Université Hassan II de Casablanca
Faculté des Sciences Ben M’sik
Licence professionnelle en Sciences et Technologies de
Laboratoire Spécialité Biotechnologie
Sous thème :
Spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier
Préparé par : Yassmine Msaad
Encadré par : Mme Latifa Hajji
Année universitaire : 2021/2022
Introduction
La spectroscopie infrarouge est une technique d'analyse rapide permettant d'identifier
rapidement les fonctions chimiques des molécules présentes dans les matériaux
analysés (solides, liquides ou plus rarement gazeux). Cette technique repose sur
l'absorption par l'échantillon de radiations électromagnétiques infrarouges comprises
entre 1 et 50 µm (micromètre). Cette bande spectrale est divisée en proche infrarouge
(de 1 à 2.5 µm) et en moyen infrarouge (de 2.5 à 50 µm). Le moyen infrarouge est utilisé
pour identifier des molécules organiques dont il permet de garder une sorte
d'empreinte digitale. Selon le matériau analysé et des informations souhaitées, la
spectroscopie infrarouge peut être complétée par d'autres techniques analytiques
comme la spectroscopie UV-visible ou la spectroscopie Raman.
Au laboratoire, nous utilisons un spectromètre infrarouge à transformée de Fourier
(IRTF) permettant de réaliser des examens en quelques secondes en utilisant le mode
ATR (analyse de surface) ou en transmission (information globale). Nous avons aussi
à disposition un spectromètre infrarouge couplé à un microscope optique (on parle
alors de micro-spectrométrie infrarouge) afin de pouvoir analyser des zones de
quelques micromètres carrés (fibres textiles, couches stratigraphiques d'écailles de
peinture...).
Objectif de TP :
L’objectif de cette manipulation est de déterminer le groupement fonctionnels présent
dans un échantillon inconnu par la méthode de spectroscopie infra rouge (IR) à
transformée de Fourier.
Principe de fonctionnement :
On compare l'intensité I du rayonnement transmis par l'échantillon étudié à l'intensité
du rayonnement incident I0 à différentes longueurs d'onde dans le domaine infrarouge.
On obtient ainsi un spectre d'absorption qui donne la transmittance T = I/I0 ou
l'absorbance A = -log(I/I0) de l'échantillon en fonction
de la longueur d'onde incidente ou du nombre d'onde
(inverse de la longueur d'onde). Etant donné le
nombre et la complexité des bandes d'absorption, le
spectre infrarouge d'une molécule donnée est
caractéristique de celle-ci et peut donc être utilisé
pour l'identifier, en consultant des tables de
correspondance ou par comparaison avec des
spectres de référence enregistrés dans une
spectrothèque. Ainsi, lors d'études comparatives de
deux substances, des spectres infrarouges identiques
indiquent des substances identiques.
Matériels et produits :
Appareil Infrarouge
Ordinateur
Pastilleuse (pression mécanique)
Support + Anneau
Mortier en agate
Moule à pastiller
Onduleur
Spatule
Balance
Mode opératoire
Etape 1 : Préparation de l’échantillon
- L'échantillon en poudre est incorporé à un support qui n'absorbe pas dans l'IR
moyen, ici on a utilisé le bromure de potassium (KBr).
- Broyer le mélange de 1% de l’échantillon et 99% du KBr qui est transparent dans
l’IR.
- Ecraser l’échantillon déjà préparé avec un mortier en agate.
- On applique une très forte pression sur l’échantillon pour former la pastille.
Pastilleuse Les pastilles
Etape 2 : Analyse de l’échantillon
- La pastille de l’échantillon préparée est placée dans le compartiment de mesure du
spectrophotomètre sur le trajet du faisceau incident.
- Le signal enregistré par le détecteur qui prend en compte, non seulement
l'absorption du rayonnement l'IR par le produit à étudier, mais aussi par l'air
présent dans le compartiment de mesure et éventuellement par le KBr s'il n'est pas
complètement anhydre. Il faut donc enregistrer un spectre de bruit de fond
(background) de l'air (éventuellement d'une pastille de KBr pure), qui sera ensuite
soustrait du spectre obtenu avec la pastille contenant l'échantillon. Cela permet de
se débarrasser des absorptions parasites. Les spectres sont enregistrés en
transmittance.
- Le spectre IR est affiché ensuite dans l’ordinateur à l’aide d’un logiciel
informatique.
- Afin d’obtenir des résultats finales on fait des corrections pour qu’on puisse
analyser le spectre IR :
Convertir l’absorbance au transmittance
La ligne de base : pour obtenir la même base à toutes les lignes
Résultat expérimentale :
Les résultats obtenus ;
Interprétation des résultats :
- La présence d’une bande large située vers 3500 -3400 cm-1, ce qui signifie la
présence d’une fonction O-H
- L’apparition d’une bande fine situé entre 1800 et 1600 cm-1 ; ce qui signifie la
présence d’une fonction C=O
- Une bande moyenne entre 3000 et 3300 cm-1, c’est une liaison C-H hybridé Sp
Conclusion :
A l’aide des résultats obtenus, on a donc une composante qui est caractérisé par trois
fonctions, la fonction de l’alcool O-H, C=O, et la liaison du carbone C-H hybridé Sp.
Alors notre échantillon il s’agit d’un acide carboxylique.
