DÉTERMINATION DU PKA D’UN INDICATEUR COLORÉ
: LE BLEU DE
BROMOTHYMOL
Le bleu de bromothymol est un composé organique qui existe sous deux formes :
• sa forme acide HIn est jaune en milieu aqueux
• sa base conjuguée In– est bleue en milieu aqueux
Hin + H2O = H3O+ + In–
–
Le couple HIn / In est caractérisé par sa constante d’équilibre Ka =
On déterminera dans une solution aqueuse de pH connu, la valeur du rapport ; ce rapport sera mesuré par
spectrophotométrie d’absorption, on en déduira le pKa.
I – PRINCIPE DE LA DÉTERMINATION DU RAPPORT
La détermination du rapport se fait à partir des valeurs des absorbances des trois solutions suivantes, pour une longueur d’onde
donnée.
Solution 1 Solution 2 Solution 3
BBT à pH connu (7,2)
BBT à pH = 1 BBT à pH = 14
Solution verte
solution jaune solution verte
Les deux formes colorées présentes le
[In–]<<[HIn] [HIn] << [In–]
sont à des concentrations molaires
du même ordre de grandeur. Forme majoritaire : HIn Forme majoritaire In–
[HIn]1 + [In–]1 = C [HIn]2 » C [In–]3 » C
Absorbance A1 Absorbance A2 Absorbance A3
II – PROTOCOLE OPÉRATOIRE
La solution mère de bleu de bromothymol est à 1 g.L-1.
La solution tampon de pH = 7,2 est obtenue en mélangeant 50 mL d'une solution d'hydrogénophosphate de sodium (2Na + + HPO2-;4)
à 4×10-1 mol.L-1 avec 50 mL d'une solution d'acide chlorhydrique à 2×10-1 mol.L-1. On a alors pH = pKA du couple H2PO-;4 /
HPO2-;4 .
On prépare 100 mL de chacune des solutions.
Solution S1 Dans une fiole jaugée de 100 mL rincée avec le milieu tampon H2PO-;4 / HPO2-;4, introduire 5 mL de la
solution mère de BBT. Compléter avec la solution tampon, homogénéiser. On obtient une solution verte S1
dont le pH est de 7,2.
Solution S2 Dans une fiole jaugée de 100 mL rincée avec de l'acide chlorhydrique à 0,1 mol.L-1, introduire 5 mL de la
solution mère de BBT. Compléter avec la solution d'acide chlorhydrique et homogénéiser. On obtient la
solution jaune S2 dont le pH » 1.
Solution S3 Dans une fiole jaugée de 100 mL rincée avec une solution de soude à 1 mol.L-1, introduire 5 mL de la solution
mère de BBT. Compléter avec de la soude et homogénéiser. On obtient la solution bleue dont le pH » 14.
Pour chacune des trois solutions, on trace le spectre d'absorption A f à l'aide du spectrophotomètre. On superpose les trois
spectres: les résultats obtenus se trouvent sur la page suivante.
Remarque: Le blanc réactif est fait en prenant pour S1 la solution tampon pH =7,2 ; en prenant pour S2, l'acide chlorhydrique
0,1 mol.L-1; en prenant pour S3, la soude 1 mol.L-1.
III – EXPLOITATION DES GRAPHES OBTENUS POUR LE CALCUL DU PKA DU BBT
Nous choisirons deux longueurs d'onde et ' de part et d'autre du point I et nous appliquerons la loi de Lambert-Beer à chacune des
trois solutions.
• Pour : A1 = HIn l [HIn]1 + In- l [In-]1 A2 = HIn l [HIn]2 A3 = In- l [In-]3
-
d'où A1 = [HIn]1 + [In ]1
A1 = [HIn]1 + ( C [HIn]1 )
A1 = [HIn]1 ( ) + A d'où
• Pour ': A'1 = HIn l [HIn]1 + In- l [In-]1 A'2 = HIn l [HIn]2 A'3 = In- l [In-]3
-
d'où A'1 = [HIn]1 + [In ]1
A'1 = ( C [In-]1 ) + [In-]1
A'1 = [In-]1 ( ) + A' d'où
donc
Or pH1 = pKa + lg donc pKa = pH1 lg donc
A'3
A2
A1
A'1 Solution S3
Solution S1
A3
A'2
Solution S2
Application numérique de la formule trouvée ci-dessus:
pKa = pH1 lg = 7,2 – 0,4 = 6,8
Le pKa du bleu de bromothymol est bien de 6,8.
