiologie normale cellulaire, qui se caractérise par le fait que les cellules filles sont porteuses
du matériel génétique viral spécifique doté de la continuité génétique dans un état non infectant
appelé provirus.
Cette forme particulière de coexistence entre le virus et la cellule infectée produit au niveau de
l’organisme une infection persistante non apparente car il n’y ’a pas de signes cliniques de
maladie. Ainsi, dans cette forme le virus se comporte au début de l’infection en cytocide, mais la
réaction immunitaire de l’organisme qui, par son action atténue le caractère cytocide, permettant
d’atteindre le stade de l’infection non apparente persistante. La forme la plus élevée de ce type
d’infection, est dite occulte ou masque où en absence de signes cliniques apparents, le diagnostic
est fait par des tests moléculaire caractérisant de façon discriminante le génome viral recherché.
Exemples de quelques maladies virales humaines : la variole, la varicelle, la rage, la
poliomyélite, la fièvre jaune, les différentes formes d’Herpes, l’encéphalite, la méningite, la
grippe, l’Hépatite etc.
Exemples quelques maladies virales animales : la fièvre aphteuse, la peste bovine, le cholera
des porcs, l’anémie et l’encéphalopathie des chevaux, la peste aviaire etc.
Exemples quelques virus de microorganismes, les bactériophages
12
L’interféron : sa production par l’organisme s’oppose à l’extension de l’infection.
L’immunité acquise : Les anticorps formés à la suite de l’infection virale sont très importants
pour la défense de l’organisme, de par leur pouvoir antiviral. Cette activité antivirale est
mesurable in vitro par la neutralisation de l’infection virale et la transmission de la protection
immune par l’administration du sérum à un animal susceptible. Le pouvoir protecteur des
anticorps est clairement démontré dans plusieurs infections virales à l’exemple des hépatites,
quand on y intervient par administration des gammaglobulines. L’injection du sérum d’un
organisme immune à un organisme naïf, lui confère une immunité spécifique. Il y’a alors une
corrélation entre le taux d’anticorps circulants et l’état immunitaire.
L’activité antivirale des anticorps s’exerce sur le virion libre ou circulant en altérant leur strate
superficielle, empêchant de ce fait dans la plupart des cas l’adsorption du virus au niveau des
récepteurs cellulaires. Dans les cas où le virus échappe à cette action et pénètre dans la cellule, il
est rapidement détruit par les enzymes endocellulaires au quel il est exposé à la suite des
altérations précédentes déterminées par les anticorps spécifiques et les activités complémentaires.
Dans les infections virales qui causent l’altération de la membrane cellulaire, un facteur de
défensif d’une grande importance est constituée par une réponse immune cellulaire de type hyper
sensibilité retardée.
L’activité des anticorps dans l’immunité acquise contre les infections virales, n’exclue pas l’action
des facteurs défensifs déjà mentionnés, qui sont à la base de l’immunité naturelle. Dans
l’ensemble les facteurs cellulaires prennent part activement aux processus de protection.
Enfin, il existe dans le plasma et les autres liquides organiques des substances dites inhibitrices car
elles sont dotées d’une activité antivirale. La participation du système humoral se divise en en
deux catégories :
- Les inhibiteurs stables à la chaleur, résistants jusqu’à une demie heure à 56° tels que les
protéines du mucus et certaines lipoprotéines ;
- Les inhibiteurs instables qui s’altèrent à 56°, ce sont des protéines simples ou complexes.
L’action des inhibiteurs s’exerce hors des cellules sensibles, avant que le virus n’y pénètre. Cette
action se vérifie dans diverses activités antivirales. Dans la plupart des cas, il s’agit des inhibiteurs
de l’hémagglutination virale et dans de rares cas l’activité se manifeste contre l’infection virale.
13
II. VIRUS ET STRUCTURE
II.1. STRUCTURE GENERALE
L’organisation générale est très simple comme représenter dans la figure 1. Elle comprend de
l’intérieur vers l’extérieur : le génome viral, la capside et l’enveloppe
14
-les hexons ou hexamères, de la polymérisation de 6 chaînes polypeptidiques
Tous les virus à symétrie icosaèdrique possèdent 12 pentons (car ils se trouvent sur chaque
sommet de la structure) et un nombre d'hexons variables ex : une capside à 32 capsomères a 12
pentons et 20 hexons.
15
Figure 4 : la symétrie mixte du bactériophage T 4
II.1.3 L’enveloppe
Certains virus possèdent une enveloppe externe à la capside. Elle n’est pas d’origine virale. On
distingue trois origines pour cette enveloppe virale :
1. Membrane nucléaire
2. Membrane plasmique cellulaire
3. Système endomembranaire cellulaire
16
3. Le pouvoir pathogène. On les désigne comme virus morbilleux responsable de la rougeole,
virus ourlien responsable des oreillons …
4. Le pouvoir pathogène. A ce jour, il est le plus complexe à mettre en œuvre, parce que certains
virus possèdent un spectre pathologique avec une diffusion à plusieurs organes, appareils ou
systèmes. Ainsi, certains syndromes peuvent être associés à une multiplicité de virus infectieux
différents. Enfin, certains virus de caractérisation récente n’ont démontré aucun pouvoir pathogène
connu.
5. Le mode de transmission. On les désigne comme virus respiratoire, entérique, transmis par des
arthropodes …
La virologie comme discipline biologique a, permis une meilleure définition des virus. Cela a eu
pour conséquence, l'élaboration d'une nouvelle classification fondée uniquement sur des critères
objectifs basée sur les caractéristiques structuraux des virions. Elle est aussi dénommée
classification appelée système L.H.T des chercheurs Lwoff, Horne, et Tournier.
Les quatre critères structuraux sont :
1. La nature de l'acide nucléique, permettant de distinguer des virus à ADN à ARN ;
2. La symétrie de la capside : icosaédrique, hélicoïdale et mixte ;
3. L'absence d'une enveloppe, virus nu ;
4. La présence d'une enveloppe, virus enveloppé.
L'utilisation de sous de critères caractéristiques du génome, de la réplication et du nombre de
capsomère, peuvent permettre une classification biologique plus fine.
Elle consiste à donner un nom à un virus. On distingue ainsi le nom commun et taxonomique.
1. le nom commun. Ce nom très souvent n’est un critère rationnel ou biologique. Les chercheurs
qui caractérisent pour la première fois ont la liberté d’attribuer un nom selon leur imagination et
convenance. Exemple virus d’Ebola.
2. le nom taxonomique
En 1966, le comité international de taxonomie des virus a défini une nomenclature à vocation
universelle suivant les taxons et l’utilisation d’un suffixe (en fin de mot) pour les quatre premiers
et d’un préfixe (en début de mot) pour le dernier, à ajouter au nom du groupe de virus pour
indiquer son taxon :
1. Ordre : virales. Exemple rétrovirales ;
2. Familles : viridae. Exemple rétroviridae ;
17
3. Sous-familles : virinae. Exemple rétrovirinae
4. Genres : virus. Exemple rétrovirus
5. Espèce : virus de. Exemple virus de l’immunodéficience acquise.
Ces noms sont écrits de façon spécifique et normalisée :
- lettre capitale et italique pour les familles : exemple PARAMYXOVIRIDAE
- lettre en italique sans capitale pour les sous-familles et genres.
- pour les espèces noms communs, romain sans capitale exemple la rougeole.
IV.I.1. DESCRIPTION
18
IV.I.2. Utilisation du microscope optique
19
[Link]. LES MICROSCOPES ELECTRONIQUES
21
TRAVAUX PERSONNELS DE L’ETUDIANT
TPE 1 : LES MIMIVIRUS
LE MIMIVIRUS,
Le Mimivirus (pour mimicking microbe). Ce Mimivirus parait en passe de bouleverser une
nouvelle fois les conceptions que nous pouvons nous faire de la vie et de ses origines.
Qu’est-ce qu’un virus ?
Rappelons d’abord la définition du virus. Rien n’est plus élusif que ce micro-organisme. Il s’agit
de petits éléments d’ADN ou d’ARN enveloppés de protéines, intermédiaires entre la vie et la
non-vie. Ils n’ont pas de membranes, ce ne sont donc pas des cellules, ni même ces cellules
élémentaires que sont les bactéries. Ils ne prennent vie que lorsqu’ils envahissent les cellules afin
de les utiliser pour se reproduire. Ceci en fait les tueurs que l’on connaît : fièvre Ebola, VIH,
grippe, etc. Mais d’innombrables autres virus ne sont pas pathogènes. Nous y reviendrons.
Rappelons que les virus n’étant pas des cellules ne sont pas sensibles aux antibiotiques.
C’est le botaniste hollandaise Martin Beijerinck qui a soupçonné leur existence au début du 20e
siècle en recherchant les causes d’une affection végétale, la Mosaïque du tabac. Les extraits de
feuilles infectés demeuraient virulents après passage par un filtre en porcelaine alors que ce filtre
aurait dû arrêter une bactérie. Mais l’agent de la mosaïque du tabac n’a été identifié qu’en 1935
grâce à l’invention du microscope électronique. Le chimiste Wendell M. Stanley qui obtint pour
cela le prix Nobel, montra que le virus pouvait être effectivement considéré comme intermédiaire
entre un organisme vivant et un composé physico-chimique.
Aujourd’hui, le débat ne s’est pas éclairci. Où se situent les virus, entre les trois branches de
micro-organismes officiellement reconnues : les eucaryotes, multicellulaires disposant de cellules
à noyau, les bactéries monocellulaires avec ou sans noyau et les archea, découvertes par Carl
Woese, bactéries sans noyau qui constitueraient peut-être le tiers de toute la matière vivante
existant sur la Terre. On considérait les virus comme dépendant des organismes sans lesquels ils
ne peuvent se reproduire. Donc ils seraient apparus après ceux-ci et non avant. Mais cette vision
est difficilement compatible avec les effectifs de virus que l’on pense exister sur Terre, sans doute
en majorité dans les océans comme le généticien Craig Venter vient de le montrer en
accomplissant un tour du monde en bateau destiné à prélever et étudier des échantillons de virus
océaniques. Le nombre des virus identifié à ce jour est infime par rapport à ceux qui ne le sont pas.
