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Technique Patch-Clamp

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.

LEXIQUE NEUROBIOLOGIE
médecine/sciences 1 989 ; 5 : 256-7

Techniques
électrophysiologiques

®
PA
I ntensité
(en pAmp) ddp i mposée
ddp
(en mV)

te m ps 0
(en m sec)

PR

PC

'
-
Extra-cellu lai re

t-----il t-
l -i

' électrodes �
I ntra-cel lu laire

Figure 2 . Dérivation intracellulaire


par microélectrode. A partir du
F i g u r e 1 . Prin c ip e du « p a tc h potentiel de repos (PR) intracellulaire,
clamp ». Une pipette isole par contact on peut enregistrer des hyperpolarisa­
une surface de membrane contenant tions (hyperpol) et/ou des dépolarisa­ Figure 3. En voltage imposé, on uti­
un petit nombre de canaux. L'enregis­ tians locales (dépol). Si ces dernières lise une électrode de mesure et
trement des courants dus au fonction­ atteignent le seuil, le potentiel d'action une dérivation d'imposition de
nement de ces canaux donne un signal (PA) se développe (courbe rouge). En ddp. La ddp imposée à la membrane
global dont le traitement informatique injectant des impulsions de courant induit des transferts d'ions qui sont éva­
extrait les courants unitaires liés à l'ou- calibrées (PC), on peut mesurer lès lués par les courants entrants (E) et
- verture des canaux individuels. variations de résistance membranaire. sortants (S) transmembranaires.
256 mis n° 4 uol. 5, auri/ 89
Dans le système nerveux, la genèse et contemporaines de l 'activité cellu­
le transfert d'information peuvent laire, que celle-ci soit spontanée ou
être assurés par la modulation en évoquée (figure 4). Selon la taille des
amplitude (potentiels locaux) et en électrodes on obtiendra un enregis­
fréquence (potentiels d'action ( PA)) trement u n icel l u laire (essentielle­
de la différence de potentiel ( ddp) ment en recherche) ou pluricellulaire
électrique transmembranaire des (neurographie, électromyographie)
neurones. Ce fonctionnement peut dont, par rapport au brui t de fond,
être étudié par ordre de complexité
croissante, depuis l'échelon cellulaire
j usqu'à celui de système (ensemble
t il faudra sélectionner les signaux
intéressants par détection du seuil
d'amplitude. On s'intéresse alors au
de cellules interconnectées) à l 'aide codage des messages circulant sous la
de techniques spécifiques à chaque forme de potentiels d'action. On pro­
niveau d'organisation. cèdera par comptage (échantillon­
Au niveau membranaire, on peut nage statistique, présence-absence,
étudier en patch clamp (figure 1 ) des vitesse, fréquence) ou encore au cal­
courants ioniques individuels ( K+ , cul de la probabilité d'émission des
Na+, Ca++, Cl -... ) déclenchés par les PA (distribution des i ntervalles entre
changements de conductance dus à Figure 4. En dérivation extracellu­ PA, au tocorrélation). Au n i veau
l 'ouverture de « passages » ou pro­ laire, les champs de potentiels dus multicellulaire, les techniques d'en­
téines-canal (voir ml s n° 9, vol. 3, à l'activité cellulaire sont détectés registrement (figure 5) font en géné­
p. 538). Le plus souvent ce type à plus ou moins grande distance ral appel à des dérivations à distance
de la membrane.
d'étude est réalisé à partir de cellules, q u i permettent la détect ion des
ou de fragments de membrane de champs électriques induits par l 'ac­
cellules isolées ou en culture. Cette tivité plus ou moins synchrone d'une
approche nécessite un traitement importante population cellulaire,
informatique pour l 'extraction des avec des électrodes de dimensions très
courants individuels du bruit de fond supérieures à celles des neurones.
« membranaire ». A l'échelon cellu­ Que cette activi té soi t spontanée
laire, en dérivation intracellulaire (électroencéphalogramme) ou provo­
par microélectrode (figure 2), on quée (potentiel évoqué), les dériva­
mesurera les variations (locales et/ou tions - le plus souvent bipolaires �

propagées) du potentiel de mem­ ne donnent que la mesure différen­


brane de la cellule. Avec une seconde tielle par rapport au temps des varia­
microélectrode par l a q u e l l e o n tions de champ détectées par chaque
impose une ddp membranaire (vol­ électrode. U ne variante, en explora­
tage imposé, figure 3), on mesure tion clinique comme en recherche,
alors les courants membranaires peut consister en l 'enregistrement
totaux (cellule entière) entrants ou « profond » des activités de popula­
sortants en fonction de la ddp impo­ tions neuronales à l 'aide d'électrodes
sée, courants qui expriment la som­ bipolaires concentriques implantées
mation statistique par rapport au dans le cerveau.
temps des .courants individuels des Jean-Paul Rivot
différents canaux mis en jeu. On Bernard C alvino
peut également étudier les variations M arc Peschanski
de résistance membranaire (relation
ohmique) par mesure des variations Figure 5. Dans les dérivations de
de ddp provoquées par des stimula­ surface (électro-encéphalogra­
phie, EEG) ou profondes, l'enre­
tions d'intensité constante. Que ce
gistrement entre deux électrodes
soit en recherche ou en exploration actives donne une trace de repré­ Dans chaque figure, les tracés supé­
clinique, on peut enregistrer en s e n ta ti o n diffé r e n tielle des rieurs sont des exemples d'enregistre­
situation extracell u laire, avec de champs électriques émis par des ment, le schéma inférieur indique
fines électrodes en verre ou en métal, populations cellulaires et << vus " l'emplacement des électrodes.
les variations du champ de potentiel par chaque électrode.
mls n• 4 vol. 5, avril 89 257

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