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Mécanismes de transfert génétique chez E. coli

Ce document contient quatre problèmes portant sur les mécanismes moléculaires des transferts horizontaux chez E. coli, notamment concernant l'ordre de marqueurs génétiques transférés par différentes souches Hfr, les distances cartographiques entre ces marqueurs, et la comparaison des mécanismes de transfert de gènes lac+ par conjugaison avec des souches Hfr, F+ et F'lac+.

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Mécanismes de transfert génétique chez E. coli

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République algérienne démocratique et populaire

‫وزارة اﻟﺘﻌﻠﯿﻢ اﻟﻌﺎﻟﻲ و اﻟﺒﺤﺚ اﻟﻌﻠﻤﻲ‬


Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique
ECOLE NATIONALE SUPERIEURE
‫اﻟﻤﺪرﺳﺔ اﻟﻮطﻨﯿﺔ اﻟﻌﻠﯿﺎ ﻓﻲ اﻟﺒﯿﻮﺗﻜﻨﻮﻟﻮﺟﯿﺎ‬
DE BIOTECHNOLOHIE
CONSTANTINE ‫ﻗﺴﻨﻄﯿﻨﺔ‬

Génétique moléculaire et plasticité des génomes microbiens


TD N°1 : mécanismes moléculaires des transferts horizontaux

Problème N°1
Chez [Link], quatre souches Hfr transfèrent une série de marqueurs génétiques dans l’ordre
indiqué ci-dessous :

Souche 1 : Q W D M T
Souche 2 : A X P T M
Souche 3 : B N C A X
Souche 4 : B Q W D M

Toutes ces souches Hfr sont dérivées de la même souche F+.


- Quel est l’ordre des marqueurs sur le chromosome circulaire de la F+ d’origine ?

Problème N°2
On croise une Hfr met+ thi+ pur+ avec une F- met- thi- pur-. Des expériences de conjugaison
interrompue montrent que met+ entre le dernier dans le receveur ; c’est pourquoi les
recombinants met+ sont sélectionnées sur un milieu contenant des suppléments satisfaisant
uniquement les exigences en pur et en thi.
On recherche chez ces recombinants la présence des allèles thi+ et pur+. Pour chaque génotype,
on trouve le nombre suivant d’individus :

met+ thi+ pur+ 280


met+ thi+ pur- 0
met+ thi- pur+ 6
met+ thi- pur- 52

a. Pourquoi n’y avait-il pas de méthionine (met) dans le milieu de sélection ?


b. Quel est l’ordre des gènes ?
c. Quelles sont les distances cartographiques en unités de recombinaison ?

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Problème N°3
Cinq souches Hfr (de A à E) sont dérivées d’une même souche F+ d’[Link]. Le tableau ci-
dessous indique les temps d’entrée des cinq premiers marqueurs dans une souche F-, lorsque
chacun est utilisé pour une expérience de conjugaison interrompue :

A B C D E
mal+ (1) ade+ (13) pro+ (3) pro+ (10) his+ (7)
strs (11) his+ (28) met+ (29) gal+ (16) gal+ (17)
ser+ (16) gal+ (38) xyl+ (32) his+ (26) pro+ (23)
ade +
(36) pro+
(44) mal +
(37) ade +
(41) met +
(49)
his+ (51) met+ (70) strs (47) ser+ (61) xyl+ (52)

a. Dessinez une carte de la souche F+, indiquant les positions de tous les genes et les
distances qui les séparent en minutes.
b. Indiquez le point d’insertion et l’orientation du plasmide F dans chaque souche Hfr
c. Pour chacune de ces souches Hfr, indiquez l’allele que vous sélectionneriez pour obtenir
la proportion la plus élevée d’exconjugants parmi les Hfr.

Problème N°4
Comparez les mécanismes de transfert et de transmission héréditaire des gènes lac+ dans des
croisements avec des souches Hfr, F+ et F’lac+.
- Comment une cellule F- chez laquelle la recombinaison homologue normale serait
impossible (rec-) se comporterait-elle dans des croisements avec chacune de ces trois
souches ?
- Cette cellule pourrait-elle recevoir les gènes lac+ ?

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