On estime parfois que mis bout à bout, l’ensemble des particules virales existant sur Terre
formerait une ligne longue de 10 millions d’années-lumière. Le plus grand nombre de ces virus
22
n’apparaît pas menaçant pour les espèces complexes comme la nôtre mais font néanmoins partie
intégralement de leur vie.
Les modes de réplication des virus sont très variés, avec de nombreuses différences dans la façon
d’infecter les cellules hôtes. Les souches de virus à ADN, comme ceux de la variole ou de
l’herpès, peuvent vivre des siècles en dehors d’un hôte, en se reproduisant par division avec un
taux minimum d’erreur. Les virus à ARN se reproduisent vite et en mutant fréquemment. On
estime que ces derniers sont les descendants des formes vivantes existant avant l’apparition de la
double hélice, un monde qui avait été qualifié de "monde de l’ARN". Ils dirigent la copie de leur
génome sans ADN et, de ce fait, plus rapidement mais avec beaucoup plus d’erreurs, ce qui était
un avantage à une époque où la vie n’avait pas encore choisi de s’incarner dans des formes stables.
Aujourd’hui, c’est de nouveau un avantage face aux méthodes de lutte antivirales adoptées par
l’homme. Les virus de la grippe, notamment celui de la grippe aviaire, sont aujourd’hui connus, au
moins de nom, du monde entier. Le virus de HIV également. Mais celui-ci est encore plus
pernicieux. Une fois qu’il s’est introduit dans la cellule de l’hôte, sous forme d’un brin d’ARN, il
y fabrique son propre double brin d’ADN qui s’incorpore à celui de l’hôte et se transmet avec lui.
Il est qualifié pour cette raison de rétrovirus.
Le monde des virus s’est enrichi récemment des viroïdes, fragments d’ARN sans enveloppes
protéiniques qui ne codent pour rien d’apparent. Les viroïdes n’ont pas de gènes et cependant
peuvent provoquer des maladies. D’autres organites, nommés satellites, ne peuvent se reproduire
que dans un virus, lui-même hébergé par un hôte. Mentionnons pour être complet les prions,
protéines complexes dont le rôle, utile ou nuisible à la vie cellulaire, reste encore en partie
mystérieux. On les exclue à ce jour de la catégorie des êtres vivants. Rappelons enfin que
l’ingénierie génétique fabrique aujourd’hui des ARN entièrement « chimériques », en enfilant des
paires de bases pour reconstituer certains virus, existants déjà comme celui de la poliomyélite, ou
inconnus à ce jour dans la nature, mais pouvant potentiellement s’y développer et devenir
dangereux pour l’homme.
Dans le panorama déjà surprenant des virus, la découverte du Mimivirus a eu l’effet d’une petite
bombe, dont les retombées sont encore loin d’être toutes perceptibles. Le Mimivirus est plus
complexe génétiquement, non seulement que les virus mais que beaucoup de bactéries. Cette
découverte oblige à redéfinir le concept plus général de virus. On est aujourd’hui tenté de faire des
virus une branche à part dans l’arbre de la vie. Mais cette branche ne serait pas récente. Elle
pourrait au contraire être l’ancêtre des trois autres. On pourrait alors considérer que les virus
seraient à l’origine même de la vie, origine dont on sait qu’elle demeure encore mystérieuse. Nous
allons examiner rapidement ces diverses perspectives.
23
TPE 2 : LA FAMILLE DES MEGAVIRIDAE (Megavirus chilensis)
Des scientifiques du CNRS viennent d'isoler un virus, encore plus grand et plus complexe que tout
ce qu'on connaissait jusqu'ici. Il a été découvert dans la mer près des côtes chiliennes mais
n'affecterait pas l'homme, d'après les recherches.
C'est la première fois qu'un tel virus est identifié dans l'environnement marin. Des chercheurs
français du Centre national de recherche scientifique (CNRS) ont annoncé une découverte de taille
: dans l'océan, à proximité des côtes du Chili, ceux-ci ont découvert un virus très particulier et qui
a d'ores et déjà battu plusieurs records. En effet, le micro-organisme est le plus gros et le plus
génétiquement complexe des virus connus à ce jour.
Décrit dans la revue Proceedings of the National Academy of Sciences, celui-ci est "chevelu avec
des épis sur la tête" et a été baptisé Megavirus chilensis. Comme son nom l'indique, il est donc
classé dans la famille des Megavirus, un type de micro-organisme dont l'archétype, isolé en 2003,
était jusqu'ici le Mimivirus doté de plus de 1.000 gènes et dépassant largement de nombreuses
bactéries en complexité. Mais ce Mimivirus est désormais détrôné : "Megavirus chilensis est
environ 15% plus gros que son lointain cousin Mimivirus et le dépasse encore en complexité",
explique à l'AFP Jean-Michel Claverie du CNRS dont le laboratoire est à Marseille.
Une nouvelle famille ?
D'après les travaux publiés, la molécule d'ADN du Megavirus comporte 1.259.000 paires de bases
qui commandent la production de 1.120 protéines, soit la plus grande séquence d'ADN jamais
décryptée. Par ailleurs, ce nouveau virus présente 594 gènes en commun avec son congénère. Les
chercheurs ont ainsi émis la possibilité qu'ils soient regroupés en une nouvelle famille, les
Megaviridae, qui inclurait des virus dont le génome est d'une taille supérieure à un million de
paires de bases.
En outre, Megavirus chilensis possède sept des enzymes utilisées par les cellules pour décrypter le
code génétique, soit trois de plus que Mimivirus. Mais si le micro-organisme a pu être
parfaitement décrit au cours de cette étude, pour l'heure, "on ne connaît pas l'hôte naturel de ce
Megavirus, qui n'apparaît pas pathogène pour l'humain", précise le chercheur.
24
savoir) qu'ils sont issus du génome d'une cellule ancestrale, peut-être un eucaryote, le type de
cellules que l'on retrouve dans les plantes et les animaux d'aujourd'hui".
Au cours de l'évolution, "les virus auraient commencé très grands à partir d'un génome cellulaire
et comme ce sont des parasites, ont ensuite rapetissé. C'est ce qu'on appelle l'évolution réductive
commune à tous les parasites (bactéries, virus, parasites)", ajoute le chercheur. Autrement dit,
comme les virus sont des parasites, ils n'ont pas hésité à abandonner certaines de ses fonctions
qu'il peut aisément trouver dans les cellules de l'hôte qu'il infecte et détourner à son usage.
Les virus géants eux ne sont pas des voleurs de gènes pris au hasard dans les cellules infectées,
mais des "fossiles vivants" d'organismes cellulaires ancestraux, précise encore le Pr Claverie.
Ainsi, de grands virus actuels tels que celui de la variole ou encore de l'herpès pourraient avoir une
origine commune avec ces megavirus.
25
PARTIE II. PARASITOLOGIE
Pr NGONO NGANE ROSALIE ANNIE
(Charge horaire: CM 06 h, TD 02, 30 h, TP 02,30 h, TPE 02,30 h)
OBJECTIFS SPECIFIQUES :
A la fin de ce cours, l’étudiant devra :
✓ Définir la parasitologie
✓ Connaître les différents types de parasites
✓ Connaitre les différents types de parasitoses
✓ Connaitre les différentes cellules et organes de l’organisme qui interagissent lors de
l’infection parasitaire
✓ Comprendre les bases générales du fonctionnement de deux cycles parasitaires simples
INTRODUCTION
Parasitologie : L'étude morphologique et biologique des parasites et des affections qu'ils
entraînent ainsi que leur diagnostic, leur prophylaxie et leur traitement.
L'étude porte également sur les vecteurs, les hôtes et les réservoirs animaux des parasitoses.
I. DEFINITIONS
Parasite : Être vivant animal ou végétal qui pendant une partie ou la totalité de son existence vit
aux dépens d'un autre organisme appelé hôte.
26
Vecteur : Organisme qui sert d'hôte à un agent pathogène et qui est susceptible de le transmettre à
un autre organisme.
Réservoir : Être vivant chez qui se perpétue le germe pathogène et qui lui permet de se maintenir
dans la nature.
Parasitisme : État de spoliation de matières nutritifs d'un parasite envers son hôte.
Le parasitisme est un contact particulier entre deux êtres vivants : le parasite et son hôte.
De la forme libre indépendante au parasitisme, forme de contact nécessaire et dépendante, divers
intermédiaires sont à distinguer :
- La vie libre : l’organisme peut subvenir par lui-même à ses besoins métaboliques.
- Le saprophytisme : l’organisme se nourrit de matières organiques ou végétales en
décomposition dans le milieu extérieur.
- Le commensalisme : l’organisme se nourrit de matières organiques sur un être vivant (milieu
buccal, intestin) sans entraîner de troubles ou de spoliations chez son hôte.
- La symbiose : les êtres vivent en étroite collaboration dans une association bénéfique aux deux
parties (équilibres des flores intestinales ou vaginales).
- Le parasitisme : l’organisme parasite vit aux dépens d’un hôte qui lui fournit un biotope et/ou
des éléments nutritifs nécessaires à sa survie, cet hôte en pâtissant de façon plus ou moins grave.
- l’opportunisme : les différents stades entre la vie libre et le parasitisme ne sont pas
définitivement déterminés pour un organisme. En cas de perte des défenses immunitaires de
l’hôte, l'organisme peut passer d'un stade saprophyte ou commensale à un stade de parasite. Il
devient opportuniste.
Le prédateur tue sa proie pour s’en nourrir.
27
- La morphologie : la taille d’un parasite peut aller de 10 mètres (Taenia : le ver solitaire) à
quelques micromètres (microsporidies, leishmanies, l'agent du paludisme).
