Pr. M. MAMOU Dr. H.
BEN SI SAID TD N°2 S2 (corrigé) Spectrophotométrie UV-Visible (Suite)
Département de Pharmacie - Troisième année
Corrigé DE TD
Spectrophotométrie UV-Visible (Suite) (Corrigé type)
Document : CTD02 - 2S N° de série : Corrigé de TD N°2 (SEMESTRE 2)
Exercice N° 01
Définition de l’Absorbance spécifique : Absorbance spécifique d’une substance donnée est l’absorbance de
cette solution d’une concentration égale à 1g/100 ml dans une cuve de 1 cm d’épaisseur.
Formule :
Selon la loi de BEER-LAMBERT
𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝑨
𝑨 = 𝑨𝟏𝒄𝒎 × 𝑪 × 𝒍 => 𝑨𝟏𝒄𝒎 = Avec :
𝑪×𝒍
A : absorbance de la solution
1𝑝𝑜𝑢𝑟 𝑐𝑒𝑛𝑡
𝐴1𝑐𝑚 = 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑒 𝑠𝑝é𝑐𝑖𝑓𝑖𝑞𝑢𝑒 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑢𝑏𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑒
C : concentration de la substance en g/100 ml
l : l’épaisseur de la cuve (longueur du trajet optique en cm)
Relation entre l’absorbance spécifique et le coefficient d’extinction molaire (ε) :
𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏𝟎 × 𝜺
𝑨𝟏𝒄𝒎 =
𝑴𝒓
Mr : Masse molaire de la substance.
Démonstration : Selon la loi de Beer-Lambert :
𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏
𝑨 = 𝑨𝟏𝒄𝒎 × 𝑪𝒈⁄𝟏𝟎𝟎𝒎𝒍 × 𝒍 = 𝑨𝟏𝒄𝒎 × 𝟏𝟎 × (𝟏𝟎 × 𝑪𝒈⁄𝟏𝟎𝟎𝒎𝒍 ) × 𝒍 =
𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏 𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏
𝑨𝟏𝒄𝒎 × 𝟏𝟎 × 𝑪𝒈⁄𝟏𝟎𝟎𝟎𝒎𝒍 × 𝒍 = 𝑨𝟏𝒄𝒎 × 𝟏𝟎 × 𝑪𝒈⁄𝑳 × 𝒍
Or
Cg/L = Cmole/L x Mr
𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏
𝑨 = 𝑨𝟏𝒄𝒎 × ×𝑪 × 𝑴𝒓 × 𝒍 … . . (𝟏)
𝟏𝟎 𝒎𝒐𝒍𝒆⁄𝑳
D’autre part :
𝑨 = 𝜺 × 𝑪𝒎𝒐𝒍𝒆⁄𝑳 × 𝒍 … . . (𝟐)
𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏 𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝟏𝟎×𝜺
(1)= (2) => 𝑨𝟏𝒄𝒎 × × 𝑪𝒎𝒐𝒍𝒆⁄𝑳 × 𝑴𝒓 × 𝒍 = 𝜺 × 𝑪𝒎𝒐𝒍𝒆⁄𝑳 × 𝒍 => 𝑨𝟏𝒄𝒎 =
𝟏𝟎 𝑴𝒓
UMM. Faculté de Médecine. Département de Pharmacie. Laboratoire de Chimie Analytique – Tizi-Ouzou Page 1 sur 4
Pr. M. MAMOU Dr. H. BEN SI SAID TD N°2 S2 (corrigé) Spectrophotométrie UV-Visible (Suite)
Dosage de la Bétaméthasone :
Principe de la méthode : il s’agit d’une méthode spectrophotométrique d’absorption dans l’UV basée sur
l’absorption spécifique de la radiation monochromatique à 238,5 nm par la bétaméthasone, un électron de valence
se trouve excité, le retour à l’état fondamental se fait par réémission à l’environnement de l’énergie absorbée sous
forme de chaleur.
Rôle de l’éthanol 96° : solvant pour solubiliser la bétaméthasone.
Dosage de la Bétaméthasone dans les comprimés :
Dans la solution fille et selon la loi de Beer-Lambert
𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 𝑨 𝟎,𝟔𝟕𝟓
𝑨 = 𝑨𝟏𝒄𝒎 × 𝑪 × 𝒍 => 𝑪 = 𝟏𝒑𝒐𝒖𝒓 𝒄𝒆𝒏𝒕 = = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟖𝟓𝟒 𝒈⁄𝟏𝟎𝟎 𝒎𝒍 = 𝟖, 𝟓𝟒 𝒎𝒈/𝑳
𝑨𝟏𝒄𝒎 ×𝒍 𝟑𝟗𝟓×𝟐
Dans la solution même :
Nous avons effectué une dilution 5/50 pour préparer la solution fille, donc
Cmère = 10 Cfille = 85,4 mg/L
Le volume de la solution mère = 100 ml, on calcule la masse de bétaméthasone dans la solution mère (donc la
masse de bétaméthasone qui se trouve dans la prise d’essai de 801,25 mg de la poudre des comprimés):
Dans 1L = 1000 ml → 85,4 mg
Dans 100 ml → m
m = 8,54 mg
Calcul de la teneur en bétaméthasone en mg/comprimé
Dans la prise d’essai de la poudre PE = 801,25 mg → 8,54 mg de bétaméthasone
Dans 1 Comprimé qui pèse la masse moyenne de 199,68 mg → teneur T
8,54 × 199,68
𝑇= = 𝟐, 𝟏𝟑 𝒎𝒈/𝒄𝒑
801,25
Calcul de la teneur en bétaméthasone en %
On a le dosage théorique = 2 mg donc
100 % → 2 mg/cp
X → 2,13 mg/cp
X = 106,46 ≈ 106,5 % compris dans l’intervalle de 90,0 % – 110,0 % donc le produit est conforme.
