Guide pour la validation des méthodes d’essais

Document AL 217
Révision 00- 2006
 Guide pour la validation des méthodes d’essais

Table des matières

Diffusion ………..………………………………..…………………………….……….…….2
Historique des modifications…………………..………………………………….….…….2
1- Objet …………………………………………………………………………….………….3
2- Méthodes de référence………………………………………..…………………..………....3
3- Conditions générales………………………………………………………………….……..3
4- Documentation d’une méthode d’essai……………………………………………………...3
5- Critères de validation d’une méthode d’essai………………………………………….……4
6- Termes et définitions relatifs à la fiabilité et à la validation d’une méthode d’essai……..…4
7- Références…………………...………..……………………………………………… .......6

Diffusion

En diffusion contrôlée :
 Les évaluateurs techniques
 Les laboratoires accrédités et candidats à l’accréditation

En diffusion non contrôlée

Tout demandeur externe

Historique des modifications

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1- Objet

Ce guide vise à décrire les modalités de validation des méthodes d’essais autres que
celles de référence et l’évaluation de certaines caractéristiques de mise en œuvre pour
les méthodes normalisées nationales ou internationales.

2- Méthodes de référence

Les méthodes de référence sont des méthodes publiées dans des normes
internationales, régionales ou nationales, par des organisations techniques de renom
ou dans des textes ou revues scientifiques spécialisées, ou spécifiées par le fabricant
de l’équipement.

3- Conditions générales

Dans une démarche d’accréditation, un laboratoire doit favoriser l’usage des

méthodes de référence, Celles-ci ont pour avantage de permettre à l’ensemble des
partenaires concernés (pouvoirs publics, industriels, distributeurs, laboratoires, …)
de s’accorder sur la validité des résultats des analyses effectuées.

A défaut d’utilisation des méthodes de référence pour des raisons techniques ou

organisationnelles, le laboratoire doit être en mesure de produire un document de traçabilité
décrivant la méthode à usage interne et l’ensemble des critères prouvant sa validité.

N.B : Toute modification par rapport à la méthode de référence doit être accompagnée de
procédure de vérification.

4- Documentation d’une méthode d’essai

La méthode d’essai matérialisée par un document doit comporter les indications suivantes :

 Identification du type d’essai.

 L’usage de la méthode (usage de routine ou alternatif).
 L’indice de révision et la date de la révision.
 Domaine d’application : produits, types d’échantillons, propriétés mesurées, étendues et
limitations des mesures.
 Références des documents auxquels la méthode fait appel pour son application.
 Définition des termes, symboles ou abréviations utilisées dans le texte.
 Principe et successions des opérations à réaliser.
 Les moyens d’essai : exigences, conditions d’installation, de montage à respecter, y
compris si nécessaire la définition d’un local fixe ou mobile.
 Réactifs ou autres produits consommables, la préparation des objets soumis à essai.
 Mode d’expression et d’obtention des résultats.
 Caractéristiques de performance déterminées dans la phase de validation.
 Paramètres d’autocontrôle : moyens, fréquence, …

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5- Critères de validation d’une méthode d’essai

Ces critères de validation dépendent des caractéristiques à déterminer : qualitatives ou

quantitatives (paramètres physiques, chimiques, physico-chimiques, biochimiques,
biologique, mécaniques …)

Ces critères doivent être définis par le laboratoire et disponibles. Le laboratoire doit
disposer d’un document décrivant la méthode mise au point ou adaptée, les moyens
utilisés, y compris les données brutes, les enregistrements et les paramètres de
validation. Ce document doit être adressé au comité d’accréditation des laboratoires
lors d’une demande d’accréditation portant sur ces méthodes et sera accessible aux
évaluateurs lors d’un évaluation.

6- Termes et définitions relatifs à la fiabilité et à la validation d’une méthode d’essai

La validation consiste à évaluer des critères quantitatifs qui permettent d’apprécier si les
différentes étapes d’une procédure analytique sont correctes.
Il n’y a pas d’approche systématique pour valider une méthode d’essai, qu’il s’agisse de choix
des termes, des définitions, des notes ou des exemples.
En s’inspirant pour une large part de vocabulaire existant, et afin de faciliter la
consultation du vocabulaire, nous proposons ci-après certains exemples de
paramètres à définir lors d’une validation de méthode d’essai :

NB : D’une manière générale la référence à la norme ISO 5725 est préférable pour la
définition des paramètres de validation des méthodes d’essais.

PARAMETRES DEFINITION
Pour une analyse quantitative le domaine d’application d’une
Domaine d’application méthode est déterminé en examinant des échantillons avec des
Réf : Welac concentrations de substances différentes et en déterminant
(Guide Eurachem n°1-1993) l’intervalle de concentration pour lequel la fidélité et la justesse
peuvent être atteintes.