- La durée du parasitisme : les parasites peuvent être permanents (leur existence entière se
déroule chez un ou plusieurs hôtes (Taenia, trichine)), temporaires (partageant leur vie entre
une forme libre dans l’environnement et l’autre parasitaire (douves, anguillules)), ou encore
facultatifs (parasites et myiases).
- Leur localisation : ils ont des localisations préférentielles qui peuvent être intra ou
extracellulaire, sanguine ou lymphatique, tissulaire, cutanée, hépatosplénique, cérébrale,
cardiaque, rénale ou tubaire (intestin, arbre urinaire, bronches).
- Leur locomotion : si certains parasites et tous les champignons n’ont pas de moyens pour se
déplacer par eux-mêmes, ils sont éventuellement transportés par voie aérienne intestinale ou
sanguine ; certains ont même la faculté de ramper, d’avancer grâce à des pseudopodes (ou
rhizopodes), des ventouses, des cils, des flagelles, ou une membrane ondulante.
2. Spécificité d'hôte
Les parasites sont plus ou moins étroitement liés à leur hôte. Certains parasites sont inféodés
exclusivement à un seul hôte et ne peuvent se développer que chez cet hôte (Les parasites
sténoxènes (poux, hématozoaires...)). D'autres au contraire (les euryxènes) ne présentent qu’une
faible spécificité, comme c’est le cas des agents des parasitoses communes à l’homme et aux animaux, les
anthropozoonoses (distomatoses, formes larvaires des taenias : hydatidose).
28
III. TYPES DE TRANSMISSION
1. Transmission orale
Par le milieu extérieur, péril fécal (eaux et aliments contaminés) (Ex de maladie : Amibiase,
giardiase, ascaridiose, cryptosporidiose, microsporidiose, cyclosporose, oxyurose,
hyménolépiase, isosporose, échinococcose alvéolaire, hydatidose, toxocarose, trichocéphalose).
Par contact avec des animaux ou ingestion de produits d'origine animale (Cysticercose,
hydatidose, toxocarose, toxoplasmose).
Par ingestion de viandes mal cuites, d'hôtes intermédiaires animaux ou de support végétaux
(Angiostrongylose, anisakiase, bothriocéphalose, clonorchiase, distomatoses, sarcocystose,
téniase, trichinose).
Par ingestion de vecteur aquatique passif (cyclops) (Dracunculose).
2. Transmission cutanéo-muqueuse
Par l'eau et les sols humides Anguillulose, ankylostomoses, bilharzioses, larva migrans cutanée.
Par le milieu extérieur sec Myiases.
Par contacts humains (malades ou porteurs sains) Maladies sexuellement transmissibles
Trichomonose (Trichomonas vaginalis), parasitoses cutanées ;
3. Transmission vectorielle
3. 1. Par les vecteurs aériens
a. Vecteurs vespéraux et nocturnes
Paludisme : Anopheles
Leishmanioses : Phlébotomes
Filarioses lymphatiques : Moustiques (Culex, Anopheles, Aedes, Mansonia)
b. Vecteurs diurnes
Trypanosomiases : Glossines
Loaose: Chrysops
Onchocercose : Simulies
Mansonelloses: Culicoïdes
3. 2. Par les vecteurs terrestres
Maladie de Chagas (Trypanosomiase américaine) : Punaises
Babésiose : Tiques
29
4. Transmission aérienne : Pneumocystose
30
V. INTERACTIONS HOTE-PARASITE
Relation hôte parasite (Variations entre le porteur sain de parasites et le malade). Le conflit plus
ou moins pathogénique entre le parasite et son hôte peut, cliniquement et biologiquement,
s’étendre du portage sain de parasites par l’hôte à la maladie chronique avec des épisodes
cliniques plus ou moins aigus et répétés.
L’équilibre nécessaire à la survie du parasite et de l’hôte est fragile et dépend de facteurs propres
aux parasites et de ceux résultant des défenses de l’hôte. Les parasites sont diversement virulents
et la pathogénicité reste en partie liée à la quantité de parasite et à leur pouvoir de contourner les
défenses que l’hôte va leur opposer. L’hôte parasité en plus d’une réceptivité qui lui est propre va
engager contre son parasite des modes de défense aspécifique commune aux agressions par tous
les pathogènes (réactions inflammatoires, allergiques…), et des réponses spécifiques (réactions
immunes humorales et cellulaires dirigées contre une forme parasitaire ou le parasite dans son
ensemble).
31
(ankylostome), d'une séquestration splénique (leishmaniose), ou d'une carence en vitamine B12
(bothriocéphalose).
* Processus tissulaires : ils s’expriment par les granulomes réactions autour d’un œuf
(bilharzioses) ou d’une larve (toxocarose) modifiant les fonctions tissulaires, évoluant
éventuellement vers des calcifications (vessie et uretères dans la bilharziose urogénitale) ou par
des développements scléro-fibreux excessifs (éléphantiasis des filarioses lymphatiques) et dans
certains cas par une implication dans les phénomènes de cancérisation (bilharziose urinaire et
cancer de la vessie).
* Processus plus directement immunopathologiques : ils impliquent antigènes, anticorps et
complexes immuns circulants participant à la formation de métaplasies réactionnelles
(paragonimose), de granulomes, de phénomènes allergiques et anaphylactiques. Les troubles
immunologiques c’est quand les anticorps produits contre le parasite s'attaquent à l'organisme
hôte (auto-immunité, hypersensibilité et allergie…).
* Facilitation (Favorisation) parasitaire et Echappement (Evitement). Le parasite co-évoluant avec
son hôte s’organise pour assurer sa survie (adaptation) par différents moyens : une très forte
fécondité comme dans le cas des taéniases (T. saginata peut produire plus de 100 millions d’oeufs
par an !), la polyembryonie au stade larvaire souvent (rédies des schistosomes dans le mollusque,
une résistance particulière au milieu extérieur (l’oeuf d’ascaris peut survivre plusieurs années),
une longévité de plusieurs années (plus de dix ans pour P. malariae, l’anguillule, les bilharzies ou
les filaires),et des adaptations métaboliques et immunologiques à leurs hôtes.
2. Conséquences du parasitisme
Parmi les conséquences du parasitisme, on peut citer :
L’action spoliatrice : le parasite vivant aux dépens de son hôte est spoliateur par définition. Les
spoliations souvent mineures s’expriment davantage si les parasites sont nombreux (anémie
ankylostomienne) ou lorsqu’ils détournent à leur profit certaines substances (anémie de Biermer
par spoliation en vitamine B12 dans le cas de la bothriocéphalose). La spoliation sanguine est le
résultat de gaspillage (ankylostomes hématophages broutant la muqueuse duodénale), d’hémolyse
(hématozoaires du paludisme), agénérative centrale (pan cytopénie des leishmanioses viscérales).
La spoliation intestinale est rarement directement en cause (tænias, ascaris). La spoliation : Le
parasite détourne des métabolites pour son propre métabolisme.
- L’action mécanique-traumatique fréquente est fonction de la taille des parasites, de leurs
localisations, et leurs éventuelles migrations ectopiques. Elle peut être microscopique (éclatement
32
de globules blancs pour les leishmanies et de globules rouges dans le cas de l’hématozoaire, des
cellules rétiniennes par le toxoplasme), ou macroscopique bruyante comme l’occlusion
lymphatique (filariose lymphatique), biliaire (douves) ou intestinale par un paquet d’ascaris, la
migration ectopique ou la perforation d’un ver, ou encore la compression par un kyste hydatique,
l’agression duodénale par les ankylostomes.
Les troubles traumatiques : Telles l'obstruction des capillaires, les lésions de la rétine par
rupture de kystes de Toxoplasma, les occlusions intestinales, les granulomes urinaires…
- L’action traumatique bactérifères : tout parasite perforant une muqueuse ou le revêtement
cutané peut constituer une porte d’entrée microbienne (amibes et abcès amibien, filaire de Médine
et perforation au niveau des malléoles).
- L’action irritative : elle peut être réflexe (spasmes intestinaux de l’intestin agressé, diarrhées,
épisodes de toux au passage de formes vermineuses larvaires…) mais elle va surtout à plus long
terme entraîner la formation de granulomes inflammatoires autour des oeufs ou larves parasitaires
(dermatite parasitaire et granulomes inflammatoires des bilharzies et larva migrans ) et/ou des
foyers de scléro-fibrose ( filarioses, bilharzioses), restant suspect dans la genèse de complications
néoplasiques (bilharziose urinaire et cancer de la vessie, opisthorchiose et cancer hépato-biliaire).
- L’action toxique due à l’émission d’excrétion/sécrétion toxiques d’arthropodes dans les plaies
de piqûre ou de produits métabolisés par le parasite et qui auront des actions allergisantes voir
anaphylactiques, histolytique comme les amibes nécrosantes, hémolytique dans le cas du
paludisme ou nécrotique dans quelques parasitoses à tiques. L’action toxique est souvent majorée
à la mort du parasite suite à un traumatisme ou au traitement (fissuration ou rupture d’un kyste
hydatique, lyse sous thérapeutique des microfilaires) avec de fréquents phénomènes allergiques ou
anaphylactiques.
- L’action infectieuse : coexistence entre un parasite et un microbe, est parfois mise à juste titre
en évidence dans le couple bilharzies-salmonelles ou la salmonelle enchâssée dans le schistosome
échappe à la thérapeutique curative complète, elle est plus discutable dans la relation entre
l’appendicite et l’oxyure.
- L’action immunodépressive, allergique voir anaphylactique est celle de tout corps étranger
pénétrant un organisme qui se défend.
- Notion de complexe pathogène : Ces modes d’actions souvent multiples plus ou moins
spécifiques d’un parasite, se mêlent à ceux d’autres agents infectieux parasitaires, bactériens ou
viraux, qui sur un fond de nutrition déficient, définissent des complexes pathogènes
malheureusement interactifs impliqués dans tous les phénomènes morbides et mortels propres aux
pays en voie de développement. (Quelques associations morbides et mortelles : paludisme et
33
rougeole, bilharzioses et salmonelloses, parasitisme et malnutrition, opportunistes parasitaires et
mycosiques et immunodépression rétrovirale ou thérapeutique …).
