FGMGP 2020/2021
Master I Génie des Procédés Pharmaceutique TD ACM
Série N°1 : Les Méthodes Chromatographique
Exercice N° 1
Soit le chromatogramme ci-dessous où le pic 1 correspond à un composé non retenu par la
phase stationnaire et le pic 2 correspond à un composé retenu cette phase.
1.Indiquer sur ce chromatogramme les grandeurs caractéristiques suivantes :
- le temps mort tM,
- le temps de rétention tR du composé 2,
- le temps de rétention réduit t'R du composé 2.
2.En négligeant les volumes morts de l'injecteur et du détecteur, et en considérant qu'à débit D
constant, on peut passer de la grandeur "temps" (t) à la grandeur "volume" (V) par la relation
V=txD
Comment peut-on déterminer, d'après le chromatogramme, le volume de phase mobile dans la
colonne ?
Exercice N° 2
1. Déterminer la largeur des pics (tRA et tRB) correspondants aux temps de
rétentiontRA= 5 min, tRB= 12 min sachant que nous avons effectué une analyse
chromatographique sur une colonne possédant 5000 plateaux théoriques.La longueur
de la colonne est égale à 2 m, calculer la hauteur de chaque plateau théorique.
2. Lors d’une analyse sur une colonne de 365 cm nous avons eu :
tRA= 11,9 min, tRB= 13,04 min, tRA=1,04 min, tRB= 1,08min
Déterminer la résolution sur ces pics.
Déterminer la longueur de la colonne pour améliorer la résolution.
Exercice N° 3
On sépare en chromatographie en phase gazeuse, à 200 °C, deux constituants d'une
préparation à usage thérapeutique: eucalyptol et camphre.
On utilise du naphtalène comme étalon interne.
Le temps de rétention tR et la largeur à la basé tR du naphtalène sont :
tRN= 4.40 min et tR= 0,20 min.
1. Quelle est l'efficacité de la colonne utilisée ?
2. Les tR et les tR de l'eucalyptol et du camphre sont respectivement:
Eucalyptol : tRE = 5,6 min,tRE=0,25 min
Camphre: tRC= 8.4 min tRc = 0,38 min
Calculer les résolutions ?
3. Quelle valeur minimale fixera-t-on à la résolution pour avoir une bonne séparation
entre le camphre et l'eucalyptol?
4. Peut-on diminuer le temps d'analyse? Si oui, comment?
5. Après changement du paramètre adéquat, l'ordre de sortie des pics est inchangé, le tR
de l'eucalyptol est de 2.8 min, sa largeur t = 0,16 min; la résolution
eucalyptol/camphre est de 2,5. Quelle est la durée de l'analyse?
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Exercice N° 4
1. Parmi les schémas de mise en œuvre d'une chromatographie suivants, trouver celui qui
correspond aux bonnes conditions opératoires ? Justifier la réponse.
2. Lors de l'analyse d'un médicament, on a réalisédifférentes chromatographie sur couche mince
avectrois éluants différents. Les chromatogrammesobtenus sont données ci-dessous.
Quels sont les éluants qui ne conviennent pas?Justifier.
De combien de corps purs ce médicament est-ilcomposé?
3. Afin d'identifier les principes actifs d'un médicament, onaréalisé la CCM dont le
chromatogramme est le suivant :
Combien de composants possède le médicament à analyser.
Quels sont les produits purs, les mélanges?
Quels sont les composés chimiques présents dans lemédicament.
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Exercice N° 5
On cherche à identifier l’espèce chimique active d’un médicament (noté X). Pour cela,
on réalise une chromatographie sur couche mince. Les références sont : l’aspirine (notée A),
l’acétaminophène (B), la caféine (C) et la phénacétine (D).
La plaque chromatographique a les dimensions suivantes : largeur = 4,5 cm ; hauteur =
5 cm ; les dépôts sont effectués à 0,5 cm du bord inférieur.
Après élution et révélation, les résultats suivants sont obtenus :
- Le front de l’éluant est monté à 0,5 cm du bord supérieur.
- Pour les références, on trouve :
Espèce chimique Aspirine Acétaminophène Caféine Phénacétine
Rf 0,85 0,50 0,31 0,72
Pour X, on trouve 3 taches dont les Rf sont respectivement à 0,13 ; 0,50 et 0,86.
1) Faire un schéma du chromatogramme après élution. Les positions des taches devront être
justifiées.
2) Faire une conclusion sur X.
Exercice N° 6
L’analyse par chromatographie en phase liquide d’un mélange de 3 substances sur une
colonne L1de 25 cm donne 3 pics A, B, C. les facteurs de retentions correspondant aux 3
composés sont respectivement :
1,34 pour A,
3,99 pour B,
4,77 pour C.
La largeur à mi-hauteur du pic B mesurée sur le tracé est de 1,7mm.
La distance de rétention du pic non retenu est de 13,9 mm, la vitesse de déroulement
du papier est de 10mm/min
Calculer le temps de rétention réduit des 3 substances ;
Calculer les résolutions ;
Lorsque le mélange est analysé sur une colonne L2 de 25 cm les autres conditions étant
inchangées le pic B présente les nouvelles caractéristiques suivantes :
tR= 481,2 secondes, largeur à mi-hauteur = 2,2 mm.
Comparer l’efficacité des deux colonnes.
