Université Sultan Moulay Slimane
Faculté des sciences et techniques de Béni
Mellal
Département de chimie et environnement
Travaux pratiques 1 : Chromatographie sur
couche mince
Realisé par:
- SadikeTariq
Année univeristaire:2022-2023
I-La chromatographie
La chromatographie est une méthode physique de séparation basée sur les
différentes affinités d’un ou plusieurs composés à l’égard de deux phases (stationnaire et
mobile). L'échantillon est entraîné par la phase mobile au travers de la phase stationnaire qui
a tendance à retenir plus ou moins les composés de l'échantillon à l'aide de différentes
interactions. L’échantillon est adsorbé puis désorbé sur la phase stationnaire, ou est plus ou
moins soluble dans la phase mobile.
II-La chromatographie sur couche mince
La CCM est une technique d’identification ; elle permet de séparer les constituants d’un
mélange. Une phase mobile appelée éluant (solvant(s)) progresse par capillarité le long
d’une phase stationnaire (silice).
→ plus une substance est soluble dans l’éluant, plus elle est facilement entrainée.
→ Une substance est plus ou moins retenue par la phase stationnaire.
1-Principe de la chromatographie sur couche mince
La plaque à chromatographie est une plaque d’aluminium sur laquelle a été déposée
une mince couche de gel de silice (de couleur blanche). La couche de gel de silice constitue
ce que l’on appelle la phase fixe. L’éluant (la phase mobile) entraîne, par capillarité, les
espèces chimiques contenues dans chaque goutte d’échantillon déposé sur une ligne
horizontale (ligne de dépôt) au bas de la plaque. Chaque espèce chimique contenue dans
les gouttes déposées migre le long de la plaque (la phase fixe) à une vitesse de migration
propre à l’espèce chimique (pour une phase fixe et un éluant donnés).
2-But
-Calculer le rapport frontal
-Déterminer le bon éluant
3-Mode opératoire :
a-Préparation de la réaction
Ethanol
Acide déhydroacétique phényle hydrazine
4-Hydroxy-6-methyl-3-[(1E)-N-
phenylethanehydrazonoyl]-2H-pyran-2-one
m=1g V=0,67ml
Dans un ballon on met l’acide dehydrodroacitique, on ajoute l ;ethanol jusaqu’a la
dissolution totale de l’acide dehydroacitique aprés cette derniere on ajoute le phenyledrazine
b-Preparation de l’éluant
On prepare 6 béchers avec un melange d’hexane et acetate d’ethyle en différents
proportions de ces deux derniers.
Bécher Acetate d’etyle Hexane
1 10 % 90%
2 20% 80%
3 30% 70%
4 40% 60%
5 50% 50%
6 60% 40%
c-Preparation de la plaque ccm
Préparation de la plaque : tenir la plaque 5cm/3cm sur les bords, ne pas poser
ses doigts dessus.
Tracer délicatement une ligne au crayon à 1 cm du bord inférieur de la plaque. Y placer
4 croix régulièrement espacées. Déposer une goutte de chaque échantillons (réaction,
phenylhydrazine, acide dehydroacetique et le mélange) à l’emplacement des croix en
faisant de petites taches et sans abimer la surface de la phase stationnaire.
Repérer la position initiale de chaque échantillon en l’indiquant sous chaque dépôt (R,
AD, PH, M).
Chambre d’élution : Verser l’éluant dans un récipient jusqu’à un niveau de liquide
inférieur à 1 cm.
Elution : Introduire la plaque lentement et en position verticale dans le récipient (la ligne
de dépôt doit se situer au-dessus du niveau de liquide). Fermer de façon étanche pour
assurer la saturation. Laisser le temps nécessaire pour que le solvant monte par capillarité
jusqu’à 1 cm environ du bord supérieur de la plaque. Sortir la plaque, repérer d’un trait la
ligne de front de l’éluant, et la laisser sécher, en position verticale, dans un endroit ventilé.
Révélation UV
Si la plaque est fluorescente, sous une lampe UV, toute la plaque apparaît verte sauf là où
sont les taches que l'on entoure au crayon.
Les dérivés aromatiques absorbent dans l'UV. Placer la plaque sous une lampe UV et
entourer les taches colorées.
Révélation à l'iode
Beaucoup de composés organiques forment des taches jaune-marron en présence d'iode.
Dans un flacon, placer la plaque et quelques cristaux d'iodes, puis boucher. Les taches
apparaissent.
d-Resultat
Bécher Acetate d’etyle Hexane Rf
1 10 % 90% 0
2 20% 80% 0,086
3 30% 70% 0,285
4 40% 60% 0,468
5 50% 50% 0,486
6 60% 40% 0,75
Le bon éluant et le bécher 3 : 30% acétate d’éthyle et 70% d’hexane car son Rf
est 0,1<Rf<0,2.
Calcule de rendement :
mth
On a nb=1,1 na=nc=
M
mth
na=nc=
M
D’ou mth=na × M
ma
¿ ×258
168,5
1g
mth= ×258
168,15
Donc mth=1,53g
mexp
R= ×100
mth
1,334
¿ × 100
1,534
R=86,96 %