Les surinfections : Elles interviennent chez un sujet déjà atteint d'une maladie infectieuse.
La prescription d'antibiotiques est la règle si la surinfection est bactérienne.
1. Les phytoparasites
Seuls les champignons microscopiques intéressent la pathologie humaine.
2. Les zooparasites
Appartiennent à trois groupes :
Les protozoaires, les helminthes et les arthropodes.
2. 1. Les protozoaires
34
Êtres vivants unicellulaires eucaryotes souvent mobiles.
Ces organismes font partie du règne des protistes.
Toutes les fonctions nécessaires à la vie sont remplies par cette cellule unique grâce aux
organelles qui remplissent le rôle des tissus et des organes des animaux plus complexes.
La locomotion est assurée par trois types d’organelles : Les pseudopodes, les flagelles et les cils.
Les échanges avec le milieu ambiant se font par diffusion à travers les membranes cellulaires.
Cette diffusion joue un rôle important dans la respiration, l'alimentation, l'excrétion et
l'osmorégulation.
La reproduction des protozoaires peut être :
Asexuée
*Par fission binaire, au cours de laquelle l'individu se sépare littéralement en deux pour produire
deux individus identiques et de même taille.
*Par bourgeonnement au cours duquel une extension de l'organisme se sépare et produit un
nouvel individu
*Par fission multiple où le parent multinucléé se divise en plusieurs cellules de taille semblable.
Ou sexuée
*Par la formation de gamètes mâles et femelles (gamétogénèse)
*Par la conjugaison (chez les ciliés) qui consiste à un échange de matériel génétique.
35
Cellules présentant des avancées cytoplasmiques dites pseudopodes qui leur permettent de se
déplacer quand ils sont à l'état trophozoïtes. Peuvent être libres, saprophytes ou parasites.
Genres Entamoeba, Dientamoeba, Endolimax, Pseudolimax, Iodamoeba
L'espèce pathogène est Entamoeba histolytica histolytica Amibiase
*Classe des Flagellés : Se déplacent à l'aide d'un ou plusieurs flagelles
Les flagellés pathogènes sont : Flagellés sanguicoles Ordre Kinetoplastida Genre Trypanosoma
et genre Leishmania ; Flagellés intestinaux Ordre Diplomonadida
Giardia intestinalis ; Flagellés génito-urinaires Ordre Trichomonadida Trichomonas vaginalis
*Classe des sporozoaires : Sont peu mobiles car ils ne possèdent pas d'appareil locomoteur,
leur déplacement se fait par flexion, glissement ou ondulation.
Vivent à l'intérieur des cellules de l'hôte.
-Famille Sarcocystiidae Toxoplasma gondii Toxoplasmose
-Famille Plamodiidae Plasmodium sp Paludisme
*Classe des ciliés : Se déplacent grâce à des cils vibratiles
Un seul pathogène occasionnellement rencontré chez l'homme: Balantidium coli
36
Famille des Hymenolepididae
Hymenolepsis nana
*Classe des Trématodes
Vers foliacés, non segmentés et pourvus d'un tube digestif.
L'œuf est operculé chez les douves et muni d'un éperon chez les schistosomes.
Ils sont :
- Soit hermaphrodites telles les douves agents des :
*Distomatoses intestinales dues à Fasciolopsis buski, Heterophyes heterophyes,
Capillaria philippinensis.
*Distomatoses hépato-biliaires dues à Fasciola hepatica, Fasciola gigantica,
Dicrocoelium dentriticum, Clonorchis sinensis, Opistorchis felineus.
*Distomatoses pulmonaires dues à Paragonimus sp.
- Soit à sexe séparés telles les schistosomes agents des bilharzioses :
*Schistosoma mansoni agent de la bilharziose intestinale
*Schistosoma haematobium agent de la bilharziose vésicale
*Schistosoma intercalatum agent de la bilharziose rectale
*Schistosoma japonicum agent de la bilharziose artério-veineuse
37
Du grec "arthron" qui signifie articulation et "podos" qui signifie pied.
Ce sont des animaux pluricellulaires dont le corps et les appendices sont formés de segments
articulés.
Ils sont soit des parasites externes soit jouent un rôle de vecteurs.
Ils se subdivisent en six classes dont deux ont un intérêt sur le plan pathologique et
épidémiologique : Les Arachnides et les Insectes
38
La puce de l'homme : Pulex irritans
La puce chique : Tunga penetrans
VII. TRAITEMENT
Les antiparasitaires
Le dépistage et le traitement des malades ont une importance épidémiologique capitale afin de
rendre les malades non contagieux et de réduire le réservoir humain.
Ce traitement doit s'intégrer dans un ensemble de mesures plus vastes: lutte anti-vectorielle, lutte
contre le péril fécal, éducation sanitaire, assainissement etc.…
39
Tænia saginata Téniase
Tænia solium Téniase
Hymenolepis sp Hyménolépiase
Echinococcus granulosus Hydatidose
Echinococcus multilocularis Échinococcose alvéolaire
1. 2. Némathelminthes
Classe des nématodes
ESPECES PARASITAIRES PARASITOSES
Ascaris lumbricoides Ascaridiose
Enterobius vermicularis Oxyurose
Ancylostoma duodenale Ankylostomiase
Strongyloides stercoralis Anguillulose
Trichinella spiralis Trichinose
Wuchereria bancrofti Wuchériose
Loa loa Loase
Onchocerca volvulus Onchocercose
Dracunculus medinensis Dracunculose
2. Ectoparasites
ESPECES PARASITAIRES PARASITOSES
Pediculus humanus capitis Poux
Pediculus humanus corporis
Phtirius pubis
Sarcoptes scabiei Gale
Ixodes ricinus Tiques
Ixodes scapularis
Rhipicephalus sanguineus
Thrombicula autumnalis Aoûtats
40
Cimex lectularius Punaises
Triatoma infestans
Ctenocephalides canis
Ctenocephalides felis
Tunga penetrans Puces
Plusieurs espèces Myiases
Limnatis nilotica Sangsues
• Ingestion d’un kyste mûr éclosion donnant 8 amoebules du type minuta qui se multiplient
par division binaire au contact de la muqueuse colique.
• Le retour du parasite à la forme minuta après 3 semaines signalant ainsi la fin de la crise
amibienne.
41
Figure 2 : Cycles d’Entamoeba histolytica
2. Enterobuis vermicularis
42
Figure 3 : Cycle de Enterobuis vermicularis
• Chez l’Homme (Hôte définitif), les vers adultes sot situés dans la dernière partie de
l’intestin grêle, le caecum et le colon ascendant.
• Après fécondation, les mâles meurent, les femelles migrent vers l’anus qu’elles traversent
la nuit pour pondre à la marge anale (environ 10 000 œufs/femelle pondus en 20 à 60
minutes).
• Les œufs pndus sur la marge anale sont embryonnés (Larve L1), en quelques heures à la
température du corps puis passent à l’étape L2 (vermiforme) puis L3 infestante.
• Auto infestation orale possible par ingestion d’œufs éliminés lors d’un prurit qui entraine
le grattage et donc les œufs sur les doigts et les ongles.
43
PARTIE III. BACTERIOLOGIE
Pr EKOUE NGO NKOT LAURETTE
(Charge horaire: CM 06 h, TD 02h30 h, TP 02h30, TPE 02h30)
OBJECTIF GENERAL
Ce cours a pour but de familiariser l'étudiant(e) avec la bactériologie générale.
OBJECTIFS SPECIFIQUES
À la fin du cours de Microbiologie Générale l'étudiant(e) devrait être capable de :
- Connaître et maîtriser les l'historique de la microbiologie ;
- Comprendre la morphologie et la structure de la cellule bactérienne ;
- Analyser les fonctions des différentes composantes des bactéries ;
- Connaitre les notions de nutrition bactérienne et leurs applications dans la culture des
bactéries.
1. DEFINITIONS
La bactériologie est l’étude des bactéries, de leur mode de vie, de leur alimentation, de leur
rapport avec le milieu dans lequel elles vivent ou avec les organismes qu’elles parasitent.
Les bactéries sont des micro-organismes unicellulaires, de petite taille. Ce sont des cellules
Procaryote c'est à dire des cellules qui ne possèdent qu'un seul chromosome et qui sont
dépourvues d’un noyau délimité par une membrane nucléaire.
44
Ces organismes sont caractérisés par l'existence d'une paroi rigide, qui contient un constituant
spécifique des bactéries, le peptidoglycane. Ils ne possèdent qu’un seul chromosome et sont
dépourvus de membrane nucléaire. Ils sont également dépourvus d’appareil mitotique, de
mitochondries, de réticulum endoplasmique et d’appareil de Golgi. L'ensemble des bactéries
forme le domaine des Eubactéries (Eubacteria).
Pour voir les bactéries, il faut d’abord les colorer puis les observer au microscope. La méthode la
plus utilisée pour colorer les bactéries est la coloration de Gram, introduite par le bactériologiste
danois du même nom. Les bactéries sont réparties en deux groupes principaux, selon leurs
caractéristiques de coloration de Gram : les Gram-négatives et les Gram-positives.
2.2.1 Dimensions
La taille est de l’ordre du micromètre (allant de 0,2 et 20 μm). Les dimensions des bactéries sont
variables. Les bactéries étant de l’ordre du micromètre sont visibles au microscope photonique
classique.
2.2.2 Forme
Les bactéries sont des organismes unicellulaires de formes variées. La forme des bactéries est un
critère permettant de les classer. Les principales formes sont : la forme sphérique ou coccoïde, la
forme en bâtonnet ou cylindrique et la forme spiralée ou hélicoïdale. Chacune de ces formes est
importante pour décrire la morphologie d’une espèce.
- Les bactéries en forme de petites sphères sont appelées des coques ou cocci.