Linéarité La linéarité est déterminée par l’analyse d’échantillon avec des

concentrations de substance concernant le domaine annoncé de la
Réf : Welac (Guide eurachem
méthode.
n°1-1993)
La sensibilité à une concentration donnée correspond au
Sensibilité rapport de la variation de la grandeur mesurée (x) à la
Réf : (Doc AFNOR T01040 variation correspondant de la concentration de l’élément à
Dec 1982 doser (c)
ISO 6955)
S= (x)/C)
En analyse par spectromètre d’absorption atomique, (x)
correspondant à la variation d’absorbance. Pratiquement, elle
s’exprime en µg/ml d’élément donnant une absorption à1%

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PARAMETRES DEFINITION
Concentration en l’élément à doser pour laquelle l’intensité ou
Limite de détection d’une l’absorbance présente une valeur égale à 3 fois celle de l’écart
méthode type d’une suite de valeurs observées sur une solution, dont la
Réf : (Doc AFNOR T01040 concentration est nettement supérieure à la valeur détectable,
Dec 1982 mais proche des valeurs d’intensité ou d’absorbance de la
ISO 6955 solution d’essai à blanc.

En mesure électrochimique la limite de détection a été définie

par l’IUPAC comme l’activité (ou la concentration de l’espèce
x au point d’intersection des parties linéaires extrapolées de la
courbe d’étalonnage) en concentration. E=f(log[x])
E = potentiel mesuré
[x] = concentration de l’espèce à mesurer.
C’est la plus basse concentration d’analyste qui peut être
Limite de quantification déterminée avec un niveau acceptable d’exactitude et de
d’une méthode (LQM) précision. Pour établir la LQM c’est la concentration équivalente
Réf : Welac à 10 fois l’écart type calculé à partir d’au moins
(Guide eurachem n°1-1993) 10 replica effectués sur des analyses contenant des matrices
réelles ayant une concentration du composé analysé équivalente à
5 fois la limite de détection de la méthode estimée.
A un niveau donné, étroitesse de l’accord entre la valeur vraie
Justesse et le résultats moyen qui serait obtenu en appliquant le
Réf : (Doc AFNOR T01040 procédé expérimental un grand nombre de fois.
Dec 1982 ISO 6955) Elle s’exprime par l’erreur relative définie par l’équation
suivante :
Erreur relative(%) = [(Vc – V0)/Vc] x100
Vc = valeur certifiée
Vo = moyenne des valeurs observées
La fidélité à un niveau donné correspond à l’étroitesse de
Fidélité l’accord entre les résultats obtenus en appliquant le procédé
Réf : (Doc AFNOR T01040 expérimental à plusieurs reprises (n=10replica) dans des
Dec 1982 ISO 6955) conditions déterminées selon les conditions d’exécution de
l’essai. Cette caractéristique s’exprime sous forme de
réplicabilité, de répétabilité ou reproductibilité pour une
méthode.
Réplicabilité A un niveau donné correspond à l’étroitesse de l’accord entre
les résultats individuels successifs obtenus sur le même
échantillon soumis à l’essai dans le même laboratoire et dans
les conditions suivantes :
 même analyste
 même appareil
 même jour
Répétabilité A un niveau donné correspond à l’étroitesse de l’accord entre les
résultats individuels sur le même échantillon soumis à l’essai
dans le même laboratoire et dont au moins l’un des éléments
suivants est différent : l’analyste, l’appareil, le jour.
Reproductibilité A un niveau donné correspond à l’étroitesse de l’accord entre les
résultats individuels obtenus sur le même échantillon soumis à
l’essai dans des laboratoires différents et dans les conditions
suivantes : l’analyste différent, l’appareil différent, jour différent
ou même jour.

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PARAMETRES DEFINITION
Récupération La récupération correspond à la différence
en % entre la concentration mesurée d’un échantillon fortifié
et la concentration mesurée du même échantillon non fortifié,
divisée par la concentration de substance ajoutée. Ce rapport
tient compte de la transformation chimique qui s’est produite,
s’il y a lieu
% récupération = [(Cf – C)/Ca]x100
Cf = concentration de l’échantillon fortifié
C = Concentration de l’échantillon non fortifié
Ca = concentration ajoutée

7- REFERENCES

1- NIS 80 (1994),Guide to the Expression of Uncertainties in Testing, NAMAS, Teddington, UK

2- NF E 02-204,Verification des tolérances des produits, Déclaration de conformité, Décembre

1993, AFNOR, Paris, France.

3- ISO/DIS 14253,part 1,Decision rules for proving conformance or non-conformance with

specification, 1995, International Organisation for Standardization, Geneva, Switzerland.

4- BIPM, IEC, IFCC, ISO, IUPAC, IUPAP, OIML, Guide to the Expression of Uncertainty in
Measurement. International Organisation for Standardization, Geneva, Switzerland, ISBN
92-67-10188-9,First Edition,1993.

5- ISO 3534 Part 1,Probability and General Statistical Terms -1993,Statistics –Vocabulary and
symbols, International Organisation for Standardization, Geneva, Switzerland.

6- VIM,ISO (1993),International Vocabulary of Basic and General Terms in Metrology,

International Organisation for Standardization, Geneva, Switzerland, ISBN 92-67-01075,
Second Edition.

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