UMM. Faculté de Médecine. Département de Pharmacie. Laboratoire de Chimie Analytique – Tizi-Ouzou Page 2 sur 4
Pr. M. MAMOU Dr. H. BEN SI SAID TD N°2 S2 (corrigé) Spectrophotométrie UV-Visible (Suite)
Exercice N° 02 : dosage simultané de deux principes actifs dans un produit fini.
D’abord on calcul les absorbances spécifiques des composés A et B pour chacune des 2 longueurs d’onde, c’est
pour ça nous avons préparé des solutions étalons séparées qui contiennent seulement le composé A ou B.
chaque solution est analysé à chaque longueur d’onde.
Pour la solution étalon A : La masse pesée = 120 mg = 0,12 g, elle est préparée dans 100 ml de solvant, donc
la concentration en g/100 ml = 0,12, cette solution est par suite diluée au 1/100 donc : CA = 0,12 /100 = 0,0012
g/100 ml.
L’absorbance à λ1 = 0,24
Selon la loi de Beer-Lambert, on calcul l’absorbance spécifique 𝑨𝟏%
Aλ𝟏 (on la note A1 pour simplifier
l’écriture)
𝑨
A = A1 x CA x l => A1 = = 0,24/0,0012 = 200
𝑪𝑨 𝒙𝒍
L’absorbance à λ2 = 0,384
Selon la loi de Beer-Lambert, on calcul l’absorbance spécifique 𝑨𝟏%
Aλ𝟐 (on la note A2 pour simplifier
l’écriture)
𝑨
A = A2 x CA x l => A2 = = 0,384/0,0012 = 320
𝑪𝑨 𝒙𝒍
Pour la solution étalon B : La masse pesée = 200 mg = 0,2 g, elle est préparée dans 100 ml de solvant, donc la
concentration en g/100 ml = 0,2, cette solution est par suite diluée au 1/100 donc : CB = 0,2 /100 = 0,002 g/100
ml.
L’absorbance à λ1 = 0,300
Selon la loi de Beer-Lambert, on calcul l’absorbance spécifique 𝑨𝟏%
Bλ𝟏 (on la note B1 pour simplifier
l’écriture)
𝑨
A = B1 x CB x l => B1 = = 0,3/0,002 = 150
𝑪𝑩 𝒙𝒍
L’absorbance à λ2 = 0,400
Selon la loi de Beer-Lambert, on calcul l’absorbance spécifique 𝑨𝟏%
Bλ𝟐 (on la note B2 pour simplifier l’écriture)
𝑨
A = B2 x CB x l => B2 = = 0,4/0,002 = 200
𝑪𝑩 𝒙𝒍
Dosage des composes A et B dans les ampoules de 10 ml
On calcul d’abord les concentrations dans la solution échantillon (ampoule diluée au 1/100), C Aech et CBech
Le dosage repose sur l’additivité de la loi de Beer-Lambert
Pour chaque longueur d’onde ;
A = 𝑨𝟏% 𝟏%
Aλ𝒊 x CA x l + 𝑨Bλ𝒊 x CB x l
Pour la longueur d’onde λ1 :
A = A1 x CA ech x l + B1 x CB ech x l => 200 x CA ech + 150 x CB ech = 0,25
Pour la longueur d’onde λ2 :
A = A2 x CA ech x l + B2 x CB ech x l => 320 x CA ech + 200 x CB ech = 0,36
UMM. Faculté de Médecine. Département de Pharmacie. Laboratoire de Chimie Analytique – Tizi-Ouzou Page 3 sur 4
Pr. M. MAMOU Dr. H. BEN SI SAID TD N°2 S2 (corrigé) Spectrophotométrie UV-Visible (Suite)
On constitue un système de 2 equations à deux inconnus
200 x CA ech + 150 x CB ech = 0,25
320 x CA ech + 200 x CB ech = 0,36
On trouve après résolution du système d’équation ;
CAech = 0,0005 g/ 100 ml = 0,5mg/100 ml
CBech = 0,001 g/ 100 ml = 1mg/100 ml
Etant donné que l’ampoule est diluée au 1/100, la concentration dans l’ampoule est 100 fois celle de la solution
échantillon.
CA ampoule = 50 mg / 100ml
CBampoule = 100 mg / 100ml
Dans une ampoule qui a un volume de 10 ml, on fait la règle de 3 et la teneur par ampoule :
TA = 5 mg / ampoule
TB = 10 mg / Ampoule
UMM. Faculté de Médecine. Département de Pharmacie. Laboratoire de Chimie Analytique – Tizi-Ouzou Page 4 sur 4