- Les formes cylindriques ou bâtonnets. On en distingue deux principales : le bâtonnet droit ou
bacille (E. coli, bacille de Koch) et le bâtonnet incurvé en virgule ou vibrion (Vibrio cholerae).
- Les formes hélicoïdales (formes spiralée) sont des spirilles (Spiroplasma). Ces formes spiralées
se rencontrent chez les tréponèmes et les spirochètes.
45
Ces formes sont les plus caractéristiques, mais dans la nature d’autres formes existent : formes
pédonculées propres aux Caulobacter, les formes filamenteuses des bactéries ferrugineuses, les
formes mycéliennes chez les mycobactéries, les actinomycètes.
2.2.3 Groupements
Le groupement ou l’arrangement des bactéries va permettre de faciliter leur identification. Il existe
plusieurs modes d'arrangement cellulaire :
Les cocci, peuvent être isolés, se rassembler en paires (diplocoques : Neisseria gonorrhoeae), en
chaînettes (streptocoques : Streptococcus, Lactococcus), en grappes (staphylocoques), en tétrades,
en groupe de 8 (Sarcina) ou en grappe de raisins (Micrococcus, Staphylococcus).
Les bacilles sont souvent isolés mais retrouvés également en paires (Diplobacillus), en courte
chaîne (Streptobacillus, Lactobacillus), ou en palissade (Corynebacterium), en Y
(Bifidobacterium).
46
en violet et celui des bactéries Gram- en rose. La différence de couleur s’explique par une
différence structurelle au niveau de la paroi des bactéries. Les bactéries Gram + ont une paroi très
épaisse et une seule membrane. Les bactéries Gram- ont une paroi globalement plus fine et plus
fragile mais deux membranes lipidiques.
Dans les deux cas, le peptidoglycane est le composant essentiel de la paroi bactérienne. Ce
complexe est un polymère composé de chaînes linéaires de sucres aminés : la N-
acétylglucosamine (NAG) et l’acide N-acétylmuramique (NAM). Ces chaînes sont reliées entre
elles par de courtes chaînes peptidiques. Le peptidoglycane participe à la solidité de la paroi et
donc à la résistance de la bactérie aux changements environnementaux.
Chez les Gram+, le peptidoglycane est épais (20 à 80 nm) et situé à l’extérieur de l’unique
membrane plasmique. Chez les Gram-, il est plus fin (5 à 8 nm) et situé entre les deux membranes
internes et externes.
La membrane plasmique qui est unique chez les Gram+ et double chez les Gram- est composée
d’une bicouche lipidique, tout comme la membrane des eucaryotes.
L’espace situé entre les deux membranes des bactéries Gram- est appelé périplasme. Les deux
membranes sont appelées membranes interne et externe. Des protéines sont insérées sur les deux
membranes des Gram- et celles des Gram+. Ces protéines peuvent avoir des parties exposées vers
le cytoplasme, le périplasme et le milieu extérieur. Elles servent à la communication entre les
bactéries, la détection des conditions environnementales, la prise de nutriments dans le milieu, le
déplacement ou encore la sécrétion des protéines vers l’extérieur. Les bactéries à Gram- possèdent
un pouvoir pathogène plus élevé grâce à la couche externe de lipides toxiques (LPS), qui sont
libérés sous forme d’endotoxines lorsque la cellule meurt. Ces bactéries sont également plus
résistantes, elles sont protégées contre la phagocytose à cause de la couche de lipide chargé
négativement.
La paroi des Gram + est faite de grande quantité d'acides teichoïques (50 % du poids sec de la
paroi). Il y a des acides lipoteichoiques. Ces acides ont pour fonction de maintenir les parois
(fonctions structurales) et sont spécifiques des Gram +. On note la présence possible des protéines
et des polysaccharides.
Les bactéries Gram- possèdent une grande molécule externe appelée lipopolysaccharide (LPS).
Celle-ci est composée d’une partie lipidique qui permet son ancrage dans la membrane externe et
d’une longue chaine de sucres. Cette molécule participe à la stabilisation de la paroi des Gram-.
47
[Link] Rôle de la paroi
- La paroi confère à la cellule sa forme. Si on enlève la paroi, on obtient des cellules sphériques
appelées protoplastes quand il s’agit des bactéries à gram positif, ou des cellules globuleuses
appelées sphéroplastes pour les bactéries à Gram négatif. De nombreux enzymes peuvent détruire
la paroi, ex le lysozyme qui rompt les liaisons β1-4 du peptidoglycane. Beaucoup d’antibiotiques
inhibent sa synthèse. C’est le cas des pénicillines.
- La paroi confère à la bactérie sa forme et sa rigidité grâce à la présence d’un composé
spécifiquement bactérien, le peptidoglycane ou muréine ou mucopeptide ; elle constitue le
squelette externe de la bactérie.
- Elle protège la bactérie. Elle forme une barrière osmotique qui maintient une pression osmotique
intracellulaire Elle généralement très élevée (5 à 25 atmosphères) exercée par la membrane
plasmique.
- Elle est également un passage obligé pour les échanges avec le milieu extérieur.
- Elle joue un rôle déterminant dans la spécificité antigénique des bactéries.
- Elle intervient dans le transport de certaines petites substances.
48
2.3.2 Membrane cytoplasmique
Cette membrane ressemble beaucoup à celle des eucaryotes. Elle a une épaisseur de 7,5 nm. Elle
est composée :
- d’une bicouche de phospholipides, mais ne possède toutefois pas de stérol ;
- des protéines : les protéines périphériques et les protéines intrinsèques (transmembranaires)
- des traces de glucides : les glucides sont quantitativement des constituants mineurs et souvent
associés aux lipides (glycolipides) ou aux protéines (glycoprotéines).
2.3.3 Cytoplasme
Le cytoplasme se trouve entre la membrane plasmique et le nucléoïde. Il contient :
- les ribosomes qui interviennent dans la synthèse des protéines.
49
- les inclusions cytoplasmiques (substances de réserve): Différentes substances chimiques peuvent
s’accumuler dans le cytoplasme pour former des granules appelés inclusions. Ces substances sont
variables suivant les genres de bactéries. C’est généralement du glycogène, de l’amidon, des
lipides parfois chez certaines bactéries du soufre, du fer ou des phosphates, etc.
- Vacuoles à gaz : elles sont rencontrées chez les cyanobactéries et les bactéries
photosynthétiques. Elles permettent aux bactéries de flotter et de remonter à différentes
profondeurs pour capter le maximum de lumière, d’O2 et de nourriture.
- Matériel nucléaire : le matériel génétique de la bactérie est constitué d’un chromosome unique,
circulaire constitué d’un filament d’ADN bicaténaire en suspension dans le cytoplasme. Le
chromosome bactérien est le support des caractères héréditaires, de l’information génétique.
- Plasmides : Les plasmides sont des molécules d’ADN double brin, extra chromosomiques,
circulaires, contenant des gènes supplémentaires et portant, comme le chromosome bactérien, des
informations génétiques. Ils peuvent soit s’intégrer dans le chromosome (épisomes), soit exister
séparément. Ils sont capables de réplication autonome dans le cytoplasme bactérien. Les plasmides
confèrent à la bactérie qui les possède des caractéristiques spécifiques. On distingue :
- les plasmides de résistance, également appelés facteurs R, qui portent des gènes codant pour
des résistances aux antibiotiques, aux antiseptiques, aux bactriophages et aux métaux lourds ;
- les plasmides métaboliques qui portent des gènes permettant l'utilisation de certains
nutriments ;
- les plasmides de virulence qui portent des gènes codant des facteurs de virulence, ayant un rôle
dans le pouvoir pathogène des bactéries ;
- les plasmides de conjugaison, également appelés facteurs F, qui portent des gènes codants pour
les constituants des pili sexuels.
50
2.3.4 Eléments inconstants
[Link] Capsule
La capsule est une structure externe non constante qui entoure la paroi, sans structure visible au
microscope électronique. Elle est constituée de polysaccharides, parfois de protéines. La capsule
est difficile à observer au microscope optique par les méthodes de coloration usuelles. Pour la
mettre en évidence, la coloration négative est utilisée. La capsule forme alors un halo clair autour
de la bactérie. L’encre de Chine est en fait un colorant négatif, c’est-à-dire qu’il ne colore pas la
capsule, mais les bactéries en possédant apparaissent entourées d’un halo lumineux. La capsule
joue un rôle important dans la défense des bactéries. Elle protège la bactérie de la phagocytose et
la protège contre les agents physiques, chimiques et contre la dessiccation. Elle est antigénique.
[Link] Flagelles
Les flagelles sont des structures rigides, ondulées qui naissent de la membrane cytoplasmique. Ils
sont constitués entièrement de protéines appelées flagellines. Les flagelles assurent la mobilité de
la bactérie. Les flagelles sont extrêmement fins, invisibles au microscope optique sur des cellules
vivantes. La disposition des flagelles peut être différente selon les espèces, ainsi, on distingue chez
les bactéries deux types principaux d’insertion des flagelles :
- Insertion polaire : le ou les flagelles sont insérés à une ou aux deux extrémités de la cellule.
- bactérie est monotriche si l’on ne rencontre qu’un seul flagelle à une de ses extrémités ;
- bactérie amphitriche lorsqu’une touffe de flagelles émerge à chaque pôle ;
- bactérie lophotriche lorsqu’une touffe émerge à un pôle.
- Insertion péritriche : la bactérie porte de nombreux cils insérés sur tout le pourtour de la cellule.
La mobilité permet aux bactéries d’envahir les tissus de l’hôte ce qui permet de considérer les
flagelles comme des facteurs de virulence. L’autre rôle est du chimiotactisme permet à la bactérie
de sentir le milieu environnemental (attractif ou répulsif) et provoque une réponse par un
changement de rotation des flagelles.
