Spectrophotométrie UV-Visible
Introduction :
La spectrométrie UV-Visible est une technique de spectroscopie mettant en
jeu les photons dont la longueurs d’onde sont dans le domaine de l’ultraviolet,
de visible. Soumis a un rayonnement dans cette gamme de longueurs d’onde, les
molécules, les ions ou les complexes subir une ou plusieurs transitions
électroniques.
Présentation de TP :
Notre TP sert d’une part à la réalisation d’une analyse par l’UV-Visible pour
plusieurs solutions de compositions et de nature différentes.
Et d’autre part sert à la réalisation d’une analyse quantitative en déterminant la
concentration d’une espèce chimique dans un produit pharmaceutique.
But de TP :
Le but de notre TP est de connaitre la méthode de l’UV-Visible et savoir
l’utiliser pour interpréter les spectres UV-Visible pour identifier la nature des
espèces chimiques analysées et à la fin de TP on peut réaliser la courbe
d’étalonnage qui permet de déterminer la concentration en espèce colorée d’une
substance par la réalisation d’un dosage par étalonnage.
Principe de TP :
La spectroscopie UV-Visible se réalise a l’aide d’un spectrophotomètre .Lorsque
la cuve contenant la solution est placée dans un spectroscope, elle reçoit un
rayonnement d’intensité I0 .Une partie de cette lumière incidente notée I0 est
absorbée par le milieux et le reste noté I, est transmis . L’intensité (I) du
rayonnement issu de la cuve est donc inférieure à l’intensité du rayonnement
initial (I0) .La fraction de la lumière incidente absorbée par une substance de
concentration C contenue dans une cuve de longueur L est donnée par la loi de
Beer-Lambert :
A= log ( I0 / I)=ɛ.I.C
Le spectrophotomètre permet de tracer le spectre d’absorption A en fonction de גּ
Partie théorique :
Partie 1 : Analyse de différentes solutions
La première expérience :
Mode opératoire :
Matériels : fioles jaugées, Bécher, pipettes, pro pipettes et spectroscopie UV-
Visible.
Produits : Alcool (éthanol),acide acétique, Aldéhyde ,acétone ,permanganate de
potassium ,bleu de méthylène.
Solvants : Eau distillée, hexane
Protocole:
Pour réaliser ce TP il faut d’abord préparer les solutions diluées suivantes :
- Alcohol ( ethanol ) : 10mol/l - Acetone : 10-3
- Acide acétique : 0.25 mol/l - Bleu de méthylène : 10-5
- Permanganate de potassium : 0.08 mol/l
Pour avoir ces solutions diluées il faut prélever un volume de la solution
mère et la diluée avec de l’eau distillée .
Exemple : L’éthanol
C ( 2 ) V (2)
On a la loi de dilution : C1 V1 = C2 V 2 V1 =
C (1)
Avec :
C1 : concentration mère (sur les flacons).
C2 : concentration qu’il faut atteindre (10 M) .
V2 : volume final (volume de fiole utilisé).
V1 : le volume qu’il faut prélever de la solution mère
Application numérique :
C1 = 16.44 M V1 = ?
C2 = 10 M V2 = 20 ml
10 20
V1 = 16.44 = 12 ml
Donc le volume qu’il faut prélever est 12 ml .
Protocole :
Verser une quantité de la solution mère (éthanol 16.44 M) dans un bécher
A l’aide d’une pipette et une pro pipette prélever 12 ml de la solution
mère.
Verser les 12 ml de la solution mère dans une fiole jaugé de 20 ml et
ajouter de l’eau distillé jusqu’à trie de jauge.
A la fin on obtient une solution diluée de l’éthanol 10 M
On suit le même protocole avec les autres produits pour avoir les solutions
diluées.
Une fois les solutions sont préparées on peut les analyser avec la machine de
l’UV-Visible.
La deuxième expérience :
Préparation des solutions diluées avec des concentration au choix .
On suit l’exemple de l’éthanol :
C1 : la concentration de la solution mère 16.44 M.
C2 : la concentration au choix 8.5 M.
V1 : le volume qu’il faut prélever.
V2 : volume final de la fiole 20 ml
8.5 20
A.N : V1 = 16.44 = 10 ml
Une fois les solutions avec des concentrations au choix sont préparées on peut
les analysées aussi .
Interprétation des spectres obtenus :
