LE 09/12/2021
TD 2 : Etude de la sensibilité
aux antibiotiques
Asmae ENNEFFAH
Kaoutar BERKIA Année Universitaire : 2021/2022
INTRODUCTION
Un antibiogramme est une technique de laboratoire qui est utilisée
pour l’objectif de tester la sensibilité d’une bactérie ou d’une souche
bactérienne par rapport à un ou plusieurs antibiotiques.
Un antibiotique est une substance active sur les bactéries. L’action
peut être tué les bactéries (bactéricide) ou inhiber la croissance
(bactériostatique)
On peut regrouper à différentes familles :
1- Inhibiteur de la synthèse des enveloppes bactérienne : Ex le
bêta-lactamines
2- Inhibiteur de la synthèse des protéines : Ex Cyclines,
Aminosides
3- Inhibiteur de la synthèse des acides nucléiques : Ex Les
chinolone
4- Inhibiteur de la synthèse de l’acide pholéique : Ex les
Sulfamides
5- Mécanismes complexes : Ex Antituberculeux
Objectif
Connaitre la notion de l’antibiogramme et son intérêt
Réalisation et interprétation de l’antibiogramme
Etude de la sensibilité d’une souche sauvage de la bactérie
E. COLI
Mode opératoire
1 – préparation de Milieu de culture
Le gélose Mueller-Hinton est un milieu riche et contient des extraits
de viande, l’amidon de maïs, et agar ….
On prélève 38g de poudre de gélose MH
On mélange 38g de poudre dans 1L d’eau
On homogénéise le mélange puis on chauffe en agitant
On stérile la gélose a l’autoclave
2- Préparation de Suspension Bactérienne
On prélève une colonie d’E. Coli
On le transférer dans un tube contenant l’eau physiologique
(Eau distillé + NaCl)
Agitation
Il faut avoir la suspension d’une turbidité équivalente de l’étalon 0,5
de Mac Farland
3-Protocole expérimental
Le nettoyage et désinfection du poste de travail
On allume le bec bunsen afin de stériliser l’air alentour
On verse dans la boite de pétri la suspension bactérienne
Puis on fait un ensemencement par inondation et on élimine
l’excès
A l’aide d’une pince stérile on prélève un disque d’antibiotique
et on dépose au boite de pétri on fait cette opération 3fois pour
les 3types des antibiotiques
On met les antibiogrammes a l’incubation dans une étuve a
37°C pendant 24h
Lecture des résultats
Résultats
Interprétation des résultats :
On remarque d’après les résultats qu’il ya la presence d’un
cercle autour des antibiotiques TMN et TE, contrairement à
l’antibiotique TEC il n’y a aucun cercle, cela est expliqué par le
fait que la bacterie Escherichia coli est sensible aux deux
antibiotiques TMN et TE alors qu’elle est résistante à TEC.
Conclusion :
Les antibiogrammes ont un rôle très important dans la
détection de la résistance d’une bactérie face à un
antibiotique, ce qui va aider à bien choisir celui qui est
convenable et efficace contre cette bactérie.