51
dans le pouvoir pathogène de la bactérie en permettant une bonne adhésion des bactéries aux
muqueuses. Ils constituent donc un facteur de virulence pour les bactéries pathogènes ;
- les pili sexuels : ils sont plus longs (10 µm environ) et se terminent par un renflement. Bien que
composés également de piline, il y en a généralement qu’un par cellule. Ils sont codés par les
gènes présents sur certains plasmides (plasmides conjugatifs). Les pili sexuels sont produits par les
bactéries porteuses de ces plasmides (bactéries donneuses) et servent à entrer en contact avec
d’autres bactéries (bactéries receveuses). Ils ont un rôle dans la conjugaison bactérienne. Les
bactéries peuvent échanger des gènes de résistance aux antibiotiques et échanger le facteur de
virulence. Les bactéries capables de produire des pili sexuels grâce à la présence du facteur F sont
dites bactéries « mâles » ou « F+ », à l'opposé des autres qui sont dites « femelles » ou « F ».
Les différents modes de transfert génétique sont les suivants :
- la conjugaison chez les bactéries est une sorte de mécanisme sexuel primitif. Elle consiste en un
transfert unidirectionnel de matériel génétique d’une cellule (donneuse) à une autre (receveuse) ;
- la conjugaison qui est le transfert d'un plasmide conjugatif (possède des gènes qui assurent leur
transfert par conjugaison) d'une bactérie donneuse à une bactérie receveuse grâce à un pilus
sexuel ;
- la mobilisation est le transfert d'un plasmide non conjugatif (sont incapables d’effectuer leur
propre transfert) d'une bactérie donneuse à une bactérie receveuse en se mobilisant sur un
plasmide conjugatif. Le transfert est effectué via un pilus sexuel ;
- la transduction est l'introduction d'un matériel génétique à l'intérieur d'une bactérie par
l’intermédiaire d’un bactériophage ;
- la transformation qui est le transfert de gènes dans la cellule par absorption d’ADN nu.
52
La spore ne sert qu’à assurer la survie de la bactérie jusqu’à ce que les conditions s’améliorent. A
ce moment, la spore va se gorger d’eau, reprendre son métabolisme et devenir un bacille, donc
retourner à la forme végétative. Le cycle sporal caractérise ces transferts où alternent les phases
végétatives de croissance, le processus de sporulation et la germination.
La situation des endospores dans les cellules ainsi que leur grosseur ne sont pas les mêmes pour
toutes les espèces. Certaines sont centrales : formées au milieu de la cellule. D’autres sont
terminales : formées à l’extrémité de la cellule et d’autres sont subterminales : formées près de
l’extrémité de la cellule.
Le diamètre de la spore peut être plus grand ou plus petit que celui de la cellule végétative. Les
spores peuvent avoir des formes différentes : sphériques, elliptiques ou ovoïdes. La présence
d’une endospore, sa situation dans la cellule, sa grosseur et sa forme sont utiles pour identifier et
caractériser les bactéries.
53
La spore résiste en général à des températures de 70-80°C pendant 10 minutes, parfois plus. Cette
propriété est due à la présence de l’acide dipicholinique et à la déshydratation de la spore.
- Résistance aux agents physiques et chimiques
La spore résiste aux rayons U.V et rayons X, aux désinfectants aux attaques des acides, des bases
et aux antibiotiques.
- Synthèse d’antibiotiques
Certaines bactéries synthétisent des antibiotiques au début de la phase de sporulation. Exemple :
Bacillus licheniformis synthétise ainsi la Bacitracine ; Bacillus polymyxa la polymyxine.
3. NUTRITION BACTERIENNE
Pour étudier les microorganismes, il faut les cultiver en culture pure et pour cela il faut connaître
leurs exigences nutritionnelles ainsi que les conditions physiques pH, T °C, pression osmotique.
Pour qu’une bactérie puisse vivre et se reproduire elle doit trouver dans son environnement de
quoi satisfaire ses besoins nutritifs. La nutrition bactérienne est l’analyse des besoins élémentaires,
énergétiques et spécifiques nécessaires au fonctionnement et à la croissance de la bactérie, ainsi
que des facteurs physico-chimiques susceptibles de les influencer.
3.1 Besoins élémentaires des bactéries
3.1.1 Eau
L'eau représente 80 à 90 % du poids cellulaire. Elle joue un rôle fondamental en solubilisant les
nutriments, en assurant leur transport et en assurant les réactions d'hydrolyse. La quantité d’eau
disponible peut être chiffrée. On utilise généralement l’activité de l’eau (Aw) comme moyen
d’expression quantitative de l’eau disponible.
L'activité de l'eau (Aw) correspond à la disponibilité en eau des microorganismes pour participer à
des réactions chimiques : c’est le rapport de la pression partielle en eau d’un milieu et celle de
l’eau pure. L’activité de l’eau est comprise entre 0 et 1. La plupart des bactéries se multiplient bien
quand l’aw est de 0.98.
54
- les oligo-éléments comme le manganèse, le zinc, le cobalt, le molybdate, le nikel et le cuivre,
sont nécessaires en très faibles quantités.
56
phase de latence ; 2. une phase d’accélération ; 3. une phase exponentielle ; 4. une phase de
ralentissement ; 5. une phase stationnaire ; 6. une phase de déclin.
57
l’accumulation des déchets. Le temps de génération s’allonge. Il y a un début d’autolyse des
bactéries.
58
4.5 Facteurs influençant la croissance bactérienne
Plusieurs facteurs environnementaux vont conditionner la croissance bactérienne.
4.5.1 Facteurs physiques
Ils interviennent de façon primordiale dans l’obtention d’une culture optimale. En effet, les
nutriments doivent être apportés à la bactérie dans les conditions d’environnement qui lui
conviennent, sinon, ils peuvent l’inhiber.
[Link] Température
Selon le comportement de la bactérie vis à vis de la température, on distingue :
- les bactéries hyperthermophiles peuvent croître à des températures > à 80°C. Ex. : Archaea.
- les bactéries thermophiles poussent de 45 à 70 °C, avec un optimum à 50 °C (Clostridium).
- les bactéries mésophiles dont la croissance est possible de 20 °C à 45 °C (optimum aux alentours
de 37 et 40 °C). Ex. : Staphylococcus.
- les bactéries psychrophiles poussant de 4 à 20 °C (optimum : 10 °C). Ex. : Listeria ;
- les bactéries cryrophiles; poussant de -5 à +3 °C (optimum : 0 °C). Ex. : Listeria ;
- les bactéries psychrotropes se développant à des températures de -5 à 35°C (optimum : 20-
25°C), Ex. : Pseudomonas.
Les bactéries d’intérêt médical sont mésophiles. Les bactéries psychrophiles sont impliquées dans
la contamination des produits laitiers.
3.4 pH
59
En fonction du pH, on distingue :
- les neutrophiles ayant un pH optimal de croissance aux alentours de 7. Bacillus subtilis, E. coli.
- les alcalinophiles (basophiles) ayant un pH optimal de croissance à des pH alcalins (>8).
- Les acidophiles ayant un pH optimal de croissance à des pH acides. Ex. : Lactobacillus.
4. AGENTS ANTIMICROBIENS
4.1 Définitions
Les agents antimicrobiens désignent toutes substances ou procédés qui inhibent ou tuent les
micro-organismes. Le suffixe -cide est attribué aux agents qui tuent (ex : bactéricides, fongicides,
et virucides), tandis que le suffixe -statique est accordé aux gents qui inhibent la croissance (ex:
bactériostatiques et fongistatiques...etc.).
Stérilisation : Opération au résultat durable visant à détruire tous micro-organismes (cellules
vivantes, spores viables et entités acellulaires). La stérilisation peut se faire :
- par la chaleur sèche par chauffage direct des objets (anse, pince) dans la flamme du bec Bunsen
après trois ou quatre passages lents, ou en utilisant des stérilisateurs à air chaud (fours Pasteur) :
Ils sont utilisés pour la verrerie, porcelaine et instruments métalliques Le matériel est emballé dans
du papier aluminium, les récipients et tubes à col doivent être bouchés avec du coton. Les spores
sont détruites en chaleur sèche par un chauffage de : 4 heures à 140 °C ; 2 heures 30 à 160°C ; 30
min à 180°C.
- par la chaleur humide : l'appareil utilisé est l'autoclave à 120°C pendant 20 min. La température
de 120°C est très supérieure à la température normale d'ébullition de l'eau, en chauffant en
surpression, c'est à dire en vase clos. Toutes les bactéries y compris les spores sont tuées. Cette
technique est utilisée pour les milieux de culture, matériel en caoutchouc, la verrerie, les
instruments de prélèvement et la stérilisation du matériel après son utilisation.
60
Désinfection : Opération au résultat momentané visant à détruire ou inhiber les micro-organismes
et/ou d'inhiber l'activité des virus présents sur une surface inerte.
Antisepsie : Opération au résultat momentané visant à détruire ou inhiber les micro-organismes
et/ou d'inhiber l'activité des virus présents sur des tissus vivants, selon leur seuil de tolérance.
Asepsie : Ensemble des mesures empêchant tout apport exogène de micro-organismes. La
stérilisation et la désinfection sont des moyens pour réaliser l’asepsie.
4.2 Agents physiques
Ils existent plusieurs agents physiques qui permettent l'élimination efficace des micro-organismes.
Les agents couramment utilisés dans les laboratoires, les industries et centres de santé sont : la
température, les radiations, la pression, la centrifugation, la filtration.
4.2.1 Température
Deux types de température sont utilisés pour la stérilisation des matériaux, produits et milieux de
culture :
- Le premier type est la chaleur sèche qui nécessite des températures plus élevées et des temps
d’exposition plus longs (ex four Pasteur : 180° pendant 30 mn utilisé pour la stérilisation de la
verrerie).
- Le deuxième type est la chaleur humide qui tue facilement les différents types de micro-
organismes (virus, bactéries, champignons (ex : l'autoclave : 120° pendant 15 à 20 mn).
4.2.2 Radiations
C'est la lumière U.V qui est le plus souvent utilisée (lampes germicides) pour la stérilisation des
surfaces et de l'air ambiant, dans des locaux ou des hottes, servant aux manipulations en
atmosphère stérile (hottes à flux laminaire). L'irradiation précède et suit la manipulation.
4.2.3 Pression
Les ultrapressions sont capables de détruire les microorganismes. Le traitement d’aliments à 4 000
bars permet de réduire sensiblement leur teneur en microorganismes. L’augmentation de la
61
pression osmotique est un procédé ancestral pour la conservation des aliments (ex : utilisation des
concentrations élevée en NaCl ou en sucres).
4.2.4 Centrifugation
Dans un milieu liquide, les micro-organismes sont éliminés par centrifugation et le surnagent
contenant les métabolites d'intérêt est récupéré.
4.2.5 Filtration
Pour les substances notamment celles qui sont thermosensibles, la filtration est une excellente
méthode pour réduire la population microbienne. La filtration est une technique qui consiste à
faire passer un liquide à travers un filtre ; les microorganismes sont retenus par le filtre.
4.3.2 Désinfectants
Les désinfectants sont des substances chimiques utilisés sur des supports inertes : sol, objets
inanimés, matériel plastique permettant d’éliminer ou de tuer les microorganismes portés par les
milieux inertes contaminés. Ils peuvent être sous forme : vapeur (formol, oxyde d’éthylène) ;
liquide (sulfate de cuivre, de fer, eau de Javel, permanganate de K) ; solide (chaux vive).
4.3.3 Antibiotiques
Ce sont des substances d'origine naturelle ou obtenues par synthèse chimique. Ils agissent à des
concentrations faibles (ordre du mg) et sont spécifiques. Les antibiotiques bactériostatiques qui
stoppent la multiplication des bactéries sans les détruire et les antibiotiques bactéricides qui tuent
les bactéries. Les antibiotiques sont fongicides ou virucides lorsqu’ils détruisent les champignons
ou les virus dans des conditions d’emploi définies.
62
Les bactéries influencent l'évolution des grands cycles biologiques tels que le cycle du carbone, le
cycle de l'azote et le cycle du soufre dans les sols, les océans et les eaux douces. Elles jouent un rôle
dans la transformation de la matière, le nettoyage de l’environnement par l’assimilation des déchets.
63
FICHE DE TD
Exercice 1
1. Définitions
Définir les termes et expressions suivants : microbiologie, pasteurisation, tyndallisation,
capsule, lophotriche, culture pure, temps de génération, diauxie, autoclave, temps de génération,
milieu sélectif, psychrophile, mucopeptide, bactérie, bactérie Gram-, bactérie Gram+,
chimiolithotrophe, chimioorganotrophe, phototrophe, endospore, spore, postulat, facteur de
croissance, paratrophe, syntrophie, activité de l’eau.
2. Enumérer quelques découvertes et invention ayant marquées l’histoire de la microbiologie
3. Enoncez les postulats de Koch
4. Illustrez les principales formes et arrangements rencontrés chez les bactéries
5. Quels sont les principaux éléments constitutifs d’une cellule bactérienne ?
6. Composition chimique des parois bactérienne
7. Enumérez les rôles des éléments constants retrouvés chez les bactéries
8. Variantes de plasmides et caractéristiques respectives
9. Situation des endospores dans la cellule bactérienne
10. Classification des bactéries en fonction du type trophique
11. Courbe de croissance bactérienne en milieu non renouvelé et description des phases
12. Schéma du cycle sporal et de la spore.
13. Propriétés des spores.
14. Typologie et rôles des plasmides
15. Schéma annoté d’une bactérie typique
Exercice 2 :
I. QCM
1. Parmi ces propositions, une seule est fausse, laquelle ?
a. Le peptidoglycane est le principal constituant de la paroi des bactéries Gram (+)
b. La capsule est un élément inconstant de la bactérie
c. L’ADN bactérien est circulaire et monocaténaire
d. Les plasmides sont localisés dans le cytoplasme bactérien
e. La piline et l’adhésine sont les constituants essentiels des pili communs
2. Quel(s) est (sont) l’(les) élément (s) constant (s) chez les bactéries ?
a. La paroi
64
b. Les fimbriae
c. Le flagelle
d. Le peptidoglycane
e. La membrane nucléaire
f. Le glycocalyx
3. Répondre par vrai ou faux en justifiant
a. Les acides teichoïques sont les constituant de la paroi des Gram (-)
b. L’appareil photosynthétique est essentiel chez les bactéries
c. Au moins un plasmide est présent chez toutes les bactéries
d. La pasteurisation ne permet pas de détruire les spores bactériennes
e. Les mycoplasmes sont des bactéries dépourvues de membrane cytoplasmique
f. Les chromatophores sont des constituants de certaines bactéries ; ils sont responsables
de la photosynthèse
g. Une bactérie dépourvue de sa paroi devient un protoplaste
h. L’espace périplasmique est le lieu de localisation du mucopeptide
4. Qui suis-je ?
a. Une enzyme entrainant la lyse de la paroi bactérienne
b. Un constituant de la paroi des bactéries constitué de sucres aminés
c. Un appareil permettant d’observer l’ultrastructure des bactéries
d. Un élément des mycobactéries les rendant insensible à la coloration de Gram.
e. Invagination de la membrane plasmique en forme de vésicule
f. Plasmides intégrés dans le génome bactérien
5. Vrai ou faux ?
a. Les bactéries sont des êtres ubiquistes
b. Chez les bactéries Gram- le périplasme est situé entre deux membranes
c. BAAR signifie Bacille Acido Alcoolo Réel
d. Les pili ne permettent que la conjugaison bactérienne
e. Tous les plasmides portent des gènes de virulence
6. Préciser les termes exacts correspondant aux définitions suivantes
a) Bactérie qui exige la présence de vitamines pour se développer
b) Transfert d’une culture pure sur un milieu neuf
c) Disponibilité de l’eau dans un produit
d) Phénomène observé quand deux sources particulières de carbones sont présentes dans le
milieu de culture.
65
e) Technique permettant d’évaluer la concentration cellulaire au moyen d’un
spectrophotomètre.
7. Quelles sont les techniques de base de la microbiologie
8. Principales caractéristiques des bactéries
9. Donner trois rôles essentiels de la paroi
10. La paroi est l’élément essentiel de classification des bactéries en deux groupes. Lesquels ?
expliquer la différence entre ces deux groupes permettant leur classification.
11. Quels sont les types trophiques possibles pour une bactérie ?
12. Citer et définir les paramètres cinétiques de la croissance
13. Citer trois paramètres ayant une influence sur la croissance bactérienne
14. Préciser le mode de reproduction des bactéries
15. La courbe de croissance d’une bactérie en milieu non renouvelé, montre plusieurs phases
distinctes. Citer et expliquer ces phases du comportement d’une bactérie en culture.
16. On étudie les besoins nutritifs d’une culture pure de Salmonella sur deux milieux (M1 et M2)
et avec différentes conditions de culture. On obtient après 48h d’incubation les résultats
suivants :
Milieux M1 M1 M1 M2 M2 M2
Température d’incubation (°C) 4 37 60 4 37 60
Présence d’une culture - - - - + -
M1 = milieu minimum contenant uniquement des substances minérales (incubation en présence de
dioxyde de carbone)
M2 = M1 + glucose à 1g/l.
a) Quel est le rôle du glucose dans M2 ?
b) Donner les types trophiques pouvant se développer sur M1 et M2
c) Analyser les résultats de cette expérience
17. La même souche de Salmonella est ensuite mise en culture sur le milieu M2 avec additifs à 37
°C. on obtient après 48h d’incubation les résultats suivants
66
18. On observe le comportement des bactéries dans divers milieux en présence ou pas d’O2
Exercice 3 :
Afin de connaitre le mode respiratoire de 5 bactéries distinctes, Vous les avez ensemencés dans 5
tubes à essai contenant le même milieu de culture. Quelle conclusion pouvez-vous tirer des
résultats ci-dessous ?
A B C D E
Exercice 4 :
Un étudiant a préparé deux milieux de culture pour l’isolement des bactéries, le premier milieu
contient de l’hydrolysat de caséine et de la vitamine A et le second du glucose et des minéraux. Il
se pose maintenant la question de la méthode de stérilisation à utiliser. Quelle est selon vous la
méthode indiquée ?
Exercice 5 :
Les étudiants de Biologie de la Faculté des Sciences ont réalisé des expériences dont les résultats
sont présentés dans le tableau ci-dessous :
Nature du besoin Bactérie A Bactérie B Bactérie C
CO2 + minéraux - - -
Glucose + minéraux - +++ -
Glucose + minéraux + vitamines - +++ -
CO2 + minéraux + vitamines +++ - -
Glucose + minéraux + toxines produites par A - - +++
Glucose + minéraux + vitamines + NaCl (10%) - ++ -
Glucose + minéraux + vitamines + NaCl (80%) - - -
+ : faible trouble - : aucun trouble
67
1) Indiquez en justifiant le type trophique de chacune de ces bactéries.
2) Comment expliquer la croissance de la bactérie C ?
3) Quel serait le rôle du NaCl ?
4) Sachant que la bactérie B entraine la putréfaction des aliments, au regard de ce tableau
quelle technique peut-on utiliser pour conserver nos aliments plus longtemps ?
Exercice 6 :
On place une bactérie dans un milieu de culture approprié, au bout de 30mn, un compteur de
cellules nous indique la présence de 8 cellules bactériennes dans le milieu.
Après avoir défini les expressions temps de génération et taux de croissance, donnez leurs valeurs
dans le cadre de cet exercice.
68
PARTIE IV. MYCOLOGIE
Mme. EBELLE ETAME Rebecca Madeleine
(Charge horaire: CM 06 h, TD 02h30 h, TP 02h30, TPE 02h30)
Objectif Général
Donner aux étudiants la capacité de connaître les champignons notamment, les champignons
microscopiques, leurs structures, leur mode de vie, leur mode de reproduction et de nutrition, leur
intérêt.
OBJECTIFS SPECIFIQUES :
A la fin de ce cours, l’étudiant devra :
✓ Définir la Mycologie
✓ Connaître les différents types de Mycètes
✓ Connaitre les différentes cellules et organes de reproduction des champignons
✓ Connaitre la Classification et l’intérêt des champignons
INTRODUCTION
Les champignons ou mycophytes sont des thallophytes (groupe polyphylétique d'organismes non
mobiles décrites comme « plantes inférieures » non vascularisées, sans feuille, ni tige, ni racine,
possédant un corps indifférencié, ou un appareil végétatif nommé : thalle), qui inclut les
champignons (ou mycètes), les algues, les lichens, et parfois les mousses et hépatiques à thalles, et
de temps en temps les bactéries (notamment les cyanobactéries considérées comme des algues
bleues). Les individus de cette famille sont parfois mentionnés comme des « plantes thalloïdes »
qui se distinguent des algues par l’absence de chlorophylle, et même de toute ébauche de plaste.
Ce sont des hétérotrophes c'est-à-dire être vivants qui doivent pour vivre consommer des
molécules organiques déjà élaborées.
Leurs cellules sont entourées de parois qui ne sont pas
constituées de cellulose comme chez les végétaux, mais de chitine (polymère d’un dérivé aminé de
glucose, constituant également l’exosquelette des insectes).
Les champignons se distinguent des plantes et des algues par l’absence de chloroplastes et des
animaux par la présence de parois cellulaire.
Ces organismes nécessitent beaucoup d’eau pour
accomplir leur cycle biologique et ils ne vivent donc que sur des milieux terrestres très humides ou
en parasitant d’autres êtres vivants.
69
Les premiers champignons seraient apparus au précambrien, il y a 600 millions d’années.
I. MORPHOLOGIE
L’organisation cellulaire des champignons est appelée le thalle. Chez les champignons
microscopiques, le thalle peut être :
➢ Unicellulaire dans ce cas ces champignons sont appelés levures,
➢ Filamenteux ce sont les moisissures.
Certaines levures sont toutefois capables de former des structures filamenteuses
(pseudomycélium) dans certaines conditions (figure 1). Ex : Levure de bière (Saccharomyces
cerevisiae).
Les levures ont une taille généralement comprise entre 10 et 50 μm. Leur forme peut être
sphérique, ovoïde, allongée, cylindrique... Leur thalle est dit lévuriforme.
Les moisissures quant à elles sont pluricellulaires et leurs filaments, plus ou moins ramifiés, sont
appelés hyphes. L’ensemble des hyphes constituent le mycélium.
En fonction du groupe de champignon filamenteux, le thalle peut être cloisonné ou pas. Ainsi :
➢ Chez les Phycomycètes trichomycètes, et zygomycètes, les cellules ne sont pas séparées
par des cloisons transversales et dans ce cas le thalle est dit coenocytique (ou «
siphonné ») ; ces champignons sont appelés siphomycètes
➢ Chez les ascomycètes et basidiomycètes, le thalle est cloisonné (ou « septé »). Dans ce
cas, des perforations assurent la communication entre les cellules (figure 2). Ces
champignons sont appelés Septomycètes
70
Figure 2 : Les hyphes
Le thalle de la très grande majorité des espèces, est constitué par l’enchevêtrement de nombreux
filaments très fins et ramifiés forme un mycélium.
Le mycélium peut être continu. On l’appelle
siphon et contient de très nombreux noyaux. Sa structure est plurinucléée ou cénocytique. Les
champignons qui possèdent des siphons sont des siphomycètes (Trichomycètes, phycomycètes et
zygomycètes).
Le mycélium peut être cloisonné, on l’appelle hyphes qui sont constitués de
cellules ou d’articles plurinucléés. Les cloisons transverses appelées septums sont percées par des
pores permettant les échanges. Les champignons qui possèdent des hyphes sont des Septomycètes
(ascomycètes et basidiomycètes). Le mycélium peut être dissocié, Il se morcelle : cas des
champignons à thalle unicellulaires comme les levures Ex : Levure de bière (Saccharomyces
cerevisiae).
71
Figure 3 : structure de la membrane des levures
72
II MODE DE VIE HETEROTROPHE DES CHAMPIGNONS
Les champignons sont des hétérotrophes qui mènent plusieurs modes de vie :
➢ Saprophytes : c’est à dire se nourrissent de matières organiques mortes (les arbres morts, les
débris végétaux, les cadavres d’animaux et les excréments). Ce sont donc des détritivores qui
dégradent toutes sortes de substrats et jouent un rôle essentiel dans la nature, notamment dans
l’élaboration de l’humus et des sols. Ex : Mucor du pain, Penicillium que l’on retrouve dans
les veinures d’un fromage et qui apparaissent en bleu ou sous forme de croûte blanchâtre sur
le camembert.
➢ Parasites : S’accroissent aux dépens d’autres cellules vivantes. Ils sont pathogènes et peuvent
causer des dégâts considérables notamment :
▪ Aux plantes cultivées. Ex : le Mildiou de la vigne (Plasmopora viticola : Phycomycètes),
la Hernie de chou au niveau du collet (excroissance) Mixomycètes.
▪ A l’homme chez qui ils causent diverses affections mycosiques telles que : teignes,
muguet, mycétomes.
▪ Symbiotiques (Lichens) : dans ce mode de vie il y a établissement avec d’autres êtres
vivants d’un équilibre à bénéfices réciproques. Ex : Lichens : ils sont les premiers à avoir
colonisés le milieu terrestre. C’est une association permanente et stable établie entre un
champignon (septomycètes) et une algue (cyanobactérie ou algue verte unicellulaire «
chlorelle »). Les champignons qui menent ce mode de vie sont parfois des bio-indicateurs
de la pollution atmosphérique.
73
microscope électronique à balayage. La localisation du bourgeonnement varie selon les
espèces. Elle peut être polaire, latéral ;
➢ La fission : c’est une division qui aboutit à deux cellules identique (Figure 5)
Figure 5 : Illustration de la fission binaire et du bourgeonnement chez les levures (Abedon, 1997)
74
Figure 6 : Illustration des différentes étapes de la fission et de la sporulation chez
Saccharomyces paradoxus (Solomon, 2007)
75
Plasmogamie. Cette situation crée un nouveau stade cellulaire qui diffère des cellules normales
haploïdes ou diploïde car au sein d’une même cellule coexistent deux noyaux dont l’un mâle et
l’autre femelle, dans le cytoplasme. La cellule résultante est appelée dicaryon et cette étape est
qualifiée de dicaryotiques.
La phase caryogamie va correspondre à la fusion des deux noyaux qui va donner un zygote. Ce
zygote peut se diviser par une méiose pour produire des spores ou il peut se diviser par mitose
pour produire un nouvel individu (Figure 7).
Il faut noter que chez les champignons inferieures, la caryogamie survient immédiatement après la
plasmogamie.
76
IV. CLASSIFICATION DES CHAMPIGNONS
La classification des champignons selon Alexopoulos est généralement basée sur les
caractéristiques de leurs structures de reproduction qui permettent de distinguer quatre classes de
champignons :
IV.1. Zygomycètes
Les champignons de ce groupe ont la particularité de croître rapidement. Ils possèdent des cellules
non mobiles et des hyphes non septés. Les zygomycètes peuvent se reproduire sexuellement et
asexuellement. La reproduction sexuée aboutit à la production de zygospores spores immobiles à
parois épaisses. La reproduction asexuée aboutit quant à elle à des spores (chlamydoconidies,
sporangiospores) contenues dans un sporange issu de sporangiophores simples ou branchés. Le
Rhizoporus stolonifer est une espèce courante qui appartient à ce groupe.
IV.2. Hyphomycètes
Tous les champignons connus de ce groupe se reproduisent de façon asexuée par des conidies. Les
hyphes sont septés et présentent des pores simples. Cette classe contient la majorité des
champignons d'importance médicale tels que les dermatophytes.
IV.3. Ascomycètes
Les ascomycètes possèdent des hyphes septés présentant de simples pores qui permettent une
migration cytoplasmique et nucléaire. La reproduction sexuée aboutit à la formation d'ascospores
endogènes dans un ascus, contrairement à la reproduction asexuée qui aboutit à des conidies. On
retrouve dans ce groupe des champignons tels que Pneumocystis jirovecii
IV.4. Basidiomycètes
Les basidiomycètes possèdent des hyphes septés à pores complexes appelés dolipores, permettant
une migration cytoplasmique. Ils produisent sexuellement des spores exogènes appelées
basidiospores. On retrouve dans ce groupe des champignons tels que Ustilago maydis, les espèces
commensales de l'Homme du genre Malassezia et le pathogène opportuniste de l'Homme
Cryptococcus neoformans.
77
V. IMPORTANCE DES CHAMPIGNONS
Les champignons sont d'un grand intérêt pour l'homme dans plusieurs domaines d'activité :
78
maladies graves. L'aspergillose pulmonaire par exemple, est une maladie de l'appareil respiratoire,
causée par inhalation des spores de moisissures du genre Aspergillus.
Plusieurs champignons produisent des composés biologiquement actifs, parmi lesquels des
mycotoxines. A titre indicatif, les espèces d'Aspergillus, notamment Aspergillus favus, produisent
des aflatoxines, toxines du foie qui croissent dans ou sur les graines d'arachides. La consommation
de ces graines contaminées conduit à une aspergillose hépatique récurrente dans le tiers-monde.
Certains champignons peuvent causer des maladies graves voir fatales si elles ne sont pas traitées.
Les levures du genre Candida, sont responsables du muguet chez les nouveaux nés caractérisé par
un dépôt blanchâtre sur la langue.
Les champignons s'attaquent également aux plantes et constituent un obstacle considérable pour
l'agriculture. Parmi ces champignons phytopathogènes, on peut citer Phytophthora infestans,
responsable du mildou des solanacées.
79